Aula terica Metabolismo dos Hidratos de Carbono

Maria Joo Ferreira da Silva mjmsilva@ff.ul.pt Bioqumica I 2012-2013

Metabolismo dos Hidratos de Carbono

A Gliclise B Neoglucognese C- Ciclo de Krebs D Glicognese e glicogenlise E Ciclo das Pentoses de fosfato

Sumrio - B
Gluconeognese
Introduo Reaces envolvidas: piruvato/fosfoenolpiruvato frutose 1,6-bifosfato/frutose 6-fosfato glucose 6-fosfato/glucose Gluconeognese/gliclise regulao Ciclo de Cori Piruvato vias metablicas Complexo da Piruvato Desidrogenase - cPDH

Gluconeognese
A gluconeognese o processo que converte precursores no glicosdicos em glucose ou glicognio Os substratos mais importantes so: - aminocidos glicognicos (ex. alanina, glicina, cistena) - lactato - piruvato - glicerol A biossntese de glucose um processo fundamental em todos os mamferos, pois diversos tecidos (crebro, SNC e eritrcitos) utilizam apenas a glucose, presente na circulao, como fonte de energia

Gluconeognese

Este processo supre as necessidades do organismo quando a glucose, proveniente da dieta ou das reservas de glicognio, no est disponvel em quantidade suficiente; ou seja, essencial para manter os nveis de glucose no sangue numa situao de jejum prolongado Esta via metablica ocorre no citoplasma (bem como a gliclise) e maioritariamente nas clulas hepticas e do crtex renal

Gluconeognese
No entanto, a neoglucognese no consiste no reverso da gliclise, visto haver trs etapas da gliclise que so irreversveis: - converso da glucose em glucose 6-fosfato (hexocinase) - fosforilao da frutose 6-fosfato em frutose 1,6-bifosfato (fosfofrutocinase-1) - formao de piruvato a partir de fosfoenolpiruvato (piruvato cinase)

Gluconeognese piruvato e fosfoenolpiruvato

A 1 reaco desta via metablica corresponde converso do piruvato a fosfoenolpiruvato e engloba a aco de 2 enzimas: - Piruvato carboxilase (PC) - Fosfoenolpiruvato carboxicinase (PEPCK) O 1 passo consiste, assim , na carboxilao (PC) do piruvato a oxaloacetato com o consumo de 1 ATP e na presena de biotina, como transportador do grupo HCO3Posteriormente, o oxalacetato descarboxilado e fosforilado (PEPCK) a fosfoenolpiruvato; a reaco necessita de Mg2+ e utiliza o GTP (guanosina trifosfato) como dador do grupo fosfato

Gluconeognese piruvato e fosfoenolpiruvato

A piruvato carboxilase uma enzima mitocondrial, enquanto todas as outras intervenientes na neoglucognese so citoplasmticas, implicando que o oxalacetato formado na mitocondria tenha que ser transportado para o seu exterior para que as reaces posteriores possam ocorrer O oxaloacetato vai ser transportado para fora da mitocndria na forma de malato: - reduo do oxaloacetato a malato na mitocndria atravs da enzima dependente do NADH - malato desidrogenase - aps o transporte do malato atravs da membrana mitocondrial, este vai ser reoxidado a oxaloacetato com formao de NADH+ + H+ no citoplasma O NADH+ + H+ formado muito importante pois vai fornecer compostos reduzidos para uso subsequente na gluconeognese

Gluconeognese

frutose 1,6-bifosfato a frutose 6- fosfato

Uma vez formado, o fosfoenolpiruvato metabolizado pelas enzimas glicolticas mas no sentido inverso. Na clula, estas reaces esto em equilibrio; assim, quando as condies intracelulares favorecem a gluconeognese, est ir ocorrer at chegar ao passo irreversvel seguinte E esse passo ser a hidrlise da frutose 1,6-bifosfato a frutose 6-fosfato e fsforo inorgnico A enzima responsvel a frutose 1,6-bifosfatase, que tal como a sua homloga na gliclise, uma enzima alostrica com uma funo muito importante regulao da neoglucognese na

Gluconeognese

glucose 6-fosfato a glucose

A frutose 6-fosfato, formada na reaco anterior, prontamente convertida em glucose 6-fosfato, sendo em muitos tecidos, o ponto final da gluconeognese Nesse caso no h formao de glucose, sendo que a molcula de glucose 6-P direccionada para outras vias metablicas, nomeadamente a sntese de glicognio A possibilidade da neoglucognese terminar aquando da formao da glucose 6-P muito importante porque esta molcula, ao contrrio da glicose, no transportada para o exterior da clula

Gluconeognese

glucose 6-fosfato a glucose

Assim, para manter a glucose no interior da clula a sua formao na forma de glucose livre controlada de duas formas: - a enzima que cataliza a converso de glucose 6-P a glucose (glucose 6-fosfatase) altamente regulada - Esta enzima s est presente em tecidos cuja funo metablica inclui a manuteno da homeostase da glicemia, ou seja tecidos que tm capacidade de libertar glucose para a circulao fgado (rim)

O passo final da neoglucognese no se d no citoplasma mas no retculo endoplasmtico onde a enzima se mantm ligada membrana

Gluconeognese

gliclise - regulao

A gluconeognese e a gliclise esto coordenadas por forma a que no interior da clula, quando uma est relativamente inactiva a outra via permanece francamente activa Assim, a intensidade da via glicoltica determinada pela concentrao da glucose e a da neoglucognese pelas concentraes de lactato e de outros precursores da glucose Sendo que a premissa bsica de regulao recproca destas duas vias metablicas : - quando h necessidade de energia predomina a gliclise - quando h um excedente de energia ocorre a neoglucognese

Gluconeognese

gliclise - regulao

Frutose 6-P / frutose 1,6-bifosfato Nveis elevados de : AMP ATP e citrato Fosfoenolpiruvato/piruvato (no fgado) ATP e alanina ADP Acetil CoA

Regulao ciclo de Cori

O lactato produzido pelo msculo esqueltico em actividade e pelos eritrcitos, pode constituir uma fonte de energia para outros rgos Oos glbulos vermelhos, ao no apresentarem mitocondrias no tm capacidade de metabolizar completamente a glucose Por outro lado, no msculo esqueltico, durante exerccio violento, a velocidade com que o piruvato produzido excede a capacidade de utilizao pelo ciclo de Krebs Assim, nestas clulas, a LDH reduz o piruvato em excesso com produo de cido lctico, de modo a restaurar o potencial de oxido reduo celular No entanto, o cido lctico, ao ser um produto final do metabolismo, necessita de ser (re) convertido a piruvato para que possa prosseguir esta via metablica Ambos difundem, atravs de carriers especficos, da clula para a corrente sanguinea

Regulao ciclo de Cori

No sangue o piruvato e o lactato podem seguir 2 vias: - entrada nas clulas de determinados tecidos (ex. cardaco) e uma vez no seu interior (meio rico em oxignio) ocorre metabolizao completa com formao de piruvato e sua oxidao atravs do ciclo de Krebs e cadeia respiratria
IMP a utilizao de lactato, em vez de glucose, faz com que esta se mantenha em circulao e disponvel para fornecer energia s clulas musculares durante o exerccio

- entrada do lactato nas clulas hepticas, converso em piruvato e, posteriormente, formao de glucose pela via da neoglucognese

Regulao ciclo de Cori

O msculo esqueltico, em actividade, fornece cido lctico ao fgado, que o usa na sntese e libertao de glucose Por sua vez, o fgado repe os nveis de glucose necessrios para a actividade muscular, que fornecer ATP, obtido atravs da metabolizao, pela via glicoltica, da glucose em lactato

Piruvato origem e vias metablicas

Piruvato origem e vias metablicas

Em aerobiose o piruvato, formado no citosol, transportado para o interior da mitocndria atravs de um transportador, tendo dois destinos principais: - descarboxilao em acetil-CoA sob aco do cPDH - carboxilao em oxalacetato sob aco da PC Os produtos destas duas reaces condensam-se para formar citrato, composto de 6 tomos de carbono que d o nome ao Ciclo de Krebs ou Ciclo do c. Ctrico

Piruvato - origem e vias metablicas

GLUCOSE GLICOLISE
ALT LDH

ALANINA

PIRUVATO
NADH NAD

LACTATO Membrana mitocondrial

PYRUVATO
PC

cPDH
CADEIA RESPIRATRIA

OXALACETATO
ACETOACETATE NADH NAD 3-HYDROXYBUTIRATE

ACETIL CoA

e-

ATP

CICLO KREBS

O2

H2O

Adaptado de Weber TA et al in J Pediatr 2001;138:390-5

Complexo da Piruvato Desidrogenase - cPDH

O cPDH cataliza, de modo irreversvel, a descarboxilao oxidativa do piruvato a acetil-CoA, num conjunto de reaces que decorrem de um modo sequencial .
PDHc Pyruvate + NAD* CO2 AcetylCoA + NADH

Ao assegurar a juno entre a gliclise e o Ciclo de Krebs, o cPDH ocupa uma posio de encruzilhada metablica, tendo uma aco primordial no metabolismo energtico aerbio A disfuno do cPDH provoca uma diminuio considervel na sntese de ATP, estando associado s hiperlactacidmias de origem mitocondrial e afectando, principalmente, o sistema neuro-enceflico

cPDH-reaces
As reaces do cPDH so aqui resumidas: Reaco 1 A subunidade E1, que requer TPP (pirofosfato de tiamina), catalisa a transferncia de um grupo acetilo para os grupos lipicos da subunidade E2, com libertao do carbono 1 do piruvato na forma de CO2. este o passo limitante da reaco global. A reaco 2 e 3 esto implicadas na transferncia do grupo acetilo para o CoA formando o acetil-CoA havendo concomitantemente a regenerao da subunidade E1

cPDH-reaces

Na rx 4 a E3, que tem como cofactor o FAD fortemente ligado, reoxida a subunidade E2 regenerando-a e completando o ciclo cataltico Finalmente a E3 reoxidada sendo o FADH2 oxidado pelo NAD com produo de NADH (reaco 5)

cPDH - reaces
Reaces
PDHc 1-14C-pyruvate AcetylCoA + NADH
14CO 2

Adaptado de Voet in Fundamentals of Biochemistry,1999

Complexo da Piruvato Desidrogenase - cPDH

Regulao
Acetyl-CoA NADH Pyruvate (<50 M) Kinase activator protein ATP Ca2+ Polyamines Insulin

PDHc active
ATP Pi Mg2+ dependent

+
PDH phosphatase

PDH kinase

ADP Pyruvate (>100 M) TPP CoA NAD+

ADP H O 2

NADH

PDHc inactive

Adaptado de Patel MS et al in FASEB J 1995;9:1164-72