UNIVERSIDAD VIRTUAL DEL ESTADO DE MICHOACN

INGENIERA EN DESARROLLO AGROINDUSTRIAL

BIOLOGA

Ensayo ADN Recombinante, tcnicas, perspectiva y tica

Profesor: M.C. Adriana Gabriela Ramos Ramrez Alumna: Mario Salvador Castro Zenil Matricula: al121028

14 de Febrero del 2013

El cido desoxirribonucleico ha sido uno de los ms grandes descubrimientos del siglo pasado, aun cuando fue aislado por primera vez en 1869, fue hasta el siglo XX cuando tuvo ms auge y su investigacin creci de forma exponencial. As pues se da paso a una nueva rama de las ciencias la cual se conoce como ingeniera gentica, en esta se realizan procesos para lograr la manipulacin de los genes, lo cual genera grandes tesis sobre la conveniencia de todos estos conocimientos donde se pide a los genetistas que operen con la mayor tica posible, pues grupos radicales piensan que no debemos intentar jugar a ser dios. Por consiguiente este breve ensayo tratar de poner en perspectiva que es la ingeniera gentica, como est a travs del ADN recombinante puede ayudar al ser humano en la bsqueda de un mayor bienestar y el papel que juega la tica y los dogmas religiosos como contraparte de una tecnologa que podra salvar la vida de millones. Ingeniera Gentica Ocho aos despus de la rendicin de Japn y el fin de la Segunda Guerra Mundial se dio un hecho que desencadeno la carrera gentica, el fenmeno de restriccin, este hecho el cual fue estudiado por Arber, Hamilton, Mertz, Davis, entre otros, se logr constituir cerca del ao 1972 la base para la produccin de molculas recombinantes in vitro, con material gentico de diferentes especies. Esto nos lleva ya a la idea de lo que es la Ingeniera Gentica: la formacin in vitro de nuevas combinaciones de material gentico, por medio de la insercin de un ADN de inters en un vehculo gentico (vector), de modo que tras su introduccin en un organismo hospedero el ADN hbrido (recombinante) se pueda multiplicar, propagar, y eventualmente expresarse. La ingeniera gentica incluye un conjunto de tcnicas biotecnolgicas, entre las que destacan: La tecnologa del ADN recombinante; La secuenciacin del ADN; La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).

La tecnologa del ADN recombinante Si se quieren unir dos ADNs, cada uno de los cuales procede de una especie diferente podemos utilizar dichas enzimas como herramientas. Cada ADN se trata con una endonucleasa de restriccin que origina en este caso un corte escalonado en las dos hebras dobles de ADN. Los extremos escalonados del ADN1 y el ADN2 son complementarios, con lo cual, una condicin que tiene que tener los dos ADNs que se quiere unir es que tengan un pequeo fragmento igual en sus secuencias. Los dos DNAs as cortados se mezclan, se calientan y s enfran suavemente. Sus extremos cohesivos se aparearn dando lugar a un nuevo ADN recombinado, con

uniones no covalentes. Las uniones covalentes se consiguen aadiendo ADN ligasa y una fuente energtica para formar los enlaces. Otra enzima clave para unir ADNs es la transferencia terminal, que puede adicionar muchos residuos de desoxirribonucletidos sucesivos al extremo 3de las hebras del ADN. De este modo pueden construirse colas de poli G (nucletico de guanina) en los extremos 3 de las dos hebras de ADN dplex y colas de poli C (nucletico de citosina) en los extremos del otro ADN. Como estas colas son complementarias, permitirn que los dos ADNs se unan por complementariedad. Posteriormente, se forman los enlaces covalentes por el ADN ligasa. El ADN vector es el vehculo de clonacin, ya que transporta el inserto de ADN a una molcula hospedadora, donde puede ser replicado. Los vectores o transportadores ms utilizados son los plsmidos y el ADN del fago lambda. Plsmidos: Estos son pequeos ADNs de cadena doble y circular, que se encuentran en el citoplasma de la mayora de las bacterias. Cada plsmido contiene varios genes que se replican, transcriben y traducen independientemente de los genes del cromforo bacteriano, pero simultneamente en el tiempo. Se pueden unir genes extraos a los plsmidos con mucha facilidad, y despus ser transportados como pasajeros al interior de las clulas de E. coli. ADN del fago lambda. Es otro vector que puede ser utilizado para introducir genes en bacterias. Cuando el ADN recombinado del fago lambda, con su gen pasajero, se mezcla con la cubierta del virus lambda, se producen partculas fgicas infecciosas, si el tamao del ADN recombinado no es muy distinto del ADN natural del virus lambda. Los procesos de clonacin y de aislamiento de estos fragmentos se inician con la construccin de una biblioteca de ADN o un banco de ADN. stas estn formadas por todas las molculas de plsmidos o fagos recombinantes originados al unir un ADN a un vector. Las bibliotecas deben cumplir la caracterstica de poder introducirse en clulas donde cada recombinante pueda aplicarse in vivo. Perspectiva del ADN Recombinante La biotecnologa puede ofrecer ms y mejores opciones sanitarias a los pacientes. Las pruebas diagnsticas y tratamientos nuevos e innovadores estn modificando el modo en que se previenen algunas enfermedades humanas y en que se tratan otras. Este gran cambio sanitario se encuentra en sus etapas iniciales, con medicamentos,

pruebas diagnsticas y tecnologas novedosas en desarrollo que tienen un gran potencial para mejorar las vidas de los pacientes. Por ejemplo la Medicina Personalizada, significa tratar a los pacientes con frmacos basados especficamente en la constitucin gentica exclusiva de cada uno de ellos, con el fin de lograr resultados ptimos. En la actualidad, la prctica de la medicina se fundamenta en normas asistenciales que vienen determinadas por el promedio de respuestas en grupos amplios de personas. La medicina personalizada es un nuevo paradigma que propone tratar la enfermedad de un paciente en funcin de sus caractersticas concretas, como edad, sexo, talla, peso, alimentacin, gentica y ambiente. Los estudios genticos estn empezando a permitir el desarrollo de la medicina personalizada genmica, una asistencia mdica basada en el genotipo o perfil de expresin gnica de un paciente.

La Farmacogenmica, es un movimiento importante en la asistencia sanitaria, aprovecha el hecho de que las personas poseen genomas nicos que representan su constitucin gentica. Es probable que cada genoma reaccione de manera diferente a un frmaco y una dosis concretos. El reto consiste en identificar el frmaco y la dosis que actuarn de forma ms ptima en cada persona o en grupos de personas que comparten una gentica semejante. Al conocer la constitucin gentica de un paciente, un mdico puede recetar mejor un medicamento y la dosis que actuar ptimamente para combatir una enfermedad particular. Los avances en la tecnologa del ADN son las claves de la farmacogenmica y la medicina personalizada. Estos avances permiten analizar e identificar la constitucin gentica nica de una persona y, a continuacin, comparar las diferencias con la poblacin en general. El conocimiento del genoma humano, de las variaciones del genoma entre las personas y de las variaciones de las protenas codificadas producidas permite que los investigadores desarrollen frmacos que aborden las necesidades

individuales de cada paciente. La farmacogenmica y la medicina personalizada se muestran prometedoras para mejorar los ensayos clnicos de frmacos nuevos, hacer avanzar la tecnologa de cribado de enfermedades y dar lugar a una asistencia sanitaria individualizada ms eficaz y a avances en medicina preventiva. La industria biotecnolgica ha deparado enormes avances en el estudio y diagnstico de las enfermedades genticas. El descubrimiento de los polimorfismos de un solo nucletido (PSN), o cambios de la secuencia de ADN en un nico nucletido, fue uno de los adelantos ms importantes en los estudios genticos. Los PSN representan una de las formas ms frecuentes de variacin gentica entre los sujetos. Cuando se produce un PSN en una secuencia gnica que codifica una protena concreta, puede modificar esa protena y causar una enfermedad o aumentar la predisposicin de un paciente a esa enfermedad. La utilizacin de tecnologa para detectar PSN permite un diagnstico ms exacto de enfermedades genticas y, por consiguiente, facilita la toma de decisiones teraputicas. Los estudios genticos aportan a los pacientes el conocimiento del posible riesgo de sufrir determinadas enfermedades, as como posibles oportunidades de prevencin. Por su parte la terapia gnica es un campo emergente de la gentica aplicada en la que se utilizan tcnicas de ADN recombinante. En este caso, se emplean las propias molculas de ADN recombinante con fines de tratamiento. La terapia gnica consiste en la introduccin de genes, creados mediante tecnologa del ADN recombinante, en las clulas y los tejidos de los pacientes para tratar sus enfermedades. Los cientficos estn estudiando terapias gnicas para tratar varias enfermedades humanas hereditarias en las que intervienen genes defectuosos. La idea es sustituirlos por genes funcionales nuevos. Desde el inicio del primer ensayo clnico en 1990, la investigacin en terapia gnica se ha extendido en gran medida, con un nmero cada vez mayor de ensayos en seres humanos. Este campo, an en fases experimentales, centra sus esfuerzos en pacientes con enfermedades graves y potencialmente mortales que suelen contar con pocas opciones teraputicas o en los que han fracasado todos los tratamientos disponibles. Las clulas madre son clulas no especializadas que pueden renovarse de manera indefinida para producir ms clulas madre. Pueden madurar y desarrollar funciones especializadas o diferenciarse en unas condiciones de crecimiento determinadas. En ltimo trmino, las clulas madre se diferencian para formar todos los tipos diferentes de clulas que conforman el organismo. El amplio potencial de una clula madre indiferenciada de transformarse en diversas clulas diferentes es el centro de atencin de la investigacin con clulas madre. El tratamiento con clulas madre, que an se encuentra en fases experimentales, supone hacerlas crecer en el laboratorio y guiarlas hacia un tipo celular deseado mediante la adicin de distintos factores de crecimiento. A continuacin se implantan quirrgicamente las clulas diferenciadas. La teora es que las clulas madre

pueden integrarse en el tejido patolgico, sustituir a las clulas patolgicas y neutralizar los efectos de la enfermedad. Tambin podran desarrollarse terapias celulares en las que se implanten clulas madre indiferenciadas junto con factores de crecimiento para guiar su diferenciacin en el organismo del paciente. El objetivo es sustituir las clulas lesionadas por clulas sanas y exentas de enfermedad, de ah el trmino medicina regenerativa que recibe esta estrategia. La esperanza es que las clulas madre, dirigidas a diferenciarse en tipos celulares especficos, podran ser una fuente renovable de clulas y tejidos de sustitucin utilizados para tratar una amplia variedad de enfermedades. Otro aspecto de vital importancia es la nanotecnologa, esta tiene que ver con la manipulacin de molculas y estructuras a escala nanomtrica (milmillonsima parte de un metro) o atmica. La aplicacin de la nanotecnologa para mejorar la salud humana se denomina nanomedicina. En la nanomedicina biotecnolgica se emplean organismos vivos o sus componentes a una escala muy pequea. Un ejemplo de nanomedicina es el uso experimental de nanoproyectiles que actan selectivamente y destruyen las clulas neoplsicas a escala celular. Los nanoproyectiles son lentes metlicas nanoscpicas que se hacen llegar selectivamente a rganos concretos o tumores a travs del torrente circulatorio. Los nanoproyectiles tienen la capacidad de captar luz infrarroja aplicada a travs de la piel de un paciente con cncer y convertirla en calor, que destruye nicamente las clulas neoplsicas objetivo. Las nanopartculas conocidas como buckyballs, unas molculas de carbono con una forma y una construccin exclusivas, tambin presentan potencial de hacer llegar medicamentos a molculas o clulas objetivo. Quiz hagan posible la aplicacin de frmacos que no se disuelven en agua. Adems, debido a su pequeo tamao, permiten administrar una mayor cantidad de frmaco por volumen. Los cientficos estn trabajando con nanopartculas para desatascar las arterias obstruidas. Nuevos sistemas de administracin de frmacos Los investigadores biomdicos estn estudiando nuevas formas de administrar frmacos en el interior del organismo que podran mejorar su eficacia. Un ejemplo es el desarrollo de partculas microscpicas denominadas microesferas que poseen orificios diminutos con el dimetro suficiente para transportar y aplicar medicamentos a sus objetivos. Estn elaboradas con materiales que se asemejan a las grasas naturales que hay en las membranas celulares y se administran en forma de pulverizacin nebulizada en la nariz o la boca. En la actualidad, existen tratamientos con microesferas para combatir el cncer de pulmn y enfermedades respiratorias. La investigacin actual est estudiando el empleo de microesferas para aplicar frmacos antineoplsicos en tumores activos y su uso con anestsicos en el tratamiento del dolor.

La prctica mdica ha cambiado radicalmente con el transcurso de los aos debido a los avances pioneros que se han hecho en la investigacin e innovacin biotecnolgicas; millones de pacientes en todo el mundo siguen beneficindose de los tratamientos desarrollados por empresas que estn descubriendo, desarrollando y comercializando medicamentos innovadores para tratar enfermedades graves. A medida que las empresas sigan desarrollando medicamentos que aborden necesidades mdicas importantes, las innovaciones futuras en la investigacin biotecnolgica conllevarn nuevos y apasionantes avances que ayudarn a millones de personas en todo el mundo.

Avances de la Teora Gentica La transgnica le permite a los cientficos desarrollar organismos que expresan caracteres o rasgos novedosos que normalmente no se encuentran en la especie. Por ejemplo, un tipo de arroz conocido como arroz dorado posee niveles elevados de vitamina A. Los cientficos tambin han desarrollado girasoles que poseen resistencia al moho y algodn que resiste el dao de los insectos. Las posibles combinaciones transgnicas se pueden clasificar en tres categoras (aqu la palabra animal se refiere a no humano): Combinaciones planta-animal-humano; Combinaciones animal-animal; y Combinaciones animal-humano.

Las plantas transgnicas pueden contener protenas humanas que produciran vacunas comestibles. Un ejemplo de una combinacin planta-animal-humano sera una en donde el ADN proveniente de fragmentos de tumor de un ratn y de un humano se inserta en el ADN de tabaco. Las plantas obtenidas contienen una vacuna potencial contra los linfomas (no del tipo Hutchins). Otras plantas transgnicas han sido utilizadas para la creacin de vacunas comestibles. Al incorporar una protena humana en bananos, en papas y en tomates, los investigadores han sido capaces de crear prototipos de vacunas comestibles contra la hepatitis B, el clera y la diarrea. Las vacunas han tenido xito en las pruebas con animales agrcolas y con humanos. El BioSteel es un producto creado de una combinacin transgnica animal-animal. Los cientficos de Nexia Biotechnologies, una compaa basada en Montreal, Canad, aislaron al gen que codifica a la protena de la seda de una araa, una de las substancias ms fuertes y ms elsticas que se conocen. Luego, insertaron a este gen en el genoma de un vulo de cabra antes de que fuera fertilizado. Cuando las cabras transgnicas maduraron, produjeron leche que contena a la protena que codifica a la seda de la araa. La fibra creada artificialmente a partir de esta protena de seda tiene varios usos potenciales de valor, tales como la produccin de chalecos

antibalas de bajo peso, gran fortaleza y gran suavidad. Otros usos industriales y mdicos incluyen componentes ms fuertes para la industria automotriz y aeroespacial y suturas ms fuertes y biodegradables para cerrar heridas. Las combinaciones transgnicas animal-humano representan un aspecto de crecimiento explosivo de la biotecnologa. Los cerdos a menudo son escogidos como animales transgnicos porque su fisiologa y tamao de sus rganos son muy similares a los de los humanos. La esperanza es que se puedan utilizar los rganos de cerdo para los transplantes humanos, conocido como xenotrasplantacin, lo cual aliviara la escasez de corazones y riones humanos. Los investigadores tambin estn explorando el uso de las terapias de trasplantacin de clulas para los pacientes con lesiones de la espina dorsal o con enfermedad de Parkinson. Otros usos de esta combinacin transgnica incluyen el crecimiento de tejidos sobre un andamio o marco de apoyo. ste se puede utilizar despus como un substituto temporal de la piel para el tratamiento de heridas o quemaduras, para reemplazar cartlagos, vlvulas del corazn, derivaciones cerebroespinales o hasta tubos de colgeno para guiar el recrecimiento de nervios que han sido daados. Adems, varias compaas comerciales buscan derivar protenas teraputicas, como anticuerpos monoclonales, a partir de la leche de vacas, cabras, conejos y ratones transgnicos, y utilizar esta leche para administrar drogas para el tratamiento de la artritis reumtica, el cncer y otros desrdenes auto-inmunes. Cuestiones ticas La biotecnologa transgnica presenta un rango excitante de posibilidades, desde la reduccin del hambre hasta la prevencin y el tratamiento de enfermedades. Sin embargo, estas promesas tambin incluyen peligros potenciales. Algunas de las cuestiones que deben ser consideradas son: Estamos borrando o alterando las lneas entre las especies al crear combinaciones transgnicas? Cules son los riesgos conocidos asociados a la transgnica? Cules son los efectos ambientales a largo plazo cuando los transgnicos son liberados en el medio ambiente? Qu controles y revisiones ticas, sociales y legales deben ser impuestos sobre este tipo de investigacin? Estamos causando dolor y sufrimiento a las criaturas vivientes cuando creamos ciertos tipos de quimeras? Crearn las intervenciones transgnicas en los humanos caractersticas fsicas o comportamentales tales que puedan ser o no ser distinguibles de lo que generalmente percibimos como ser humano? Si la mezcla de ADN animal y humano resulta, intencionalmente o no, en entidades quimricas posesoras de grados de inteligencia o sensitividad

nunca vistas en los animales no humanos, debern darse derechos y proteccin especial a estas entidades? Cules seran las consecuencias personales, sociales y culturales no intencionales? Redefiniran estas intervenciones lo que conocemos como normal? Quin tendr acceso a estas tecnologas y cmo se distribuiran los recursos escasos?

Algunos individuos han argumentado que el cruce de las lneas de las especies no es natural, es inmoral y es una violacin de las leyes de Dios. Este argumento presume que los lmites entre las especies son fijos y fciles de delinear. Sin embargo, una reciente edicin de la Revista Norteamericana de Biotica (en ingls) reflexion que la nocin de las lneas entre las especies es un tpico muy debatido actualmente. Algunos bioeticistas han apuntado que existe una variedad de conceptos sobre las especies: biolgico, morfolgico, ecolgico, tipolgico, evolucionario y filogentico, para nombrar algunos pocos. Todas estas definiciones de lo que es una especia reflejan las teoras cambiantes y los diferentes propsitos con que las diferentes especies son utilizadas por los individuos. A pesar que el tema de la moralidad del cruce de las lneas de las especies refleja los diferentes puntos de vista de la gente y puede ser conceptualmente poco claro, existen riesgos conocidos asociados con la xenotrasplantacin de clulas transgnicas u rganos de animales a humanos. Por ejemplo, existe un riesgo pequeo pero significativo de la transmisin de enfermedades zoonticas generalmente fatales, tales como la encefalopata bovina espongiforme (conocida como enfermedad de la vaca loca), retrovirus endgenos porcinos (PERVs) y encefalitis Nipah. La introduccin de estas enfermedades a la poblacin humana puede tener consecuencias devastadoras. La Administracin para el Alimento y las Drogas de los Estados Unidos (U.S. Food and Drug Administration) ha prohibido las pruebas de xenotrasplantacin en primates no humanos hasta que el procedimiento haya sido adecuadamente demostrado como seguro y hasta que las cuestiones ticas hayan sido discutidas suficientemente en pblico. Los riesgos y los beneficios del uso experimental en humanos necesitan ser discutidos tambin. Similarmente, al combinar el ADN animal y el ADN humano con el ADN de una planta, Corremos el riesgo de crear nuevas enfermedades para las cuales no existen tratamientos? Los riesgos a largo plazo al medio ambiente son desconocidos. Varios bioeticistas, ambientalistas y activistas en derechos de los animales han argumentado que no es correcto crear monstruos o animales que pueden sufrir a causa de la alteracin gentica (por ejemplo, un cerdo sin patas) y que este tipo de experimentacin debera ser prohibida. Varios bioeticistas han hecho un llamado para la prohibicin de las tecnologas que alteran a las especies, la cual sera impuesta por un tribunal internacional. Parte del argumento a favor de esta prohibicin es la preocupacin que dicha tecnologa

podra ser usada para crear una raza de esclavos, es decir, una raza de infrahumanos que podra ser explotada. En Abril de 1998, los cientficos Jeremy Rifkin y Stuart Newman, ambos opuestos a los organismos genticamente modificados, (OGM), aplicaron para una patente sobre un humanc, parte humano y parte chimpanc, con el fin de crear un debate y llamar la atencin a los abusos potenciales de esta tecnologa. La Oficina de Patentes de los Estados Unidos (USPTO en sus siglas en ingls) rechaz la patente sobre la base de que violaba la Decimotercera Enmienda a la Constitucin de los Estados Unidos, la cual prohbe la esclavitud. Esta decisin fue apelada, pero la apelacin no ha llegado a las cortes an, aunque quizs nunca llegar. La apelacin puede ser sobreseda sobre la base de otros elementos tcnicos. A pesar de que la USPTO ha permitido el patentado extenso de formas de vida biodiseadas y del ADN humano, la cuestin que ha sido puesta en evidencia por la aplicacin de Newman y Rifkin no ser resuelta fcilmente: Qu hace a un ser humano? La definicin gentica no es de mucha utilidad, dada la variedad de las secuencias de genes entre los individuos. La definicin de una especie es controversial, como lo mencionamos anteriormente. Si vemos a los caracteres para crear una definicin, existen muchos caracteres que los humanos comparten con los primates y con otros animales. Si creamos a un ser que tiene la habilidad de hablar y quizs de razonar pero que se parece a un perro o a un chimpanc, Deberamos darle todos los derechos y proteccin que se le dan a un ser humano? Algunos bioeticistas argumentan que la definicin de ser humano debera ser ms expansiva y protectora, en vez de ser ms restrictiva. Otros argumentan que las definiciones que son ms expansivas podran denigrar el estatus de los humanos y crear un desincentivo financiero para la patente de creaciones que puedan ser tiles a la humanidad. La cuestin de si la definicin debiese ser o no ser ms expansiva o restrictiva deber ser considerada en las cortes, en las legislaciones y por las instituciones que tratan sobre las leyes que regulan a la discriminacin gentica. En forma similar, el Comit Olmpico Internacional ha expresado la preocupacin de que los atletas pronto emplearn a la ingeniera gentica para obtener ventajas.16 Si ciertos individuos estn dispuestos a manipular genticamente a sus hijos para hacerlos mejores atletas, es entonces posible que ellos tambin estn dispuestos a manipularlos para que sean ms inteligentes, mejor parecidos, con mejor odo musical, o cualquier cosa que los padres crean que les van a dar una ventaja. Los oponentes de la manipulacin gentica argumentan que al permitir esto estamos corriendo el riesgo de crear una raza de sper humanos, cambiando lo que significa ser normal y aumentando la creciente brecha entre los que tienen y los que no tienen. Los proponentes de la manipulacin gentica argumentan que los padres actualmente pueden darle y, de hecho, les dan a sus hijos ventajas al mandarlos a mejores escuelas o al darles hormonas de crecimiento, y que la prohibicin de la manipulacin gentica es un rechazo a las libertades individuales. Estos argumentos

tambin reflejan las filosofas opuestas que discuten cmo debera ser la distribucin de los recursos escasos. Conclusin La transgnica y la ingeniera gentica presentan retos intrigantes y difciles a los cientficos y para los eticistas del Siglo XXI. Hasta que nosotros como sociedad o como una entidad global podamos estar de acuerdo sobre si los entes humanos o no humanos merecen nuestro respeto y estatus moral y legal, podremos esperar un debate y discusin interdisciplinario intenso, a medida que la ciencia y la medicina continen creando nueva vida inteligente.

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