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  Desarrollo Histórico:

  Desarrollado desde 1944 por J.P. Martin et.al. para


investigaciones en biotecnología, por ejemplo:
  Determinación de aminoácidos en proteínas (usando
ninhidrina como revelador).
  Aislamiento e identificación de ácidos nucleicos.

  Separación de iones metálicos.


  Separación de pigmentos vegetales
  Aislamiento e identificación de aminoácidos en la
insulina. Sanger recibió el Nobel de Química 1958
por este trabajo.
  En ésta técnica, la celulosa del papel actúa como
soporte de la fase estacionaria, que suele ser agua
(cromatografía de partición).
  La celulosa es un polisacarido, formado por millones
de unidades de ß-glucosa, es incolora e insoluble en
agua y en la mayor parte de disolvetes organicos. La
celulosa es la biomolécula mas abundante que existe
en nuestro planeta.componente principal de las
paredes celulares vegetales.es una fibra que al ser
observada en el microscopio es similar a un cabello
humano,cuya longitud y espesor varia segun el arbol
o planta.
Esta técnica puede efectuarse con el desarrollo frontal
ascendente o descendentemente.
Para lograr un desarrollo óptimo de los cromatogramas
es necesario controlar los siguientes factores:

  La difusión molecular y la difusión turbulenta:


aplicando las muestras suficientemente separadas
entre sí y a una distancia prudencial del frente inicial
del solvente.

  La resistencia a la transferencia de la mancha:


usando disolventes con una viscosidad adecuada.

  El pH del medio (importante en separación de


aminas, alcaloides y ácidos orgánicos).
•  Existen en el comercio papeles “impregnados” con sílica gel o
alúmina para separaciones en fase reversa (para sustancias
moderadamente hidrófilas o hidrófobas); silicona, parafina,
látex, dimetilformamida o aminas de alto peso molecular.

•  Los papeles “cargados” con resinas poliestirénicas o


intercambiadores de iones permiten la separación de
sustancias orgánicas o inorgánicas poco polares o iónicas,
respectivamente.

•  Existen también papeles tratados químicamente para alterar la


estructura polimérica de la celulosa y así ampliar la
aplicabilidad de ésta técnica.

•  Puede usarse papel de fibra de vidrio para condiciones de pH y


temperatura extremas.
•  Para condiciones especialmente extremas

•  Los papeles “cargados” con resinas poliestirénicas o


intercambiadores de iones permiten la separación de
sustancias orgánicas o inorgánicas poco polares o
iónicas, respectivamente.

•  Existen también papeles tratados químicamente para


alterar la estructura polimérica de la celulosa y así
ampliar la aplicabilidad de ésta técnica.
Selección de Disolventes por familias de Compuestos a Separar:
Selección de Disolventes por familias de Compuestos a Separar:
Rf: Es el cociente entre la distancia recorrida por la
mancha de la sustancia (respecto a su centro
geométrico), y la distancia recorrida al mismo tiempo
por el frente del disolvente.

Rx: Es el cociente entre la distancia recorrida por la


mancha de una sustancia de referencia (respecto a su
centro geométrico), y la distancia recorrida el mismo
tiempo por el frente del disolvente.

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