PRODUCCIN DE POLIHIDROXIALCANOATOS DE LA CEPA RALSTONIA EUTROPHA

EQUIPO Gonzales Dominguez Erick Javier Naranjo Ortega Zeltzin Sanchez Mercado Luis Ricardo Ugalde Mercado Fatima

OBJETIVO. El objetivo de este proyecto es establecer nuevos procesos para la bacteria Ralstonia eutropha para la produccin biotecnolgica de varios

polihidroxialcanoatos tcnicamente interesantes para la elaboracin de plstico biodegradable a partir de sustratos orgnicos. Se reportara en una hoja de clculo que incluir aspectos cinticos y estequiometricos de la cepa, el sustrato adecuado.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA. La problemtica de los plsticos convencionales que se generan a partir de las reservas de petrleo pasando por diferentes procesos qumicos y fsicos, es que el planeta por sus propios medios no es capaz de degradar estos plsticos, por lo que se ha vuelto una de las fuentes de contaminacin ms grande en este mundo. La importancia de generar plsticos biodegradables es reducir significativamente la contaminacin por el plstico ya que nuestro planeta en un tiempo relativamente corto de aproximadamente seis semanas degradara en su totalidad el plstico, convirtindolo en suelo por lo que no se generara contaminacin por acumulacin de desechos. Aunque la solucin es fcil, tambin existen diferentes problemas con ella, el primero de ellos es que se puede obtener plstico biodegradable de distintos medios como los Polmeros extrados de biomasa como almidn y

celulosa por sntesis qumica con la utilizacin de monmeros biolgicos de

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fuentes renovables y polmeros producidos por los microorganismos (1) con los polmeros extrados de biomasa, independientemente de que es un proceso costoso por el mtodo de extraccin, al tomar la celulosa de las plantas en el proceso de fotosntesis estas se tienen que arrancar para extraerlas por lo que es probable que se genere una sobre explotacin de especie porque no es fcil propagarse, as pues la elaboracin de bioplsticos por medio de los microorganismos, es difcil ya que cada especie de microorganismos necesita medios ptimos de crecimiento as, como una fuente de carbono, y el medio empleado para mantener a las bacterias lo ms cercano a su naturaleza es sumamente caro. Por esta razn, hemos elegido la cepa Ralstonia eutropha para producir los polmeros que se utilizan en la produccin de plsticos biodegradables, ya que es la cepa con mayor produccin en peso seco de este polmero.

INTRODUCCIN Los poli-b-hidroxialcanoatos (PHAs) son una serie de polisteres sintetizados por algunos gneros bacterianos como material de reserva, cuando el medio de cultivo se encuentra desbalanceado con limitacin en nitrgeno, fosforo, azufre, magnesio y/o oxgeno y con exceso de fuente de carbono (Kim 1994; lee 1996b; madison y Huisman, 1999). Son considerados fuertes candidatos para el reemplazo de los polmeros de origen petroqumico, ya que siendo sintetizados por microorganismos a partir de sustratos agrcolas, tiene la posibilidad de ser degradados a dixido de carbono y agua. Aunque se ha detectado la acumulacin de PHAs en cerca de 300 especies bacterianas el porcentaje de acumulacin en mucha de ellas es muy bajo por la cual se rechazan ante la posibilidad de industrializar el proceso, sin embargo la Ralstonia eutropha tiene la capacidad de acumular grandes cantidades de PHAs en forma del tipo poli-b-hidroxiburato (PHB), en un porcentaje al 80% del peso seco de la bacteria. Esta bacteria crece en un medio simple a partir de fuentes de
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carbono con glucosa, sin embrago la cepa silvestre crece en fructuosa, por lo cual es necesario establecer las condiciones para la acumulacin del polmero. Para la produccin del polmero por R. eutropha, la estrategia de fermentacin ms empleada es el cultivo por lote en cascada, por el cual las clulas en el primer reactor se reproducen constantemente, y por el otro crecen hasta una determinada concentracin con limitacin de nutrientes para permitir la sntesis de PHAs.

CARACTERISTICAS Las inclusiones de PHB son normalmente esfricas, de 0,5 m de dimetro. Las molculas de PHB, insolubles en agua. Ms til, desde el punto de vista comercial, es el PHBV. Aumentando la relacin HV/HB se consigue disminuir el punto de fusin del copolmero, on la consecuente mejora de sus caractersticas termoplsticas y propiedades mecnicas. La biosntesis del PHB se lleva a cabo mediante el acetil-CoA, el cual se produce a partir de sustratos, tales como glucosa, fructosa o acetato. Las molculas de PHB, insolubles en agua, ejercen una presin osmtica intracelular despreciable

EXTRACCION

Extraccin e PHA usando un disolvente orgnico clorado: cloroformo Este mtodo, muy til, rpido y eficaz a nivel laboratorio, permite el clculo de la cantidad de biopolmero producido por la biomasa bacteriana. La adicin de cloroformo sobre a biomasa liofilizada, a temperatura prxima al punto de ebullicin, es esencial para permitir la disolucin orgnica del biopolmero acumulado intracelularmente. El mtodo consta de las siguientes fases:

BIBLIOGRAFA 1. Bioplasticos - cido polilctico (PLA) extrado de la dextrosa del maz Francisco Jos Rodrguez Valero. http://grupos.emagister.com/debate/bioplastico__acido_polilactico_pla_extr aido_de_la_dextrosa_del_maiz/7153-622728

2. Plsticos biodegradables. www.figueraspacheco.com/.../PLASTICOS%20BIODEGRADABLES...

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3. Pgina oficial Biopol www.biopol.cat/es/ 4. Contaminacin ambiental y bacterias productoras de biodegradables Daniel Segura, Ral Noguez y Guadalupe Espn. plsticos

http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/libro_25_aniv/capitulo_31.pdf 5. Produccin de PHA en bacterias. http://www.eis.uva.es/~biopolimeros/virginia/bacterias.htm 6. Extraction of PHAs http://www.clt.astate.edu/dgilmore/Research%20students/extraction_of_pha s.htm 7. Efecto del gen fadh1 en la produccin del PHA conteniendo monmeros insaturados por Pseudomona putida. Diego Armando Castillo Franco.
http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis219.pdf