Membranas Excitáveis - Bio

Cincias Biolgicas
Membranas Excitveis:
Gradiente Eletroqumico, Potencial de Repouso e Potencial de Ao
Cincias Biolgicas
Profa. Dra. Daniela Priscila Marchi Salvador

Roteiro da Aula
Introduo
Membranas celulares Canais transmembranares
Gradiente eletroqumico Potencial de repouso Potencial de ao
Biofsica dos Sistemas Biolgicos
Introduo
Consideraes:
Introduo
Porque as clulas biolgicas necessitam de membranas e canais transmembranares?
Reaes biolgicas ocorrem em solues aquosas

vida est intimamente ligada a gua
gua no o melhor meio para molculas hidrofbicas
Membranas Celulares
Conservao do material interno da clula Proteo contra molculas indesejadas
Canais Transmembranares
Clulas necessitam trocar material e informao com o meio externo
Isso deve ser feito de maneira altamente seletiva
Canais proteicos fazem esse transporte

Quando os canais transmembranares se abrem aumenta a condutncia atravs da membrana
Cincias Biolgicas
Abertura e fechamento de canais por sistema porta Canais de Voltagem Dependentes

Abertura em funo da mudana do potencial da membrana
Canais de K+ e Canais de Na+
Canais Inicos
Gradiente Eletroqumico
Clulas Vivas DDP entre os dois lados da membrana
Canais Vazantes
Difuso Simples
Canal de Na+/K+
Canais de Ligantes Abertura em funo da ligao de molculas

Acetilcolina (Na+) Glutamato (Ca2+)
Todos os canais fazem parte do mecanismo de controle de conduo

Originado pela distribuio assimtrica de Na+, K+, Cl-, HPO4= e ptns aninicas (negativas)
Gradiente Eletroqumico
Membrana = capacitor
solues condutoras separadas por uma delgada camada
isolante Interior sempre negativo Exterior sempre positivo
Potencial de Membrana
Potencial de Repouso
originado por um mecanismo simples de alternncia entre os transportes ativo e passivo de pequenos ons
Potencial de Ao
Variao brusca do potencial de membrana provocada por estmulos externos que o deflagre
Estmulos qumicos, eltricos, eletromagnticos e mecnicos
Resultado de uma distribuio desigual de ons atravs da membrana
Espao perimembranar interno Espao perimembranar externo +
Presente em todas as clulas humanas e desaparece quando a clula morre
Valor caracterstico para cada tipo celular Relacionado com a conformao e ao funcionamento da membrana
O potencial de repouso sensvel a ons em proporo sua capacidade de permear a membrana

Biofsica dos Sistemas Biolgicos Biofsica dos Sistemas Biolgicos
Cincias Biolgicas
Foras q atuam nas trocas inicas entre a clula e o meio
Potencial de Repouso - Consideraes

Canais vazantes de Na+/K+: permitem a entrada de Na+ e sada de K+ por difuso atravs de uma cintica lenta Na+ entra em maior quantidade por difuso do q sai K+ K+ tem maior permeabilidade membranar Atrao de cargas internas (-) celular no permite a sada de K+ e atrai os Na+ para o interior celular
FE: fora eltrica FD: fora de difuso

Trs Fases:
Entrada passiva de Na+

Gradiente de concentrao
Expulso de Na+ e introduo de K+ ativamente

Ao de ATPases
Sada passiva de K+
Gradiente de concentrao e grande mobilidade

Cl- entra na clula por co-transporte com Na+ (atrao eltrica) e sai por difuso
potencial eltrico = Clula polarizada

Sada de K+ = Carga externa positiva [K+] interna no capaz de igualar as cargas de Cl-, HPO4= e Ptns aninicas
Interior celular negativo
HPO4= sai da clula lentamente; externamente participa de rpidas reaes e retorna para o interior celular
[HPO4=] interno e sai por difuso
Cincias Biolgicas
ATPase de Na+ / K+
Manter uma distribuio assimtrica de ons
Atividade da bomba = 85% de sua capacidade
O potencial de repouso independe da [Na+]
3 Na+
[K+]externo
[Na+]interno + Pi
2 K+
[K+] externo o principal regulador da bomba de Na+/K+
Lei do Tudo ou Nada

PA Tudo Propagao de um pulso de potencial eltrico caracterstico ao longo de uma clula PR Nada Rpida atenuao da perturbao, sem que ocorra a excitao da clula
Potencial de Ao
Sinal eltrico em propagao para conduzir uma informao, seja uma ordem ou uma notcia
Potencial de Ao
Clulas excitveis
Clulas nervosas (neurnios) Clulas musculares
Propaga-se ao longo das membranas excitveis

clula a clula sinapses tecido a tecido placa motora intimidade do tecido muscular tubos T
Clulas auto excitveis

Capazes de gerar impulsos eletroqumicos em suas membranas e utiliza estes impulsos para transmitir sinais ao longo das membranas
Clulas cardacas
Cincias Biolgicas
Potencial de Ao
Despolarizao Abrem os canais voltagem dependentes de Na+ (canais rpidos do tipo limiar excitatrio) influxo de Na+ (carga positiva) por difuso simples a carga vai se igualar (0 / 0)
Potencial de Ao
Inverso ou polarizao invertida Na+ continua entrando em grande quantidade Interior celular positivo (+ / -) Atividade da bomba de Na+/K+: 10-15% de sua capacidade
Potencial de Ao
Repolarizao Fecham-se os canais de Na+ e abrem os canais voltagem dependentes de K+ efluxo de K+ a permeabilidade ao K+ devido ao excesso de cargas (+) intracelulares (sada de K+ [K+] interna)
Potencial de Ao
Hiperpolarizao Consequente repolarizao alm do potencial de repouso [K+] externa [K+] externa induz da atividade da bomba de Na+/K+ (100% de sua capacidade)
Potencial de Ao
Repouso
Potencial de Ao
Retorno das [ ] originais do repouso eltrico (- / +)
O potencial de ao de uma clula excitvel dura apenas alguns milsimos de segundo (2-3 mili segundos)
Nas clulas excitveis do msculo cardaco o PA (despolarizao) varia de 1,15 a 0,3 segundos e so denominados de Plat
Cincias Biolgicas
Canais Voltagem-Dependentes
Abertura e fechamento dos canais de K+ e de Na+
Potencial de Ao
Membranas Excitveis:
Clulas Nervosas e Clulas Musculares
Cincias Biolgicas
Roteiro da Aula
Clulas Nervosas
Potencial de Repouso e Potencial de Ao
Anatomia das fibras nervosas

Conduo do PA
Clulas Musculares
Potencial de Ao e Contrao Muscular
Sinapses Neurotransmissores
Profa. Dra. Daniela Priscila Marchi Salvador
Clulas Nervosas
Clulas nervosas (neurnio) processam informao
Clulas Nervosas: Potencial de Repouso

Fibras nervosas de grande calibre - 90mV em relao lquido intersticial Fibras nervosas mais delgadas (sistema nervoso central) e nas fibras musculares (msculo liso) -40mV a -60mV
Potencial de repouso no interior da fibra nervosa Ncleo informao gentica
Canais de Vazamento de Na+/K+ difuso simples Bomba de Na+/K+ gradientes de concentrao da membrana neural de repouso
Neurnios conectam-se uns aos outros por sinapses (cadeias neuronais) ou aos msculos (placas motoras) transmisso de informaes / impulsos eltricos
Dendritos
Ncleo
Axnio
Dendritos conexes com neurnios vizinhos Axnio transmisso de impulsos nervosos

Cincias Biolgicas
Bomba de Na+/K+ X Canais de Vazamento de Na+/K+

Difuso de Na+/K+
Reduzida permeabilidade de ons pela membrana
Condutncia do K+ de 50-100 x mais permevel que o Na+ Determinante do valor do potencial de repouso
Potencial interno da membrana obtido por este conjunto de
fatores de -86mV

Bomba de Na+/K+
Eletrognica: + cargas positivas so bombeadas para o exterior (3 Na+) que para o interior (2 K+) dficit efetivo de cargas (+) no interior ou acmulo de cargas (-) no interior da membrana celular
Grau adicional de negatividade: -4mV
Potencial de membrana efetivo: -90mV

Difuso de Na+/K+: -86mV Bomba de Na+/K+: -4mV
Clulas Nervosas: Potencial de Ao

Lei do Tudo ou Nada
Um neurnio s consegue enviar um impulso se a intensidade deste for acima de um determinado nvel que induza q sua membrana seja despolarizada e repolarizada
+30
Potencial Limiar
Menor estmulo necessrio para desencadear um potencial de ao
Valores sublimiares esto abaixo do potencial limiar e so caractersticos para cada clula
-90
Cincias Biolgicas

Sinais neurais transmitidos por variaes muito rpidas do potencial de membrana potenciais de ao Incio: modificao abrupta do potencial de repouso para
um potencial positivo Continuidade: rpido retorno para o potencial negativo, alternncia e deslocamento pela fibra nervosa sinal neural

Despolarizao (0 / 0) Ativao dos canais de voltagem dependentes de Na+ voltagem para -70 e -50mV alteraes conformacionais abertura da comporta de ativao Condutncia do Na+: de 50 a 500 x
Despolarizao

Inverso (+ / -) Inativao dos canais de voltagem dependentes de Na+
+30
voltagem +30mV alteraes conformacionais fechamento da comporta de inativao
-90
Esta despolarizao percorre o axnio como um condutor do PA


Repolarizao (- / +) Ativao dos canais de voltagem dependentes de K+ voltagem -30mV alteraes conformacionais abertura (lenta) do canal de K+
Repolarizao
+30
-90
A despolarizao e repolarizao rpida produz um padro chamado de ponto de descarga

Cincias Biolgicas
Hiperpolarizao
Hiperpolarizao (- / +) Inativao dos canais de voltagem dependentes de K+ Tenso inferior ao potencial de repouso: -95mV
Ocorre aps breve retardo
-90 +30
Este o perodo refratrio


Potencial de Ao Clulas Nervosas
Anatomia da Fibra Nervosa

Axnios envoltos pela bainha de mielina fibra mielnica (neurofibra ou fibra nervosa) envoltas por oligodentrcitos (clulas de Schwann)
No possvel nova abertura dos canais de Na+ at q o potencial de membrana retorne a seu valor de repouso ou muito prximo a ele
Anatomia da Fibra Nervosa

Interior do axnio ocupado pelo axoplasma (lquido intracelular viscoso) Bainha de mielina circunda o axnio e interrompida pelos nodos de Ranvier
Bainha de mielina
Substncias lipdicas esfingomielina Atua como um isolante eltrico Aumenta a velocidade dos sinais Capaz de diminuir o fluxo inico atravs da membrana por 5000 x e reduzir a capacitncia da membrana 50 x
Bainha de mielina
Cincias Biolgicas
Nodo de Ranvier
Ponto de juno entre duas clulas de Schwann sucessivas Pequena regio no isolada - 2 a 3 mm de extenso ons fluem do lquido extracelular para o interior do axnio
Potencial de Conduo
Conduo do PA em Fibras Mielnicas

Conduo saltatria PA conduzido de nodo a nodo ons no fluem significativamente pela bainha de mielina porm fluem facilmente pelos nodos de Ranvier Importncia
Despolarizao saltatria por longos trechos velocidade de transmisso neural Somente nodos se polarizam perda de ons 100 x (economia de energia)
Conduo em Fibras Amielnicas x Mielnicas

Membrana do axnio envolvida pela bainha de mielina
Nodos de Ranvier
Fibras Mielnicas (120m/s)
Fibras Amielnicas (0,5 m/s) Membrana do axnio em contato direto com tecidos vizinhos
Potencial de Ao em Progresso
Repolarizao
Potencial de Ao e Conduo
Repouso Despolarizao
Todos os impulsos nervosos so iguais durante o seu percurso pela membrana celular do axnio porm podem ter diferentes resultados ao alcanarem o final do axnio, onde se forma uma sinapse
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Cincias Biolgicas
Axnios ramificam e terminam perto de dendritos de clulas vizinhas
Sinapse: diferena de potencial que separa os terminais do axnio e dos dendritos
Sinapse
Transmisso do impulso nervoso Neurnio Neurnio Neurnio Msculo (placa motora)
Clulas Musculares: Potencial de Ao

PA trafega ao longo de um nervo motor at suas terminaes nas fibras musculares Na sinapse secretada a acetilcolina (NT) q atravessa a sarcolema e liga-se com receptores de acetilcolina permitindo a abertura de canais acetilcolinadependentes de Na+ e K+ da membrana da fibra muscular Sada de K+

Colinesterases ligam-se a acetilcolina e as clivam em colina + acetato, tornando-as invativas
Fechamento dos canais de Na+ e K+ acetilcolinadependentes da membrana da fibra muscular

Despolarizao no sistema de tbulos T causa a abertura de
canais de Ca2+ atravs da ativao dos receptores de DHP e transmisso do sinal para o receptor de rianodina
[K+] da membrana da fibra muscular induz a abertura dos canais voltagem-dependentes de Na+
Entrada de Na+ na membrana da fibra muscular no ponto terminal neural desencadeia PA na fibra muscular
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Cincias Biolgicas

Liberao do do retculo sarcoplasmtico pelo receptor de rianodina Difuso do Ca2+ pela regio das miofibrilas Ligao do Ca2+ na troponina C
Ca2+ provoca foras atrativas entre os filamentos de actina e miosina processo contrtil

Captao do Ca2+ das miofibrilas pelas ATPases de Ca2+ e bombeamento para o interior do retculo sarcoplasmtico
[Ca2+] dissociao do Ca2+ da troponina C fim da contrao muscular
Ca2+
Retorno s concentraes iniciais de Ca2+ no sarcoplasma

Ca2+ armazenados no retculo sarcoplasmtico at que um novo PA ocorra
Potencial de Ao e Contrao Muscular
Sinapse Excitatria X Inibitria

Sinapse excitatria: PA chega a extremidade prsinaptica, libera o neurotransmiossor das vesculas o qual atravessa a fenda sinaptica e se localiza em receptores especficos
Acetilcolina secretada
K+ Na+
Ca2+
Ca2+
permeabilidade da membrana ao Na+ q despolariza a membrana ps-sinptica e inicia um PA que continua no mesmo sentido do anterior
Potencial de Ao Clulas Musculares

Sinapse Excitatria X Inibitria

Sinapse inibitria: neurotransmissor liberado
permeabilidade da
Sinapse Eltrica X Sinapse Qumica

Sinapse Eltrica: feita atravs de contato eltrico (tipo especial de sinapse) Impulso transmitido rapidamente fibra ps-sinptica com um mnimo perodo de latncia Bidirecional e excitatria
membrana ao K+ e Clque penetram na membrana ps-sinptica, provoca hiperpolarizao e o impulso bloqueado Principais mediadores inibitrios: Glicina e GABA (cido gama-amino-butrico)
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Cincias Biolgicas
Sinapse Eltrica X Sinapse Qumica

Sinapse Qumica: feita atravs de mediadores qumicos Vescula libera neurotransmissor transmite impulso Unidirecional e inibitria ou excitatria
Neurotransmissor (NT)
Neurotransmissor
Receptor
ons positivos (Na+) despolarizam o neurnio sinapse excitatria ons negativos (Cl-) Sinapse mista: h conduo qumica e eltrica
hiperpolarizam o neurnio sinapse inibitria

Neurotransmissores
Trs categorias: aminocidos, aminas e peptdeos
Neurotransmissores
Diferentes neurnios no SNC liberam diferentes NTs
Aminocidos e aminas: pequenas molculas orgnicas com pelo menos um tomo de N armazenados e liberados em vesculas sinpticas q os liberam por exocitose
Sntese: terminal axonal
Transmisso sinptica do SNC mediada por aminocidos glutamato (Glu), gama-aminobutrico (GABA) e glicina (Gli) Transmisso sinptica em junes neuromusculares mediadas por amina acetilcolina
Peptdeos: grandes molculas armazenados e liberados em grnulos secretores

Sntese: retculo endoplasmtico rugoso do corpo celular
Neurotransmissores
Funes especficas de alguns NTs
Dopamina: NT inibitrio derivado da tirosina - produz sensaes de satisfao e prazer Serotonina: NT inibitrio derivado do triptofano - regula o humor, o sono, a atividade sexual, o apetite, o ritmo circadiano, as funes neuroendcrinas, temperatura corporal, sensibilidade dor, atividade motora e funes cognitivas
Neurotransmissores
Endorfinas e Encefalinas: bloqueiam a dor analgsicos GABA (cido gama-aminobutirico): principal NT inibitrio do SNC - relacionado com processos de ansiedade cido glutmico ou glutamato: principal NT estimulador do SNC - ativao aumenta a sensibilidade aos estmulos dos outros NTs
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Cincias Biolgicas
Alguns Frmacos que Atuam Sobre Receptores

Antagonistas: se ajustam mal ao receptor e bloqueiam o NT
Toxina Botulnica
Agonistas: se encaixam bem ao receptor e agem como o NT

Nicotina
Bibliografia Recomendada

Heneine, I.F. Biofsica Bsica. 4 Ed. So Paulo: Atheneu, 2004, 391p. Mouro Jr, C.A.; Abramov, D.M. Curso de Biofsica. 1 Ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2009, 260p. Garcia E. A. C. Biofsica. 2 Ed. So Paulo: Sarvier, 2005; 387p.
Complementar: Livros de Fisiologia e Bioqumica
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