PRACTICA No. 7 OBSERVACIN Y ESTUDIO DE TREMATODOS.

A. OBJETIVOS ESPECIFICOS a.1.El alumno conocer y aplicar diversas tcnicas para el estudio, observacin e identificacin de trematodos, con el propsito de desarrollar habilidades destinadas al reconocimiento de los parsitos de los animales domsticos.

B.- MATERIAL Y EQUIPO A UTILIZAR b.1. Microscopio compuesto b.2. Microscpio estereoscpico b.3. Cajas de petri b.5. Pinzas de diseccin b.6. Asas de platino y cucharas b.7. Pizetas con agua destilada b.8. Lminas de ilustracin de trematodos b.9. Catlogo de trematodos b.10. Especmenes conservados en formol al 10% b.11. Preparaciones permanentes de Fasciola hepatica b.12. Recuperacin del conocimiento sobre trematodos (apuntes)

C.- PROCEDIMIENTOS

c.1. INTRODUCCION

Los trematodos constituyen un grupo heterogeneo de gusanos planos (plathelmintos), que agrupa a los helmintos ms abundantes en el reino Animalia, despus de los nematodos. Son parsitos de todas las clases de vertebrados, ya sea en su fase juvenil o adulta. Existen unas 8000 especies. Carecen de coloracin. Los Trematodos digenticos son, en estado adulto, endoparsitos en diversos rganos o tejidos (conductos biliares, intestino, venas mesentricas y vesicales, pulmones, etc.) de vertebrados. Son aplanados, de tamao variable (desde 30 m a 30 mm), con una o dos ventosas y ciclos complejos con dos o ms hospedadores. El hospedador definitivo (vertebrado) alberga la fase adulta y los intermediarios (molusco, artrpodo o, raramente, vertebrado) las fases larvarias. Todos los Trematodos son hermafroditas, excepto los miembros de la familia Esquistosomtidos que presenta machos y hembras.

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Figura No. 7.1 Tipos de trematodos

Un nmero limitado de trematodos digenticos tiene importancia mdica, pero varias especies causan severas prdidas econmicas debido a las parasitosis que producen en ganado y animales domsticos. Los trematodos de importancia mdica se ubican en la subclase Digenea, entre ellos los gneros Fasciola, Clonorchis y Epistorchis (hgado), Fasciolopsis, Heterophyes, Metagonimus y Echinostoma (intestino delgado), Paragonimus (pulmones), Schistosoma (hemtico). Morfologa del adulto Morfolgicamente, los Trematodos digenticos muestran caractersticas tpicas (Fig. 7.2). El cuerpo es oval y aplastado y en la cara ventral destacan, salvo alguna excepcin, dos ventosas: una ventosa anterior (llamada tambin oral, porque suele rodear a la boca) y otra ventral (llamada tambin acetbulo). Las dimensiones de los adultos son muy variables segn la especie: los ms pequeos no miden ms de 30 m, en tanto que los ms grandes pueden superar los 3 cm de longitud. Presentan coloracin plida, blanquecina, y si muestran algn color vivo se debe a los productos ingeridos que se aprecian por transparencia.

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Figura No. 7.2 Exterior de un trematodos

En los Trematodos digenticos adultos y sexualmente maduros se distinguen varios tipos morfolgicos, basados, principalmente, en el nmero y disposicin de las ventosas. El cuerpo est relleno de parnquima, que rodea a los rganos y el lquido corporal que circula entre sus clulas constituye el medio de transporte de diversas sustancias. Este est recubierto de cutcula y desprovista de cilios. La epidermis es sincitial (citoplasma distal); la parte del sincitio que contiene los ncleos (citoplasma perinuclear) est incluida en el parnquima por debajo de la musculatura. En la epidermis existen espinas y diversas glndulas: de penetracin y de produccin de quistes. La funcin de la pared del cuerpo es protectora, excretora y de absorcin de alimento. Por debajo de la pared del cuerpo se sita el parnquima. En su interior existe un sistema linftico que parece representar un sistema circulatorio primitivo. Consta de 1 a 4 tubos longitudinales a cada lado del cuerpo, no conectados entre s. Contienen fluido y clulas que se asemejan a clulas sanguneas. Su funcin es la del transporte de alimento, gases y excreciones.
Figura No. 7.3 Estructura de la epidermis de trematodos

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El tubo digestivo es incompleto, pues, salvo alguna excepcin, carecen de ano, y los desechos son regurgitados. La boca se abre en la porcin anterior del cuerpo rodeada (salvo excepciones) por la ventosa oral y se comunica con una faringe musculosa (que falta en los Esquistosomtidos), a la que sigue un esfago que se bifurca en dos ciegos intestinales, a menudo ramificados.
Figura No. 7.4 Aparto digestivo y excretor de trematodos

Todos los Trematodos digenticos son hermafroditas (a excepcin de los Esquistosomtidos, que tienen sexos separados y presentan un acentuado dimorfismo sexual) con doble juego de genitales, masculino y femenino. El aparato reproductor masculino est formado generalmente por dos testculos, de forma variada segn la especie, de los que surgen sendos vasos eferentes, para posteriormente unirse en un vaso deferente comn, que se ensancha en una vescula seminal y finaliza en un cirro (rgano de la cpula) protrusible rodeado de glndulas prostticas. En muchas especies, el cirro (y a veces la vescula seminal) se encuentra dentro de un saco, denominado bolsa del cirro que se abre en un poro genital, situado por detrs de la ventosa oral.
Figura No. 7.5 Aparato reproductor masculino de trematodos

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El aparato reproductor femenino est formado, generalmente, por un nico ovario, situado habitualmente por delante de los testculos. Del ovario parte un oviducto corto que desemboca en una pequea cmara denominada ootipo. En el ootipo desembocan, a su vez, los conductos de las glndulas de Mehlis, los conductos vitelinos provenientes de las glndulas vitelgenas y, en ocasiones, el receptculo seminal. En algunas especies existe un conducto, denominado canal de Laurer (vagina vestigial de los Trematodos ancestrales), que parte del ootipo y se abre dorsalmente. Del ootipo parte, tambin, el tero; se trata de un conducto, a veces muy largo, por el que transitan los huevos producidos en el ootipo hasta su evacuacin por el poro genital. El tero se abre al exterior por un poro que, en la mayora de las especies, es comn al aparato genital masculino.
Figura No. 7.6 Aparato reproductor femenino de trematodos

El ciclo biolgico tpico de un trematodo. Presentan ciclos de vida complejos, que incluyen habitualmente uno o dos hospederos intermediarios (ocasionalmente tres de ellos) y el hospedero definitivo. La fecundacin es generalmente cruzada, siendo la autofecundacin poco frecuente. Los vulos caen al ootipo y son fecundados por los espermatozoides; en el ootipo se forma la cscara de los huevos fecundados que pasan al tero y luego se expulsan por el orificio genital. El ciclo vital de un trematodo digentico tpico comprende los estadios de adulto, huevo, miracidio, esporoquiste, redia, cercaria y metacercaria. En algunas especies puede faltar alguna de las fases larvarias y/o existir varias generaciones de un estadio larvario determinado. Los huevos se producen en gran cantidad y tienen morfologa variable, aunque suelen ser ovales. Dependiendo de las especies, los huevos pueden salir al exterior embrionados o no. Salvo alguna excepcin, los huevos deben caer al agua, donde con condiciones determinadas de oxgeno, temperatura y luminosidad surge el primer estadio larvario o miracidio. El miracidio es una larva pequea, ovoide, alargada y cubierta con lminas ciliadas aplanadas. En el extremo anterior se encuentra una papila apical protrctil en la cual desembocan dos tipos de glndulas: la glndula apical, situada en posicin central, y las glndulas de penetracin, situadas a ambos lados de la anterior; la secrecin de estas glndulas colaboran en la disolucin de los tejidos del hospedador durante el proceso de penetracin del miracidio.

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Figura No. 7.7 Huevecillo de trematodo

Cuando el miracidio encuentra a su primer hospedador (que suele ser un molusco: caracol de agua dulce), penetra en l, transformndose en esporoquiste; ste tiene tegumento sencillo y posee clulas germinales que darn lugar a la siguiente generacin larvaria, las redias. La redia posee un tubo digestivo sencillo y clulas germinales que darn lugar al siguiente estado larvario, la cercaria, que sale al exterior a travs de la pared de la redia o por un orificio especifico. La cercaria posee una gran variabilidad morfolgica, segn los grupos; una vez en el agua nada en busca de un segundo hospedador intermediario o una planta, enquistndose como metacercaria.

Figura No. 7.8 Cercaria de trematodo

La metacercaria debe ser ingerida por el hospedador definitivo; en el intestino, por accin de las enzimas queda libre de su cubierta y migra hasta su localizacin definitiva, donde se transforma en el adulto. En los Esquistosomtidos la cercaria busca al hospedador definitivo y penetra en l activamente.

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Figura No. 7.9 Metacercaria de trematodo

En resumen, el patrn bsico del ciclo biolgico de los trematodos es: huevo, miracidio, esporoquiste, redia, cercaria, metacercaria y adulto, con variaciones que se identificarn en los ciclos de vida .

c.2. OBSERVACION DE Fasciola hepatica

Con la recuperacin del conocimiento previo sobre los trematodos, el alumno realizara la observacin de preparacin permanentes y de especmenes conservados en formol al 10% o alcohol al 50% de Fasciola hepatica, observando las ventosas ventral y oral, las estructuras internas visibles a travs de la epidermis y sus huevecillos, con el propsito de hacer la identificacin de la especie. Para lo anterior, debern extraerse los especimenes conservados en formol o alcohol con sumo cuidado con la ayuda de cucharas, asas de platino y pinzas, con el propsito de no romperlo, y colocarlo en una caja de Petri para su observacin al microscopio estereoscpico. La manipulacin del frasco del espcimen abierto, debe hacerse con precaucin para no aspirar o producir contacto con ojos o mucosas con el formol, ya que este es irritante, por lo que se deber tapar y colocarlo en un lugar apartado para evitar accidentes. Durante esta observacin, se procurar mantener hmedo el ejemplar, para lo cual se proporcionar una pizeta con agua destilada para rociar al parsito continuamente. La observacin de los especmenes en preparaciones permanentes (laminillas), se realizar simplemente colocando estos en la platina del microscpio compuesto, y se observarn con el objetivo de 10x exclusivamente. En todo momento se podr consultar con el catedrtico o auxiliar del laboratorio.

c.3. OBSERVACION DE Paramphistoumn cervi

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Con la recuperacin del conocimiento previo sobre los trematodos, el alumno realizara la observacin de preparaciones conservadas en formol de Paramphistomun cervi. Para lo anterior, se seguir el mismo procedimiento descrito en la observacin de Fasciola.

D.- EJERCICIOS. d.1 Revisar el esquema de a continuacin, comparando las estructuras observadas en los especmenes observados y completar los nombres de las estructuras identificadas.

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d.2 Realiza el dibujo del Paramphistomun cervi en las preparaciones permanentes. Anotar la observacin y la experiencia.

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