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Istudio de ia hidriisis dei
crudo de aceite de paima
aricana empieando como
cataiizador ia iipasa de ia
ievadura C.rugosa
MigueI MoIano
Asesor. lngeniero Quimico e lngeniero Mecanico, Prolesor
inslruclor del Deparlamenlo de lngenieria Quimica de
Universidad de los Andes
Diana iveros
Aulor. Lsludianle de lngenieria Quimica de la Universidad de
los Andes
Edgar Vargas
lngeneiro Quimico, Msc. lng. Quimica, Prolesor inslruclor del
Deparlamenlo de lngenieria Quimica de Universidad de los
Andes
Pecibido 9 de sepliembre de 2005, aprobado 30 de oclubre de 2005.
PALAA5 CLAVE. cidos Grasos, Lipasa, AceiIe de paIma,
hidrIisis.
KEY WOD5. faIIy acids, Lipase, PaIm oiI, hydroIysis.
E 5 UME N Ln esle arliculo se presenla el esludio de la hi-
drolisis del crudo de aceile de palma por medio de la lipasa
Cand|da ruo:a. Los laclores esludiados en esla invesliga-
cion lueron el nivel de agilacion, el eleclo de blanqueo y la
canlidad de lipasa. Lxperimenlalmenle lueron alcanzados
porcenlajes de hidrolisis del 79 93 en periodos de
liempo de 2 horas y media. Se pudo oblener un incremenlo
de la reaccion al aumenlar la rolacion del agilador al igual
que incremenlando la concenlracion de lipasa. Aunque
la lileralura cila el blanqueado como una venlaja para la
hidrolisis enzimalica, esle procedimienlo parece no lener un
eleclo benelco en la reaccion.
A 5 T AC T This paper shows lhe sludy ol lhe hydrolysis
reaclion ol crude palm oil giving by lipase lrom Cand|da
ruo:a. The sludied laclors were agilalion level, bleaching
ellecl and lipase concenlralion. Lxperimenlally 79 - 93
hydrolysis were achieved in 2 and a hall hour. The reaclion
rale was increased wilh lhe incremenl ol lhe impeller
rolalional speed as well as increasing lhe lipase concenlra-
lion. Allhough lhe lileralure ciles bleaching as a benelcial
advanlages lo enzymalic hydrolysis, lhis procedure do nol
have a signilcanl benelcial ellecl on lhe reaclion.
1 . I NT ODUC C I ON
Ios cidos grasos son una importante materia prima
para ia industria qumica. In Coiombia, se registra
una produccin de aiguna importancia soiamente
para ei cido esterico, por io cuai, para satisacer ia
demanda de otros cidos grasos, ei pas depende de
ias importaciones ((Viez et ai. 2002)
Ixisten diversas tecnoiogas para ia produccin de
cidos grasos. Aigunos de estas tecnoiogas son 1wit-
cheii y Coigate-Imery, ias cuaies utiiizan presiones
y temperaturas aitas (airededor de 00 psi y 480 I)
por perodos de 2 horas para aicanzar un 96-99` de
hidriisis. In este itimo mtodo, se aiimenta ei
materiai graso y agua continuamente a un racciona-
dor (20 m aitura), en contracorriente, iiegando a ser
un proceso de gran eiciencia (Aivarez, 1995).
Ia gran mayora de industrias productoras de cidos
grasos, en pases industriaiizados, han utiiizado tec-
noiogas que requieren un aito consumo de energa,
debido a que eran ia nica orma de producirios en
ese tiempo. Ia viabiiidad de conseguir comer-
ciaimente iipasas en este momento, ha hecho ia
hidriisis enzimtica ms atractiva para ios nuevos
productores.
Ia patente de \amada K. (1965) divuiga ia purii-
cacin de una iipasa de gran actividad, obtenida de
una especie de ievadura iiamada caoaiaa .y/ioaa..a,
ahora iiamada caoaiaa asa Benzonana y Isposito
(191) demostraron iuego que esta iipasa cataiizaba
compietamente ia hidriisis de diversos aceites, obte-
niendo cidos grasos iibres y giiceroi. muchas otras
iipasas se han utiiizado en ia industria para este in,
como son ias obtenidas a partir de Rhizotus arrhizus,
Rhizomucor miehei y Aspergiius niger, ias cuaies se
comerciaiizan ciimente (Arango, 2004). Como se
muestra en ei estudio de Samuei Serota (1984), aigu-
nas de ias anteriores iipasas, como ia proveniente de
R. arrhizus, son especicas para aigunos eniaces en
ios trigiicridos (no hidroiiza posicin-2). In cam-
bio, ias iipasas provenientes de C. rugosa y A. niger,
no son especicas y atacan a cuaiquier posicin.
In ei presente artcuio, se mostrarn ias condiciones
ptimas para ia produccin de cidos grasos, por
medio de una hidriisis enzimtica, cataiizada por
ia enzima producida por ia c asa. Ios actores
anaiizados ueron: ei nivei de agitacin, ia concen-
tracin de iipasa y ei nivei de bianqueo. Iste itimo
se hace importante ya que ia iiteratura muestra que
aparentemente se presentan impurezas en ei aceite,
ias cuaies producen una inhibicin de ia enzima en
su proceso cataitico.
Hay que tener en cuenta que una de ias ases ms
importantes en ios procesos industriaies, es repro-
ducir a mayor escaia ios resuitados encontrados
en ei iaboratorio, siendo esta una etapa crtica
para cuaiquier proceso qumico. Debido a su
importancia, en ei presente estudio se muestra ei
escaiamiento a ias condiciones dei mejor resuitado
obtenido de ia experimentacin a nivei iaboratorio,
con ei objetivo de veriicar si ei escaiamiento
reaiizado puede obtener ios mismos porcentajes de
hidriisis que ia escaia menor.
Hay que tener en cuenta que, para ias reacciones
de hidriisis, ia agitacin es uno de ios actores de
mayor importancia, ya que de eiio depende ia buena
ainidad entre ia ase grasa y acuosa. Como es bien
sabido estas dos ases tienen poca soiubiiidad, por
io que es necesario ormar emuisiones para aumen-
tar ia interase de contacto en ias primeras etapas
de ia reaccin. Por tai motivo, ei escaiamiento se
enoca principaimente en ia agitacin y todos ios
parmetros que a eiia se reiacionan, como son ei es-
caiamiento dei nivei de agitacin, iniuencia dei tipo
de agitador dentro dei mezciado y ei aniisis de ios
parmetros de mezciado que permanecen constantes
dentro de este proceso.
2 . E XP E I ME NTAC I ON
2 . 1 MAT E I AL E 5
Se utiiiz iipasa de ia Candida rugosa 2,820 unida-
des/mg siido, (200 g), que ue adquirida en SIGmA
Chemicai Co. Ia iipasa ue aimacenada a una tem-
peratura de 8C. Se utiiiz ia arciiia bianqueadora
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1onsii actisii, brindada por meza Hermanos I1DA,
importadora y distribuidora de este materiai a nivei
industriai en Coiombia. Ii crudo de aceite de paima
( Iitros) ue suministrado por ia empresa Oieagino-
sas San marcos Itda.
2 . 3 DI 5 E O E XP E I ME NTAL
Se utiiiz un diseno actoriai de 3
3
, en ei que se
tomaron tres actores con tres niveies indepen-
dientes. Ios actores estudiados con sus respectivos
niveies se iiustran en ia tabia nmero 1. Para este
diseno se requirieron 2 ensayos, con ei objetivo de
correiacionar cada uno de ios distintos actores con
sus dierentes niveies, tomando adems para cada
combinacin una rpiica.
Tabla !.
laclores analizados en el esludio, con sus dislinlos niveles.
Otros actores que intervienen en ia hidriisis enzi-
mtica ya han sido estudiados por diversos investiga-
dores, y sus reportes se encuentran registrados en ia
iiteratura, de donde se tomaron ias condiciones pti-
mas a ias cuaies trabaja ia enzima. Istas condiciones
ptimas bajo ias que se estudi ia hidriisis ueron:
temperatura (3C) ], pH (,2) 8] y reiacin de
reactantes (2:1 agua aceite, 10g aceite y 20 g de
agua) 9]. Un nuevo actor ue tomado en cuenta en
ia reaccin, para aicanzar grados de hidriisis ms ai-
tos, se utiiiz una reiacin de hexano-aceite ptima,
estudiada por H.1. Khor (1986), ia cuai corresponde
a 0,5 mi de hexano por gramo de aceite. Ii tiempo
estabiecido para que ia reaccin de hidriisis se iie-
vara a cabo ue de 2 horas y media, en donde se pudo
apreciar porcentajes de hidriisis eievados.
2 . 4 ME T ODOL OGI A DE E XP E I ME NTAC I ON
Para poner en marcha ia reaccin de hidriisis, se
utiiiz un beacker de 100 mi, en ei que se agregaron
10 g de aceite disueitos en 5 mi de hexano. Ia canti-
dad de iipasa correspondiente ai ensayo se disoivi en
10 mi de buer de osato de sodio de pH .2, ms
10mi de agua destiiada. Ista ase acuosa se puso en
contacto con ia ase oieosa, para iuego ser agitado
con impeiier tipo turbina simpie de paia recta de 3
cm de dimetro.
Despus de dos horas y media, para cada ensayo, se
detuvo ia agitacin y se determin ia cantidad de
cidos iibres, para iuego estabiecer ei porcentaje de
hidriisis de ia muestra, como se ve en ia ecuacin
uno.
Lcuacion. !
Donde, IIA fioa/.s son ios cidos iibres totaies des-
pus de ia reaccin, IIA ioi.ia/.s son ios cidos iibres
que tiene ia muestra de aceite iniciaimente antes de
ia reaccin y I.S es ei ndice de saponiicacin dei
aceite con que se reaiiz ia hidriisis.
2 . 4 E 5 C AL AMI E NT O
Como se mencion anteriormente, ei escaiamiento
se reaiiz como estudio posterior a ia experimenta-
cin hecha en ei iaboratorio, este proceso se hizo con
reiacin a ia agitacin. Debido a ias iimitaciones de
ia enzima, ueron posibies tan soio dos escaiamien-
tos, reaiizados con base en ios resuitados obtenidos a
nivei de iaboratorio. Para eiio, ue necesario determi-
nar cui de ias combinaciones entre niveies de cada
uno de ios tres actores (tabia 1), ue ia que arroj
un mayor porcentaje de hidriisis, para as tomar sus
condiciones y escaiarias.