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METHODES DEXTRACTION DES SUBSTANCES BIOMEDICALES Il existe un ensemble de mthodes dextraction des substances biomdicales partir dun matriel

l primitif, le plus souvent dorigine vgtale. Parmi ces mthodes, on peut citer : - la macration (laisser sjourner le matriel vgtal dans un solvant puis filtrer pour rcuprer le filtrat) - linfusion -la dcoction - lextraction au soxhlet - lextraction liquide-liquide - lextraction acide-base En dehors de la dernire mthode (qui peut permettre dobtenir un compos pur), les autres conduisent un extrait organique brut des plantes mdicinales. Dans le cadre de ce TP, nous nous intresserons particulirement lextraction liquide liquide. Extraction liquide-liquide 1- Principe Lextraction liquide-liquide repose sur la diffrence de solubilit des substances entre deux solvants non miscibles. On dissout lextrait brut de la plante dans un premier solvant (gnralement leau) puis on y ajoute un deuxime solvant non miscible au premier et qui dissout slectivement le compos sparer. A laide dune ampoule dcanter, on spare les deux phases et on rcupre le solut par distillation du solvant.

Remarque : Les solvants organiques les plus couramment utiliss pour extraire un compos dune solution aqueuse sont : lthanoate dthyle ou lactate dthyle, le dichloromthane, le trichloromthane, le dithylther et lhexane

2- Coefficient de partage Lorsquon ajoute une solution aqueuse un solvant organique (non miscible leau), le solut se rpartit entre les deux solvants selon sa solubilit relative dans chacun dentre eux. Lquilibre obtenu peut tre dcrit par une constante que lon appelle coefficient de partage (K). Ce coefficient

correspond au rapport de la concentration de solut dans le solvant organique (CS) sur la concentration du solut dans la phase aqueuse (Ceau).

Exemple : soit une solution aqueuse contenant 10g/100mL de solut pour un systme eau-solvant organique. En supposant que le coefficient de partage pour ce systme est K = 4, calculer la quantit de solut extraite avec 100mL de solvant organique. Rp : 3- Extraction multiple Pour extraire la plus grande quantit de solut dune solution aqueuse, on effectue ordinairement plusieurs extractions avec de petites portions de solvant organique au lieu de faire une seule extraction avec une portion unique de solvant. Exemple : considrer la solution de lexemple prcdent. On suppose toujours que K = 4. Montrer que, si on effectue successivement 4 extractions en ajoutant chaque fois 25mL de solvant organique la solution aqueuse, le rendement de lextraction sera meilleur que si on utilise directement 100mL de solvant organique. Rp : X1= 5g ; X2= 2,5g; X3= 1,25g; X4= 0,62g et Xtotal= 9,37g soit 93,7% de solut extrait. Ainsi, on extrait plus de solut par le principe de lextraction multiple 4- Schage dun liquide organique Aprs les extractions, la phase organique contient toujours des traces deau que lon doit scher avant de distiller le solvant. Pour ce faire, on utilise un desschant chimique : les desschants chimiques sont des substances inorganiques capables de fixer les molcules deau et de former des produits stables. Pour une bonne efficacit, un desschant ne doit ni ragir avec le compos scher, ni le dissoudre, ni donner lieu lquilibre avec leau. En gnral, on les utilise ltat anhydre. Les desschants couramment utiliss sont : CaCl2 (chlorure de calcium) anhydre Na2SO4 (sulfate de sodium) anhydre CaSO4 (sulfate de calcium) anhydre MgSO4 (sulfate de magnsium) anhydre soit 80% de solut extrait.

Ces sels anhydres absorbent leau pour se transformer en sels hydrats selon les quations suivantes :

CaCl2 + 6 H2O Na2SO4 + 10 H2O

CaCl2, 6H2O Na2SO4, 10H2O

la fin du schage, le desschant est limin par simple filtration. MANIPULATION Mode operatoire 1) prparation de lextrait brut peser 10g des feuilles de Dorstenia psilurus (Moraceae) Puis introduire dans un erlenmeyer de 250mL. Ajouter dans lerlenmeyer 100mL de mthanol, homogeniser le mlange puis fermer hermetiquement lerlen et laisser sjourner le mlange pendant environ 48 heures. Plier en 4 un morceau de papier filtre et placer le dans un entonnoir conique. Poser lentonnoir sur un ballon de 250 mL. Filtrer lextrait mthanolique directement dans le ballon (filtration simple) Monter le ballon sur un vaporateur rotatif et concentrer lextrait organique rsultant sec pour liminer le solvant utiliser (mthanol).

NB : Il faut mettre la temprature du bain-marie celle de lbullition du mthanol car les solvants organiques couramment utiliss dans les oprations pratiques en Chimie organique sont volatiles et parfois trs toxiques. Il est conseill de les manipuler avec beaucoup dattention.

2) traitement de lextrait organique brut Ajouter environ 50mL deau distille dans le ballon et agiter pour dissoudre completement lextrait organique. Sur un statif surmont dun anneau, placer une ampoule dcanter. Verser y un peu deau pour verifier si le bouchon et le robinet fonctionnent normalement. Au besoin, lubrifier les lgerement. Transvaser le contenu du ballon dans lampoule dcanter puis y ajouter 50mL de salvant organique (dichloromthane, CH2Cl2) et refermer immediatement lampoule. Tout en tenant bien le bouchon pour quil ne senlve pas, renverser lampoule (orienter obliquement vers le haut) et ouvrer immdiatement le robinet afin de laisser chapper lexcdent de pression.

Refermer le robinet. Agiter ensuite vigoureusement lampoule et relacher nouveau comme prcdemment. Agiter lampoule une deuxieme fois. Assurez vous que le robinet est bien ferm puis replacez lampoule sur son anneau. Laisser les deux phases se sparer. Enlever le bouchon de lampoule, placer une fiole ou un erlenmeyer sous le robinet puis ouvrir le robinet pour sparer la phase organique en vitant de faire passer la phase aqueuse. Transvaser dans un ballon Ajouter 3g de desschant chimique et agiter. Laisser reposer quelques minutes. Filtrer et concentrer le filtrat lvaporateur rotatif.

Matriel ncessaire Potence (noix + pince + anneau) Ampoule dcanter (au moins de 250mL) Evaporateur rotatif avec ballons, Bain-marie Eau distille Solvant organique dthyle,) Extrait de plante Desschant chimique Entonnoir conique et Bchner, papier filtre, fiole vide, trompe eau, tuyau en caoutchouc Becher, spatule, bagette de verre (dichloromthane : au moins 100mL, actate