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Universidad de Sucre. Facultad de Ingeniera. Programa de Ingeniera Agroindustrial. Biotecnologa. Miguel Arroyo Beltrn, Jess Eduardo Salgado, Fabin Alvares Rodrguez, Jess Reales De la Ossa, Alexander Ortega Villadiego. RESUMEN En el momento que nos referimos a bebidas alcohlicas fermentadas, debemos tener en cuenta que stas son bebidas con probabilidad alta, de verse contaminadas con productos congenericos del etanol, as como metanol. Esto ocurre porque no son sometidos a procesos de destilacin y por ende no estn purificadas y aun poseen la contaminacin de este tipo, sabiendo que la probabilidad de contaminacin de estos, puede aumentar dependiendo del manejo y realizacin de las buenas prcticas de manufacturas y de la comercializacin sin antes haber sido sometidos a un riguroso control de calidad, donde se analice el grado de contaminacin que estas puedan tener y su grado de adulteracin, como es el caso de las bebidas alcohlicas tradicionales o populares por lo que es necesario realizar controles y pruebas de estos productos, ya que se han estado infiltrando en la poblacin y que estn causando dao en la salud. En el presente trabajo se llev a cabo, con el fin de establecer la calidad de estas bebidas, al determinarse y cuantificarse la presencia de etanol. Para llevar a cabo dicha investigacin, utilizamos el mtodo tradicional de gran aplicabilidad en el campo de la agroindustria el cual es la determinacin de alcohol por el mtodo de winnick, donde no necesitamos grandes cantidades de muestra y obtuvimos ms exactitud. Luego de llevar a cabo el trabajo analtico, as como el anlisis de resultados, se demostr la presencia de etanol, en diferente proporcin, en las muestras analizadas. Palabras Claves: Etanol, Alcohol, Fermentacin ABSTRACT At the time we refer to fermented alcoholic beverages, keep in mind that these are drinks with high probability of being contaminated with ethanol congeneric products and methanol. This happens because they are not subjected to distillation processes and therefore are not purified and still have this type of pollution, knowing that the likelihood of contamination of these may increase depending on the management and implementation of
good manufacturing practices and marketing without having been subjected to rigorous quality control, which analyze the degree of contamination that they can have and the degree of adulteration, as in the case of traditional alcoholic beverages or popular so it is necessary checks and tests of these products, as they have been infiltrating the population and are causing health damage. The present work was carried out in order to establish the quality of these drinks, to be identified and quantified the presence of ethanol. To carry out this investigation, we use the traditional method of wide applicability in the field of the agricultural industry which is the determination of alcohol by the method of Winnick, where not need large amounts of sample and obtained more accurately. After carrying out analytical work and the analysis of results showed the presence of ethanol in different proportions, in the analyzed samples. Keywords: Ethanol, Alcohol, Fermentation. etlico y otros componentes voltiles (metanol, alcohol isoproplico, aldehdos, teres). Se pueden distinguir entre bebidas producidas por fermentacin alcohlica (vino, cerveza, sidra, etc.) en las que el contenido en alcohol no supera el 15%, y las producidas por destilacin, generalmente a partir de un producto de fermentacin (licores, aguardientes, etc.) entre ellas se encuentran bebidas de muy variadas caractersticas, y que van desde los diferentes tipos de brandy y licor, hasta los de whisky, ans, tequila, ron, vodka, vermouth y ginebra entre otras.
INTRODUCION
Cuando hablamos de determinacin de alcohol, hacemos nfasis en las bebidas fermentadas que es de donde se obtienen gran mayora de las bebidas alcohlicas. De ellas se ha estudiado diversos mtodos, con el fin de encontrar el ms exacto y preciso para la determinacin de alcohol en las bebidas alcohlicas ya sean de carcter fermentado o destilado. Para llevar a cabo estos procesos, se requieres de los procedimientos y equipos necesarios. El grado alcohlico de una bebida es el contenido de alcohol etlico expresado en volumen de alcohol por 100 ml de bebida, o en gramos de alcohol por 100 ml de bebida si se expresa como grado alcohlico en peso. Los mtodos de determinacin se basan en la destilacin del alcohol
MATERIALES Y REACTIVOS * Soporte universal * Erlenmeyers de 50 ml * Pipetas * Balanza * Beakers * Acido sulfrico * Dicromato de potasio 0.4N en H2SO4 10N * Yoduro de potasio 3N * Almidn soluble * Tiosulfato de sodio 0.1N METODOOGIA Parte a: Pesamos 1 g de almidn soluble, lo adicionamos con agitacin constante en 200ml de agua destilada Parte b: Realizamos una curva patrn en tubos de ensayo con tapa que contenan 5ml de las
3N y mezclamos. Adicionamos 2 gotas de solucin del reactivo de almidn soluble. Titulamos con solucin volumtrica de tiosulfato de sodio 0.1N agitamos cuidadosamente hasta que obtuvimos un cambio ntido un color azul marino. Restamos el volumen de tiosulfato gastado por el blanco al momento que construimos la curva de calibracin.
RESULTADOS Y ANALISIS
Determinacin
por
winnick:
Concentracin | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 | 14 | Tiosulfato gastado | 10 | 9.5 | 10.1 | 4.7 | 9.6 | 14.8 | 3.9 | 4.5 | Etanol | 0 | 0.5 | 0.1 | -5.3 | -0.4 | 4.8 | -6.1 |-5.5| De acuerdo a los resultados, estos no fueron los esperados debido a que el experimento no fue satisfactorio. Este mtodo se basa en la reaccin de oxido-reduccin del etanol con el dicromato de potasio en medio cido, el producto final de la reaccin es un compuesto coloreado el cual puede ser determinado por titulacin con tiosulfato de sodio y almidn como indicador. La liberacin del etanol de la muestra biolgica se basa en la volatilidad del etanol a la temperatura del ensayo y la reaccin con el dicromato de potasio
siguientes concentraciones: 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12 y 14 de etanol. A estas diluciones y a la muestra le hicimos el siguiente proceso: Realizamos una dilucin 1:9 (muestra: agua) para cada tubo. Adicionamos exactamente 1 ml de solucin de Dicromato de potasio 0.4 N en H2SO4 10N en un Erlenmeyer pequeo (20-50ml). Adicionamos 2ml de la solucin a estudiar Dejamos en reposo durante 5 minutos Transcurrido el tiempo, adicionamos 1 ml de solucin de yoduro de potasio
CONCLUSIONES En el desarrollo de esta prctica, se pudo destacar la importancia que tiene la determinacin del contenido de alcohol en una bebida durante su proceso de fabricacin. Y es debido bsicamente a que con el anlisis de alcohol podemos normalizar sus caractersticas y sus componentes. Por otra parte el contenido de alcohol presente en una bebida debe estar acorde a lo estipulado por la norma de cada pas, o de lo contrario una empresa productora de este tipo de productos puede arriesgarse a penalizaciones y multas.
CUESTIONARIO Grafique la curva de calibracin para las diluciones de alcohol realizadas. Calcule el valor R2 y muestre la ecuacin que explique la curva.
Consulte otros mtodos para determinar alcohol etlico. Explique las ventajas y desventajas para su uso. Determinacin de etanol mediante densimetra
% Etanol 0 2 4 6 8 10 12 14
Hidrometra El contenido de etanol se puede medir en el destilado a partir de un volumen de la muestra exactamente medido. Los azucares reductores no son destilables.
los
y = -0.7292x + 4.8667 R = 0.4087
niveles
que
se
sealan
continuacin: Niveles de SO2 superiores a 200 mg/1 Acidez voltil que exceda 0,10% Por esta razn las muestras deben neutralizarse antes de la destilacin. La determinacin se efecta por medio de un hidrmetro calibrado y
se
registra
la temperatura.
El hidrmetro es un instrumento que basa su accin en la variacin de flotabilidad que sufre un cuerpo
solubles pero
que, al llenarlo con la muestra y pesarlo, permite obtener la masa o peso por unidad de volumen de la solucin hidroalcohlica. Requiere el empleo de tablas de equivalencia densidad-alcohol. Requiere el uso de una balanza de precisin.
expresa la masa o peso de la solucin por unidad de volumen, lo que se conoce como densidad o peso especfico. Mediante tablas esta
densidad puede ser relacionada con el contenido de alcohol y expresarse entonces como porcentaje o grado Gay-Lussac (G.L.). Este instrumento y los otros empleados para medir densidad deben ser manejados bajo ciertos parmetros de temperatura para poder obtener de ellos una lectura adecuada
Ebullmetro. Permite medir el descenso que sufre el punto de ebullicin de la solucin hidroalcohlica en proporcin con la cantidad de alcohol que contiene.
Un
hidrmetro
clsico
Alcoholmetro
alcohmetro.
3C2H5OH
contenido de alcohol por lo que no es necesario el uso de tablas. Su fundamento es exactamente el mismo del hidrmetro.
3CH3COOH + 4Cr++++ + 11H2O El exceso de K2Cr207 se determina con solucin de sulfato ferroso y amonio estandarizado. Los tiempos y temperatura de incubacin para
Picnmetro
crticos.
Debe
tenerse
especial
precaucin de que la concentracin de etanol sea de 0,01 a 0,12g/l (365 nm) o de 0,005 a
0,06g/l(340o334nm). 5. Determinacin del etanol en peso Se utiliza el mtodo del picnmetro. Se debe tener la precaucin de un buen control de peso del picnmetro y bien calibrado, y un muy buen control de temperatura
Determinacin
etanol
cromatografa
gas-lquido
(GLC)
El etanol presente en vinos, cervezas, jugos se puede separar de otros componentes por GLC. Se pueden emplear columnas empacadas de acero inoxidable o vidrio de 2 m rellenas con Porapack QS, Carbowax 0,2 % 1500 sobre Carbopack C 80 100 mesh, Chromosorb 103.
BIBLIOGRAFIA CARPENTER. Microbiologa. Editorial Interamericana. 1969. FRAZIER. Microbiologa de alimentos. Editorial Acribia. 1981 los
SCAGG. Biotecnologa para Ingenieros. Editorial Limusa. 1997 AURELIO HERNNDEZ "Microbiologa", Editorial Madrid, 1997. MUOZ, paraninfo,
acetaldehdo por el NAD en presencia de la enzima alcohol deshidrogenasa (ADH) para producir NADH. El NADH producido se determina
STAINER, R. Microbiologa. Barcelona: S.A. Ed revert http://www.geocities.com http://www.uamenlinea.uam.mx/materiale s/licenciatura/diversos/AQUIAHUATL_ RAMOS_MARIA_DE_LOS_ANGELES _Manual_de_practicas_de.pdf