Mtodos de estudio de la biologa celular El mtodo cientfico La Ciencia es la construccin de conocimientos por parte del hombre para dar

respuesta a sus curiosidades e interrogantes. En el campo de la Biologa Celular, al igual que en otros campos de la Ciencia, los investigadores acceden al conocimiento siguiendo una metodologa sistemtica, una forma de trabajo conocida como mtodo cientfico, a fin de construir conocimientos que tengan validez universal. El conocimiento cientfico se caracteriza por ser: - Explicativo: su propsito es descubrir verdades cientficas que permiten la interpretacin y la comprensin de los fenmenos que son objeto de estudio. - Predictivo: la Ciencia no se contenta slo con proporcionar una explicacin adecuada del comportamiento de algunos aspectos del mundo, sino que da un paso ms adelante: busca predecir. Es sta pues una caracterstica importantsima de la Ciencia, que pone al cientfico en condiciones de anticipar el comportamiento de los fenmenos o hechos de la realidad que ha tomado como objeto de estudio. - Objetivo: en el sentido de que el cientfico en el curso de su trabajo de investigacin no es libre para tomar las decisiones pertinentes en funcin de sus puntos de vista personales, de sus inclinaciones o intuiciones, es decir arbitrariamente, sino que debe proceder con rigor de juicio, control permanente y responsabilidad (1). - Sistemtico y metdico: para poder dar explicaciones pertinentes de las realidades que estudia procede de una manera ordenada y organizada, aplicando un mtodo. Esto permite afirmar que existe una secuencia sistemtica de trabajo en la investigacin cientfica. - Verificable: debe aprobar el examen de la experiencia, lo que significa que todas sus suposiciones y conjeturas deben ser puestas a prueba por diferentes tcnicas de comprobacin. - General: es decir, al abordar el estudio de un determinado fenmeno o hecho de la realidad, sus conclusiones hacen referencia a todos los fenmenos o hechos de este tipo en todos los lugares y en todos los tiempos. - Comunicable: el saber cientfico es un saber trasmisible por toda persona que lo posea a otra que no lo posea pero que sea capaz de comprenderlo, tanto dentro del ambiente cientfico como entre el pblico en general. - Autocorrectivo: el cuerpo de la Ciencia es algo vivo y cambiante y es por ello que se la puede caracterizar como 1m sistema inestable. Sus verdades no son absolutas sino que pueden ser modificadas a medida que aparecen nuevos conocimientos. Cuando se producen cambios relevantes, todo el sistema cientfico se conmueve, originando las llamadas revoluciones cientficas" (2). Caractersticas del mtodo cientfico La metodologa utilizada por los cientficos implica procesos complejos y planificados que permiten comprender al menos parcialmente la realidad y construir conocimientos considerados con validez cientfica. Para ejemplificar las caractersticas del mtodo cientfico, analizaremos un caso histrico:

A comienzos del siglo XX, numerosas observaciones microscpicas acerca del comportamiento de los componentes celulares, especialmente durante la divisin y la produccin de nuevas clulas, sugeran que el ncleo de las clulas era el portador de la informacin hereditaria. En los primeros aos de la dcada de 1930, un investigador llamado J. Hammerling, preocupado por determinar la responsabilidad del ncleo celular en relacin a las caractersticas y las funciones de la clula, estudi comparativamente el ncleo y el citoplasma en el alga marina Acetabularia. Este es un organismo unicelular que presenta caractersticas particulares. Su cuerpo est formado por una nica clula gigante, de 2 a 5 cm de altura., la cual presenta porciones diferenciadas: un sombrero, un pedicelo y un pie, en el cual se encuentra el ncleo. Existe una especie de Acetabularia que tiene un sombrero en forma de sombrilla compacta, mientras que otra especie tiene un sombrero rasgado, en forma de ptalos. Si se corta el sombrero, en cualquiera de las dos especies, el alga regenera uno nuevo, semejante en apariencia al que le ha sido quitado.

Hammerling cort el pie y el sombrero de una Acetabularia de sombrero compacto, dejando slo el pedicelo, al cual le implant el pie, con el respectivo ncleo, tomado de una Acetabularia de sombrero en forma de ptalos. Esta alga trasplantada regener, al poco tiempo, un sombrero que tena una forma intermedia entre ambas especies.Hammerling elimin entonces ese sombrero, y observ que el alga formaba un nuevo sombrero, que esta vez era idntico al correspondiente a la Acetabularia que haba donado el ncleo y no a la que don el citoplasma.

De acuerdo a estos resultados, Hammerling dedujo que el ncleo diriga la produccin de ciertas sustancias citoplasmticas que determinaban la forma del sombrero. La razn de que el primer sombrero formado luego del trasplante fuera de una forma intermedia, se debera a que la Acetabularia trasplantada tendra un acmulo propio de esas sustancias en el citoplasma. Ms tarde, cuando se form el segundo sombrero, dichas sustancias ya se habran agotado, y por eso la produccin de ese nuevo sombrero estuvo totalmente bajo el control del nuevo ncleo. A partir de ste y de otros experimentos relacionados, se ha podido generalizar que el ncleo desempea dos funciones fundamentales para las clulas: Lleva la informacin hereditaria responsable de que cada clula sea semejante a la clula que le dio origen, y regula las funciones celulares, controlando la formacin de todas las complejas molculas que la clula necesita. Analizando el ejemplo vemos que el investigador parte de un problema o interrogante, es decir, una dificultad que no puede resolverse automticamente, sino que requiere de una investigacin. Es de fundamental importancia que el problema a investigar est formulado con claridad, evitando ambigedades, y que sea resuelto con el mximo de rigor posible. En nuestro ejemplo, el problema o interrogante podra expresarse as: Es el ncleo el portador de la informacin hereditaria?, o sea: Es el ncleo el responsable de que las clulas hijas sean semejante a las clulas madre? O, ms particularmente: Es el ncleo el responsable de que las Acetabularias de determinada especie tengan siempre el mismo tipo de sombrero?

Antes de que el cientfico pueda comenzar una investigacin con el objeto de solucionar dicho problema o interrogante, debe revisar ampliamente los antecedentes sobre el tema, es decir, debe familiarizarse con los estudios previos sobre el tema. De esta forma puede evitar una duplicacin innecesaria de esfuerzos y puede aprovechar los datos tiles de otros estudios, para su propio trabajo. Una comprensin adecuada de los trabajos ya realizados se obtiene revisando la literatura cientfica apropiada, en especial las revistas que publican los trabajos cientficos que se realizan en el campo considerado. En nuestro ejemplo, Hammerling sin duda cont con la informacin acerca de observaciones microscpicas realizadas en diversas clulas; tuvo en cuenta la opinin de otros cientficos acerca del posible papel del ncleo celular, y se interioriz sobre las caractersticas del alga Acetabularia. Despus de haber realizado una prolija revisin de la informacin previa, el investigador est preparado para realizar su propio trabajo. Desde ese momento el desarrollo de los pasos siguientes vara considerablemente dependiendo del investigador y de la naturaleza del material con el cual trabaja. En general, una vez que el investigador ha asimilado todo lo ya conocido sobre el tema, puede formular una hiptesis tentativa, o sea una posible explicacin, a manera de conjetura, para el problema del que se trata. La hiptesis que probablemente se plante Hammerling sera ms o menos como sigue: "El ncleo lleva la informacin hereditaria y por lo tanto dirige las funciones del citoplasma, por ejemplo controla el tamao y la forma de la clula" (En este caso, eso se evidencia por la forma del sombrero). La hiptesis o proposicin provisional necesita ser verificada para poder llegar a su aprobacin o rechazo. Esto se lleva a cabo confrontando la hiptesis con datos y hechos que pueden ser observados. Para ello el cientfico elabora un diseo experimental que le permitir trabajar en condiciones controladas, con la finalidad de obtener datos confiables. El diseo puede abarcar una diversidad de metodologas de trabajo, de acuerdo al problema a investigar; por ejemplo experimentos, observaciones, cuestionarios, entrevistas. Los datos pueden obtenerse en la naturaleza o en el laboratorio. Estas observaciones por lo general son apoyadas por equipos o instrumentos cientficos, como cmaras fotogrficas, microscopios, aparatos de medicin qumica, etc. En el ejemplo analizado se trat de un experimento de laboratorio. Hammerling tom el pedicelo de una especie de Acetabularia y le implant el pie con el ncleo, de una especie distinta. Registr cuidadosamente los resultados obtenidos tanto en primer trmino como despus de haber cortado el sombrero regenerado por la Acetabularia trasplantada. Con seguridad emple varios ejemplares para esta experimentacin y la repiti cierto nmero de veces a fin de confirmar sus hallazgos. En una investigacin cientfica la experimentacin permite determinar la relacin ms probable entre causa y efecto. Al disear los experimentos cientficos se deben tener en cuenta dos condiciones: 1) Los experimentos deben efectuarse de manera tal que cada conjunto de experiencias difiera de otro en un solo factor. Por ejemplo, no sera correcto que Hammerling hubiera cambiado al mismo tiempo el ncleo de la Acetabularia y los nutrientes que le provea, porque entonces no hubiera podido establecer cul de dichos factores era responsable del tipo de sombrero formado. 2) Los experimentos deben poder ser repetidos por otras personas. Larepetibilidad es uno de los aspectos cruciales del mtodo cientfico.

De las observaciones o experimentaciones surgen una serie de resultados o datos que deben ser analizados e interpretados por el investigador. Esta etapa del trabajo suele denominarse anlisis de datos y con frecuencia requiere del tratamiento estadstico de los datos obtenidos, los que finalmente quedarn registrados en tablas, cuadros, grficos u otros tipos de imgenes y descripciones. La evaluacin e interpretacin de los resultados permite establecer conclusiones que se desprenden de la investigacin realizada. A partir de las conclusiones se podr decidir el rechazo (refutacin) o la aceptacin (validacin) de la hiptesis. Si la hiptesis es sostenida (verificada) por cualquier tipo de experiencia que se realice, entonces alcanza un nivel de mayor certeza. En nuestro ejemplo, Hammerling encontr suficientes evidencias para aceptar su hiptesis. De todas maneras, la hiptesis an conservar el carcter de "explicacin probable", ya que otras observaciones o experiencias podran refutarla. En ciertos casos, las hiptesis suficientemente corroboradas que explican de manera satisfactoria un determinado fenmeno, se pueden generalizar y adquieren validez universal, por lo que pasan a ser consideradas leyes cientficas. As por ejemplo, la ley fsica de Boyle-Mariotte enuncia que el volumen de un gas vara de manera inversamente proporcional a las presiones que soporta, y la ley biolgica de la segregacin, de Mendel, afirma que cada caracterstica hereditaria depende de un par de genes, recibiendo cada descendiente al azar un gen de cada uno de sus progenitores. A su vez, las leyes y/o hiptesis o enunciados se ordenan y vinculan entre s, dando origen a las teoras, que corresponden a un nivel de generalizacin an mayor y que permiten explicar y an predecir toda una serie de fenmenos relacionados. En el prrafo final del comentario sobre el experimento de Hammerling se enuncia en cierta manera una teora explicativa sobre el papel del ncleo celular, ya que a partir de los resultados de los experimentos con Acetabularia y otros experimentos comparables, pudo generalizarse que: En todas las clulas es el ncleo el que lleva la informacin gentica y a la vez ejerce una influencia continua sobre las actividades de la clula. Una teora que ha sido repetidamente verificada y parece tener amplia aplicacin, como en el caso que hemos comentado, puede convertirse en un principio, o sea, tiene an mayor grado de generalizacin y de aceptacin. Sin embargo, eso no cambia su condicin de ser una proposicin que se confirma con un alto grado de probabilidad en un amplio rango de eventos. Por ser el resultado del razonamiento humano, las teoras y los principios tienen sus limitaciones y estn sujetos a cambio si se agregan conocimientos adicionales en el futuro. Por otra parte, las teoras cientficas y las visiones del mundo nacen y crecen en un entorno cultural, social, econmico y poltico, y por lo tanto estn fuertemente determinadas por esos factores. La Teora Celular, (que expresa que todos los seres vivos estn compuestos por clulas; que las clulas son asiento de la informacin gentica y de las actividades bioqumicas de los seres vivos, y que toda clula proviene de otra clula) y la Teora de la Evolucin, (que afirma que los seres vivos derivan unos de otros, proveniendo de antecesores comunes y, en ltima instancia, de una nica forma original de vida), son en realidadgrandes principios biolgicos aceptados ampliamente por los cientficos, y conservan el nombre de "Teoras" slo por una razn histrica. Son ejemplos de principios de aceptacin general; stos constituyen paradigmas, es decir marcos de referencia para el pensamiento cientfico

propio de una poca, y sin embargo pueden llegar a ser sustituidos por nuevos paradigmas en una etapa posterior de la historia de la humanidad. Los resultados de las investigaciones cientficas se publican en revistas especializadas, de difusin regional, nacional o internacional, ya que es importante que la comunidad cientfica conozca los nuevos aportes. Es fundamental que los materiales y la metodologa empleados por el investigador se presenten con claridad y detalle, porque eso permite juzgar acerca del rigor cientfico con que se llev a cabo la experimentacin u observacin, y tambin, eventualmente, permite repetir el procedimiento y verificar los resultados. Adems de los trabajos de investigacin originales, las revistas cientficas publican con cierta frecuencia monografas o artculos de revisin elaborados por algn investigador que se encarga de resumir los esfuerzos cientficos propios y ajenos acerca de determinado tema, para presentar el estado actual o el progreso que se realiza en un campo dado de la Ciencia. En los libros de texto tambin se procura presentar los principios generales y las informaciones bsicas de los diferentes campos de estudio. Resumiendo, los pasos ms relevantes del mtodo cientfico son: Identificacin de un problema o interrogante Bsqueda de informacin preexistente Formulacin de una hiptesis Experimentacin y observacin Evaluacin de los datos Aceptacin o rechazo de la hiptesis Y en cuanto al nivel de validacin y generalizacin, consideramos: Hiptesis -----> Leyes -----> Teoras -----> Principios El mtodo cientfico comentado es conocido tambin como "mtodo hipottico- deductivo" y es de tipo cuantitativo, ya que se registran datos cuantificables y con frecuencia se usan tcnicas estadsticas. El control y el rigor de las observaciones y experimentaciones resultan de fundamental importancia. Es la metodologa utilizada predominantemente en las Ciencias Naturales. Por su parte, las Ciencias Sociales con frecuencia necesitan utilizar una metodologa de investigacin de tipo cualitativa, inductiva, por medio de la cual el investigador se adentra en un grupo humano poniendo en juego tcnicas como la "observacin participante" o las entrevistas. En el campo de las Ciencias de la Salud, la investigacin bsica o la aplicada est destinada a conocer aspectos normales o patolgicos del organismo humano y reacciones frente a tratamientos, o bien a lograr el desarrollo de nuevos medicamentos o tcnicas teraputicas. Se utiliza fundamentalmente el mtodo cuantitativo. Sin embargo, cuando se encaran trabajos de tipo epidemiolgicos en los que se consideran sectores amplios de la poblacin, suele necesitarse tambin de ciertas tcnicas propias de los mtodos cualitativos. "Siempre que se trabaje en relacin a pacientes, adems del necesario rigor cientfico en la planificacin y en el desarrollo de la investigacin, se debe velar por la integridad fisica-psquica-moral de los sujetos

de la investigacin, protegiendo sus derechos y poniendo sus intereses por sobre los intereses de la Ciencia o de la comunidad. Los individuos deben dar su consentimiento libremente y deben contar con el derecho de retirarse cuando lo deseen. El investigador, a su vez, no puede tomar ninguna medida sin el consentimiento de los pacientes, ya que slo dispone de los derechos que stos le han concedido y tiene la obligacin de interrumpir la investigacin cuando los riesgos son mayores de lo previsto. Toda experimentacin cientfica que signifique un aporte beneficioso para la comunidad podr llevarse a cabo siempre que se respeten stos y otros principios morales y cientficos, que estn expresados a nivel internacional en diferentes documentos: - Cdigo de Nrenberg, 1947. - Declaracin de Helsinski de la Asociacin Mdica Mundial, 1964. - Declaracin de Tokio en la 29 Asamblea de la Asociacin Mdica Mundial, 1975".(*) (* Prrafos tomados del texto: "Metodologa del Aprendizaje", H. Hilas y A. Andrawos, Fac. Odontologa, U.N.C., 1995)