MICROBIOLOGA Ciencia que estudia los microorganismos Primera observacin Leeuwenhoek 1674 Necesita de la microscopa y de las tcnicas de anlisis

y manipulacin de microorganismos Se consideran microorganismos a aquellos seres vivos con un tamao inferior a 1mm. Agrupa a un conjunto muy diverso: Procariontes y eucariontes, Unicelulares y sencillas agrupaciones multicelulares (no pluricelular), Diversidad de metabolismos y de hbitats. Importancia de la Microbiologa en las reas industriales, medioambiental, agroalimentaria y farmacutica Primeras investigaciones: Generacin espontnea Redi 1668 Los gusanos proceden de los huevos de las moscas Spallanzani Cerro un matraz con caldo y lo hirvi. El caldo permaneci sin microorganismos. Los agentes descomponedores no aparecen espontneamente Louis Pasteur 1859: En el aire estan los microorganismos responsables de la putrefaccin Robert Koch: teora microbiana de la enfermedad: 1. El microorganismo causal debe aparecer en todos los individuos que sufren la misma enfermedad 2. Se deben obtener cultivos puros del agente microbiano 3. La inoculacin de cultivos puros en animales de experimentacin debe producir en ellos la enfermedad

4. El patgeno debe ser aislado de nuevo e identificado en cultivo puro (cultivo axnico)

DIVERSIDAD MICROBIANA: ORGANISMOS ACELULARES: VIRUS TRES REINOS: MONERA, PROTOCTISTA, FUNGI Los datos evolutivos ms fiables se han obtenido por secuenciacin del ARNr La vida tiene un origen comn que dio lugar a tres linajes, dos procariotas (dominio Bacteria, dominio Archaea) y uno eucariota (dominio Eucarya) REINO MONERA Eubacterias, Arqueobacterias y Micoplasmas EUBACTERIAS Microorganismos procariontes Fisiologa y metabolismo con mucha variedad: Fottrofos, quimitrofos, auttrofos hetertrofos, Pequeo tamao y rpido crecimiento Reproduccin asexual por biparticin y Procesos de sexualidad: Transformacin, transduccin y conjugacin Bacterias gram negativas: Mviles, fijas, formas resistentes Cianobacterias con fotosntesis oxignica, utilizan el agua Bacterias rojas (o prpuras) y verdes con bacterioclorofila realizan fotosntesis anoxignica Algunas son quimiolitotrficas y otras quimioorgantrofas como por ejemplo las que metabolizan residuos difciles, y las simbiticas intestinales Bacterias gram positivas Todas quimioorgantrofas. Realizan fermetacion / Respiracin

Algunas presentan endosporas resistentes en el interior de las clulas vegetativas: Clostridium botulinun Actinomicetos, similares al micelio de hongos Streptomyces MICOPLASMAS Sin pared. Membrana muy resistente. Parsitos ARQUEOBACTERIAS Vinculadas filogenticamente con Eucariontes Procariontes, Pared sin peptidoglicanos, enlace eter en lpidos de membrana, metabolismo respiratorio, ambientes extremos (halofilas, termoacidfilas, metangenas)

PROTOCTISTAS MICROSCPICOS

Eucariontes unicelulares o coloniales sin diferenciacin en tejidos Protozoos Algas microscpicas Hongos mucosos PROTOZOOS Organismos mviles hetertrofos (amebas, paramecios), aunque los fitoflagelados son fotosintticos (Euglena) La locomocin por cilios, flagelos, pseudpodos y deslizamiento. En base a su movilidad se establece su clasificacin Normalmente reproduccin asexual aunque pueden presentar procesos de sexualidad: conjugacin, sobre todo en pocas adversas donde es beneficioso un aumento de variabilidad. ALGAS MICROSCPICAS Tienen cloroplastos con clorofila, por tanto presentan metabolismo fotosinttico y auttrofo. Componentes del fitoplancton Pared celular de celulosa, algunas sin pared y otras de quitina y slice (diatomeas) Los dinoflagelados son los responsables de las mareas rojas. Producen toxinas que son retenidas por moluscos

HONGOS MUCOSOS

Eucariotas hetertrofos. Ciclos de vida complejos. Formas Ameboides, plasmodiales, esporulacin a partir de cuerpos fructferos REINO HONGOS Viven en el suelo sobre materia en descomposicin. Saprfitos Soportan medios extremos de acidez, salinidad y desecacin y temperatura Pueden ser parsitos Estructura Pared de quitina, glucgeno como reserva Unicelulares: levaduras (Sacharomyces) Micelio vegetativo con hifas(producen enzimas hidrolticos para la absorcin de nutrientes). Con tabiques o cenocticas Micelio reproductor areo: talo fngico(seta) Reproduccin asexual y sexual

METODOS DE ESTUDIO I. TECNICAS DE ESTERILIZACION Desinfectante: eliminacin de microorganismos de objetos Antisptico: eliminacin de microorganismos de tejidos Fsicos Por calor 1. Hmedo: autoclave. A 121 en una atmsfera de vapor de agua 20 2. Seco: Hornos a 170 durante 90 Por radiaciones con luz UV y las radiaciones ionizantes X y Gamma Por filtracin: Filtro de nitrocelulosa con un tamao de poro de 0,45m de dimetro Qumicos Leja, alcohol, yodo Esterilizacin en alimentos (mtodos fsicos) Pasteurizacin: Tratamiento por calor suave (inferior al punto de ebullicin), seguido de un enfriamiento rpido. Se realiza principalmente en bebidas. Cuanto mayor sea la temperatura utilizada menor es el tiempo de duracin del proceso. Uperizacin (UHT)es una ultra pasteurizacin. Se utiliza en esterilizacin de la leche. Se calienta en tres etapas, hasta los 150 Accin de vapor sobrecargado y purificado. Elimina adems de grmenes formas de resistencia como esporas

Eliminacin de microorganismos

Conserva por mayor tiempo sus caracteristicas y propiedades nutritivas II. CULTIVOS MICROBIANOS

Concepto: Mezcla de nutrientes que permite el desarrollo de un microorganismo Constitucin: Macronutrientes que aportan C, N, P S Micronutrientes aportan oligoelementos y productos esenciales Agua En una atmsfera de oxigeno o ausente de ella Tipos: Segn el estado fsico: Medios lquidos en matraces Medios slidos en placas de Petri, con agar Segn su composicin: Definidos y complejos Segn su funcin: Generales, selectivos, diferenciales, de enriquecimiento Segn la constancia de nutrientes: cultivos cerrados o continuos Para la siembra se utilizan campanas aspticas Para el crecimiento se utilizan estufas que proporciona la humedad, temperatura, ph adecuados

III.

CRECIMIENTO MICROBIANO: Proceso en un cultivo microbiano cerrado

Un cultivo microbiano cerrado o cultivo batch es aquel que no se renueva. No se aaden nuevos nutrientes, y no se retiran las sustancias de deshecho. En estos cultivos de describen 4 etapas: de latencia, exponencial, estacionaria y de muerte Proceso en un cultivo continuo El nmero de clulas se mantiene siempre constante al renovar los nutrientes (Quimiostato) y mantener la densidad celular (Turbidostato) IV. OBSERVACION DE MICROORGANISMOS En fresco Tincin Fijacin qumica o por calor previa a la aplicacin del colorante Tincin simple se utiliza un nico colorante: azul de metileno, violeta de genciana Tincin diferencial, utiliza al menos dos colorantes y permite la diferenciacin de dos grupos de bacterias las positivas que se tien con el colorante fundamental (cristal violeta) y las gram negativas que se tien con el colorante de contraste,(safranina)