SEGUNDA UNIDAD: INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA

AGENTES INFECCIOSOS ACELULARES.

VIRUS, UN CASO ESPECIAL

Biol. Rosalba Amaya Luna Noviembre 2010

QU ES UN VIRUS? Virus significa veneno.

Pasteur llamaba virus a las bacterias

Agente infeccioso intracelular Partcula parsita acelular estricta Patgeno acelular estricto Macromolculas parasitarias intracelulares

UN POCO DE HISTORIA
Fueron descubiertos en por Friedrich Loeffler y Frosch cuando estudiaban glosopeda, no puede ser toxina porque acta concentraciones muy bajas. 1889 Paul a la una a

En 1892 Dimitri Ivanovski buscando el agente causante de una enfermedad llamada mosaico del tabaco, concluyo que deba tratarse de una toxina o de un organismo ms pequeo que las bacterias, pues el agente atravesaba los filtros que retenan las bacterias.

En 1897 Martinus Beijerinck public su trabajo sobre la enfermedad del mosaico del tabaco. Llam al agente causal Contagium vivum fluidum (fluido vivo contagioso). El agente causal se incorpora al citoplasma de la clula para reproducirse, la reproduccin se realiza de forma paralela a la clula.

En 1915 se descubren los virus bacterianos o bacterifagos.

ESTRUCTURA QUMICA DE UN VIRUS

Material gentico: RNA (retrovirus o RNA virus) o DNA (lineal o circular) Capside: capa de protenas generalmente de forma geomtrica, si est formada por subunidades se llaman capsmeros (protenas globulares) Enzimas: 1 o 2 Envoltura externa: protena + lpido + carbohidratos + metales

Acido nuclico + cpside = nucleocpside

Nucleocpside + envoltura externa = virin (partcula vrica morfolgicamente completa e infecciosa que se encuentra en el exterior de la clula)

VIRUS DEL MOSAICO DEL TABACO

Espculas

RNA viral
Glucoprotenas Transcriptasa inversa

gp120 y gp41

Envoltura (bicapa lipdica)

Protenas internas

Cubierta protenica

VIRUS DE INMUNO DEFICIENCIA HUMANA

BACTERIOFAGO (FAGO)

sarampin

OTRAS CARACTERSTICAS: En fase extracelular son partculas inertes No tienen clulas ni metabolismo Miden de 20-300 nm

 Aprovechan mecanismos celulares para introducir el genoma en la clula Aprovechan mecanismos celulares para producir sus protenas y genoma Pueden salir de clula a infectar otras.

Algunos pueden permanecer indefinidamente en el interior celular en el cromosoma de la clula.

Slo tienen funcin de reproduccin.

 Los virus son cristalizables, es decir, pueden presentar formas geomtricas e idnticas entre s adems de una consistencia slida Son altamente especficos

Virus de la gripe
Virus de la rabia Virus de la viruela

tracto respiratorio
clulas nerviosas piel

Estn vinculados con ciertos tipos de cncer

CLASIFICACION DE LOS VIRUS

Por su material gentico:

Virus con DNA de doble cadena (bicatenario) lineal o circular

Herpesvirus
VPH

Viruela

Virus con DNA de cadena sencilla lineal o circular (DNA virus)

Parvovirus

Por su material gentico:

Virus con RNA de cadena doble (RNA virus)

Rotavirus

Virus con RNA de cadena sencilla (monocatenario)

Ebola Gripe Sarampin

Por la forma de la capside se dividen en Cilndricos o helicoidales: cpsides alargadas, donde los capsmeros se disponen de forma helicoidal en torno al cido nucleico. Estos virus infectan clulas vegetales. Icosadricos: cpsides redondeadas con capsmeros triangulares. Estos virus infectan clulas animales. (la mayora de los virus, hepatitis C y poliovirus) Complejos: cpsides con una zona icosadrica, seguida de otra zona helicoidal. Estos virus infectan bacterias. (bacterifagos)

Por el tipo de husped que parasitan en:

Virus bacterianos o bacterifagos

Virus vegetales Virus animales

Por la envoltura externa: Virus desnudos Virus con envoltura

REPLICACION VIRAL

1. Penetracin a. Inyeccin del material gentico b. Endocitosis c. Fusin con membrana celular 2. Duplicacin: el material gentico se copia varias veces 3. Transcripcin: se sintetiza el RNA m

4. Sntesis de protenas: el RNAm viral sintetiza protenas virales

REPLICACION VIRAL.

5. Ensamblado viral: material gentico, enzimas y la capside se renen 6. Liberacin: los virus emergen por gemacin o ruptura celular

Replicacin viral del herpesvirus en una clula cutnea

3. El DNA viral se transcribe a RNAm que sale al citoplasma
Envoltura Cubierta

6. Los virus salen de la clula por exocitosis

DNA NUCLEO

1. El virus entra en la clula por endocitosis

CITOPLASMA RNAm

2. La envoltura viral se fusiona con la membrana nuclear. La cubierta se desintegra y el DNA viral entra en el ncleo

5. Los virus se ensamblan en el ncleo. Salen de ste por gemacin y adquieren una envoltura de membrana nuclear 4. El RNAm sintetiza las protenas de la cubierta y la envoltura que entran en el ncleo

Replicacin viral del VIH en un leucocito

1. El VIH se fija al receptor de membrana del leucocito. Se desintegra su envoltura y su cubierta.

6. Los virus brotan por gemacin de la membrana plasmtica

CITOPLASMA

DNA VIRAL

NUCLEO RNA VIRAL

5. Se ensamblan las protenas y el RNA virales

RNAm

2. El RNA viral entra en el citoplasma y la transcriptasa inversa produce el DNA viral.

4. Se sintetizan protenas virales usando el RNAm.

3. El DNA viral entra al ncleo y se incorpora al DNA del leucocito. Se transcribe RNAm y ms RNA viral que se dirigen al citoplasma.

TIPOS DE REPLICACION VIRAL.

1. Va ltica (lisis de la clula) 2. Va lisognica (el virus se convierte en un profago y la clula lisognica)

CUL ES EL ORIGEN DE LOS VIRUS?

Una bacteria parsita obligada degener perdiendo todos los componentes necesarios para desarrollar un ciclo de vida libre. Fragmentos de material gentico fueron transferidos por error o por azar a una clula de una especie diferente y dentro de sta se convirtieron en parsitos. Son fragmentos de material gentico que escaparon de organismos celulares. Su origen es posterior al origen de la vida.

SEGUNDA UNIDAD: INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA

AGENTES INFECCIOSOS ACELULARES.

PRIONES

Biol. Rosalba Amaya Luna Noviembre 2010

QU ES UN PRION?
Se define a los priones como partculas infecciosas que no poseen cido nucleico, este agente infeccioso consiste nicamente en una protena la cual se codifica normalmente por genes del husped

Estructura tridimensional de la protena prinica bovina

Propiedades fsico-qumicas: Filtrable con poros 25 nm o 100 nm. Es invisible al microscopio ptico y electrnico. Resistente a: Formaldehdo, EDTA, Proteasas ( Tripsina, pepsina ), aunque reducen la infectividad, Nucleasas ( ribonucleasas A y III, desoxiribonucleasa I ), Radiacin ultravioleta ( 2540 )

Propiedades biolgicas:

Largo periodo de incubacin (meses, aos, dcadas). No producen respuesta inflamatoria No antignicos. Patologa crnica progresiva. Fatal en todos los casos. Presencia de cido nucleico no demostrada. El nico componente conocido es la protena PrP. Pueden existir en mltiples formas moleculares Periodo de adaptacin a nuevos hospedadores. Existencia de distintas cepas.

Formas de eliminacin: Autoclave >134 C por 18 minutos Hipoclorito sdico (20C, 1hora) Hidrxido sdico 2N Fenol 90% ter Acetona Permanganato potsico 0.002 M Urea 6 M 2 Cloroetanol Cloroformo

CMO SE DESCUBRIERON?
1957 Carleton Gajdusek, comenz a estudiar una enfermedad llamada kuru (temblor), propuso que deba ser una encefalitis viral epidmica, o causada por una toxina en la dieta o de origen gentico.

 1959 William Hadlow estudiaba la Scrapie (encefalitis espongiforme) en borregos y cabras, observ que era similar al kuru y lleg a la conclusin de que se trataba de un virus lento pues la incubacin tardaba 2 aos. Igor Klatzo informa a Gajdusek de una enfermedad hereditaria llamada Creutzfeldt-Jakob (CJ, 1920-1921) que presenta caractersticas similares al kuru y puede transmitirse a animales.

 1982 Stanley B. Prusiner, trabajando con este tipo de enfermedades, encontr que el agente causal era ms pequeo que un virus y no tena material gentico, solo estaba formado por protena. Prusiner denomin al agente causal de la encefalitis espongiforme PRION. Recibi el premio nobel en 1997

COMO SE FORMA UN PRION?

Un prin se origina cuando una protena normal, formada por el husped, se pliega de manera diferente y se convierte en una protena infecciosa. La forma no patgena se llama PrPc (protena prin celular) y la patgena PrPSc (protena prin scrapie), sta posee la misma secuencia de aminocidos pero con una estructura tridimensional y funcin diferente. La diferencia entre las dos recae en las estructuras secundaria y terciaria.

En 1985 se demostr que la protena prin es codificada por un gen de la clula. El gen se expresa en el tejido cerebral normal y codifica una protena de 254 aminocidos designada PrPc cuya funcin an se desconoce. La PrPc es sintetizada y transportada a la superficie celular de neuronas y en menor medida a linfocitos y otras clulas, donde se une a un glicofosfatidil inositol (GPI). La no unin de GPI hace disminuir fuertemente la sntesis de PrPsc.

La versin modificada de la protena se acumula dentro de las clulas nerviosas formando agregados que, aparentemente, matan a las clulas.

La protena normal es muy rica en alfa-hlices, la protena patgena lo es en beta-plegada. Este cambio de configuracin es crucial, ya que las protenas con lminas beta son muy resistentes a las enzimas proteolticas, al calor y no se disuelven en agua. Pero sobre todo, la protena alterada tiene una caracterstica nica: interacciona con una molcula de protena normal, le cambia la conformacin y la hace capaz de convertir las estructuras de ms protenas normales en patgenas. Ah radica al parecer el poder infectivo de los priones.

QU ENFERMEDADES CAUSA UN PRIN?

Las enfermedades por priones, tambin denominadas Encefalopatas Espongiformes Transmisibles (EET), son una familia de enfermedades neurodegenerativas raras, con periodos de incubacin largos, lentamente progresivas y fatales, que afectan a personas y animales. En animales, las enfermedades ms conocidas son: Encefalopata espongiforme bovina (BSE), ("Vacas locas") Scrapie (ovejas) Encefalopata transmisible (visones) Enfermedades crnicas de desgaste (mulas, ciervos, alces)

ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME TRANSMISIBLE

Los humanos son susceptibles a varias enfermedades vinculadas a priones: Enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (CJD) Sndrome de Gerstmann-Straussler-Scheiner (GSS) Kuru Insomnio fatal familiar (FFI) Sndrome de Alpers

CMO SE TRANSMITEN ESTAS ENFERMEDADES?

Los priones o las enfermedades producidas por ellos se transmiten verticalmente, como cualquier enfermedad hereditaria tpica, por otro lado se comportan de manera infectiva transmitindose horizontalmente, mediante contagios que pueden darse entre individuos de distintas especies.

Por factores mendelianos dominantes debidas a mutaciones en el gen PrP

Transmisin iatrognica: por medicamentos y tratamientos mdicos (uso de electrodos cerebrales, trasplantes de crneas, injertos de duramadre) La transmisin por transfusin sangunea no ha sido demostrada

 Kuru se ha demostrado la transmisin por va oral por prcticas de canibalismo

CMO SE DETECTAN ESTAS ENFERMEDADES?

Enzimoinmunoensayo: se extraen extractos de tejido nervioso, son tratados con proteinasa y al resultado se le realiza una electroforesis en gel.

Inmunohistoqumica: el tejido nervioso se tie con un colorante especial para detectar la presencia de la protena en el.

QU TRATAMIENTOS SE EMPLEAN?
Actualmente no hay ningn tratamiento farmacolgico disponible para las enfermedades por priones, por lo que slo pueden tomarse medidas sintomticas.

SEGUNDA UNIDAD: INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA

AGENTES INFECCIOSOS ACELULARES.

VIROIDES

Biol. Rosalba Amaya Luna Diciembre 2009

QU ES UN VIROIDE?
Son molculas de ARN circular (300-400 nucletidos) que carecen de cubierta viral o cpside, son de menor tamao que los virus. Se encuentran en clulas vegetales donde causan enfermedades.

Debido a que los viroides no codifican para ninguna protena deben necesariamente reclutar protenas y vas metablicas de la clula hospedera para completar su ciclo infeccioso. Se les considera como la etapa primitiva de los virus, pero tambin se cree que podran proceder evolutivamente de los intrones.

Caractersticas 1. Bajo peso molecular 2. No tienen cpsula proteica 3. Se multiplican en forma autnoma 4. Parsitos obligados 5. Infecciosos

CMO INFECTA UN VIROIDE?

Un viroide no se traduce, se replica en el ncleo de la clula vegetal infectada y afecta a genes que codifican hormonas. Causa enanismo y deformaciones del tallo, hojas y frutos. Se transmiten por insectos o material agrcola infectado.

QU ENFERMEDADES PROVOCAN LOS VIROIDES?

Pepino plido

Manchas del aguacate

Tubrculo ahusado de la papa PSTVd, tambin afecta a otras solanaceas como el jitomate, el tabaco o la berengena

CMO SE CONTROLAN ESTAS ENFERMEDADES?

El manejo de esta enfermedad es solo cultural, en donde principalmente se recomienda solo el uso de semilla certificada que se sabe con certeza que no se encuentra infectados de PSTVd; adems de sembrar solo en campos libres de tubrculos enfermos que pudieran haber sobrevivido de la cosecha anterior. Otros mtodos de prevencin son tambin evitar la transmisin mecnica plantando solo tubrculos enteros en lugar de utilizar semilla cortada y evitar el contacto del follaje por el equipo de labranza; desinfeccin de herramientas con desinfectantes como hipoclorito de sodio o compuestos de amonio cuaternario; remocin de plantas enfermas enteras (aunque esto no es muy efectivo por lo impreciso de los sntomas) y control de insectos