EFECTO PROTECTOR DEL EXTRACTO DE CALENDULA OFFICINALIS CONTRA LA INDUCCION DE STRESS OXIDATIVO EN LA PIEL POR UVB :

EVALUACION DE LOS NIVELES REDUCIDOS DE GLUTATION Y SECRECION DE METALOPROTEINASAS DE MATRIZ

Presentado por Sandra Johanna Garzn P., O.D., Msc. Pharm. Candidata Ph.D Ciencias Farmacuticas Universidad Nacional de Colombia sjgarzonp@unal.edu.co

PROTECTIVE EFFECT OF CALENDULA OFFICINALIS EXTRACT AGAINST UVB-INDUCED OXIDATIVE STRESS IN SKIN: EVALUATION OF REDUCED GLUTATHIONE LEVELS AND MATRIX METALLOPROTEINASE SECRETION Fonseca , Y. et al (2009)

INTRODUCCIN
CALNDULA OFFICINALIS
BOTN DE ORO, MARAVILLA, MARIGOLD 35 propiedades (Brown, Dattnerr, 1998) Enfermedades Inflamatorias: Traumas, Quemaduras, Antitumorales (Jimenez, 2006), reparacin (Zitterl et al , 1997), antioxidantes ( Katlinic, 2006)

2-4 ml tintura diluida 250-500 ml con Agua 2-5 g de hierba en 100g ungento

Asteraceae

Constituyentes Qumicos
Aceite esencial 0,02% Calendulina Carotenoides Esteroides Sesquiterpenoides Triterpenoides Flavonoides y Polifenoles Esteres de cidos orgnico y otros

(Re et al, 2009)

(Re et al, 2009)

ESPECIES REACTIVAS DEL OXGENO (ROS)

Las radiaciones UV de tipo B se encuentran entre las longitudes de onda de 280 a 320 _m y las menos energticas son las de tipo A con longitudes de onda de 320 a 400 _m
(Afaq et al., 2002; Bernerd et al.,2003).

Uso potencial de administraciones orales de Marigold para prevenir el estrs oxidativo en la piel por radiacin UV

Deficiencia de glutation peroxidasa predispone a la formacin de carcinoma de clulas escamosas.

MATERIALES Y MTODOS
Partculas Calndula 0,3mm Maceradas 50% Etanol (25 C- 5 dias) Agitacin mecnica 870 rpm (1h) Filtracin y Secado 40 C Suspension 50% solucion hidroalcohica 200 ml (conservados 20 C) Concentra cion 15,7%

Solucion de extracto de Calendula fue preparada por dilucion de 100 microL de extracto concentrado en 10mL de solucin metanolica al 50%

Metodos Colorimtricos: Polifenol y contenido de Flavonoides Determinacin de la Actividad antioxidante por el mtodo DPPH (2,2difenil-1-picril hidrazilo)

Consiste en que este radical tiene un electrn desapareado y es de color azul-violeta, decolorndose hacia amarillo plido por reaccin con una sustancia antioxidante; la absorbancia es medida espectrofotomtricamente a 517 nm. La diferencia de absorbancias, permite obtener el porcentaje de captacin de radicales libres

MATERIALES Y MTODOS
Determinacin in protector contra producido por UVB vivo de efecto stress oxidativo
Los animales se dividieron en cinco grupos Grupo 1 = no irradiado control Grupo 2 = control irradiado Grupo 3 = irradi y se trat con una solucin que contiene 150 mg / kg de EM Grupo 4 = irradiado y tratado con una solucin que contiene 300 mg / kg ofME Grupo 5 = irradiado y se trat con una solucin que contiene 600 mg / kg de EM

Philips TL/12 RS 40W lamp

Esta fuente emite en el rango de 270-400nm con un pico de salida a 313 nm, dando lugar a una irradiacin de 0.27mW/cm2 a una distancia de 20 cm, medida por un radimetro 1700 IL Induccion actividad gelatinasa (2.46 J/cm2)

Glutation Los niveles de la piel de GSH spectrofotmetro de fluorescencia.

va oral 30 min y18 h antes de la irradiacin.

Actividad gelatinasa por UVB

Electroforesis: Cascada de enzimas (colagenasas, gelatinasas, elastasas, stromelysin-1), que degradan a las protenas de la matriz extracelular

RESULTADOS
Eficacia antioxidante mayor actividad sobre destruccin radicales superxido producidos en el sistema xantina / luminol / XOD Bajas concentraciones de extracto de calndula estimulan la proliferacin de fibroblastos 27% incremento (11,25-15 mg/mL) Hepatoproteccin (93%)

150 y 300 mg / kg de ME mantiene los niveles de GSH cercanos a los del control no irradiado, a la dosis ms alta administrada de ME (600 mg / kg), Disminuye 43% de los niveles de GSH

RESULTADOS
Aumento de la expresin / actividad de las gelatinasas en la piel de ratones sin pelo se observ despus de la irradiacin UVB en este estudio. El anlisis de las gelatinasas (MMP-2 y MMP-9) en la piel mostr que la MMP-9 slo apareci en la piel irradiada 150, 300 y 600 mg / kg de Extracto, mostraron reduccin MMP-9

CONCLUSIONES
ROS inducidas por UVB causa dao celular y alteraciones bioqumicas, tales como la oxidacin de protenas y lpidos, la inflamacin, el dao al ADN, y la activacin y la inactivacin de enzimas (Shindo et al., 1993). Prevencin reduccin de GSH inducida por irradiacin UVB: tratamiento con EM estrategia proteccin contra daos en la piel inducido por UVB

CONCLUSIONES
MMPs tienen dos actividades: pro-inflamatoria y antiinflamatoria El dao en la piel generado por UVB se produce por degradacin del procolgeno tipo I MMP-1 Aumento gelatinasas: MMP-9 MMP-2: Benefician procolgeno tipo 1

FIN