ELEMENTOS DE ESPECTROSCOPIA: LEYES DE LOS PROCESOS DE ABSORCIN DE RADIACIN En estudios cuantitativos involucrando absorcin de radiacin, se necesita una medida

experimental que pueda caracterizar la cantidad de radiacin electromagntica absorbida por una muestra. Esta cantidad corresponde a lo que se llama potencia radiante, sea, la cantidad de energa caracterstica de la radiacin por unidad de tiempo. La unidad de potencia es el Watt, y su magnitud puede variar con la direccin. As, se hace conveniente definir la potencia radiante como funcin de un plano perpendicular a la direccin del flujo de la radiacin (Figura 1). Experimentalmente, la radiacin absorbida por una muestra es determinada comparndose la potencia radiante del haz transmitido en la ausencia de especies absorbentes, con la potencia radiante transmitida en la presencia de estas especies.
Figura 1 - Haz de radiacin con energa E, incidiendo perpendicularmente en una superficie.

Aunque las medidas experimentales sean realizadas en funcin de la potencia radiante, usualmente encontramos en la bibliografa informaciones sobre la intensidad de la radiacin. Estas dos cantidades no corresponden a la misma cosa, pero estn relacionadas entre s. La Intensidad de radiacin, I, es definida como la razn entre la potencia radiante y el ngulo slido de incidencia. Cuando el rea iluminada, el ngulo slido y el volumen de la especie absorbente son pequeos, tal como es el caso de las medidas con fines analticos, la potencia de la radiacin puede ser tomada como la intensidad.

Figura 2 - Fenmenos involucrados cuando un haz (monocromtico) de radiacin incide sobre una cubeta conteniendo una solucin que absorve en la longitud de onda incidente.

Cuando un haz de radiacin monocromtica, con intensidad Io, incide sobre una cubeta conteniendo una solucin, varios fenmenos pueden ocurrir. El efecto ms significativo ocurre cuando parte de la radiacin es absorbida por el medio que est siendo analizado. Sin embargo, este no es el nico efecto que puede ser observado. Parte de la radiacin incidente puede ser reflejada, dependiendo de la especie absorbente o de las diferencias entre el ndice de refraccin del medio donde la radiacin se propaga e del medio que est sendo analizado (inclusive por las paredes de la cubeta), al mismo tiempo que otra parte podr simplemente ser dispersada, en el caso de que el medio no sea transparente y homogneo. En consecuencia, la intensidad del haz que es medida despus de atravesar la muestra (intensidad transmitida, It) ser menor que la intensidad inicial, Io. Sin embargo, un aspecto sumamente importante, es que todos estos efectos asociados con la intensidad de radiacin (Figura 2), estn relacionados entre s por una expresin linear descrita por la ecuacin: Io = Ir + Ie + Ia + It eq. 1

Io = Intensidad del haz incidente, Ir = Intensidad del haz reflejado, resultado de las diferencias del ndice de refraccin entre la especie absorbente y el ambiente, Id = Intensidad del haz dispersado, resultado de un medio no homogneo (suspensin) y/o de fluctuaciones trmicas, Ia = Intensidad del haz absorbido por el medio It = Intensidad del haz transmitido.

En medidas analticas convencionales, el efecto de reflexin de la radiacin electromagntica, Ir, puede ser minimizado con el uso de medidas relativas y de cubetas con paredes homogneas con poca espesura y de caras paralelas. En otras palabras, se preparan dos cubetas, una conteniendo la muestra que se desea analizar y otra conteniendo todos los componentes de la cubeta anterior, menos la sustancia de inters. La medida de la intensidad del haz transmitido a travs de la segunda cubeta servir de referencia para calibrar el instrumento, antes de la medida de la intensidad transmitida a travs de la cubeta conteniendo el material de inters. Este procedimiento es empleado para descontar los posibles efectos de reflexin observados en el experimento. De esta forma se puede deducir la necesidad del uso de cubetas prcticamente idnticas, con paredes de poca espesura y con caras paralelas. El procedimiento general para calibracin del espectrofotmetro es de fcil ejecucin. Gran parte de los procedimientos involucrando absorcin de luz, son realizados con soluciones

homogneas y transparentes, de tal modo que la intensidad de la radiacin dispersada, Id, puede ser considerada despreciable. De esta forma, trabajndose con soluciones homogneas, puede considerarse que la intensidad de la radiacin incidente est siendo utilizada en dos procesos descritos por la ecuacin: Io = Ia + It eq. 2

Las intensidades incidente (Io) y transmitida (It ) pueden ser medidas directamente. Por lo tanto, la parte absorbida (Ia) puede ser determinada como la diferencia entre Io e It. Algunas tcnicas analticas, tales como la turbidimetria y la nefelometra, utilizan la propiedad que presentan determinadas soluciones no homogneas de dispersar la luz. Para tales procedimientos, la intensidad del haz disperso ser el factor determinante para aplicaciones analticas. En este texto, particularmente, no sern discutidos los elementos relacionados con la dispersin de luz, apenas aquellos relacionados a las soluciones homogneas. Cuando se piensa en evaluar las propiedades de soluciones en funcin de la intensidad de haces de luz, imagnese inicialmente que este es el tipo de informacin que est intrnsicamente asociado a utilizacin de luz elctrica o de instrumentos especiales. Sin embargo, al buscarse el origen de los estudios de absorcin de luz por soluciones, sorprendentemente se encuentra que estos estudios son anteriores al descubrimiento de la luz elctrica. Eran utilizadas luz solar o luz emitida por llama. Entre las primeras investigaciones sobre la relacin existente entre las intensidades de radiacin incidente y transmitida, se destacan los experimentos de Pierre Bouguer (1729) y de Johann Heindrich Lambert (1760). Estos dos cientficos efectuaron observaciones independientes y verificaron que las propiedades asociadas al proceso de absorcin de luz pueden ser enunciadas en trminos de dos leyes fundamentales: *La intensidad de luz (monocromtica) transmitida por un cuerpo homogneo es proporcional a la intensidad de luz incidente. Es decir: It = k Io. *La intensidad de luz (monocromtica) transmitida disminuye exponencialmente con el aumento de la espesura de la capa del cuerpo homogneo. La Figura 3 muestra claramente la existencia de este fenmeno, en la rutina del laboratorio, con el uso de luz solar.
Figura 3 - Solucin de CuSO4 en medio amoniacal, contenida en una fiola. Ntese que la solucin parece ser ms clara en la regin del ajuste del menisco, debido a que el dimetro del tubo (espesura de la especie absorbente) es mucho menor que en la parte inferior de la fiola.

Esta ley es representada por la matemticamente de varias formas:

ecuacin

puede

ser

deducida

eq. 3 Donde: e es la base del logaritmo natural y k' el coeficiente de absorcin. Considerndose la siguiente propiedad matemtica asociada a la potenciacin: eq. 4 donde ecuacin 3 en: , se puede convertir el trmino en , convirtiendo a la eq. 5 En 1852, August Beer estudi la influencia de la concentracin de soluciones coloridas sobre la transmisin de luz. La conclusin a la que lleg fue que el valor de a' para una determinada sustancia es proporcional a su concentracin, es decir: donde, c es la concentracin y a absortividad ( constante independiente de la concentracin).

La ley de Beer es anloga a la ley de Bouguer - Lambert. Mientras que Bouguer y Lambert estudiaron la variacin en la absorcin de un haz de luz, en funcin de la variacin de la espesura de la camada absorbente, Beer hizo el mismo estudio en lo que se refiere a la concentracin de la solucin, manteniendo la espesura constante. En ambos casos, el resultado es el mismo pues, ya que al variar la concentracin, o variar la espesura de la solucin a ser atravesada por la luz, esencialmente aumentamos o disminuimos el nmero de partculas que interaccionan con la radiacin. Combinndose las ecuaciones 4 y 5, se obtiene la ley bsica da espectrofotometra, sea la Ley Bouguer - Lambert - Beer, ms conocida como la Ley de Beer: eq. 6

S la concentracin c estuviera expresada en mol por litro y la espesura de la especie absorbente (en este caso el camino ptico de la cubeta, b) en centmetros, la constante toma el nombre de absortividad molar, y el smbolo normalmente empleado para esta cantidad pasa a ser (psilon). La absortividad, , es la ms usada cuando no se conoce la naturaleza del material absorbente (y por lo tanto su masa molar), siendo la concentracin expresada en gramos por litro. La absortividad molar (e) es preferible cuando se desea comparar cuantitativamente la absorcin de varias sustancias. Para una misma espesura de material absorbente (camino ptico), cuanto mayor el valor de e mayor la sensibilidad del mtodo. De este modo, se puede escribir la ecuacin 6 como: eq. 7 La absortividad molar, , depende de la sustancia, de la longitud de onda utilizada, de la temperatura y del solvente. Analizndose la ecuacin 7, se nota que cuanto mayor el valor de , mayor ser el nivel de absorcin observado y ms sensible el mtodo espectrofotomtrico. Esta es la razn por la cual, idealmente, se busca trabajar con una radiacin monocromtica, siempre que sea posible, correspondiente al mximo de absorcin de la especie a ser determinada. Rearreglando la ecuacin 7 se obtiene: eq. 8 La relacin It / Io se llama transmitanca y es representada por el smbolo T. As: eq. 9 Se nota por la ecuacin 9 que la relacin entre T y c no es linear, lo que tiende a dificultar la comparacin entre diferentes transmitancias y las concentraciones asociadas a ellas. Sin embargo, aplicando logaritmos a la ecuacin 8 ( 9), se obtiene: eq. 10

Figura 4 - Representacin grfica de la Ley de Beer, para soluciones de KMnO4 en l = 545 nm y un camino ptico de 1 cm. a) En %Transmitancia [%T versus c - eq. 9]; b) En Absorvancia [ A versus c eq. 12].

La relacin log10 (Io / It) es llamada de absorbancia por muchos autores de idioma portugus, pero varios otros prefieren la derivacin del ingls, absorbancia (absorbancia en espaol). Por razones de uso, este texto utilizar esta ltima alternativa. As, la Ley de Beer puede ser representada como en la Figura 4 y enunciada simplemente como: A=bc eq. 11 o en el caso de no utilizarse la concentracin en mol por litro: A= bc eq. 12 Se nota claramente en la ecuacin 12, la relacin lineal entre la absorbancia, A, y la concentracin c. Por lo tanto, mantenindose el camino ptico constante, se puede determinar la concentracin de una especie en solucin, a travs de la medida de la absorbancia. En la prctica, es construida una curva de calibracin (absorbancia versus concentracin), de la especie de inters y la concentracin de la muestra es determinada a travs de esta. Para realizarse un anlisis espectrofotomtrico es tambin necesario conocer el espectro de absorcin de la muestra que se quiere determinar. Esto es hecho para definirse cual es la longitud de onda de la radiacin incidente, que causar la absorcin mxima de la especie a ser determinada y as obtener la mejor sensibilidad en su cuantificacin. El espectro de absorcin es obtenido variando la longitud de onda de la radiacin que incide sobre la muestra y medindose la cantidad de radiacin absorbida en un espectrofotmetro. Una otra caracterstica particular de la ley de Beer es la sumatoria de las absorbancias. En muchos casos, es posible determinar simultneamente dos o ms especies diferentes presentes en una muestra, utilizndose esta misma ley. Tericamente, esto puede ser realizado desde que no ocurra ninguna interaccin entre las especies y que el espectro de absorcin observado por la mezcla sea la suma de los espectros individuales que serian obtenidos en el caso de que slo una de las especies estuviese presente en la solucin y bajo las mismas condiciones experimentales. En la prctica, estas condiciones

ideales no ocurren, pero sin embargo es posible la determinacin de especies qumicas en una mezcla. En este caso, para cada longitud de onda, la absorbancia total debida a las especies presentes en la solucin puede ser expresada como la suma de las absorvancias de cada una de ellas, Para el caso particular de dos sustancias,

donde A1 e A2 son los valores de absorbancia medidas a dos longitudes de onda diferentes, 1 e 2, y los ndices 1 y 2 representan las dos sustancias diferentes. FUENTE DE REFERENCIA: http://www.chemkeys.com/esp/ Material preparado por: *Joo Carlos de Andrade (Universidad Estadual de Campinas, Instituto de Qumica) *Rogrio Custodio (Universidad Estadual de Campinas, Instituto de Qumica) *Lauro T. Kubota (Universidad Estadual de Campinas, Instituto de Qumica) a partir de las anotaciones de las clases y de la bibliografa: 1 - Strong, F.C., "Theoretical basis of the Bouguer-Beer law of radiation absorption", J. Chem. Educ., 1952, 24: 338-347 [com correes de algumas equaes em J. Chem. Educ., 1952, 24: 2013]. 2 - Swinehart, D.F., "The Beer-Lambert law", J. Chem. Educ., 1962, 39: 333-335. 3 - Barberan-Santos, M.N., "The Beer law revisited", J. Chem. Educ., 1990, 67: 757-759 [ver tambm as citaes bibliogrficas deste artigo]. 4 - Lykos, P., "The Beer-Lambert law revisited - a development without calculus", J. Chem. Educ., 1992, 69: 730-732. Creado en: ABR/1999. ltima actualizacin: MAR/2000