Toma y en envo de muestras al laboratorio

Normas generales Para la adecuada recoleccin, conservacin y envo de muestras, es indispensable tener presente las siguientes normas: Toda muestra debe ser remitida con su historia clnica completa y perfectamente identificada. Las muestras ideales se obtienen de animales vivos en distintos estadios de la enfermedad. Si es necesaria la necropsia, sta debe guardar un orden y metodologa adecuadas; adems, debe realizarse al menor tiempo posible despus de la muerte del animal (1 hora). Las muestras para estudio bacteriolgico deben tomarse antes de la administracin de medicamentos y empleando siempre material estril. Para evitar que la muestra se seque y lograr una adecuada conservacin, en algunos casos es necesario utilizar medios de transporte. Para la recoleccin de cualquier otro tipo de muestra, utilizar material limpio y seco. Los envases utilizados para el envio de muestras deben ser en lo posible irrompibles, hermticos y de dimensiones adecuadas; el tiempo entre la obtencin de la muestra y su llegada al laboratorio no debera ser superior a 24 horas.

Identificacin de las muestras: La identificacin de las muestras es de primordial importancia para el laboratorio y deben estar acompaadas de la siguiente informacin: Nombre, direccin, telfono y correo electrnico del Mdico Veterinario. Nombre, direccin, telfono y correo electrnico del propietario. Nombre de la explotacin pecuaria. Ubicacin completa. Especie, raza, sexo y edad del animal. Identificacin o nombre del animal. Nmero de animales en la explotacin. Porcentaje de morbilidad y mortalidad. Signos y sntomas. Tiempo de evolucin de la enfermedad. Tratamiento efectuado. Vacunas aplicadas (nmero y fecha). En caso de necropsia, descripcin de hallazgos macro. Tipos de muestras, fecha y hora de la toma. Sistema de conservacin utilizado. Observaciones.

Consideraciones generales Puncin y calibre de agujas. Empaque y envo de muestras..

CONSIDERACIONES GENERALES

1. El diagnstico de laboratorio correcto y oportuno depende del cuidado con que se realice la toma, manejo y envo de muestras siguiendo al detalle las instrucciones al respecto. 2. La interpretacin del resultado del laboratorio debe estar apoyado por un buen diagnstico clnico y los antecedentes epidemiolgicos del caso. 3. La muestra para aislamiento de agentes infecciosos debe ser tomada ANTES de instaurar la terapia con antimicrobianos. 4. La muestra debe identificarse utilizando una cinta de tela adhesiva, escrita con LAPIZ, donde se incluya todos los datos relevantes del caso: nombre completo o clave, diagnstico presuntivo, fecha de toma y tipo de muestra indicando si es 1a, 2a o 3a. 5. La muestra debe acompaarse siempre de un resumen clnico del caso y sus antecedentes, as como de cualquier dato epidemiolgico relevante.

ENVIO DE MUESTRAS 1. Hay que verificar que todas las muestras estn identificadas con los datos relevantes del caso, tal como ya se indic en las consideraciones generales al inicio de esta seccin. 2. Los frascos, viales, tubos, etc, deben estar tapados lo ms hermticamente posible, colocando bien las tapas y tapones los cuales se asegurarn con tela adhesiva. 3. Cuando se manden varios tubos se aseguran con ligas y se colocan en bolsas cerradas. 4. Los frascos se colocan en bolsas de plstico resistentes y hermticamente cerradas. 5. Las laminillas se deben enviar secas, envueltas individualmente en papel de China y cada una estar bien identificada con un nmero o el nombre del paciente. 6. Para el envo, las muestras se colocan en cajas trmicas resistentes empaquetandolas con relleno de papel, plstico o madera (viruta), para amortiguar los golpes. 7. Si se envan por avin asegurarse que el paquete viaje en el rea presurizada para evitar la prdida (evaporacin) de los especmenes. 8. No olvidar que las muestras deben estar acompaadas de una carta u oficio en el que se especifique claramente que tipo de prueba se solicita y un resumen clnico enfatizando la fecha de inicio del padecimiento y la fecha de la toma de la muestra, edad y sexo, estos documentos (original y copia), se colocan dentro del paquete en una bolsa de plstico sellada para evitar la prdida de esta informacin. o o o o Debe verificarse que el nombre de la muestra sea el mismo en oficio y resumen clinico. Escribir con letra de molde, de preferencia a mquina y enviar en original. Que la cantidad de muestra enviada sea de acuerdo a los estudios solicitados. Indicar en el paquete en un lugar visible si ste contiene muestras de clera, rabia, poliomielitis, aguas residuales, citologa, paludismo, VIH etc..

9. Las muestras se remiten lo ms pronto posible despus de obtenidas para organizar su adecuada preservacin.10. Es conveniente que se informe del envo al

A continuacin se describen, en ORDEN ALFABETICO, los procedimientos adecuados de toma y envo de muestras clnicas (M) para diagnstico y referenci

M1. EXPECTORACION (ESPUTO) Toma: En un frasco de plstico combustible, con capacidad de 30 a 50 mL, de boca ancha y estril, se recogen unos 5 mL de expectoracin del paciente. Para el aislamiento de agentes microbianos de infeccin respiratoria aguda, la muestra debe satisfacer un control de calidad consistente en el recuento celular a seco dbil de 25 campos, en busca de la presencia promedio de no ms de 10 clulas epiteliales y ms de 25 polimorfonucleares por campo; en caso de no cumplir con estos valores se solicita otra muestra. En los casos de sospecha de tuberculosis slo hay que cuidar que la muestra sea mucopurulenta y est libre de saliva; se toman 3 muestras: una es cuando se produce tos, otra se toma en la maana cuando despierta el paciente y una ms al hacer la entrega de las muestras en el laboratorio. Envo: Las muestras se protegen del calor excesivo con refrigerante.

M2. EXUDADO CUTANEO Toma: Con un hisopo de algodn se toma una porcin del exudado, evitando que sea muy superficial. Inmediatamente se siembra en medios de cultivo adecuados (agar sangre, agar chocolate, PAI, etc) o se inocula en el medio de transporte de Stuart. Envo: Las muestras se protegen del calor excesivo con un refrigerante. M3. EXUDADO FARINGEO Toma: Se pide al paciente que se siente y coloque su cabeza hacia atrs. Se ilumina bien la cavidad orofarngea y con un abatelenguas se empuja la lengua hacia abajo para facilitar el acceso a la parte posterior de la faringe. Con un hisopo de algodn se hace un raspado de las reas hipermicas, purulentas o necrticas, as como de las membranas o manchas de Koplic, si es que las presenta. Envo: Agentes virales: El hisopo con la muestra se introduce en un tubo de tapn de rosca con 1 a 2 mL de solucin salina isotnica estril. Se rompe la varilla de madera a la altura del tapn y se tapa hermticamente. Agentes bacterianos: El hisopo con la muestra se introduce en un tubo de tapn de rosca con medio de Amies o de Stuart. Se rompe la varilla de madera a la altura del tapn y se tapa hermticamente.

M4. EXUDADO NASOFARINGEO Toma: Se pide al paciente que se siente y coloque su cabeza hacia atrs. Se introduce un hisopo de alginato de calcio, dacrn o nylon (nunca de algodn en caso de sospechar Bordetella) por las fosas nasales hasta la nasofaringe, sin tocar los cornetes y tratando de producir un acceso de tos. El hisopo se mantiene in situ de 1015 segundos durante el acceso de tos, despus de lo cual se retira rpidamente. Envo: Si la muestra no se va a procesar de inmediato, el hisopo se mantiene en un medio de transporte y se enva de inmediato con refrigerante: Agentes virales: El hisopo con la muestra se introduce en un tubo de tapn de rosca con 0.5 mL de solucin salina isotnica estril. Se rompe la varilla de madera a la altura del tapn y se tapa hermticamente. Agentes bacterianos: El hisopo con la muestra se introduce en un tubo de

tapn de rosca con medio de Amies o de Stuart. Se rompe la varilla de madera a la altura del tapn y se tapa hermticamente. M5. EXUDADO URETRAL Toma: Se recomienda al paciente que no orine por lo menos una hora antes de tomar la muestra. En casos de gonorrea, cuando se produce un exudado abundante, se presiona ligeramente la uretra con el fin de que lo expulse y ste se recoge con un hisopo de alginato estril el cual se deposita en el medio de transporte de Stuart. Cuando se sospecha de una infeccin por clamidia, se emplea un hisopo de alginato de calcio adecuado para toma de muestras en varones, el cual se introduce unos 2 a 4 cm en la uretra y se frotan las paredes haciendo girar el hisopo durante 5 a 10 segundos; con esta muestra se deben hacer de inmediato frotes en portaobjetos limpios que se fijan con acetona. Envo: El tubo y las preparaciones se enva lo antes posible de modo que no lleguen al laboratorio despus de 24 horas. M6. EXUDADO VAGINAL Y ENDOCERVICAL Toma: Se utiliza un espejo vaginal para revisar el crvix. En caso de gonorrea no se hace ningn tipo de limpieza y se recoge una muestra de exudado con ayuda de un hisopo; la muestra se debe sembrar de inmediato en la placa de agar de Thayer Martin y slo que sto no sea posible, se puede transportar en medio de Stuart. Cuando se sospecha de infeccin por clamidias, se limpia el exocrvix con un hisopo de algodn para eliminar el moco y el exudado, se introduce el hisopo (de alginato de calcio o de dacrn, nunca de algodn) o el cepillo unos 2 a 4 cm dentro del canal endocervical y se rota cuidadosamente presionando contra la pared, evitando el contacto con las superficies vaginales. Con esta muestra se deben hacer de inmediato frotes en portaobjetos limpios que se fijan de inmediato con acetona. Envo: El tubo con el medio de transporte se enva lo antes posible de modo que no llegue al laboratorio despus de 24 horas. No es necesario refrigerar la muestra. Las preparaciones se envuelven individualmente y se envan protegidas de la luz y el calor excesivo. M7. FROTIS SANGUINEO Toma: Se limpia la yema del dedo o el lbulo de la oreja con una torunda de algodn empapada en alcohol etlico al 70% y se deja secar. Con una lanceta estril se hace una puncin firme y profunda y se limpia la primera gota de sangre con un algodn limpio y seco. Se comprime de nuevo la yema o el lbulo hasta que se forme una gota esfrica. Se toca la parte superior de la gota con un portaobjetos muy limpio y con un extremo de otro portaobjetos, se extiende la sangre para hacer un frote. La sangre se deja secar a temperatura ambiente y en posicin horizontal. Envo: Cada laminilla se protege individualmente con cartn preferentemente. El conjunto se empaqueta cuidadosamente en un recipiente con doble cubierta para evitar la ruptura y se enva lo antes posible al laboratorio. No hay que refrigerar el paquete. M8. GARGARISMO Toma: Se proporciona al paciente un frasco de boca ancha con tapn de rosca, estril, con 5 mL de solucin salina y se le instruye de modo que mantenga la solucin en la garganta el mayor tiempo posible mientras hace grgaras y depositndo nuevamente el lquido en el frasco. Envo: El frasco con la muestra se enva de inmediato, protegido con un refrigerante. M9. GOTA GRUESA Toma: Se limpia la yema del dedo o el lbulo de la oreja con una torunda de algodn empapada en alcohol etlico al 70% y se deja secar. Con una lanceta estril se hace una puncin firme y profunda y se limpia la primera gota de sangre con un algodn limpio y seco. Se comprime de nuevo la yema o el lbulo hasta que se forme una gota

esfrica, la cual se hace depositar sobre el centro de un portaobjetos limpio. Con ayuda de una arista de un portaobjetos se extiende sobre una superficie de aproximadamente 0.5 a 1cm. La gota se deja secar a temperatura ambiente y en posicin horizontal. Envo: Cada laminilla se protege individualmente con cartn preferentemente y se empaqueta cuidadosamente con doble cubierta para evitar la ruptura y se enva lo antes posible al laboratorio. No hay que refrigerar el paquete, pero si protegerlo de la humedad y la luz solar. M10. HEMOCULTIVO Toma: Se limpia el sitio de la puncin con una torunda de algodn impregnada con etanol al 70% o solucin de yodo al 2%. Si se trata de un adulto, se toman de 5 a 8 mL de sangre total, sin anticoagulante, o de 2 a 3 mL si se trata de un nio, siguiendo las indicaciones que se describen en el inciso M20. De inmediato la sangre se inyecta a travs del tapn (previamente desinfectado con alcohol) de un frasco con medio bifsico para hemocultivo. Envo: El frasco del hemocultivo se empaqueta bien en un recipiente con doble cubierta para evitar su ruptura. No hay que refrigerarlo. M11. HISOPO RECTAL Toma: La muestra se toma introduciendo la punta de un hisopo de algodn humedecido en solucin salina o medio de transporte en el recto y hacindolo rotar ligeramente. Estar bien tomada si observamos un ligero color caf en el hisopo. Una vez tomada la muestra se introduce el hispo hasta el fondo en un tubo con medio de transporte Cary-Blair que debe estar bien tapado (tapn de rosca). Para estudios bacteriolgicos se enva inmediatamente despus de haberse tomado. En caso de ser para estudios virales mandarlo en refrigeracin, aunque no se recomienda usar hispo para el caso de virus. Envo: Si se trata de estudios bacteriolgicos no hay que refrigerar el paquete, pero s en el caso de estudios virales. M12. IMPRONTA DE LESIONES CUTANEAS Toma: En caso una lesin ulcerosa, se presiona un portaobjeto perfectamente bien desengrasado sobre la lesin. Si la lesin est cicatrizada con la punta de un portaobjeto se levanta la cicatriz y se toma la muestra como se indic anteriormente. En caso de una lesin nodular, se pincha el ndulo con una lanceta y se presiona con un portaobjeto sobre la lesin hasta que salga lquido tisular el cual contendr al parsito.Hay que evitar en lo posible el sangrado durante la toma de la muestra. Se fija con alcohol metlico absoluto. Envo: Las laminillas se envuelven individualmente y se empaquetan bien en un recipiente con doble cubierta para evitar su ruptura y se enva lo antes posible al laboratorio. Hay que proteger el paquete de la humedad y de la luz solar. M13. LAVADO FARINGEO Toma: Se pide al paciente que se siente cmodamente e inclina la cabeza hacia atrs. Se mide la distancia media entre la fosa nasal y la base del pabelln auricular, para saber la profundidad a la que se debe introducir la sonda. Se aplicar 1 mL de solucin salina o PBS estril e inmediatamente se introducir la sonda, que estar conectada a travs de una trampa a un tubo o recipiente estril para la recepcin del material. Envo: La muestra se coloca en hielo hasta su procesamiento (dos a cuatro horas en las tcnicas rpidas). M14. LAVADO GASTRICO Toma: Debe ser efectuada por personal mdico bien entrenado. Se introduce una sonda por va bucal hasta el estmago en ayunas. La muestra se deposita en un frasco de boca ancha y de preferencia estril.

Envo: El frasco se enva lo antes posible al laboratorio, donde no debe llegar despus de 6 horas de tomada la muestra. Se debe acompaar de refrigerante. M15. LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO (LCR) Toma: La obtencin de la muestra es responsabilidad exclusiva del mdico quien la tomar bajo rigurosas condiciones de asepsia. Se deben recuperar unos 5 mL los cuales se conservan en tubos de vidrio estriles con tapn de rosca. Envo: Cuando se trate de estudios virolgicos, la muestra se enva refrigerada. Si se sospecha de una infeccin bacteriana, la muestra no debe refrigerarse, ni acompaarse de hielo. Cuando el envo tarda ms de 24 horas, la muestra debe enviarse inoculada en medios especficos. M16. LIQUIDO PLEURAL Toma: La obtencin de la muestra es responsabilidad exclusiva del mdico, quien la tomar bajo condiciones rigurosas de asepsia. Se obtiene una muestra de aproximadamente 5 mL en tubos de vidrio estriles con tapn de rosca. Envo: El tubo se enva lo antes posible al laboratorio acompaado de refrigerante. M17. MATERIA FECAL Toma: Las muestras fecales pueden ser obtenidas en recipientes limpios de boca ancha y con tapa hermtica que permitan su fcil transporte, de preferencia que no sean de vidrio. Las heces obtenidas del suelo, excusado as como del paal no son satisfactorias, debido a que pueden contaminarse con material extrao. Envo: La muestra se debe enviar de inmediato al laboratorio. Estudios virales: el tiempo de envo debe ser menor a los tres das y en condiciones de refrigeracin, con la cantidad de 10 gramos. Si se trata de hisopo rectal en solucin salina, sueros y L.C.R. en envases apropiados correctamente sellados. Estudios bacteriolgicos: se inocula en un medio de transporte (Cary Blair o Amies) y se enva a temperatura ambiente Estudios parasitolgicos: se adiciona formol al 10% v/v neutralizado y se homogeniza bien. El envo se hace a temperatura ambiente. Estudios para determinacin de coproantgenos por ELISA: el tamao que se enva sera similar al tamao de una nuz independientemente de la consistencia. Estudios parasitoscpicos : tres muestras consecutivas (de diferente da), el envo se hace a temperatura ambiente. Cuando la muestra presente sangre y/o moco de preferencia mandar de esa parte.

M18. MEDULA OSEA Toma: La muestra deber ser tomada exclusivamente por el mdico en condiciones rigurosas de asepsia. Se obtienen aproximadamente de 0.25 a 0.3 mL de material con una jeringa heparinizada estril de 1 mL de capacidad. La jeringa se gira cuidadosamente para mezclar el material aspirado y se deposita en un tubo estril con 0.5 mL de solucin salina fisiolgica. Si se dispone de medios de cultivo se recomienda sembrar de inmediato la muestra: Bacterias: caldo soya-tripticasa Hongos: medios de Sabouraud simple y de Sabouraud con antibiticos Leishmaniosis: medio de Marin NNN y/o RPMI con 10% de suero de ternera fetal

Envo: Si el laboratorio est cerca la muestra se puede transportar en la misma jeringa solamente cuidando que la aguja quede bien protegida para evitar la contaminacin.

Si el transporte se tarda ms de 24 horas, las muestras (jeringa o tubo) se conservan en refrigeracin . El tubo o tubos sembrados se mantienen a temperatura ambiente y se envan lo ms rpido posible al laboratorio. M19. ORINA Toma: Se usa un recipiente estril, de boca ancha con tapa de rosca. Aunque el sondeo vesical es la forma ideal para evitar la contaminacin, debido a la posibilidad de extender la infeccin en el paciente, se utiliza en casos muy excepcionales en el hospital. Por esto, la miccin espontnea es la tcnica ms aconsejable: despus de una cuidadosa limpieza de la regin urogenital con agua y jabn y despus con benzal al 1%, se instruye al paciente para que deseche la primera parte de la miccin y se colecta el chorro medio. Slo en caso de sospechar parsitos, se usa la primera parte de la miccin. Envo: La muestra se debe enviar de inmediato al laboratorio con refrigerante. Estudios virales: el envo debe tardar menos de un da. M20. RASPADO DE LESIONES Y/O COSTRAS Toma: Se lava bien el sitio de la lesin, primero con agua y jabn y luego con alcohol al 70%, utilizando gasa (no debe utilizarse algodn) y se deja secar. Con bistur estril, se raspa el borde de la lesin y se recoje el material que se desprende. Si la epidermis est desprendida se toman porciones de sta. Para la bsqueda morfolgica del agente, las costras o escamas se colocan en una caja de petri estril y se asegurar la tapa con cinta adhesiva para que no se abra, o bien se pueden colocar en sobres de papel que se sellan. Envo: El material slo debe congelarse cuando la muestra es para estudios virolgicos. Para estudios bacteriolgicos la muestra se siembra en los medios de transporte adecuados. M21. SANGRE TOTAL Toma: La toma deber hacerse en un lugar perfectamente iluminado y con el paciente cmodamente sentado. Se localiza una vena adecuada en el brazo del paciente y se coloca el torniquete. Se desinfecta el rea de puncin con un algodn impregnado de alcohol al 70%, se introduce la aguja con el bisel hacia arriba. Si la muestra necesaria es sangre total hay que utilizar el anticoagulante adecuado segn el proceso que vaya a seguirse, ya que algunos anticoagulantes pueden ser inhibitorios. Si la toma de sangre es para la obtencin de suero, no debe usarse ningn anticoagulante. Si la sangre no fluye espontneamente y se est utilizando una jeringa, se jala el mbolo y se aspira con suavidad; si se est empleando equipo al vaco se presiona el tubo de ensaye hacia arriba. Al empezar a fluir la sangre el torniquete se retira y hasta que se haya obtenido la cantidad de sangre que se requiere (generalmente 6-10 mL) se retira la aguja y se coloca una torunda con alcohol sobre el sitio de puncin ejerciendo presin para detener la hemorragia. Si la toma se hizo con jeringa, la sangre se vierte de la jeringa ya sin aguja sobre un tubo estril dejndola resbalar lentamente por la pared para evitar hemlisis. El tubo se tapa cuidadosamente. Envo: Es muy importante estar seguro que para el estudio a realizar es correcto el envo de sangre total, ya que sta puede sufrir hemlisis y dejar de ser til. Si efectivamente es el caso, el tubo con la muestra se empaqueta bien en un recipiente con doble cubierta y hermtico y se enva de inmediato, protegindolo del calor excesivo con un refrigerante y de la luz solar. M22. SUERO Toma: Se debe seguir la misma tcnica que para la obtencin de sangre total (M21), pero sin anticoagulante. El cogulo formado se separa de las paredes del tubo con un aplicador de madera. Se debe esperar el tiempo necesario para que se retraiga el cogulo y el suero se separa por centrifugacin a 2,500-3,000 rpm. El suero no debe mostrar indicios de hemlisis, ni debe estar lipmico y se debe conservar refrigerado o congelado, a menos que se d otra indicacin. Actualmente existe un equipo comercial de tubos al vaco con un gel especial, con este sistema se puede separar el

suero directamente en los tubos centrifugando a 3,000 rpm por 5 minutos. El suero se conserva en los mismos tubos por varios das. Este procedimiento tiene la ventaja de que no se destapan los tubos en ningn momento, as el contenido se conserva estril y adems representa un riesgo mnimo. Envo: El frasco con la muestra se enva de inmediato, protegindolo del calor con hielo o un refrigerante. Si es necesario congelarlo, hay que empaquetarlo bien con hielo seco. Si el suero muestra indicios de contaminacin debe desecharse de inmediato. M23. OTRAS MUESTRAS Para diversos diagnsticos especiales y para la investigaciones de brotes se pueden requerir otros tipos de muestras. En estos casos dirigirse directamente al laboratorio correspondiente para recibir la informacin respectiva.