PRUEBAS DE SEROLOGIA

Es un examen de sangre que se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos contra un microorganismo. En los anlisis serolgicos se buscan anticuerpos especficos producidos por el sistema inmunolgico. Tambin, a diferencia de los anlisis microbiolgicos, los anlisis serolgicos son extremadamente eficaces para determinar si un individuo ha estado expuesto a una infeccin antes de que comience a mostrar los sntomas de la enfermedad o para determinar si en el pasado existi una determinada infeccin o enfermedad. La serologa se refiere al estudio del contenido de anticuerpos en el suero. Ciertos microorganismos (antgenos) estimulan al cuerpo para producir estos anticuerpos durante una infeccin activa. En el laboratorio, los anticuerpos reaccionan con los antgenos de formas especficas, de tal manera que se pueden utilizar para confirmar la identidad del microorganismo en particular Por qu utilizamos el diagnstico inmunolgico?

El diagnstico clnico no suele ser definitivo. Las lesiones histolgicas pueden ser indicativas pero pocas veces son patognomnicas A veces, el diagnstico microbiolgico es lento, complicado o imposible

Conceptos Bsicos
Las IgM normalmente reflejan una infeccin reciente El aumento del ttulo de anticuerpos indica una infeccin reciente A veces, simplemente con determinar un ttulo elevado podemos suponer que se ha producido una infeccin reciente Los ttulos de IgG por s solos suelen indicar una infeccin pasada

TCNICAS
Existen varias tcnicas serolgicas que se utilizan dependiendo de los anticuerpos de los cuales se sospecha entre las que se pueden mencionar aglutinacin, precipitacin, fijacin del complemento, anticuerpos fluorescentes y otras.

Pruebas de Aglutinacin

Se basan en la unin de antgenos partculados preferentemente a las IgM. Son pruebas muy sensibles pero de poca especificidad

Pruebas de Precipitacin

Pruebas de precipitacin: En este caso se utilizacin antgenos solubles que se Difunden frente a los anticuerpos. La unin antgeno-anticuerpo precipita de forma visible y permite establecer la presencia de anticuerpos especficos.

Pruebas Fijacin del complemento

La fijacin del complemento se basa en la capacidad del complemento para unirse a los complejos antgeno-anticuerpo. La prueba incluye la adicin de eritrocitos sensibilizados con una hemolisina. Si el suero posee anticuerpos especficos, se fija el complemento y no puede unirse a la hemolisina para lisar los eritrocitos. Se trata de una prueba muy especfica.

Pruebas de hemaglutinacin e inhibicin de la hemaglutinacin

Estas pruebas se basan en la capacidad de algunos patgenos (p.ej. el virus de la influenza) para causar la aglutinacin de los eritrocitos. Pueden utilizarse para detectar el patgeno (pruebas de hemaglutinacin) o

los anticuerpos dirigidos contra las hemaglutininas del microorganismo (inhibicin de la hemaglutinacin). Suelen ser pruebas especficas de serotipo o subtipo y bastante sensibles.

Las pruebas de hemaglutinacin se utilizan con patgenos que poseen esta capacidad, generalmente virus. El ejemplo ms clsico es el diagnstico de la influenza

Pruebas de ELISA Las pruebas inmunoenzimticas se basan en una reaccin antgeno anticuerpo que tiene lugar sobre un soporte slido (normalmente una microplaca de plstico) a la que se ha adsorbido un antgeno o un anticuerpo. La prueba puede desarrollarse en diferentes modalidades pero en todas ellas la reaccin final se revela mediante un enzima que modifica un substrato que adquiere color. Se trata de pruebas muy sensibles y especficas

Pruebas de inmunofluorescencia
Las pruebas de inmunofluorescencia pueden utilizarse para detectar anticuerpos o para detectar la presencia de un patgeno. En ambos casos la reaccin finaliza mediante la adicin de un anticuerpo conjugado a una sustancia fluorescente, habitualmente fluorescena. Estas pruebas son muy sensibles pero su interpretacin tiene un alto grado de subjetividad Las pruebas de inmunofluorescencia, en sus dos variantes, directa e indirecta, han sido

muy utilizadas durante el siglo pasado aunque hoy en da han cado bastante en desuso debido al desarrollo de otros sistemas diagnsticos como el ELISA o las tcnicas de biologa molecular. La tcnica se basa en una reaccin antgeno-anticuerpo que se revela con la ayuda de un anticuerpo marcado con una sustancia fluorescente.

RESULTADOS DE LAS PRUEBAS SEROLOGICAS Significado de los resultados de valores normales . Una serologa se puede realizar cuando hay sospecha de infeccin. Con valores normales No se detectan anticuerpos, sin embargo, durante los primeros das a las primeras semanas despus de la exposicin al antgeno, se puede presentar una produccin ligera de anticuerpos y a medida que la enfermedad progresa, la cantidad de stos aumenta. Si se sospecha de una enfermedad, es posible que sea necesario repetir el examen entre los 10 das a 2 semanas luego de la primera prueba. Significado de los resultados anormales Si se detectan anticuerpos, ha habido exposicin a un antgeno. La deteccin de los anticuerpos se puede utilizar ya sea para diagnosticar una infeccin previa o activa o para determinar si el individuo es inmune a una reinfeccin por parte de un organismo. Consideraciones especiales Una serologa puede determinar si la persona alguna vez ha estado expuesta a un microorganismo en particular (antgeno), pero no necesariamente indica que haya una infeccin activa.

Las venas y arterias varan en tamao de un paciente a otro y de un lado del cuerpo a otro, por esta razn puede ser ms difcil obtener una muestra de sangre de algunas personas que de otras . Perfiles serolgicos La lgica de estas agrupaciones, similar a lo que realiza en el diagnstico directo, descansa en que generalmente el problema clnico requiere investigar varios patgenos como posibles agentes etiolgicos, como responsables de la patologa del paciente. Algunos ejemplos de los Perfiles Serolgicos Perfil respiratorio: Este perfil est orientado al estudio de procesos respiratorios que fundamentalmente muestran patrones radiolgicos poco compatibles con neumonas localizadas o bacterianas. Perfil Heptico: Las hepatitis producidas por los virus A, B, C, Delta, y E se diagnostican casi exclusivamente mediante tcnicas serolgicas aunque en el caso de algunas de ellas pueda realizarse la deteccin de la partcula viral, sus antgenos o su DNA o RNA ( PCR) . Estas determinaciones, se denominan marcadores serolgicos y de su estudio podemos extraer datos sobre la presencia o no de infeccin por alguno de ellos, la situacin biolgica del virus en relacin con el husped y probablemente el pronstico de la enfermedad. Perfil serolgico HIV: Para el diagnstico de esta infeccin se emplea en primer lugar una prueba de ELISA para la deteccin de anticuerpos. Estas pruebas se fabrican con dos diseos: unas son indirectas y otras competitivas. Las primeras son altamente sensibles y las segundas, menos sensibles pero muy especficas, pueden emplearse para confirmar los resultados positivos obtenidos con las primeras. Perfil para gestantes e infecciones congnitas: El objetivo de este perfil no es otro que el de prevenir infecciones congnitas (TORCH) y como tal debe de emplearse. No se persigue con este el diagnstico de enfermedades en la embarazada, sino la prevencin de enfermedades en el feto. Existe actualmente una polmica muy intensa acerca de si este estudio se debe de realizar durante el embarazo o, de forma universal, en todas las mujeres en edad de gestar.