TEMA 8

Neosporosis Sarcocystiosis

1. Neosporosis
INTRODUCCIN
Neospora caninum es un protozoo parsito, desconocido hasta hace 20 aos, capaz de producir enfermedad neuromuscular en perros y relacionado con abortos endmicos y epidmicos, mortalidad neonatal en vacuno. La primera descripcin de Neosporosis en perros data de 1984, en Noruega, donde Bjerks et al., encontraron un parsito similar a Toxoplasma gondii en cerebro y msculo de perros afectados de encefalopata, sin que los animales tuvieran anticuerpos frente a este protozoo. La primera descripcin de Neosporosis en vacuno se realiz en Nuevo Mxico (USA) en 1987 (histologa). Neospora caninum es la 1 causa de aborto en vacuno en numerosos pases. Distribucin mundial

Seleccin de trabajos recientes sobre la infeccin por Neospora caninum (en %) en fetos bovinos abortados utilizando diferentes tcnicas de diagnstico (histopatologa, inmunohistoqumica, serologa y PCR):

Pas
Espaa Espaa Francia Reino Unido Suiza Suiza Corea Argentina Brasil Mjico

n
80 130 104 324 83 242 180 188 47 211

HP
31,3 44

IHCa
53,8 50

Serologa
10,7 51

PCR
15,3

Referencia
Pereira-Bueno et al. 2003 Gonzlez et al. 1999

21 4 75 84 25 22,8 46,8 34,6 35,6 67,4 81,8 77 21,1 24,6 23,1 10,5 8,4 13 29 21 76,6

Pitel et al. 2001 Schock et al. 2000 Gottstein et al. 1998 Sager et al. 2001 Kim et al. 2002 Moore et al. 2002 Corbellini et al. 2002 Morales et al. 2001

1. Neosporosis
INTRODUCCIN
el 55,1% de los rebaos de carne y el 83,2% de los de leche tienen algn animal seropositivo. La seroprevalencia individual es del 17,9% y del 35,9%, respectivamente para cada tipo de ganadera.

Len:

Asturias:

90,7% de rebaos son positivos con una seroprevalencia individual del 29,6% (vacuno de leche)

Zaragoza: 76% de los rebaos con algn animal positivo y prevalencia individual
del 17,3% (vacuno de leche)

Prevalencia media de los rebaos en Espaa: 63% Prevalencia media individual en Espaa: 16,2%

PREVALENCIA DE N. caninum EN PERROS EN ESPAA (Estudio de Orturo et al. 2002)

Se investigaron un total de 139 perros en Catalua utilizando la tcnica IFI. El porcentaje de perros con anticuerpos frente al parsito fue del 12,2%. La seroprevalencia fue mayor en perros mayores de 1 ao que los ms jvenes. No se encontraron diferencias significativas segn sexo, raza o modo de vida. Los ttulos de anticuerpos fueron en general muy bajos, lo que indica en general infecciones subclnicas en el rea estudiada.

1. Neosporosis
ENCUADRE TAXONMICO
Reino Protozoa (Goldfuss, 1818) Owen, 1858 Subreino Biciliata Infrareino Alveolata Cavalier-Smith, 1991 Phylum Myzozoa Cavalier-Smith & Chao, 2004 Subphylum Apicomplexa Clase Conoidasida Levine, 1988 Subclase Coccidiasina Leuckart, 1879 Orden Eucoccidiorida Lger & Duboscq, 1910 Suborden Eimeriorina Lger, 1911 Familia Sarcocystidae Poche, 1913 Subfamilia Toxoplasmatinae Biocca, 1957 Gnero Neospora Dubey et al., 1988

MORFOLOGA
Los taquizotos tienen forma ovoide, semilunar o globosa y miden 5-7 m x 1-2 m. Se dividen dentro de la clula parasitada (HD y HI). Se han encontrado en clulas nerviosas, macrfagos, fibroblastos, endotelio vascular, miocitos, clulas del epitelio de los tbulos renales y hepatocitos.

Los bradizoitos, en el interior de quistes tisulares. Estos quistes tienen forma redondeada u ovalada y miden hasta 100 m de dimetro. Su pared es lisa y gruesa, pudiendo tener hasta 4 m de espesor. Se han descrito sobre todo en tejido nervioso (cerebro, mdula espinal, nervios perifricos), aunque tambin en musculatura esqueltica y retina.

Los ooquistes tienen forma esfrica y un dimetro de 10-12 m, y una vez esporulados contienen en su interior 2 esporocistos con 4 esporozoitos cada uno (tipo isosporoide). Resultado del ciclo sexual del parsito en el intestino del HD. El perro es HD, aunque no se puede afirmar que sea el nico.

Pared tisular del quiste

Bradizoitos

Complejo apical

Microfotografa de un quiste tisular de Neospora caninum

PERRO es tanto HHDD como HHII

(Taquiz, Bradiz o Quistes y Ooquistes)

HHII (Taquiz y Bradiz o Quistes) VACUNO OVINO, CAPRINO, EQUINO, PORCINO, otras especies silvestres

1. Neosporosis
CICLO EVOLUTIVO

Perros infectados

Placenta y fetos con quistes

Ooquistes en material fecal de perros Alimentos contaminados Vacas adultas infectadas

Transmisin vertical

1.- Replicacin en cls. nerviosas, macrfagos, fibrocitos, hepatocitos, musculares, etc (pseudoquistes-TZ) 2.- Replicacin en SNC (quistes-BZ)

Terneras infectadas

TRANSMISIN VERTICAL: A su vez puede ser: - Transmisin endgena transplacentaria: A partir de la reactivacin de los bradizoitos en los quistes tisulares de la madre por la gestacin y que pueden pasar al feto. - Transmisin exgena transplacentaria: Cuando la madre ingiere ooquistes por primera vez durante la gestacin y pasa la infeccin al feto. Es el principal mecanismo de contagio en las explotaciones. Ocasiona muerte fetal (ABORTO) o nacimiento de terneros con/sin sintomatologa clnica.

TRANSMISIN HORIZONTAL: No es imprescindible para mantener la infeccin. Est relacionada con brotes de abortos en explotaciones. Se produce por ingestin de ooquistes esporulados eliminados por perros infectados.

1. Neosporosis
PATOGENIA
Accin patgena ligada a la capacidad de multiplicacin de los taquizotos en los distintos tipos de clulas, que provocan su destruccin. Multiplicacin muy importante en tejido muscular y nervioso. En vacunos adultos solamente en SNC.. ENCEFALITIS.

La transmisin transplacentaria provoca en el feto afeccin tisular en cerebro, mdula espinal y corazn y menos frecuentemente en pulmones, riones y membranas fetalesMENINGOENCEFALITIS Y MIOCARDITIS. Afeccin de la placenta con necrosis difusa..PLACENTITIS

Meningoencefalitis + Miocarditis + Placentitis.MUERTE DEL FETO

CLNICA
Puede ocurrir:

(Neosporosis en vacuno)

Reabsorcin embrionaria

Feto momificado

Feto

Aborto

SERONEGATIVO Nacimiento Sin sintomatologa SEROPOSITIVO Con sintomatologa

1. Neosporosis
CLNICA
Abortos endmicos: Explotaciones abortos superiores a la normal (5-10%). Tiene lugar en
explotaciones en las que la infeccin se mantiene por transmisin vertical en ausencia del H.D. Pueden deberse a alteraciones del sistema inmune por estrs, otros agentes infecciosos o contaminacin de los alimentos con toxinas. Tambin podran estar causadas por nuevas reinfecciones va horizontal.

Abortos epidmicos: Tormentas de abortos que pueden llegar a un 20-30% en 2 semanas,

producindose en general a mitad de gestacin. En los meses posteriores podremos encontrar fetos momificados. Tiene lugar en explotaciones con escasa o nula prevalencia del parsito y animales entran de forma sbita en contacto con gran cantidad de ooquistes eliminados por el H.D.

Abortos espordicos: En explotaciones con baja prevalencia. La infeccin fetal no siempre

produce muerte del feto.

Los terneros infectados congnitamente desarrollan cuadros nerviosos de intensidad variable:

Bajo peso, ataxia, disminucin reflejos, incapacidad para incorporarse, extremidades flexionadas o hiperextendidas, exoftalmia o posicin asimtrica ojos.

No obstante, la mayor parte de los fetos infectados durante la gestacin van a sobrevivir y nacern congnitamente infectados pero clnicamente sanos

1. Neosporosis
CLNICA

(Neosporosis en perros)

Alteraciones musculares y neurolgicas Signos en funcin de la edad:

Adultos
Signos multifocales en SNC Polimiositis Miocarditis Dermatitis

Jvenes
Parlisis ascendente (ppal. miembros posteriores) Disfagia Parlisis de mandbula Flacidez muscular Atrofia muscular (Fallo cardaco) Focos de necrosis y mineralizacin de musc.

DIAGNSTICO
* D. Asertivo o clnico. H clnica, Fetos momificados, presencia de perros con sintomatologa,..

* D. Laboratorial.
* Examen histolgico (Necrosis, gliosis,..) D. Directo * Inmunohistoqumica * Cultivos celulares, IFD, PCR, ...

* IFI o AD (Usan TZ enteros: Ag de superficie) D. Indirecto * HAI, AL o ELISA (Usan Ag citoplamticos) * Otras: RIA, CIA, dot-ELISA o DIG-ELISA

1. Neosporosis
DIAGNSTICO
D. Directo
- Examen histolgico del SNC, miocardio, hgado y cotiledones placentarios. Necrosis celular, gliosis, encefalitis focal (materia gris de la mdula espinal). Miocarditis no supurativa. Hepatitis periportal y necrosis multifocal hepatocelular.

D. Indirecto
Sobre fluidos feltales o suero sanguneo. Los mtodos ms comunes son IFI, Inmunohistoqumica y ELISA

TRATAMIENTO Y CONTROL
9 NO tratamiento farmacolgico para prevenir la infeccin fetal por N. caninum. 9 NO tratamiento farmacolgico para la Neosporosis. Solo algunos estudios in vitro han obtenido interesantes resultados usando toltrazuril y su derivado ponazuril.

9 El control ha de basarse en medidas biolgicas encaminadas a limitar ambos tipos de transmisin (Horizontal y Vertical):

Eliminar animales infectados y reemplazar con seronegativos. NO dejar para reposicin hijas de vacas seropositivas. Realizar anlisis serolgicos precalostrales. Disminuir n de PERROS que cohabiten con el ganado. Controlar las poblaciones de roedores, aves, ... Usar salas de parto individuales.

9 NO existe en el mercado ninguna VACUNA eficaz para la prevencin de la Neosporosis bovina o contra la eliminacin fecal de ooquistes en el perro.

2. SARCOCYSTIOSIS
INTRODUCCIN
Enfermedad conocida hace relativamente poco tiempo (el ciclo se conoci en 1973) y en actual estudio por muchos equipos de investigacin, ya que an existen muchas LAGUNAS de conocimiento. La presencia de las distintas especies del gnero Sarcocystis es muy elevada, pero en escasas ocasiones se ha descrito la enfermedad asociada al parsito. Son parsitos muy DIFUNDIDOS en especies de abasto (herbvoros y omnvoros).

Otras denominaciones
SARCOSPORIDIOSIS: Esta es una denominacin tradicional y hace referencia a la presencia de esporos en la musculatura. Enfermedad de DALMENY (1961): ya que fue en esta localidad Estadounidense donde se detect, siendo su etiologa desconocida.

FAGER y JOMMSON en 1973 reprodujeron experimentalmente el ciclo de Sarcocystis fusiformis, fusiformis, S. ovicanis. ovicanis.

Importancia y Distribucin geogrfica

Importancia inicial ----- Confusin con quistes de Trichinella!!! La posibilidad de infecciones experimentales, ha permitido avanzar mucho en el conocimiento de los mecanismos de accin patgena, as como la virulencia de las distintas especies, cepas, etc., esto ha hecho que se considere un patgeno a tener en cuenta en la actualidad (S. bovicanis, S. porcifelis, S. ovicanis, S. capracanis). En la actualidad va adquiriendo una nueva importancia econmica al detectarse procesos morbosos causados por Sarcocystis que cursan con CUADROS NERVIOSOS con baja morbilidad y baja mortalidad, pero alto parasitismo.

2. SARCOCYSTIOSIS
INTRODUCCIN Importancia y Distribucin geogrfica
La distribucin es UNIVERSAL, pues no requieren caractersticas especiales de climatologa y de hospedadores para poder cerrar el ciclo. Prcticamente sin informacin acerca de las prdidas econmicas directas (decomisos de carnes y abortos) y mucho menos de las indirectas. FRECUENCIA: En ciervos el 76% de los jvenes y 95% de adultos. En ovejas adultas el 100% de Extremadura. En cabras adultas, el 96%. En cerdos, el 40% (Centroeuropa), el 35% (Len), 99-100% (Granada y Zaragoza) y 85% (Galicia) En caballos, 90% de adultos

Hospedadores
Afectan a un amplio espectro de especies:
A los CARNVOROS (que son los Hospedadores definitivos), con

localizacin intestinal.
A los HERBVOROS (que son los Hospedadores intermediarios), con

localizacin en tejido muscular.

2. SARCOCYSTIOSIS
ENCUADRE TAXONMICO
Reino Protozoa (Goldfuss, 1818) Owen, 1858 Subreino Biciliata Infrareino Alveolata Cavalier-Smith, 1991 Phylum Myzozoa Cavalier-Smith & Chao, 2004 Subphylum Apicomplexa Clase Conoidasida Levine, 1988 Subclase Coccidiasina Leuckart, 1879 Orden Eucoccidiorida Lger & Duboscq, 1910 Suborden Eimeriorina Lger, 1911 Familia Sarcocystidae Poche, 1913 Subfamilia Sarcocystinae Poche, 1913 Gnero Sarcocystis Lankester, 1882

ETIOLOGA
Hospedador Intermediario Parsito S. tenella S. arieticanis S. gigantea S. medusiformis S. cruzi S. hirsuta S. hominis S. capracanis S. moulei S. hircicanis S. miescheriana S. suihominis S. porcifelis S. bertrami S. fayer *S. falcatula(= neurona) Distribucin geogrfica Mundial Mundial ? Mundial Australia, Europa Mundial Mundial Europa Mundial Europa, Asia menor Eurasia Mundial Europa Rusia Europa, frica del Norte EEUU, Centroeuropa Amrica del Norte, Brasil Patogenicidad +++ + ? +++ + + +++ ? + ++ ++ ? +++ Hospedador definitivo Perro Perro Gato Gato Perro Gato Hombre Perro Gato Perro Perro Hombre Gato Perro Perro Zarigeya

OVEJA

VACA

CABRA

CERDO

CABALLO

*S. falcatula produce la Sarcocistiosis nerviosa equina, en la que el caballo se considera hospedador aberrante (hospedadores intermediarios reales son aves)

2. SARCOCYSTIOSIS
ETIOLOGA
Los pseudoquistes localizados en el H.I., constituidos por merontes en distintos estadios de evolucin, alojados en una vacuola parasitfora de la clula hospedadora. Se localizan en las clulas endoteliales de los vasos sanguneos de distintos rganos y tejidos, con preferencia en el glomrulo renal. Dar lugar a numerosos merozotos. Los quistes localizados en musculatura estriada, aunque tambin en SNC. Son fusiformes y generalmente microscpicos. Hay excepciones como S. gigantea que es globoso y macroscpico. La pared qustica sirve de identificacin de las especies (grosor, prolongaciones digitiformes, en empalizada, a modo de flecos, etc). En el interior se observan septos y numerosos bradizotos.

QUISTES MACROSCPICOS

Los ooquistes son de tipo isosporoide (2 esporocistos). Con cubierta fina muy delicada, rompindose con facilidad ya en el trnsito intestinal (. En coprologa esporocistos libres!!). Estos esporocistos de 12-16 x 9-11 m estn esporulados, elipsoides, sin cuerpo de Stieda y con 4 esporozoitos.

EPIDEMIOLOGA
Hospedador Definitivo: Contagio: Ingestin de carne con quistes: CARNIVORISMO. Localizacin: Lmina propia del intestino delgado. Reproduccin: Solamente sexual (gametogonia). Tipo ooquiste: Isosporoide.

Hospedador Intermediario: Contagio: Oral pasivo (agua o alimentos contaminados). Localizacin: Fase proliferativa con pseudoquistes en cels. endoteliales de las arterias. Fase qustica en musculatura con bradizoitos en interior. Reproduccin: Asexual (merogonia).

SARCOCYSTIS- Ciclo biolgico

Los bradizoitos infectan el tej. intestinal del H.D., se transforman en gametocitos y finalmente producen ooquistes (gametogonia).

El H.D. se infecta ingiriendo quistes con bradizoitos.

H.D.
Quistes septados con metrocitos (inicio) y bradizoitos (maduros) en musculatura estriada

H.I.
Ooquistes salen con las heces al m.a. Pseudoquistes en cls. endoteliales vasos sanguneos de diversos rganos con merozoitos

Ooquistes son ingeridos por el H.I.

Salen los esporozoitos que infectan los tejidos del H.I.

Periodo de prepatencia en perro: 8-12 das Periodo de patencia: 1 mes

2. SARCOCYSTIOSIS
EPIDEMIOLOGA
Resistencia de los quistes: Los quistes sobreviven: Durante 18 das a 2C. Durante 3 das a -20C. Durante 55-6 minutos a 45C. Para asegurar la muerte e inviabilidad de los bradizoitos en el interior de los quistes en las piezas crnicas son necesarios al menos 10 minutos minutos a 6565-70C.

PATOGENIA
Factores que influyen en la patogenia: A) Dependientes del parsito: 1.- Especie. Las ms patgenas son S. tenella, S. cruzi y S. capracanis. 2.- Dosis infectante. 3.- Ritmo de infeccin. B) Dependientes de los hospedadores: 1.- Edad, los adultos estn ms parasitados (jvenes ms sensibles). 2.- Estado nutricional. 3.- Estado sanitario. 4.- Estrs 5.- Gestacin o lactacin.

Mecanismos de accin patgena:

H.D.
GAMETOGONIA a nivel del EPITELIO INTESTINAL (en ltimas porciones del duodeno y primeras del yeyuno) DESCAMACIN de CLULAS, quedando al descubierto la lmina propia con prdida del epitelio de absorcin provocando ENTERITIS DESCAMATIVA

2. SARCOCYSTIOSIS
Mecanismos de accin patgena:

H.I.
1.- Multiplicacin rpida de los merozotos en los endotelios vasculares (hgado, bazo, etc.) 2.- Invasin masiva de musculatura y tejido nervioso, con formacin de quistes y crecimiento de stos. 3.- Accin de una sustancia denominada SARCOCISTINA, que no se sabe si su naturaleza es TXICA o no. Endoarteritis y aumento permeabilidad vascular

Miodistrofias (problemas masticacin, deglucin, miccin, locomocin, etc)

Administradas va endovenosa producen hemorragias, parlisis, edemas e incluso muerte

Mecanismos de accin patgena segn fase de la enfermedad:

FASE AGUDA, AGUDA, que corresponde con los daos a nivel endotelial (vasculares) con

hemorragias y anemia.

FASE CRNICA, CRNICA, que coincide con la instauracin de los quistes en musculatura o en

SNC. Actan mediante accin MECNICA, provocando infiltracin de clulas mononucleares y reaccin del hospedador intentando aislar los quistes formndose un granuloma parasitario con aparicin posterior de clulas gigantes en zonas de degeneracin qustica. En las fibras musculares parasitadas se producir una degeneracin zienkeriana, con posterior restauracin mediante fibras de colgeno. La lesin se define como una MIOSITIS CRNICA ESCLEROSANTE. En el SNC se produce una encefalitis no purulenta, indicada por la presencia de manguitos perivasculares, movilizacin de clulas de glia, zonas de necrosis, satelitosis y diferenciacin piramidal de clulas.

2. SARCOCYSTIOSIS
CLNICA
Sarcocistiosis aguda
Se ha constatado de forma experimental inoculando hasta 100.000-200.000 esporocistos: Signos generales: Fiebre, decaimiento general, apata, tristeza, polipnea, taquicardia, prdida de peso (a partir de las 3 semanas), etc. Sntomas cutneo-mucosos: Alopecias en vacunos, lana quebradiza, erosiones interdigitales. Mucosas plidas. Linfoadenitis perifrica generalizada. Sntomas nerviosos: Alteracin de la conducta, estupor, excitabilidad, ataxia, nistagmos, paso galopante, etc. Otros sntomas (no constantes): Exoftalmia, sialorrea, edema mandibular, hematuria, etc.

Sarcocistiosis crnica
Determinada por la localizacin muscular de los quistes. Son signos inespecficos y muy discretos: 9 Transtornos en la masticacin y deglucin de los alimentos 9 Alteracin en la marcha 9 Transtornos en la miccin 9 Bloqueos atrio-ventriculares

H.D. (perros, gatos, zorros, hombre, etc)

9 Hay una ligera emaciacin. 9 Diarreas acuosas o mucosas que remiten al poco tiempo (autolimitantes)

ANALTICA (H.I.)
Anemia, con disminucin del hematocrito. Preferentemente normocrmita y

normoctica. No hay alteraciones de UREA, Calcio (Ca) y fsforo (P), y s estn doblados los valores de Magnesio (Mg). Protenas totales que frecuentemente estn disminuidas (hipoalbuminemia) hasta la 7-8 semana, a partir de la cual se incrementa por aumento de las gammaglobulinas. Enzimas sricas LDH, CPK y GOT suelen estar aumentadas en las primeras 4-5 semanas.

2. SARCOCYSTIOSIS
CLNICA
Lesiones
HOSPEDADOR DEFINITIVO: Enteritis catarral aguda. HOSPEDADOR INTERMEDIARIO:

INTESTINO: Enteritis eosinoflica. PULMN: Neumona y bronconeumona. Edema pulmonar. HGADO: Necrosis y microgranulomas. Cirrosis en estados avanzados. BAZO: Esplenomegalia, hiperplasia folicular. GANGLIOS: Hipertrofia folicular. Linfoadenitis catarral. VEJIGA URINARIA: Hemorragias (quistes en musculatura estriada). APARATO REPRODUCTOR: Endometritis. SISTEMA NERVIOSO CENTRAL: Encefalitis no purulenta. CORAZN: Hemorragias endocrdicas, edema, ndulos blanco-nacarados en punta. MUSCULATURA ESTRIADA: Miositis esclerosante crnica. Miodistrofia.

DIAGNSTICO

HOSPEDADOR INTERMEDIARIO:
CLNICO: No vale de mucho, pues los sntomas son inespecficos DIRECTO o INDIRECTO: ANIMAL VIVO: Serologa: Hemaglutinacin indirecta (utilizando bradizotos). Biopsia muscular (cortes y tincin con hematoxilina-eosina y digestin artificial-Trpsica). ANIMAL MUERTO: Macroscpicos: Comprensin en placas. Microscpicos: Cortes histolgicos y digestin trpsica artificial (Mtodo de ERBER).

HOSPEDADOR DEFINITIVO:
Coprologa (Ver ooquistes o esporocistos).

2. SARCOCYSTIOSIS
TRATAMIENTO
HOSPEDADOR DEFINITIVO: Sulfamidas y amprolio como preventivos y
curativos.

HOSPEDADOR INTERMEDIARIO: Dada la variedad de hospedadores y

especies parsitas, la efectividad de un tratamiento es variable, con poca eficacia frente a las formas qusticas. Se aconseja el uso de: Amprolio o salinomicina durante 2 semanas. Halofuginona durante 4 das. Oxitetraciclina en inyeccin intravenosa. En modelos experimentales se ha visto que la asociacin de sulfaquinoxalina con pirimetamina es efectivo contra todas las formas evolutivas, incluida la qustica.

PROFILAXIS Y CONTROL
Medidas de higiene (desparasitacin de perros y gatos). Impedir la existencia de perros, gatos y zorros incontrolados. Destruir cadveres y decomisos contaminados. Ingerir carnes bien cocidas o asadas. Evitar la fertilizacin del campo con aguas fecales