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INFLUENCIA DE MICRONUTRIENTES EN METABOLISMO DE ENZIMAS ANTIOXIDANTES EN GIRASOL (Helianthus Annaus L.) BAJO LA INFLUENCIA DEL ESTRS, CAUSADO POR SEQUA

Autores: Rahimizadeh M., Habibi, D.2, Madani, H., Mohammadi, G.N., Mehraban, A. and Sabet,
A.M.

Resumen:
La superxido dismutasa (SOD), catalasa (CAT) y glutatin peroxidasa (GPX) son enzimas antioxidantes que tienen papel importante en el metabolismo especies reactivas de oxgeno (ROS) y la defensa contra dao por estrs oxidativo. Actividad antioxidante enzimas aumenta en clulas de plantas como respuesta a la ambiental subraya. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de los micronutrientes aplicacin en el metabolismo de la enzima antioxidante (SOD, CAT y GPX) en girasol bajo estrs por sequa. Este experimento se llev a cabo a Golmakan Agricultura Research Station (Irn) en 2005, el uso de parcelas divididas al azar completar el diseo de bloque con cuatro repeticiones. El riego es un factor principal en tres niveles (tensin normal, baja y alta tensin) y micronutrientes seis tratamientos (control, Fe, Fe + Zn, Fe + Zn + Cu, Fe + Zn + Cu + Mn, Fe + Zn + Cu + Mn + B) como sub-parcelas dentro de las parcelas principales. Fertilizantes de base (N, P, K) y tratamientos de micronutrientes tambin utilizados segn sea necesario sobre la base de los suelos prueba. Los resultados mostraron que la actividad de estas enzimas fue significativamente diferente (a = 5%) entre los tratamientos de control y el estrs. Las enzimas antioxidantes Las concentraciones se incrementaron en 11.31% bajo gran estrs. Tambin haba diferencias significativas (a = 5%) entre los tratamientos control y micronutrientes en virtud de diferentes concentraciones de la enzima. Las enzimas concentraciones de antioxidantes se incrementaron a 48-89% a nivel con Fe + Zn + Cu + Mn tratamiento. La resultados mostraron que en condiciones de sequa micronutrientes solicitud aumentar resistencia a la sequa en girasol.

1.- Introduccin:
El estrs ambiental afecta adversamente el rendimiento de plantas y con frecuencia resulta en reducciones significativas en el rendimiento del cultivo y la calidad en todo el mundo (Boyer, 1982). La exposicin de las plantas a estreses ambientales tales como el estrs por sequa, estrs por calor, estrs por fro, estrs salino y enfermedades de las plantas puede resultar en la produccin de especies reactivas de oxgeno (ROS) que contribuye a la disminucin del rendimiento de la planta (Grill et al., 2001). El aumento de la evidencia indica que el dao oxidativo a crticos compuestos celulares resultados del ataque de ROS. Una variedad de mecanismos enzimticos y no enzimticos que metabolizan ROS existir en especies qumicas menos perjudiciales (Jaing y Huang, 2001). Actividad antioxidante enzimas aumenta en las clulas vegetales como una respuesta al estrs ambiental. Estas enzimas tienen un papel importante en la defensa contra el estrs oxidativo (Cakmak, 2000; Foyer, 2001; Jiang y Huang, 2001; Blokhina et al, 2003; Habibi et al, 2004). Halliwel y Cutteridge (1990) informaron que en cultivos de semillas oleaginosas tales como el girasol, el contenido de radicales libres tales como superxido y el perxido en el tejido aumentar en condiciones de estrs. Bailly et al. (2000) informaron que en el girasol, el contenido de la superxido dismutasa (SOD), catalasa (CAT), glutatin reductasa (GR) y malondialdehdo (MDA) en semillas aumentar bajo condiciones de estrs por sequa. Dentro de una clula, la superxido dismutasa (SOD) constituye la primera lnea de defensa contra ROS (Alscher et al., 2002). Aqu hay tres tipos distintos de SOD clasificados sobre la base del cofactor de metal: cobre / cinc (Cu, Zn_SOD), manganeso (Mn_SOD) y hierro (Fe_SOD) isozima (Bannister et al, 1987.). La catalasa (CAT) es un hemo-contaning enzima que cataliza la dismutacin del perxido de

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hidrgeno en agua y oxgeno. La glutatin peroxidasa (GPX) tiene un residuo de selenocistena de selenio en cuatro ramas unidad que es muy importante para la actividad enzimtica. GPX cataliza la reduccin del perxido de hidrgeno por el GSH (glutatin reducido), protegiendo as las clulas del dao oxidativo (Esterbauer et al., 1992). Los iones metlicos tales Fe, Zn, Cu, Mn y Mg son micronutrientes esenciales minerales y cofactores de enzimas mayora de los antioxidantes. Marschener (1986) y Cakmak et al. (1999) indicaron Zn es un cofactor de ms de 300 enzimas y protenas implicadas en la divisin celular, el metabolismo de cidos nucleicos y la sntesis de protenas. Adems, los rendimientos de los cultivos son a menudo limitados por los niveles bajos de micronutrientes del suelo mineral en suelos calcreos de zonas ridas y semiridas regiones (Graham et al, 1992;.. Cakmak et al, 1999). Cakmak (2000) especul que el estrs deficiencia de Zn puede inhibir la actividad de un nmero de enzimas antioxidantes. El objetivo de este estudio fue investigar el efecto de la aplicacin de micronutrientes en el metabolismo de las enzimas antioxidantes de aceite de girasol en condiciones de sequa.

2.- Metodologa:
Este experimento se llev a cabo en la Estacin de Investigacin de Agricultura Golmakan (Irn) en un suelo franco tiene: 0,03% de contenido de nitrgeno total, 8,8 ppm de fsforo (P2O5), 230 ppm de potasio (K2O), 0,4% de materia orgnica, 3,1 ppm de Fe, 0,52 ppm Cu, 0,3 ppm Zn, Mn 6,74 ppm, 0,5 ppm B y un pH = 7,7. El Registro de cultivar hbrido Se utiliz como material de planta. En este estudio el uso de parcelas divididas completamente al azar diseo de bloque, con cuatro repeticiones. El riego es un factor principal en tres niveles (normal, baja tensin y alta tensin) y seis tratamientos de fertilizacin (control, Fe, Fe + Zn, Fe + Zn + Cu, Fe + Zn + Cu + Mn, Fe + Zn + Cu + Mn + B) como sub-parcelas dentro de la principal parcelas. Los tratamientos de riego de la siguiente manera: 1. El riego despus de la evaporacin de 60 mm Clase de Pan A (sin estrs) 2. El riego despus de la evaporacin de 120 mm Clase de Pan A (tensin baja) 3. El riego despus de la evaporacin de 180 mm de Pan Clase A. Fertilizantes bsicos (N, P, K) y los tratamientos de micronutrientes se utilizaron como se requiere en la base de la prueba del suelo. El hierro se utiliza como FeSO4 a razn de 120 kg ha-1, como zinc ZnSO4 a razn de 70 kg ha-1, como cobre CuSO 4 en la tasa de 40 kg ha-1, manganeso como MnSO4 a razn de 60 kg ha-1 y el boro como HBO3 a razn de 30 kg ha-1, cada mezclado con el suelo antes de la siembra. Veinte hojas fueron seleccionadas al azar de cada parcela (en floracin) para el ensayo enzimtico y la medicin de protenas. Todas las muestras se transportaron inmediatamente al laboratorio. Todos los datos se sometieron a anlisis de varianza para cada carcter usando MSTAT-C software. Preparacin de la muestra para el ensayo de enzima y medicin de protenas Las hojas de cada planta se lavaron con agua destilada y se homogeneiz en 0,16 M tampn Tris (pH = 7,5) a 4 C. Entonces, 0,5 ml de solucin homogeneizada total fue utilizado para la determinacin de protenas por el Lowry et al. (1957) mtodo. Basado en la cantidad de protena por volumen de solucin homogeneizada, las siguientes enzimas eran se ensaya en el volumen que contiene una concentracin de protena conocida para calcular las actividades especficas de las enzimas. Superxido dismutasa (SOD) La actividad se midi sobre la base de Misra y Fridovich (1972), en la que l se midi la actividad sobre la base de su capacidad para inhibir la oxidacin de cadena de radicales libres en el que O2 era un radical de cadena de multiplicacin y de la autooxidacin de la epinefrina (0,25 mM) fue inducida. Estndar de SOD se utiliz para la calibracin de la actividad.

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La catalasa (CAT)

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Actividad de la catalasa se midi a 25 C como se ha descrito previamente por Paglia y Valentine (1987), que utiliza perxido de hidrgeno como sustrato y 1 k de catalasa actividad se define como la constante de velocidad de la reaccin de primer orden. Glutatin peroxidasa (GPx) La actividad se midi por el mtodo de Paglia y Valentine (1987) en la que 0,56 m (pH = 7) tampn de fosfato, 0,5 M EDTA, 1 mM de NaN3, 0,2 mM NADPH eran a la solucin se extrajo. GPX cataliza la oxidacin del glutatin (GSH) por hidroperxido de cumeno. En presencia de la glutatin reductasa y el NADPH, la glutatin oxidado se convierte inmediatamente en la forma reducida con la concomitante la oxidacin de NADPH a NADP. La disminucin en la absorbancia a 340 nm fue midi con un espectrofotmetro.

3.- Resultados:
Los resultados mostraron que la actividad de estas enzimas (SOD, CAT, GPX) mayores en condiciones de sequa y hubo diferencias significativas (P <0,01) entre los niveles de actividad de la superxido dismutasa, catalasa y glutatin peroxidasa en los tratamientos de riego. Actividades de SOD, CAT y GPX se incrementaron en un 31%, 12% y 11%, respectivamente, en condiciones de sequa alto. Nuestros resultados estn de acuerdo con los resultados reportados por Malan et al. (1990), Bailly et al. (2000), Jiang y Huang (2001) y Habibi et al. (2004). La aumento simultneo de la actividad de estas enzimas contribuye a una disminucin de los efectos deletreos de H2O2 en condiciones de sequa. Tambin, el anlisis de varianza indic que haba diferencias significativas (P <0,01) entre los niveles de actividad de estos enzimas en los tratamientos de fertilizacin. Actividades de SOD, CAT y GPX se incrementaron por 89%, 69% y 48%, respectivamente, con el Fe + Zn + Cu + Mn tratamiento. El ms bajo la actividad de estas enzimas se obtuvo en el fertilizante no (control) de tratamiento. Hacisalihoglu et al. (2003) reportaron que bajo estrs deficiencia de Zn, actividad de Cu / Zn SOD disminuye porque Zn est directamente implicada en la expresin gnica y proteica sntesis. Adems, Cakmak (2000) reportaron que el estrs puede inhibir la deficiencia de Zn las actividades de un nmero de enzimas antioxidantes. De manera similar, Rahmati et al. (2004) encontrado que la actividad de SOD, CAT y APX (ascorbato peroxidasa) en exceso Mntreated aumento de las clulas en comparacin con el tratamiento control. Adems, los resultados de experimentos indicaron que la aplicacin de micronutrientes reduce los efectos del medio ambiente tensiones tales como el estrs por sequa y estrs salino (Wang et al., 2004). Se sabe que la cantidad y distribucin de la precipitacin y la diferenciacin de la temperatura son los factores principales que afectan el rendimiento de semilla y algunos componentes del rendimiento de girasol en las regiones ridas y semi-ridas. Por lo tanto, la aplicacin de micronutrientes en el campo tenda a disminuir los efectos de la sequa.