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UNIVERSIDADE ESTCIO DE S

LUCIANA HASTENREITER DAIANE MACHADO PABLO BAPTISTA GLACE KELLY

EXTRACAO DE DNA DA MUCOSA ORAL

RIO DE JANEIRO 2013

RESUMO

O objetivo deste relatrio o de observar e discutir, a utilizao de determinadas substancias na extrao de DNA a partir de clulas raspadas da mucosa oral, e a importncia biolgica da separao de suas molculas.. PALAVRA-CHAVE: DNA, helice

SUMRIO
Pg 1- INTRODUO ........................................................................................................... 4 2- MATERIAIS E MTODOS ........................................................................................ 2.1- MATERIAIS 2.2 - MTODOS 3- RESULTADOS ............................................................................................................. 4- DISCUSSO ................................................................................................................. 5- CONCLUSO .............................................................................................................. BIBLIOGRAFIA ..........................................................................................................

1 INTRODUO

H exatos 60 anos, numa quinta-feira, dia 25 de abril de 1953, a revista Nature trazia um artigo curto, assinado pelo americano James Watson e o britnico Francis Crick. O discreto texto marcava uma das mais impactantes descobertas da cincia moderna: a estrutura molecular do DNA, em forma de dupla hlice. O DNA j era conhecido desde o sculo 19, mas sua forma ainda era mistrio. Ao desvendar sua estrutura, Watson e Crick abriram caminho para entender como a molcula base da vida humana funcionava, como orquestrava a produo de protenas do nosso corpo e transmitia informaes genticas de gerao em gerao. Mas, ao contrrio do que muitos pensam, o modelo da dupla hlice proposto pelos cientistas no foi um sucesso imediato no meio cientfico. Somente quando o papel do DNA na sntese de protenas foi esclarecido, no final da dcada de 1950, que a comunidade cientfica passou a ter interesse pela sua estrutura. Em 1962, Watson e Crick ganharam por seu trabalho o prmio Nobel de Medicina, divido com o britnico Maurice Wilkins, que elucidou algumas das funes biolgicas associadas estrutura da dupla hlice. O trio ficou famoso no mundo todo, mas no sem deixar de lado outra personagem que teve papel importante na descoberta: a inglesa Rosalind Franklin. A cientista tambm estudava a estrutura do DNA em paralelo a Watson, Crick e Wilkins. Era inclusive colega desse ltimo no Kings College, em Londres. Independentemente, Franklin chegou concluso de que o DNA teria duas ou quatro hlices e props uma estrutura muito prxima a mais tarde sugerida por Watson e Crick. Em um famoso artigo, a contribuio de Franklin citada apenas de passagem como estmulo quela pesquisa. Franklin morreu de cncer alguns anos depois, em 1958, quatro anos antes do Nobel de Medicina pela descoberta da estrutura do DNA. Passados mais de 50 anos desse Nobel, o processo de escolha do prmio deixou de ser sigiloso. Agora abertas para o pblico, as cartas de indicao ao prmio revelam que Rosalind Franklin nem foi citada nas discusses. As cartas mostram ainda que Wilkins quase ficou de

fora, s sendo indicado por um carta, e que muitos cientistas envolvidos na escolha defendiam que a descoberta valesse o Nobel de qumica e no medicina. O modelo de Watson e Crick entrou para histria e gerou muitas outras descobertas na gentica. Mas, ainda hoje, o DNA continua surpreendendo a comunidade cientfica. Recentemente, novas estruturas de DNA foram descobertas. Organismos vivos armazenam todas as informaes genticas codificadas e contidas nos cidos nuclicos (DNA - cido desoxirribonuclico e RNA-cido ribonuclico). A molcula de DNA responsvel pelo armazenamento e transmisso da informao gentica. E

encontrado principalmente nos cromossomos nucleares e, em pequenas quantidades, nos cromossomos das mitocndrias e dos cloroplastos. Nos cromossomos das clulas eucariontes, o DNA esta associado a protenas bsicas, principalmente histonas. A molcula de DNA consiste em duas cadeias de nucleotdeos dispostas em hlice em torno de um eixo. Essa molcula se auto reproduz e sintetiza o RNA que atua na sntese de protenas. Cada nucleotdeo composto por um acar, uma base e um fosfato, o acar uma pentose do tipo desoxirribose no DNA e ribose no RNA. As bases so de 4 tipos A (adenina), C (citosina), T (timina), G (guanina) para o DNA. No RNA a base T (timina) substituda pela base U (uracila). Para as duas fitas se ligarem e enrolarem formando uma dupla hlice, as bases se conectam atravs de ligaes formando pontes de hidrognio entre as bases complementares (A e T, G e C no caso do DNA e no caso do RNA A e U). Quando ocorre a duplicao do DNA uma enzima separa as duas fitas da hlice, e a informao contida no DNA transferida para uma molcula de RNA, essa molcula muito semelhante ao DNA, porm constituda de um nico filamento e sua funo reproduzir a seqncia de um dos filamentos do DNA, atuando como intermedirio na construo de uma protena. Cada uma das hlices do DNA serve como molde para a construo do novo DNA. O passo dessas hlices e dirigido no sentido da esquerda para a direita. Diz-se que essas cadeias so antiparalelas. Em funo disso, em cada extremidade da molcula uma das cadeias polinucleotidicas termina em 3 e a outra em 5. Na hlice dupla, as bases unem-se por meio de pontes de hidrognio, principais responsveis pela estabilidade da hlice. Quando as pontes de hidrognio so rompidas- por exemplo pelo aquecimento do DNA em soluo-, os filamentos polinucleotidicos da hlice sofrem desnaturao, separando-se,, quando baixa a temperatura, eles se unem novamente. A desnaturao pelo rompimento das pontes de hidrognio pode ser completa ou parcial. Essa desnaturao ocorre mais cedo nas ligaes AT, que tem duas pontes de hidrognio, sendo as ligaes CG mais resistentes, pois tem trs pontes de hidrognio.

2 MATERIAIS E MTODOS

2.1 MATERIAIS

Espatula de madeira Celulas de mucosa oral Becker Tubo de ensaio grande Agua Sal de cozinha Detergente 01 colher de sopa Banho Maria 56 Gelo

2.1 MTODOS Experimento 01: Foram numerados 05 tubos de ensaio, adicionou-se em cada tubo, com o auxlio de uma pipeta, solues, como descritas abaixo e, aps a adio, homogeneizaram-se todos os tubos (tampou-se os mesmos com papel toalha e misturou-se). Em seguida, foram medidos o pH das solues com o auxlio de um medidor de pH de papel tornassol; classificando-as em cidas., bsicas e neutras.

3 RESULTADOS

4 DISCUSSO De acordo com Mahan, o DNA consiste de dois filamentos paralelos de nucleotdeos que se enrolam um em torno do outro, formando uma dupla hlice, esta por sua vez, se ligaria por pontes de hidrognio entre as bases. O DNA constitui os genes de todos os seres vivos, ele um polmero constitudo por macromolculas que carregam as informaes necessrias para a sntese de protenas. Por que se adiciona o detergente? Porque o detergente desestrutura as molculas de lipdeos presentes nas membranas celulares. Com a ruptura das membranas o contedo celular, incluindo as protenas e o DNA, solta se e dispersam se na soluo. A funo de algumas dessas protenas manter o DNA enrolado num espiral muito apertada. Por que se usa o lcool? Por que tem que ser gelado? Porque o DNA insolvel em etanol (lcool etlico). Quando as molculas so solveis em um dado solvente, elas se dispersam e no so, portanto, visveis. Quando as molculas so insolveis em um dado solvente, elas se agrupam, tornando se visveis. Quando mais gelado estiver o lcool, menos solvel o DNA vai estar. Por que no se pode ver a dupla hlice? Porque a estrutura de dupla hlice s pode ser visualizada de modo indireto e atravs de aparelhos sofisticados. O que se observa so milhares de fitas de DNA juntas. A adio do sal (NaCl) no incio da experincia proporciona ao DNA umambiente favorvel. O sal contribui com ons positivos e negativos. Os positivosneutralizam a carga negativa do DNA, e os negativos as histonas, permitindo que ocomplexo DNA+Histonas no se repila mais e ento se enovele. Se no fosse apresena do sal, ele poderia desintegra-se. Um outro fato, que o sal aumenta adensidade do meio, o que facilita a migrao do DNA para o lcool

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55 JUNQUEIRA, L. C. & CARNEIRO, J. Biologia CELULAR e Molecular. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 9. ed., 2012.

http://cienciahoje.uol.com.br/especiais/estrutura-do-dna-50-anos-de-uma-revolucao/dna-50anos/

5 CONCLUSO

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BIBLIOGRAFIA