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Efecto de los contaminantes atmosfricos sobre dos cultivos agrcolas; sanda y tomate .

111 La emisin de hidrocarburos voltiles y xidos de nitrgeno constituyen los compuestos claves, a partir de los cuales se genera el ozono en la troposfera. La produccin de ozono se debe, de modo simplificado a una reaccin que implica un equilibrio entre el N02 y el NO (SEINFIELD, 1989) segn la reaccin: NO2+hv-->N0+0 0+O2+M--> 03+M hv= fotn o cuanto de luz solar. M= molcula que absorbe la energa tras la formacin de los nevos enlaces El ozono, o sus precursores, pueden ser transportados por los vientos dominantes desde su origen en las zonas industriales o urbanas hasta zonas rurales, constituyendo un problema de contaminacin global, que se incrementa en las regiones del rea mediterrnea debido a la alta intensidad luminosa y a la mayor cantidad de horas de radiacin solar. En el este Peninsular hay zonas en las que las medias diarias durante los meses . de primavera y verano sobrepasan los l mites permitidos por la legislacin europea que se sitan en 65 microg/m3 (33 ppb) (GIMENO et al. 1994) Las primeras observaciones de reacclones de fitotoxicidad debidas al ozono en Espaa sobre cultivos agrcolas, se producen en 1987, detectadas en sanda de la variedad Toro, en la finca Migjom en el Delta del Ebro (Tarragona). Adems de los daos visibles detectados en las hojas, exista tambin una reduccin de nmero total de frutos as como de su contenido en slidos solubles (GIMENO et al. 1993, 1994). El ozono es absorbido principalmente por los estomas y una vez en el interior ds la clula, reacciona inmediatamente con los componentes celulares y su concentracin disminuye. No obstante, los pro ductos en los que se descompone el 03, principalmente radicales libres, son tan txicos o ms que la propia molcula de ozono. Las concentraciones ambientales de ozono afectan de manera particular al aparato fotosinttico, incluso antes de que se manifiesten los sntomas visibles. Las evidencias fisiolgicas de la accin del 03 se manifiestan en una reduccin en la absorcin del C02 debida a una alteracin de la conductividad estomtica y/o cambios en la actividad de la RuBisCO (ENYEDI et al. 1992; HASSAN et al. 1994). Adems se han detectado cambios en la permeabilidad celular debido a procesos de peroxidacin de lpidos que destruyen la integridad de las membranas (ROBINSON Y WELLBURN, 1983). El ozono tambin induce la senescencia foliar prematura en especies anuales y perennes (STow et al. 1992; TEMPLE et al. 1993; TEMPLE, 1999) as como una disminucin del contenido de nitrgeno foliar que es desviado desde las hojas viejas hasta las jvenes asociado a una prdida del enzima RUBSCO (PELL et al. 1992, 1994). As mismo, se producen modificaciones en el cociente tallo/raiz que tiende a aumentar tras las fumigaciones con ozono, debido a una traslocacin de fotoasimilados desde la raz hasta las partes areas de la planta ah donde son ms necesarios (PELL et al. 1994). Los efectos de los contaminantes atmosfricos se ven incrementados por las altas intensidades luminosas del verano, que predisponen a los cultivos a mayores daos por fotoinhibicin (inhibicin de la fotosntesis producida por la luz visible) y al aumento de los radicales libres en la clula. Se han realizado muchos ensayos para tratar de evitar los daos por ozono en las plantas mediante la adicin de diferente compuestos qumicos, incluidos antioxidantes, agentes antisenescentes, antitranspirantes, bioreguladores y pesticidas (DASS Y WEAVER, 1968; CARNAHAN et al. 1978; ORIUROD Y BECKERSON, 1986), con el fin de determinar el efecto de estos compuestos en la proteccin de las plantas frente al ozono. El fungicida benomilo y el antioxidante EDU han sido los principales compuestos con actividad antioxidante ms estudiados (MANNING, 1992). Ms recientemente se ha demostrado un mayor inters por los efectos que provocan las aplicaciones de sustancias de

otras familias qumicas, como es el cido ascrbico (MANo et al. 1997), las cuales estn ms relacionadas con los procesos de proteccin naturales de las plantas, Dada la importancia econmica y ecolgica que estn adquiriendo los efectos de los contaminantes atmosfricos en el rea mediterrnea, principalmente el ozono, la Conselleria d Agricultura de la Generalitat Valenciana ha instalado una serie de medidores fsico-qumcos en la Estacin Experimental Agraria de Carcaixent, con el fin de tener constancia de las concentraciones de O2, SO2 y NOx en esta zona de carcter agrcola. De esta forma se pueden estudiar los posibles efectos que estos contaminantes atmosfricos puedan tener sobre los cultivos agrcolas. Adems se dispone de una dotacin de 12 cmaras abiertas (OTCs) con los tratamientos de aire filtrado (CF), aire no filtrado (NF) y cmaras en las que se fumiga con una concentracin conocida de ozono. El objetivos de este trabajo es doble: 1) Evaluar los efectos de la intensidad luminosa sobre el cultivo de sanda en las variedades Toro y Reina de Corazones relacionndolas con las concentraciones ambientales de ozono. 2) Estudiar los efectos de la adicin del ditiocarbamato, zineb, con capacidad antioxidante, y evaluar su posible proteccin frente al ozono en el cultivo de tomate en la variedades Claudia y Maresme. Ambos objetivos se han abordado mediante el seguimiento del estrs oxidativo por medio de la peroxidacin de lpidos y la medida de la productividad. Materiales y mtodos Medida de los contaminantes atmosfricos Durante el tiempo en que duran las experiencias de campo, las concentraciones ambientales de 03, SO2, NO y N02 son continuamente registradas en la Estacin Agraria de Carcaixent utilizando medidores especificos para cada contaminante (DASIBI modelos 1008, 4108 y 2108 respectivamente). Material vegetal Las semillas de las plantas de sanda y de tomate se hicieron germinar sobre vermiculita y fueron mantenidas en invernadero durante tres semanas, hasta la obtencin de las cuatro primeras hojas. En este estadio se transfirieron a macetas con un sustrato comercial (Terraplant, BASF) y se colocaron en el campo hasta completar su ciclo biolgico. Tratamientos de campo 1) Diez plantas de sanda para cada variedad (var. Toro y Reina de Corazones) se expusieron directamente a la luz solar, que alcanza a medioda una intensidad de aproximadamente 1.800 micromol m-2 s-'. Idntico nmero de plantas se colocaron bajo la manta trmica en cuyo interior la intensidad luminosa es de aproximadamente 800 micromol m-2 s-'. Las plantas estuvieron en campo desde el 11 /Mayo/1998 hasta 11 /Septiembre/1998. 2) Diez plantas de tomate (var. Claudia y Maresme) se trataron foliarmente cada 10 das con una solucin acuosa de zineb a 2.5 g/I. Las plantas que no reciben zineb (diez plantas) se pulverizan con igual volumen de agua. El periodo de cultivo fue de 22/Junio/1998 a 8/Octubre/1998 para cada tratamiento y variedad. Determinacin de la biomasa El ltimo da de permanencia de las plantas en el campo se procedi a la recoleccin de los frutos y a su pesado. Se separ la parte rea de la planta de la parte radicular y se pesaron independientemente con el fin de calcular el cociente taI to/raz. Determinacin de la peroxidacin de lpidos El grado de peroxidacin se mide espectrofotomtricamente mediante la determinacin de la concentracin en los extractos de las hojas del compuesto malondialdehydo (MDA) segn el protocolo propuesto por Heath y Parker (1968) y siguiendo las modificaciones posteriores de Dhindsa et al. (1981). El MDA es formado tras las reacciones de los radicales libres con los lpidos de membrana. Resultados

Los valores de ozono (Figura 1) registrados en la Estacin Agraria de Carcaixent durante los meses de duracin de los cultivos (Mayo-Octubre) se sitan en torno a los 40 ppb (80 mmicro/m3 como media en 24 horas superando los lmites permi tidos en la UE. Los picos diarios de ozono en las horas de mxima radiacin solar alcanzan valores entre los 50-80 ppb. Los valores para el resto de contaminantes no superan los lmites recomendados por el MOPU que son de 30 ppb para el S02, sin lmites para el NO y de 104.6 ppb para el N02. En la Tabla 1 se presentan los datos obtenidos para el cociente tallo/raz, el peso medio de los frutos y la produccin total. El cociente tallo/raz se ve afectado por el rgimen de luz en el cual crecen las plantas de sanda. Las plantas crecidas

bajo manta, el cociente es menor que las plantas crecidas sin esta proteccin. El peso medio de los frutos (Tabla 1) es mayor en las plantas de sanda de ambas variedades crecidas bajo manta.

La diferencia en peso entre ambos tratamientos es mayor en la variedad Toro con un incremento del 50% en las plantas de sombra frente a un 13% obtenido en la Reina de Corazones. La produccin tambin es mayor en las plantas de sanda crecidas en la sombra, la mayor diferencia se presenta en la variedad Toro. En la variedad Reina de Corazones la produccin obtenida para ambos tratamientos es similar. En las plantas de tomate tratadas con zineb el cociente tallo/raz es menor en ambas variedades (Tabla 1). La mayor disminucin del cociente es para la variedad Maresme, con una disminucin del 37% frente a la variedad Claudia es del 14%. La produccin y el tamao de los frutos en las plantas de tomate tratatas con zineb es mayor para ambas variedades en las plantas tratadas con zineb. El incremento en la produccin es del 23% y del 16% para las variedades Claudia y Maresme respectivamente. La peroxidacin de lpidos medida como la concentracin de MDA (Tabla 2) es ms alta en las plantas crecidas al sol. La variedad Toro presenta mayor contenido en MDA que la Reina de Corazones tanto para las plantas situadas a la sombra como al sol. Ambas variedades difieren en la cantidad de peroxidacin inducida por la alta intensidad luminosa en porcentajes que aumentan un 87% y un 64% en el sol comparadas con las plantas crecidas en la sombra para las variedades Toro y Reina de Corazones, respectivamente. Los valores obtenidos en la concentracin de MDA son diferentes significativamente (p= 0.05) para ambas variedades y tratamientos. Las plantas de tomate tratadas con zineb (Tabla 2) presentan menor dao en los lpidos de membrana en ambas variedades. La concentracin de MDA en las plantas no tratadas con zineb es un 46% y un 65% mayor que las plantas tratadas con zineb para las variedades Claudia y Maresme respectivamente. Las concentraciones de MDA son significativamente diferentes entre tratadas y no tratadas. Discusin Los resultados sugieren que el sombreado es beneficioso para ambas variedades de sanda, presumiblemente porque se reduce la susceptibilidad al estrs lumnico, y por otra parte, debido a que debajo de la manta trmica la capa de Boundary (capa de aire estable que rodea a la hoja) es ms estable, dado que el aire se renueva menos, con to que la entrada de ozono dentro de las clulas es tambin menor. La variedad Reina de Corazones presenta una mayor capacidad de aclimatacin a las altas intensidades luminosas ya que presenta una menor peroxidacin de lpidos, es decir menor dao en las membranas celulares y, en definitiva, mayor peso de los frutos comparada con la variedad Toro, la cual ya ha sido catalogadas por otros investigadores (GIMENo et al. 1994) como sensible al ozono. El contenido de MDA representa el estado de peroxidacin de los lpidos de membrana y ha sido correlacionado positivamente con el estrs oxidativo producido por la exposicin de las plantas al ozono (RANIERI et al. 1996; YOSHIDA et al. 1994; PRICE et al. 1990). En condiciones de sol el cociente tallo/raz es mayor en ambas variedades. Un aumento en este cociente indica una disminucin de la parte radicular como consecuencia de un estrs que proviene de la parte area, ya que la raz tiene que traslocar fotoasimilados a las hojas en detrimento de su biomasa (PELL et al. 1994). La variedad Toro resulto ser la ms afectada en este cociente. Por otra parte, los sntomas visibles slo son observados en las hojas expuestas al sol y stos son ms acusados en la variedad Toro. Los trabajos pioneros de Kendrick y colaboradores (1962) demostraron que la adicin de zineb prevenia el dao por ozono, pero su efecto slo fue estudiado en base a la presencia o ausencia de sntomas visibles en las hojas. El tratamiento con zineb confiere a las plantas de tomate, de las variedades Claudia y Maresme, cierta resistencia al estrs oxidativo. Esto queda reflejado en una menor peroxidacin de los lpidos de membrana, mayor peso de los frutos y menor cociente taIlo/raz. Estos resultados estn de acuerdo con los publicados por otros autores utilizando el antioxidante EDU (MILLER et al. 1994). La adicin de zineb disminuye el estrs oxidativo provocado por el ozono y por las altas intensidades luminosas de los meses de verano. Un menor dao oxidativo repercute en ltima instancia en una mayor productividad. Dado que, tanto las plantas tratadas con zineb como las no tratadas, se encuentras expuestas a los mismos factores ambientales y la nica diferencia existente es la aplicacin foliar del zineb, se puede concluir que existe un efecto de proteccin sobre los lpidos de membrana que puede atribuirse a la accin del zineb. El efecto de este compuesto es similar en ambas variedades de

tomate, pero es necesaria la realizacin de un mayor nmero de experimentos con el fin de clarificar el porqu de su papel protector frente al estrs oxidativo. Conclusiones 1) El cultivo bajo manta beneficia a ambas variedades de sanda. 2) Las plantas de sanda crecidas directamente a la luz del sol presentan: mayor peroxidacin de lpidos y menor productividad. 3) La variedad de sanda Reina de Corazones presenta mayor tolerancia al estrs oxidativo que la variedad Toro. 4) Las plantas de tomate tratadas con zineb se encuentran mejor protegidas frente al estrs oxidativo. 5) El tratamiento con zineb aumenta el peso de los frutos y disminuye el cociente tallo/raz. 6) La concentracin de MDA es un buen indicador del estado de salud de las plantas. Agradecimientos: Este trabajo se ha podido realizar gracias a un proyecto de investigacin de la Conselleria d'Agricultura, Pesca i Alimentaci de la Generalitat Valenciana (CA-2389) y a la estimable ayuda de Miguel Juan Delhom.