INTRODUCCION

Todo organismo, an el ms simple, contiene una enorme cantidad de informacin. Esa informacin le permite tener caractersticas que lo diferencien de otros individuos. Como se sabe, todas esas caractersticas estn ubicadas en un conjunto de molculas orgnicas de gran tamao llamadas cidos nucleicos. En cada una de las clulas de un organismo encontramos dos molculas de este tipo: el cido desoxirribonucleico (ADN) y el cido ribonucleico (ARN). Ambos tienen propiedades y funciones muy diferentes en la maquinaria de la vida. Pero es el ADN el que lleva la batuta de la transmisin de informacin gentica de los padres a los hijos, llamada herencia. La gentica es la rama de la biologa encargada del estudio de la herencia. Luego de los estudios hechos por el Padre de la gentica, Gregor Mendel, en esta rama de la biologa se desarrollaron tcnicas que daran lugar a lo que hoy da se conoce como ingeniera gentica y nueva biotecnologa. Con estas tcnicas se han podido desarrollar una diversidad de investigaciones de notable importancia mdica, farmacutica, agrcola y ecolgica. En el 1917 se utiliz, por primera vez, el termino Biotecnologa. sta se define como un conjunto de tcnicas que utilizan organismos vivos o genes de stos, para producir o modificar un producto. Dentro de la biotecnologa incluimos la ingeniera gentica. Desde principios de siglo XX, la ingeniera gentica ha experimentado notables avances en la manipulacin y el control de la herencia. Uno de los principales descubrimientos en este campo ha sido la tcnica del ADN recombinante o ADNr, la cual ha permitido un notable avance en diferentes campos de aplicacin de la ciencia. Este trabajo se concentrar en la importancia y aplicaciones de este mtodo por medio de una exhaustiva investigacin bibliogrfica, con el objetivo de lograr un aprendizaje verdaderamente significativo acerca de los agigantados pasos con que avanza la ciencia en nuestros das.

DESARROLLO
El cido desoxirribonucleico es una macromolcula orgnica compuesta por dos cadenas de polinucletidos enrolladas en forma de doble hlice (ms o menos como un colocho). Esta molcula se encuentra principalmente en los ncleos de las clulas y tiene la funcin de regular todo lo que pasa en la clula y mantener las caractersticas hereditarias del ser vivo. El ADN est conformado por nucletidos que a su vez tienen tres componentes principales: un grupo fosfato, un azcar (desoxirribosa, de seis carbonos y una base nitrogenada, que puede ser cualquiera de las siguientes cuatro sustancias: adenina, guanina, citosina y timina. Estas bases tienen unas reglas de combinacin que solo permiten la unin de la adenina con la timina y la guanina con la citosina. Sin embargo, estas dos combinaciones dan lugar como en un alfabeto, o mejor dicho, como en la clave morse; a una increble cantidad de informacin, la cual incluso permite que una bacteria sea tan diferente de una planta o un mamfero. El ADN a su vez tiende a enrollarse formando estructuras llamadas cromosomas, en unin con protenas y alguna cantidad de ARN. Estos cromosomas estn divididos en unidades llamadas genes, las cuales se encargan de la codificacin de las caractersticas de los seres vivos. Los defectos de los genes pueden causar malfuncionamientos en el metabolismo del cuerpo, y es el origen de muchas enfermedades genticas. Como es posible deducir de lo anteriormente expuesto, un control sobre la transmisin de la

informacin gentica nos permitira la erradicacin de una gran variedad de enfermedades que tienen origen gentico. Es por este supuesto que, a nivel mundial, la comunidad cientfica ha sido partcipe del desarrollo de una rama de la biotecnologa conocida como ingeniera gentica. La ingeniera gentica puede definirse como "La manipulacin deliberada de la informacin gentica". Con el descubrimiento de la composicin del material gentico, en 1953, nace la biologa molecular y con ello se inicia una nueva etapa en la historia de la biologa. El ao de 1970 marca otra etapa importante: el comienzo de la manipulacin enzimtica del material gentico, y por consiguiente, la aparicin de la ingeniera gentica molecular. En la ingeniera gentica se busca el conocimiento de lo que significa cada uno de los genes en el mapa gentico. La manipulacin de genes a travs de la ingeniera gentica tiene un gran campo de accin. En las plantas ofrece la posibilidad de variar la expresin de genes especficos, que son importantes para un cierto proceso metablico. Adems, es posible aumentar o disminuir la manifestacin de un determinado gen dependiendo de la necesidad. Tambin es posible tomar una molcula de ADN de un organismo, sea un virus, una planta o una bacteria y llevarla al laboratorio para manipularla y ponerla de nuevo dentro de otro organismo. Por ejemplo, el gen para la insulina, que por lo general, slo se encuentra en los animales superiores, se puede ahora introducir en clulas bacterianas mediante un plsmido o vector. Despus, la bacteria puede reproducirse en grandes cantidades constituyendo una fuente abundante de la llamada insulina recombinante a un precio relativamente bajo. La produccin de insulina recombinante no depende, entonces, del variable suministro pancretico animal. Otros usos de la ingeniera gentica son el aumento de la resistencia de los cultivos a enfermedades, la produccin de compuestos farmacuticos en la leche de los animales, la elaboracin de vacunas, y la alteracin de las caractersticas del ganado. Existen muchos mtodos para lograr todos estos avances como la transferencia de genes, ADN recombinante, activadores genticos, clonacin, hibridizaciones, electroforesis, reaccin en cadena de la polimerasa entre otros. En el pasado se utilizaban en forma inconsciente los sistemas biolgicos, pero hoy en da, no solamente se selecciona uno de esos sistemas, sino que se disean teniendo en mente la posibilidad de manejar la informacin gentica e incorporarle la de otros organismos. Este trabajo se concentrar en uno de los sistemas ms usados a nivel mundial: el ADN recombinante. Con este nombre se conoce a una gran variedad de tcnicas que los bilogos moleculares utilizan para manipular las molculas de ADN uniendo segmentos de ADN en un lugar fuera de la clula u organismo, para luego introducirla en una clula y hacerla replicarse all, por s misma, o despus de haberse integrado en un cromosoma celular. ADN recombinante es una molcula que proviene de la unin artificial de dos fragmentos de ADN. Por lo tanto, la tecnologa de ADN recombinante es el conjunto de tcnicas que permiten aislar un gen de un organismo, para su posterior manipulacin e insercin en otro diferente. De esta manera podemos hacer que un organismo (animal, vegetal, bacteria, hongo) o un virus produzca una protena que le sea totalmente extraa.

El proceso para llevar a este mtodo tiene lugar en los laboratorios, donde por lo general se sigue el siguiente: 1. 2.

OBTENENCIN EL ADN PASAJERO. Este ADN contiene el gen deseado. PREPARACIN DEL ADN PASAJERO. A los dos extremos del fragmento de ADN pasajero se les
coloca la secuencia de nucletidos que reconocen la enzima de restriccin (esta es una protena que sabe dnde debe cortar una cadena de nuclotidos, para obtener una secuencia especfica).

3.

UNIN DEL ADN PASAJERO AL PLSMIDO O VECTOR. Para esto el plsmido, que es una molcula
circular de ADN extra cromosmico (distinta del genoma bacterial) y tiene la capacidad de reproducirse autnomamente, debe tener una secuencia que reconozca la enzima de restriccin que estamos usando. Se abre el plsmido con esta enzima y se le aade el ADN pasajero. Por la complementariedad de las bases nitrogenadas del ADN los extremos de uno se unirn al otro. El resultado es una molcula de ADN recombinante.

4.

TRANSFORMACIN. Las molculas recombinantes son introducidas a la clula husped. Esto puede
hacerse con un choque de temperatura o utilizando una pistola gentica o por microinyeccin.

5.

IDENTIFICACIN DE LAS CLULA CON EL ADN RECOMBINANTE. Muchos de estos plsmidos

poseen genes que otorgan resistencia a los antibiticos. Las bacterias suelen crecer en un medio de cultivo con antibiticos. De esta forma las clulas transformadas (que poseen el plsmido con el ADN recombinante) son las que sobreviven. Las que no poseen el plsmido modificado genticamente mueren en presencia del antibitico.
1

6.

SEPARACIN. La colonia de clulas que contienen el gen de inters es escogida o separada del
resto de las clulas, para que pueda multiplicarse.

7.

RECUPERACIN: El ADN pasajero ha provocado que se produzca la sustancia deseada, as que se

matan las clulas, se rompen sus membranas y se extrae la sustancia.

8.

PURIFICACIN. Se eliminan los residuos celulares que podran venir con la sustancia deseada,
como protenas, ADN, membranas, entre otras; para luego producir los preparados qumicos finales con que se har una vacuna, una medicina, o el producto final que se deseaba obtener para su uso o venta.

1.

Los plsmidos llevan consigo genes que transmiten particularidades fenotpicas a las

bacterias que los contienen, como la resistencia a los antibiticos. El plsmido pBR 322 es el ms ampliamente usado, es de pequeas dimensiones y lleva los genes para la resistencia a los antibiticos ampicilina (amp) y tetraciclina (tet).

Pero qu nos permite el ADN recombinante? Nos permite obtener muchas sustancias que tienen su origen en cdigos genticos especficos, en cantidades comerciales y a un bajo costo, utilizando individuos de una esecie no habituada a la elaboracin de tal producto. Algunos ejemplos de su uso son: La utilizacin de las bacterias de Escherichia Coli en la obtencin de Somatotropina Bovina, una hormona producida en la glndula pituitaria de las vacas que alarga el perodo de produccin mxima de leche en las reses, estimulando la produccin de leche desde tres hasta seis litros, si se sigue un ciclo de inyecciones subcutneas. La obtencin de la insulina recombinante en forma masiva y ms barata que si se obtuviera de la produccin pancretica de un animal, al introducir un gen productor de esa hormona en una bacteria. Produccin de medicinas con origen en agentes biolgicos obtenidos por recombinacin del ADN para el tratamiento de enfermedades de origen auto inmune. Estos agentes permiten retardar la accin de un sistema inmunolgico demasiado activo y as evitar la destruccin de tejidos. De esta forma se logra tratar enfermedades como psoriasis, varios tipos de artritis, enfermedad granulomatosa crnica, osteoporosis y esclerosis mltiple, entre otras; con menos efectos secundarios que con un tratamiento qumico.2 Produccin de somatotropina humana. Alteracin gentica de los organismos fermentadores de productos como la cerveza, para lograr nuevas clases de esta bebida. Obtencin del factor VII de la coagulacin sangunea, de una manera ms rpida y segura, para el tratamiento de la hemofilia. Pero, ciertamente la tcnica de recombinacin del ADN, tambin tiene sus posibles efectos dainos, pues al ser una tcnica que manipula la informacin gentica de los seres vivos, desata temores entre algunos. La mayora de esos temores ha sido rechazada de plano por los especialistas, pero sin

Los tratamientos basados en agentes biolgicos no son totalmente libres de efectos

secundarios, pues pueden generar sntomas similares a la gripe (fiebre, escalofros y dolor muscular y articular), prdida de apetito,nusea y/o vmito, fatiga, enrojecimiento, sarpullido y/o dolor en el sitio de la inyeccin, dolor de cabeza, posible reaccin alrgica a los anticuerpos que creados mediante la combinacin de clulas de humano y de ratn, posible reactivacin de infecciones latentes de tuberculosis con agentes anti-TNF (los agentes antiTNF suprimen a un tipo particular de clula inmunolgica, bloqueando de ese modo el proceso inflamatorio)

embargo todava persisten algunas dudas sobre la seguridad de este mtodo. Algunos doctores sostienen que el uso de la manipulacin gentica para la obtencin de vacunas, es imprevisible y peligroso:

"Desde un punto de vista ecolgico y ambiental, muchas vacunas transgnicas vivas de primera generacin son intrnsecamente impredecibles, y posiblemente peligrosas. No deberan ser utilizadas masivamente hasta tanto no se hayan aclarado una serie de problemas. Los riesgos y peligros estn ciertamente ms cerca del reino de lo posible, y por el Principio de Precaucin deberan estar sujetos a medidas preventivas, no obstante, se acta como si no existieran riesgos aduciendo que stos no estn apoyados por investigaciones experimentales o epidemiolgicas. Pero esas investigaciones no se han llevado a cabo".
3

Adems de estas interrogantes sobre la imprevisibilidad de las vacunas transgnicas existen otras relacionadas con los problemas planteados por algunos contaminantes ambientales conocidos como xenobiticos. Los xenobiticos pueden tener dos posibles impactos en las vacunas basadas en ADN recombinante: Algunos xenobiticos pueden actuar como mutgenos pueden haciendo que el ADN desnudo se escape o se libere con su secuencia o estructura cambiada, influyendo en la capacidad de clulas y organismos de asimilar ADN y facilitando el establecimiento a largo plazo en los ecosistemas de formas que son totalmente impredecibles. Algunos xenobiticos pueden afectar la membrana celular y/o las funciones intracelulares de tal forma que podra pensarse que llegan a influir en la capacidad de las clulas de absorber y transferir ADN desnudo. Por ejemplo, los xenobiticos que imitan hormonas o afectan las condiciones de los sistemas de mamferos, pueden cambiar las posibilidades tanto de asimilacin como de establecimiento de cidos nucleicos externos en animales y personas. Esto provocara que una terapia basada en ADN recombinante termine en algo imprevisto. Otro de los riesgos que se corren, como con todo descubrimiento cientfico, es la mala utilizacin del mtodo de recombinacin de l ADN, ya sea intencionalmente o por descuido. Por citar un ejemplo de lo anteriormente expuesto: Qu pasara si un cientfico combinara los genes relacionados al cncer con un virus como el de la influenza? A pesar de estas posibles situaciones, no se puede obviar que este mtodo resulta bastante beneficioso para la humanidad, pues permite y permitir la obtencin de numerosos productos que mejorarn la vida por mucho tiempo. Incluso resulta seguro en cuanto a que las bacterias genticamente modificadas son diseadas para que no puedan sobrevivir fuera del laboratorio, por lo que si se liberan al medio ambiente mueren, pues son dependientes de las condiciones del laboratorio.

Terje Traavik, "Un hurfano de la ciencia: los riesgos ambientales de las vacunas

transgnicas", departamento de Virologa y Microbiologa Mdica de la Universidad de Troms, Noruega

CONCLUSIONES De este trabajo se logran extraer las siguientes conclusiones: A. La tcnica del ADN recombinante es una herramienta de la biotecnologa moderna que permite el uso del ADN para la elaboracin de sustancias que necesita la medicina. B. El ADN recombinante, o ADN recombinado, es una molcula de ADN formada por la unin de dos molculas de diferente origen. C. Esta tcnica tiene muchos beneficios, pues permite obtener ciertas protenas a bajo costo.

D. Tambin tiene sus detractores que opinan que su uso no es cien por ciento seguro. E. Entre los peligros que se pueden enfrentar con est tcnica est la contaminacin con agentes xenobiticos, que pueden causar un desequilibrio en la molcula de ADN recombinante, comprometiendo el resultado del proceso.