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SEGURO SOCIAL DE SALUD ESSALUD

CONCURSO: PREMIO KAELIN

TITULO DE LA INVESTIGACIN:

EFECTO DEL ACEITE DE Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) SOBRE LA HIPERCOLESTEROLEMIA E HIPERTRIGLICERIDEMIA EN PACIENTES CON HIPERLIPIDEMIA MIXTA DEL CAMEC-IQUITOS,2009.

SEUDNIMO: AMUI-O

LUGAR Y FECHA DE PRESENTACION:

LIMA, 29 DE ABRIL 2011

i. INDICE Pgina

INTRODUCCIN RESUMEN CAPITULO I Planteamiento del problema A. Problemtica B. Delimitacin de la investigacin C. Justificacin D. Limitaciones E. Objetivos CAPITULO II Fundamentacin terica CAPITULO III A. Hiptesis y variables B. Diagrama de variables C. Definicin operacional de variables D. Indicadores de las variables CAPITULO IV A. Metodologa de la investigacin B. Tipo de investigacin C. Poblacin y muestra

01 05

07 07 08 08 09 09

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Materiales y mtodos D. Tcnicas en la recoleccin de informacin E. Resultados F. Discusin de resultados G. Conclusiones H. Recomendaciones Anexos Bibliografa

32 40 42 47 57 58 59 101

ii.

LA INTRODUCCION.

Ante el inters de la Organizacin Mundial de la Salud por el estudio de plantas medicinales, considerando que el Per tiene una amplia cultura en su uso tradicional y teniendo encuentra que las

enfermedades cardiovasculares ocupan el segundo lugar dentro de las prioridades sanitarias del Seguro Social de Salud-EsSalud; el Instituto de Medicina Tradicional- IMET de EsSalud como parte de su misin y visin, consider materia de estudio a una especie de la Amazonia Peruana, llamada sacha inchi (Plukenetia volubilis

Linneo) la cual posee semillas de las que se obtiene aceite y harina de uso frecuente en la alimentacin y la medicina tradicional de las comunidades nativas de la Amazonia (1). El Dr. Antnez de Maylo (1976), en un viaje de recuperacin de plantas silvestres endmicas alimenticias, hall en la provincia de San Martn (Per) unas semillas denominadas sacha inchic, man del monte y/o man silvestre, que eran consumidas tostadas como man, o hervidas como si fuera mote o descascaradas, eran utilizadas cual grasa en la preparacin de las viandas (2). Actualmente la humanidad se ha distanciado de la alimentacin saludable trayendo como consecuencia enfermedades crnicas como ateroesclerosis, hipertensin esencial, obesidad, hiperlipidemias, diabetes, artritis y otras enfermedades autoinmunes, y muchos canceres, especialmente de mama, colon y prstata. Por supuesto

hay que considerar en adicin a la dieta, el estilo de vida sedentaria y exposicin a sustancia nocivas que interaccionan con procesos bioqumicos controlados genticamente conduciendo a enfermedades crnicas(3). Las enfermedades cardiovasculares representan la primera causa de muerte en el mundo y, segn las previsiones de la Organizacin Mundial de la Salud, esta situacin se agravar en los prximos aos como consecuencia de la adopcin de los hbitos de vida occidentales en los pases en vas de desarrollo (4). Ante esta situacin, se extiende la necesidad del llamado mercado para la salud que implica caminos para prevenir las denominadas enfermedades de la dieta occidental. Por lo anterior, se ha incrementado los estudios cientficos sobre los efectos de los componentes de los alimentos, sea como parte de su contenido nutricional o sin l. Esto ha llevado a la industria alimentaria al desarrollo de nuevos productos alimentarios con los cuales, no slo se ganen mercados sino se satisfagan las expectativas de proteccin de la salud de los consumidores. En este campo se encuentran los llamados alimentos funcionales en los que, como parte de las materias primas que se proponen, se utilizan los vegetales como fuentes de omega 3 ( - linolnico) y de un equilibrio adecuado omega 6 / omega - 3; indispensable para la salud humana (3). En ese contexto tenemos a una especie peruana llamada sacha inchi (Plukenetia volubilis L.), que brinda un aceite con alto contenido de omega 3 ( - linolnico) y especialmente provee una proporcin

adecuada de cidos grasos linoleico / - linolnico. Desde el ao 2008, el Instituto de Medicina Tradicional - IMET ha venido realizando una serie de estudios multidisciplinarios con la especie sacha inchi. El departamento de Etnobotnica del IMET, se encarg de los estudios taxonmicos, descripcin botnica y seguimiento de la cosecha de semillas; el departamento de Farmacognosia del IMET, en

coordinacin con el Centro de Investigacin POS Pilot Plant Corp. de Canad determaron las caractersticas fsico-qumicas (parmetros de calidad) y composicin qumica del aceite de sacha inchi. As

tambin este Departamento se encarg de la supervisin y asesoramiento de la produccin de este aceite. El departamento de Farmacologa y Toxicologa del IMET, realiz los estudios de genotoxicidad, toxicologa aguda y subcrnica con evidencia

histolgica, demostrando que el aceite es inocuo. Este Departamento tambin demostr el efecto del aceite sobre el trnsito intestinal, efecto inmunoestimulante, hipolipemiante y anti-inflamatorio en animales de experimentacin. Todos estos estudios y la presente investigacin se realizaron con el aceite de sacha inchi que corresponde al nombre comercial de

Nutraceite Omega-3 De IMET, el cual cuenta con un Registro sanitario como alimento y un Registro de propiedad industrial a favor del Seguro Social de Salud-EsSalud, expedido por INDECOPI. Su peculiar composicin qumica junto con las evidencias de su efecto hipolipemiante y antiinflamatorio, nos permiti avizorar en el aceite de

sacha inchi a un alimento funcional con propiedades potenciales para afectar el riesgo y desarrollo de enfermedades cardiovasculares. El presente trabajo muestra los primeros indicios de que adicionar aceite de sacha inchi a la dieta estndar de cambios de estilo de vida segn el Programa Nacional de Educacin sobre el Colesterol (ATP III), tiene un beneficio significativo en la disminucin de los niveles de colesterol total y triglicridos en pacientes con hiperlipidemia mixta del Centro de Atencin de Medicina Complementaria (CAMEC)

iii.

RESUMEN

Objetivo: Establecer el efecto del aceite de Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) sobre la hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia en pacientes con hiperlipidemia mixta del CAMEC-Iquitos,2009. Diseo: Cuasi experimental. Participantes: Pacientes referidos del CAMEC- Iquitos, al Instituto de Medicina Tradicional en donde se les diagnstico hiperlipidemia mixta y se determin la elegibilidad para participar en el estudio, de los pacientes captados 26 completaron el estudio. Intervencin: Administracin oral de 20 ml/da de aceite sacha inchi durante 12 semanas al grupo experimental y el grupo control no recibi aceite sacha inchi, pero ambos grupos fueron instruidos para seguir durante las 12 semanas del estudio una dieta hipolipidmica recomendada con los cambios teraputicos del estilo de vida, segn el ATP III. Principales medidas de resultados: Colesterol total, triglicridos y peso corporal. Anlisis estadstico: Se aplic la prueba t de student para muestras independientes para comparar el cambio porcentual de cada variable, de la semana 12 a la semana 0, entre el grupo control y el experimental.

Resultados: El grupo que recibi el aceite sacha inchi disminuy significativamente el colesterol total en un promedio de 26.61%,

comparado con la disminucin de 6.42% del grupo control (p< 0.01). Los triglicridos disminuyeron en un promedio de 31.20%, comparado con la disminucin de 9.38% que se logr en el control (p< 0.01). No hubo diferencia significativa entre los grupos con respecto al peso corporal. Conclusiones: La ingestin diaria de aceite sacha inchi, disminuye la hipercolesterolemia hiperlipidemia mixta. Palabras clave: aceite sacha inchi, colesterol total, triglicridos, hiperlipidemia mixta, dieta hipolipidmica. e hipertrigliceridemia en pacientes con

CAPITULO I PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

A. PROBLEMTICA Se sabe que los cambios teraputicos del estilo de vida, como dieta y ejercicio, son la base de la prevencin primaria para la cardiopata coronaria, al reducir los niveles de lpidos sricos; segn el tercer informe del Grupo de Expertos del Programa Nacional de Educacin sobre el Colesterol acerca de la deteccin, valoracin y tratamiento de la hipercolesterolemia en adultos (ATP III) (5). Este informe tambin considera dentro de los cambios teraputicos del estilo de vida, que si al cabo de 6 semanas no se ha alcanzado la concentracin deseada de lpidos sricos, se puede aadir otras opciones teraputicas que potencien esta reduccin, como los estanoles/esteroles vegetales (2g/da) o el aumento de las fibras viscosas (10-25 g/da). Incluso se propone el uso de farmacoterapia en la prevencin primaria, segn este informe el tratamiento farmacolgico debe comenzar, cuando se considere conveniente, generalmente durante la tercera consulta (despus de las 12 semanas) tras el inicio del tratamiento diettico. A pesar que estas recomendaciones fueron publicadas en el 2001 (5) y considerando que los expertos de las diversas instituciones del mundo las pusieron en prctica, han transcurrido casi una dcada y sin

embargo, se ha reportado actualmente una prevalencia creciente de los factores de riesgo cardiovascular en todo el mundo y el estancamiento de la reduccin de la mortalidad cardiovascular (6); mientras que en EsSalud las enfermedades cardiovasculares tambin constituyen un

problema, ya que ocupan el segundo lugar dentro de las prioridades sanitarias (7). Sabemos que esta problemtica es multifactorial, pero a la luz de las investigaciones realizadas en el Instituto de Medicina Tradicional-IMET nuestra intencin es contribuir en algo a la solucin de esta problemtica, a travs del desarrollo de un alimento funcional que ayude a un mejor control de los lpidos sricos, por lo cual se plante el siguiente problema: Tiene el aceite de Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) efecto sobre la hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia en pacientes con hiperlipidemia mixta del CAMEC-Iquitos? B. DELIMITACIN DE LA INVESTIGACIN. El presente estudio fue dirigido a pacientes asegurados con sobrepeso y diagnstico de hiperlipidemia mixta, sin historia personal de enfermedad cardiaca coronaria ni diabetes. C. JUSTIFICACIN. Con lo expuesto anteriormente, estn justificadas las investigaciones de nuevos productos que permitan un mejor control de los niveles de colesterol total y triglicridos, muchos ms an si se trata de un alimento el cual ya es usado popularmente en las cocinas de muchos hogares

peruanos, slo era necesario establecer una dosis y su seguridad. Con los resultados obtenidos, estamos dando los primeros pasos para proponer la introduccin del aceite de sacha inchi, como un componente til dentro de las practicas de prevencin primaria. D. LIMITACIONES. El nmero de pacientes fue pequeo, el estudio no fue a doble ciego ya que fue difcil conseguir una sustancia que haga las veces de placebo. La cantidad de aceite sacha inchi (20 ml) administrada a los pacientes no fue posible darlas en la presentacin de cpsulas por que se obtendra aproximadamente 19 cpsulas de 1 g cada una, lo cual hubiera generado incomodidad al ingerirlas. No s evalu la lipoprotena de alta densidad (HDL) ni la de baja densidad (LDL). E. OBJETIVOS. Objetivo General: Establecer el efecto del aceite de Plukenetia volubilis L.(sacha inchi) sobre la hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia en pacientes con hiperlipidemia mixta del CAMEC-Iquitos Objetivos Especficos: Determinar si 20 ml/da de aceite de sacha inchi administrados oralmente disminuyen la hipercolesterolemia en pacientes con hiperlipidemia mixta. Determinar si 20 ml/da de aceite de sacha inchi administrados oralmente disminuyen la hipertrigliceridemia en pacientes con hiperlipidemia mixta. Determinar si 20 ml/da de aceite de sacha inchi administrados

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oralmente

disminuyen

el

peso

corporal

en

pacientes

con

hiperlipidemia mixta. CAPITULO II FUNDAMENTACIN TERICA.

Las hiperlipidemias son un conjunto de transtornos del metabolismo lipdico que se caracterizan por un aumento en las concentraciones plasmticas de colesterol y/o triglicridos. La importancia de diagnosticar estos transtornos radica en su relacin causal con enfermedad aterosclertica, especialmente la enfermedad cardiaca coronaria en el caso de las hipercolesterolemias puras o mixtas, y la pancreatitis aguda en las hipertrigliceridemias graves (8). Se habla de hipercolesterolemia cuando la concentracin de colesterol en plasma es mayor igual que 240 mg/dl, lmite alto cuando el colesterol en plasma es entre 200-239 mg/dl y valor normal cuando el colesterol en plasma es menor de 200 mg/dl, segn ATP-III. Se habla de

hipertrigliceridemia cuando la concentracin de triglicridos en plasma es mayor igual que 200 mg/dl, lmite alto cuando los triglicridos son entre 150199 mg/dl y valor normal cuando los triglicridos son menor que 150 mg/dl, segn ATP-III (5). Se define el diagnstico de hiperlipidemia mixta cuando se presenta al mismo tiempo la hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia (8). Segn el ATP III, las personas sin cardiopata coronaria conocida, u otras formas de enfermedad ateroesclertica (arteriopata perifrica, aneurisma artico abdominal y arteriopata carotdea sintomtica), y sin diabetes mellitus se definen como en prevencin primaria. En estos casos se debe

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determinar el nmero de factores de riesgo cardiovascular, estos factores son: tabaquismo, hipertensin (presin sangunea 140/90 mm Hg en medicacin antihipertensiva), bajo HDL-C (< 40 mg/dl), historia familiar de enfermedad cardiaca coronaria prematura (en hombres < 55 aos, en mujeres < 65 aos) y la edad (hombre > 45 aos, mujer > 55 aos) (5). El siguiente paso es establecer el inicio del tratamiento que pueden ser los cambios teraputicos de estilo de vida y/o tratamiento farmacolgico. Con respecto al tratamiento farmacolgico, tenemos que actualmente las estatinas son el tratamiento ms eficaz para reducir el colesterol, disminuyen con ms eficacia el LDL, aumentan ligeramente el HDL y disminuyen con moderacin los triglicridos. Los fibratos disminuyen de forma moderada el LDL, aumentan ms eficazmente el HDL y, sobretodo, reducen las concentraciones de triglicridos cuando se comparan con las estatinas (8). Con respecto a los cambios teraputicos del estilo de vida, segn ATP III, en trminos generales se debe instaurar una dieta con reduccin de la ingesta de grasas saturadas (<7% de las caloras totales) y colesterol (< 200 mg/da). Adicionalmente incluir al menos una actividad fsica moderada que contribuya a un gasto aproximado de 200 kcal/da. Y se considera aadir otros componentes como esteroles/estanoles y fibras viscosas, si no se ha alcanzado la concentracin deseada de lpidos sricos. Se puede deducir de estas recomendaciones que los expertos consideran seriamente la utilidad de adicionar productos que no son frmacos como parte de la prevencin primaria. Los esteroles, estanoles y fibras viscosas corresponden a una en los ltimos aos son catalogados como

serie de productos que

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alimentos funcionales.

El Directorio de Alimentos y Nutricin del Instituto de Medicina de Estados Unidos, ha definido a los alimentos funcionales como cualquier alimento o ingrediente alimentario que puede proporcionar beneficios de salud adems de los tradicionalmente nutricionales (9). Esta definicin nos hace recordar un frase clebre del padre de la medicina, Hipcrates Que tu alimento sea tu medicamento. Es relevante como las evidencias cientficas sustentan que adems de los nutrientes clsicos y la importancia del balance de energa hay una serie de constituyentes dentro de los alimentos que son tiles para la salud, tambin se reconoce la importancia de ciertos patrones de dieta, como la dieta mediterrnea (10). Dietas ricas en vegetales y frutas han mostrado que bajan la presin arterial y disminuyen algunos factores de riesgo para la enfermedad cardiovascular. Patrones dietarios con alto contenido de granos enteros y fibra han sido asociados con el decrecimiento del riesgo para la enfermedad

cardiovascular. El pescado, especialmente el aceite de pescado, es rico en cidos grasos poliinsaturados de cadena larga: eicosapentanoico (EPA) y docosahexanoico (DHA); el consumo de 2 porciones (aproximadamente 8 onzas) por semana de pescado con alto contenido de EPA y DHA est asociado con una reduccin del riesgo por muerte sbita y reduccin del riesgo de muerte por cardiopata coronaria en adultos. Estos beneficios se explica, porque los alimentos contienen mezclas variables de

macronutrientes (protenas, grasas y carbohidratos) y micronutrientes

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(vitaminas, minerales y compuestos fitoqumicos)

que pueden reducir el

riesgo de enfermedad por separado o en combinacin (10). Hay estudios promisorios del efecto hipocolesterolmico del ajo (allium sativum) por la presencia de derivados azufrados, la lecitina de soya, el t (Thea sinensis), la fibra y los esteroles, abundantes en semillas de distintas leguminosas, cuya eficacia en el tratamiento de las hipercolesterolemias esta fuera de discusin (11). Otro alimento funcional por excelencia es el aceite oliva, el cual en adicin a tener un alto nivel de cidos grasos monoinsaturados (MUFA), tambin contiene mltiples componentes

menores con propiedades biolgicas. El efecto cardioprotector del aceite de oliva en el contexto de la dieta mediterrnea ha sido atribuido a su alto contenido de MUFA (12) En el campo del metabolismo lipdico y el riesgo coronario hay varios estudios con el omega 3 de origen marino (EPA y DHA), pero hay escasos estudios con el omega 3 (-linolnico) de origen vegetal, el cual se encuentra en alta concentracin en el aceite de sacha inchi. A pesar que esta molcula es el precursor del EPA, las crticas contra la utilidad del linolnico como molcula funcional, es que su conversin a EPA en el cuerpo humano es ineficiente y escasa (13). Sin embargo, segn estudios epidemiolgicos, se ha reportado que una dieta con alto contenido en -linolnico ha mostrado marcada reduccin de la proporcin de recurrencia despus de un primer infarto al miocardio (14); otros estudios tambin mostraron que una ingesta ms alta de -linolnico protege contra la enfermedad isqumica en mujeres (15) y esta asociado con una prevalencia

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reducida de la enfermedad de la arteria coronaria en hombres y mujeres(16). Estos reportes a favor del -linolnico no pueden ser explicados slo por su conversin a EPA, sino por otros mecanismos no relacionados al EPA(13). Ante lo expuesto anteriormente y considerando que nuestro pas tiene una amplia cultura en el uso tradicional de plantas medicinales, dirigimos nuestra atencin en la Amazonia peruana, donde una especie vegetal llamada sacha inchi (Plukenetia volubilis L.), provee semillas de las cuales se obtiene

aceite y harina de uso frecuente en la alimentacin y la medicina tradicional de las comunidades nativas de la Amazonia (1). Sobre el sacha inchi se dispone de los siguientes estudios: botnicos, composicin qumica del aceite, caractersticas fsico-qumicas, toxicolgico, farmacolgico, usos tradicionales y un estudio clnico cuasi-experimental. Nomenclatura.Especie botnica: Plukenetia volubilis L. Familia botnica: Euphorbiaceae (17) Descripcin botnica. Descripcin macroscpica: planta trepadora,

monoica, decidua. Las hojas son opuestas y simples; la lmina foliar es aovado-triangular, 6-13(-20) cm de largo y 4-10(-12) cm de ancho, con base truncada o cordada; el margen es crenado o finamente aserrado; en la cara adaxial se presenta una protuberancia glandular en el pice del pecolo. Inflorescencia racemosa, alargada, monoica (bisexual), y de 5-18 cm de largo; flores pistiladas solitarias en nudos basales, la columna estilar es parcial o totalmente connada, 15-30mm de largo, flores masculinas numerosas, subglobosas, agrupadas en nudos distales; estambres de 1630, con filamentos conspicuos, cnicos, 0,5mm de largo. Fruto: cpsulas

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tetra o pentmeras, glabras, 2,5-6(-7) cm de dimetro. Semillas lenticulares, comprimidas lateralmente y de color marrn con manchas irregulares ms oscuras, 1,5-2 x 0,7-0,8 cm (17) Composicin qumica del aceite. Los componentes mayoritarios del aceite de sacha inchi son los cidos grasos -linolnico, linoleico y oleico (18-22). Segn la Norma Tcnica Peruana (NTP 151.400:2009) para el aceite extrado de la semilla de sacha inchi del gnero Plukenetia, el perfil de cidos grasos del aceite de Plukenetia volubilis L., debe contener como mnimo 8.9% de cido graso oleico, 32.1% de cido graso linoleico y 44.7 % de cido graso linolnico(23). El IMET- EsSalud en coordinacin con el Laboratorio de Instrumental Orgnica de SGS del Per, realiz un estudio del perfil de cidos grasos de 6 muestras de semillas de Plukenetia volubilis L., recolectadas en la Regin Loreto; resultando que los cidos grasos dominantes fueron: -

linolnico(48.3 45.0%), linoleico(33.8 36.2%) y oleico(9.6 10.5%); tambin se hallaron otros componentes minoritarios como: palmtico, palmitoleico, heptadecanoico, esterico, araqudico y gadoleico. Los valores expresados en base a grasa saturada e insaturada son: saturadas (7.7 7.5%), monoinsaturadas (10.8 -10.0%) y poliinsaturadas (81.2 -82.1%). En el mismo estudio se estableci que 100 gramos de semillas de sacha inchi rinden entre 39.9 a 41.5 g de aceite, es importante sealar que los aceites obtenidos de las 6 muestras se extrajeron por prensado en fro (24). Otros componentes encontrados fueron los tocoferoles (20-22). Reportamos el perfil de tocoferoles del aceite extrado por prensado en fro, del estudio

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ms actual (21): delta-tocoferol 135 mg/100 g, gamma-tocoferol 144 mg/100 g y no se detect alfa-tocoferol. En otro estudio se determin un total de esteroles de 247.2 mg/100 g de aceite, siendo los predominantes: betasitosterol 56.5 %, estigmasterol 27.9 % y campesterol 7.1 % (20) Caractersticas fsico-qumicas. Un estudio report: ndice de refraccin 1.48, peso especfico (g/mL) a 15 C 0.9290852, ndice de Iodo (g de I2/ 100 g) 189, ndice de saponificacin (mg KOH/g) 229.583, valor de perxido (meq O2/kg) 4.139 (19). Mientras que otro estudio report: : ndice de refraccin 1.48, peso especfico (g/mL) a 25C 0.9269, ndice de Iodo (g de I2/ 100 g) 194.035, ndice de saponificacin (mg KOH/g) 184.748, valor de perxido (meq O2/kg) 0.889(25). Estudios toxicolgicos El IMET- EsSalud, ha realizado una serie de estudios toxicolgicos, los cuales se presentarn a continuacin: Se determin el efecto genotxico mediante el ensayo de anomalas en la cabeza de los espermatozoides de ratones por efecto de la administracin oral del aceite de sacha inchi. Materiales y mtodos: se utilizaron ratones albinos machos cepa Balb/C/CNPB con un peso promedio de 25 g, distribuidos aleatoriamente en 3 grupos (7 ratones/grupo): control negativo (solucin salina 0.9%), control positivo(50 mg/kg/pc/da de ciclofosfamida), y tratamiento: 0.5 0.02 ml de aceite de sacha inchi, es decir 20 g/kg/da. Las sustancias fueron administradas por va oral cada 24 horas por 5 das. A los 35 das de la primera administracin se procedi al sacrificio de los ratones,

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luego se determin el peso de los testculos y los epiddimos, as como se separ la porcin distal de estos ltimos y se prepar una suspensin de espermatozoides la cual fue teida con eosina al 1%, a continuacin se realiz un extendido en una lmina portaobjeto para su lectura en microscopio, realizndose el conteo de al menos 1000

espermatozoides/ratn; la clasificacin morfolgica de las cabezas de espermatozoides se realiz segn el criterio de Wyrobex y Bruce. El aceite de sacha inchi ensayado corresponde a la marca: Nutraceite Omega 3 de IMET, cuya densidad fue 0,9279 g/ml, para la conversin a de ml a g se us la formula D= m/v (g/ml). Los resultados fueron: en cuanto a los pesos de los testculos y epiddimos no se observaron diferencias estadsticamente significativas entre los 3 grupos experimentales. No se observaron diferencias significativas entre grupo control negativo y el grupo de sacha inchi con respecto a los porcentajes de espermatozoides normales y anormales. Si hubo diferencia significativa entre grupo control positivo y los otros grupos con respecto al porcentaje de espermatozoides anormales. Se concluy que el aceite de sacha inchi a la dosis de 20 g/kg/da no presenta potencial genotxico sobre las clulas germinales masculinas de los ratones(26). El IMET - EsSalud en coordinacin con la Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad de la Amazona Peruana - UNAP, realiz estudios para ver el nivel de dao en el ADN por efecto de la administracin del aceite de sacha inchi, para ello se plante determinar si la administracin oral de aceite sacha inchi tiene efecto genotxico mediante el ensayo cometa.

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Materiales y mtodos: Se utilizaron ratas albinas Holtzman de ambos sexos con un peso promedio de 185 g, distribuidos aleatoriamente en 5 grupos de 8 ratas (4 machos y 4 hembras) cada uno: control negativo (muestras tomadas antes de iniciar los tratamientos), control positivo(50 mg/kg/pc/da ciclofosfamida, por 5 das) y grupos problema(400, 1600 y 3200l de aceite de sacha inchi, cada 24 horas por 15 das), todas las sustancias fueron administradas oralmente; la dosis de 400 l/da (0.4 ml) equivale a 2.2 g/kg/da. El ensayo cometa consisti en la obtencin de 1ml de sangre por puncin cardiaca de las ratas que completaron el tratamiento, separacin de leucocitos centrifugando la sangre total con 0.5ml de ficol, luego se procedi al lavado y resuspensin de leucocitos con 200l de tampn fosfato, cuantificacin y evaluacin de la viabilidad de los leucocitos. Se realiz una observacin microscpica y anlisis de 100 clulas / lmina / animal (2 lminas/animal). La clasificacin de dao genotxico se realiz teniendo en cuenta 2 criterios: el primero en unidades arbitrarias(UA) que presenta un rango de 0 a 400 y el segundo en base al grado de dao que toma valores de 0,1,2,3 4 dependiendo del % de ADN en la cola del cometa. El aceite de sacha inchi ensayado corresponde a la marca: Nutraceite Omega 3 de IMET, cuya densidad fue 0.9279 g/ml, para la conversin de ml a g se us la formula D= m/v (g/ml).. Resultados: El grupo control negativo no present efecto genotxico (UA=56.42 1.87 y nivel de dao en el ADN=0), as tambin el grupo que recibi 400l de aceite de sacha inchi no present efecto genotxico (UA=33.63 1.46 y el nivel de dao en el ADN=0). El

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grupo control positivo present la mayor genotoxicidad (UA=168.50 4.50 y el nivel de dao en el ADN=2) y las otras 2 dosis del aceite de sacha inchi, presentaron un bajo nivel genotxico. Conclusin: La dosis de aceite de sacha inchi de 2.2 g/kg/da no induj dao en el ADN de leucocitos de ratas. A esta dosis el aceite de sacha inchi carece de efectos genotxicos (27). En otro estudio realizado en el IMET - EsSalud, se busc determinar si la administracin oral de aceite de sacha inchi produce efectos txicos en animales de experimentacin por el mtodo de Dosis Lmite y Clases Txicas Agudas (CTA). Material y mtodos: Para el estudio de Dosis Lmite, se utilizaron ratones albinos cepa Balb/C/CNPB con un peso promedio de 22g, distribuidos aleatoriamente en 2 grupos de 12 ratones cada uno(6 machos y 6 hembras): grupo control negativo recibi suero fisiolgico y el grupo problema recibi un volumen mximo de 0.5 ml de aceite de sacha inchi por va oral en dosis nica, es decir 23 g/kg/da; se evalu signos clnicos de toxicidad al trmino de las 24 horas y durante los 14 das siguientes post-administracin de las sustancias a experimentar, se evalu peso corporal y despus de los 14 das se procedi con la necropsia en donde se evalu macroscpicamente los rganos. Para el estudio de CTA, se utilizaron ratas albinas Holtzman con un peso promedio de 174g, distribuidas aleatoriamente en 2 grupos de 6 animales cada uno(3 machos y 3 hembras): el grupo control negativo recibi suero fisiolgico y el grupo problema recibi un volumen mximo de 3.62 ml de aceite de sacha inchi por va oral en dosis nica, es decir 19 g/kg/da; se evalu signos clnicos de toxicidad al trmino de las 24 horas y durante los 14 das siguientes post-

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administracin de las sustancias, se evalu peso corporal y se procedi a la necropsia para la respectiva evaluacin macroscpica de los rganos. El aceite de sacha inchi ensayado corresponde a la marca: Nutraceite Omega 3 de IMET cuya densidad fue 0.9279 g/ml, para la conversin de ml a g se us la formula D= m/v (g/ml). Resultados: en ambos mtodos no se observaron signos clnicos de toxicidad y no hubo mortalidad al trmino de las 24 horas ni en los 14 das siguientes. En ambos mtodos no hubo cambios significativos en los pesos; no se observaron alteraciones macroscpicas en cuanto a la coloracin, consistencia y tamao en los siguientes rganos: cerebro, corazn, pulmones, hgado, riones, bazo y estmago. Conclusin: El aceite de sacha inchi a la dosis de 23 g/kg/da result no txico por el mtodo de Dosis Lmite y por el mtodo de Clases Txicas Agudas a la dosis de 19 g/kg/da se clasific como no txico ATC0, considerndose no clasificable(28). En general, los estudios de toxicidad sub-crnica son frecuentemente abreviados o limitados, pero es importante saber que estos estudios son de crucial importancia para los pacientes, quienes a veces deben usar estos medicamentos por un tiempo prolongado. En ese contexto el IMET de EsSalud evalu al aceite de sacha inchi a travs de un estudio de toxicidad a dosis repetidas. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar el potencial txico del aceite de sacha inchi administrado durante 30 das por va oral en ratas. Material y mtodos: Se utilizaron ratas albinas Holtzman de ambos sexos con un peso promedio de 157 g, distribuidos aleatoriamente en 3 grupos de 20 ratas (10 machos y 10 hembras) cada uno: control negativo

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(suero fisiolgico) y 2 grupos problema (200, 400 l de aceite de sacha inchi, diariamente por 30 das administrados oralmente), la dosis de 400 l (0.4 ml) equivale a 2.5 g/kg/da. Se evalu diariamente signos clnicos de toxicidad, control de peso, parmetros hematolgicos (hematocrito, recuento leucocitario total y diferencial), parmetros bioqumicos (glucosa, colesterol total, triglicridos, rea, creatinina, protenas totales, albmina, globulina, transaminasas -TGO, TGP- fosfatasa alcalina y bilirrubina total) al inicio y despus de los 30 das. Despus de este perodo de tiempo se sacrificaron a todas las ratas para proceder a la necropsia con la finalidad de pesar los rganos y hacer la histopatologa de: cerebro, corazn, pulmones, estmago, hgado, bazo, riones y testculos. El aceite de sacha inchi ensayado corresponde a la marca: Nutraceite Omega 3 de IMET cuya densidad fue 0.9279 g/ml, para la conversin de ml a g se us D= m/v (g/ml). Resultados: No se observaron signos clnicos de toxicidad, con respecto al peso corporal se evidenci una leve aumento pero no hubo diferencia significativa con respecto al control negativo. Los parmetros hematolgicos y bioqumicos presentaron algunas variaciones entre grupos, pero sin significancia biolgica; no hubo diferencia estadsticamente significativa con respecto al grupo control. No se encontr diferencias significativas entre los pesos relativos de los rganos, en los 3 grupos. Con respecto a los estudios histolgicos, En cada animal se evalu 8 rganos y de cada rgano se hizo el montaje de 2 lminas, como fueron 20 ratas por grupo de estudio entonces se ley 40 lminas/rgano/grupo de estudio. En el hgado, el grupo que recibi 200 l present leve tumefaccin turbia en el 10% de las

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lminas, igual % se evidenci en el grupo control negativo, es decir no hubo diferencia significativa con el placebo. En el pulmn, el grupo de 200 l de sacha inchi present dilatacin alveolar en el 2.5% de las lminas, el mismo % se observ en el grupo control negativo. En el resto de los rganos no se evidenci ninguna alteracin histolgica. A dosis mayores (400 l) no se present ninguna alteracin histolgica Conclusin: el aceite de sacha inchi a las dosis de 200 y 400l administrados a ratas por 30 das por va oral es inocuo a nivel bioqumico e histolgico al comparar con el grupo control(29). Adems de los estudios de toxicologa realizados en el IMET - EsSalud, hay un estudio recientemente publicado, realizado en la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la Universidad Mayor de San Marcos. Este estudio tuvo como objetivo evaluar la toxicidad oral a 60 das y determinar la dosis letal 50 (DL 50) de los aceites crudos de sacha inchi y linaza en ratas y en ratones respectivamente. En la evaluacin de la toxicidad oral a 60 das se us 24 ratas macho Holtzman divididos en tres grupos de ocho cada uno, un grupo recibi solucin salina fisiolgica y los otros grupos recibieron aceite de sacha inchi 0.5 ml/kg y aceite de linaza 0.5 ml/kg respectivamente; durante el experimento se control semanalmente el peso corporal y signos de toxicidad en los grupos de estudio, tambin se cuantific el colesterol total, HDL, triglicridos, glucosa, urea, TGP y fosfatasa alcalina a los 30 y 60 das de iniciado el estudio. En la evaluacin de la DL 50 se us ratones macho en grupos de diez y se administr por va oral dosis crecientes de los aceites crudos hasta alcanzar 1 ml/kg (37 g/kg). Los resultados reportaron que los parmetros sricos en las ratas indican que no hay toxicidad alguna a los 60

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das y que la administracin de los aceites disminuyeron los niveles de colesterol, triglicridos e incrementaron el HDL con respecto al grupo

control. La DL 50 muestra que los aceites crudos de sacha inchi y linaza presentan dosis por encima de los 37g/kg de masa corporal. En conclusin ambos aceites son inocuos a 60 das bajo las condiciones experimentales del presente estudio (25). Estudios farmacolgicos Al respecto, el IMET- EsSalud desarroll una serie de estudios que permitieron evidenciar la actividad farmacolgica de este aceite. El estudio realizado fue con el objetivo de determinar si la administracin oral del aceite de sacha inchi disminuye el trnsito intestinal en ratones. Material y mtodos: se utilizaron 24 ratones machos cepa Balb/C/CNPB divididos en 4 grupos de 6 cada uno, los grupos fueron: control negativo (solucin salina), control positivo (atropina 1 mg/kg), aceite de sacha inchi 0.25 ml y aceite de sacha inchi 0.50 ml. Los animales estuvieron en ayunas 12 horas antes de empezar el experimento se procedi a administrar por va oral las sustancias a evaluar, transcurridos 30 minutos post-administracin de las sustancias, se administr a todos los ratones por va oral una solucin de carbn activado al 10% en un volumen de 0.1 ml/10 g de p.c del ratn. Pasados los 45 minutos, se sacrificaron los ratones y se les extrajo el tubo digestivo desde el cardias hasta la vlvula ileocecal. Se midi la distancia recorrida por el carbn activado desde el ploro hasta el lugar ms distal donde lleg esta sustancia como marcadora. Se tom como el 100% el largo total del intestino desde el ploro hasta la vlvula ileocecal de cada ratn para calcular

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porcentualmente el avance del carbn en cada animal. Para este ensayo se us la marca de sacha inchi: Nutraceite Omega 3 de IMET. Resultados: porcentaje del recorrido del carbn activado por grupo: sacha inchi 0.25 ml = 42.04 %, sacha inchi 0.50 ml = 38.30 %, atropina 1mg/kg = 48.70 % y el control negativo = 65.40 %. Todos los tratamientos (las 2 dosis de sacha inchi y la atropina) disminuyeron significativamente (p< 0.05) el trnsito intestinal en los ratones. En el caso del aceite de sacha inchi el efecto fue de manera dependiente de la dosis. Conclusin: en el modelo in vivo de trnsito intestinal en ratones, el aceite de sacha inchi (0.25 ml y 0.50 ml) disminuy el trnsito intestinal, demostrando as su efecto sobre la movilidad intestinal. Esto sugiere que el aceite de sacha inchi podra tener un efecto antidiarreico a la dosis estudiada (30). Se plante un estudio con la finalidad de determinar si la administracin oral del aceite de sacha inchi disminuye los niveles de colesterol y triglicridos en ratas con hiperlipidemia experimental. Material y mtodos: Se utilizaron 8 grupos de 6 ratas Holtzman cada uno, todas las ratas fueron inducidas a un estado hiperlipidmico por consumo de una dieta alta en colesterol durante 80 das. A los 45 das de esta dieta se logr instalar el modelo hiperlipidmico. Los diferentes tratamientos se administraron durante 35 das. 5 grupos recibieron aceite de sacha inchi a dosis de 200, 400, 800, 1600 y 3200 l por da; 1 grupo recibi placebo y 2 grupos recibieron atorvastatina y gemfibrozilo respectivamente. En el modelo animal hiperlipidmico se determin los valores basales de colesterol total y triglicridos, luego se volvieron a medir despus de los 35 das de terapia. El

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aceite de sacha inchi usado fue el Nutraceite Omega 3 de IMET. Resultados: Todas las dosis de sacha inchi disminuyeron el colesterol total entre 69,92% y 79.68% (P<0.05) en relacin con el grupo placebo, cabe sealar que este grupo tambin disminuy los niveles de colesterol en un 53.12%, por lo que la disminucin neta de colesterol que puede ser explicado por el sacha inchi sera entre 17 - 27%. Mientras que la disminucin neta de triglicridos que puede ser explicado por el sacha inchi sera entre 23.63% y 53.33% (P<0.01) en relacin con el grupo placebo. Conclusin: El aceite de sacha inchi disminuye los niveles de colesterol total y triglicridos en ratas hiperlipidmicas, a las dosis estudiadas (31). En otro estudio el objetivo fue determinar la actividad inmunoestimulante del aceite de sacha inchi en ratas. Material y mtodos: se utilizaron 30 ratas machos Holtzman, distribuidas aleatoriamente en 4 grupos: 5 ratas para control positivo (isoprinosine 300 mg/kg de p.c; droga que estimula el sistema inmune), 5 ratas para control negativo (solucin salina), 10 ratas para sacha inchi 200l y 10 ratas para sacha inchi 400l. La evaluacin se realiz usando el ensayo de Estimulacin del Retculo Endotelial de Delaveau; previo al experimento las ratas fueron sometidas a ayuno de 12 horas. Las sustancias fueron administradas durante 5 das por va oral, transcurridas las 24 horas de la ltima aplicacin, se procedi a administrar 0.5 ml de solucin de azul de metileno al 10% en la vena sagital de la cola de las ratas. Se tom 10l de sangre venosa a la 1, 2, 3, 6 y 24 horas postadministracin del azul de metileno al 10%, para realizar el frotis sanguneo y otros 10l fueron hemolizados con 5 ml de agua destilada. Posteriormente

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se hizo el recuento de leucocitos del frotis obtenido y tambin se determin la captacin del azul de metileno en el espectrofotmetro a una longitud de onda de 650 nm. Se calcul el porcentaje de activacin de la respuesta inmune, a travs de la frmula: % ARSI= C-T/C x 100. El aceite ensayado fue el Nutraceite Omega 3 de IMET. Resultados: Las 2 dosis de aceite de sacha inchi presentaron diferencia significativa(p< 0.05) con respecto al grupo control negativo. El porcentaje de activacin de la respuesta inmune en los grupos de ratas que recibieron sacha inchi fue similar al del grupo que recibi isoprinosine, incluso el grupo de 400 l de sacha inchi a las 2 horas mostr un mayor porcentaje(55.93%) de activacin de la respuesta inmune comparado con el grupo de isoprinosine(41.38%). Conclusiones: El aceite de sacha inchi presenta actividad inmunoestimulante in vivo en ratas Holtzman, a las dosis estudiadas. Es posible que el efecto sea de modo dosisdependiente (32). Los cidos grasos -linolnico(omega 3) y linoleico(omega 6), estn involucrados en los procesos inflamatorios, el primero es conocido por su efecto antiinflamatorio y el segundo est ms asociados a efectos proinflamatorios (33). Dado que ambas molculas estn presentes en el aceite de sacha inchi, se plante un estudio con la finalidad de establecer si la administracin oral del aceite de sacha inchi tiene actividad

antiinflamatoria sobre el granuloma inducido por algodn en ratas. Material y mtodos: se utilizaron 3 grupos de 10 ratas cada uno: grupo 1, recibi 200l de sacha inchi, grupo 2, recibi 400l de sacha inchi y grupo 3, recibi solucin salina(control) durante 30 das. Para ello previamente se indujo la

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inflamacin en los animales por el modelo de granuloma, el cual consiste en hacer una incisin en la lnea media del dorso del trax de cada animal, para introducir subcutneamente 1 pellet de algodn de 50 mg, previo decolado de la piel, de manera que quedan situados aproximadamente a 3 cm de la herida. Se sutura y se aade antibitico en la herida para evitar infecciones. 30 das despus de administrar las sustancias se procedi al sacrificio de los animales y a la exresis de los granulomas; estos fueron pesados para obtener el peso hmedo del granuloma, posteriormente se llevaron a una estufa a 120C por 6 horas hasta llevarlo a un peso constante (peso seco del granuloma) y por ltimo se calcul: contenido acuoso del granuloma (peso hmedo peso seco) y el contenido fibrogranuloso del granuloma (peso seco peso del pellet de algodn). El aceite ensayado fue el Nutraceite Omega 3 de IMET. Resultados: la administracin de 200l de aceite sacha inchi disminuy significativamente el contenido acuoso del granuloma (p<0.001) y el contenido fibrogranuloso (p<0.001), en un 57% y 31% respectivamente, en la respuesta inflamatoria inducida por el algodn en ratas. 400l de aceite sacha inchi disminuy significativamente el contenido acuoso del granuloma (p<0.001) y el contenido fibrogranuloso (p<0.001), en un 41% y 34% respectivamente, en la respuesta inflamatoria inducida por el algodn en ratas. Conclusin: Las dosis ensayadas de aceite de sacha inchi por va oral inhibe la respuesta inflamatoria en el modelo del granuloma en ratas (34). Estudios clnicos Son escasos los estudios de sacha inchi en seres humanos, pero se dispone

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de un estudio cuasi experimental realizado en la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo: Se realiz un estudio cuyo objetivo fue determinar el efecto del ingesta de la semilla tostada de sacha inchi sobre la trigliceridemia posprandial en adultos jvenes. A 12 estudiantes de medicina seleccionados al azar se les aplic la prueba de tolerancia a triglicridos, en dos fases: la primera, despus de la ingesta de 82 g de aceite de oliva y, en la segunda, adicionado 50g de semilla de sacha inchi. Los resultados fueron: La primera fase, los triglicridos bsales fueron 99,67 mg/dl, en promedio y luego se incrementaron en promedio 32 a la 1 h, 74 a las 3 h, 89 a las 4 h, y 54 a las 6h. En la segunda fase el promedio basal fue 100,92mg/dl incrementndose 15 a la 1 h, 52 a las 3h, 40 a las 4 h y 43 a las 6h, en promedio, siendo significativa la reduccin a la 1 h y a las 4 h. en conclusin el consumo de las semillas tostadas de sacha inchi, disminuye la trigliceridemia posprandial en adultos jvenes (35). Uso tradicional Los adultos mayores de las comunidades Mayorunas, Chayuhuitas, Campas, Huitotas, Shipibas, Yaguas y Boras, mezclan el aceite de Plukenetia volubilis con harina de esta misma almendra y preparan una crema para revitalizar y rejuvenecer la piel. Los indgenas Secoyas, Candoshis, Amueshas, Cashibos, Dapanahuas y Boras, consumen las semillas tostadas de Plukenetia volubilis para recuperar fuerzas y como reconstituyente para el trabajo y con el aceite frotan sus cuerpos para curar dolores musculares y reumticos. Las sociedades indgenas; Sharanahua, Ameshua, Amahuaca, Aguaruna, Arabela, Chayahuita, Yagua, Shipibo,

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Huitoto, Murui, Campa del gran pajonal, Machiguenga, Ashninca campa, Mayoruna, Arabela, Quechua de San Martn, Quechua del Tigre, etc, extraen, artesanalmente, aceite de Plukenetia volubilis para uso alimentario, para combustible y tambin elaboran harina de la torta. Los Yaguas, Cocamas, Shipibos y Cayahuitas consumen hojas tiernas de Plukenetia volubilis, en forma de ensaladas como parte de su dieta (1).

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CAPITULO III

A.

HIPOTESIS Y VARIABLES Hiptesis: El aceite de Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) disminuye la hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia en pacientes con hiperlipidemia mixta del CAMEC-Iquitos. Variables: Independiente: Dependientes: Aceite de sacha inchi (Plukenetia volubilis L.) Hipercolesterolemia Hipertrigliceridemia

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B-C. DIAGRAMA DE VARIABLES, DEFINICIN OPERACIONAL DE VARIABLES (Esquema segn Taller de Metodologa de

Investigacin,2008- UNMSM-Facultad de Medicina).

Variable

Valores finales Si recibe

Criterios 10 ml de aceite 2 veces/da por 12 semanas

Instrumento de medicin Ficha de registro diario de cumplimiento de la ingesta del aceite Mtodo enzimtico

Aceite de sacha inchi No recibe No Hipercolesterolemia Si No Hipertrigliceridemia Si limite alto 150-199 mg/dl normal < 200 mg/dl limite alto 200-239 mg/dl alto 240 mg/dl normal < 150 mg/dl

Mtodo enzimtico

alto 200 mg/dl

D. INDICADORES DE LAS VARIABLES Variable Hipercolesterolemia Hipertrigliceridemia Indicador Colesterol total srico 240 mg/dl Triglicridos srico 200 mg/dl

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CAPITULO IV

A. B. C.

METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN. TIPO DE INVESTIGACIN: Cuasi experimental

POBLACIN Y MUESTRA: La poblacin de estudio estuvo conformada por todos los pacientes adultos que se les detect hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia al mismo tiempo, diagnstico de hiperlipidemia mixta, y que cumplieron determinados criterios de inclusin y exclusin. Considerando que el presente trabajo fue un estudio piloto, se plante trabajar con un total de 30 pacientes a razn de 15 pacientes para el grupo control y 15 para el grupo experimental.

D.

MATERIAL Y METODO Pacientes. Pacientes con diagnstico de sobrepeso (IMC: 25 29.9 kg/m2 ) fueron captados en el Centro de Atencin de Medicina Complementaria de la Red Asistencial Loreto entre los meses de Junio a Septiembre del 2009 y derivados al Instituto de Medicina Tradicional- IMET, aqu se les explic los detalles del estudio y los que estuvieron de acuerdo firmaron su consentimiento informado . El proyecto de investigacin fue aprobado por el Comit de tica del Hospital III de Iquitos-EsSalud, ver documento de aprobacin en

Anexo I. Ver consentimiento informado en Anexo II.

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Los pacientes que firmaron el consentimiento informado pasaron una evaluacin clnica y de laboratorio. Hombres y mujeres adultos de 18 aos de edad con diagnstico de hiperlipidemia mixta (colesterol total 240 mg/dl y triglicridos 200 mg/dl) y sin historia personal de enfermedad cardiaca coronaria ni diabetes fueron elegidos para

participar en el estudio. Una ficha clnica (Anexo III) se us para registrar la presencia de historia familiar de enfermedad cardiaca y presencia de factores de riesgo cardiovascular, en esta mismo anexo se adjunto la ficha de evolucin clnica ya que cada paciente fue evaluado clnicamente en la semanas 0, al final de la semana 6 y 12. Estos pacientes en los ltimos 5 meses no se haban evaluado sus niveles de colesterol total y triglicridos. Una Nutricionista instruy a todos los pacientes para instaurar, en su vida diaria, los cambios teraputicos del estilo de vida y mantenerlos durante las 12 semanas del estudio. La alimentacin para los pacientes se hizo en base a un promedio de caloras diarias dependiendo de su peso, talla, sexo, edad y actividad fsica; se mantuvo constante este promedio de

caloras durante las 12 semanas de estudio. Segn el Grupo de Expertos del Programa Nacional de Educacin sobre el Colesterol- ATP III (5), estos cambios de estilo de vida con respecto a la dieta son: grasas saturadas < 7% de las caloras totales, grasas poliinsaturadas hasta un 10% de las caloras totales, grasas monoinsaturadas hasta un 20% de las caloras totales, grasas totales hasta un 25-35% de las caloras totales, hidratos de carbono 50-60%

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de las caloras totales, fibra 20-30 g/da, protenas aproximadamente 15% de las caloras totales, colesterol < 200 mg/da; las caloras totales mantuvieron un equilibrio entre el ingreso y el gasto para mantener el peso corporal deseable y evitar su aumento. Cada paciente recibi semanalmente un plan de dieta individualizado y se les entreg los alimentos semanalmente para que los preparen de acuerdo a su plan de dieta. Es importante sealar que esta dieta no incluy aceite de linaza, aceite de oliva, margarinas enriquecidas con esteroles y slo incluy 1 porcin de pescado (aprox. 8 onzas) 1 vez por semana. Con respecto a la actividad fsica se recomend una actividad fsica moderada la cual consisti, para el presente estudio, en ejercicio de 3 sesiones/semana (caminar a paso ligero por 30 minutos), se realiz un seguimiento de la adherencia a estos cambios de estilo de vida. Los criterios de exclusin fueron: mujeres embarazadas o en etapa de lactancia, pacientes con obesidad (IMC 30 kg/m2 ), pacientes que ya han presentado un episodio de enfermedad cardiaca coronaria u otra forma de aterosclerosis (arteriopata perifrica, aneurisma artico abdominal y arteriopata carotdea sintomtica), pacientes diabticos, hipercolesterolemia familiar, causas secundarias de hiperlipidemia (diabetes, hipotiroidismo, enfermedad heptica obstructiva, falla renal crnica), pacientes que estuvieron usando suplementos vitamnicos, antioxidantes, aceite de ajo, suplementos de aceite de pescado, margarinas enriquecidas con estanol/esterol, participacin simultnea

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en otro estudio, pacientes con juicios mdico legales pendientes, pacientes con nivel de triglicridos muy altos ( 500 mg/dl), pacientes que estn tomando medicamentos anticoagulantes y pacientes con hipertensin no controlada (presin arterial > 140/90). Preparacin del aceite de sacha inchi El aceite de sacha inchi que se us en este estudio se obtuvo por el siguiente procedimiento: El Departamento de Etnobotnica del IMET, recolect especmenes de la planta llamada sacha inchi de unas

plantaciones en la Comunidad de Padre Cocha, Provincia de Maynas, Loreto-Per. Este muestra botnica fue identificada con el nombre cientfico de Plukenetia volubilis L. en el Herbarium Amazonense de la Universidad Nacional de la Amazonia Peruana- Facultad de Ciencias Biolgicas, en donde fue certificada con el cdigo 0036532. Las semillas maduras de esta planta fueron colectadas en Febrero del 2009 en la misma comunidad y luego entregadas a la Empresa Negocios Agroindustriales Loreto S.A.C., para la extraccin por prensado en fro y envasado del aceite, todo este proceso fue supervisado por el Departamento de Farmacognosia del IMET.

De este lote de semillas se obtuvo 30 litros de aceite, los cuales fueron almacenados en depsitos de acero inoxidable e

inmediatamente envasados en botellas de vidrio oscuro de 250 ml. Una muestra de este aceite se envi a los Laboratorios de POS Pilot Plant Corp. en Canad, quienes reportaron la composicin qumica

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(cidos grasos alfa-linolnico, linoleico, oleico, tocoferoles, esteroles, fosfolpidos y fenoles) y los siguientes parmetros de calidad: valor de Iodo 188 g I2/100 g, valor perxido 2.60 meq O2/kg, ndice de refraccin a 20 C 1.4822, gravedad especfica (densidad) a 25C 0.9279 g/mL; los cuales cumplieron con los estndares establecidos por la Norma Tcnica Peruana para el aceite de sacha inchi (23). Este aceite cuenta con un Registro Sanitario como alimento: C1304608N OASGSC y un Registro de Propiedad Industrial con el Nombre

Comercial Nutraceite Omega-3 De IMET a favor del Seguro Social de Salud-EsSalud, certificado con el N 00154013, ver Ficha tcnica del producto (Anexo IV). Diseo del estudio Es un estudio cuasi experimental, con diseo en paralelo aleatorizado comparativo. El grupo control fue instruido para seguir las

recomendaciones del Grupo de Expertos del Programa Nacional de Educacin sobre el Colesterol- ATP III (5), tanto en la dieta como en el ejercicio. En el Grupo experimental, el rgimen diettico y la rutina de ejercicios fue idntica a la del grupo control, excepto en que todos los pacientes del grupo experimental fueron instruidos para consumir 10 ml (1 cucharada sopera) de aceite de sacha inchi antes del desayuno y antes del almuerzo durante las 12 semanas que dur el estudio. Para este fin se entreg a cada pacientes de este grupo, 7 botellas del aceite de sacha inchi Nutraceite Omega-3 De IMET , se constat el consumo de este aceite a las dosis indicadas, a travs de

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las visitas domiciliarias diarias en donde el paciente ingiri el aceite en presencia del personal del IMET encargado de las visitas. Si el

paciente completaba la dosis diaria se le permita firmar en una ficha de control de cumplimiento de la ingesta de este aceite (Anexo V). Evaluacin bioqumica Las tomas de muestras de sangre de los pacientes se realizaron en el Laboratorio de Farmacologa y Toxicologa del IMET. A cada paciente se le tom una muestra de sangre de 5 cc correspondiente a la semana 0 (basal) y otra muestra al final de la semana 12. El efecto del aceite de sacha inchi sobre la hipercolesterolemia e del

hipertrigliceridemia se evalu a travs del cambio porcentual

colesterol total y triglicridos de la semana 12 a la semana 0. Las muestras de sangre fueron colectadas en tubos ensayo de 10 cc sin anticoagulante ya que las muestras fueron procesadas rpidamente , el suero fue separado en una centrifugadora a 5000 revoluciones durante 3 minutos. A las muestras de suero se les agreg los reactivos respectivos de la marca Wiener para evaluar el colesterol total y triglicridos; las muestras se incubaron en bao mara a 37C por 15 minutos para el colesterol total y 5 minutos para los triglicridos. Las concentraciones de colesterol total y los triglicridos fueron evaluados por mtodos enzimticos estndar, las lecturas se realizaron con un espectrofotmetro Wiener lab. METROLAB 1600 DR. Los resultados fueron registrados en una ficha de registro de datos laboratorio (Anexo VI).

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Evaluacin del Peso El peso y la estatura se registr en la semana 0 y al final de la semana 12. Para lo cual se us una balanza de pie con tallmetro y los pacientes fueron vestidos con una bata. El efecto del aceite de sacha inchi sobre el peso corporal se evalu a travs del cambio porcentual del peso corporal de la semana 12 a la semana 0 Evaluacin de la adherencia a la dieta y a la actividad fsica Cada paciente fue provisto semanalmente con hojas informativas de un plan de dieta individual, junto con la provisin de los insumos alimenticios para prepararlos, basado en la dieta recomendada por el ATP III. En cada visita semanal la nutricionista explic las instrucciones dietticas y el mensaje central fue insistir en la importancia del cumplimiento de este rgimen diettico, ya que todo estaba por escrito en las hojas informativas (tipos de alimentos, cantidades, forma de cmo estimar la porcin de alimentos y frecuencia de consumo). Los pacientes usaron una balanza para pesar en gramos sus porciones de alimentos. En la misma hoja informativa se dejo un espacio para que el paciente registre algn alimento(s) que ingiri fuera de lo establecido o algn alimento(s) que dej de ingerir del rgimen diettico establecido, ver ejemplo del plan de dieta de una paciente para 7 das (Anexo VII). Personal instruido por la Nutricionista se encargaron de visitar 3 veces

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por semana a los 30 pacientes en los horarios de comida , con la finalidad de chequear el cumplimiento. Se consider un cumplimiento del rgimen diettico si el paciente cumpli con las 3 principales comidas, siempre que no haya ingerido alimentos que no estuvieron en el plan diettico. Los que no cumplieron este requisito fueron

retirados del estudio. Con respecto a la actividad fsica cada paciente debi realizar 3 sesiones semanales de ejercicios (caminar a paso ligero por 30 minutos), es decir un total de 36 sesiones durante los 12 semanas de estudio, se consider un cumplimiento > del 70% si al final del estudio realizaron ms de 26 sesiones en total, el cumplimiento tambin se registro en el Anexo VII.

Seguridad y tolerabilidad La seguridad fue evaluada a travs de los reportes de los pacientes en los controles clnicos y por observaciones del mdico investigador . No se hizo seguimiento de parmetros bioqumicos pero si se evalu las funciones biolgicas y signos vitales, los cuales fueron registrados en la ficha de evolucin clnica (Anexo III). Por se acaso se

presentar alguna reaccin adversa de preocupacin para los pacientes, se les entreg los nmeros telefnicos del investigador principal. Anlisis estadstico Se us pruebas paramtricas por que los datos en ambos grupos tuvieron una distribucin normal. Se aplic la prueba t de student para

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muestras independientes para comparar el cambio porcentual de cada variable (colesterol total, triglicridos y peso corporal), de la semana 12 a la semana 0, entre el grupo control y el grupo experimental. Tambin se us la prueba t de student para muestras apareadas, la cual permiti evaluar los cambios de las variables entre el antes(semana 0) y despus (semana 12) de las intervenciones, dentro de cada grupo. Un p< 0.05 fue considerado para ser

estadsticamente significativo. Para el anlisis estadstico fue usado el programa SPSS para Windows (versin 18, 2007, en espaol).

E.

INSTRUMENTOS PARA LA RECOLECCIN DE LA INFORMACIN Y DOCUMENTOS QUE PERMITEN CLARIFICAR Y EVIDENCIAR EL TRABAJO Anexo I: Documento de Aprobacin del Comit de tica. Anexo II: Consentimiento informado. Anexo III: Ficha clnica y ficha de evolucin clnica. Anexo IV: Ficha tcnica del producto Nutraceite Omega-3 De IMET. Anexo V: Ficha de control de cumplimiento de la ingesta del aceite. Anexo VI: Ficha de registro de los datos de laboratorio. Anexo VII: modelo de un plan de dieta por 7 dias para una paciente(incluye registro de Cumplimiento de la dieta y la actividad fsica)

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Instrumentos de medicin de las variables Para medir la concentracin de colesterol total y triglicridos se usaron los siguientes instrumentos: espectrofotmetro digital,

centrifuga, equipo de bao maria. Para medir el peso corporal y la talla se us una balanza de pie con tallmetro. Para evaluar los signos vitales se us: un termmetro de mercurio, estetoscopio, un esfigmomanmetro y una camilla mdica.

42

F.

RESULTADOS La composicin qumica del aceite sacha inchi, usado en este estudio se muestra en la tabla I.
TABLA I. Composicin Qumica del Aceite sacha inchi Componentes Qumicos Promedio cidos grasos (%) C16 Palmitico C16:1n7 Palmitoleico C17 Margarico C18 Esterico C18:1n9 Oleico C18:1 Octadecenoico C18:2n6 Linoleico C18:3n3 -Linolenico C20 Araquidico C20:1n9 Eicosenoico C20:2n6 Eicosadienoico C22 Behenico Otros Total saturados Total Monoinsaturados Total Poliinsaturados Tocoferoles (mg/100g) -Tocoferol -Tocoferol -Tocoferol Total Esteroles (mg/100g) Campesterol Estigmasterol sitosterol Otros Total Fosfolipidos (%) Fosfatidilcolina Fosfatidilinositol Lisofosfatidilcolina Total Fenoles (mg/100g) Total 0.96 4.56 0.09 0.10 3.23 9.56 0.53 34.74 46.29 0.10 0.28 0.03 0.04 0.4 8.03 10.46 81.10 61.6 125 0.59 187.19 18.3 62.5 126 30 236.8 0.03 0.02 0.04 0.09

Fuente: Analytical report POS Pilot Plant Corp. Project N 905. Report Date: 4/15/09. Lab Number: AA19520. Sample description: Nutraceite Omega 3 de IMET (aceite de sacha inchi).

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Disposicin de pacientes Un total de 43 pacientes cumplieron los criterios de elegibilidad. De estos, 13 descontinuaron antes de realizarse la randomizacin, de los 30 pacientes randomizados, 15 fueron asignados al grupo

experimental y 15 al grupo placebo. Finalmente, 26

de los 30

pacientes(87%) completaron el estudio. 3 pacientes en el grupo control y 1 paciente en el grupo experimental fueron retirados del estudio por incumplimiento con el plan de dieta establecido y fueron referidos para que pasen consulta por medicina interna o general del Hospital III-EsSalud. Caractersticas basales de los pacientes Las caractersticas basales de todos los participantes admitidos al estudio son mostradas en la tabla II. Los grupos prcticamente no difirieron en cuanto a edad, sexo, IMC, actividad fsica, caractersticas clnicas, uso de medicamentos, nmero de factores de riesgo y los niveles de colesterol total y triglicridos. Ningn paciente present historia de enfermedad cardiaca coronaria y la mayora de pacientes tuvo entre 0-1 factores de riesgo. Es importante sealar que no hubo diferencia significativa entre los grupos en cuanto a las caractersticas basales.

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TABLA II. Caractersticas basales de los participantes Caractersticas Demograficos Edad (promedio DE) Hombre / Mujer Clinicas Fumador corriente Actividad fisica sistemtica Historia de hipertensin Historia de diabetes mellitus Historia familiar de Enfermedad cardiaca coronaria Historia personal de Enfermedad cardiaca coronaria IMC (Kg/m2) (Promedio DE) Factores de riesgo* 0 1 2 Medicamentos que actualmente toman Losartan Laboratorio Colesterol total (mg/dL) (promedio DE) Triglicridos (mg/dL) (promedio DE) 46.58 13.31 5/10 0 0 2 0 0 0 27.11 1.18 7 6 2 2 258.98 4.58 220.92 3.21 43.00 13.34 3/12 0 0 2 0 0 0 26.18 1.27 8 6 1 2 272.14 4.42 198.96 7.95 Grupo Control (n=15) Grupo Experimental (n=15)

________________________________________________________________________ No hubo diferencia significativa entre los grupos en la lnea basal, se uso t student para datos de distribucin normal. * En base a los 5 factores de riesgo principales que modifican el LDL Colesterol (segn ATP III, 2001). En el presente estudio no se evalu el HDL Colesterol.

Lpidos sricos en respuesta al tratamiento El grupo que recibi el aceite de sacha inchi disminuy

significativamente las concentraciones del colesterol total (de la semana 0 a la semana 12) en un promedio de 26.61% , comparado con la disminucin de 6.42% que se logr en el grupo control (p<

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0.01). Aproximadamente, el 86% de los pacientes que tomaron el aceite de sacha inchi tuvieron una reduccin > 25% del colesterol total. El grupo que recibi el aceite de sacha inchi disminuy significativamente las concentraciones de triglicridos (de la semana 0 a la semana 12) en un promedio de 31.20%, comparado con la disminucin de 9.38% que se logr en el grupo control (p< 0.01). (tabla III; fig. 1).

TABLA III. Promedio de las concentraciones de lpidos plasmaticos en la semana 0 y 12 en cada grupo de estudio. Grupo Control 258.98 4.58 242.37 8.30 -6.42 2.54 Grupo Experimental 272.14 4.42 199.69 5.56 -26.61 2.15

Lipido Colesterol total Semana 0 (mg/dL) Semana 12 (mg/dL) *Cambio %

Trigliceridos Semana 0 (mg/dL) 220.92 3.21 198.96 7.95 Semana 12 (mg/dL) 200.25 11.34 137.01 12.05 *Cambio % -9.38 4.50 -31.20 4.33 P< 0.01, significativamente diferente de la lnea basal *Cambio % =
semana 12 semana 0 x 100 % semana 0

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Con respecto al peso El grupo que recibi el aceite de sacha inchi disminuy el peso corporal en un promedio de 2.91%, mientras que el grupo control

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disminuy el peso corporal en un promedio de 2.78%. No hubo diferencia estadsticamente significativa entre los grupos(p= 0.602). Cumplimiento de los cambios teraputicos de estilo de vida Al revisar los registros del Anexo VII se detect que un paciente del grupo experimental y 3 del grupo control no cumplieron los requisitos de adherencia al rgimen diettico; con respecto a la actividad fsica todos cumplieron con los requisitos solicitados. Seguridad y tolerabilidad en respuesta al tratamiento Dos pacientes del grupo experimental manifestaron que presentaron deposiciones sueltas en 3 oportunidades (2 deposiciones/da en 3 das diferentes), mientras que un paciente del grupo control refiri que present 2 deposiciones sueltas en 1 da. Estos fueron las nicos posibles eventos adversos que se presentaron durante el estudio. En cuanto a la tolerabilidad del aceite, solo 3 pacientes del grupo

experimental refirieron incomodidad por el sabor del aceite, pero continuaron ingirindolo hasta terminar el estudio. G. DISCUSIN DE RESULTADOS Las caractersticas basales de los participantes fueron muy

semejantes, lo cual permiti trabajar con 2 pequeos grupos casi homogneos y como se puede ver en la tabla II la mayora de los pacientes tuvieron pocos factores de riesgo, segn los parmetros evaluados, aunque cabe la posibilidad que pudieron tener otros factores ocultos ya que no se evalu el HDL-C. Adems de la disminucin significativa de los niveles de colesterol total y triglicridos

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en el grupo que recibi aceite de sacha inchi, se puede ver en la tabla III que la concentracin promedio de colesterol total con las justas fue inferior al valor aceptable de colesterol total (<200 mg/dl), mientras que la concentracin promedio de triglicridos fue inferior al valor normal (<150 mg/dl) por un margen ms amplio. El grupo experimental disminuy el colesterol total en 26.61%, mientras que el grupo control slo disminuy en 6.42%, podemos decir que la disminucin de colesterol total neta, atribuida al aceite de sacha inchi sera 20.19% el resto sera explicado por el efecto de los cambios teraputicos de estilo de vida. Este valor esta dentro del rango de disminucin neta de colesterol total (16.8 -26.56%) logrado al administrar aceite de sacha inchi en ratas Holtzman

hiperlipidmicas con un peso promedio de 251 g; este estudio evalu dosis de 200, 400, 800, 1600 y 3200 l de aceite de sacha inchi por da durante 5 semanas (31) este efecto rpido es semejante al del aceite de Argan (Argania spinosa L.) el cual logr una disminucin del 36.67% del colesterol total en solo 7 semanas (36). Al analizar la dosis de 200 l /da (0.2 ml) de aceite de sacha inchi, se puede deducir que a este grupo de animales se les administr aceite de sacha inchi a razn de 0.8 ml/kg /da, si consideramos que el peso promedio de los pacientes que recibieron el aceite de sacha inchi fue 62 kg y extrapolamos la dosis aplicada en animales tendramos que haber indicado a cada paciente aproximadamente 50 ml/da de este aceite, sin embargo las evidencias indican que con

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menos de la mitad de la dosis (20 ml) usada en animales se logr una disminucin significativa de las concentraciones de colesterol total en seres humanos. Est claro que el metabolismo de los lpidos en los animales difiere un poco al de los humanos, por eso los estudios farmacolgicos pre-clnicos en animales son slo una referencia del comportamiento de una variable expuesta a una intervencin. En el estudio de Gorriti et al, se demostr que un grupo de ratas sanas Holtzman que recibi 0.5 ml/kg/da de aceite de sacha inchi present los menores valores promedio de colesterol total comparado con el grupo placebo a los 60 das del estudio, aunque no hubo diferencia estadsticamente significativa(25). Con respecto a los triglicridos, el grupo experimental logr disminuir en 31.20%, mientras que el grupo control disminuy en 9.38%,

podemos deducir que la disminucin de triglicridos neta, que se puede atribuir al aceite de sacha inchi sera 21.82% el resto sera explicado por el efecto de los cambios teraputicos de estilo de vida. Este valor fue ligeramente inferior a las disminuciones (23.63 53.33%) logradas en el estudio experimental con ratas

hiperlipidmicas, cabe sealar que a la dosis de 0.8 ml/kg/da se logr una disminucin de 23.63 % en ratas (31) y de igual modo slo se necesito 20 ml/da de aceite de sacha inchi para alcanzar disminuciones significativas de los triglicridos en seres humanos. En el mismo estudio de Gorriti et al, se demostr que el grupo que recibi 0.5 ml/kg/da de aceite de sacha inchi present valores promedio

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menores de triglicridos con respecto al grupo placebo a los 60 das del estudio, aunque tampoco hubo diferencia estadsticamente significativa(25). Otro estudio que encontr resultados favorables en la disminucin de los triglicridos al administrar sacha inchi fue el de Huamn et al, en donde se administr 50 g de semillas de sacha inchi a adultos

jvenes aparentemente sanos, sometidos a una prueba de tolerancia a triglicridos, en esta investigacin al graficar la prueba de tolerancia a triglicridos, se evidenci significancia estadstica al comparar el rea bajo la curva de ambas fases con una disminucin de 38.17% con el consumo de sacha inchi (35). El aceite de sacha inchi logr una disminucin neta en las concentraciones de triglicridos (21.82%) y colesterol total (20.19%) casi semejante. Estos datos son relevantes si consideramos que la misma dieta recomendada por del Grupo de Expertos del Programa Nacional de Educacin sobre el Colesterol acerca de la deteccin, valoracin y tratamiento de la

hipercolesterolemia en adultos (ATP III) aplicada en un estudio por 3 meses logr una disminucin del colesterol total y triglicridos de

5.3% y 8.3% respectivamente (37), as tambin en otro estudio aplicando las misma dieta (ATP III) por 3 meses se logr una disminucin del colesterol total y triglicridos de 3.2% y 11.5% respectivamente (38) .En nuestro estudio el grupo control, que slo recibi las recomendaciones del ATP III logr disminuir ms el colesterol (6.42%) con respecto a los estudios mencionados y la

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disminucin de los triglicridos (9.38%) fue semejante a otros estudios reportados. La supervisin del cumplimiento de la dieta en ambos grupos fue importante para que no sea un factor de confusin al evaluar y analizar los resultados finales. Las estatinas, en general, disminuyen los triglicridos entre 7 30%, mientras que los fibratos disminuyen los triglicridos entre 20 -50% (5), de esto se deduce que la disminucin neta de los triglicridos (21.82%) logrado por efecto del aceite de sacha inchi est dentro del rango de estos frmacos, por este motivo se puede considerar a este aceite como un producto promisorio, el cual necesita estudios

mejores controlados con un mayor nmero de pacientes. El aceite de sacha inchi disminuy el peso corporal (2.91%) de los pacientes un poco ms que el grupo control (2.78%), pero no hubo diferencia estadsticamente significativa. As tambin, en los estudios con las ratas hiperlipidmicas (31) y ratas sanas (25) que recibieron aceite de sacha inchi no hubo diferencia estadsticamente significativa en los pesos con respecto el grupo control (placebo). Un producto por ms que sea considerado como alimento, siempre debe ser evaluado su seguridad, por tal motivo en el IMET de EsSalud se evalu la toxicidad oral del aceite de sacha inchi a diferentes dosis en animales de experimentacin: a la dosis de 20 g/kg/da no present efecto genotxico sobre las clulas germinales masculinas de ratones (26), a la dosis de 2.2 g/kg/da no indujo dao en el ADN de leucocitos de ratas (27), con respecto a la toxicidad aguda el aceite

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a la dosis de 23 g/kg/da en ratones result no txico por el mtodo de Dosis Lmite y por el mtodo de Clases Txicas Agudas a la dosis de 19 g/kg/da en ratas tampoco fue txico (28) y con respecto a la toxicidad sub-crnica de 30 das el aceite a la dosis de 2.5 g/kg/da no produjo alteraciones clnicas, bioqumicas ni histolgicas en ratas (29). Por otro lado las investigaciones de Gorriti et al., reportaron que la DL50 del aceite de sacha inchi est por encima de los 37 g/kg de peso corporal en ratones y con respecto a la toxicidad sub-crnica de 60 das el aceite de sacha inchi no produjo toxicidad alguna a la dosis de 0.5 g/kg/da(25). La dosis de 20 ml/da de aceite de sacha inchi administrada en el presente estudio equivale a 18.5 g de aceite/da, si consideramos que la densidad de este aceite fue de 0.9279 g/ml. El peso promedio de los pacientes del grupo que recibi el aceite fue 62 kg, entonces la dosis de 20 ml/da equivali a ingerir 0.3 g/kg/da, la cual fue una dosis inferior a las dosis estudiadas en las investigaciones toxicolgicas referidas anteriormente, entonces

podemos decir que la dosis ensayada es segura y tolerable en seres humanos, aunque es necesario ms estudios para corroborar estos hallazgos. Cabe sealar que algunos pacientes refirieron que presentaron deposiciones sueltas, aunque tambin se present en el grupo control; al analizar esta posible reaccin adversa hay que considerar que en un estudio en ratones con peso promedio de 21 g se

evaluaron las dosis de aceite de sacha inchi (11 - 23 g/kg) sobre el

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trnsito intestinal (30), con las cuales no se produjo deposiciones sueltas, puede ser que estos pacientes presentaron una respuesta idiosincrtica. El aceite de sacha inchi ensayado present una serie de parmetros de calidad que cumplieron los estndares requeridos por la Norma Tcnica Peruana del aceite de sacha inchi (23), los niveles de perxido inferior a 10 meq O2/ kg hallados en este aceite nos indica un buen grado de resistencia a la oxidacin, el cual puede ser influenciado por condiciones de secado de las semillas, operaciones durante la extraccin del aceite, tiempo de almacenamiento y presencia de iones metlicos (39), es importante prevenir la oxidacin de los aceites comestibles con el fin de mantener su calidad y seguridad de lo contrario pueden disminuir o perder sus actividades biolgicas. Es conocido que los aceites con alta concentracin de cidos grasos poliinsaturados son muy susceptibles a la oxidacin, en el caso del sacha inchi hay que tener en cuenta esta informacin ya que contiene 81.1 % de estos cidos grasos, sin embargo la presencia de antioxidantes como los tocoferoles podran brindarle una mayor estabilidad frente a la oxidacin(21). El aceite administrado a los pacientes fue extravirgen ya que su valor de acidez libre (0.25 g/100 g) (40) fue de menor de 1 g/100 g expresado en cido oleico, segn la Norma Tcnica Peruana del aceite de sacha inchi(23). Con respecto a su composicin qumica (tabla I) las concentraciones de los 3

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componentes mayoritarios del aceite : cido graso alfa-linolnico (46.29%), cido graso linoleico (34.74%) y cido graso oleico (9,56%) cumplen con los estndares establecidos por la Norma Tcnica Peruana para el aceite sacha inchi. Los hallazgos del presente estudio con respecto a la disminucin del colesterol y los triglicridos por efecto del aceite de sacha inchi, constituyen un indicio que puede justificar los reportes

epidemiolgicos a favor de seguir una dieta con alto contenido de alfalinolnico (14-16). Por otro lado Zhao et al., report que el cido graso alfa-linolnico puede decrecer el riesgo de enfermedad cardiovascular a travs de varios mecanismos biolgicos, incluyendo reducciones de los lpidos y los marcadores inflamatorios como el PCR- ultrasensible y las molculas de adhesin celular (41); tambin hay un estudio en animales de experimentacin que demuestra el efecto antiinflamatorio del aceite de sacha inchi(34), lo cual sera una evidencia ms de cmo podra actuar este aceite en la prevencin de las enfermedades cardiovasculares. No hay estudios clnicos en donde se haya evaluado el efecto del alfa-linolnico solo, sino como parte de una dieta. Si extrapolamos las concentraciones de los componentes qumicos hallados en 100 g aceite de sacha inchi (tabla I), a la dosis administrada en el presente estudio, podemos deducir que 20 ml

(18.5 g) de aceite de sacha inchi contienen: 8.56 g del cido graso alfa-linolnico, 6.43 g del cido graso linoleico, 1.77 g del cido graso

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oleico, 34.63 mg de tocoferoles, 43.8 mg de esteroles, 16.65 mg de fosfolpidos y 0.18 mg de fenoles. Si nos enfocamos en el alfalinolnico es posible decir que los pacientes del grupo experimental ingirieron 8.56 g/da adicional a la ingesta diaria recomendada segn Food and Nutrition Board -2005 (42), en este panel de expertos se recomienda una ingesta adecuada de 1.6 g/da para hombres adultos y para mujeres adultas 1.1 g/da, lo cual se tuvo en cuenta en la elaboracin de las dietas ya que en el informe de ATP III no especifican cuanto de alfa-linolnico ni de linoleico. Por otro lado segn la Gua Dietaria de la Asociacin Americana del Corazn (AHA), para proveer EPA + DHA se recomienda incluir al menos 2 porciones de pescado/semana y para el alfa-linolnico se recomienda una ingesta total de 1.5 a 3 g/da para personas en riesgo de cardiopata coronaria (43). Analizando esta informacin vemos que la dosis que se administr de alfa-linolnico en el presente estudio fue alta pero segura, segn las dosis ensayadas en los estudios toxicolgicos en animales, lo cual se corrobor al no presentar los pacientes eventos adversos

prcticamente. Cabe sealar que hay estudios con altas dosis de aceite de pescado puro (4g/da), lo cual reduce los niveles de triglicridos y lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL) en pacientes con hipertrigliceridemia familiar (4). Una evaluacin ms minuciosa de las recomendaciones del Food and Nutrition Board, nos revela que considera como ingesta adecuada de

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acido linoleico, en hombres(19-50 aos): 17 g/da y en mujeres(19-50 aos): 12 g/da. Si con estos datos ms la ingesta adecuada de alfalinolnico establecemos la proporcin entre linoleico(omega-6) / alfalinolnico(omega-3) obtenemos para hombres 17/1.6(10.6/1) y para mujeres 12/1.1(10.9/1), dichas proporciones ya no son tan saludables, pero an se usan, a la luz de las recomendaciones de la FAO y OMS quienes recomiendan la proporcin 5/1 el Departamento de Salud y Bienestar-Canad que recomienda disminuir los omega-6 para llegar a un consumo de omega-6/omega-3 de iguales proporciones (44) En ese contexto tenemos que en los 20 ml de aceite de sacha inchi la proporcin de linoleico/alfa-linoleico fue de 0.75/1 (6.43/8.56), esto es mucho ms importante que analizar aisladamente la cantidad de alfalinolnico que se ingiere. Esta proporcin es relevante porque durante el perodo Paleoltico cuando el perfil gentico del humano fue establecido, hubo un balance entre los cidos grasos linoleico/alfalinoleico, el cual fue 0.7/1 -1/1, pero los seres humanos actualmente viven en un ambiente nutricional (omega-6/omega-3: 15/1- 16.7/1) que difiere del cual nuestra constitucin gentica fue seleccionada (3). En el aceite de sacha inchi, adems de la importancia del alfalinolnico y de su adecuado balance omega-6/omega-3, se dispone de una serie de componentes menores( tocoferoles,

esteroles,fosfolipidos y fenoles) que podran potenciar su efecto, este planteamiento es vlido ya que actualmente se reporta que el agente primario responsable de las propiedades saludables del aceite de

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oliva son sus componentes menores(tocoferoles, esteroles, fenoles y otros) ms que el cido oleico(12), mientras que en otros estudios se report que los componentes menores (tocoferoles, esteroles, fenoles) del aceite de Argan (Argania spinosa) tienen efecto sobre la peroxidacin del LDL-C(45). Cada da hay ms estudios sobre las propiedades teraputicas de alimentos comnmente usados en nuestra dieta diaria, por ejemplo el maz morado(Zea mays L.) (46) y la berenjena (Solanum melongena L.) (47), los cuales tienen efecto promisorio como hipolipemiantes. Siguiendo esta lnea y considerando el auge de los alimentos funcionales, ms los hallazgos encontrados en el presente estudio, estamos frente a un promisorio alimento funcional que crece en abundancia en el Per y que ha sido parte de la alimentacin de las culturas pre-incas. H. CONCLUSIONES El grupo que recibi 20 ml/da de aceite de sacha inchi durante 12 semanas, logr disminuir significativamente sus niveles de colesterol total y de triglicridos por debajo de los valores lmites deseables, cuando se compara con el grupo que solo sigui las

recomendaciones de dieta y ejercicio segn ATP III. Y su ingesta fue segura y tolerable. No obstante, este estudio tiene la limitacin que el nmero de pacientes fue pequeo, por lo que los hallazgos

encontrados son vlidos para este grupo de personas, pero las evidencias justifica realizar ms investigaciones.

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I.

RECOMENDACIONES Realizar estudios con un mayor nmero de pacientes, buscar un placebo para el aceite de aceite de sacha inchi, lipoprotenas de alta densidad(HDL) y evaluar las

baja densidad(LDL) esto

permitir orientar mejor el tratamiento ya que actualmente la molcula LDL es el blanco primario de las terapias hipocolesterolmicas. Evaluar la seguridad del aceite usando parmetros bioqumicos como el perfil heptico, renal, perfil de coagulacin entre otros. Evaluar el marcador inflamatorio PCR-ultrasensible, considerando que los eventos inflamatorios son centrales en la patognesis de

ateroesclerosis. AGRADECIMIENTOS A los internos de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la Universidad Nacional de la Amazonia Peruana-UNAP-Iquitos-Loreto, quienes realizaron sus prcticas en el Departamento de Farmacia y Toxicologa del IMET. Ellos colaboraron con todos los estudios pre-clnicos del aceite de sacha inchi. A los practicantes de la Facultad de Agronoma de la UNAP, quienes colaboraron con los estudios etnobotnicos del Departamento de

Etnobotnica. A la enfermera del Centro de Atencin de Medicina Complementaria- CAMEC-Iquitos. Nutricionista del Hospital III de IquitosEsSalud, al personal logstico del IMET y a los pacientes por su gran colaboracin.

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ANEXO I

APROBACIN DEL PROYECTO DE INVESTIGACIN POR EL COMIT DE TICA DEL HOSPITAL III DE IQUITOS ESSALUD

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AO DE LA UNION CONTRA LA CRISIS MUNDIAL

HOSPITAL III DE IQUITOS - ESSALUD COMIT DE TICA

ACTA DE REUNION

El comit de tica del Hospital III - Iquitos -- Essalud, se reuni para evaluar desde el punto de vista tico el proyecto presentado por el IMET EFECTO DEL ACEITE de Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) SOBRE LA HIPERCOLESTEROLEMIA E HIPERTRIGLICERIDEMIA EN PACIENTES CON HIPERLIPIDEMIA MIXTA DEL CAMEC - IQUITOS, 2009. Nosotros integrantes del comit de tica del Hospital III - Iquitos - Essalud, acordamos lo siguiente: 1. Aprobar la realizacin de dicho proyecto por cuanto cumple con los requisitos planteados para trabajos de investigacin. 2. Solicitar a los investigadores cumplir de manera estricta con el protocolo planteado, preservando el bienestar del paciente. 3. Recomendaciones: Es conveniente entregar una copia de consentimiento informado a los sujetos de estudio. Iquitos 19 de Mayo del 2009

__________________________ Dr. Alberto Del guila Manzur Presidente

__________________ Dr. Carlos Daz Celiz Miembro

______________________

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Lic. Isabel Navas Torres Miembro ANEXO II CONSENTIMIENTO INFORMADO Titulo del estudio: Efecto del aceite de Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) sobre la hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia en pacientes con hiperlipidemia mixta del CAMEC-Iquitos, 2009. A usted se le est solicitando participar en este estudio. Antes que decida participar usted necesita tener informacin para que decida su participacin voluntaria en el mismo. Su decisin de participar o no en este estudio, no afectar el servicio (atencin mdica) que se le brinde. Este estudio ser dirigido por el Instituto de Medicina Tradicional- IMET del Seguro Social de Salud- EsSalud, de la Red Asistencial Loreto. Propsito del Estudio Es demostrar si el aceite de sacha inchi disminuye los niveles de colesterol total y triglicridos. El estudio consistir en administrar por va oral durante 12 semanas, el siguiente protocolo:

Grupo 1(experimental):

Tomar 10 ml 2 veces/da de aceite de sacha

inchi ( antes del desayuno y almuerzo; adicional a un rgimen de dieta hipolipidmica y actividad fsica moderada.

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Grupo 2(control):

Slo seguir el mismo rgimen de dieta y actividad fsica que el grupo experimental.

La dieta hipolipidmica ser segn el informe del Grupo de Expertos del Programa Nacional de Educacin sobre el Colesterol-ATP III (la cual es parte de los cambios terapeticos de estilo de vida recomendados por este mismo Grupo de Expertos), esta dieta consistir: grasas saturadas < 7% de las caloras totales, grasas poliinsaturadas hasta un 10% de las caloras totales, grasas monoinsaturadas hasta un 20% de las caloras totales, grasas totales hasta un 25-35% de las caloras totales, hidratos de carbono 50-60% de las caloras totales, fibra 20-30 g/da, protenas aproximadamente 15% de las caloras totales, colesterol < 200 mg/da; las caloras totales mantuvieron un equilibrio entre el ingreso y el gasto para mantener el peso corporal deseable y evitar su aumento. La alimentacin para los pacientes se har en base a un promedio de caloras diarias dependiendo de su peso, talla, sexo, edad y actividad fsica; se mantendr constante este promedio de caloras durante las 12 semanas de estudio. Cada paciente recibir un plan de dieta individualizado por escrito y se les entregar los alimentos semanalmente para que los preparen de acuerdo a su plan de dieta. Para un mejor cumplimiento sern instruidos por una Nutricionista, quien los visitar semanalmente, adems recibirn una visita (en uno de los horarios de comida) 3 veces/semana de personal del IMET, para chequear el cumplimiento. Se considerar un cumplimiento correcto si el paciente cumple con las 3 principales comidas, siempre que no ingiera

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alimentos que no estn consignados en el plan diettico. Con respecto a la actividad fsica moderada, consistir en 3 sesiones semanales de caminata a paso ligero por 30 minutos, es decir un total de 36 sesiones durante las 12 semanas de estudio, se considerar un cumplimiento correcto si al final del estudio cumple con ms del 70% de las sesiones( 26 sesiones o ms), esto ser registrado por el paciente. Usted ser asignado al azar a uno de los 2 grupos. Es importante sealar que el aceite de sacha inchi que se usar para el presente estudio corresponde al nombre: Nutraceite Omega 3 de IMET, con un registro

sanitario como alimento otorgado por DIGESA. Este producto cuenta con parmetros de calidad aceptables para cualquier aceite comestible. La presentacin de este producto ser en botellas de vidrio color verde oscuro de 250 ml. Procedimientos. 1. Consulta con el Mdico-investigador responsable para el llenado de la ficha clnica, si es un potencial candidato para el estudio continuar el siguiente paso. 2. Exmenes de laboratorio, toma de muestra de sangre

aproximadamente 5 ml, de la flexura del codo, en el Laboratorio de Farmacologa y Toxicologa del IMET. 3. S los resultados de laboratorio ms la evaluacin clnica corresponden a los criterios de inclusin, ser usted seleccionado. 4. Luego ser distribuido al azar en uno de los 2 grupos de estudio.

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5.

La administracin del aceite se realizar en los respectivos domicilios de los pacientes, para lo cual se les entregar un lote de 7 botellas del aceite Nutraceite Omega-3 De IMET, la ingesta se realizar en presencia de personal del IMET que los visitar diariamente 2 veces/da. El aceite una vez abierto ser conservado en refrigeracin. Tambin como se dijo anteriormente, recibirn una visita de la Nutricionista semanal para reforzar las instrucciones del plan diettico.

6.

Evaluacin clnica s realizar al inicio(semana 0) y al final de las semanas 6 y 12.

7.

Exmenes de laboratorio al final de las 12 semanas de tratamiento, toma de muestra de sangre aproximadamente 5 ml de la flexura del codo.

8.

Despus de obtener el informe de laboratorio del final de las 12 semanas del estudio, los pacientes pasarn consulta con el mdicoinvestigador responsable para que le informe de sus resultados finales. Si no se lograra la normalizacin de los valores de colesterol total y triglicridos, se les derivar a los pacientes al Hospital III de Iquitos EsSalud, para que sean evaluados por un mdico general o internista.

Cabe sealar que los ambientes donde sern evaluados clnicamente y donde se tomarn las muestras de sangre, pertenecen al Instituto de Medicina Tradicional IMET de la Red Asistencial Loreto. Posibles beneficios

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Los estudios en animales con hiperlipidemia experimental, realizados en el Instituto de Medicina Tradicional-IMET-EsSalud, demostraron que el aceite de sacha inchi disminuye los niveles de colesterol y triglicridos en ratas. As tambin, hay otro estudio en ratas sanas en donde se observa que los niveles de colesterol y triglicridos disminuyen por efecto del aceite de sacha inchi. Adems hay un estudio en seres humanos, quienes comieron semillas de sacha inchi tostadas y lograron la disminucin de los triglicridos postprandial; estos estudios nos sugieren un beneficio potencial para usted, ya que es muy probable que tambin le ayude a disminuir sus niveles de colesterol total y triglicridos. Con respecto a la dieta hipolipidmica , se trata de una dieta estndar, ya estudiada, recomendada por el Comit de Expertos del Programa Nacional de Educacin sobre el Colesterol- ATP III. Con respecto a la actividad fsica moderada, ser de gran beneficio para su salud. Posibles riesgos y molestias Estudios de toxicida aguda y crnica realizados en el IMET-EsSalud , sobre el Nutraceite Omega-3 De IMET reportan que dosis agudas de 24 g/kg/da y dosis sub-crnicas de 2.5 g/kg/da son seguras e inocuas. Los 20 ml de aceite por da que ingerir equivale a tomar 0.3 g/kg/da , si consideramos un peso promedio de aproximadamente 60 kg, es decir usted tomar una cantidad de aceite muy inferior a las dosis evaluadas en los estudios toxicolgicos. Adems es de dominio pblico que este aceite es actualmente de consumo popular en la alimentacin diaria y hasta la fecha no se ha

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reportado efectos adversos. Es importante conocer las molestias potenciales del estudio que incluirn: la molestia de venir al IMET para sus

evaluaciones clnicas y de laboratorio, la molestia de tomar el aceite de sacha inchi, la molestia de recibir visita domiciliarias de la Nutricionista y personal del IMET para supervisar el cumplimiento de la dieta, el ejercicio y la ingesta del aceite, la molestia de someterse a un dieta estndar durante 12 semanas, la molestia de la insuflacin del manguito para tomar la presin arterial. Consideraciones: como las mujeres embarazadas sern excluidas del estudio, a las pacientes mujeres en edad frtil que logrn ser seleccionadas para el estudio, se les entregar condones como mtodo anticonceptivo, para evitar que salgan embarazadas durante el estudio. Derecho a retirarse del estudio Ocurrira para los participantes que: a. Deseen terminar su participacin. b. Experimenten reacciones adversas c. No puedan satisfacer el protocolo de estudio. El presente proyecto con su respectivo consentimiento informado ser revisado por un comit el comit de tica del Hospital IIII de Iquitos EsSalud. Privacidad Todos los datos recogidos sern identificados por un nmero de identificacin codificado para mantener la confidencialidad del participante.

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Todos los expedientes sern guardados en un archivo dentro de un gabinete cerrado. Todos los programas de cmputo de entrada de datos estarn identificados con cdigos.

Investigadores Responsables Usted podr ponerse en contacto con el investigador responsable: Dr. Jos Alberto Aranda Ventura, Tetfs. 26-5669, 231514, celular: 965-766025, direcciones: Psje. San Lorenzo N 205, calle 2 de Mayo N 348. Comit de tica. Direccin: Hospital III de Iquitos-EsSalud, Av La Marina S/N. Carretera Nanay. Distrito: Punchana. Provincia de Maynas, Departamento Loreto.

Area de Anatomopatologa. Presidente del Comit de tica: Dr. Alberto Del Aguila Manzur. Mdico Anatomopatlogo. Telefonos: 065-255733, anexo: 1037.Celular: 965975464. Firmas: Si usted voluntariamente estuviera de acuerdo en participar en este estudio es necesario su firma en este documento, en presencia de un testigo.

Nombre del paciente: ............ Firma:..

Nombre del testigo: ............ Firma:..

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DECLARACIN DEL INVESTIGADOR Yo certifico que este estudio ha sido explicado al paciente arriba indicado, quin ha comprendido el propsito del mismo, los posibles riesgos y beneficios y que en el momento que lo desee puede comunicarse conmigo.

NOMBRE: ............................ FIRMA.. FECHA: .................

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ANEXO III

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FICHACLINICA

Nombre:_____________________________________________________ Cdigo:____________________________________________________ Tiempo BASAL(SEMANA 0) Variable Clnica * Sntomas * Funciones biolgica: Apetito Sed Sueo H. Defecatorio Miccin * Signos * Signos Vitales: T FC FR PA IMC SEMANA 6

SEMANA 12

SUBJETIVO

OBJETIVO

OTROS SINTOMAS O SIGNOS

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ANEXO IV FICHA TECNICA DEL NUTRACEITE OMEGA 3 DE IMET

Foto del Nutraceite Omega 3 De IMET

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Ficha Tcnica del Nutraceite Omega-3 De IMET El Nutraceite Omega-3 De IMET, es el aceite obtenido por prensado en fro de las semillas de la planta llamada sacha inchi. Una muestra botnica de esta planta fue colectada por el Departamento de Etnobotnica del IMET y llevada al Herbarium Amazonense de la Universidad Nacional de la

Amazonia Peruana , en donde se identific y certific que el nombre cientfico es Plukenetia volubilis Linneo (ver copia del certificado). Ya identificada la fuente de la materia prima, se procedi ha determinar que zonas de la Regin Loreto iban a proveer en forma continua las semillas de sacha inchi, respetando las buenas prcticas agrcolas. El procedimiento para obtener el aceite fue: secado, descapsulado, pesado, descascarado, seleccin visual de la almendra, molido de la almendra, prensado en fro, filtrado del aceite en papel de filtro Wathman N 01, depositado en contenedores de acero inoxidable e inmediatamente envasado en botellas de vidrio verde oscuro de 250 ml, finalmente las botellas fueron selladas hermticamente con precinto de seguridad (chapa metlica) y etiquetadas. Todo este procedimiento se realiz en las instalaciones de la empresa Negocios Agroindustriales Loreto S.A.C., ubicada en la Provincia de Maynas-Ciudad Iquitos. El Departamento de Etnobotnica, se encarg de recolectar las semillas y entregarlas a la empresa ya referida, mientras que el Departamento de Farmacognosia se responsabiliz de la supervisin de todo el proceso de obtencin del aceite hasta su envasado y

almacenamiento. Este producto cuenta con un Registro Sanitario como

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alimento Cdigo C1304608N/OASGSC, expedido por DIGESA (ver copia del Registro). Tambin se dispone de un Registro de Propiedad Industrial a favor del Seguro Social de Salud- EsSalud, expedido por INDECOPI, es as que el Nombre Nutraceite Omega-3 De IMET ha quedado inscrito en el Registro de Marcas de Producto, con el certificado N 00154013. Con la finalidad de determinar los componentes qumicos y parmetros de calidad de este producto, se envi 2 botellas del Nutraceite Omega-3 De IMET al laboratorio POS Pilot Plant Corp. De Canada. Ver copia de informes de ensayo realizados en este Laboratorio.

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ANEXOV FICHADECONTROLDECUMPLIMIENTODELAINGESTADELACEITEDESACHAINCHI Nombre :_________________________________________________________________________________________________________ Cdigo :_________________________________________________________________________________________________________ DIAS 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Tratamiento

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45

Cadadaelpacientefirmar01vezcomoconstanciaquehatomadolos20ml/diadelaceite

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DIAS 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Tratamiento

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Cadadaelpacientefirmaraunavezencadacasillerocomoconstanciadehaberingerido20ml.deaceiteporda

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ANEXO VI FICHA DE REGISTRO DE LABORATORIO Apellidos y Nombres: ____________________________________________ Cdigo: ______________________________________________________

Pre-Tratamiento Exmenes de Sangre (Semana 0)

Post-tratamiento (Semana 12)

Colesterol total (mg/dl)

Triglicridos (mg/dl)

Laboratorio de Farmacologa y Toxicologa del IMET ESSALUD Red Asistencial Loreto

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ANEXO VII EJEMPLO DE PLAN DE DIETA POR 7 DAS PARA UNA PACIENTE DEL ESTUDIO Y REGISTRO DE CUMPLIMIENTO DEL PLAN DIETTICO Y FRECUENCIA DE ACTIVIDAD FSICA

MEN 01: Aporte Nutricional: 1859.4Caloras DESAYUNO Naranja Para Jugo Pan integral.(Calentar Con Aceite de Soya) Clara de huevo. Adicional 10 Am 1 Porcin de Papaya. ALMUERZO Ensalada de lechuga / tomate. Caldo de quinua con verduras. Saltado de vainita con pollo. Media porcin de arroz. Fruta Meln. Agua Hervida CENA Caldo de verduras. Saltado de Berenjena c/pollo. Fruta granadilla.

DOSIFICACIN DE INGREDIENTES POR RACIN POR DA DESAYUNO: ALIMENTO Leche evaporada semidescremada Papaya Huevo de gallina clara Pan integral de trigo Naranja agria, jugo de Azcar rubia Aceite vegetal de soya TOTAL De Caloras CANTIDAD Gr 100 150 38 20 150 11 5.6 371.8

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ALMUERZO: ALIMENTO Pollo pierna Tomate redondo Lechuga redonda Quinua hojuela Zanahoria Poro Apio Uvilla Arroz Extra Vainita picada Aceite vegetal de soya TOTAL De Caloras CANTIDAD Gr 100 80 60 15 44 20 20 100 100 240 10.1 929.9

EL POLLO DEBE SER SANCOCHADO Y SIN PIEL LAS FRUTAS SE CONSIDERA PARTE COMESTIBLE CENA: ALIMENTO Pollo pierna Frijol chino germinado Apio Poro Nabo Zapallo macre Zapallo italiano Zanahoria Arroz extra Aceite vegetal de soya Pera manzana(3pm) TOTAL Caloras CANTIDAD gr 70 180 20 16 20 58 30 20 40 20.08 180 557.7

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ADECUACIN DE NUTRIENTES TOTAL DE CALORAS DESAYUNO ALMUERZO CENA CALORAS 371.8 929.9 557.7 APORTE CALRICO PROTENAS GRASA CARBOHIDRATOS PORCENTAJE 15.00 27.00 58.00

MEN 02: Aporte Nutricional: 1859.1 DESAYUNO Jugo de Manzana. Leche de soya. Pan integral c/ aceituna. ALMUERZO Ensalada de Mixta( zanahoria +Brcoli Cebolla Caldo de verduras. Guiso de zapallo c/ carne. Fruta naranja. CENA Crema de verduras. Saltado de caigua c/ pollo. Media porcin de arroz. -Fruta Uva borgoa

DOSIFICACIN DE INGREDIENTES POR RACIN DESAYUNO: ALIMENTO Leche de soya Pan integral de trigo Manzana Aceitunas de botija Azcar rubia, granulada Naranja 10 AM TOTAL Caloras CANTIDAD gr 120 20 150 25 9.7 200 371.67

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ALMUERZO: ALIMENTO Carne, pulpa Cebolla Brcoli Apio Nabo Poro Zanahoria Naranja Zapallo macre Ajo molido Aceite vegetal de soya Arroz pilado o pulido crudo Zapallo italiano Arroz extra Aceite vegetal de soya Limn, jugo de TOTAL Caloras CANTIDAD gr 100 30 100 10 40 10 78 240 40 10 15 50 100 50 9.9 10 929.6

CENA: ALIMENTO Pollo pierna Caigua Apio Poro Zapallo macre Zanahoria Ajo molido Arroz extra Uva borgoa Nabo Aceite vegetal de soya TOTAL Caloras CANTIDAD gr 100 180 19 19 60 60 9.7 50 130 20 5 557.8

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DISTRIBUCIN POR FRACCIN DE RACIN

TOTAL DE CALORAS DESAYUNO ALMUERZO CENA

CALORAS

APORTE CALRICO PROTENAS GRASA CARBOHIDRATOS

PORCENTAJE 14.00 28.00 58.00

371.67 929.6 557.8

MEN 03: Aporte Nutricional: 1858.9 DESAYUNO Leche. Tostadas c/ tortilla de verduras. Jugo de pia. ALMUERZO Ensalada rusa s/ papa. Caldo de verduras. Saltado de zapallo italiano c/ carne. Media porcin de arroz. Fruta sandia. CENA Sopa de quinua. Saltado de olluco + vainita c/ pollo. Fruta mandarina.

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DOSIFICACIN DE INGREDIENTES POR RACIN DESAYUNO: CANTIDAD Gr 120 20 20 22 20 30 5 8 160 371.31

ALIMENTO Leche evaporada semidescremada Pan integral de trigo Espinaca Cebolla Tomate redondo Huevo de gallina, clara Azcar rubia, granulado Aceite vegetal de soya Pia TOTAL

ALMUERZO: CANTIDAD Gr 120 60 60 30 30 30 80 250 80 10.4 30

ALIMENTO Carne, pulpa Zanahoria Betarraga Apio Poro Nabo Zapallo macre Zapallo italiano Arroz extra Ajo molido Cebolla

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Tomate redondo Limn, jugo de Choclo sin panca Mandarina Pomarrosa Aceite vegetal de soya TOTAL

30 15 80 150 120 13 929.72

C ENA: ALIMENTO Pollo pierna Poro Zapallo macre Nabo Apio Quinua hojuela Olluco Vainita picada Ajo molido Aceite vegetal de soya Papaya TOTAL CANTIDAD Gr 100 30 50 30 30 20 200 63 15 10 140 557.9

DISTRIBUCIN POR FRACCIN DE RACIN TOTAL DE CALORAS DESAYUNO ALMUERZO CENA 371.31 929.72 557.9 CALORAS APORTE CALRICO PROTENAS GRASA CARBOHIDRATOS 14.00 28.00 58.00 PORCENTAJE

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MEN 04: Aporte Nutricional: 1895.8 DESAYUNO Leche descremada. Jugo de pia. Queso fresco Laive ALMUERZO Ensalada de pepinillo / zanahoria. Sopa de morn. Media porcin de arroz. Pescado rio. Ensalada de frutas (manzana, pia, papaya, naranja). DOSIFICACIN DE INGREDIENTES POR RACIN DESAYUNO: CANTIDAD Gr 120 200 30 30 10 117 357.4 CENA Sopa de trigo pelado. Saltado de brcoli c/ pollo. Manzana Hermelinda.

ALIMENTO Leche de soya Pia Pan integral de trigo Queso fresco de vaca Azcar rubia Anona TOTAL Caloras

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ALMUERZO: ALIMENTO Jurel Pepinillo o pepino de mesa Cebolla Morn Tomate redondo Zanahoria Apio Poro Nabo Zapallo macre Pia Papaya Manzana Arroz pilado Aceite vegetal de soya Toronja TOTAL Caloras CANTIDAD Gr 150 100 50 15 50 50 25 25 25 60 60 60 60 80 20 19 981.4

CENA: CANTIDAD Gr 120 200 15 50 200 15 50 20 20 20 557

ALIMENTO Pollo pierna Brcoli Trigo Zapallo macre Manzana Aceite vegetal de soya Zanahoria Apio Poro Nabo TOTAL Caloras

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DISTRIBUCIN POR FRACCIN DE RACIN TOTAL DE CALORAS DESAYUNO ALMUERZO CENA 357.4 981.4 557.0 CALORAS APORTE CALRICO PROTENAS GRASA CARBOHIDRATOS 14.00 28.00 58.00 PORCENTAJE

MEN 05: Aporte Nutricional: 1859.3 DESAYUNO Leche evaporada semidescremada. Pan integral / pollo. Jugo de manzana. ALMUERZO Ensalada de choclo + zanahoria. Sopa de trigo c/ verduras. Media porcin de arroz. Saltado de coliflor c/ pollo. Fruta limn dulce. CENA Crema de espinaca. Saltado de brcoli. Media porcin de arroz. Fruta papaya.

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DOSIFICACIN DE INGREDIENTES POR RACIN DESAYUNO: ALIMENTO Leche de soya Pan integral de trigo Pollo pechuga Papaya Uva borgoa Pltano guineo Tuna Pepino dulce Pera nacional Yogurt Azcar rubia, granulada TOTAL Caloras CANTIDAD Gr 120 20 30 150 60 50 45 50 120 50 10 371.9

ALMUERZO: CANTIDAD Gr 100 100 80 25 25 25 40 15 80 127 140 929.8

ALIMENTO Pollo pierna Choclo sin panca Zanahoria Apio Poro Nabo Zapallo macre Aceite vegetal de soya Arroz pilado Ciruelas Pera chilena TOTAL Caloras

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CENA: CANTIDAD gr 100 140 100 60 140 11 557.6

ALIMENTO Pollo pierna Brcoli Espinaca Arroz pilado Papaya Aceite vegetal de soya TOTAL Caloras

DISTRIBUCIN POR FRACCIN DE RACIN TOTAL DE CALORAS DESAYUNO ALMUERZO CENA 371.9 929.8 557.6 CALORAS APORTE CALRICO PROTENAS GRASA CARBOHIDRATOS 14.00 27.00 59.00 PORCENTAJE

MEN 06: Aporte Nutricional: 1859 DESAYUNO Leche de soya. Pan integral / palta. Meln. ALMUERZO Ensalada de chonta, pepinillo + tomate. Caldo de olluco. Saltado de coliflor c/ pollo. Fruta lima. CENA Caldo de verduras. Saltado de frejol chino c/ pollo. Fruta pera.

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DOSIFICACIN DE INGREDIENTES POR RACIN DESAYUNO: ALIMENTO Leche de soya Pan integral de trigo Palta Papaya Azcar rubia, granulada Sandia TOTAL Caloras CANTIDAD Gr 125 35 41 200 15 232 371.6

ALMUERZO: ALIMENTO Pollo pierna Chonta Pepinillo o pepino de mesa Tomate Olluco Apio Poro Nabo Zanahoria Coliflor Cebolla Ajo molido Limn dulce, lima Arroz extra Aceite vegetal de soya Blanquillos TOTAL Caloras CANTIDAD Gr 120 40 50 40 130 30 30 30 50 180 30 10 140 80 14 120 929.8

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CENA: CANTIDAD gr Pollo pierna 100 Apio 20 Poro 20 Nabo 20 Zanahoria 30 Zapallo macre 30 Frijolito chino, germinado 140 Pera de agua 130 Arroz extra 60 Aceite vegetal de soya 7.6 TOTAL Caloras 557.6 DISTRIBUCIN POR FRACCIN DE RACIN ALIMENTO TOTAL DE CALORAS DESAYUNO ALMUERZO CENA 371.6 929.8 557.6 CALORAS APORTE CALRICO PROTENAS GRASA CARBOHIDRATOS 14.00 28.00 58.00 PORCENTAJE

MEN 07: Aporte Nutricional: 1859.91 DESAYUNO Jugo de naranja. Leche de soya. Pan integral / margarina. ALMUERZO Ensalada de caigua + chonta + tomate. Sopa de morn c/ verduras. Frejoles guisados. Bistec al jugo. Media porcin de arroz. CENA Caldo de verduras. Locro de zapallo c/ pollo + verduras. Media porcin de arroz.

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DOSIFICACIN DE INGREDIENTES POR RACIN DESAYUNO: CANTIDAD gr 200 120 20 30 9 180 372.8

ALIMENTO Naranja Leche de soya Pan integral de trigo Huevo de taricaya (tortuga) Azcar rubia, granulada Mango TOTAL Caloras

ALMUERZO: ALIMENTO Carne, pulpa Chonta Caigua Tomate Morn Apio Poro Nabo Zanahoria Arroz extra Frijol canario Aceite vegetal de soya Chirimoya Caimito Cebolla TOTAL Caloras CANTIDAD gr 120 30 50 30 15 20 20 20 20 60 60 10 120 100 24 929.51

102

CENA: ALIMENTO Pollo pierna Apio Poro Nabo Zapallo macre Choclo sin panca Arvejas verdes partidas Vainita picada Arroz pilado Granadilla Zanahoria Tuna TOTAL Caloras CANTIDAD gr 100 20 20 20 200 47.3 20 20 30 20 40 130 557.6

DISTRIBUCIN POR FRACCIN DE RACIN TOTAL DE CALORAS DESAYUNO ALMUERZO CENA 372.8 929.51 557.6 CALORAS APORTE CALRICO PROTENAS GRASA CARBOHIDRATOS 14.00 28.00 58.00 PORCENTAJE

103

Registro Personal de Cumplimiento del Plan Diettico: Desayuno Almuerzo Cena _________ _________ _________

Marcar con una aspa slo si cumpli correctamente con estas comidas.

Registro de cumplimiento de la actividad fsica N de sesiones a la semana: 1. ____________ 2. ____________ 3. ____________ Marcar con una aspa slo si cumpli con la actividad fsica indicada.

104

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23. Comisin de Normalizacin y de Fiscalizacin de Barreras Comerciales

No

Arancelarias-INDECOPI.

Norma

Tcnica

Peruana

NTP

151.400:2009: Aceite de Sacha Inchi del gnero Plukenetia.- Requisitos. 2009.

24. Aranda-Ventura J, Villacrs J. Composicin de cidos grasos del aceite

extrado de seis muestras de semillas de Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) recolectadas en la Regin Loreto. Informe del Departamento de Etnomedicina-IMET-EsSalud. 2009; 001-SI.
25. Gorriti A, Arroyo J, Quispe F, Cisneros B, Condorhuamn M, et al.

Toxicidad oral a 60 das del aceite de sacha inchi (Plukenetia volubilis L.) y Linaza (Linum ussitatissimum) y determinacin de la dosis letal 50 en roedores. Rev Per Med Exp Salud Publica. 2010; 27(3):352-60
26. Ros F, Infa G, Aranda-Ventura J, Villacrs J. Evaluacin genotxica del

aceite de Plukenetia volubilis L.(sacha inchi) mediante el ensayo de anomalas en la cabeza de los espermatozoides. Informe del Departamento de Farmacologa y Toxicologa-IMET-EsSalud.2009; 001SI
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Castro J, Aranda-Ventura J, Infa G, Villacrs J. Evaluacin genotxica del aceite de Plukenetia volubilis L.(sacha inchi) mediante el ensayo cometa. Informe del Departamento de Etnomedicina-IMET-

108

EsSalud.2009; 002-SI.
28.

Ros F. Toxicidad aguda oral del aceite de Plukenetia volubilis L.(sacha inchi) en animales de experimentacin. Informe del

Departamento de Farmacologa y Toxicologa-IMET-EsSalud.2009; 002SI.

29.

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