Vous êtes sur la page 1sur 7

PRODUCTION PAR CO-BROYAGE DE MATERIAUX COMPOSITES POREUX BIODEGRADABLES A USAGE ORTHOPEDIQUE Nadine LE BOLAY *, Vronique SANTRAN**, Christle COMBES***,

Grard DECHAMBRE***, Christophe DROUET***, Alain LAMURE***, Christian REY*** *Laboratoire de Gnie Chimique UMR CNRS 5503 ENSIACET 5 rue Paulin Talabot, BP 1301, 31106 Toulouse cedex 1 Tel : +33 (0)5 34 61 52 67 ; Fax : +33 (0)5 34 61 52 53 Nadine.LeBolay@ensiacet.fr **Laboratoire de Biologie Cellulaire U 531 38 rue des 36 ponts 31400 Toulouse ***CIRIMAT UMR CNRS 5085 ENSIACET 118 route de Narbonne 31077 Toulouse cedex 4
Rsum. Larticle prsente les rsultats dune tude sur la production de matriaux composites poreux biodgradables par co-broyage suivi dune mise en forme. De lacide polylactique et une apatite nanocristalline carbonate analogue au minral osseux, sous forme de poudres, ont t cobroys dans un broyeur boulets afin de disperser la charge minrale dans le polymre. Des implants poreux ont ensuite t raliss en moulant chaud le mlange des deux constituants et un agent porogne qui a ensuite t limin par lessivage. La rsistance mcanique des implants a enfin t caractrise. Il a t montr que des pourcentages de 30 % de charge et 70 % dagent porogne permettent de produire des implants suffisamment poreux et rsistants. Mots Cls. Biopolymre, biodgradable, co-broyage, proprits

1. INTRODUCTION Les matriaux composites matrice polymre offrent des potentialits importantes en chirurgie rparatrice du tissu osseux en raison de leur analogie avec l'os, qui constitue un nanocomposite naturel. Cependant, leurs dveloppements industriel et commercial restent, ce jour, limits. Une des voies nayant pas encore t explore pour obtenir ces matriaux est lutilisation du cobroyage de la charge minrale et du polymre. Ce procd a dj t utilis pour la synthse de matriaux composites matrice polymre et charge minrale constitue de calcite [1,2], et il a t dmontr que le co-broyage permettait damliorer nettement les proprits mcaniques du matriau par rapport un simple mlange des constituants. Il sagit ici de produire des composites poreux biocompatibles et biodgradables par co-broyage des constituants, suivi dune mise en forme, en vue d'offrir une alternative aux substituts osseux base de cramiques frittes haute temprature actuellement utiliss. Ces composites offrent des avantages indniables sur ces dernires. Ils permettent en particulier une mise en forme contrle et ralise basse temprature, limitant ainsi les pertes en ractivit de surface de la charge minrale. Par ailleurs, leurs proprits mcaniques sont adaptables et autorisent de nombreuses applications. Enfin, plusieurs associations entre le biomatriau et des principes actifs (ions minraux biologiquement actifs, facteurs de croissance, ) peuvent tre envisags par l'intermdiaire de la charge minrale, permettant de moduler lactivit cellulaire aprs implantation [3,4]. Larticle prsente une tude sur la production, par co-broyage dans un broyeur boulets et mise en forme, de composites poreux biodgradables offrant plusieurs caractristiques : porosit et distribution de taille des pores imposes, bonne rsistance la compression. Le polymre utilis est lacide polylactique, couramment choisi comme biomatriau, alors que la charge est constitue dune apatite nanocristalline carbonate de synthse, analogue au minral osseux [5,6]. Ce choix permet ainsi dassocier la biodgradabilit de la matrice polymre et les proprits biologiques, de biodgradabilit et mcaniques de la charge minrale.

2. PRODUITS, APPAREILLAGES ET ANALYSES La matrice polymre retenue pour cette tude est de lacide polylactique L,D (PLA, Galactic), disponible sous forme de granuls denviron 3 mm de diamtre. Ces granuls sont prbroys pendant 10 minutes dans un broyeur couteaux de laboratoire thermostat 20 C pour viter, sous leffet

des lames des couteaux, un chauffement local du produit pouvant engendrer son passage ltat caoutchoutique [7]. Le polymre est ensuite tamis, et seules les particules dont la taille est infrieure 250 m sont conserves. La taille moyenne du produit initial est gale 157,7 m. La charge minrale utilise dans ce travail est constitue dapatite carbonate nanocristalline obtenue par double dcomposition entre une solution de nitrate de calcium Ca(NO3)2 4H2O (52.2 g dans 750 ml deau dsionise et une solution dhydrognophosphate dammonium (NH4)2HPO4 (90 g) et dhydrognocarbonate de sodium NaHCO3 (90 g), dans 1500 ml deau dsionise. Le prcipit form a t laiss maturer dans les eaux mres pendant 15 jours, puis filtr, lav leau dsionise, puis lyophilise, et la poudre a t conserve au conglateur jusqu utilisation. Son taux de carbonatation initial a t dtermin 4.5% massique, avec un rapport Ca/P de 1.46. La taille des nanocristallites individuelles (sous forme de plaquettes) a t value partir des donnes de diffraction des rayons X 160 en longueur et une moyenne de 54 en largeur/paisseur, par application de la formule de Scherrer. Ces plaquettes prsentent cependant une forte agglomration, et la taille moyenne initiale des particules agglomres de charge minrale a t value 37,4 m. Lopration de co-broyage a t ralise en voie sche dans un broyeur boulets de laboratoire constitu dune jarre en cramique dun litre contenant des boulets en cramique de 10 mm de diamtre occupant 20 % du volume de la jarre. La vitesse de rotation de la jarre a t fixe 100 tr.min-1 (soit 75% de la vitesse critique), afin dobtenir un mouvement en cataracte des boulets. Des particules dacide polylactique, dapatite ou de mlange des deux constituants en proportions variables (10 40 % massique de charge minrale) ont t introduites dans la jarre, lensemble de la poudre occupant 10% du volume vide interstitiel des boulets. Ce pourcentage de poudre peut paratre faible par rapport ceux habituellement utiliss avec ce type de broyeur (40 50 %), mais il a t choisi afin de minimiser la consommation des produits qui sont coteux. Diffrents temps de cobroyage, variant entre 10 minutes et 10 heures, ont t fixs. Plusieurs proprits des chantillons de poudres produits par co-broyage ont t caractrises : la taille des particules (granulomtre laser Malvern Mastersizer 2000 coupl un accessoire de dispersion en voie sche de type Sirocco) ; la morphologie des particules (microscope lectronique balayage LEO 435 VP) ; la temprature de transition vitreuse (thermobalance SDT Q600 TA Instruments). La faisabilit de mise en forme dimplants a t teste en fabriquant des pastilles poreuses. A cet effet, un agent porogne (du chlorure de sodium de taille moyenne gale 300 m) a t ajout aux poudres produites par co-broyage, le sel reprsentant de 50 90 % massique de lensemble. Les chantillons ont ensuite t mlangs pour obtenir des systmes homognes en composition, puis ils ont t placs dans un moule en Teflon afin de former des pastilles de 1 cm de diamtre et 3 mm dpaisseur. Ils ont t ports 190 C pendant 45 minutes, puis refroidis temprature ambiante. Les pastilles obtenues ont t places dans de leau pour dissoudre totalement le chlorure de sodium et gnrer ainsi la porosit. La tenue des pastilles poreuses a t contrle en les observant qualitativement dans leau. Les pastilles ont ensuite t retires de leau et sches lair ambiant. Leur porosit a t contrle par microscopie lectronique balayage et mesure laide dun porosimtre multi gaz (ASAP 2010 M, Micromritics). Enfin, compte tenu de la forme des chantillons (disques), lvaluation de la rsistance mcanique dprouvettes par tests classiques en compression requrant un rapport hauteur/diamtre suprieur 1,5 na pas t possible, et celle-ci a t ralise en traction indirecte ou test brsilien . Au cours de cet essai, une force de compression croissante (F) est appliqu sur un cylindre (ou disque) en position horizontale, des contraintes de traction proportionnelles leffort se dveloppent perpendiculairement au plan passant par les deux gnratrices supportant la charge. La rupture se produit alors lorsque la contrainte de traction est maximale. La rsistance mcanique du disque est dtermine par (contrainte), qui est relie F par lquation : = 2F / (DH) o D et H reprsentent respectivement le diamtre et la hauteur du disque.

3. CARACTERISATION DES POUDRES PRODUITES PAR CO-BROYAGE Chaque systme particulaire ayant un comportement spcifique lors du broyage ou du cobroyage, il convient tout dabord de broyer les deux constituants sparment en suivant leur taille au cours du temps.

En ce qui concerne lacide polylactique, dont la taille moyenne initiale est de 157,7 m, le broyage ne permet pas de fragmenter les particules. Au contraire, la taille augmente progressivement au cours du broyage en raison de phnomnes dagglomration. Ainsi, elle atteint 189,8 m aprs une heure de traitement et 415 m aprs 3 heures. Au del de ce temps, on observe la formation dcailles rsultant de lagglomration des particules entre elles puis de la compaction des agglomrats sous leffet des boulets. Pour ce qui est de lapatite utilise, sa taille est rapidement rduite comme le montre la figure 1, puisquune taille limite de 4 m est atteinte aprs 6 minutes de traitement. Cette fragmentation rapide provient du fait que les particules sont constitues dagglomrats de nanocristaux, qui sont partiellement dissocis lors du broyage. Ceci laisse prsager que lors du co-broyage, la charge pourra se rpartir aisment au sein de la matrice.

40 35 30 25 20 15 10 5 0 0

d50 (m)

t (min) 2 4 6 8

Figure 1 : Variation de la taille de lapatite et photo MEB dune particule (chelle = 100 m)

En ce qui concerne les mlanges, leur comportement diffre selon la proportion de la charge. En effet, avec 10 % dapatite, le mlange tend sagglomrer comme le polymre seul. Par contre, partir de 30 %, on note une rduction progressive de la taille moyenne des particules, puisque aprs 10 heures de co-broyage, celle-ci atteint 90,8 m avec 30 % de charge, et 62,7 m avec 40 %. Sous leffet des boulets, les particules dapatite se fragmentent. Lorsque les fragments ont atteint quelques microns, ils adhrent la surface des particules de polymre, empchant celles-ci de sagglomrer entre elles. Un traitement prolong permet mme droder les fragments de charge et den rduire davantage la taille que par broyage de la charge seule. Ainsi, on peut voir sur les photos MEB de la figure 2 que des fragments de charge de taille infrieure au m sont colls sur le polymre. Nous avons vrifi par EDX que les petits fragments taient le minral. La charge est ainsi parfaitement disperse au sein de la matrice, dispersion favorise par la rduction de la taille des particules de polymre. De plus, ladhsion de la charge sur le polymre permet dviter une sgrgation ultrieure des constituants lors de la manutention, conservant ainsi lhomognit du mlange.

Figure 2 : Photos MEB du mlange aprs 10 heures de co-broyage

De par lanalyse de la taille et de la morphologie des particules, on peut dire quun pourcentage de charge de 30 ou 40 % massique est retenir pour la suite de ltude, proportion suffisamment leve pour participer la rparation tissulaire (ostoconduction) en favorisant la colonisation cellulaire de l'implant et la minralisation de la matrice extracellulaire. La temprature de transition vitreuse dchantillons de polymre prbroy, sans apatite, et de mlanges contenant 30 et 40 % massique de charge, broys 10 minutes et 10 heures, a t dtermine. Elle est gale 54 C pour le polymre prbroy (ce qui est en accord avec la bibliographie [3] et les spcifications du fournisseur), comme pour les mlanges co-broys 10 minutes. Pour les mlanges co-broys 10 heures cette temprature augmente jusqu 58,5 C et le pourcentage de charge ninflue pas sur sa valeur. Ces rsultats montrent que la charge rigidifie la structure supramolculaire du polymre quelle que soit lpaisseur de la couche dapatite dpose.

4. FAISABILITE DE MISE EN FORME DIMPLANTS Sagissant de reconstruction osseuse, les implants composites doivent permettre la migration des cellules et la vascularisation. Il sagit alors de produire des implants suffisamment poreux, en terme de pourcentage de porosit et de taille des pores, mais ayant suffisamment de maintien. Nous avons donc fabriqu des pastilles constitues dune part des mlanges pulvrulents cobroys pendant diffrents temps, contenant 30 ou 40 % massique dapatite, et dautre part de chlorure de sodium raison de 50 90 % massique dagent porogne dans le mlange. Le sel a ensuite t limin par lessivage leau. Les pastilles ont t lessives pendant 48 heures et nous avons contrl par microscopie lectronique balayage que tout le sel avait t limin. De plus, les pastilles ont t observes qualitativement afin de contrler leur tenue lors de cette tape de lessivage. Enfin, les pastilles poreuses ont t sches. Leur tenue a galement t contrle ce stade puis elles ont t observes au microscope lectronique balayage et leur porosit a t mesure. Les pastilles contenant 90 % massique de chlorure de sodium se sont transformes en poudre ds ltape de lessivage car le composite ntait pas prsent en quantit suffisante pour constituer un rseau continu autour des cristaux de sel. Les pastilles contenant 80 % de sel et moins ont satisfait cette tape de la mise en forme. Les pastilles contenant le composite 40 % dapatite ont t trs friables aprs ltape de schage et elles se sont transformes en poudre ds leur manipulation. La proportion de charge dans les mlanges tait probablement trop leve, ne permettant pas la matrice de jouer correctement son rle de liant. Seules les pastilles contenant les mlanges 30 % dapatite et 80 % de chlorure de sodium ou moins ont t conserves pour les analyses ultrieures. Les photos des figures 3.a et 3.b montrent des vues de pastilles avant et aprs lessivage. Sur la premire photo, les cristaux de sels sont bien visibles, emprisonns dans le composite. Aprs lessivage, des pores sont crs, de forme cubique et dune taille de lordre de 200 300 m. Le grossissement de la photo 3.c permet de constater que des cristaux (agglomrats) dapatite tapissent les pores, signe quils seront accessibles aprs implantation. De plus, on relve des interconnections entre pores (photos 3.c et 3.d), de diamtre variant entre 100 et 200 m, rsultant des contacts entre cristaux de sel lors de la fabrication des pastilles. La distribution des pores au sein des pastilles a t dtermine par porosimtrie au mercure. Un exemple est prsent sur la figure 4 dans le cas dune pastille contenant un mlange 30 % massique dapatite et pour laquelle 80 % massique de chlorure de sodium (soit 74 % volumique) ont t initialement introduits. La taille moyenne des pores a t dtermine 133,4 m et la porosit 60 % volumique. Ce pourcentage est un peu infrieur celui du sel initialement introduit. En effet, lors de la constitution des pastilles, le chlorure de sodium tant plus dense que le mlange composite, une lgre sgrgation se produit, de sorte que la proportion de sel rellement au cur des pastilles est un peu infrieure la valeur initiale. Des rsultats similaires ont t obtenus avec toutes les pastilles contenant le composite 30 % massique de charge, quel que soit le temps de co-broyage. Nanmoins, la diffrence entre le pourcentage de porosit des implants et le pourcentage dagent porogne initialement introduit se rduit avec ce dernier en raison dune diminution des phnomnes de sgrgation entre les constituants. La taille des pores et le taux de porosit sont satisfaisants pour permettre laccessibilit de lensemble de limplant aux cellules.

a. Pastille avant lessivage (chelle = 1 mm)

b. Pastille aprs lessivage (chelle = 1 mm)

c. Prsence de cristaux minraux (chelle = 200 m) d. interconnections entre pores (chelle = 100 m) Figure 3 : Photos MEB de pastilles

Figure 4 : Distribution en volume des pores

5. RESISTANCE MECANIQUE DES IMPLANTS Un autre critre dexigence concernant les implants est leur rsistance mcanique. En effet, ils doivent tre facilement manipulables par le chirurgien, et conserver leur forme aprs implantation

dans le corps humain (avant rsorption). Dune manire gnrale, le renfort minral joue ce rle. Nanmoins, dans le cas de composites poreux prsentant une porosit leve, la prsence des pores peut annuler leffet de la charge. Cest pourquoi des tests de rsistance mcaniques ont t raliss. A cet effet, deux sries dexpriences ont t menes. Au cours de la premire, des tests brsiliens ont t effectus sur des pastilles obtenues dans des conditions identiques celles prsentes dans le paragraphe prcdent : pourcentage massique dapatite = 30 % ; temps de cobroyage = 10 minutes ; pourcentage massique de sel = 65, 70, 75 et 80 % ; temprature de chauffe = 190 C ; mise en uvre pression ambiante. Le tableau 1 prsente les rsultats de rsistance mcanique pour les diffrents pourcentages dagent porogne utiliss. % sel Rsistance (MPa) 65 2,17 70 2,21 75 1,03 80 faible

Tableau 1 : Influence du pourcentage de sel sur la rsistance des pastilles poreuses

On peut noter que jusqu 70 % dagent porogne, la rsistance mcanique est satisfaisante. Par contre, elle diminue nettement pour des pourcentages suprieurs car le composite est prsent en proportion trop faible pour constituer une structure suffisamment rigide. Une deuxime srie dexpriences a t ralise en diminuant la temprature de travail et en exerant une pression sur la surface de la pastille au moment de sa mise en forme. Une temprature de 130 C a t fixe dans le but ventuel de limiter les pertes en ractivit de surface de lapatite temprature plus leve. En ce qui concerne la pression, elle a t fixe 20, 50 et 75 MPa. Les rsultats sont rassembls dans le tableau 2. Pression (MPa) 75 % sel 65 70 75 80 65 80 65 80 Rsistance (MPa) 1,98 0,87 0,11 0,12 0,62 0,12 0,59 faible

50 20

Tableau 2 : Influence de la pression et du pourcentage de sel sur la rsistance des pastilles poreuses

Comme prcdemment, on peut noter que les rsultats sont plus satisfaisants avec les pourcentages de sel les plus faibles. En outre, la rsistance des pastilles est amliore par une augmentation de la pression exerce leur surface lors de la mise en forme. Toutefois, quelles que soient les conditions de mises en uvre, les rsistances restent infrieures celles de la premire srie dexpriences.

CONCLUSIONS Le co-broyage en voie sche a t mis en uvre pour produire des matriaux composites biodgradables. A cet effet, de lacide polylactique a t charg par une apatite nanocristalline carbonate analogue au minral osseux. Il a t dmontr que lajout de 30 40 % de charge favorise le broyage du polymre et permet une dispersion satisfaisante du minral au sein de la matrice. Nanmoins, le pourcentage le plus lev est dfavorable une mise en forme dimplants poreux car trop important pour que la matrice puisse jouer son rle de liant. La ralisation des implants a t effectue par ajout dun agent porogne qui a ensuite t dissout, gnrant ainsi une porosit. Le pourcentage dagent porogne introduit dans le mlange dfinit le taux de porosit des implants. Pour conserver le maintien de ceux-ci, il ne faut pas ajouter plus de 80 % dagent porogne. Un autre critre important est la rsistance mcanique des implants. Elle est satisfaisante si le pourcentage dagent porogne ne dpasse pas 70 %. Pour que les qualits dun implant puissent tre considres comme satisfaisantes, il faut que celui-ci contienne un taux suffisant dapatite favorisant la minralisation et ladhsion cellulaire, des pores de taille et en nombre suffisants pour faciliter la pntration des cellules et la vascularisation de limplant, et quil possde une rsistance mcanique suffisante pour ne pas se briser une fois quil est implant. Un pourcentage de charge de 30 %, un temps de co-broyage de 10 minutes et un

pourcentage et une taille dagent porogne respectivement gaux 70 % et 300 m permettent datteindre ces objectifs.

REFERENCES [1] ZAPATA MASSOT C., FRANCES C., LE BOLAY N., On the use of scanning electron microscopy for the modelling of co-grinding kinetics in a tumbling ball mill, Powder Technol., 143-144, 215-229 (2004). [2] ZAPATA C., FRANCES C., LE BOLAY N., MOLINA BOISSEAU S., Production of small composite particles by co-grinding in a media mill Characterization of the granulometric and the mechanical properties, Trans. IChemE, Part A, Chem. Eng. Res. Des., 82 (A5), 631-636 (2004). [3] KHAN Y. M., KATTI D.S., LAURENCIN C.T., Novel polymer-synthesized ceramic composite-based system for bone repair: an in vitro evaluation., J. Biomed. Mater. Res., 69(4), 728-737 (2004) [4] DUTTA ROY T., SIMON J.L., RICCI J.L., REKOW E.D., THOMPSON V. P., PARSONS J.R., Performance of hydroxyapatite bone repair scaffolds created via three-dimensional fabrication techniques, J. Biomed. Mater. Res., 67(4), 1228-1237 (2003) [5] EICHERT D., COMBES C., DROUET C., Formation and evolution of hydrated surface layers of apatites, Key Engineering Materials (Bioceramics 17), 284-286, 3-6 (2005). [6] CAZALBOU S., EICHERT D., DROUET C., COMBES C., REY C., Minralisations biologiques base de phosphates de calcium, Compte-rendu Palvol (palontologie gnrale), 3, 563-572 (2004). [7] RABETAFIKA H.N., PAQUOIT M., DUBOIS P., Les polymres issus du vgtal : matriaux proprits spcifiques pour des applications cibles en industrie plastique, Biotechnol. Agron. Soc. Environ., 10(3), 185-196 (2006).