2005GRE17020 Orsi-Llinares Fabienne 1 D PDF

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LIENS
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http://www.cfcopies.com/V2/leg/leg_droi.php
http://www.culture.gouv.fr/culture/infos-pratiques/droits/protection.htm

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UNIVERSITE JOSEPH FOURIER
FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE

Anne : 2004-2005 N

LA NIGELLE,
UNE EPICE DINTERET MEDICINAL

THESE
PRESENTEE POUR LOBTENTION DU DOCTORAT EN PHARMACIE
DIPLOME DETAT

Fabienne ORSI LLINARES
Ne le 27 dcembre 1971 Grenoble

THESE SOUTENUE PUBLIQUEMENT
A LA FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE

Le 22 juin 2005

DEVANT LE JURY COMPOSE DE :

Prsident du jury : Anne-Marie MARIOTTE Professeur
Membres : Annick VILLET Matre de confrence
Christiane PEYRAMOND D
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en pharmacie

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UNIVERSITE JOSEPH FOURIER
FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE
Domaine de la Merci 38700 LA TRONCHE

Doyen de la Facult : M. le Professeur P.DEMENGE
Vice-Doyenne : Mme A.VILLET

PROFESSEURS DE PHARMACIE

BAKRI Abdelaziz Pharmacie Galnique
BENOIT-GUYOD Jean-Louis (Emrite)
BURMEISTER Wilhelm Biophysique
CALOP Jean Pharmacie Clinique et Bio-Technique
DANEL Vincent Toxicologie
DECOUT Jean-Luc Chimie Bio-Inorganique
DEMENGE Pierre Physiologie / Pharmacologie
DROUET Emmanuel Immunologie / Microbiologie / Biotechnologie
FAVIER Alain Biochimie / Biotechnologie
GOULON Chantal Biophysique
GRILLOT Rene Parasitologie
LECLERC Grard Chimie Organique
MARIOTTE Anne-Marie Pharmacognosie
PEYRIN Eric Chimie Analytique
RIBUOT Christophe Physiologie / Pharmacologie
ROUSSEL Anne-Marie Biochimie
SEIGLE-MURANDI Franoise Botanique et Cryptogamie
STEIMAN Rgine Biologie Cellulaire
WOUESSIDJEWE Denis Pharmacie Galnique

PROFESSEUR ASSOCIE (PAST)

CHAMPON Bernard Pharmacie Clinique

Mise jour du 06/10/2004

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MAITRES DE CONFERENCES DE PHARMACIE

ALDEBERT Delphine Parasitologie
ALLENET Benoit Pharmacie Clinique
BARTOLI Marie-Hlne Pharmacie Clinique et Biotechn.
BOUMENDJEL Ahcne Pharmacognosie
CARON Ccile Biologie Molculaire
CHOISNARD Luc Pharmacotechnie et gnie de la formulation
DELETRAZ Martine Droit Pharmaceutique Economie
DEMEILLERS Christine Biochimie
DESIRE Jrme Chimie Bioorganique
DIJOUX-FRANCA Marie-Genevive Pharmacognosie
DURMORT-MEUNIER Claire Virologie
ESNAULT Danielle Chimie Analytique
FAURE Patrice Biochimie
FAURE-JOYEUX Marie Physiologie - Pharmacologie
FOUCAUD-GAMEN Jacqueline Immunologie
GEZE Annabelle Pharmacotechnie Galnique
GERMI Raphale Bactriologie
GILLY Catherine Chimie Thrapeutique
GODIN-RIBUOT Diane Physiologie - Pharmacologie
GROSSET Catherine Chimie Analytique
GUIRAUD Pascale Biologie Cellulaire et Gntique
HININGER-FAVIER Isabelle Biochimie
KRIVOBOK Serge Botanique - Cryptogamie
MORAND Jean-Marc Chimie Thrapeutique
NICOLLE Edwige Chimie Organique / Chimie Thrapeutique
PINEL Claudine Parasitologie
RAVEL Anne Chimie Analytique
RAVELET Corinne Chimie Analytique
RICHARD Jean-Michel
RIONDEL Jacqueline Physiologie - Pharmacologie
SEVE Michel Ens.Physique / Rech.Biochimie
VANHAVERBEKE Ccile Chimie Bio-Inorganique
VILLEMAIN Danielle Mathmatique / Informatique
VILLET Annick Chimie Analytique

PROFESSEUR AGREGE (PRAG)

ROUTABOUL Christel Chimie Gnrale

Mise jour du 06/10/2004

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Remerciements

Mme le Professeur Anne-Marie Mariotte, Prsident du jury et Directeur de thse :
Pour son enseignement et son savoir prcieux ;
Pour mavoir permis, enfin, de raliser cette thse.

Mme Annick Villet, Matre de confrence en Chimie analytique :
Pour avoir spontanment et trs aimablement accept de faire partie du jury.

Mme Christiane Peyramond, Docteur en Pharmacie :
Pour son accueil chaleureux et pour la place quelle rserve la phytothrapie au sein de
son officine.

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Ma reconnaissance profonde et particulire va celui qui, quotidiennement et tendrement,
me soutien et maccompagne.

Je remercie trs sincrement toutes les personnes qui dune faon ou dune autre, ont
particip llaboration de ce travail.
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ERRATA
Page 6, paragraphe 1.2.2 :
Lire :
- Tribu des Hellbores et des Paeonies :
Les carpelles sont peu nombreux, pluriovuls et disposs en verticille.
Page 18, paragraphe 2.1 :
Ure :
L'analyse des mono, di et triacylglycrols est ralise par une CLHP couple un dtecteur par
ionisation de flamme ou par chromatographie gaz-liquide.
Page 18, paragraphe 2.2:
Lire :
L' indice de saponification est la masse d'hydroxyde de potassium (en mg) ncessaire pour
saponifier les fonctions esters contenues dans 1 g de lipides selon la raction suivante :
Page 27, paragraphe 2.11.2:
Ure:
Ce qui fait une teneur totale en phnols (thymohydroquinone + thymol) de 98,87 .,ag/g.
Ceci est infrieur la valeur dtermine dans l'tude du paragraphe prcdent.
Ces diffrences peuvent provenir soit de variations exprimentales ou de variations chimiques de la
composition ; ou bien ceci signifie que l'huile contient d'autres phnols que ces 2 composs (nous
verrons que l'huile essentielle peut renfermer du carvacrol).
Lire :
Etude des rcepteurs
)> La TQ agit en diminuant le tonus GABAergique via la stimulation des rcepteurs aux
opiodes.
Lire :
L'lvation de la FR (et non de la PID par l' HE serait due d'autres composs gue la TQ comme
par exemple les monoterpnes.
Lire :
Hmoglobine
Chez l'homme : pas de modification significative au bout d'une semaine, mais qui pourrait le
devenir au-del.
Chez la femme : lvation significative au bout de 14 jours et plus marque avec l'huile
( P ~ 0 . 0 1 ) .
Page 129, paragraphe 6 :
Dans le tableau 47 :
baisse de la cratinine sanguine : supprimer effet transitoire avec les graines
Lire :
Effets abortifs (pour une dose par v.o. de 60 g de graines en 2 prises).
La Nigelle, une pice d'intrt mdicinal
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Table des matires
INTRODUCTION .......................................................................................................................................... 1
CHAPITRE 1 : BOTANIQUE ....................................................................................................................... 3
1 LA PLACE DANS LA SYSTEMATIQUE ........................................................................................................ 4
1.1 Ordre des Ranales ..................................................................................................................... 4
1.2 Famille des Renonculaces ....................................................................................................... 6
1.3 Les diffrentes espces ............................................................................................................. 7
1.4 Nigella sativa L. ........................................................................................................................ 10
2 CULTURE ........................................................................................................................................... 12
3 LA DROGUE ....................................................................................................................................... 12
3.1 Caractristiques........................................................................................................................ 12
3.2. Inscription aux diffrentes pharmacopes ............................................................................... 13
CHAPITRE 2 : CHIMIE .............................................................................................................................. 14
1 COMPOSITION GENERALE ................................................................................................................... 15
1.1 Minraux ................................................................................................................................... 15
1.2 Vitamines .................................................................................................................................. 16
1.3 Protines .................................................................................................................................. 16
2 LHUILE .............................................................................................................................................. 18
2.1 Gnralits et mthodes danalyse .......................................................................................... 18
2.2 Caractristiques physico-chimiques de lhuile ......................................................................... 18
2.3 Composition gnrale .............................................................................................................. 19
2.4 Acides gras libres ..................................................................................................................... 19
2.5 Les triacylglycrols ................................................................................................................... 21
2.6 Mono- et di-acylglycrols .......................................................................................................... 21
2.7 Phospholipides ......................................................................................................................... 22
2.8 Glycolipides .............................................................................................................................. 23
2.9 Strols ...................................................................................................................................... 25
2.10 Tocophrols .............................................................................................................................. 26
2.11 Composs phnoliques et quinoniques ................................................................................... 27
2.12 Conclusion ................................................................................................................................ 28
3 HUILE ESSENTIELLE ............................................................................................................................ 29
3.1 Caractristiques........................................................................................................................ 29
3.2 Composition .............................................................................................................................. 29
3.3 Variations de la composition .................................................................................................... 30
3.4 Conclusion ................................................................................................................................ 32
4 SAPONOSIDE ..................................................................................................................................... 34
5 ALCALODES ...................................................................................................................................... 36
5.1 Historique ................................................................................................................................. 36
5.2 Alcalodes isoquinoliques et indazoliques .............................................................................. 36
5.3 Alcalodes diterpniques type-dolabellane ............................................................................... 37
5.4 Conclusion ................................................................................................................................ 38
6 COMPOSES PHENOLIQUES .................................................................................................................. 39
6.1 Flavonodes .............................................................................................................................. 39
6.2 Isobenzofuranone ..................................................................................................................... 40
6.3 Hydroxyactophnone ............................................................................................................. 41
7 CONCLUSION ..................................................................................................................................... 42
CHAPITRE 3 : PHARMACOLOGIE .......................................................................................................... 43
1 ACTION ANTIOXYDANTE ...................................................................................................................... 44
1.1 Les objectifs .............................................................................................................................. 44
1.2 Les tests utiliss ....................................................................................................................... 44
1.3 Les rsultats ............................................................................................................................. 45
1.4 Applications .............................................................................................................................. 49
1.4.1 Vieillissement des fonctions hpatiques et rnales .......................................................... 49
1.4.2 Hpatoprotection ............................................................................................................... 50
1.4.3 Nphroprotection ............................................................................................................... 53
1.4.4 Conclusion ......................................................................................................................... 56

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2 ACTION IMMUNOMODULATRICE ............................................................................................................ 57
3 ACTIONS ANTI-INFLAMMATOIRE ET ANTIPYRETIQUE .............................................................................. 59
3.1 Les tests ................................................................................................................................... 59
3.2 Les rsultats ............................................................................................................................. 59
3.3 Mcanisme daction .................................................................................................................. 61
3.4 Effet antipyrtique .................................................................................................................... 62
3.5 Conclusion ................................................................................................................................ 63
4 ACTION SUR LE SYSTEME NERVEUX CENTRAL ...................................................................................... 64
4.1 Action sdative ......................................................................................................................... 64
4.2 Action antalgique ...................................................................................................................... 65
4.3 Action anticonvulsivante ........................................................................................................... 67
4.4 Conclusion ................................................................................................................................ 68
5 ACTIONS RESPIRATOIRES ................................................................................................................... 69
5.1 Action bronchodilatatrice .......................................................................................................... 69
5.2 Action sur la frquence respiratoire et la pression intra-trachale ........................................... 71
5.3 Action sur la libration dhistamine ........................................................................................... 72
5.4 Action antitussive ..................................................................................................................... 73
5.5 Conclusion ................................................................................................................................ 73
6 ACTIONS SUR LE SYSTEME DIGESTIF ................................................................................................... 74
6.1 Muqueuse gastrique ................................................................................................................. 74
6.2 Colite ........................................................................................................................................ 76
6.3 Action sur le muscle jjunal ...................................................................................................... 76
6.4 Action hpatique ....................................................................................................................... 77
6.5 Conclusion ................................................................................................................................. 77
7 ACTION HYPOGLYCEMIANTE ................................................................................................................ 78
7.1 Les protocoles .......................................................................................................................... 78
7.2 Les rsultats ............................................................................................................................. 79
7.3 Chez les animaux non diabtiques .......................................................................................... 80
7.4 Actions complmentaires ......................................................................................................... 81
8 ACTIONS CARDIOVASCULAIRES ET SUR LES PARAMETRES DU SANG ....................................................... 82
8.1 Action sur la tension et la frquence cardiaque ....................................................................... 82
8.2 Action hypolipmiante .............................................................................................................. 83
8.3 Action sur lhmostase ............................................................................................................. 85
8.4 Action sur les paramtres du sang ........................................................................................... 86
8.5 Action sur lhyperhomocystinmie .......................................................................................... 87
8.6 Cardioprotection ....................................................................................................................... 87
8.7 Conclusion ................................................................................................................................ 88
9 ACTIONS CYTO-TOXIQUES ET ANTI-TUMORALES ................................................................................... 89
9.1 Les tests ................................................................................................................................... 89
9.2 Rsultats ................................................................................................................................... 90
9.3 Mcanismes daction ................................................................................................................ 93
9.4 Conclusion ................................................................................................................................ 95
10 PROPRIETES ANTI-INFECTIEUSES .................................................................................................... 96
10.1 Proprits antibactriennes ...................................................................................................... 96
10.2 Proprits antifongiques ........................................................................................................... 99
10.3 Proprits antivirales .............................................................................................................. 101
10.4 Conclusion .............................................................................................................................. 101
11 PROPRIETES ANTIPARASITAIRES .................................................................................................... 102
12 ACTION SUR LES FONCTIONS DE REPRODUCTION ............................................................................ 104
12.1 Action sur la production de lait ............................................................................................... 104
12.2 Action sur la gestation, action abortive .................................................................................. 104
12.3 Action utrorelaxante ............................................................................................................. 106
12.4 Conclusion .............................................................................................................................. 107
13 RESUME DES ACTIVITES PHARMACOLOGIQUES ............................................................................... 108
CHAPITRE 4 : TOXICOLOGIE ................................................................................................................ 110
1 COMPARAISON ENTRE LES DIFFERENTS EXTRAITS .............................................................................. 111
2 TOXICITE DE LHUILE ......................................................................................................................... 112
3 TOXICITE DE LEXTRAIT A LETHER DE PETROLE .................................................................................. 113
4 TOXICITE DE LHUILE ESSENTIELLE .................................................................................................... 114
5 TOXICITE DE LA THYMOQUINONE ....................................................................................................... 115
6 TOXICITE DE LEXTRAIT AQUEUX ........................................................................................................ 116
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7 TOXICITE DES GRAINES..................................................................................................................... 117
8 CONCLUSION ................................................................................................................................... 118
CHAPITRE 5 : ESSAIS CLINIQUES ....................................................................................................... 119
1 ACTIONS SUR DIFFERENTS PARAMETRES ........................................................................................... 120
1.1 Protocole ................................................................................................................................ 120
1.2 Rsultats ................................................................................................................................. 120
1.2.1. Glycmie .......................................................................................................................... 120
1.2.2 Lipides sanguins ............................................................................................................. 121
1.2.3 Cellules sanguines et hmostase ................................................................................... 121
1.2.4. Enzymes .......................................................................................................................... 123
1.2.5 Cratinine ........................................................................................................................ 124
1.2.6 Prolactine ........................................................................................................................ 124
1.3 Discussion .............................................................................................................................. 124
2 ACTION DANS LALLERGIE ................................................................................................................. 125
2.1 Protocole ................................................................................................................................ 125
2.2 Rsultats ................................................................................................................................. 126
2.3 Discussion .............................................................................................................................. 127
3 ACTION ANTIPARASITAIRE ................................................................................................................. 127
4 ACTION CHEZ LA FEMME ................................................................................................................... 128
4.1 Action abortive ........................................................................................................................ 128
4.2 Action sur la prolactine ........................................................................................................... 128
5 CONCLUSION ................................................................................................................................... 129
6 RESUME DES EFFETS CLINIQUES ....................................................................................................... 129
CHAPITRE 6 : EFFETS INDESIRABLES ............................................................................................... 131
1 SELON LES ESSAIS CLINIQUES ........................................................................................................... 132
2 SELON LES ETUDES PHARMACOLOGIQUES ......................................................................................... 132
3 SELON LA PHARMACOVIGILANCE ....................................................................................................... 133
CHAPITRE 7 : UTILISATIONS ................................................................................................................ 135
1 USAGES CULINAIRES ........................................................................................................................ 136
2 USAGES TRADITIONNELS .................................................................................................................. 137
2.1 Les usages ............................................................................................................................. 137
2.2 Discussion .............................................................................................................................. 138
2.2.1 Usages selon les essais cliniques .................................................................................. 138
2.2.2 Usages selon les tudes pharmacologiques .................................................................. 139
2.2.3 Usages non confirms .................................................................................................... 140
2.2.4 Remarques ...................................................................................................................... 141
3 FORMES GALENIQUES COMMERCIALISEES EN FRANCE ET INDICATIONS ............................................... 141
3.1 Produits et laboratoires .......................................................................................................... 141
3.2 Posologie ................................................................................................................................ 142
3.3 Indications .............................................................................................................................. 142
3.4 Remarques ............................................................................................................................. 143
3.5 Conclusion .............................................................................................................................. 143
CONCLUSION ......................................................................................................................................... 144
BIBLIOGRAPHIE ..................................................................................................................................... 146
ANNEXE I : STROLS FORMULES .............................................................................................................. 156
ANNEXE II : LABORATOIRES ..................................................................................................................... 159

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Index des tableaux
FIGURE 1 : NIGELLA SATIVA L. PLANTE ENTIERE .............................................................................................. 2
FIGURE 2 : CLASSIFICATION BOTANIQUE SELON BENTHAM ET HOOKER ............................................................ 5
FIGURE 3 : DIFFERENTES ESPECES DE NIGELLE : NIGELLA DAMASCENA, NIGELLA SATIVA ................................ 8
FIGURE 4 : NIGELLA ARVENSIS ....................................................................................................................... 8
FIGURE 5 : NIGELLA HISPANICA ....................................................................................................................... 9
FIGURE 6 : FLEUR DE NIGELLA SATIVA L. ...................................................................................................... 11
FIGURE 7 : GRAINES DE NIGELLA SATIVA. ..................................................................................................... 13
TABLEAU 1 : COMPOSITION GENERALE DES GRAINES DE NIGELLA SATIVA. ....................................................... 15
TABLEAU 2 : COMPOSITION MINERALE DES GRAINES DE NIGELLA SATIVA. ........................................................ 15
TABLEAU 3 : TENEUR EN VITAMINES ET VALEURS NUTRITIONNELLES DES GRAINES DE NIGELLA SATIVA. ............. 16
TABLEAU 4 : REPARTITION EN ACIDES AMINES DES PROTEINES DE GRAINES DE NIGELLA SATIVA. ...................... 17
TABLEAU 5 : PROPRIETES PHYSIQUES ET CHIMIQUES DE LHUILE DE GRAINES DE NIGELLA SATIVA. .................... 18
TABLEAU 6 : POURCENTAGE DES DIFFERENTES CLASSES DE LIPIDES DE LHUILE DES GRAINES DE NIGELLA SATIVA
SUIVANT LA METHODE DEXTRACTION. ..................................................................................................... 19
TABLEAU 7 : COMPOSITION EN ACIDES GRAS DES GRAINES DE NIGELLA SATIVA DARABIE................................ 20
TABLEAU 8 : COMPOSITION EN ACIDES GRAS (EN POURCENTAGE) DE LHUILE DE GRAINES DE NIGELLA SATIVA
DEGYPTE. ............................................................................................................................................ 20
TABLEAU 9 : ETUDE DES TRIACYLGLYCEROLS DE LHUILE DE GRAINES DE NIGELLA SATIVA. .............................. 21
TABLEAU 10 : COMPOSITION EN MONOACYLGLYCEROLS ET DIACYLGLYCEROLS (EN POURCENTAGE) DE LHUILE DE
GRAINES DE NIGELLA SATIVA EXTRAITE PAR 2 METHODES DIFFERENTES. .................................................. 22
TABLEAU 11 : DIFFERENTES CLASSES DE PHOSPHOLIPIDES DE LHUILE DES GRAINES DE NIGELLA SATIVA ......... 22
TABLEAU 12 : LES DIFFERENTES CLASSES DE GLYCOLIPIDES (GL) DE LHUILE DES GRAINES DE NIGELLA SATIVA.23
TABLEAU 13 : LES FRACTIONS STEROLS DE LHUILE DE GRAINES DE NIGELLA SATIVA. ...................................... 25
TABLEAU 14 : NATURE DES STEROLS ET TRITERPENES CONTENUS DANS LHUILE DE GRAINES DE NIGELLA
SATIVA. ................................................................................................................................................. 26
TABLEAU 15 : COMPOSITION EN TOCOPHEROLS DE LHUILE DE GRAINES DE NIGELLA SATIVA DEGYPTE ............ 27
TABLEAU 16 : TENEUR EN QUINONES DUNE HUILE COMMERCIALE DE GRAINES DE NIGELLA SATIVA ................... 27
TABLEAU 17 : COMPOSITION DE LHUILE ESSENTIELLE DE GRAINES DE NIGELLA SATIVA. .................................. 29
TABLEAU 18 : EFFETS DE LA THYMOQUINONE ET DE LA SYLIBINE SUR LES TRANSAMINASES ET LE GLUTATHION
REDUIT (EN NMOL/MG DE PROTEINE) DHEPATOCYTES ISOLES DE RATS AU BOUT DE 120 MINUTES. ............. 52
TABLEAU 19 : EFFETS SUR DIFFERENTS PARAMETRES, DE LA THYMOQUINONE (12,5 MG/KG EN I.P.) ADMINISTREE
A DES SOURIS 1HEURE AVANT INJECTION I.P. DE CCL
4
(15 L/KG) ............................................................ 52
TABLEAU 20 : EFFET DE LIFOSFAMIDE ET/OU DE LA THYMOQUINONE SUR QUELQUES PARAMETRES
BIOCHIMIQUES. ...................................................................................................................................... 54
TABLEAU 22 : EFFET CHEZ LE RAT DE LADMINISTRATION DE THYMOQUINONE SUR LA NEPHROTOXICITE INDUITE
PAR LE CISPLATINE................................................................................................................................. 55
TABLEAU 23 : VARIATIONS BIOCHIMIQUES CHEZ LES RATS TRAITES PAR GENTAMICINE ET/OU LHUILE DE NIGELLE.
............................................................................................................................................................. 55
TABLEAU 24 : EFFETS DE LHUILE ESSENTIELLE ET DE LA THYMOQUINONE EN INJECTION I.P. SUR LDEME ET LE
GRANULOME DU RAT. ............................................................................................................................. 59
TABLEAU 25 : EFFET DE LA THYMOQUINONE (EN I.P. 60 MINUTES AVANT INJECTION DU PENTYLENETETRAZOLE)
SUR LA CRISE DEPILEPSIE INDUITE PAR LE PENTYLENETETRAZOLE CHEZ LA SOURIS .................................. 67
TABLEAU 26 : EFFET DE LHUILE ESSENTIELLE SUR LA FREQUENCE RESPIRATOIRE DE COBAYES. ...................... 71
TABLEAU 27 : EFFET DE LHUILE ESSENTIELLE SUR LA PRESSION INTRA-TRACHEALE DE COBAYES .................... 71
TABLEAU 28 : EFFET DE LHUILE DE NIGELLE ET DE LA THYMOQUINONE SUR LA LESION DE LA MUQUEUSE
GASTRIQUE 1 ET 24 HEURES APRES ISCHEMIE/REPERFUSION CHEZ LE RAT. .............................................. 75
TABLEAU 29 : EFFET DE LA THYMOQUINONE EN PRE-TRAITEMENT PAR VOIE ORALE SUR LA COLITE INDUITE PAR
LACIDE ACETIQUE CHEZ LE RAT. ............................................................................................................. 76
TABLEAU 30 : EFFET DE LHUILE DE NIGELLE SUR DIFFERENTS PARAMETRES SANGUINS CHEZ LE RAT ............... 86
TABLEAU 31 : ACTIVITE ANTITUMORALE DU TRAITEMENT PAR IFOSFAMIDE ET/OU THYMOQUINONE CHEZ DES
SOURIS PORTEUSES DE TUMEURS ASCITIQUES ........................................................................................ 94
TABLEAU 32 : ACTION ANTI-BACTERIENNE DE L'HUILE ESSENTIELLE, DE LHUILE ET DE LA MATIERE INSAPONIFIABLE
DE GRAINES DE NIGELLE. ....................................................................................................................... 97
TABLEAU 33 : EFFET DE LEXTRAIT AQUEUX DE GRAINES DE NIGELLE SUR DES SOURIS PORTEUSES DE
CANDIDOSE. .......................................................................................................................................... 99
TABLEAU 34 : EFFET DE LA NIGELLE, SEULE OU ASSOCIEE AU PRAZIQUANTEL, SUR LA DISTRIBUTION DES VERS ET
LA TAILLE DU GRANULOME CHEZ LA SOURIS INFECTEE PAR SCHISTOSOMA MANSONI. ............................... 103
TABLEAU 35 : ACTIVITE ABORTIVE DE L'EXTRAIT A L'HEXANE ET DE SES FRACTIONS CHEZ LA RATE. ................. 105
TABLEAU 36 : RESUME DES ACTIVITES PHARMACOLOGIQUES ........................................................................ 108
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TABLEAU 37 : DETERMINATION DES DL
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DES DIFFERENTS EXTRAITS DE NIGELLE EN INJECTION I.P. CHEZ LA
SOURIS ............................................................................................................................................... 111
TABLEAU 38 : DOSES ENTRAINANT UN DEFICIT NEUROLOGIQUE MINIMAL CHEZ 50% DES SOURIS (TD
50
) ......... 112
TABLEAU 39 : EFFET DES GRAINES ET DE L'HUILE DE NIGELLE SUR LA GLYCEMIE (MG/DL) CHEZ L'HOMME ET LA
FEMME ................................................................................................................................................ 120
TABLEAU 40 : EFFET DES GRAINES ET DE L'HUILE DE NIGELLE SUR LES LIPIDES SANGUINS CHEZ L'HOMME ET LA
FEMME ................................................................................................................................................ 121
TABLEAU 41 : EFFET DES GRAINES ET DE L'HUILE DE NIGELLE SUR LES CELLULES SANGUINES ET L'HEMOSTASE
CHEZ L'HOMME ET LA FEMME ................................................................................................................ 122
TABLEAU 42 : EFFET DES GRAINES ET DE L'HUILE DE NIGELLE SUR CERTAINES ENZYMES CHEZ L'HOMME ET LA
FEMME ................................................................................................................................................ 123
TABLEAU 43 : EFFET DES GRAINES ET DE L'HUILE DE NIGELLE SUR LE TAUX DE CREATININE SANGUINE (MG/DL)
CHEZ LHOMME. ................................................................................................................................... 124
TABLEAU 44 : EFFET DES GRAINES ET DE L'HUILE DE NIGELLE SUR LE TAUX DE PROLACTINE SANGUINE (NG/ML)
CHEZ L'HOMME ET LA FEMME ................................................................................................................ 124
TABLEAU 45 : EFFET DE L'HUILE DE NIGELLE SUR LES SYMPTOMES DE L'ALLERGIE. ........................................ 126
TABLEAU 46 : EFFET DE LA PRISE PAR V.O. DE GRAINES DE NIGELLE CONTRE LES CESTODES CHEZ LES ENFANTS.
........................................................................................................................................................... 128
TABLEAU 47 : RESUME DES EFFETS CLINIQUES DE LA NIGELLE. .................................................................... 129
TABLEAU 48 : COMPARAISON DE LA COMPOSITION DES GRAINES DE NIGELLE AVEC CELLE DAUTRES GRAINES
OLEAGINEUSES, CALCULEE SUR 1KG DE MATIERE SECHE. ...................................................................... 136

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Introduction

La Nigelle est une plante de grande notorit, surtout lchelle du monde Arabe, o elle est souvent
mentionne comme tant une panace. Sa renomme en tant que plante mdicinale et condimentaire
dans les pays allant du Proche au Moyen Orient remonte plusieurs sicles.
On pense quelle a jou un rle important dans les coutumes de lEgypte ancienne puisquon a
retrouv des graines de Nigelle dans la tombe de Toutankhamon, pratique utilise en gnral pour aider
le roi dans lau-del.
La premire rfrence la Nigelle se trouve dans le livre dIsae dans lAncien Testament o il est
crit que la sagesse du cultivateur sachant planter et battre ses semences (Nigelle, Cumin, Bl, Orge et
Millet) selon lexigence de lespce, est limage de la sagesse de Dieu dans la conduite de son peuple.
Au 1
er
sicle, Dioscoride, physicien Grec, cite les usages de la Nigelle : elle sert soigner les maux
de tte, la congestion nasale, les rages de dents et lutte contre les vers intestinaux. Elle tait aussi
utilise comme diurtique et favorisait les menstruations et la monte de lait.
Lrudit musulman Al-Biruni (973-1048) rdigea un trait sur les premires origines des drogues
indiennes et chinoises ; il parle de la Nigelle comme tant une sorte de crale. Ceci fut confirm par la
suite par Suhar Bakht, do la probable utilisation culinaire de la Nigelle ds le
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et
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sicle.
Dans le systme de mdecine Greco Arabe ; les contemporains dHippocrate : Galien et Avicenne
considrent la Nigelle comme un remde prcieux contre les dsordres digestifs et hpatiques, et comme
un bon stimulant gnral. Pour Avicenne (980-1037) les graines de Nigelle stimulent lnergie du corps et
aident rcuprer de la fatigue et du dcouragement.
La Nigelle est mentionne dans cinq textes arabes anciens (marocains, maghrbins et andalous) du
me
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et V
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sicle. [106c]
Dans son livre Plantes mdicinales de la Bible, le scientifique Jim Duke cite un proverbe du
prophte Mohamed disant que la Nigelle soigne tous les maux sauf la mort. [106b]

Depuis quelques annes de nombreuses publications scientifiques paraissent rgulirement que ce
soit pour tudier la composition des graines de Nigelle et de ses extraits, ou pour explorer le champ de
ses possibilits thrapeutiques.
Les graines et lhuile qui en est extraite sont les deux parties de la plante les plus utilises en mdecine
traditionnelle et les seules commercialises en Europe (les graines ltant pour un usage culinaire).
Mais nous verrons que les chercheurs se sont aussi beaucoup intresss lactivit de lhuile essentielle
et de son constituant majoritaire, la thymoquinone.
Tous ces travaux nous permettrons de revisiter et de valider ou non les emplois traditionnels de la Nigelle
dans telle ou telle pathologie.

Nous vous invitons, par ce travail, dcouvrir cette pice mconnue dans nos rgions. Par une tude
botanique, chimique, pharmacologique et clinique, voici prsente ici une synthse des donnes
actuelles concernant cette plante et les perspectives de son usage mdicinal.

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Figure 1 : Nigella sativa L. plante entire [106e]

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CHAPITRE 1
BOTANIQUE

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1 La place dans la systmatique
Le genre Nigella recouvre plusieurs espces. Celle que nous allons tudier : Nigella sativa L. ne se
trouve que trs rarement en France o 4 autres espces sont plus representes. Parmi celles-ci Nigella
damascena L. est la plus courante ; elle est trs souvent confondue avec Nigella sativa.
La systmatique est un domaine toujours ltude et sujet de nombreux dbats entre
botanistes.
Le systme de classification botanique longtemps utilis fut celui de Engler (1846-1930) qui a servi de
base aux flores classiques franaises. Lauteur divise directement en ordres les 2 classes
monocotyldones et dicotyldones.
Plus tard, Bentham et Hooker (1862-1883) dfinirent des taxons (reposant sur la sparation ou non des
ptales entre eux) : aptales, dialyptales, gamoptales.
La classification de Hutchinson (1973) repose sur la subdivision des dicotyldones en 2 grands phylum :
les plantes herbaces et les plantes ligneuses ; ceux ci tant ensuite chacun subdiviss en ordres. Dans
ce systme, le genre Nigella appartient au phylum des herbaces qui comporte 28 ordres dont celui des
Ranales. Cette dichotomie en phylum herbacs et ligneux est discutable, bien que lon reconnaisse une
remarquable description et circonscription des taxons.
La notion dvolution apparat plus clairement dans les systmes suivants ; notamment celui de Cronquist
(1919-1992) qui comporte un arbre volutif 2 branches o la fleur de Magnolia serait considre
comme la fleur primitive : Magnoliopsida et Liliopsida (tabli auparavant par Takhtajan). Les deux
branches sont elles-mme divises en sous-classes. Mme si ce systme est logique et didactique,
Cronquist lui-mme reconnat larbitraire de certains de ses regroupements.
Lvolution actuelle des systmes de classification sappuie sur la phylogntique molculaire qui est
base sur la reconnaissance de caractres primitifs et la recherche de ses drivs.
Chaque auteur dune classification botanique a slectionn des caractres quil considrait important
pour dlimiter des taxons. Il existe donc plusieurs systmes selon le poids respectif donn par chacun
aux diffrents caractres. Tous les systmes comportent de nombreuses convergences et ne peuvent
tre considrs comme contradictoires. [110] [144] [159]
La classification botanique utilise ici provient du systme tabli par Bentham et Hooker qui, bien quil ne
tienne pas encore suffisamment compte de lvolution, reste, lheure actuelle un systme beaucoup
utilis et enseign.
La place du genre Nigella dans la systmatique est prcise dans le schma de la figure 2.
1.1 Ordre des Ranales [48] [57] [61] [87] [158]
Ranale provient du grec rana : grenouille.
Cet ordre comporte le type le plus archaque des fleurs dAngiosperme avec un habitat aquatique pour
les moins volues do lorigine de son nom.
Il est caractris par des carpelles toujours indpendants et des fleurs souvent en partie spirales.
Lvolution est marque dans cet ordre par le passage des formes acycliques (spirales) aux formes
cycliques par rduction du gynce quelques, voire un seul carpelle(s).
Plusieurs familles composent cet ordre :
- Famille des Renonculaces (dont Nigella sativa)
- Famille des Nymphaces
- Famille des Cratophyllaces
- Famille des Lauraces :
o Groupe des Magnoliales : compos des familles : Magnoliaces, Anonaces,
Calycanthaces, Monimiaces, Myristicaces
o Groupe des Berbridales : compos des familles : Mnispermaces et Berbridaces.
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Figure 2 : Classification botanique selon Bentham et Hooker [144] [159]

Embranchement
Sous-
Embranchement Classe Sous-Classe Srie Ordre Famille Tribu Genre
Bryophytes

Clmatides
Ptridophytes
Anmones Caltha
Gymnospermes Isopyrum
Renonculaces Renoncules Helleborus
Nigella
Nymphaces Hellebores Aquilegia
Spermaphytes Monocotyldones Ranales Coptis
Cratophyllaces Paeonies Trollius
Paritales Delphinium
Aptales Lauraces Aconitum
Angiospermes Thalamiflores Guttifrales

Malvales

Dicotyldones Dialyptales Disciflores Euphorbiales

Caliciflores
Gamoptales
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1.2 Famille des Renonculaces
1.2.1 Gnralits [57] [61] [90] [159]
Cest lune des grandes familles des Angiospermes avec 40 50 genres et 1500 2000 espces.
Elle est cosmopolite mais plus particulirement prsente dans les rgions tempres et froides de
lhmisphre nord.
Les Renonculaces sont le type mme de la famille par enchanement ; cest dire comportant des
espces daspect trs variable (herbes, arbrisseaux, arbustes) ; les espces primitives diffrant fortement
des espces de type volu avec de nombreux intermdiaires les reliant entre elles.
Le seul vritable caractre commun tous les genres est lembryon, toujours de petite taille et entour
dun albumen charnu.
Beaucoup despces sont toxiques.
1.2.2 Classification [57] [61]
Bentham et Hooker ont envisag une division en deux groupes selon la structure du gynce :
- Tribu des Clmatides, Anmones, Renoncules :
Les tamines et les carpelles sont nombreux et disposs en spirale ; les carpelles sont uniovuls
ou pluriovuls.
Le fruit est sec et indhiscent : akne.
- Tribu des Hellebores et des Paeonies :
Les carpelles sont peu nombreux, uniovuls et disposs en verticille.
Le fruit est un follicule en gnral (exceptionnellement une capsule ou une baie).
1.2.3 Tribu des Hllbores [61] [158]
Cest la tribu la plus importante en nombre despces.
Les plantes sont des herbaces annuelles ou vivaces, feuilles souvent trs divises.
Les fleurs sont actinomorphes (rgulires) ou zygomorphes (irrgulires), prianthe simple.
Les spales sont en insertion spirale.
Certaines tamines se transforment en nectaires de formes variables.
1 5 carpelles en verticille, pluriovuls.
Elle comporte les genres Caltha, Isopyrum, Helleborus, Nigella, Aquilegia, Coptis, Trollius, Delphinium et
Aconitum.
1.2.4 Genre Nigella
Nigella vient de nigellus : noirtre (couleur des graines de Nigelle).
Ce genre comporte 25 espces rparties en Europe, en Asie occidentale et en Afrique du Nord.
- Lappareil vgtatif [42] [56] [158] [165]
Ce sont des plantes annuelles, herbaces, tige ordinairement rameuse.
Les feuilles sont divises en lanires troites et linaires.
Le systme racinaire est une racine principale allonge et persistante.
- La fleur [42] [56] [132] [145]
La fleur est actinomorphe.
o Le calice
Il est rgulier, 5 spales ptalodes (colors), bleu clair, ou bleu ml de vert, rarement
blanc.
o La corolle
5 8 ptales beaucoup plus petits que les spales. Ils sont tubuleux la base, deux
lvres ; la lvre infrieure est divise en deux.
o Les tamines
Elles sont toujours nombreuses, libres, centriptes (anthres tournes vers lextrieur de
la fleur), insres en spirales directement sur le rceptacle floral.
Les anthres sont dhiscence longitudinale.
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o Le gynce
Il est form de 3 10 carpelles plus ou moins souds entre eux par leurs cots internes.
Chaque carpelle se prolonge en un style troit et persistant, au moins aussi long que la
moiti du reste du carpelle.
Lovaire est supre.
- Le fruit [42] [56]
Cest une capsule ou un follicule selon la soudure totale ou partielle des carpelles.
Chaque follicule se termine par une longue pointe plus ou moins recourbe.
- La graine [42] [56]
Les graines sont noires ou noirtres, trois angles et sont disposes sur deux ranges dans le
fruit.
1.3 Les diffrentes espces
1.3.1 En France
5 espces du genre Nigella peuvent tre prsentes dans nos rgions :
a) Nigella damascena L.: [56] [90] [158] [165] (figure 3)
Espce la plus rpandue en France (dans les jardins et les champs, elle ne slve pas en montagne)
car frquemment cultive pour lornement. Elle fleurit en juin-juillet.
Cette trs jolie fleur se distingue des 4 autres espces par son involucre longues lanires enchevtres
dispos immdiatement sous la fleur. Son fruit est une capsule renfle trs ornementale, rentrant souvent
dans la composition de bouquets secs.
Sa localisation :
- En France : dans le midi, dans louest (sauf en Bretagne) et dans le sud-ouest.
- En Europe : en Suisse, en Belgique et en rgion mditerranenne.
- Hors Europe : dans le nord de lAfrique, dans les les de Madre et des Canaries.
b) Nigella arvensis L.: [56] [86] [91] [165] (figure 4)
Plante rameaux carts, grande fleur isole sans involucre, de couleur bleu clair stri de vert. Elle
fleurit en juin-juillet.
Sa localisation :
- En France : plante assez commune, prsente principalement sur les sols calcaires, elle est
cependant rare dans louest et le centre. Elle ne slve pas en montagne.
- En Europe : Europe centrale et mridionale.
- Hors Europe : Asie occidentale, Nord de lAfrique.
Il existe quelques sous espces : ssp arvensis (ci dessus), et deux autres retrouves en Grce : ssp
aristata et ssp rechingeri.
c) Nigella hispanica L.: [84] [90] [145] [165] (figure 5)
Plante feuilles trs divises et fleur bleue trs grande et non involucre.
Sa localisation :
- En France : midi et sud-ouest.
- En Europe : Espagne et Portugal.
- Hors Europe : Afrique du Nord (Maroc, Algrie).
d) Nigella gallica Jord. : [56] [84]
Elle est proche de lespce hispanica mais les feuilles sont moins divises et les fleurs sont plus
petites et de couleur bleu ple.
Sa localisation :
- En France : midi et sud-ouest.
- En Europe : Espagne septentrionale et centrale.
e) Nigella sativa L. : [42] [91] (figure 3)
Nous allons ltudier en dtail plus loin.
Elle est rare en France, on peut la trouver accidentellement dans les champs du midi ; en Europe cest
une espce rare galement, elle y a t introduite. On la retrouve surtout hors de lEurope.
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Figure 3 : Diffrentes espces de Nigelle : Nigella damascena, Nigella sativa [42]

Figure 4 : Nigella arvensis [42]

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Figure 5 : Nigella hispanica [42]

1.3.2 Autres espces hors de France [41] [84] [165]
Nigella orientalis L. : sud-ouest de lAsie
Nigella cretica Miller. : Crte
Nigella degenii Vierth. : Iles Cyclades, Carpates, Crte et Grce
Nigella segetalis Bieb. : sud de lUkraine et Russie
Nigella fumariifolia Kotschy. : Carpates, Crte et Chypre
Nigella elata Boiss. : Asie mineure et Chypre
Nigella arvensis ss esp aristata Sibth. : Grce et Iles Cyclades
ss esp rechingeri Tutin. : est de la Grce
ss esp arvensis L. : sud de lEurope, Nord Afrique et Asie occidentale
Nigella doerfleri Vierth. : Crte
Nigella nigellastrum : toute la mditerrane sauf le Nord de lAfrique
Nigella ciliaris : Chypre et Palestine.
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1.4 Nigella sativa L.
1.4.1 Description (figure 6)
- Parties ariennes [40] [42] [86]
Cest une plante annuelle, herbace, ne dpassant pas 50 cm de hauteur.
La tige est dresse, rameuse, ctele et anguleuse.
Les feuilles sont divises en lobes troits, allongs, souvent un peu largis leur sommet. Elles
sont multifides : les feuilles infrieures sont ptioles et les suprieures sessiles.
- La fleur [40] [42] [84] [86]
La floraison a lieu davril juin.
Les fleurs sont assez petites, de 2 2,5 cm de diamtre.
Il ny a pas dinvolucre sous la fleur.
o Le calice
5 spales blancs pointe verdtre ou bleutre. Ils sont de forme ovale, rtrcis la
base ; et portent quelques poils pars sur le dos.
o La corolle
Elle est bleu clair mle de vert.
5 8 ptales, plus petits que les spales et trs peu pubescents.
Les ptales sont en forme de cornet deux lvres portant chacun au sommet deux petits
renflements arrondis, non amincis la base, et ont un onglet nectarifre.
o Les tamines
Elles font 1,5 cm de long, sont de couleur jaune et sont sans pointe leur sommet
(mutiques).
o Le gynce
Il est compos de 3 6 carpelles lisses, souds entre eux jusqu la base des styles
persistants.
- Le fruit [42] [86]
Ce sont des follicules souds, souvrant au sommet par une fente interne.
La surface du fruit mr est ride en travers sur le milieu de chaque carpelle.
- La graine [40] [42] [86]
Les graines sont noires, nombreuses et granuleuses, de 1,5 2 mm de longueur et sont
disposes sur deux rangs.
Leur forme est pyramidale, faces triangulaires sensiblement planes, marques de rides
transversales et finement chagrines.
Les amandes sont blanches et huileuses.
Au broyage elles dgagent une odeur fortement aromatique, tenant du poivre et de lanis et aussi
de la noix de muscade. [166]
1.4.2 Autres appellations [106a] [106d]
Les appellations de Nigella sativa dans les diffrentes langues sont les suivants :
- Franais : Cheveux de Vnus, Nigelle, Poivrette, Cumin noir
- Anglais : Love-in-a-mist, Fennel flower, Onion seed, Black Cumin, Black Caraway, Black seed
- Allemand : Zwiebelsame, Nigella, Schwarzkmmel
- Grec : Melanthion
- Italien : Nigella, Grano nero
- Espagnol : Niguilla, Pasionara
- Norvgien : Svartkarve
- Sudois : Svartkummin
- Hbreux : Katzah, Qetsach, Qetsah
- Turque : Corekotu siyah
- Arabe : Sinouj, Sanouz, Shunez, Habbah sauda, Habbet el beraka, Kamun aswad
- Hindi : Kalounji, Munga reala

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Figure 6 : Fleur de Nigella sativa L. [106e]

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2 Culture
2.1 Rpartition [158]
Nigella sativa est une plante cultive trs largement en dehors de lEurope : en Russie, Turquie,
Egypte, Arabie saoudite, Ethiopie, Afrique du nord, Syrie, dans les Balkans, en Moyen et Extrme Orient,
Inde, Bangladesh, au Sri Lanka. Le principal pays producteur est lEgypte. [166]
En France elle peut tre exceptionnellement prsente dans la rgion mditerranenne.
2.2 Conditions de culture [52] [54] [152]
Les semis doivent se faire en place car la Nigelle naime pas tre dplace. Il faut semer en lignes
espaces de 30 cm, en plein soleil, dans un sol riche et bien drain. La germination se fait en 10 15
jours.
Dans nos rgions, la Nigelle fleurira en Juin-Juillet. Les graines pourront tre rcoltes en Aot. En
laissant monter en graines quelques fleurs, de nouveaux plants apparaissent pendant des annes. Il faut
nanmoins veiller supprimer les fleurs fanes au fur et mesure pour prolonger lpanouissement.
On peut multiplier la plante par semis en automne ou au printemps.
2.3 Rendement de production de graines de Nigella sativa [58]
Cette tude conduite en Italie montre linfluence de la plantation trois dates diffrentes de Nigella
sativa et ses rpercussions sur la production des graines (rendement, quantit, poids, densit,
germinabilit) et sur leur contenu en huile essentielle.
Ces dates taient, pour Nigella sativa : le 3 mars, le 9 avril et le 7 mai ; les rcoltes eurent lieu,
respectivement : le 19 juillet, le 25 juillet et le 1er aot.
Ltude montre que le cycle de croissance est court mais quen gnral, une plantation plus prcoce
engendrera une plus grande production de graines par plante do un rendement plus important.
Nanmoins, la courte phase vgtative reste un facteur limitant quant la quantit de graines produites
et des tudes plus approfondies seraient ncessaires pour augmenter le pouvoir de germination et
accrotre le cycle vgtatif.

3 La drogue
Ce sont uniquement les graines de Nigella sativa qui sont utilises.
3.1 Caractristiques [166]
3.1.1 Odeur
La graine broye dgage une forte odeur aromatique qui rappelle lanis, la noix de muscade et le
poivre [166] ; dautres auteurs voquent lodeur du citron et du sassafras [40].
Nous verrons plus loin, dans ltude de lhuile essentielle contenue dans ces graines de Nigelle que la
composition chimique de celle-ci peut varier sensiblement selon les facteurs environnementaux et donc
influer nettement sur lodeur dgage au broyage de la drogue.
3.1.2. Saveur
Elle est en premier lieu lgrement amre, puis pice et un peu cre.

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3.1.3. Identification (figure 7)
Lidentification microscopique parat inutile car les graines ont une forme caractristique (graines
ovodes, de 2 mm de long, de couleur noir mat, de forme pyramidale avec 3 ou 4 angles et une face
suprieure finement granuleuse et rticule) et des caractres organoleptiques marqus.
Le tgument de la graine est form de trois tuniques :
- Externe : forme de cellules coniques papilliformes, parois brunes et paisses.
- Moyenne : forme de cellules aplaties, allonges tangentiellement.
- Interne : forme dune range de petites cellules cubiques.
Lalbumen est riche en huile et en aleurone.
3.2. Inscription aux diffrentes pharmacopes
En Europe, les graines de Nigelle ont t inscrites diffrentes pharmacopes [105] :
- A la 1
re
dition de la pharmacope danoise.
- A la 2
me
et la 4
me
dition de la pharmacope espagnole
- A la 1
re
et la 5
me
dition de la pharmacope sudoise
- A la 1
re
et la 3
me
dition de la pharmacope franaise.
Nigella sativa nest pas inscrite la pharmacope europenne actuelle, ni aux Cahiers de lAgence
n3. [166]

Figure 7 : Graines de Nigella sativa. [166]

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CHAPITRE 2
CHIMIE

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1 Composition gnrale
Cette analyse a t ralise sur des graines de Nigelle de Turquie en 1993 [140].
Le tableau 1 rsume ces valeurs.
Tableau 1 : Composition gnrale des graines de Nigella sativa. [140]
Composition Teneur en %
Eau 6,4
Cendres 4,0
Lipides 32,0
Protines 20,2
Fibres 6,6
Glucides 37,4

La composition gnrale des graines de Nigella sativa montre une teneur relativement importante en
glucides (37,4%), en lipides avec 32% et en protines avec 20%.
Les graines de Nigella sativa tant trs utilises dans lalimentation, ces donnes permettent dj de les
qualifier comme ayant une bonne valeur nutritive.

1.1 Minraux
Lanalyse minrale a t ralise par spectrophotomtrie par absorption atomique sur des graines de
Nigelle provenant de 4 pays diffrents : Inde (1 chantillon), Syrie (2 chantillons), Turquie (1 chantillon)
et Jordanie (1 chantillon). Les valeurs obtenues pour chaque chantillon ne montraient que peu de
variations et le tableau 2 donne une moyenne. ([161] 1998)
Tableau 2 : Composition minrale des graines de Nigella sativa. [161]
Composition Teneur en mg/100g

Potassium 527,70 47,70
Phosphore 526,50 30,16
Sodium 49,60 6,13
Fer 10,50 1,56
Zinc 6,04 0,38
Calcium 185,90 18,27
Cuivre 1,84 0,34

Comme nous le verrons dans le chapitre sur les valeurs nutritionnelles, la graine de Nigelle prsente
une teneur intressante en fer, zinc et phosphore.
Il est dommage que la teneur en magnsium nait pas t value.
Une autre tude confirme labsence de mtaux lourds (cadmium, plomb et arsenic). [14]

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1.2 Vitamines
En 1998 en Jordanie [161], ltude de la teneur en vitamines t mene sur 5 chantillons de
graines de Nigella sativa provenant de 4 pays diffrents rpartis comme suit :
- 1 chantillon dInde
- 2 chantillons de Syrie
- 1 chantillon de Turquie
- 1 chantillon de Jordanie

Lanalyse a t ralise par chromatographie liquide haute performance (CLHP), daprs la
mthode AOAC 1984 (Association of Official Analytical Chemists).
Le tableau 3 donne la valeur moyenne des 5 chantillons.
Tableau 3 : Teneur en vitamines et valeurs nutritionnelles des graines de Nigella sativa. [161]
Vitamines
Teneur
moyenne
en
mg/100g
AQR
a
en
mg
% d'AQR
b

Thiamine (B1) 1,500 1,5 100,0
Riboflavine (B2) 0,100 1,7 5,9
Pyridoxine (B6) 0,500 2,0 25,0
Niacine (B3) 5,700 20,0 28,5
Acide folique (B9) 0,061 0,4 15,3
a
AQR : Apports Quotidiens Recommands aux Etats-Unis.
b
% dAQR : Pourcentage dApports Quotidiens Recommands (aux Etats-Unis).

Les teneurs en vitamines B sont intressantes, notamment celle en vitamine B
1
avec 100% des
AQR ; en vitamine B
3
avec 28,5% des AQR ; et en vitamine B
6
avec 25% des AQR.

1.3 Protines
Les graines de Nigella sativa contiennent environ 20% de protines. [140]
Lanalyse de la composition en acides amins (AA) t ralise par Saleh Al-Jassir sur des graines de
Nigelle dArabie en 1992 [14].
Les protines ont t hydrolyses par de lacide chlorhydrique puis analyses par un automate analyseur
dAA.
Le tableau 4 montre la composition en acides amins essentiels (AAE) et non essentiels (AANE).

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Tableau 4 : Rpartition en acides amins des protines de graines de Nigella sativa. [14]
ACIDES AMINES
Teneur en mg /100g
de protines
% de
contribution
l'apport
protique
Acides amins essentiels
leucine 665,00 3,51 5,82
valine 527,00 3,28 4,61
lysine 462,00 4,28 4,04
thronine 417,00 3,31 3,65
phnylalanine 413,00 2,67 3,61
isoleucine 395,00 2,11 3,46
histidine 383,00 1,64 3,35
mthionine 188,00 0,37 1,65
total AAE 3450 30,19

Acides amins non
essentiels
acide glutamique 2829,00 19,34 24,74
arginine 1051,00 10,39 9,19
acide aspartique 1022,00 9,80 8,94
glycine 642,00 4,42 5,61
proline 560,00 3,91 4,90
srine 493,00 4,11 4,31
alanine 427,00 3,35 3,73
tyrosine 411,00 2,95 3,59
ammonium 325,00 2,21 2,84
cystine 224,00 1,82 1,96
total AANE 7984 69,81

Acides amins totaux 11434 100
rapport AAE/AANE 0,43

Les protines de la graine de Nigelle sont composes de 17 AA dont 8 sont des AAE.
LAA majeur est lacide glutamique, suivi par larginine, lacide aspartique, la leucine et la glycine. Ces
constituants majeurs reprsentent plus de 54% des AA totaux.
La cystine et la mthionine sont les plus mineurs.
Le tryptophane, autre AAE, na pas t mis en vidence.
En 1978, Indianapolis, ltude de Babayan et al. [28] sur lanalyse de la composition en AA de
graines de Nigelle importes du Moyen Orient (localisation exacte non dfinie) rvle des rsultats
lgrement diffrents. Les protines ont t hydrolyses par lacide chlorhydrique puis les acides amins
ont t identifis par chromatographie gaz-liquide.
LAA majeur est ici larginine, suivi par lacide glutamique et la leucine.
Ces diffrences sont certainement dues des variations gnotypiques et environnementales.

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2 Lhuile
2.1 Gnralits et mthodes danalyse [50] [96]
Dans certains cas lhuile est dite huile fixe ou huile grasse.
Parmi les lipides on distingue :
- Les lipides simples : acides gras et esters dacides gras et dun alcool (monoacylglycrols,
diacylglycrols et triacylglycrols)
- Les lipides complexes : phospholipides et glycolipides (qui sont aussi des lipides polaires).
Lextraction de lhuile se fait aprs broyage des graines par pression ou laide dun solvant
organique.
Dans les tudes suivantes, lextraction se fait au Sohxlet daprs la mthode dcrite par AOAC 1990.
Deux solvants sont utiliss : le n-hexane et un mlange chloroforme/mthanol (2 : 1 en volume).
Les diffrentes fractions de lipides peuvent tre spares par chromatographie sur couche mince ou par
chromatographie sur colonne.
Pour la dtermination de la composition en acides gras, il est ncessaire de raliser une raction de
saponification et de mthylation pour obtenir les esters dacides gras ; en fait on ralise une mthanolyse
alcaline. Ensuite, leur analyse est faite par chromatographie en phase gazeuse couple un dtecteur
par ionisation de flamme.
Lanalyse des mono, di et triacylglycrols est ralise par CLHP ou par chromatographie gaz-liquide
toutes deux couples un dtecteur par ionisation de flamme.
2.2 Caractristiques physico-chimiques de lhuile [38] [50] [96]
Les caractristiques physico-chimiques ont t dtermines daprs la mthode AOAC sur des
graines de Nigella sativa gyptiennes en 2003. Lhuile a t extraite des graines broyes par ther de
ptrole laide dun Soxhlet.
Lhuile obtenue par pression froid est de couleur jaune dor, alors que celle extraite par solvant est
jaune bruntre ; ceci serait d la capacit du solvant extraire les pigments liposolubles et les
olorsines prsentes dans les graines de Nigelle. [38]
Le tableau 5 rsume les caractristiques.
Tableau 5 : Proprits physiques et chimiques de lhuile de graines de Nigella sativa. [38]
indice de rfraction ( 20C) 1,4721 0,0002
point de fusion (enC) 3,3 0,6
densit relative (g/cm
3
) 0,921 0,0002
indice d'iode (g d'iode/100g d'huile) 128 21
indice de saponification (en mg de KOH/g d'huile) 203 3
% de matire insaponifiable 1,8 0,3
indice de proxydation (mq O2/kg d'huile) 10,7 0,4

Lindice diode est la masse diode molculaire (en g) ncessaire pour saturer les doubles liaisons de
100g de lipides ; il est donc un reflet de linsaturation des chanes dacide gras. Il donne aussi des
indications sur linstabilit de lhuile par proxydation des doubles liaisons.
Lindice de saponification est la masse dhydroxyde de potassium (en mg) ncessaire pour saponifier
les acides gras (neutraliser les acides gras libres) contenus dans 1g de lipides selon la raction suivante :
RCOOH + KOH RCOO + K
+
+ H
2
O
Le pourcentage de matire insaponifiable est de 1,8%. La raction de saponification permet de
sparer la fraction insaponifiable qui contient : carotnodes, strols, tocophrols, alcools terpniques et
hydrocarbures.
Lindice de proxydation exprime en milli-quivalents doxygne actif, la quantit de proxyde
contenue dans 1kg de substance. Il donne une ide de la stabilit de lhuile tudie.
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2.3 Composition gnrale [38]
Ltude a t ralise en 2003 en Egypte.
Les graines de Nigella sativa ont t nettoyes, broyes et divises en deux portions. Lune a t
soumise une presse hydraulique pour obtenir une huile par pression froid ; et lautre a t extraite par
de lther de ptrole dans un Soxhlet pour obtenir lhuile selon la mthode dcrite par AOAC (1990).Le
pourcentage dacides gras libres a t dtermin selon la mme mthode. Lhuile a t fractionne par
chromatographie sur colonne de silice puis les fractions lipidiques ont t identifies par comparaison de
leur temps de rtention avec celui des produits standard. La chromatographie sur couche mince a permis
alors de calculer le pourcentage de chaque fraction lipidique.
Le tableau 6 indique le pourcentage de chaque fraction lipidique de lhuile de graines de Nigelle
obtenue par les deux mthodes.
Tableau 6 : Pourcentage des diffrentes classes de lipides de lhuile des graines de Nigella sativa
suivant la mthode dextraction. [38]

classe de lipides
mthode par
pression froid
mthode
d'extraction par
solvant
lipides polaires
a
3,7 0,2 4,8 0,8
monoacylglycrols 4,8 0,7 5,7 0,5
diacylglycrols 5,1 0,7 4,1 0,8
strols libres 3,0 0,8 5 0,6
inconnu 5,4 0,5 4,5 0,3
acides gras libres 14,2 0,5 8,3 0,2
triacylglycrols 57,5 2,0 63,2 2,2
esters de strols
b
2,5 0,4 4,4 0,4
a
lipides polaires : phospholipides et glycolipides.
b
esters de strols, hydrocarbones et pigments.

Les triacylglycrols (TAG) reprsentent la fraction la plus importante des lipides (57,5% et 63,2%
pour lune et lautre mthode), viennent ensuite les acides gras libres (14,2% et 8,3%) ; puis les
diacylglycrols (DAG) pour lhuile obtenue par pression froid (5,1%) et les monoacylglycrols (MAG)
pour lhuile extraite par solvant (5,7%).
Le pourcentage suprieur dacides gras libres dans lhuile obtenue par pression froid serait d laction
hydrolytique de la lipase prsente dans les graines de Nigelle broyes. Cette activit serait annule par le
contact de lhuile avec le solvant durant lextraction.
2.4 Acides gras libres [14]
Ce sont des acides carboxyliques aliphatiques de longueur variable.
Les acides gras (AG) se rpartissent en deux groupes : les AG saturs et les AG insaturs (mono ou
polyinsaturs selon que la chane carbone comporte une ou plusieurs doubles liaisons).
La composition en acides gras libres a t dtermine par chromatographie en phase gazeuse sur
des graines de Nigelle dArabie en 1992 (confre tableau 7).
Dix acides gras libres ont t mis en vidence, avec 83,7% dacides gras insaturs (AGI) et 16,3%
dacides gras saturs (AGS). Ceci est conforme aux rsultats obtenus en 1978 par Babayan et al. [28]
Parmi les AGI, le prdominant est lacide linolique, il reprsente plus de 54% des AG totaux. Puis vient
lacide olique (23,58%).
Les deux AGS majeurs sont lacide palmitique (11,90%) et lacide starique (2,28%).
Quatre des AG trouvs dans cette tude navaient pas t dtects dans celle de Babayan en 1978
[28] ; ni dans celle de Zeitoun et Neff [172] ralise en 1995 ; ce sont les acides myristolique,
palmitolique, arachidonique et lignocrique.
Les rsultats obtenus pour les six autres AG sont en accord avec ces deux travaux cits.
Par contre, ces deux travaux rvlaient la prsence dacide icosadinoque non dtect ici.

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Tableau 7 : Composition en acides gras des graines de Nigella sativa dArabie. [14]
ACIDES GRAS POURCENTAGE
acide myristique C 14:0 0,90 0,08
acide myristolique C 14:1 0,18 0,03
acide palmitique C 16:0 11,90 0,18
acide palmitolique C 16:1 0,30 0,01
acide starique C 18:0 2,28 0,11
acide olique C 18:1 23,58 1,03
acide linolique C 18:2 59,34 1,96
acide arachidonique C 20:0 0,14 0,02
acide linolnique C 18:3 0,30 0,12
acide icosadinoque C 20:2
acide lignocrique C 24:0 1,080 0,012
acides gras saturs 16,30
acides gras insaturs 83,70

Une autre analyse faite en Egypte par Bassim Atta en 2003 [38] montre des rsultats lgrement
diffrents. (confre tableau 8)
Lhuile a t extraite par 2 mthodes : pression froid et solvant (ther de ptrole) ; les AG ont t
dtermins par chromatographie en phase gazeuse.
Cette tude met en vidence deux autres AG : lacide bhnique (C 22 :0) : 0,8% et 0,9% ; et lacide
rucique (C 22 :1) : 0,7% et 1%. Les trois AG majoritaires sont toujours lacide linolique (47,5%et 49%),
lacide olique (18,9% et 20,1%) puis lacide palmitique (12,1% et 9.9%). Ensuite, contrairement
prcdemment, cest lacide myristique qui arrive en 4
me
position (avec 11,1% et 9,8%).
Tableau 8 : Composition en acides gras (en pourcentage) de lhuile de graines de Nigella sativa
dEgypte. [38]
ACIDES GRAS
extraction par
pression froid
extraction par
solvant
acide myristique C 14:0 11,1 1,1 9,8 2,1
acide myristolique C 14:1 traces traces
acide palmitique C 16:0 12,1 3,4 9,9 3,3
acide palmitolique C 16:1 0,5 0,1 0,7 0,5
acide starique C 18:0 3,7 1,7 3,3 1,2
acide olique C 18:1 18,9 5,4 20,1 6,1
acide linolique C 18:2 47,5 6,5 49,0 5,7
acide linolnique C 18:3 2,1 0,4 2,7 1,1
acide arachidonique C 20:0 1,2 0,8 0,7 0,4
acide bhnique C 22:2 0,9 0,4 0,8 0,2
acide rucique C 22:1 0,7 0,4 1,0 0,1
acide lignocrique C 24:0 0,2 0,1 0,3 0,1
acides gras saturs 29,2 24,8
acides gras insaturs 69,7 73,5

Toutes ces observations soulignent le fait que les compositions chimiques varient largement en
fonction des provenances gographiques des chantillons et des mthodes danalyses utilises ;
nanmoins, dans tous ces travaux on retrouve les trois mme AG majeurs : lacide linolique, lacide
olique et lacide palmitique.

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2.5 Les triacylglycrols [147] [172]
Ils reprsentent la classe de lipides majoritaire dans lhuile de Nigelle.
Ce sont des triesters dun alcool, le glycrol et dacides gras de formule gnrale :

R, R et R" sont les chanes hydrocarbones des diffrents AG.
Un triacylglycrol (TAG) peut tre homogne ou htrogne selon que les molcules dacides gras qui
estrifient les trois fonctions alcool du glycrol sont identiques ou diffrentes.
Ltude ralise en 1995 [172] porte sur la composition en TAG de graines en provenance dEgypte ;
lhuile a t obtenue par pression froid. Lisolement de la fraction triglycridique a t ralis par un
procd chromatographique dextraction en phase solide. La dtermination des TAG et de leurs acides
gras a t obtenue par chromatographie liquide haute performance en phase inverse et
chromatographie en phase gazeuse, respectivement toutes deux couples une dtection par ionisation
de flamme. (tableau 9)
Tableau 9 : Etude des triacylglycrols de lhuile de graines de Nigella sativa. [172]

A
P = acide palmitique ;
S = acide starique ;
O = acide olique ;
L = acide linolique ;
LN = acide linolnique.

Cinq TG majeurs ont t mis en vidence, parmi ceux-ci le majoritaire est le trilinoleate de glycryl
(24,6%) ; puis lolate, dilinolate de glycryl (19,6%) ; le palmitoate, dilinolate de glyceryl (17,5%) ; le
palmitoate, oloate, linolate de glycryl (12,9%) et le diolate, linolate de glycryl (9,6%). Les autres
TG sont prsents en quantit infrieure 3%.
2.6 Mono- et di-acylglycrols [147]
Ce sont des mono et diesters de glycrol et dacide gras.
Ltude t ralise en Allemagne en 2001 (la provenance des graines achetes un grainetier
allemand nest pas connue).
Lhuile a t extraite par Soxhlet. Deux solvants ont t utiliss : le n-hexane et un mlange
chloroforme : mthanol (2 :1 en volume). La fraction des lipides neutres (AG libres, monoacylglycrols,
diacylglycrols et triacylglycrols, strols) a t isole par chromatographie sur couche mince. Les lipides
neutres ont t transforms en esters mthyliques et ces derniers ont t identifis par chromatographie
en phase gazeuse quipe dun dtecteur ionisation de flamme. (tableau 10)
triacylglycrols
A
pourcentage
LNLL 0,5
LLL 24,6
LLO 19,6
LLP 17,5
LOO 9,6
LLS 2,5
LOP 12,9
PLP 2,5
OOO 1,6
LOS 2,4
PCO 2,4
SLP 0,5
POP 0,6
PPP 0,1
SOO 0,5
SOP 0,5
non identifi 1,7
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Tableau 10 : Composition en monoacylglycrols et diacylglycrols (en pourcentage) de lhuile de
graines de Nigella sativa extraite par 2 mthodes diffrentes. [147]
mthode
d'extraction
extraction avec l'hexane
extraction avec
CHCl
3
.MeOH (2:1)
classe de lipide
MAG
a

0,41%
c

DAG
b

0,65%
MAG
0,44%
DAG
0,68%
ac.palmitique 32,50 8,98 29,80 18,90
ac.starique 0,60 n.d. 0,05 n.d.
ac.olique 6,96 26,40 11,1 15,80
ac.linolique 53,40 61,50 51,70 62,20
ac.icosadinoque 6,54 3,12 6,77 2,96
ac.icosnoque n.d. n.d. 0,58 0,14
a
MAG = monoacylglycrol ;
b
DAG = diacylglycrol
c
= % de MAG et de DAG prsents dans les lipides neutres (acides gras libres,
monoacylglycrols, diacylglycrols, triacylglycrols et strols esters).
De mme que pour les TAG ou les acides gras libres, lacide linolique reste lacide gras majoritaire
dans les MAG et les DAG quelque soit le mode dextraction.
2.7 Phospholipides [96] [148]
Les phospholipides (PL) ont la fois un intrt nutritionnel thrapeutique (ils aideraient diminuer le
taux de cholestrol, auraient un effet protecteur hpatique et amlioreraient les fonctions crbrales) et
des applications technologiques (mulsifiants ou surfactants ; ils participent la formation de liposomes).
Cest un ester de glycrols et dacides gras, avec un groupe phosphate et un substituant basique
(choline, thanolamine ou srine). Il existe aussi des PL avec un inositol la place de la base organique.
Leur formule gnrale est :

Base = choline : CH
2
CH
2
NMe
3
ethanolamine : CH
2
CH
2
NH
2
serine : CH
2
CH
2
(NH)COOH

Ltude a t ralise en Allemagne en 2002.
Les lipides totaux ont t extraits partir des graines de Nigelle par un Soxhlet en utilisant deux
solvants : du n-hexane (H) et un mlange chloroforme : mthanol (2 :1 en volume) (CM). Les diffrentes
fractions de lipides ont t spares par colonne chromatographique et les classes de PL ont t
dtermines par CLHP. Les acides gras des PL ont t dtermins par chromatographie gaz liquide
quipe dun dtecteur ionisation de flamme.
Le tableau 11 donne les valeurs en g/100g de lipides totaux.
Tableau 11 : Diffrentes classes de phospholipides de lhuile des graines de Nigella sativa. [148]
Classe de
PL
PG PE PI LPE PS PC LPC
Extraction
par H 1,51 0,03 25,10 0,05 9,56 0,01 1,200 0,001 12,30 0,03 46,10 0,04 4,23 0,01
Extraction
par CM 1,56 0,04 24,30 0,03 8,99 0,01 1,690 0,003 11,80 0,05 48,50 0,03 3,16 0,03
PG = phosphatidyl glycrol ; PE = phosphatidyl thanolamine ; PI = phosphatidyl inositol ;
LPE = lysophosphatidyl thanolamine ; PS = phosphatidyl srine ; PC = phosphatidyl choline ;
LPC = lysophosphatidyl choline

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Le phosphatidyl choline est le phospholipide majoritaire (avec 46,1 et 48,5 %) puis viennent ensuite
PE, PS, PI, LPC.
Ltude analyse galement la composition des PL en acides gras ; ici aussi, lAGI majoritaire est lacide
linolique ; et lAGS principal est lacide palmitique.
Lhuile de Nigella sativa est donc une bonne source de phosphatidyl choline et de phosphatidyl
thanolamine.
2.8 Glycolipides [96] [149]
Ce sont des esters de glycrols et dacides gras et la troisime fonction alcool du glycrol porte un
sucre.
Ils font partie des lipides polaires avec les phospholipides. Leur formule gnrale est :

Lanalyse de la teneur en glycolipides (GL) a t ralise en Allemagne en 2002.
Lextraction des lipides totaux sest faite partir des graines par Soxhlet en utilisant comme solvant le
mlange chloroforme/mthanol (2 :1 en volume). Les lipides totaux ainsi obtenus ont t spars dans
une colonne chromatographique. Les solvants luants pour sparer les lipides neutres et les glycolipides
(GL) taient respectivement le chloroforme et lactone. La fraction des GL a ensuite t analyse par
CLHP couple une analyse par ultraviolets.
La quantit de GL totaux trouve tait de 2,59 g/100g de lipides totaux. (tableau 12)
Tableau 12 : Les diffrentes classes de glycolipides (GL) de lhuile des graines de Nigella sativa. [149]
Sous classes de
glycolipides
Teneur en
g/100g de
GL
ASG 9,95
MGD 7,88
SG 9,45
CER 11,90
DGD 55,60
SQD 5,08
ASG = glucoside actyl de strol CER = glucocrbroside
MGD = monogalactosyl diacylglycrol DGD = diglucoside diacylglycrol
SG = glucoside de strol SQD = sulfoquinovosyl diacylglycrol

Six GL ont t mis en vidence dans ces graines de Nigelle.
Le GL largement majoritaire est le diglucoside diacylglycrol avec 55,60 g/100G de GL. On trouve
ensuite le glucocrbroside, puis le glucoside actyl de strol et le glucoside de strol en proportions
presque quivalentes ; le monogalactosyl diacylglycrol le sulfoquinovosyl diacylglycrol sont les deux
GL minoritaires.
Les quantits quotidiennes moyennes absorbes dans la ration alimentaire sont, pour les diffrentes
classes de GL:
ASG : 140mg ; MGD : 90mg ; SG : 65mg ; CER : 50mg ; DGD : 220mg
Les graines de Nigella sativa sont donc sans aucun doute une excellente source alimentaire de GL.
Lanalyse de la composition en AG des GL a t ralise par chromatographie gaz-liquide couple
une dtection par ionisation de flamme.
Elle rvle que lacide gras majoritaire est lacide linolique suivi de lacide olique et de lacide
palmitique.

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Formules :

R
1
et R
2
sont des chaines dacides gras.

monogalactosyl diacylglycrol
diglucoside diacylglycrol
sulfoquinovosyl diacylglycrol
glucocrbroside
R1=H, glucoside de strol
R1=acyl, glucoside actyl de strol
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2.9 Strols [128]
Lanalyse de la composition en strols de lhuile de Nigella sativa a t ralise sur des graines de
Grce, en1985.
Aprs extraction par lactone, le fractionnement par chromatographie sur colonne a permis de sparer 4
fractions de strols : les esters de strols (ES), les strols libres (SL), les strols glycosyls (SG) et les
strols glycosyls et actyls (SGA). Aprs hydrolyse des 4 fractions pour librer les acides gras et les
sucres, la chromatographie sur couche mince a permis de sparer les strols, les 4-methylstrols et les
alcools triterpniques qui furent identifis par chromatographie gaz-liquide couple la dtection par
ionisation de flamme et par chromatographie gazeuse couple la spectromtrie de masse.
Voir le tableau 13 pour les diffrentes fractions de strols.

Tableau 13 : Les fractions strols de lhuile de graines de Nigella sativa. [128]
FRACTIONS
quantit en
mg/100g
d'huile
SL
strols 40,0
4-mthyl strols 4,5
alcools triterpniques 8,2
ES
strols estrifis 2,6
4-mthyl strols estrifis 3,7
alcools triterpniques estrifis 9,5
SGA 42,0
SG 33,0

Les quatre fractions sont reprsentes dans les proportions suivantes :
- strols libres : 36,7 %
- strols glycosyls et actyls : 29,3 %
- strols glycosyls : 23 %
- strols estrifis : 11 %
Les strols glycosyls (SGA + SG) sont la forme majeure de strols avec 52,3%.
Ensuite, les strols ont t analyss par chromatographie en phase gazeuse. (confre tableau 14)
9 strols ont t identifis ; il sagit du cholestrol, du campestrol, du campestanol, du stigmastrol,
du sitostrol, du stigmastanol, du 5-avnastrol, du 7-avnastrol et du 7-stigmastnol.
Le sitostrol est le strol trs majoritaire ce qui nest pas tonnant car il est trs largement rpandu dans
les lipides vgtaux ; il est suivi du stigmastrol puis du campestrol. La particularit vient du 5-
avnastrol, compos rencontr plus rarement chez les plantes.
7 mthyl strols ont t rvls : 5 de ceux-ci sont prsents en quantit relativement importante : 24-
mthyllophnol, cycloeucalnol, gramistrol, obtusifoliol et citrostadinol ; les 2 autres sont ltat de
traces : lophnol et 4-thyllophnol.
Parmi les alcools triterpniques la bta-amyrine classiquement prsente dans les vgtaux nest que
faiblement reprsente chez la Nigelle. Les composs majoritaires sont le cycloartnol et le 24-
mthylenecycloartanol. Nous trouvons aussi du butyrospermol, du taraxrol et des traces de tirucallol.

Les formules sont visibles dans lannexe I.

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Tableau 14 : Nature des strols et triterpnes contenus dans lhuile de graines de Nigella sativa.
[128]
ACETATE
COMPOSITION EN %
SL ES SG SGA
strols
cholestrol 0,6 1,1 0,2 0,3
campestrol 11,9
}
15,2
9,6 10,9
campestanol
stigmastrol 20,8 8,8 18,5 16,1
b-sitostrol 61,8
}
60,0
69,9 72,7
stigmastanol
d5-avnastrol 4,9 11,7 1,8 traces
d7-stigmastnol traces
d7-avnastrol 3,2
4-mthylstrols
lophnol traces
obtusifoliol 26,0 40,0
24-mthyllophnol
}
45,6
}
48,2

cycloeucalnol
gramistrol
24-thyllophnol 1,3
citrostadinol 28,4 10,5
alcools triterpniques
tirucallol traces traces
taraxrol 1,3 1,0
bta-amyrine
}
7,1
}
3,2

butyrospermol
cycloartnol 39,6 31,6
24-mthylnecycloartanol
}
52,0
}
64,2

non identifi

2.10 Tocophrols [50] [172]
Les tocophrols sont le groupe des vitamines E ; antioxydants naturels.
On les retrouve dans la partie insaponifiable de lhuile.
Leur formule gnrale est la suivante :

En 1995, ZEITOUN et NEFF (Egypte/Etats-Unis) ont dtermin la teneur en tocophrols de graines
de Nigelle gyptiennes.
Les graines ont t presses mcaniquement froid laide dune presse vis.
Aprs avoir t dilue dans du n-hexane (1 :1 en volume), lhuile a t soumise une CLHP utilisant
comme systme de solvant : de lhexane : isopropanol (99 : 1, vol/vol) pour dterminer ainsi directement
la composition en tocophrols. (confre tableau 15)

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Tableau 15 : Composition en tocophrols de lhuile de graines de Nigella sativa dEgypte. [172]
tocophrol
mg de tocophrol
par kg d'huile
alpha 42,9 1,6
bta 26,3 2,0
gamma 118,7 5,5
delta 4,8 0,2
total 192,7

Le gamma tocophrol est de loin le plus abondant (118,7mg), suivi de lalpha tocophrol (42,9 mg),
du bta tocophrol (26,3 mg) et enfin du delta tocophrol prsent en faible quantit (4,8 mg).
La quantit totale de tocophrols (192,7 mg/kg dhuile) prsente dans lhuile des graines de Nigella sativa
est trs infrieure aux quantits totales gnralement reportes pour dautres huiles vgtales (530
1500 mg/kg dhuile).
2.11 Composs phnoliques et quinoniques [88] [140]
2.11.1 Teneur totale en drivs phnoliques [140]
En Turquie en 1993, Nergiz et tles ont dtermin la teneur en drivs phnoliques de graines de
Nigelle turques selon la mthode de Nergiz et nal (1991) [141].
La teneur totale de drivs phnoliques trouve tait de 1744 10.6 g/g dhuile.
2.11.2 Teneur en certains composs actifs [88]
Aux USA en 1998, une mthode par CLHP a t dcrite pour quantifier quatre constituants prsents
dans une huile de Nigelle commerciale (Albadawia) achete en Egypte. Il sagit des quinones :
thymoquinone, dithymoquinone et thymohydroquinone ; et du compos phnolique : le thymol.
La chromatographie a t ralise en utilisant un mlange deau, mthanol et 2-propanol (50-45-5 %)
avec une colonne C18 en phase inverse.
La composition est visible dans le tableau 16.
Tableau 16 : Teneur en quinones dune huile commerciale de graines de Nigella sativa. [88]
composants teneur en % d'huile
thymoquinone 5,26x10
2
2,59x10
3

thymohydroquinone 7,67x10
4
5,49x10
5

dithymoquinone non quantifiable
a

thymol 9,12x10
3
1,38x10
3

a
= en dessous des limites quantifiables : 2,12x10
4
% dhuile

Ce qui fait une teneur totale en thymoquinone + thymohydroquinone + thymol de 624,87 g/g dhuile
ce qui est infrieur la valeur dtermine dans ltude du paragraphe prcdent.
La provenance gographique des graines modifie certainement la composition chimique puisquune autre
tude [100] a dos la thymoquinone de diffrentes huiles fixes de graines de Nigelle et elle rvle une
teneur 3 fois suprieure :
- Huile commerciale Al-Amin achte en Arabie, de graines de provenance inconnue : 0,15%
- Huile commerciale Al-Khaial achte en Arabie, de graines de provenance inconnue : 0,13%
- Huile extraite de graines thiopiennes par Soxhlet lther de ptrole : 0,17%
La thymoquinone est une quinone monoterpnique ; la dithymoquinone est son dimre, obtenu par
photodimrisation et anciennement cit sous le nom de nigellone.
Nous retrouverons galement ces quatre composs dans lhuile essentielle extraite des graines de
Nigella sativa.

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Formules :

2 .11.3 Thymoquinone
La thymoquinone est une quinone monoterpnique : 1,4-dione,2-methyl,5-(-1-methylethyl) 2,5-
cyclohexadine.
Elle a la particularit dtre prsente la fois dans lhuile fixe (0,05% 0,15 %) et dans lhuile essentielle
o les teneurs sont trs variables suivant la provenance : de 0,6 % parfois plus de 25%.
La photodimrisation de la TQ aboutit la dithymoquinone anciennement cite sous le nom de nigellone.

Mode dextraction [100]
Aprs extraction par mthanol : eau (6 :1) dun mlange dhuile et dther de ptrole, la phase
mthanolique est soumise une chromatographie sur colonne de silice avec 3 luants successifs : ther
de ptrole, chloroforme, mthanol. La chromatographie en phase gazeuse rvle que la thymoquinone
est prsente dans la phase chloroformique ; la molcule est spare par CCM et est identifie par ses
caractristiques chromatographiques et spectrales en comparaison avec celles de la thymoquinone de
rfrence (Sigma Chemical Company).
2.12 Conclusion
Lhuile de Nigella sativa est compose majoritairement de triacylglycrols (57,5 63,2%) et dune
grande proportion dacides gras libres : 8,3 14,2% (ceci cause de la prsence de lipase).
Lacide linolique est le principal acide gras libre prsent hauteur de 49 59%.
Cette huile renferme galement des phospholipides, des glycolipides et des strols.
Les strols sont des strols libres ou des strols glycosyls et/ou estrifis. Notons quelques strols
particuliers : le 5-avnastrol (strol libre) et les mthyl strols suivants : 24-mthyllophnol,
cycloeucalnol, gramistrol, obtusifoliol et citrostadinol.
Lhuile de Nigelle ne contient que peu de tocophrols, compare dautres huiles vgtales.
La particularit de lhuile de Nigella sativa est la prsence de quinones : thymoquinone et
thymohydroquinone ; et dun compos phnolique : thymol.
Ces quinones sont les composs actifs de lhuile de Nigelle qui, nous le verrons, lui confrent
dimportantes proprits pharmacologiques.
Elles sont en outre des marqueurs de lhuile essentielle, la thymoquinone en tant parfois un des
constituants majoritaires.
thymol dithymoquinone
thymohydroquinone thymoquinone
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3 Huile essentielle
Lorsque lon tudie lhuile essentielle (HE) dune plante, il faut absolument tenir compte des facteurs
de variabilit qui entranent des diffrences trs importantes de sa composition et de la rpartition en
chacun des constituants.
Ces facteurs sont : les facteurs extrinsques : pratiques culturales et facteurs environnementaux
(temprature, humidit, vents) ; linfluence du cycle vgtatif et les diffrents procds dobtention.
Do lexistence de plusieurs chimiotypes selon la localisation gographique : chaque chimiotype
caractrise une HE de mme espce par le nom de sa molcule principale.
3.1 Caractristiques
Les graines de Nigella sativa contiendraient entre 0,4 % et 0,5 % dHE.
Cette HE est un liquide jaune ple avec une odeur caractristique.
Elle est normalement obtenue par distillation la vapeur deau des graines broyes de Nigella sativa.
LHE est rcupre dans lther thylique qui est ensuite vapor.
Une autre mthode pour lobtention de lHE a t dcrite par Rathee et al. en 1982 [151]. En utilisant une
extraction lther de ptrole (60-80) on obtient 35% dune huile, qui aprs distillation rvle lHE un
taux de 1,5%.
3.2 Composition
En 1986, [3] la sparation des diffrents constituants de lHE de graines de Nigella sativa en
provenance dEgypte a t obtenue par CPG couple la spectromtrie de masse.
Les composants ont t identifis par leur temps de rtention et par comparaison de leur spectre de
masse par rapport ceux des produits de rfrence.
67 composants ont ainsi t dtermins et sont rpertoris dans le tableau 17.
Tableau 17 : Composition de lhuile essentielle de graines de Nigella sativa. [3]
Ndu pic composants pourcentage
1 -pinne 9,30
2 camphne 0,06
3 hexanal 0,07
4 b-pinne 2,20
5 sabinne 0,76
6 myrcne 0,05
7 -terpinne 0,06
8 limonne 1,60
9 -phllandrne 0,01
10 1,8-cinole 0,08
11 ester thylique de l'acide hexanoque 0,01
12 C
3
H
7
-S-S-C
2
H
5
<0,01
13 g-terpinne 0,51
14 p-cymne 31,70
15 terpinolne 0,06
16 C
3
H
7
-S-S-C
3
H
7
0,05
17 2-heptnal 0,13
18 ester thylique de l'acide heptanoque 0,01
19 C
4
H
9
-S-S-C
2
H
5
0,05
20 artmisia ctone 0,14
21 C
4
H
9
-S-S- C
3
H
7
0,13
22 C
4
H
9
-S-S- C
4
H
9
0,01
23 C
3
H
7
-S-S- C
3
H
7
0,01
24 C
4
H
9
-S-S- C
3
H
7
0,08
25 ester thylique de l'acide octanoque 0,07
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26 C
4
H
9
-S-S- C
4
H
9
0,17
27 -thujone 0,01
28 trans-hydrate sabinne 0,07
29 longipinne 0,18
30 camphre 0,06
31 ester thylique de l'acide nonanoque <0,01
32 linalol 0,06
33 cis-hydrate sabinne 0,01
34 longifolne
0,78
35 actate de bornyl
36 2-undcanone 0,05
37 4-terpinol 0,58
38 ester thylique de l'acide dcanoque <0,01
39 2-dodcenal <0,01
40 1,8-p-menthadine-4-ol <0,01
41 carvotanactone 0,01
42 bornol <0,01
43 carvone 0,19
44 thymoquinone 24,50
45 2-tridcanone 0,01
46 trans-anthole 0,05
47 ester thylique de l'acide dodcanoque <0,01
48 p-cymne-8-ol 0,13
49 p-anisaldhyde <0,01
50 ester thylique de l'acide tetradcanoque 0,22
51 4-hydroxy-4-mthyl-2-cyclohexnone 0,01
52 ester thylique de l'acide pentadcanoque 0,01
53 thymol 0,01
54 carvacrol 1,10
55 ester mthylique de l'acide hexadcanoque 0,08
56 ester thylique de l'acide hexadcanoque 2,80
57 ester thylique de l'acide hexadcnoque 0,09
58 ester thylique de l'acide heptadcanoque <0,01
59 ester mthylique de l'acide octadcanoque <0,01
60 ester mthylique de l'acide olique 0,05
61 ester thylique de l'acide octadcanoque 0,21
62 ester thylique de l'acide olique 2,70
63 ester mthylique de l'acide linolique 0,20
64 ester thylique de l'acide linolique 9,40
65 ester thylique de l'acide linolnique 0,05
66 acide hexadcanoque 0,15
67 thymohydroquinone 0,64

LHE extraite contient environ 46% dhydrocarbures monoterpniques dont le principal est le
cymne ( 32%) et l pinne ( 9%).
Un autre composant principal est la thymoquinone (24,5%).
LHE contient galement du carvacrol (1,1%) et de la thymohydroquinone (0,64%).
Il est trs intressant de noter la prsence en faible quantit de 8 disulfides car ceux-ci peuvent
contribuer par leur teneur en soufre la qualification de saveur piquante attribue aux graines de Nigelle.
3.3 Variations de la composition
Les analyses ci-dessous portant sur des graines de Nigelle provenant de 2 rgions diffrentes dIran,
permettent dj dapprcier des diffrences.
La 3
me
tude ralise en Italie fait apparatre de nouveaux composs dans lHE des graines de Nigelle.
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3.3.1 Etude de Hasanzadeh, Ramazanie et Golmohammadzadeh, Iran, 2000 [97]
Les graines de Nigelle ont t rcoltes dans une rgion du Nord Est de lIran.
La teneur en hydrocarbures monoterpniques est ici beaucoup plus leve : 73,7%.
18 composs ont t identifis.
On trouve par ordre dcroissant les composs suivants :
- cymne : 41,7%
- terpinne : 12,8%
- campholnal : 9,7%
- thuyne : 8,2%
- longifolne : 3,3%
- limonne : 3%
- pinne : 2,9%
- carvacrol : 2,2%
- longipinne : 2,1%
- thymoquinone : 2%
- pinne : 2%
- 4-terpinol : 1,9%
- dihydrocarvone (cis) : 1,8%
- terpinne : 1,8%
- actate de 4-terpinnyle : 1,5%
- sabinne : 1,3%
- carvone : 0,63%
- verbnol (trans) : 0,62%
- thymol et thymohydroquinone : non dtects
- disulfides : non dtects.
Le cymne reste le compos majoritaire prsent ici en plus grande quantit (41,3% contre 31,7%
dans ltude prcdente).
La thymoquinone est la seule quinone retrouve, et en quantit nettement plus faible : 2%.
Aucun des huit disulfides nont t rvls ici.
Pour le campholnal, on note que les proportions sont trs diffrentes : absent dans ltude prcdente, il
est ici le compos arrivant en 3
me
position avec 9,7%.
3.3.2 Etude de Nickavar, Mojab, Javidnia et Roodgar, Iran, 2003 [142]
Pour cette tude, les graines de Nigella sativa proviennent dun march local de Thran.
Les hydrocarbures monoterpniques sont ici retrouvs un taux de 26,9% ; ce qui est proche de ltude
du paragraphe 3.2 ralis sur des graines de Nigelle gyptiennes.
On trouve par ordre dcroissant les composs suivants :
transanthole : 38,3% 4terpinol : 0,7%
cymne : 14,8% longifolne : 0,7%
limonne : 4,3% phellandrne : 0,6%
carvone : 4% thymoquinone : 0,6%
thuyne : 2,4% 1mehyl3propyl benzne : 0,5%
estragole : 1,9% 1,3,5trimthyl benzne: 0,5%
dill-apiole : 1,8% terpinne : 0,5%
anisaldhyde : 1,7% pcymne8ol : 0,4%
nnonane : 1,7% ndcane : 0,4%
carvacrol : 1,6% myrcne: 0,4%
myristicine : 1,4% 3mthyl nonane : 0,3%
sabinne : 1,4% dihydrocarvone : 0,3%
pinne : 1,3% longipinne : 0,3%
pinne : 1,2% 1thyl2,3dimthyl benzne : 0,2%
fenchone : 1,1% ntetradcane : 0,2%
apiole : 1% nhexadcane : 0,2%
thymol et thymohydroquinone : non dtects
disulfides : non dtects.

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Le transanthole prsent en faible quantit dans les graines de Nigelle gyptiennes [3] : 0,05% et
non dtect dans les graines du nord-est de lIran [97], est ici le compos majoritaire : 38,3%. Ceci aura
pour consquence de lui attribuer une odeur totalement diffrente de celles des 2 tudes prcdentes.
Ici on ne retrouve pas le thymol mais son isomre le carvacrol.
Les disulfides sont absents ainsi que la thymohydroquinone et on a seulement 0,6% de thymoquinone.
Le cymne est le seul compos majeur relativement constant bien que ses teneurs varient : de 14,8%
ici contre 41,7% dans les graines du nord-est de lIran.
Ces derniers rsultats montrent de grandes variations, mme lorsquil sagit de plantes provenant de
rgions diffrentes dun mme pays car la notion de conditions environnementales influence trs
fortement les compositions chimiques des HE dune mme espce.
3.3.3 Etude de DAntuono, Moretti et Lovato ; Italie, 2001 [58]
Ces auteurs ont tudi leffet de trois cultures diffrentes, cest dire semes (3 mars, 9 avril et 7
mai) et rcoltes trois dates diffrentes (19 et 25 juillet et 1
er
aot) sur la composition en HE de graines
de Nigella sativa originaires du Maroc.
Ces cultures ont t ralises dans le nord de lItalie (Bologne).
Les composs mis en vidence sont :
thuyne thuyol
pinne thymoquinone
sabinne myrtnol
pinne thymol
myrcne bourbonne + caryophyllne
terpinne lmne
cymne longifolne
cymne slinne
limonne slinne
terpinne germacrne A
trans hydrate de sabinne 7pislinne

Tout dabord, les auteurs font apparatre encore dautres composs : thuyol, myrtnol, bourbonne,
lmne, et slinne, germacrne A et 7pislinne ; dautre part la thymohydroquinone et les
disulfides sont absents.
Une interprtation exhaustive de ces donnes nest pas possible dans le cadre des rsultats obtenus
dans cette recherche, nanmoins ltude montre une grande variabilit de la composition en HE selon les
dates de culture avec :
- une teneur en HE totale extraite variant de 0,28% (2
me
culture) 0,5% (1
re
culture).
- des composs absents dans la 2
me
culture.
- des composs apparaissant lors de culture tardive (sesquiterpnes haut poids molculaire).
Nous pouvons penser que les conditions climatiques des mois de mars, avril et mai ont jou un rle
important dans la variation de la composition de lHE.
3.4 Conclusion
Les expriences [58], [97], [142] et [3] montrent des variations importantes de la composition de lHE
de graines de Nigella sativa L.
Nous remarquons que certaines tudes ne rvlent pas la prsence des drivs de la thymoquinone ni
celle des disulfides. La thymoquinone nest parfois prsente quen trs faible quantit.
Ce que nous avons pu voir dans ces diffrents travaux illustre bien la notion de facteur de variabilit :
Linfluence des facteurs extrinsques : ltude ralise en Italie [58] montre la grande
variabilit des composants rsultant de conditions de plantations diffrentes. Dautre part les
conditions gographiques semblent relativement modifier lHE rsultante comme le montre
les analyses sur les graines de Nigelle dEgypte et dIran : [97], [142] et [3].
Linfluence du cycle vgtatif : lexprience de ltude sur les 3 cultures diffrentes [58] donne
une ide des variations que peut entraner la rcolte diffrents moments de la maturation
des graines.
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Linfluence des procds dobtention : dans les expriences [97], [142] et [3], avant dtre
distilles, les graines nont pas toujours subi les mmes traitements, ce qui a pu contribuer
extraire plus ou moins de composs.
La notion de chimiotype : actuellement, aucun chimiotype na t dtermin pour lHE de
graines de Nigella sativa L. Nous avons vu limmense tendue gographique allant du bassin
mditerranen jusqu lExtrme-Orient, concerne par les cultures de cette espce ; partir
de l on peut imaginer la probable existence de diffrents chimiotypes. Or, les chimiotypes
dune HE orientent chacun leur manire les proprits pharmacologiques, et donc
lutilisation thrapeutique de cette HE ne pourra se faire sans en connatre sa teneur exacte.
Des expriences plus pousses seraient ncessaires pour rpertorier ces chimiotypes.
Nous devrons garder lesprit la grande variabilit de la teneur en thymoquinone lors dtudes
pharmacologiques avec lHE car il pourra arriver :
- que les rsultats obtenus soient contradictoires.
- quune activit propre la thymoquinone ne soit pas retrouve avec lHE.

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4 Saponoside
Les saponosides font partie des htrosides neutres de terpnes; ils sont trs largement distribus
dans les vgtaux.
Une de leurs caractristiques est leur proprit tensioactive : les saponosides se dissolvent dans leau en
formant des solutions moussantes.
Dans tous les cas, les saponines trouves dans les graines de Nigelle ont pour aglycone
lhdragnine, une gnine triterpnique. [50] [118]
4.1. Etude de Akbar Ali Ansari et al. , Pakistan, 1988 [20]
Ces auteurs ont identifis une saponine triterpnique.
Lextrait thanolique de graines de Nigelle du Pakistan a rvl une fraction contenant une saponine
aprs sparation par lacide chlorhydrique et le n-butanol. Le compos a t isol par chromatographie
sur colonne de silice et analys par RMN du
1
H et du
13
C ce qui a rvl un acide triterpnique et 6
sucres.
Le compos identifi est :
3O[Dxylopyranosyl(13)Lrhamnopyranosyl(12) Larabinopyranosyl]28
O[L rhamnopyranosyl (14) Dglucopyranosyl(16) Dglucopyranosyl]
hdragnine
Confre ci-dessous formule 1 :

Diffrentes saponines avec lhdragnine comme aglycone ont t trouves dans les vgtaux. La
plupart dentre eux contiennent les sucres : Larabinose, Dxylose, Dglucose et Lrhamnose ; ils
estrifient lhydroxyl en position 3.
Une saponine similaire a t retrouve dans une autre Renonculace : Anemone rivularis, la seule
diffrence porte sur le groupe Dxylopyranosyl qui est remplac par un groupe Dribopyranosyl chez
Anemone rivularis.
4.2 Etude de Singab et al., Egypte, 1999 [157]
Ces auteurs ont mis en vidence la mme saponine que prcdemment partir de lextrait
butanolique de graines de Nigelle dEgypte, ainsi quune autre saponine triterpnique caractrise ainsi :
3O[Dxylopyranosyl(13)Lrhamnopyranosyl(12)Larabinopyranosyl]
hdragnine.
(confre ci-dessus formule 2.)
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4.3 Etude de Kamara et Huat, Singapour, 2001 [118]
En 2001 Singapour, Kumara et al. ont pu isoler un saponoside partir des graines de Nigella
sativa.
Cest au cours dessais biologiques et plus particulirement concernant les effets cytotoxiques in vitro
qua t identifie cette saponine triterpnique.
Le compos pur a t isol aprs extraction des graines par actate dthyle et fractionnement par
chromatographie sur colonne de silice.
On a ensuite procd sa caractrisation analytique et chimique : dfinition de son pouvoir rotatoire,
chromatographie sur couche mince, CLHP, RMN
1
H et
13
C.
Le saponoside identifi est l -hdrine, une saponine triterpnique monodesmosique caractrise
ainsi :
3O [Lrhamnopyranosyl(12) Larabinopyranosyl] hdragnine de formule :

Ce compos avait t isol prcdemment partir des feuilles de Lierre grimpant (Hedera helix
Araliaces). Il est largement prsent dans la nature sous diffrents noms : koronaroside A et sapindoside
A.
Une analyse spectrale plus pousse de laglycone, lhdragnine avait t ralise antrieurement
par Joshi et al. en 1999 [108].
4.4 Conclusion
La graine de Nigelle renferme plusieurs saponosides dont laglycone est toujours lhdragnine.
Ces saponosides peuvent contenir 2, 3 ou 6 sucres.

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5 Alcalodes
Les alcalodes sont des composs essentiellement prsents chez les Angiospermes, certaines
familles ont dailleurs une tendance marque en laborer, les Renonculaces en font partie en
particulier lAconit.
Les plantes produisant ces composs se contentent rarement dun seul alcalode ; elles en contiennent
en gnral un mlange complexe.
5.1 Historique
12 alcalodes ont t retrouvs dans les graines de Nigella sativa.
- Au Pakistan :
1985 : Nigellimine N-oxyde : alcalode isoquinolique [26]
1985 : Nigellicine : alcalode indazolique [24]
1992 : Nigellimine : alcalode isoquinolique [25]
1993 : Nigellidine : alcalode indazolique [27]
Ces dcouvertes ont t menes par Atta-Ur-Rahman et al.
- Au Japon :
2003 : Nigellamine A1, A2, B1, B2 alcalodes diterpniques type-dolabellane [134]
2004 : Nigellamine A3, A4, A5, C [133]
Ces dcouvertes ont t menes par Morikawa et al.
5.2 Alcalodes isoquinoliques et indazoliques [24 27]
Les graines de Nigelle sont dgraisses avec de lther thylique.
5.2.1 Extraction des alcalodes isoquinoliques
Dans chacune des tudes, [26] et [25], ces alcalodes ont t extraits de la faon suivante :
Les graines dgraisses sont alcalinises, puis extraites par du chloroforme. Le rsidu est soumis
une chromatographie sur colonne.
Lalcalode isol est optiquement inactif ; il est ensuite dtermin par spectroscopie UV, par
rsonance magntique nuclaire (RMN) de
1
H et
13
C, et diffraction par rayon-X.
Les deux alcalodes isoquinoliques ainsi caractriss sont :

5.2.2 Extraction des alcalodes indazoliques
Dans chacune des tudes [24] et [27], ces alcalodes ont t extraits de la faon suivante :
Le rsidu dgraiss est acidifi par de lacide chlorhydrique 5%, filtr, alcalinis ( pH 8-9) par de
lammoniaque concentr et extrait par du chloroforme. Le rsidu obtenu est soumis une
chromatographie sur Silicagel 60. Puis les alcalodes isols sont caractriss par tude de leur spectre
de masse, par spectroscopie UV, par spectroscopie IR, par RMN (
1
H et
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C), et diffraction par rayon-X.
nigellimine nigellimine N-oxyde
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Les deux alcalodes indazoliques ainsi caractriss sont

5.3 Alcalodes diterpniques type
Les alcalodes terpniques ne sont pas issus du mtabolisme dun acide amin
terpnodes (mono-, di- ou sesquiterpnes) qui tardivement ont incorpor un atome dazote. Ceci conduit
certains auteurs les considrer comme des pseudo
Les alcalodes diterpniques actuellement connus sont en majorit isols partir de dive
Renonculaces.
Leur structure est toujours complexe.

Etude des alcalodes [133] [134]
Les graines de Nigella sativa
lactate dthyle. Cest la phase soluble dans lactate dth
chromatographies sur colonne et CLHP, on obtient les alcalodes purs, dtermins chacun selon leur
pouvoir rotatoire, leur spectre UV, leur spectre IR et par RMN (
Huit alcalodes diterpniques type
A1, A2, A3, A4, A5, B1, B2, C ; de formules

nigellamine A1 : X = CH
nigellamine A2 : X = N
nigellidine
Les deux alcalodes indazoliques ainsi caractriss sont :

Alcalodes diterpniques type-dolabellane
Les alcalodes terpniques ne sont pas issus du mtabolisme dun acide amin
ou sesquiterpnes) qui tardivement ont incorpor un atome dazote. Ceci conduit
certains auteurs les considrer comme des pseudo-alcalodes.
Les alcalodes diterpniques actuellement connus sont en majorit isols partir de dive
Leur structure est toujours complexe. [50]
Etude des alcalodes [133] [134]
Nigella sativa sont extraites par du mthanol. Lextrait mthanolique est lav
lactate dthyle. Cest la phase soluble dans lactate dthyle qui est tudie. Aprs plusieurs
pouvoir rotatoire, leur spectre UV, leur spectre IR et par RMN (
1
H et
13
C).
Huit alcalodes diterpniques type-dolabellane sont mis en vidence sous les noms de Nigellamine
; de formules :

: X = CH
: X = N
nigellamine A3
nigellidine
nigellicine
37
Les alcalodes terpniques ne sont pas issus du mtabolisme dun acide amin ; ce sont en fait des
ou sesquiterpnes) qui tardivement ont incorpor un atome dazote. Ceci conduit
Les alcalodes diterpniques actuellement connus sont en majorit isols partir de diverses
sont extraites par du mthanol. Lextrait mthanolique est lav
yle qui est tudie. Aprs plusieurs
ne sont mis en vidence sous les noms de Nigellamine

nigellamine A3
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nigellamine A4
nigellamine B1 : X = CH
nigellamine B2 : X = N

5.4 Conclusion
Avec ces 12 alcalodes jamais mis en vidence auparavant dans dautres plantes, on peut qualifier
Nigella sativa de plante alcalodes.
Dans la famille des Renonculaces, chez laconit, nous retrouvons un seul type
laconitine.
Ce qui est trs intressant dans la graine de Nigelle cest cette prsence concomitante dalcalodes
de trois structures de base diffrentes
alcalodes isoquinoliques
alcalodes indazoliques
alcalodes diterpniqu
Ceci est une caractristique rarement observe.

nigellamine A4
nigellamine A5

: X = CH
: X = N
nigellamine C
plante alcalodes.
Dans la famille des Renonculaces, chez laconit, nous retrouvons un seul type dalcalode diterpnique
de trois structures de base diffrentes :
alcalodes isoquinoliques
alcalodes indazoliques
alcalodes diterpniques de type-dolabellane.
Ceci est une caractristique rarement observe.
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nigellamine A5

nigellamine C
dalcalode diterpnique :
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6 Composs phnoliques
6.1 Flavonodes
Les flavonodes sont les pigments des vgtaux ; ils sont responsables de la coloration des fleurs,
des fruits et parfois des feuilles.
Ils sont aussi universellement prsents dans la cuticule foliaire et dans les cellules pidermiques des
feuilles assurant la protection des tissus contre les effets nocifs du rayonnement UV.
Les flavonodes constituent un large groupe de composs polyphnols comprenant les flavones, les
flavonols, les aurones, les chalcones et leurs htrosides.
Dans la Nigelle on retrouve des htrosides de flavonols. [50] [131]
6.1.1 Etude de Merfort et al. , Allemagne, 1997 [131]
En 1997, en Allemagne les auteurs Merfort et al. ont mis en vidence ces composs.
Aprs dgraissage des graines lhexane, lextrait hydroalcoolique subit plusieurs chromatographies sur
colonne de polyamide, sephadex pour isoler les produits purs. Lhydrolyse enzymatique permet dtudier
les sucres. Les produits terminaux sont identifis par leurs caractristiques spectrales : UV, spectre de
masse, RMN
1
H et
13
C.
Les flavonodes de la graine de Nigella sativa sont :
- des flavonol triglycosides pour les composs 1, 2 et 3 ;
- des flavonol monoglycosides pour les composs 4, 5 et 6.
Ils furent caractriss comme suit :
- 1 = querctine 3Oglucopyranosyl (12)O galactopyranosyl (12)O
glucopyranoside
- 2 = kaempfrol 3Oglucopyranosyl (12)O galactopyranosyl (12)O
glucopyranoside
- 3 = querctine 3O(6fruloyl glucopyranosyl) (12)O galactopyranosyl (12)
Oglucopyranoside
- 4 = querctine 3glucoside
- 5 = kaempfrol 3glucoside
- 6 = rutine = querctine 3rutinoside

Leurs formules chimiques sont visibles ci-dessous.
6.1.2. Etude de Singab et al., Egypte,1999 [157]
Un triglycoside de kaempfrol a t isol partir de lextrait butanolique des graines de Nigella
sativa ; il sagit du :
kaempfrol 3O [Dglucosyl (12) ODglucosyl (12)]glucoside

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6.2 Isobenzofuranone [109]
Un nouveau compos appartenant aux isobenzofuranone a t mis en vidence en Inde en 2001.
A partir dune solution alcaline de graines dgraisses de Nigelle indiennes, on extrait les substances
solubles dans lacide chlorhydrique. Aprs extraction par le chloroforme et le butanol, la fraction soluble
dans le chloroforme est soumise une chromatographie sur colonne pour rvler le compos pur qui fut
ensuite tudi par RMN
1
H,
13
C,1D et 2D.
Il fut identifi comme tant :
5hydroxy2,2dimthyl2,8dihydro6Hfuro[3,4g]chromn6one de formule :

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Ce compos est une nouvelle isobenzofuranone jamais isole auparavant.
6.3 Hydroxyactophnone [60]
Une nouvelle para-hydroxyactophnone a t isole de graines de Nigelle en Egypte en 2001.
Elle se caractrise comme suit :
2H6,7dihydro9hydroxy2,2dimthyl6oxofuro[3,2g]chromne de formule :

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7 Conclusion
La chimie de la graine de Nigella sativa est remarquable par la prsence simultane dune huile fixe
et dune huile essentielle.
Voici rsums les points importants de cette composition :
Une forte teneur en huile grasse (32%) constitue des esters du glycrol, des acides
linolique, olique et palmitique ; mais aussi de phospholipides, glycolipides, tocophrols,
strols particuliers et surtout de drivs phnoliques actifs : thymoquinone,
thymohydroquinone et thymol.
La prsence dune huile essentielle (0,4 0,5 %) compose majoritairement de
monoterpnes. On y trouve aussi le compos actif de lhuile fixe, la thymoquinone et des
drivs soufrs : les disulfides.
On a pu en outre identifier 12 alcalodes de 3 types chimiques diffrents ; plusieurs
saponosides dont l-hdrine et des composs phnoliques : htrosides de flavonol,
isobenzofuranone et hydroxyactophnone.

Les graines de Nigelle contiennent aussi des protines (20%), des minraux (fer, zinc, phosphore),
des vitamines du groupe B (surtout B1).
Cette richesse chimique laisse prsager de nombreuses actions pharmacologiques comme nous
allons le voir dans le chapitre suivant.
Prcisons la possibilit dun risque toxique par la prsence dun grand nombre dalcalodes.

Voici un rsum des teneurs des diffrents extraits de la graine de Nigelle :
- Graine : environ 30% dhuile
environ 0,5% dhuile essentielle
maximum de 0,1% de thymoquinone
- Huile : 0,05 0,15% de thymoquinone
- Huile essentielle : 0,6 24% de thymoquinone

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CHAPITRE 3
PHARMACOLOGIE

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1 Action antioxydante
1.1 Les objectifs
Les oxydants sont produits par notre mtabolisme anarobie, leur source est la fois endogne et
exogne. Le stress oxydatif survient lors dun dsquilibre de la balance oxydants/antioxydants en faveur
des oxydants, gnrant ainsi des espces ractives de loxygne en excs qui ne peuvent tre dtruites
par la capacit antioxydante de notre systme biologique et qui, par leur lectron libre sattaquent aux
molcules voisines et endommagent lipides membranaires, protines, acides nucliques
Ils sont impliqus dans la pathognse de nombreuses affections humaines comme :
lathrosclrose, le diabte, lhypertension artrielle, les inflammations, le cancer, et comme nous allons
le voir dans la survenue deffets indsirables lors de la prise de certains mdicaments
Les molcules antioxydantes sont donc mises profit dans ces pathologies mais aussi dans
lindustrie agro-alimentaire, toujours la recherche de substances naturelles pour prvenir lauto-
oxydation des lipides.
Les graines de Nigella sativa ayant traditionnellement t utilises dans les affections prcdemment
cites et dans lalimentation; il tait logique de pousser plus loin la recherche dune ventuelle proprit
antioxydante. [51]
1.2 Les tests utiliss
Plusieurs tests permettent de mettre en vidence les proprits anti- ou pro-oxydantes dun compos
ou dun extrait ainsi que son mode daction (agent rducteur, pigeur de radicaux libres, agent chlatant
de mtaux oxydants, suppresseur de la formation de loxygne singulet) [146].
Voici ceux qui seront utiliss dans les diffrentes tudes que nous allons voir :
1.2.1. Le test la DPPH (diphnylpicrylhydrazyl) [51]
Ce test est bas sur la capacit de lchantillon tudi rduire le radical DPPH en un compos
jaune : la diphnylpicrylhydrazine par don dun proton ou dun lectron. Au bout de 30 minutes
dincubation on mesure au spectrophotomtre labsorption de lchantillon 517nm. Diffrentes
molcules peuvent tre utilises comme tmoin positif et on compare les rsultats laide de la CI
50

(concentration inhibant 50% de la raction).
1.2.2. Le test dinhibition de la proxydation lipidique non enzymatique [51]
Pour cela on emploie des liposomes provenant dextraits de cerveau de buf, ou encore des
microsomes de foie de rat. En prsence de trichlorure de fer (FeCl
3
) et dascorbate il se forme des
radicaux hydroxyl (OH) qui, mis en prsence des li posomes sont responsables de la proxydation
lipidique. Le test au TBA (acide thiobarbiturique) permet de quantifier ltendue de la proxydation car
cette molcule, au contact des produits de loxydation forme un pigment rose dont on mesure labsorption
532nm. On tudie ainsi la capacit de la substance piger le radical hydroxyl par comparaison de sa
CI
50
avec celle dantioxydants de rfrence.
1.2.3 Le test au dsoxyribose [51]
La mise en prsence de Fe
3+
-EDTA avec le proxyde dhydrogne (H
2
O
2
) et lacide ascorbique
conduit la formation de radicaux hydroxyl qui seront dtects par leur aptitude dgrader le 2-
dsoxyribose en produits doxydation qui seront rvls par le test au TBA vu prcdemment.
Les antioxydants vont piger le radical OHet prv enir la dgradation du sucre. On compare leur CI
50
avec celle dun antioxydant de rfrence.
1.2.4 Le test dterminant des actions sites-spcifiques [51]
Il est men comme le test au dsoxyribose avec quelques modifications.
a) le fer est apport sous forme de trichlorure de fer au lieu de fer chlat lEDTA :
Dans ce cas, certains ions Fe
3+
se lient au dsoxyribose. La dgradation du sucre devient
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site-spcifique car les radicaux OHforms par les ions Fe
3+
attaquent immdiatement le
sucre et seuls les composs capables de complexer les ions fer seront susceptibles dinhiber
loxydation du dsoxyribose. A partir de l on peut dterminer si la substance tudie a un
pouvoir antioxydant par chlation de mtaux oxydants.
b) lascorbate est omis :
Laptitude de la substance rduire lEDTA ferrique peut tre mesure, car sans ascorbate,
seul un faible taux de radicaux OHseront gnrs et lon pourra observer une ventuelle
capacit directement pro-oxydante de la substance vis vis du sucre. Dans ce cas,
labsorption augmentera car un plus grand nombre de produits de dgradation seront
engendrs.
c) le dsoxyribose est omis :
Seule la substance tudie sera susceptible de ragir directement avec les radicaux OH
pour former des produits de dgradation (aldhydes par exemple).
1.2.5 Le test la blomycine [35]
Les composs inhibant la proxydation lipidique peuvent tre des agents pro-oxydants pour dautres
molcules comme les hydrates de carbone, les protines ou les acides nucliques.
Ce test permet de mesurer la capacit pro-oxydante dune molcule vis vis de lADN.
1.2.6 tude de laction antioxydante envers une mulsion -carotne/acide
linolique [23]
Leffet antioxydant sera mesur par laptitude de la molcule inhiber la dgradation du -carotne
dans une mulsion -carotne/acide linolique.
1.2.7 Mesure de la capacit piger lanion superoxyde O
2
[35]
La production danion superoxyde est ralise grce au systme hypoxanthine/xanthine oxydase. Il
mesure la capacit des antioxydants ragir avec O
2
. Les substances sont compares par leur CI
50.

1.2.8 Mesure de la capacit prvenir lauto-oxydation dune huile vgtale [23]
Lextrait test est mlang lhuile et chauff pour crer une auto-oxydation qui est value par
lindice de proxydation et danisidine et compare celle dun tmoin positif.

1.3 Les rsultats
1.3.1 Extraits aqueux et alcoolique
Objectifs
Atta et Imaizumi, en 1998 [23] ont tudi le comportement des extraits dgraisss thanoliques et
aqueux de graines de Nigelle et de plante de Romarin (Rosmarinus officinalis L.). Ceci a t ralis dans
le but de trouver des antioxydants naturels comme alternative aux molcules de synthse utilises dans
lindustrie, pour prvenir loxydation des lipides alimentaires.
Loxydation lipidique des aliments riches en matires grasses est un problme majeur dans lindustrie
agroalimentaire car elle modifie le got, lodeur, la couleur, la valeur nutritionnelle et elle limite la dure de
conservation de laliment.
Dautre part linnocuit de lutilisation de molcules antioxydantes de synthse est parfois conteste car
elles peuvent se comporter comme des pro-oxydants.
Les tests utiliss
- Action antioxydante envers une mulsion -carotne/acide linolique
- Mesure de la capacit prvenir lauto-oxydation dune huile de mas
Le tmoin positif est la tertio-butylhydroquinone (TBHQ), une quinone antioxydante de synthse, de
structure et daction biologique proche de la TQ.

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Les rsultats
Les capacits antioxydantes des extraits thanoliques sont suprieures celles des extraits aqueux.
Leffet antioxydant de lextrait thanolique de graines de Nigelle est suprieur celui du romarin et
quivalent celui du TBHQ.
Discussion
Lextrait thanolique de graines de Nigelle est un trs bon antioxydant, aussi puissant que la TBHQ et
pouvant tre utilis pour prvenir lauto-oxydation de lhuile de mas.
Les auteurs suggrent dutiliser la poudre cryobroye de cet extrait pour la disperser par sonification dans
lhuile de mas la dose de 100 ppm ; ce qui ne modifierait pas les proprits organoleptiques de lhuile
vgtale et permettrait de prvenir lauto-oxydation des lipides.
Malheureusement, ltude de la composition de cet extrait thanolique na pas t ralise et nous ne
pouvons que faire des suppositions quant aux molcules responsables de lactivit antioxydante. Les
couleurs des solutions ont t estimes visuellement auparavant et selon les auteurs, celle brun dor de
lextrait alcoolique rvlait la prsence de composs phnoliques et de pigments flavoniques
(contrairement lextrait aqueux gristre).
Nous pouvons penser que lthanol permet dextraire une partie de la TQ, des composs
polyphnoliques et des pigments flavoniques participant lactivit antioxydante ; et peut tre aussi une
partie de lHE (nous verrons plus loin quelle est galement antioxydante) puisque le degr alcoolique de
lextrait est de 80.
Une tude de la composition de lextrait thanolique et aqueux de graines de nigelle permettrait de
complter cette tude.
1.3.2 Thymoquinone
Objectifs
Les travaux raliss par Badary et al. en Egypte en 2003 [35] reposent tout particulirement sur la
recherche de lactivit antioxydante et non pro-oxydante de la TQ.
Les tests utiliss
- Inhibition de la proxydation lipidique (tmoin positif : la TBHQ)
- Test la DDPH (tmoins positifs : lacide ascorbique et le butylhydroxytolune : BHT)
- Test au dsoxyribose (tmoin positif : TBHQ et catchine)
- Test de site-spcifique au dsoxyribose (tmoin positif : TBHQ et catchine)
- Production danion superoxyde par le systme hypoxanthine/xanthine oxydase (tmoin positif : le
TBHQ)
- Test la blomycine (tmoin positif: le TBHQ)
Rsultats
- Inhibition de la proxydation lipidique :
TQ: CI
50
de 16,8 M
TBHQ: CI
50
de 14,9 M
Nous observons une action quivalente et puissamment inhibitrice des 2 molcules.
Leffet est dose-dpendant.
- Test la DPPH :
TQ : CI
50
de 1mM
TBHQ : CI
50
de 5 M
Acide ascorbique : CI
50
de 20 M
BHT: CI
50
de 50 M
Ici leffet de la TQ est trs infrieur (de 20 50 fois) celui des tmoins positifs.
- Test au dsoxyribose :
TQ : CI
50
de 44,3 M
TBHQ : CI
50
de 4,6 M
Catchine : CI
50
de 18,3 M
Ici galement, la TQ est moins active que les tmoins positifs (de 2,5 10 fois moins).
- Test de site-spcifique au dsoxyribose :
Aucun des 2 composs nest capable de complexer le fer ; ils ne forment pas de produits de
dgradation quand le dsoxyribose est omis et enfin pas daction pro-oxydante vis vis des
sucres.
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- Production danion superoxyde par le systme hypoxanthine/xanthine oxydase :
Elle est efficacement inhibe par la TQ de faon dose-dpendante avec un effet suprieur celui
de la TBHQ.
TQ : CI
50
de 3,35 M
TBHQ : CI
50
de 18,1 M
Les 2 molcules nagissent pas par inhibition de lactivit de la xanthine oxydase, car leur CI
50
,

elles ne purent diminuer la formation durate par lenzyme.
- Test la blomycine :
Il confirme une forte action pro-oxydante de la TBHQ, 8 fois suprieure celle de la TQ qui, en
dessous de la concentration de 200 M nest pas pro-oxydante vis vis de lADN.
Discussion
La TQ et la TBHQ ont une action antioxydante puissante ; elles inhibent la proxydation lipidique de
faon comparable.
La TQ est particulirement puissante pour piger lanion superoxyde (effet suprieur celui de la
TBHQ). Cet anion a une ractivit propre qui est faible mais il est considr comme un important
initiateur de proxydation lipidique car il est le prcurseur de radical hydroxyl fortement ractif. Dans cette
activit, la TQ et la TBHQ se comportent comme des substances SOD-like ; la SOD tant une enzyme
clef dans la catalyse de lanion superoxyde en proxyde dhydrogne et en oxygne.
Lactivit antioxydante de la TQ sexerce donc par son aptitude donner un proton ou un lectron,
par pigeage de radicaux libres et non en complexant des mtaux pro-oxydants comme la montr le test
de spcificit de site. Dautre part la TQ na pas montr daction pro-oxydante vis vis des sucres et de
lADN (pas en dessous de 200 M) alors que la TBHQ se rvlait tre pro-oxydante dans le test la
blomycine (vis vis de lADN).
1.3.3 Lhuile
Objectifs
Lhuile de Nigelle tant commercialise, il tait intressant de voir si ses effets antioxydants pouvaient
tre aussi importants que ceux de la TQ.
En 1995 [100] les auteurs Houghton et al. comparrent ces 2 extraits.
Test utilis
Linhibition de la proxydation lipidique non enzymatique (sur des liposomes de cerveau de bovin)
Rsultats
Lhuile montra une inhibition dose-dpendante de la proxydation lipidique avec une activit 10 fois
infrieure celle de la TQ.
Discussion
La concentration moyenne en TQ dans les chantillons dhuile tant de 0,15% nous pouvons dire que
lactivit antioxydante de lhuile est suprieure celle attendue daprs sa teneur en TQ ; donc dautres
composants de lhuile doivent certainement participer ses proprits antioxydantes ; ceux-ci pourraient
exercer une synergie avec la TQ et augmenter ainsi le pouvoir de lhuile.
En 2003 en Allemagne [146], Ramadan et al. montraient que chaque composant dune huile pris
individuellement ne peut expliquer lui seul lactivit pigeur de radicaux libres et que celle-ci est due
une action combine de plusieurs antioxydants endognes comme les phospholipides, les strols, la
fraction insaponifiableAinsi, le taux de lipides polaires (notamment les phospholipides, beaucoup plus
antioxydants que les glycolipides), lindice de proxydation initial, la prsence de tocophrols et de
certains phnols ainsi que le taux dacides gras polyinsaturs (AGPI) affecteront cette activit.
1.3.4 Lhuile essentielle
Objectifs
En 2000 en Autriche [51], les auteurs Burits et Bucar ont montr que laction antioxydante de lHE de
graines de Nigelle ntait pas due la seule action de la TQ.
Pour cela ils ont observ le comportement antioxydant des HE extraites de 7 chantillons de Nigelle de
provenances gographiques inconnues.
Lanalyse montra des diffrences quantitatives de la composition des HE, par contre lanalyse qualitative
rvlait les mmes composants majoritaires savoir : la TQ puis le p-cymne, le carvacrol, le 4-terpinol
et le trans-anthol.
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Un rapide screening pour dterminer les molcules antioxydantes prsentes dans lHE rvla 4
composants : carvacrol, TQ, trans-anthol et 4-terpinol.
Tests utiliss
- Test au DPPH : tmoin positif le BHT
- Test dinhibition de la proxydation lipidique : tmoin positif la querctine
- Test au dsoxyribose : tmoin positif la querctine
- Test de site spcifique : tmoin positif la querctine et le BHT
Rsultats
- Test au DPPH :
Tous purent rduire le radical DPPH en diphnylhydrazine avec :
BHT: CI
50
de 12,12 g/ml
Carvacrol : CI
50
de 28 g/ml
TQ : CI
50
de 211 g/ml
HE: CI
50
de 460 g/ml
Les deux autres composs (4-terpinol et trans-anthol) ne purent inhiber 50% de la raction
sous les conditions de ce test, le facteur limite tant le volume des chantillons tests : 50 l.
Nous obtenons donc une faible activit de la TQ et de lHE par rapport au tmoin positif (200 et
400 fois moins actif), alors que le carvacrol est seulement 2 fois moins actif que le BHT.
- Test dinhibition de la proxydation lipidique :
HE: CI
50
de 0,0011 g/ml
TQ : CI
50
de 1,84 g/ml
Carvacrol : CI
50
de 9,3 g/ml
Querctine: CI
50
de 1,84 g/ml
Leffet sur la proxydation lipidique de lHE est trs suprieur celui de la TQ ; cependant, la TQ
agit de faon comparable au tmoin positif.
- Test au dsoxyribose :
Activit antioxydante suprieure du carvacrol : CI
50
: 21 g/ml
- Test de site-spcifique :
Il ne montra aucune action pro-oxydante des composs tests vis vis des sucres, aucune
action chlatrice du fer et pas de formation de produits de dgradation de type aldhydique.
Discussion
En conclusion, lHE a une activit antioxydante particulirement puissante pour inhiber la
proxydation lipidique, suprieure la TQ.
Elle exerce galement son effet antioxydant par pigeage du radical hydroxyl et par don dlectron ou de
proton, mais dans ce cas son action est moindre que celle de la TQ ou du carvacrol.
Donc lHE comporte dautres molcules antioxydantes que la TQ savoir le carvacrol essentiellement,
mais il ne faut pas ngliger non plus la prsence de 4-terpinol et de trans-anthol.
Ni lHE, ni les composs tudis ne montrrent daction pro-oxydante vis vis des sucres, mais il serait
ncessaire de complter ces rsultats par le test la blomycine qui mesure laction pro-oxydante envers
lADN. En effet, une molcule nayant pas la capacit de dgrader les sucres peut se montrer pro-
oxydante vis vis de lADN.
Ici encore, laddition des effets antioxydants des 4 molcules ne peut expliquer la puissante action de
lHE elle mme. Nous pouvons donc supposer que dautres composs non dtects peuvent jouer le rle
dantioxydants et que certainement il existe une synergie daction.
1.3.5 Conclusion
Les diffrentes tudes in vitro mettent en vidence une action antioxydante de lextrait alcoolique de
graines de Nigelle, de lhuile et de lhuile essentielle et de la TQ extraites des mmes graines.
Lhuile, lhuile essentielle et la TQ exercent leurs actions antioxydantes de la faon suivante :
Inhibition de la proxydation lipidique
Pigeage du radical hydroxyl
Donneur de proton ou dlectron
Incapacit complexer les mtaux pro-oxydants pour la TQ et huile
Pas deffet pro-oxydant vis vis des sucres, ni vis vis de l ADN en ce qui concerne la TQ (ceci
resterait vrifier pour lhuile essentielle et lhuile par le test la blomycine)
Puissant pigeur de lanion superoxyde pour la TQ.
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Pour lhuile : dautres molcules comme les phospholipides et autres lipides polaires, les strols,
certains phnols et les tocophrols pourraient agir de faon synergique avec la TQ pour augmenter le
pouvoir antioxydant de lhuile.
Pour lhuile essentielle galement, les 4 molcules antioxydantes identifies (TQ, carvacrol, anthol
et 4-terpinol) semblent agir en synergie, seules ou avec dautres molcules antiradicalaires prsentes
dans lhuile essentielle et non rvles par cette tude.
Lextrait thanolique dgraiss de graines de Nigelle quant lui, a t tudi dans la perspective
dtre substitu aux antioxydants de synthse utiliss dans lindustrie agroalimentaire, ceux-ci tant
parfois controverss.
Lextrait thanolique a rvl une activit antioxydante nette et suprieure celle de lextrait aqueux.
Concernant linhibition de la proxydation lipidique, lHE est la plus active (1000 fois plus que la TQ)
puis vient la TQ et lhuile (10 fois moins active que la TQ).
Lhuile et les graines qui nous intressent ici ont donc une activit antioxydante certaine mais infrieure
celle de la TQ et de lHE.
Il convient dattirer lattention sur le fait que ces rsultats sont obtenus in vitro seulement. Leur intrt
rside dans le fait quils permettent ainsi de rechercher directement lactivit antioxydante ou pro-
oxydante des composs ou des extraits in vivo pour corrler les rsultats observs dans les deux cas.
1.4 Applications
La graine de Nigelle a t utilise dans diffrentes applications o ses proprits antiradicalaires
peuvent tre mises profit ; notamment lors de la prise de mdicaments o le but est de trouver des
substances limitant les effets indsirables qui dcoulent du stress oxydatif caus par les molcules
administres, et pouvoir ainsi scuriser et largir la prescription thrapeutique.
1.4.1 Vieillissement des fonctions hpatiques et rnales
Lobjectif est de montrer que ladministration par voie orale (v.o.) dune huile de Nigelle des rats
adultes et sniles est une bonne prvention du vieillissement des fonctions rnales par un mcanisme
daction antioxydant principalement. ([37] 1996).
Le vieillissement est d en gnral aux radicaux libres et la baisse de concentration dans le sang du
glutathion rduit (GSH), principal agent cellulaire de dfense antiradicalaire.
1.4.1.1 Protocole
Des rats adultes et sniles reoivent par v.o. : 2,7 g/kg/jour dhuile pendant 4 semaines.
Sont valus au bout de 2 et 4 semaines : les changements histologiques dans les tissus rnaux et
hpatiques et les modifications biochimiques ; ainsi que la teneur en ADN cellulaire des organes tudis.
Le vieillissement provoque une chlation de lADN sous leffet des radicaux libres et les liaisons
hydrogne faibles sont alors remplaces par des liaisons fortes, empchant ainsi le droulement des
chanes dADN. Ainsi le taux cellulaire dADN augmente.
1.4.1.2 Rsultats
Le vieillissement provoque chez le rat snile (par rapport au rat adulte) :
une baisse du GSH et de la cratinine srique (P0,01)
une lvation des taux sriques de cholestrol et de -glutamyl-transfrase ( GT) (P0,05)
une lvation des taux sriques dure et dacide urique (P0,01)
Le taux de transaminases nest pas modifi, ni celui de la phosphatase alcaline.
Lhuile entrane chez le rat adulte par rapport au groupe contrle non trait :
Une baisse significative des taux sriques de cholestrol (P0,05), de GT et dure (P0,01)
Chez le rat snile, lhuile provoque, par rapport au groupe contrle non trait :
une baisse de cholestrol, de GT, dure, dacide urique et daspartate aminotransfrase avec
P0,01.
une baisse de la teneur en ADN cellulaire hpatique et rnal significative avec P0,01.
une nette diminution de toutes les modifications tissulaires (restauration de la taille des
hpatocytes et du glomrule rnal, dcongestion des vaisseaux sanguins du glomrule)
confirme par ltude histologique
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1.4.1.3 Discussion
La baisse des taux de -GT et dAST indique un meilleur fonctionnement hpatique et celle de lacide
urique et de lure, une meilleure filtration glomrulaire.
Le fait que lingestion dhuile de Nigelle chez les rats snescents abaisse la teneur en ADN cellulaire
confirme limplication dun mcanisme antioxydant dans la prvention du vieillissement tissulaire.
Lhuile de Nigelle peut donc permettre de retarder certains phnomnes de vieillissement chez le rat.
1.4.2 Hpatoprotection
1.4.2.1 Les tests utiliss
Les diffrents tests visent dtruire les cellules hpatiques par un agent chimique et observer
ensuite le pouvoir hpatoprotecteur de lextrait de Nigelle en traitement curatif ou prventif par des tudes
histopathologiques ou par dosage de paramtres biochimiques.
Dosages sriques:
- transaminases sriques : alanine aminotransfrase (ALT) et aspartate aminotransfrase (AST) :
leur lvation signe une souffrance hpatique.
- -GT : idem
- phosphatase alcaline (PA) : son activit augmente en cas de cholestase ou de pathologie
hpatocellulaire chronique.
- lactate dshydrognase (LDH) : elle nest pas spcifique du foie mais son activit augmente
lorsquil est atteint.
- bilirubine totale : sa teneur dans le sang augmente en cas de problme hpatique car elle est
conjugue dans le foie et limine par la bile.
- activit prothrombique : la prothrombine est un facteur de la coagulation synthtis dans le foie.
Dosages hpatiques:
- malondialdhyde (MDA) : mesure la proxydation lipidique
- glutathion rduit (GSH) : value le statut en antioxydants hpatiques
Test au paractamol [98]
Linjection i.p. de paractamol des rats in vivo induit une ncrose hpatique qui se traduit par
une lvation dans le srum de AST, ALT et une baisse du GSH hpatique.
Ce test met en vidence la capacit du compos prvenir la dpltion en GSH et la
proxydation lipidique.
Produit test :
Lhuile de Nigelle par v.o. (1,125 g/kg) aprs injection de paractamol.
Tmoins positifs : vitamines C et E, fructose et un cocktail fructose/cyclosporine A/trifluoprazine.
Test au tertiobutyl hydroproxyde (TBHP) [59]
Le TBHP est utilis pour crer des lsions oxydatives et une dpltion rapide en GSH
intracellulaire qui est lvnement initiateur de la toxicit pour aboutir la rupture du cytosquelette
membranaire.
In vitro, lhpatotoxicit se traduit par une perte de viabilit cellulaire avec fuite des transaminases
ALT et AST dans le milieu dincubation et dpltion en GSH intracellulaire.
Ces 3 paramtres permettent de mesurer le maintien ou non de lintgrit membranaire des
hpatocytes.
Le test mettra en vidence la capacit prserver le GSH intracellulaire.
Produit test :
La TQ sur les hpatocytes isols de rat en pr-incubation avant le TBHP.
Tmoin positif : la sylibine, agent hpatoprotecteur connu.
Test au ttrachlorure de carbone (CCl
4
)
Le CCl
4
administr des rongeurs est mtabolis dans le foie en radical libre trichloromthyl
(CCl
3
) qui ragit avec loxygne pour conduire au radic al trichloromthylproxyl (CCl
3
OO), celui-
ci entrane une destruction de la membrane cellulaire, une ncrose centrilobulaire et une
dgnration lipidique.
Les 2 points importants de la survenue des lsions hpatiques sont la gnration de radicaux
libres et laltration de lhomostasie calcique (par altration des protines responsables du
transport trans-membranaire du calcium).
Lvnement premier est la proxydation lipidique. [66] [126]

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Du point de vue biochimique, cela se traduit par une lvation de la concentration des
transaminases, de la LDH et de la PA dans le srum ; par une dpltion en GSH hpatique et par
une augmentation du MDA dans le foie.
Leffet hpatoprotecteur des produits tests (huile, HE, TQ) mettra en vidence leur capacit
inhiber la proxydation lipidique, piger les radicaux libres, voire, diminuer linflux
intracellulaire du calcium.
Test la D-galactosamine (DG) [66]
La DG en injection intra-pritonale (i.p.) cre chez le rat une altration de la membrane cellulaire
hpatique avec lvation des transaminases sriques et de la PA.
Produit test : lhuile par v.o. chez le rat.
1.4.2.2 Rsultats
Lhuile
Test au paractamol
Lors de cette tude ralise par Hassan et al. en Egypte en 1998 [98], lhuile de Nigelle par v.o.,
les vitamines et le cocktail restaurent les paramtres biochimiques de faon comparable alors
que le fructose ne propose quune protection partielle.
Il avait dj t montr que ladministration de certains antioxydants comme la mthionine et la
N-actylcystine forte dose avait pu efficacement prvenir les lsions hpatiques dues au
paractamol.
Donc lhuile exerce in vivo un effet hpatoprotecteur par action antioxydante (comme les vit. C et
E), par prservation du GSH intracellulaire et par inhibition de la proxydation lipidique.
Test au ttrachlorure de carbone
Une tude histologique chez le rat ([164] 2003) montre que lhuile par v.o., associe linjection
de CCl
4
rduit les lsions seulement quelques ncroses parses alors que le CCl
4
seul en i.p.
induisait une ncrose et une fibrose svre.
Lhuile par V.O. chez le rat ([66] 2000) nexerce quune protection partielle de lhpatotoxicit due
au CCl
4
inject en sous-cutan.
Ces 2 tudes nont pas t menes par rapport un tmoin positif.
Test la D-galactosamine
Dans la mme tude [66], lhuile par v.o. restaure tous les paramtres et offre une
hpatoprotection totale.
Il a t montr en 2003 leffet rgnrateur hpatique de ladministration dune mulsion de lipides
des rats intoxiqus la D-galactosamine. Donc lhpatoprotection totale de lhuile de Nigelle aux
doses testes sexplique la fois par sa teneur en TQ et en lipides. [83]
Les 2 autres tests montrent un effet hpatoprotecteur in vivo d laction antioxydante de lhuile par
inhibition de la proxydation lipidique, prservation GSH intracellulaire et pigeage de radicaux libres.

Huile essentielle
Lors de leur tude histologique chez le rat, Trkdogan et al. [164] montraient lhpatoprotection
apporte par lHE par v.o. avec comme pour lhuile, seulement quelques ncroses parses.
Deux composs principaux de lHE de graines de Nigelle : l-pinne et la para-cymne nont
apport aucune amlioration de lhpatotoxicit lors de leur administration diffrentes doses i.p.
avant linjection i.p. de CCl
4
chez la souris ; ces 2 composs nont pas de proprit antioxydante
majeure. [126]
Ceci met en vidence un effet hpatoprotecteur in vivo par inhibition de la proxydation lipidique et
pigeage de radicaux libres.

Thymoquinone
Test au tertiobutyl hydroproxyde
Les auteurs Daba et al. aux USA en 1998 [59] montrent que la pr-incubation dhpatocytes
avec la TQ diminue trs significativement lhpatotoxicit. (confre tableau 18)
La TQ rduit nettement la fuite des transaminases, et son action principale est la prvention de la
dpltion en GSH o elle est aussi active que la sylibine.
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La pr-incubation des hpatocytes avec la TQ permet de retrouver une bonne viabilit cellulaire
au bout de 120 minutes ; toutefois laction de la sylibine est suprieure.
La TQ, en prvenant la dpltion en GSH, diminue le stress oxydatif caus par le TBHP et limite
la cytotoxicit.
Tableau 18 : Effets de la thymoquinone et de la sylibine sur les transaminases et le glutathion rduit
(en nmol/mg de protine) dhpatocytes isols de rats au bout de 120 minutes. [59]
groupes
% de fuite en
ALT
% de fuite en
AST
teneur en GSH
contrle 46,1 0,6 24,8 0,7 6,19 0,20
TBHP 82,6 1,9* 62,6 1,1*** 2,03 0,10***
Sylibine 45,4 1,4 22,7 1,1 5,31 0,30
TQ 50,5 1,4 23,8 1,0 5,36 0,40
Sylibine+TQ 54,2 1,5** 25,1 1,7** 4,28 0,20**
TQ+TBHP 62,1 0,8** 33,5 0,7** 4,10 0,20**
* et *** : significativement diffrents du groupe contrle avec P<0,001 et P<0,05 respectivement
** : significativement diffrent du groupe TBHP avec P<0,05
Leffet de ladministration prventive ou concomitante de TQ avec le CCl
4
chez la souris a t
observ dans les tudes suivantes :
- [10] Al-Gharaby et al. en 1997 en Arabie
- [137] Nagi et al. en 1999 en Arabie
- [125] Mansour en 2000 en Arabie
- [126] Mansour et al. en 2001 en Arabie
Que la TQ soit administre par v.o. ou i.p., en prventif ou en curatif, elle amliore dans tous
les cas les paramtres tudis et lhistopathologie par rapport au groupe non trait. [10]
Par v.o., la TQ agirait galement par lintermdiaire de son mtabolite : la dihydrothymoquinone,
qui elle mme inhibe fortement la proxydation lipidique. La DT-diaphorase rduit les quinones
dans le foie et permet leur limination. La dihydrothymoquinone est 2 fois plus active que la TQ
pour inhiber la proxydation lipidique. ([137] 1999)
Nanmoins, daprs les diffrents travaux, laction hpatoprotectrice optimale semble tre
obtenue par injection i.p. de 12,5 mg/kg de TQ une heure avant linjection de CCl
4
en i.p. (15
L/kg), ce qui restaure les taux de GSH et MDA hpatiques et diminue nettement lactivit des
transaminases. [126] (confre tableau 19)

Tableau 19 : Effets sur diffrents paramtres, de la thymoquinone (12,5 mg/kg en i.p.) administre
des souris 1heure avant injection i.p. de CCl4 (15 L/kg). [126]
traitement
ALT
(UI/ml)
AST
(UI/ml)
GSH
(M/g de foie)
MDA
(nM/g de foie)
contrle 19,80 1,65 219,00 10,77 8,10 0,45 138,0 11,4
TQ 18,40 3,30 260,00 18,10 8,70 0,34 145,0 11,9
CCl4 695,00 40,84* 725,00 16,50* 4,70 0,75* 667,0 162,0*
TQ+CCl4 56,25 10,23** 373,00 86,10** 8,80 0,84** 172,0 28,0**
Les rsultats reprsentent la moyenne SE (n=5)
* : significativement diffrent du groupe contrle avec P<0,05
** : significativement diffrent du groupe trait par CCl4 avec P<0,05

Ces tests confirment chez la souris leffet inhibiteur de la proxydation lipidique et pigeur de
radicaux libres de la TQ et leur intrt comme hpatoprotecteur lors de lsions oxydatives.
Nous ne pouvons carter lventualit dune implication de mcanismes complmentaires (voir ci-
dessous).

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1.4.2.3 Discussion
Les 3 principes les plus antioxydants de la graine de Nigelle (la TQ, lHE et lhuile) ont une forte
action hpatoprotectrice vis vis du stress oxydatif occasionn par diffrentes substances.
Lvnement commun et principal est la proxydation lipidique : facteur initiateur de la lsion.
Donc leffet antioxydant reste le mcanisme daction prpondrant de la graine de Nigelle en aidant
maintenir lintgrit des membranes hpatocytaires, que ce soit en pigeant les radicaux libres, en
prservant le glutathion rduit intracellulaire ou en inhibant la proxydation lipidique.
2 mcanismes complmentaires peuvent intervenir :
La baisse du calcium intracellulaire par la nigellone (dithymoquinone) montr par Chakravarty
([53] 1993) probablement en inhibant la protine kinase C.
Linhibition de la production de tromboxane B
2
(TxB
2
) par la TQ, par inhibition de la cyclo-
oxygnase. Or une augmentation de production de TxB
2
contribue la formation dune vsicule
de la membrane plasmique de lhpatocyte (dissociation de la bicouche lipidique membranaire du
cytosquelette sous-jacent) et ce phnomne serait aussi un des vnements initiaux survenant
dans la lsion de lhpatocyte suite un stress oxydatif. ([100] 1995)
Ces actions combines permettraient la cellule de rsister laugmentation de linflux calcique et
la destruction de la membrane cellulaire.
Les actions des diffrents extraits nont pas t compares.
Ltude histopathologique [164] montrant leffet hpatoprotecteur de lhuile et de lHE ne montre pas de
diffrences significatives dans lactivit de ces 2 substances.
1.4.3 Nphroprotection
Le but de ces tudes in vivo est de trouver une substance pouvant limiter la nphrotoxicit de
diffrents mdicaments anticancreux et antibiotiques.
Cette nphrotoxicit entrane une altration des structures rnales avec mauvaise filtration glomrulaire.
La principale manifestation est la baisse de la clairance la cratinine mais dautres paramtres
biochimiques sont modifis:
- Dans le sang : augmentation des concentrations en cratinine, ure et baisse de celles en
albumine et protines.
- Dans les urines : augmentation de lexcrtion urinaire en protine, albumine, sucres et
lectrolytes.
Les lsions rnales sont gnres par le stress oxydatif et entraneront une proxydation lipidique
avec baisse du statut en antioxydants dans le cortex rnal.
Lamlioration de ces paramtres et de lhistopathologie permettra dvaluer leffet nphroprotecteur de la
Nigelle lors de son association aux molcules mdicamenteuses.
1.4.3.1 Protocoles exprimentaux
Mdicaments anticancreux
Ifosfamide (IFO) ([29] 1999)
Sa nphrotoxicit se manifeste entre autres par un syndrome de Fanconi : trouble de la
rabsorption du tubule rnal proximal avec fuite des lectrolytes, du glucose et des acides
organiques. Le mcanisme est mal connu mais la toxicit lIFO a pu tre associe la
dpltion en GSH rnal et laccumulation en MDA (proxydation lipidique).
Produit test :
La TQ par administration par v.o. des souris (5 mg/kg/jour), 5 jours avant et 5 jours pendant
linjection i.p. quotidienne de IFO (50 mg/kg).
Doxorubicine (ou adriamycine)
Ses effets indsirables sont une nphrotoxicit et une cardiotoxicit.
La DOX est transforme en un radical semiquinone qui rduit loxygne pour produire le
superoxyde et rgnrer la DOX. La formation du radical superoxyde initie une raction
radicalaire en chane qui dtriore les membranes cellulaires. [138]
Cela se traduit au niveau rnal par une permabilit des parois glomrulaires avec
hyperlipidmie, proxydation lipidique, protinurie, albuminurie et perte du statut en antioxydant
rnaux.

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Produit test :
La TQ par v.o. des rats (dose de 10 mg/kg/jour) pendant 5 jours avant et un jour pendant
linjection intra veineuse (i.v.) de DOX (6 mg/kg). ([30] 2002)
Cisplatine
Sa toxicit rnale et son action mylosuppressive seraient lies une libration de radicaux
libres de loxygne avec proxydation lipidique et perturbation de lhomostasie calcique.
Action de lextrait thanolique :
Cet extrait thanolique est concentr en principe actif par chromatographie (luant :
mthanol/eau 9 :1). Il est administr par v.o. des souris (50mg/kg), 30 minutes avant linjection
i.p. de cisplatine (2 mg/kg) pendant 10 jours, 1 jour sur 2. ([139] 1991)
Action de la thymoquinone :
La TQ est donne par v.o. des rats (8 mg/kg/jour) et des souris (4 mg/kg/jour) 5 jours avant et
5 jours aprs linjection de cisplatine en i.v. aux rats (5 mg/kg) et en i.p. aux souris (7 et 14
mg/kg). ([34]1997)
Mdicament antibiotique : la gentamicine
La gentamicine (GM) est connue pour tre nphrotoxique par production de radicaux libres ; dailleurs
diffrents pigeurs de radicaux libres ont permis dattnuer sa toxicit.
Action des graines broyes :
Elles sont donnes par v.o. des rats (2 mg/kg) paralllement linjection i.p. de GM (30 mg/kg)
pendant 15 jours. ([81] 1997)
Action de lhuile :
Diffrentes doses orales dhuile sont donnes des rats (0,5 ; 1 et 2 ml/kg) 4 jours avant et pendant
les 6 jours de traitement par GM (injection intra-musculaire, i.m. 80 mg/kg/jour). ([11] 2004)
1.4.3.2 Rsultats
Ifosfamide
Ladministration de la TQ diminue nettement la susceptibilit rnale des souris lIFO, par prvention
de la proxydation lipidique et prservation du GSH rnal ; ce qui diminue la fuite urinaire des
lectrolytes, du glucose et des acides organiques et amliore la filtration glomrulaire. [29] (voir tableau
20)
Tableau 20 : Effet de lifosfamide et/ou de la thymoquinone sur quelques paramtres biochimiques.
[29]
paramtres sol.saline TQ IFO TQ+IFO
clair.crat. (ml/min) 0,60 0,04 0,69 0,07 0,27 0,03
ab
0,50 0,04
c

FE Na (%) 0,35 0,03 0,38 0,04 7,20 1,00
ab
3,00 0,40
abc

FE K (%) 35,00 3,00 33,00 2,70 65,0 8,00
ab
40,0 5,10
c

FE PO4 (%) 3,00 0,02 3,20 0,33 30,00 4,00
bc
9,00 2,00
c

FE glucose (%) 0,09 0,40 0,08 0,01 0,40 0,06
ab
0,17 0,01
c

EU lactate (M/h) 1,30 0,20 1,20 0,20 4,00 0,50
ab
2,50 0,30
c

EU pyruvate (M/h) 1,50 0,20 1,10 0,10 3,50 0,40
ab
2,00 0,20
c

ure srique (mM/l) 5,600 0,354 4,80 0,40 9,00 0,50
ab
6,80 0,30
bc

a,b,c,
: significativement diffrent des groupes contrle saline, TQ et IFO respectivement avec P<0,05
n = 6, FE = fraction excrte ; EU = excrtion urinaire

Doxorubicine
Ladministration prventive de la TQ attnue la nphrotoxicit de la DOX en rduisant la protinurie et
lalbuminurie. Elle agit en amliorant le statut rnal en antioxydants (lvation de 70% de lactivit de la
catalase rnale par rapport au groupe trait uniquement par DOX) et en rduisant la proxydation
lipidique (de 41% par rapport au groupe trait par DOX seul).
Son puissant effet de pigeage de lanion superoxyde contribue certainement limiter les dommages
oxydatifs donc la TQ agit diffrents niveaux du mtabolisme de la DOX. [30] (voir tableau 21)

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Tableau 21 : Effet de la thymoquinone sur diffrents paramtres, chez des rats traits par la doxorubicine. [30]
paramtres sol.saline TQ DOX TQ+DOX
ure srique (mg/dl) 24,00 3,40 23,00 3,00 37,00 4,20
ab
26,00 3,10
c

protine srique (g/dl) 6,33 0,70 6,30 0,50 4,00 0,51
ab
5,50 0,60
c

albumine srique (g/dl) 3,20 0,20 3,12 0,25 1,80 0,15
ab
2,80 0,30
c

protine U (mg/mg cratinine) 0,99 0,10 0,96 0,11 41,00 5,00
ab
20,00 4,50
abc

albumine U (mg/mg cratinine) 0,42 0,07 0,39 0,05 12,60 2,50
ab
6,40 2,00
abc

a,b,c,
: significativement diffrents des groupes contrle saline, TQ et DOX respectivement avec P<0,05 ; n = 6
U = urinaire
Cisplatine
Extrait thanolique [139]
Son association au cisplatine permet dallonger la dure de vie de 10% et de restaurer le taux dure
sanguine.
Les auteurs montrent galement lattnuation de la mylosuppression par limitation de la perte en
leucocytes et de la baisse de lhmoglobine (-15,6% et -26% respectivement pour le groupe trait par
Nigelle+cisplatine contre -62,4% et -52,5% respectivement pour le groupe trait par le cisplatine seul).
Nous pouvons penser que cet extrait concentr par chromatographie a une teneur particulirement
leve en TQ.
Thymoquinone [34]
Ltude histopathologique montre que la TQ associe au cisplatine attnue fortement les lsions rnales
oxydatives. (voir tableau 22)
La clairance la cratinine et lurmie sont aussi trs significativement amliores. Le mcanisme
daction nest pas envisag mais on peut supposer quil sagit toujours dune inhibition de la proxydation
lipidique.
Tableau 22 : Effet chez le rat de ladministration de thymoquinone sur la nphrotoxicit induite par le
cisplatine. [34]
traitement
ure srique
(mM)
cratinine
srique (M)
vol. urinaire
(ml/24h)
clair.cratinine
(ml/min/kg)
saline 7,4 0,7 65,1 2,1 10,0 1,8 4,00 0,75
TQ 7,1 0,9 52,7 1,1 12,0 1,7 4,70 0,75
cisplatine 36,0 6,0* 248,0 23,5* 23,5 9,0* 0,60 0,25*
cisplatine+TQ 11,8 1,3* 97,4 17,0* 14,0 5,5 3,10 0,75
* et : significativement diffrents des groupes t raits par la solution saline et par le cisplatine
respectivement avec P<0,05 ; n = 6.
Gentamicine
Graines broyes [81]
Associes la GM, elles permettent de restaurer lurmie et la cratinmie leurs valeurs normales ;
ceci est confirm par ltude histopathologique.
Huile [11]
Ladministration par v.o. dhuile de Nigelle avec la GM diminue la svrit de certains signes
biochimiques de faon dose-dpendante. (voir tableau 23)
Tableau 23 : Variations biochimiques chez les rats traits par gentamicine et/ou lhuile de Nigelle. [11]
traitement
cratinine
srique (mg/dl)
ure srique
(mg/dl)
GSH rnal
(mM/100g)
STA rnal
(mM/100g)
saline 0,37 0,04* 19,40 2,60* 2,21 0,22* 2,11 0,22*
GM 3,17 0,34# 119,30 10,20# 1,59 0,18# 1,67 0,14#
huile (1 ml/kg) 0,33 0,04* 18,80 2,00* 2,80 0,30 2,44 0,20
huile (0,5 ml/kg)+GM 2,77 0,40 98,20 9,50 1,69 0,20# 1,80 0,20
huile (1 ml/kg)+GM 1,37 0,04 31,00 3,60 2,08 0,20* 1,90 0,20*
huile (2 ml/kg)+GM 0,46 0,04* 28,40 2,90 2,11 0,20* 1,90 0,20*
*, , #, : valeurs significativement diffrentes avec P<0,05 ; n = 6 ; STA=statut en antioxydant totaux
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Les doses de 1 et 2 ml/kg se sont rvles tre plus nphroprotectrices avec, la dose suprieure :
restauration de la cratinine srique, du GSH et du statut total en antioxydants dans le cortex rnal et
rduction significative du taux dure sanguine (P<0,05).
Ceci est confirm par un examen histologique puisque les groupes traits par les 2 doses
suprieures nont plus quune seule cellule ncrose dans quelques tubules pars.
Nous pouvons dire la suite de cette tude, que lhuile exerce son effet nphroprotecteur en maintenant
le statut en antioxydants dans le cortex rnal.
1.4.3.3 Discussion
La TQ, lhuile, lextrait thanolique et les graines, par leur action antioxydante, peuvent tre associs
certains mdicaments pour rduire efficacement le stress oxydatif conduisant une nphrotoxicit.
Dans tous les cas, linhibition de la proxydation lipidique et le maintien en antioxydants dans le
cortex rnal permet de protger lintgrit des structures et du fonctionnement des reins.
1.4.4 Conclusion
Nous constatons que les travaux ne se limitent pas ltude de lhuile ou des graines mais galement
celle de la thymoquinone, de lhuile essentielle et des extraits aqueux et alcooliques.
Ici, lhuile et les graines broyes ont montr leur effet nphroprotecteur vis--vis de ladministration de
gentamicine chez le rat.
Par contre, seule lhuile a t tudie pour son action hpatoprotectrice vis--vis des dommages crs
par le paractamol, le ttrachlorure de carbone ou la D-galactosamine chez les rongeurs. Nous pouvons
penser que la graine possdera en partie cette proprit du fait de sa teneur en huile.
Nous retrouverons leffet antioxydant dans dautres phnomnes : inflammatoires, infectieux

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2 Action immunomodulatrice
Lemploi traditionnel de la Nigelle dans certaines pathologies comme les infections et les affections
inflammatoires amne rechercher dventuelles proprits immunomodulatrices.
El-Kadi et al. furent les premiers montrer (en 1987) que la Nigelle avait des effets immunomodulateurs
sur des lymphocytes T humains in vitro. ([12] 2003)
2.1 Protocoles exprimentaux
Leffet sur limmunit est valu in vitro de plusieurs manires ([94] 1995) ; ([95] 1999) :
Par observation de la rponse lymphocytaire diffrents mitognes ou groupes de cellules
allogniques en prsence ou en labsence de Nigelle.
Par observation de leffet de la Nigelle sur la scrtion de cytokines par une culture de
lymphocytes humains
Par mesure de lactivit chimioluminescente de leucocytes (granulocytes) stimuls par le
myristate de phorbol et le zymostan : loxydation du luminol se fait grce aux radicaux libres de
loxygne produits lors de la phagocytose ; la stimulation des granulocytes augmente ce
phnomne (production de radicaux libres, oxydation du luminol) ainsi que la quantit de lumire
produite. On mesure ensuite la capacit de la Nigelle piger les radicaux libres de loxygne
librs lors de la phagocytose, ceci se traduisant par une baisse de la chimioluminescence.
Par mise en prsence de Staphylococcus aureus avec une suspension de granulocytes les
auteurs ont pu mesurer le taux de mort bactrienne, le taux de phagocytose (nombre total de
cocci intracellulaire/nombre de granulocytes) et lactivit phagocytaire (% de granulocytes
contenant au moins 3 cocci).
Les extraits de Nigelle
Les auteurs [94] ont obtenu lextrait de Nigelle par dissolution de la poudre de graines dans une
solution de tampon phosphate suivie dune centrifugation et de la rcupration de lextrait soluble
surnageant.
Lextrait soluble subit ensuite un fractionnement protique pour librer 4 fractions : <10 kDa ; 10-
30 kDa ; 30-50 kDa et >50 kDa.
Les mmes auteurs [95] compltrent ces travaux en valuant leffet du mme extrait de Nigelle
et de son fractionnement protique sur dautres cytokines.
2.2. Rsultats
Les rsultats furent les suivants:
La fraction protique de la graine de Nigelle stimule la rponse lymphocytaire aux groupes de
cellules allogniques avec un effet plus marqu pour la fraction protique de bas poids molculaire
(< 10 kDa). [94]
Lextrait stimule la production dIL-1 par les cellules mononuclaires actives ou non par les
cellules allogniques. Lextrait total est plus actif que ses fractions protiques. [94] [95]
Aucun effet sur la production dIL2. [94]
Lextrait protique active les lymphocytes T et augmente ainsi la scrtion dIL3 par les
lymphocytes activs ou non. [94]
Les substances testes nont aucun effet sur la scrtion dIL4 par les cellules monocytaires non
actives ou actives par mitognes ou par cellules allogniques. [95]
Sur la production dIL8 leffet est variable : lextrait protique total supprime la production dIL8 par
les cellules mononuclaires non actives mais stimule celle des cellules mononuclaires actives par
le mitogne du Pokeweed. [95]
Lextrait protique supprime lactivit chimioluminescente des leucocytes stimuls par le myristate de
phorbol et le zymostan. [94]

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Vis vis du Staphylococcus aureus : en prsence de 0,5 ou 50 g/ml de la fraction protique <10
kDa aucun des 3 paramtres tudis ntaient significativement diffrents du groupe contrle. Donc
la fraction protique de la graine de Nigelle na pas dactivit bactricide et les auteurs suggrent
quelle agit par inhibition de lactivit de la myloproxydase des granulocytes.
Lors dune tude [153] en 2000 visant valuer leffet de lhuile de Nigelle sur linfection au
cytomgalovirus chez le rat, il tait montr un effet antiviral qui tait accompagn dune augmentation
du taux srique en IFN- ainsi que du nombre de cellules M et de cellules T CD4
+
. Ainsi leffet
antiviral de lhuile de Nigelle sexercerait via la stimulation de IFN-, des cellules M et des cellules T
CD4
+
.
2.3 Conclusion
Les cytokines scrtes par les lymphocytes, les monocytes ou les macrophages sont des facteurs
de rgulation de nombreuses fonctions biologiques et notamment de limmunit.
La fraction protique de la graine de Nigelle semble donc agir la fois sur limmunit spcifique et sur
limmunit non spcifique.
Elle stimule les lymphocytes T humains in vitro avec augmentation de la scrtion dIL3 mais pas de
celle de lIL2 suggrant ainsi que la fraction protique aurait une action plus spcifique sur le sous-
groupe CD4
+
des lymphocytes T.
Laction de la Nigelle sur la production dIL-1 laisse penser quelle agirait par stimulation des
macrophages de faon directe ou via lIL3.
Laction variable sur lIL8 ne s explique pas au vu des rsultats de cette tude.
La fraction protique de bas poids molculaire semble la plus active sur la stimulation lymphocytaire.
Lhuile de Nigelle pourrait aussi avoir une action sur dautres mdiateurs de limmunit comme l IFN-
et les cellules M.

Des tudes complmentaires seraient ncessaires pour confirmer les effets immunomodulants de
lhuile car cest sous cette forme que la Nigelle est commercialise en Europe pour un usage mdicinal.
Et cest sa proprit immunostimulante qui est en gnral mise en avant.
Laction de la graine sur limmunit na pas t tudie mais son administration permettrait de bnficier
la fois des proprits de ses protines et de son huile.

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3 Actions anti-inflammatoire et antipyrtique
La graine de Nigelle a t traditionnellement utilise dans des affections rhumatismales, quelques
travaux ont donc tudi ses effets anti-inflammatoires.
3.1 Les tests
dme induit par le carraghnane
Une inflammation aigu est produite par injection dune solution de carraghnane 1% (0,5 ou 1ml)
dans la patte postrieure du rat. Ceci cre un dme.
La Nigelle est administre par v.o. ou i.p. h 1 h avant le carraghnane et son effet anti-inflammatoire
est valu par mesure du volume de la patte avant et 2 4 heures aprs linduction de ldme.
Le tmoin positif est lindomtacine ou laspirine. [9] [18] [92] [136]
Granulome
Il est induit de 2 faons :
- Par implantation sous-cutane dune boulette de coton sur labdomen du rat. LHE de Nigelle et la
TQ sont injectes quotidiennement en i.p. pendant 7 jours et leur effet est valu par mesure du
poids du granulome. Le tmoin positif est lindomtacine. [136]
- Par application dhuile de croton sur la surface interne de lune des 2 oreilles de souris. On value
leffet anti-inflammatoire local de lapplication dHE de Nigelle en mesurant la diffrence de poids
des 2 oreilles. [92] Leffet na pas t compar celui dun tmoin positif.
3.2 Les rsultats
3.2.1 Lhuile essentielle et la thymoquinone
Lors dune tude ralise en 1997 en Arabie [136], leurs effets sur ldme et le granulome a t
compar celui de lindomtacine.
Sur ldme:
Nous observons daprs les rsultats (tableau 24) un effet anti-inflammatoire sur ldme du rat
comparable voire suprieur lindomtacine (9 mg/kg : 68% dinhibition ; P<0,001) de :
- lHE la dose i.p. de 1,55 ml/kg (96% dinhibition ; P<0,001)
- la TQ la dose i.p. de 2 mg/kg (105% dinhibition ; P<0,001)
Ltude ralise en 2004 en Iran [92] montre que lHE de Nigelle est plus active par voie i.p. que par
v.o. : la dose de 400 L/kg : on obtient 20% (non significatif, n.s.) et 87% (P<0,001) dinhibition
respectivement par v.o. ou i.p. contre 73 et 79% (P<0,001) avec lindomtacine (10mg/kg).
Tableau 24 : Effets de lhuile essentielle et de la thymoquinone en injection i.p. sur ldme et le
granulome du rat. [136]
TRAITEMENT
OEDEME GRANULOME
dose en i.p. n % d'inhibition dose en i.p. n % d'inhibition
contrle 17 15
HE 0,66 ml/kg 8 64,12 7,49* 0,33 ml/kg 9 17,64 5,79**
1,55 ml/kg 7 96,26 22,56* 0,66 ml/kg 8 46,86 3,66*
TQ 0,5 mg/kg 8 38,85 6,35* 3,0 mg/kg 7 13,04 3,53***
1,0 mg/kg 9 56,63 10,30* 5,0 mg/kg 6 48,09 2,29*
5,0 mg/kg 6 104,88 4,24*
contrle 6 8
indomtacine 3,0 mg/kg 8 46,9 12,85*** 3,0 mg/kg 8 34,37 1,01**
9,0 mg/kg 8 67,83 7,89*
*, ** et *** : diffrence significative entre les produits tests et le groupe contrle avec P<0,001 ; P<0,01 et
P<0,05 respectivement
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Sur le granulome
Sur le granulome induit par implantation de coton, [136], la TQ (5 mg/kg) et lHE (0,66 ml/kg) en i.p.
ont un effet anti-inflammatoire suprieur lindomtacine (3 mg/kg) avec P<0,001 et P<0,01 pour
lindomtacine par rapport au groupe contrle.
Lapplication locale de 20L dHE sur le granulome de loreille de souris induit par lhuile de croton [92]
permettait de le rduire de 50%. Ceci na pas t compar avec un tmoin positif.
La TQ et lHE en injection i.p. ont un effet anti-inflammatoire comparable celui de lindomtacine.
LHE contient environ 24% de TQ donc leffet obtenu avec lHE est suprieur celui attendu daprs
sa teneur en TQ ; donc dautres composants de lHE doivent participer cet effet.
3.2.2 Les graines broyes
Lors dune tude ralise en 2001 en Arabie [9], 500 mg de graines broyes, administres par v.o.
permettaient de rduire ldme significativement (P<0,018) 3 heures aprs linjection de carraghnane
par rapport au groupe contrle.
Leffet tait comparable celui de laspirine la dose de 100 mg/kg par v.o.
A ces doses nous pouvons considrer que laspirine et les graines de Nigelle exercent une action anti-
inflammatoire quivalente.
3.2.3 Autres extraits
Dautres extraits ont galement montr un effet anti-inflammatoire important vis vis de ldme lors
dune tude ralise en 1997 en Arabie [18] ; mais le test na pas t fait en parallle avec un tmoin
positif. Voici ces rsultats 2 heures aprs injection de carraghnane (par rapport au groupe contrle avec
P<0,001) :
- Extrait lther de ptrole dose par v.o. de 215 mg/kg Inhibition de 88%
- Poudre dose par v.o. de 645 mg/kg Inhibition de 84%
- Extrait alcoolique dose par v.o. de 160 mg/kg Inhibition de 79%
Lextrait lther de ptrole extrait lhuile et une partie de lhuile essentielle ; mais comme cette
dernire est prsente en faible quantit, on pourra pratiquement assimiler leffet de lextrait lther de
ptrole celui de lhuile.
3.2.4 Discussion
Lextrait alcoolique, lhuile, la poudre par voie orale rduisent significativement ldme chez le rat
mais ils nont pas t compars un tmoin positif. [18]
Lactivit anti-inflammatoire de lhuile na pas t tudie mais elle peut tre reflte par celle de lextrait
lther de ptrole.
Les graines broyes la dose de 500 mg/kg ont montr la mme activit anti-inflammatoire que
laspirine (100 mg/kg). [9]
Dans ces tudes, lHE et la TQ montrent un effet anti-inflammatoire chez le rat remarquable
(rduction de ldme et du granulome) comparable celui de lindomtacine lors de ladministration par
voie i.p. des extraits de Nigelle.
La TQ a un effet anti-inflammatoire suprieur celui de lHE.
La voie orale est visiblement moins active et ceci pourrait tre d la mtabolisation hpatique de la TQ
en dithymoquinone par la DT-diaphorase.
Un effet anti-inflammatoire local a galement t mis en vidence par application dHE sur le
granulome de loreille de la souris, induit par lhuile de croton. [92]

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3.3 Mcanisme daction
Il ne semble pas tre entirement lucid et certainement plusieurs mcanismes sont impliqus.
Nous allons en voquer quelques uns sans carter lide que des phnomnes complmentaires non
connus actuellement peuvent intervenir.
3.3.1. Action sur la production dicosanodes
2 enzymes du mtabolisme de lacide arachidonique : la cyclo-oxygnase et la 5-lipoxygnase (5-LO)
conduisent la formation de thromboxane B
2
(TxB
2
) et de leucotrine B
4
(LTB
4
) respectivement ; ces 2
composs (appartenant aux icosanodes) interviennent dans les phnomnes de linflammation.
Protocole
- Dans ltude [100] ralise en 1995 les auteurs valuent leffet de lhuile et de la TQ sur la
production dicosanodes par les leucocytes de pritoine de rats stimuls par le calcium
ionophore. Les tmoins positifs sont lindomtacine (inhibitrice de la cyclo-oxygnase) et la
fistine (inhibitrice des 2 enzymes).
- Dans dautres travaux raliss en 2002, [67] les auteurs se sont penchs sur linhibition de la
synthse des produits issus de laction de la 5-lipoxygnase (principalement le LTB
4
et lacide 5-
hydroxyicosatetranoque : 5-HETE) dans les granulocytes de rats (stimuls par le calcium
ionophore). Diffrentes doses dhuile de Nigelle, de nigellone et de TQ ont t testes.
Rsultats
- Lhuile et la TQ inhibent de faon dose-dpendante la production de LTB
4
et TxB
2
par les
leucocytes de rats. Les 2 substances sont plus efficaces pour linhibition de libration de TxB
2
.
Les auteurs voquent une inhibition de la phospholipase A2 comme site daction de la TQ et de
lhuile.
La TQ est beaucoup plus active que lhuile (6 fois plus pour inhibition de production de TxB
2
et 10
fois plus pour LTB
4
).
- Les 3 principes (huile, nigellone et TQ) inhibent de faon dose-dpendante la production de 5-
HETE et celle des produits de la 5-LO, avec une activit trs suprieure pour la TQ par rapport
lhuile ; la nigellone ayant la plus faible efficacit.
Discussion
La TQ et lhuile dans une moindre mesure, inhibent la formation de 2 produits issus du mtabolisme
de lacide arachidonique : TxB
2
et LTB
4
, 2 mdiateurs fortement impliqus dans les phnomnes
inflammatoires.
Les auteurs suggrent que dautres acides gras polyinsaturs de lhuile (par exemple lacide
icosapentadinoque) pourraient aussi contribuer lactivit anti-inflammatoire en intervenant dans le
mtabolisme de lacide arachidonique.
3.3.2 Action sur la production de monoxyde dazote
Le monoxyde dazote (NO) est un des mdiateurs scrts par les macrophages. Il est produit
partir de la L-arginine sous laction de la monoxyde dazote-synthtase (MAS) dans des conditions
physiologiques normales ou pathologiques. Son action principale est la vasodilatation dpendante du
GMP-cyclique et la cytotoxicit contre des agents pathognes du systme de dfense de limmunit non
spcifique. Il joue un rle majeur dans les phnomnes inflammatoires.
Lenzyme MAS existe sous la forme de 3 isomres ; 2 de ceux-ci sont rguls par le systme
calcium/calmoduline alors que le 3
me
(celui tudi ici) est rgul au niveau de sa transcription par des
mdiateurs comme les interleukines et linterfron, ou par des stimuli inflammatoires ou bien encore des
endotoxines comme les lipopolysaccharides bactriens (LPS). [70] [123]
Protocole
Les macrophages de pritoine de rat sont pr-incubs avec lextrait de Nigelle (extrait aqueux [123]
et TQ [70]) puis mis en prsence de LPS de Escherichia coli qui activent la production de NO par les
macrophages).
La quantit de NO produite par les macrophages en prsence ou absence de Nigelle est mesure et
compare. On value le pourcentage dinhibition de sa production.
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Rsultats
Ltude [123] ralise en 2003 au Pakistan montre que la pr-incubation des macrophages avec un
extrait aqueux de graines de Nigelle (du Pakistan) cre une baisse dose-dpendante de la production
de NO.
La prparation dun extrait bouilli priv de ses protines a la mme activit ; ce qui rvle que les
composants actifs ne sont pas de nature protique.
Au cours dautres travaux raliss en 2002 [70], la TQ inhibe de faon dosedpendante la
production de NO par les macrophages de pritoine de rat stimuls par les LPS.
Les suites de cette exprience montrent que la TQ induit son effet par contrle de la transcription gnique
de lenzyme MAS puisque :
- la TQ diminue de faon dose-dpendante le taux protique de lenzyme dans les macrophages
de rat
- laTQ inhibe laugmentation de lexpression par lARN messager de lenzyme induite par la
prsence de LPS
- la TQ rduit limmuno-ractivit de lenzyme dans les macrophages
Discussion
Linhibition de la production de NO par les macrophages chez lanimal participe laction anti-
inflammatoire.
La TQ et lextrait aqueux ont dmontr possder cette activit. La fraction active de lextrait aqueux nest
pas protique et la TQ est peu prsente dans cet extrait. Donc dautres composants participent
linhibition.
Leffet sexerce par contrle de la transcription de lenzyme MAS et par diminution de son expression.
3.3.3 Autres mcanismes
Les auteurs de ltude sur linhibition de la production dicosanodes [67] voquent galement un
mcanisme daction antioxydant (par prservation du GSH intracellulaire comme cela a t souvent
dmontr et inhibition de la proxydation lipidique) pour cette activit anti-inflammatoire des 3 principes :
TQ, nigellone et huile. Ce qui expliquerait laction faible de la nigellone peu antioxydante par rapport
celle de la TQ.
Bien que les diffrents extraits se soient rvls fortement anti-inflammatoires et de puissance parfois
quivalente lindomtacine, des travaux supplmentaires seraient ncessaires pour lucider le
mcanisme daction.
3.4 Effet antipyrtique
Seulement 2 travaux tudient ces effets et les rsultats sont contradictoires.
Chez le rat, lextrait aqueux de graines de Nigelle par v.o. (500 mg/kg) administr aprs injection
sous cutane (s.c.) dune solution de levures (afin de provoquer une fivre) na pas permis de rduire la
temprature rectale contrairement au tmoin positif reprsent par laspirine. ([9] 2001)
Par contre, les extraits aqueux et mthanolique injects par voie i.p. chez la souris faisaient
significativement chuter la temprature rectale au bout de 30 minutes de, respectivement 3,15 0,35C
et 2,18 0,41C. ( [17] 2003)
Ces rsultats ne permettent pas de conclure mais nous pouvons faire quelques remarques :
Bien souvent lextrait aqueux sest montr beaucoup moins actif que les autres extraits et il
aurait t ncessaire de tester lhuile par exemple sur la fivre provoque chez le rat dans la
1
re
tude.
La fraction protique de la graine de Nigelle module la libration des cytokines, or la fivre
est justement provoque par la libration de cytokines pyrognes qui vont ensuite augmenter
la synthse de prostaglandine E2 ; donc cet effet est envisageable et des travaux
complmentaires seraient ncessaires.

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3.5 Conclusion
Chez lanimal il a t observ une trs bonne activit anti-inflammatoire de la TQ, de lHE,
certainement de lhuile (extrait lther de ptrole), de la poudre et de lextrait alcoolique.
La TQ semble avoir laction la plus importante (quivalente lindomtacine) particulirement par voie i.p.
Ceci tant d certainement linactivation enzymatique de la TQ dans le tractus gastro-intestinal.
Limportance de cet effet anti-inflammatoire peut venir du fait que plusieurs mcanismes daction
sadditionnent :
- Inhibition de la production des icosanodes
- Inhibition de la libration de NO
- Effet antioxydant et inhibition de la proxydation lipidique.
Leffet anti-inflammatoire de lhuile de Nigelle est reflt par celui de lextrait lther de ptrole ; la
poudre et lextrait alcoolique ont une action intressante mais moindre.
Ceci confirme lusage traditionnel de lhuile et de la graine de Nigelle dans les phnomnes
rhumatismaux et les affections inflammatoires.
La Nigelle pourrait par ailleurs avoir un effet antipyrtique mais les tudes manquent ce sujet.

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4 Action sur le systme nerveux central
4.1 Action sdative
4.1.1 Les tests
a) Test du temps de sommeil induit par le sodium de pentobarbital
La molcule est injecte aux rongeurs prtraits par la Nigelle ; le temps de sommeil du groupe
prtrait est compar au groupe trait par le pentobarbital seul.
b) Test du champ ouvert (activit locomotrice)
On mesure la dambulation, le nombre de lchages et le nombre de cabrages des rongeurs
placs dans un espace libre pendant un temps donn et prtraits ou non par la Nigelle.
c) Test du stress la nage
Les rongeurs sont soumis une nage force pendant 15 minutes. Le lendemain le test est
reconduit aprs pr-traitement ou non par la Nigelle. On mesure alors durant 5 minutes les temps
dimmobilit observs.
d) Test du comportement explorateur
Les souris sont places sur une plaque perce de trous. On mesure le nombre de trous explors
en un temps donn aprs administration ou non de Nigelle.
e) Test de lactivit motrice spontane
Il est valu le nombre de fois o la souris, par ses dplacements, en un temps donn,
traversera un faisceau lumineux aprs pr-traitement ou non par la Nigelle.
f) Test de coordination motrice
On mesure le temps de maintien de la souris sur une piste rotative aprs administration ou non
de la Nigelle.
Les extraits tests sont :
Lhuile : tests a) b) c) : dose par v.o. aux rats de 1 ml/kg ; le tmoin positif est la chlorpromazine
(3 mg/kg en injection i.p.). n=10 [116]
Les extraits aqueux et mthanolique : tests d) e) f) : injection i.p. de lquivalent de 1,25 g/kg de
graines sches des souris ; pas de tmoin positif. n=6 [17]
La thymoquinone : tests a) b) f) : injection i.p. des souris de diffrentes doses (20 80 mg/kg) ;
le tmoin positif est le diazpam. n= 10 [99]
4.1.2 Les rsultats
Lhuile
Elle induit chez le rat ([116] 1993) :
- un allongement significatif (P<0,05) du temps de sommeil induit par le pentobarbital de 45,42
minutes contre 33 minutes avec le groupe contrle.
- dans le test du champ ouvert, une baisse de la dambulation de 61,6% avec lhuile contre 37%
avec la chlorpromazine (pour les 2 : P<0,05 par rapport au groupe contrle).
- dans le test du stress la nage : un temps dimmobilit de 216 secondes (P<0,05) pour le groupe
trait par lhuile contre 198 et 206 secondes (n.s.) pour le groupe contrle et tmoin positif
(chlorpromazine) respectivement
Les extraits mthanolique et aqueux ([17] 2003)
Ils entranent chez la souris une baisse trs importante du comportement explorateur, de lactivit
motrice spontane et de la coordination motrice par rapport au groupe non trait.
Il ny a pas de diffrence significative entre les 2 extraits sauf dans le test de la coordination motrice
o lextrait mthanolique est 2 fois plus actif que l extrait aqueux.
La thymoquinone ([99] 2004)
- A la dose de 80 mg/kg, elle naugmente pas significativement le temps de sommeil induit par le
pentobarbital ; alors que le diazpam laugmente de 18,5 minutes par rapport au groupe contrle
(P<0,001).
- Aux 3 doses testes (20, 40 et 80 mg/kg) la TQ rduit lactivit motrice totale de faon trs
significative (P<0,001) et suprieure au diazpam (3 mg/kg) (P<0,01).
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- La TQ la dose de 80 mg/kg cre une incoordination motrice lgrement infrieure celle
induite par le diazpam avec un temps de maintien sur la piste de 26,7 et 5,2 secondes
respectivement (P<0,001) contre 300 secondes pour le groupe contrle.
- Donc la TQ a un effet sdatif trs manifeste dans les 2 derniers tests.
4.1.3 Discussion
Lhuile, la TQ, les extraits aqueux et mthanolique ont une action sdative sur le systme nerveux
central.
Aux doses testes, leffet de lhuile est quivalent voir suprieur celui de la chlorpromazine et leffet de
la TQ celui du diazpam.
Nous ne pouvons comparer leffet sdatif des extraits entre eux ; nous pouvons seulement voquer
laction suprieure de lextrait mthanolique par rapport lextrait aqueux. Ceci pourrait tre d la
prsence de thymoquinone gnralement extraite par le mthanol.
Il semble cependant que la TQ soit la plus active et que lhuile et lextrait mthanolique le soit un peu
moins.
Prcisons que le test du comportement explorateur mesure galement le degr danxit. La Nigelle
aurait donc aussi un effet anxiolytique. [17]
Le mcanisme daction sera envisag plus loin.
4.2 Action antalgique
4.2.1 Les tests
Diffrents tests sont ncessaires pour mettre en vidence cette activit chez les rongeurs :
Douleurs induites par agent chimique :
- Test de la contorsion : une injection i.p. dacide actique cre une contraction des muscles
abdominaux avec extension des pattes, on compte le nombre de contractions. Ce test value un
effet analgsique priphrique sur la douleur viscrale. [92]
- Test au formol : il est inject dans la patte arrire et on dtermine le temps de lchage de la
patte pendant 2 priodes de 5 minutes (phase prcoce et phase tardive, la 1
re
implique un
mcanisme central, la 2
me
un mcanisme la fois central et priphrique). [1]
Douleurs induites par agent thermique
- Test de la plaque chaude : on dtermine le temps de latence entre le dpt de lanimal sur une
plaque mtallique maintenue environ 55C et le mo ment o il ragit la douleur (lchage ou
sursaut). [1]
- Test de la chaleur sur la queue : un faisceau lumineux est envoy sur la portion distale de la
queue de souris, on mesure le temps de latence jusquau retrait de la queue. [92]
Douleurs induites par agent mcanique
- Test du pincement de la queue : ceci se fait par un appareil, on mesure le temps de latence
jusquau moment o lanimal ragit par un cri ou en mordant lappareil. [1]
- Test de la pression de la queue : elle est place dans un analgsimtre, on mesure le temps
de latence jusqu son retrait. [17]
Les substances sont testes en comparaison avec un tmoin positif (morphine, indomtacine,
chlorpromazine). La naloxone (antagoniste morphinique des rcepteurs supra spinaux aux opiodes) est
parfois ajoute la substance teste. Si la naloxone inhibe leffet antalgique de la substance, cest quelle
exerce son activit par stimulation des rcepteurs prcits ; donc par un mcanisme central.
4.2.2 Les rsultats
Lhuile essentielle : action dmontre par une tude ralise sur la souris en 2004 en Iran [92] :
- Le test de la contorsion :
LHE par v.o. (800 l/kg) cre une inhibition des contorsions de 70% contre 81% pour
lindomtacine (10 mg/kg i.p.) par rapport au groupe contrle avec P<0,001.
- Le test au formol :
Diffrentes doses par v.o. et i.p. testes ont un effet analgsique dose-dpendant qui est
suprieur dans la phase tardive et par voie i.p. o laction est quivalente celle de la morphine
(10 mg/kg i.p.) avec P<0,001.
Cette activit nest pas antagonise par lajout de naloxone.
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- Le test de la chaleur sur la queue :
LHE augmente significativement le temps de raction par rapport au groupe contrle (P<0,01)
mais son effet antalgique est infrieur celui de la morphine bien quil dure plus longtemps.
LHE a une action analgsique centrale certainement couple un mcanisme priphrique.
Lhuile
- Dans une autre tude [116] ralise en 1993 en Inde chez les rongeurs, lhuile ainsi que la
morphine inhibent significativement (P<0,05) la douleur dans le test de la chaleur sur la queue,
de la plaque chaude et de la contorsion, mais lhuile est 2 3 fois moins puissante que la
morphine.
- Dans une tude ralise sur la souris en 2000 lhuile par voie orale est active de faon dose-
dpendante dans le test au formol et ses effets sont plus marqus dans la phase prcoce et enfin
laddition de naloxone inhibe ces effets. Cette tude na pas t effectue en comparaison avec
un tmoin positif. [1]
Leffet analgsique central est clairement dmontr avec une efficacit nanmoins infrieure la
morphine aux doses testes.
Les extraits aqueux et alcooliques
- Ces extraits, dans le test de la plaque chaude et de la pression de la queue chez la souris ont
montr un effet analgsique central. ([17] 2003)
Lextrait alcoolique (lquivalent de 1,25 g de graine sche /kg en i.p.) est le plus puissant et
dactivit suprieure lacide salicylique (100 mg/kg, i.p.).
La thymoquinone
- Dans le test au formol chez la souris [1] ladministration de TQ diffrents dosages et par
diffrentes voies dadministration (pas de tmoin positif) entrane une inhibition de la rponse la
douleur de faon dose-dpendante avec un effet bien plus marqu en injection i.p. et en phase
tardive (seulement 50% de la dose par v.o. est ncessaire pour obtenir le mme effet par voie
i.p.).
La naloxone attnue significativement leffet de la TQ dans la phase prcoce.
La TQ a donc un effet antalgique central.
4.2.3 Mcanisme daction
Les activits antalgiques de lhuile et de la TQ ont pu tre antagonises par la naloxone ce qui
signifie que la Nigelle exerce son effet via la stimulation des rcepteurs aux opiodes supra spinaux.
Une tude [1] montre quels sous rcepteurs sont responsables de leffet antalgique de la TQ dans le test
au formol, lors de son administration aux souris (4 mg/kg en i.p.) en prsence de diffrents antagonistes
de ces sous rcepteurs morphiniques :
-
La naloxonazine qui bloque le sous rcepteur aux opiodes
1
- La nor-binaltorphimine qui bloque le sous rcepteur aux opiodes
- Le naltrindole qui bloque le sous rcepteur aux opiodes
Leffet antalgique de la TQ est significativement renvers par les antagonistes des rcepteurs
1
et
dans la phase prcoce, pas daction dans la phase tardive. Le naltrindole na aucun effet.
Le mcanisme central par lequel la Nigelle exerce son effet est la stimulation des sous rcepteurs aux
opiodes
1
et , et proviendrait principalement de la prsence de TQ dans les extraits.
4.2.4 Discussion
La proprit antalgique a t montre par diffrents tests pour lhuile, lHE, lextrait aqueux et
mthanolique et la TQ.
Seul les effets de lHE et de lhuile ont pu tre compars celui dun tmoin positif, la morphine.
LHE sest rvle tre aussi puissante la dose de 10 mg/kg alors que lhuile tait 2 3 fois moins
active que la morphine aux doses testes.
Leffet antalgique sexerce principalement par un mcanisme central en stimulant les sous rcepteurs aux
opiodes
1
et ; mais les actions antalgiques de lHE et de la TQ beaucoup plus marques dans la
phase tardive du test au formol nous indiquent lexistence de mcanismes priphriques.

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Leffet antalgique est dans certain cas trs li leffet anti-inflammatoire : il a t montr que la rponse
douloureuse aux tests de la contorsion et au formol pouvait tre efficacement inhibe soit par des anti-
inflammatoires soit par des drogues narcotiques. [1] Linhibition de la production dicosanodes vue plus
haut fait certainement partie de ces mcanismes priphriques.
4.3 Action anticonvulsivante
4.3.1 Les tests
Cette tude a t ralise en 2004 en Iran sur des souris [99].
Effet de la thymoquinone (en i.p.) sur la crise dpilepsie provoque soit par le pentylnettrazole
(PTZ : modle exprimental pour reproduire la crise du petit mal pileptique) soit par lectrochocs
(modle reproduisant le grand mal pileptique).
On value le temps de latence entre les crises, la dure de la crise, le pourcentage de protection
contre la crise et contre la mortalit.
Le tmoin positif est une benzodiazpine (BDZ), le diazpam.
Rcepteurs impliqus
2 molcules spcifiques sont administres pour voir si leur effet antagonise celui de la TQ sur la crise
pileptique :
- Le flumaznil : antagoniste spcifique du site des BDZ des rcepteurs GABA. (Il a t montr
que la PTZ diminuait le tonus GABAergique par inhibition du site des BDZ des rcepteurs GABA.
- La naloxone : antagoniste des rcepteurs aux opiodes.
4.3.2 Les rsultats
Effets de la thymoquinone
Sur la crise induite par lectrochocs : la TQ na aucun effet sur le temps de latence et la dure
des crises par rapport au groupe contrle ; par contre elle exerce une protection totale sur la
mortalit toutes les doses testes ; tout comme le diazpam.
Sur la crise induite par PTZ : la TQ exerce une action anti-convulsivante de faon dose-
dpendante maximale lors de son administration 60 minutes avant la PTZ avec :
- une prolongation efficace du temps de latence entre les crises la dose de 80 mg/kg par
rapport au groupe contrle (P<0,01)
- une rduction de la dure des crises de moiti (P<0,001) et une protection 100% de la
mortalit la dose de 80 mg/kg (P<0,001).
- mais leffet du diazpam reste suprieur sauf en ce qui concerne la mortalit. (tableau 25)
Tableau 25 : Effet de la thymoquinone (en i.p. 60 minutes avant injection du pentylnettrazole) sur la
crise dpilepsie induite par le pentylnettrazole chez la souris. [99]
traitement latence dure protection c/ protection c/
(mg/kg) (secondes) (secondes) la crise (%) la mortalit (%)
contrle 44,4 2,1 12,2 0,6 0 0
diazpam 1 415,6 10,5*** 5,1 0,4*** 42,8 100
diazpam 1,5 587,1 1,4*** 0*** 85,7 100
diazpam 3 600 0*** 0*** 100 100
TQ 20 60,6 2,8 0 25
TQ 40 265,7 53,2* 5,8 0,5*** 14,3 71,4
TQ 80 341,1 69,1** 6,5 0,6*** 14,3 100
*, **, ***: significativement diffrent du groupe contrle avec respectivement P<0,05 ; P<0,01 ; P<0,001.
Etude des rcepteurs
Le flumaznil :
Il antagonise significativement laction du diazpam.
Seul leffet de la TQ sur le temps de latence est antagonis (pas deffet sur la dure de la crise).
La naloxone :
Leffet de la TQ sur le temps de latence et la dure de la crise est significativement antagonis.
La TQ agit en augmentant le tonus GABAergique via la stimulation des rcepteurs aux opiodes.
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4.3.3 Discussion
Dans le modle du grand mal pileptique la TQ nagit pas sur la dure de la crise mais elle protge
contre la mortalit.
La TQ possde un effet anti-convulsivant chez la souris dans le modle reproduisant le petit mal
pileptique o elle permet, la dose i.p. de 80 mg/kg :
- de rduire la dure de la crise
- despacer les crises
- de protger totalement contre la mortalit
La TQ affecte probablement le complexe-rcepteur GABA
A
-benzodiazpine en inhibant le systme
GABAergique via un antagonisme comptitif du site des benzodiazpines des rcepteurs GABA ;
ceci via la stimulation des rcepteurs aux opiodes.
Chez la souris souffrant du petit-mal pileptique, la TQ prsente donc un rel intrt.
4.4 Conclusion
Les diffrents principes de la graine de Nigelle (TQ, huile, HE, extraits aqueux et alcooliques)
sont sdatifs et anxiolytiques chez lanimal par action sur le systme nerveux central. Cet effet peut
provenir de la stimulation des sous rcepteurs aux opiodes .
Mais cette sdation provoque par la Nigelle chez le rongeur serait un inconvnient majeur sil tait
retrouv lors dessais cliniques chez lhomme et conduirait respecter certaines prcautions demplois.
Une action antalgique importante a t observe par action sur le systme nerveux central
(stimulation des sous rcepteurs aux opiodes
1
et ) ainsi que par effet priphrique aprs
administration de TQ et dHE mais aussi dhuile et dextraits aqueux et alcoolique.
Les effets anti-inflammatoires de la Nigelle vus prcdemment contribuent galement rduire la douleur
(effets priphriques).
Pour ces proprits la TQ semble tre le principal agent responsable de leffet sur le systme
nerveux central do une action sdative et antalgique suprieure.
Lhuile possde ces proprits mais est moins active.
La TQ a de plus montr son action anti-convulsivante intressante dans le modle du petit mal
pileptique chez la souris.

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5 Actions respiratoires
La Nigelle a t traditionnellement utilise pour traiter lasthme et les allergies respiratoires.
5.1 Action bronchodilatatrice
Les travaux sur le muscle de la trache permettent de mesurer laction bronchodilatatrice de la
Nigelle. Cette proprit est intressante dans le cas de lasthme o le bronchospasme est lvnement
premier.
La recherche du mcanisme daction est troitement lie aux travaux sur la trache car la
bronchodilatation est un phnomne qui dcoule de diffrents effets biologiques ; parmi ceux-ci [44] :
- Un antagonisme calcique
- Un blocage des rcepteurs histaminiques H
1

- Une action anticholinergique
- Louverture des canaux potassiques
- La stimulation des rcepteurs -adrnergiques (entrane la dilatation des bronches)
- Une activit mthylxanthine (par activation des phosphodiestrases et maintien du taux dAPM
cyclique : bronchodilatation)
- Linhibition de la libration dicosanodes
- Etc.
5.1.1 Les tests
On observe les effets de la Nigelle sur la contraction des muscles isols de la trache de cobayes.
Cette contraction peut tre induite par diffrents agents.
Le mcanisme daction est tudi paralllement ; c'est--dire soit :
lagent utilis pour contracter le muscle donne une indication du mcanisme par lequel la Nigelle
exerce son effet relaxant : histamine, actylcholine, srotonine, solution de chlorure de calcium
(blocage des canaux calciques).
par lobservation de leffet antagoniste de laction relaxante de la Nigelle par ajout dune molcule
[16] :
- effet anticholinergique : par ajout datropine
- effet -adrnergique : par ajout de propanolol
- effet anti-histaminique H
1
: par ajout de chlorphniramine
- activit mthylxanthine : par ajout de thophylline
- inhibition de la libration dicosanodes : par ajout de quinacrine (inhibiteur de la phospholipase
A2), indomtacine (inhibiteur de la cyclo-oxygnase) et acide nor-dihydroguiartique (inhibiteur
de la lipoxygnase)
- etc.
5.1.2 Les rsultats
Extrait aqueux
Effet inhibiteur calcique : il montre une inhibition dose-dpendante de la contraction de la
trache induite par des concentrations croissantes de chlorure de calcium.
Leffet est comparable celui du diltiazem (inhibiteur calcique). ([46] 2002)
Effet par ouverture des canaux potassiques : ([47] 2004)
Cette tude est contradictoire avec la prcdente.
Lextrait aqueux ainsi que le diltiazem inhibent de faon dose-dpendante la contraction de la
trache induite par la mtacholine en prsence dune solution de Krebs ordinaire. Contrairement
aux travaux vus plus haut, la mme exprience ralise en labsence de Ca
2+
dans le milieu
dincubation ne change pas les rsultats.
De plus, les extraits nont aucun effet sur la contraction induite par une solution riche en K
+
alors
que seul le diltiazem est inhibiteur de faon dose-dpendante.
Dans cette tude, nous ne pouvons donc envisager un antagonisme calcique et les auteurs
pensent que leffet relaxant des extraits se fait par ouverture des canaux potassiques.
Ces diffrences pourraient provenir des variations de composition des graines suivant leur
provenance gographique.
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Effet anticholinergique : ladjonction datropine antagonise laction bronchodilatatrice des
extraits sur la contraction induite par la mtacholine.
Par contre ladjonction de propanolol ou de chlorphniramine ne modifie pas lactivit relaxante
de lextrait. ([44] 1997)
En conclusion, lextrait aqueux exerce son action bronchodilatatrice par effet inhibiteur calcique ou
par ouverture des canaux potassiques et par effet anticholinergique. Il na pas deffet
antihistaminique ou -adrnergique.
Extrait aqueux/mthanolique et extrait lther de ptrole (huile)
Effet inhibiteur calcique :
Lextrait lther de ptrole (EEP) et lextrait aqueux/mthanolique (EAM) crent une relaxation
dose-dpendante du muscle de la trache pr-contracte par une solution riche en K
+
.
Leffet de lEEP qui peut reflter lactivit de lhuile de Nigelle, est 10 fois suprieur celui de
lEAM et est comparable celui du vrapamil (inhibiteur calcique). ([89] 2001)
Ces rsultats indiquent que les extraits aqueux/mthanoliques et lther de ptrole relaxent la
trache par inhibition calcique et que lactivit et concentre dans la fraction organique.
Thymoquinone
Elle induit une relaxation dose-dpendante du muscle de la trache pr-contracte par le carbacol.
Effet anticholinergique : la TQ abolit partiellement la contraction induite par lactylcholine.
Antagonisme non spcifique des rcepteurs H
1
: la TQ abolit la contraction induite par
lhistamine
Antagonisme non spcifique des rcepteurs srotoninergiques : la TQ abolit la contraction
induite par la srotonine.
Inhibition de la libration dicosanodes : leffet de la TQ est potentialis par le pr-traitement
du muscle par : la quinacrine, lacide nor-dihydroguiartique.
Dans les mme conditions, la pr-incubation avec le propanolol, lindomtacine ou la thophylline
nont pas deffet sur laction relaxante de la TQ.
Leffet inhibiteur calcique na pas t tudi.
Par consquent, la TQ semble agir par antagonisme non spcifique des rcepteurs lhistamine H
1

et des rcepteurs la srotonine, par action anticholinergique et certainement partiellement par
inhibition de la production des produits de la lipoxygnase. ([16] 2001)
Huile essentielle
Effet inhibiteur calcique
LHE a pu inhiber :
- la contraction induite par lhistamine chez le lapin et par lactylcholine chez le cobaye (elle
est inactive en cas dabsence dions Ca
2+
dans le milieu)
- celle induite par une solution dincubation riche en K
+
. LHE parat exercer son action par
antagonisme calcique. ([21] 1992)
Effet anticholinergique : cet effet a t dmontr pour l-pinne qui est un composant
important de lHE de Nigelle mais non spcifique. [44]
Il a donc t montr leffet inhibiteur calcique et anticholinergique de lHE mais tant donn que la
TQ est un des composants principaux de lHE de Nigelle, nous pouvons supposer que lHE pourra
relaxer le muscle trachal par le mme mcanisme que la TQ savoir : par antagonisme non
spcifique des rcepteurs H
1
et srotoninergiques.
5.1.3 Discussion
Les graines de Nigelle renferment certainement plusieurs composants activit relaxante sur le
muscle de la trache, avec des mcanismes daction diffrents. Ceci expliquerait les variations observes
lors des divers travaux : non seulement chaque principe (aqueux, huile essentielle) a une composition
qui lui est propre mais il faut y ajouter lincidence de la provenance gographique des graines sur la
composition chimique dun mme extrait. Des travaux complmentaires seraient ncessaires.
Nanmoins cet effet sur la trache serait en faveur de lutilisation de lhuile de Nigelle dans les
problmes asthmatiques.
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5.2 Action sur la frquence respiratoire et la pression intra-trachale
([76] 1993)
5.2.1 Les tests
Effet de lhuile essentielle et de la thymoquinone :
Diffrentes doses dHE et de TQ sont injectes en i.v. des cobayes anesthsis lurthane pour
voir leur action sur la frquence respiratoire (FR) et la pression intra trachale (PIT).
Mcanisme daction
Diffrentes molcules ont t administres pour tudier leurs effets sur les modifications
respiratoires provoques par la Nigelle : mpyramine (antihistaminique H
1
), atropine
(anticholinergique), rserpine (dpltion des stocks neuronaux et cellulaires en monoamines :
histamine, srotonine et noradrnaline), indomtacine (inhibiteur de la cyclo-oxygnase),
hydrocortisone (inhibiteur de la phospholipase A2) et dithyl-carbamazine (inhibiteur de la synthse
de prostaglandine et leucotrine)
5.2.2 Les rsultats
Lhuile essentielle
Elle augmente de faon dose-dpendante:
- la frquence respiratoire FR (pour des doses allant de 4 16 l/kg) (voir tableau 26)
- la pression intra trachale PIT (doses de 4 32 l/kg) (voir tableau 27)
La FR atteint un maximum 30 secondes aprs injection de lHE et le retour la normale se fait 3
5 minutes plus tard.
Mais il est observ que laugmentation de la FR est prcde dune bronchoconstriction
histamine-like.
La mpyramine, latropine et la rserpine antagonisent significativement les modifications
respiratoires induites par lHE et prviennent la bronchoconstriction.
Lindomtacine, lhydrocortisone et la dithyl-carbamazine nont eu aucun effet.
LHE aux doses de 1 8 g/ml nentrane pas de contraction spontane de la trache isole.
Tableau 26 : Effet de lhuile essentielle sur la frquence respiratoire de cobayes. [76]
HE % d'lvation de la frquence respiratoire
en minute(s) aprs administration
L/kg 0,5 1 3
4 85,20 17,50 85,70 27,50 18,10 5,70
8 163,20 19,60** 148,90 21,30 39,10 19,10
16 240,45 23,20** 163,60 23,40 96,50 27,20*
*P<0.05 et ** : P<0.01 ; n = 3 24

Tableau 27 : Effet de lhuile essentielle sur la pression intra-trachale de cobayes. [76]
HE
en lvation de la dure de
L/kg PIT en mmHg l'effet en sec.
4 0,4 0,2 6,5 3,6
8 1,8 0,2* 30,4 4,8*
16 2,9 0,2* 57,4 6,9*
32 3,6 0,8* 51,0 2,8*
*P<0,05 et ** : P<0,01 ; n = 4 24
La thymoquinone ne modifie par la FR par contre elle induit une bronchoconstriction puissante et
une augmentation de la PIT, toutes deux de faon dose-dpendante (aux doses de 1,6 6,4 mg/kg
i.v.).

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5.2.3 Discussion
LHE augmente la FR et la PIT chez lanimal.
Les auteurs concluent que lHE agirait ainsi sur la respiration par libration dhistamine et activation des
rcepteurs H
1
et des rcepteurs muscariniques M3 dans le systme nerveux et dans les structures
priphriques impliques dans la rgulation de la respiration. Leffet ne ferait pas intervenir la libration
dicosanodes ou de PAF (facteur dactivation plaquettaire).
Llvation de la PIT par lHE serait due dautres composs que la TQ comme par exemple les
monoterpnes.
Et la bronchoconstriction provoque par lHE serait due principalement la prsence de TQ.
Cette tude est trs contradictoire plusieurs niveaux :
- la bronchoconstriction est en opposition avec un effet anti-asthmatique et avec la bronchodilatation
observe par action de la TQ sur le muscle isol de la trache de cobaye. [16]
- nous allons voir ci-dessous que la Nigelle a montr dans deux tudes son effet antihistaminique H
1

Cette bronchoconstriction provoque par la TQ peut entraner de gros problmes si la TQ est utilise
directement en essai clinique chez lhomme ; il serait important dapprofondir cette observation.
5.3 Action sur la libration dhistamine
La Nigelle est traditionnellement utilise dans les problmes allergiques.
En 1993 [53] Chakravarty avait tudi in vitro, leffet de la nigellone sur la libration dhistamine.
5.3.1 Les tests
Objectifs :
Lauteur value laction de la nigellone sur la libration dhistamine par les mastocytes de pritoine de
rat stimuls par diffrents agents : antigne, compos 48/80 et ionophore calcique A23187.
Mcanisme daction :
Lauteur envisage 2 mcanismes :
- Linhibition de la protine kinase C : la stimulation de la protine kinase C par lester de phorbol
ou par le diacylglycrol cre une libration de lhistamine par les mastocytes. Lauteur observe un
ventuel effet inhibiteur de la nigellone sur cette libration.
- Leffet de la nigellone sur le transport calcique.
5.3.2 Rsultats
La libration dhistamine est inhibe par la nigellone dans les 3 cas avec les CI
50
suivantes :
- 11 g/ml avec lantigne comme stimulant
- 15 g/ml avec le compos 48/80
- entre 15 et 26 g/ml avec le ionophore calcique
La nigellone est donc active faible concentration et a une action moindre avec le ionophore
calcique.
Inhibition de la protine kinase C par la nigellone : la stimulation de la protine kinase C par
lester de phorbol ou par le diacylglycrol : la nigellone (10 g/ml) inhibe la libration dhistamine de
64% et de 39% avec chacun des agents stimulants respectivement.
Effet sur le transport calcique : la nigellone inhibe lassimilation intracellulaire des ions Ca
2+
de 20
40% (aux doses de 25 100 g/ml) et stimule linflux de 9 27% pour des doses allant de 50 100
g/ml. (P<0,05 0,02)
5.3.3 Discussion
La nigellone inhibe in vitro la libration dhistamine par les mastocytes de rats en inhibant la protine
kinase C et en facilitant le transport des ions calciques.
Dautres travaux effectus en 2000 [45] par Boskabady montrent leffet inhibiteur des extraits aqueux sur
les rcepteurs histaminiques H
1
de trache isole de cobaye.
Au vu de ces rsultats, la nigellone semble effectivement avoir une action antihistaminique H
1
, mais sa
teneur est mal connue et si elle tait prsente en concentration suffisante elle pourrait expliquer lintrt
de la prise de graines ou dhuile de Nigelle dans les problmes allergiques.
Cet effet antihistaminique H
1
est gnralement reconnu par les chercheurs alors que ltude vue
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prcdemment est en contradiction. Il serait ncessaire dvaluer plus prcisment la teneur en
nigellone. [76]
5.4 Action antitussive
5.4.1 Protocole
Lors de cette tude ralise en 2004 [43], les auteurs ont observ leffet darosols base dextrait
aqueux de graines de Nigelle (3,3% et 5% en poids/poids), de macrat aqueux (mmes concentrations)
et dune dcoction (5%), sur la toux produite chez des cobayes par inhalation dun arosol lacide
citrique 10 minutes aprs celle des produits tests.
Leffet a t mesur en comptant le nombre daccs de toux pendant 5 minutes, ceci en comparaison
dun tmoin positif : la codine (0,03 g/ml).
5.4.2 Rsultats
Toutes les concentrations testes diminuent fortement le nombre daccs de toux avec un effet
antitussif de lextrait aqueux et de la macration comparable celui de la codine aux doses suprieures
utilises.
Le mcanisme daction nest pas tudi ici mais leffet antitussif pourrait tre li :
- aux proprits bronchodilatatrices
- leffet sur les rcepteurs aux opiodes vu prcedemment. Cette activit, retrouve avec lhuile et
la TQ semblait provenait de la TQ et il nest donc pas certain que nous la retrouvions avec lextrait
aqueux.

5.5 Conclusion
Il a t montr leffet relaxant sur le muscle trachal du cobaye par les diffrents principes de la
Nigelle (extraits aqueux et alcoolique, huile, HE et TQ).
Une tude [76] montre un effet bronchoconstricteur passager de lHE sur le muscle bronchique du
cobaye d certainement la prsence de TQ, avec augmentation de la frquence respiratoire et de la
pression intra trachale. Les auteurs avaient conclu par un effet stimulateur des rcepteurs histaminiques
H
1
et muscariniques M3.
Ceci est en dsaccord avec le fait que :
- la nigellone inhibe la libration dhistamine par les mastocytes [53]
- lextrait aqueux est relaxant pour la trache isole de cobaye par effet antihistaminique H
1
. [45]
- chez le cobaye ou le lapin, la TQ, lHE, les extraits aqueux, mthanolique et lther de ptrole
montrent tous un effet relaxant du muscle isol de la trache.
Lhuile a un effet bronchodilatateur alors que la TQ est responsable dune bronchoconstriction. Il faut
rappeler que la TQ est prsente hauteur de 0,15% dans lhuile et moins de 0,1% dans la graine. Donc
leffet bronchoconstricteur de la TQ (si il y a) ne pourra se manifester visiblement. Ceci ncessite des
travaux complmentaires.
Si leffet relaxant bronchique tait montr, ceci confirmerait lintrt de la prise de graines ou dhuile
de Nigelle dans lasthme car elle agirait sur les diffrents phnomnes de la pathologie, savoir :
- sur le bronchospasme qui est lvnement premier
- sur la phase inflammatoire qui suit le bronchospasme
- sur lamlioration de la frquence respiratoire
- sur la composante allergique par effet antihistaminique.
Il est ncessaire dapprofondir les tudes car pour lhuile, seuls ses effets bronchodilatateurs ont t
tudis.

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6 Actions sur le systme digestif
La Nigelle est traditionnellement utilise pour soigner les ulcres gastriques, les coliques, les
spasmes abdominaux et les problmes de digestion en gnral.
6.1 Muqueuse gastrique
6.1.1 Les tests
Lulcration est provoque exprimentalement chez le rat de diffrentes manires :
- Par lacide actylsalicylique (AAS) : il est administr par v.o. (200 mg/kg). ([6] 1996)
Produit test : lextrait aqueux par v.o. : 2 g/kg/jour, 3 heures avant et 3 heures aprs lAAS
pendant 3 jours.
- Par lthanol 50% : dose unique par v.o. de 1 ml. ([64] 2000)
Produit test : lhuile de Nigelle prventivement par v.o. (0,88 g/kg/jour) 2 semaines avant.
- Par ischmie/reperfusion (I/R) : en plus de lulcre ce test cre une forte production de radicaux
libres et permet dtudier la contribution de leffet antioxydant sur la gastroprotection. ([63] 2003)
Produits tests : la TQ et lhuile par v.o., diffrentes doses, 30 minutes avant I/R.
Aucun tmoin positif n'a t utilis.

Ensuite la muqueuse gastrique est observe et le suc gastrique rcolt et analys.
Sont valus :
- Lincidence de lulcre et lindex dulcre
- Lactivit peptique, la quantit de suc gastrique
- La production dacide, lactivit de la mucine,
- La teneur en histamine dans la muqueuse gastrique (facteur agressif)
- Concernant le stress oxydatif : valuation de la proxydation lipidique et du GSH dans la
muqueuse gastrique ; activit de la SOD et de la lactate dshydrognase.
6.1.2 Les rsultats
Extrait aqueux [6]
En absence d'ulcre, l'extrait augmente dj significativement l'activit peptique.
Sur lulcre provoqu par AAS :
- il permet de rduire de 36% (n.s.) l'index d'ulcration par rapport au groupe contrle non
trait.
- il rduit l'activit peptique et la scrtion acide (fortement levs lors d'ulcre) mais n'a pas
d'effet sur l'activit de la mucine par rapport au groupe non trait.
Nous voyons ici que lextrait aqueux nest que lgrement protecteur et quil ne contient
certainement pas les substances actives lui permettant dtre gastroprotecteur.
Thymoquinone [63]
Leffet de ladministration par voie orale de diffrentes doses de TQ, 30 minutes avant lI/R est
observ au bout dune heure et de 24 heures. Il est rsum dans le tableau 28.
La TQ (5 et 20 mg/kg) amliore lindex dulcre de 85,2 90,9% par rapport au groupe non trait
(P<0,05).
Aux doses suprieures : (50 et 100mg/kg), leffet protecteur est infrieur avec une lvation du
taux de mortalit au bout de 24 heures.
La TQ limite la proxydation lipidique de la muqueuse gastrique et la dpltion en GSH et SOD
ds la 1
re
heure aux doses de 5 ; 20 ; 50 et 100 mg/kg, et aux doses de 5 et 20 mg/kg au bout
de 24 heures. (P<0,05).
Au bout de 24 heures la TQ restaure le taux initial de proxydation lipidique.
La TQ amliore donc lulcre provoqu par I/R chez le rat, en partie grce son action
antioxydante. Mais dautres mcanismes daction peuvent aussi tre impliqus.
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Tableau 28 : Effet de lhuile de Nigelle et de la thymoquinone sur la lsion de la muqueuse gastrique 1
et 24 heures aprs ischmie/reperfusion chez le rat. [63]
traitement
INDEX D'ULCERE
1 heure aprs I/R 24 heures aprs I/R
contrle 0 0
I/R contrle 28,00 4,56* 28,14 2,67*
huile 2,5 ml/kg 4,60 0,37** 83,57% 3,00 0,43** 89,34%
huile 5 ml/kg 2,00 0,25** 92,80% 1,83 0,31** 93,50%
TQ 5 mg/kg 3,00 0,83** 89,28% 3,29 0,36** 88,31%
TQ 20 mg/kg 4,14 0,34** 85,20% 2,56 0,24** 90,90%
TQ 50 mg/kg 6,00 0,92* 78,57% nd
TQ 100 mg/kg 14,43 0,95* 48,60% nd
nd : valeurs non donnes ; n = 6 8
* : significativement diffrent du groupe contrle, P<0,05
** : significativement diffrent du groupe I/R, P<0,05
Huile
Sur l'ulcre provoqu par I/R, l'huile amliore les paramtres du stress oxydatif (GSH et SOD) de
faon significative au bout de 24 heures seulement. (P<0,05) (voir tableau 28)
Aux 2 doses testes, elle rduit l'index d'ulcre de 83,57 93,5% (P<0,05) [63]
L'huile par son action antioxydante diminue les lsions ulcreuses, mais nous allons voir que
d'autres mcanismes interviennent.
Dans lulcre provoqu par lthanol, le pr-traitement par lhuile de Nigelle rduit de moiti
lindex dulcre tout en augmentant le taux de mucine et dacide libre et en rduisant la teneur en
histamine et en GSH tissulaire. Lactivit peptique nest pas modifie.
Nous remarquons que lhuile administre seule rduit dj significativement la teneur en
histamine et augmente celle de GSH. [64]
Lhuile de Nigelle exerce une action gastroprotectrice de diffrentes manires :
- Action sur lhistamine : celle-ci est un facteur agressif pour les muqueuses, reconnu pour
participer la gnration de lulcre
- Action sur la mucine : la Nigelle lve la teneur de ce composant principal du mucus
protecteur de la muqueuse gastrique
- Augmentation du GSH : il a t montr que sa dpltion entranait des lsions de la
muqueuse gastrique
- Rduction du stress oxydatif.
6.1.3 Discussion
Lextrait aqueux est peu actif en tant que gastroprotecteur ; mais rappelons que les graines ne sont
pratiquement pas utilises sous cette forme dans la mdecine traditionnelle et la rputation de la plante
dans les problmes dulcre repose certainement sur lingestion de lhuile ou des graines.
En effet, lhuile et la TQ ont montr chez le rat une proprit anti-ulcreuse intressante par diffrents
mcanismes :
- Action antioxydante
- Augmentation de la scrtion de mucine protectrice
- Baisse de la teneur en histamine tissulaire
La quantit de TQ contenue dans 5 ml dhuile est environ de 6,9 mg ce qui apporte 93,5%
damlioration au bout de 24h alors que la TQ la dose de 5 mg/kg entrane une amlioration de
88,31%. Lactivit antiulcreuse de lhuile correspond peu prs celle attendue par sa teneur en TQ.
Mais dautres de ses constituants pourraient aussi participer cette action. Les acides gras
polyinsaturs, par leur interaction avec le mtabolisme de lacide arachidonique peuvent conduire la
biosynthse de prostaglandines cytoprotectrices. [63]

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6.2 Colite
6.2.1 Protocole ([122] 2003)
Induction de la colite chez le rat : par injection intra-colonique dune solution dacide actique 3%.
Produit test : la TQ dissoute dans le propylne glycol par v.o. : 5 et 10 mg/kg/jour pendant 3 jours
Tmoin positif : la sulfasalazine (500 mg/kg), un anti-inflammatoire.
Lvaluation se fait par :
- lhistopathologie : score lsionnel et pourcentage de protection
- la mesure de lactivit de la myloproxydase (index de linflammation de certains tissus) et de la
teneur en GSH tissulaire
Le mcanisme daction est tudi par identification des mdiateurs amenant linflammation aigu
du colon : mesure de la teneur en PAF et histamine dans la biopsie rectale.
6.2.2 Rsultats
Lacide actique induit chez le rat : ncrose, dme des muqueuses et infiltrations cellulaires ainsi
quune dpltion en GSH, et une augmentation de la teneur en PAF et en histamine.
Alors que la sulfasalazine et la TQ la dose de 5 mg/kg/jour ne rduisent que partiellement les
lsions ; la TQ la dose de 10 mg/kg/jour entrane une correction totale des phnomnes
histopathologiques induits par lacide actique.
Ceci est confirm par la mesure de lactivit de la myloproxydase qui est significativement
abaisse mais non restaure par la TQ au dosage suprieur (P<0,05).
Lidentification des mdiateurs montre lefficacit de la TQ rduire les lsions tissulaires via
linhibition de la libration dhistamine et de PAF ainsi que la prservation du taux de GSH
intracellulaire ; dans les 3 cas son effet est significativement suprieur celui de la sulfasalazine
(P<0,05).
Tableau 29 : Effet de la thymoquinone en pr-traitement par voie orale sur la colite induite par lacide
actique chez le rat. [122]
pr-traitement et dose inducteur score lsionnel % protection
sol.saline 5 ml/kg sol.saline 0
sol.saline 5 ml/kg ac.actique 4,00 0,00
propylne glycol 5 ml/kg sol.saline 0,16 0,17
sulfasalazine 500 mg/kg ac.actique 1,67 0,33* 58
thymoquinone 5 mg/kg ac.actique 2,20 0,37* 45
thymoquinone 10 mg/kg ac.actique 0,33 0,21*# 92
n = 6
* : significativement diffrent du groupe sol.saline + acide actique avec P<0,05
# : significativement diffrent du groupe sulfasalazine + acide actique avec P<0,05
6.2.3 Discussion
La TQ en pr traitement amliore trs nettement la colite induite par lacide actique chez le rat en
inhibant la libration dhistamine et de PAF et par action antioxydante.
A la dose de 10 mg/kg son effet contre la colite est suprieur celui de la sulfasalazine (500 mg/kg).
6.3 Action sur le muscle jjunal
6.3.1 Protocole ([89] (2001)
Objectifs : effets de lextrait aqueux/mthanolique (EAM) et de lextrait lther de ptrole (EEP) sur
la contraction spontane et sur celle induite par une solution riche en K
+
du muscle du jjunum isol
de lapin.
Le tmoin positif est le vrapamil, un inhibiteur calcique.
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Mcanisme daction : Les auteurs recherchent un effet inhibiteur calcique car la contraction
spontane de nombreux muscles lisses est dpendante du cycle de polarisation/dpolarisation cre
par influx rapide de Ca
2+
dans la cellule via les canaux calciques.
6.3.2 Rsultats
LEAM et lEEP inhibent la contraction spontane du jjunum.
La contraction induite par une solution riche en K
+
est inhibe par les 2 extraits de faon dose-
dpendante et lactivit de lEEP est 10 fois suprieure celle de lEAM (idem pour linhibition de la
contraction spontane).
Aux doses testes, le vrapamil montre un effet comparable aux extraits.
Ces rsultats montrent une probable proprit relaxante par antagonisme calcique.
LEEP semble concentrer la substance responsable de leffet. On pourra assimiler leffet de lEEP
celui de lhuile et considrer que celle-ci est plus active que lEAM.
6.3.3 Discussion
La Nigelle induit une relaxation du jjunum isol de lapin par effet inhibiteur calcique.
Ceci pourrait confirmer lintrt de la prise dhuile de Nigelle dans les spasmes intestinaux et les coliques.
6.4 Action hpatique
Une trs ancienne tude ([121] 1964) montrait leffet cholrtique (augmentation de la production
de bile) de lhuile de Nigelle chez le chien anesthsi, avec un maximum atteint 1h30 aprs linjection.
Un tel effet amliore la digestion en gnral et plus particulirement celle des graisses.
6.5 Conclusion
Ces tudes chez lanimal in vivo et in vitro pourraient confirmer lusage de la Nigelle lors
daffections gastro-intestinales comme les ulcres ; les spasmes intestinaux lors de diarrhes ou
parasitoses ; ou tout simplement la mauvaise digestion.
Mais nous ferons deux remarques :
Lhuile a montr chez lanimal un effet antiulcreux gastrique, antispasmodique et cholrtique.
Concernant la colite, seule la TQ a t teste et nous ignorons si sa teneur dans lhuile ou dans la
graine est suffisante pour que celles-ci possdent une activit intressante. Nous pouvons tout de
mme dire que leurs effets antioxydants contribueront attnuer les lsions ulcreuses.
Les graines, qui vont contenir les substances extraites par leau et par lalcool, et lhuile auront
une action antiulcreuse gastrique et antispasmodique au moins partielle. Reste savoir si ces
effets seront significatifs.
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7 Action hypoglycmiante
La graine de Nigelle est traditionnellement employe pour traiter le diabte.
Les travaux ont montr l'effet sur la glycmie chez diffrents modles animaux rendus
exprimentalement diabtiques (diabte gras) : hamsters, rats et lapins.
7.1 Les protocoles
Le diabte peut tre induit par:
- La streptozotocine (STZ) chez le hamster ([79] [80] 2002) et le rat ([112] 2004 ; [113] 2003 ; [65]
2002).
- L'alloxane chez le lapin ([130] 2001 ; [129] 2003).
Les valuations sont:
- Le dosage de la glycmie et de l'insulinmie
- L'immunohistochimie : marquage de l'insuline des lots de Langerhans par des anticorps anti-
insuline monoclonaux.
- L'histopathologie
- Le dosage de l'hmoglobine glycosyle : marqueur de l'quilibre long terme de la glycmie [79]
Le mcanisme d'action est tudi par
- Lvaluation de l'action antioxydante : dosage de MDA srique, activit de la SOD, de la
glutathion proxydase, de la catalase...
- Leffet sur la noglucogense hpatique : des hpatocytes isols de hamster sont mis en
incubation avec diffrents prcurseurs de la noglucogense (alanine, glycrol, lactate) en
prsence ou absence de Nigelle. [79]
- Leffet de la Nigelle sur la libration d'insuline induite par le glucose par des lots de Langerhans
isols de rats [65]
- Lobservation de la sensibilisation des hpatocytes isols de rats in vitro laction de linsuline :
on value l'effet de la Nigelle la rponse linsuline de 2 kinases connues pour tre impliques
dans lactivation de la glycognognse hpatique. ([120] 2004)
Les doses administres sont:
L'extrait aqueux :
Chez le lapin rendu diabtique par l'alloxane : 20 ml/kg/jour par v.o. pendant 2 mois aprs
induction du diabte. [129] [130]
L'huile essentielle :
- Chez des rats rendus diabtique par la STZ : 0,2 ml/kg/jour en injection i.p. 30 jours aprs
induction du diabte et pendant 30 jours : [112] ; ou 3 jours avant et pendant 4 semaines :
[113].
- Chez des hamsters rendus diabtiques par STZ + nicotinamide : 400 mg/kg/jour par v.o., 4
semaines aprs induction du diabte et pendant 4 semaines. [80]
L'huile :
- Chez des hamsters rendus diabtiques par STZ : 400 mg/kg/jour par v.o., 6 semaines aprs
induction du diabte et pendant 4 semaines [79]
- Chez des rats rendus diabtique par la STZ : 0,4 g/kg/jour par v.o., 6 semaines aprs
induction du diabte et pendant 6 semaines [65]
- On value leffet de la sensibilisation linsuline dhpatocytes isols de rat auparavant
traits par lextrait lther de ptrole (lquivalent de 2 g/kg/jour de poudre par v.o. pendant
4 semaines). [120].
la thymoquinone et la nigellone :
On teste leurs effets sur la libration d'insuline induite par le glucose par des lots de Langerhans
isols de rats. [65]

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7.2 Les rsultats
7.2.1 Les diffrents extraits
L'extrait aqueux [129] [130]
Il permet de rduire la glycmie significativement ; cependant l'effet est insuffisant et la glycmie
reste relativement leve :
- groupe contrle : 96,32 mg/dl
- groupe diabtique : 340,43 mg/dl ; (P<0,05) par rapport au contrle
- g.diabt. trait par la Nigelle : 194,41mg/dl ; (P<0,05) par rapport aux 2 autres groupes.
L'extrait permet de restaurer les taux sanguins de GSH et MDA initiaux.
L'tude histopathologique montre une disparition des lsions hpatocytaires grce la Nigelle ;
par contre lhistopathologie du pancras nest pas amliore.
Lextrait aqueux par voie orale donne une amlioration trs partielle du diabte induit par
lalloxane chez le lapin. Son intrt rside surtout dans son action antioxydante vis--vis des
lsions parallles gnres par le diabte.
L'huile essentielle [80] [112] [113]
Chez le rat et le hamster l'HE rduit trs significativement la glycmie et augmente l'insulinmie.
Ltude immunohistochimique montre de larges plages dimmunoractivit positive la prsence
dinsuline dans les lots pancratiques, dans les groupes traits par la Nigelle par rapport aux
groupes diabtiques non traits, respectivement : 80% contre 18% chez le hamster et 37,13%
contre 3,84% chez le rat aprs 4 semaines.
Lexamen histopathologique rvle une nette amlioration des lsions pancratiques avec une
rgnration partielle des lots dans les groupes traits par la Nigelle.
Enfin l'HE amliore le stress oxydatif avec baisse du MDA tissulaire et augmentation de l'activit
des enzymes antioxydantes.
LHE exerce une action hypoglycmiante chez le rat et le hamster porteurs dun diabte gras.
Elle agit en partie par une rgnration/prolifration partielle des cellules des lots de
Langerhans (ce qui augmente l'insulinmie) et par son effet antioxydant.
L'huile
Chez le rat et le hamster, la glycmie est trs diminue par administration de l'huile (taux rduit
de moiti au bout de 4 semaines par rapport aux groupes diabtiques non traits). [65] [79]
Ceci s'accompagne d'une baisse de l'hmoglobine glycosyle : son taux est de 5,9% ; 17,3% et
12,1% respectivement pour les groupes contrle, diabtique non trait, et diabtique trait par la
Nigelle (P<0,01).
Concernant la noglucogense hpatique in vitro : par rapport au groupe non trait, lhuile rduit
significativement la quantit de glucose produite partir de l'alanine, du glycrol et du lactate
avec P<0,001 pour les 2 premiers et P<0,05 pour le dernier. [79]
L'huile n'a aucun effet sur la libration d'insuline induite par le glucose par des lots de
Langerhans isols de rats [65].
Par contre on note une sensibilisation des hpatocytes laction de linsuline in vitro chez les rats
traits auparavant par lEEP ; avec une activation dose-dpendante trs suprieure des 2
kinases (impliques dans lactivation de la glycognognse hpatique) par linsuline par rapport
au groupe contrle non trait par la Nigelle. [120]
L'huile rduit significativement la glycmie chez les rats et hamsters diabtiques.
Et d'aprs l'tude ralise in vitro [65], l'huile ne semble pas favoriser la libration d'insuline
par les lots de Langerhans. Elle agirait donc plutt par action extra pancratique, notamment
par inhibition de la noglucogense hpatique et par sensibilisation des hpatocytes
laction de linsuline.
Or nous avions vu prcedemment que l'HE in vivo permettait une rgnration des lots de
Langerhans et donc une augmentation de la libration d'insuline.
Rappelons qu'il est toujours difficile de comparer des rsultats obtenus in vivo et in vitro et
trs certainement, plusieurs mcanismes d'actions expliquent l'effet hypoglycmiant.
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La thymoquinone et la nigellone [65]
Elles nont aucun effet sur la libration d'insuline induite par le glucose par des lots de Langerhans
isols de rats. Leurs effets sur la glycmie nont pas t tudis.
7.2.2 Les mcanismes daction
Les mcanismes d'action impliqus seraient donc:
- une rgnration des lots de Langerhans et une augmentation de la libration d'insuline (HE)
- une inhibition de la noglucogense hpatique (huile)
- une augmentation de la sensibilit des hpatocytes laction de linsuline (EEP)
- une diminution du stress et des lsions oxydatives (extrait aqueux, HE)
7.2.3 Discussion
LHE et lhuile rduisent la glycmie chez lanimal porteur dun diabte gras (lactivit de lextrait
aqueux est moindre).
Si leffet hypoglycmiant de ces 2 extraits est incontestable, des diffrences apparaissent dans leurs
mcanismes daction, car daprs les travaux nous faisons les constatations suivantes :
lHE rduit la glycmie par un effet pancratique : en rgnrant les lots pancratiques de
Langerhans et en augmentant linsulinmie.
Ses effets extra pancratiques nont pas t tudis et pourraient se rajouter.
Lhuile rduit la glycmie et :
- inhibe la noglugnognse hpatique in vitro
- elle naugmente pas la libration dinsuline par les lots pancratiques de Langerhans
isols stimuls par le glucose
- lEEP qui extrait lhuile, sensibilise in vitro les hpatocytes linsuline
Donc lhuile agirait essentiellement par des mcanismes extrapancratiques ; mais cette constatation
repose uniquement sur des travaux in vitro donc il serait ncessaire :
- de faire une tude immunohistochimique sur lanimal diabtique trait par lhuile de Nigelle
et de doser linsulinmie
- dtudier les possibles effets extrapancratiques de lHE.

Les graines, par leur teneur en huile auront certainement une action hypoglycmiante moindre.
7.3 Chez les animaux non diabtiques
Il a t observ une baisse de la glycmie chez des animaux non diabtiques suite l'administration
de Nigelle.
L'huile
Chez les rats non diabtiques l'administration par v.o. de 1 ml/kg/jour d'huile pendant 12
semaines fait diminuer la glycmie de 16,5% par rapport au groupe contrle non trait. (P<0,05)
[168]
La baisse est dj significative au bout de 8 semaines.
Chez des rats non diabtiques l'administration par v.o. de l'quivalent en EEP de 2 g/kg/jour de
poudre de graine de Nigelle pendant 4 semaines ne modifie pas significativement la glycmie.
Mais, ces 4 semaines d'administration sont peut-tre insuffisantes pour observer leffet
hypoglycmiant. [120]
Autres extraits
Nanmoins, suite une dose par v.o. de 215 mg/kg dEEP ou de 645 mg/kg de poudre ou de
160 mg/kg dextrait alcoolique au rat, on observe sur la glycmie jeun, post-prandiale (2 heures
aprs le repas) et 2 heures aprs ingestion de glucose (1 mg/g de poids corporel) :
- aucune action significative sur la glycmie jeun avec les 3 extraits
- pas de baisse significative de la glycmie post-prandiale avec les 3 extraits
- 2 heures aprs ingestion de glucose rduction significative de la glycmie avec l'EEP
(P<0,01) et la poudre (P<0,001) par rapport au groupe contrle. Lextrait alcoolique na pas
deffet. [18]
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Chez le rat non diabtique la prise par voie orale unique de lEEP (huile), de la poudre ou de
lextrait alcoolique ne modifie pas la glycmie. Idem pour la prise par voie orale dEEP pendant 4
semaines.
Mais il a t montr une rduction de la glycmie chez le rat non diabtique aprs prise par v.o.
dhuile en continu pendant 12 semaines. Leffet devenait significatif au bout de 8 semaines.
Donc, visiblement la prise prolonge de graines de Nigelle (suprieure 4 semaines) peut faire
apparatre des modifications de la glycmie chez le rat sain.
Si ceci se rvlait en essai clinique chez lhomme sain, cela reprsenterait un inconvnient
important la prise de graines ou dhuile de Nigelle.
7.4 Actions complmentaires
Voici les effets de la Nigelle sur certains risques associs au diabte.
Action sur les cellules du sang
Lextrait aqueux de graines de Nigelle a t donn par v.o. des lapins rendus diabtiques par
lalloxane la dose de 20 ml/kg pendant 2 mois. ([129] 2004, Turquie) A lissue de cette priode, le
dosage des diffrentes lignes cellulaires du sang montre que la Nigelle permet de prvenir les baisses
des taux de globules blancs, globules rouges, de neutrophiles et de monocytes causs par le diabte.
Les neutrophiles reprsentant la 1
re
ligne de dfense du corps face aux bactries, lextrait aqueux de
Nigelle semble intressant pour amliorer les dfenses des sujets diabtiques face aux infections.
Action cardiovasculaire
La mme tude a valu leffet de cet extrait aqueux sur la frquence cardiaque des lapins
diabtiques.
Celle-ci tait fortement leve chez les sujets diabtiques par rapport aux sujets normaux : 268
battements/minutes contre 184. Lextrait de Nigelle ramenait cette frquence 205 battements/minutes.
Nous avons galement vu que la Nigelle avait une action hypolipmiante ; ces 2 proprits combines
encouragent lutilisation de la Nigelle pour diminuer les risques daffections cardiaques, majors par le
diabte.

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8 Actions cardiovasculaires et sur les paramtres
du sang
La Nigelle a traditionnellement t utilise pour traiter lhypertension, lexcs de cholestrol et pour
stopper les saignements de nez.
8.1 Action sur la tension et la frquence cardiaque
8.1.1 Les tests
Effets des diffrents extraits
On observe l'effet de la Nigelle sur la pression artrielle (PA) ou la frquence cardiaque (FC) de rats
anesthsis ou non l'urthane.
Les diffrents extraits sont:
L'HE et la TQ en injection i.v. des rats anesthsis l'urthane normo tendus (doses
respectives de 4 32 L/kg et de 0,2 1,6 mg/kg) ([75] 1993)
LHE prive de TQ en injection i.v. des rats non anesthsis (2 16 L/kg) ([73] 2003)
L'-pinne et le para-cymne en injection i.v. des rats non anesthsis (doses respectives de 1
4 L/kg et de 2 16 L/kg). [73]
L'extrait dichloromthanolique par v.o. des rats hypertendus (0,6 ml/kg/jour pendant 15 jours)
avec comme tmoin positif la nifdipine, inhibiteur calcique (5 mg/kg/jour) ([169] 2000)
Les mcanismes d'action
- Action par mcanisme central : observation de l'effet de la destruction neuronale (entre les
neurones adrnergiques de la moelle et les neurones sympathiques pr ganglionnaires) [73] [75]
- Rcepteurs en jeu : observation de l'effet de diffrents agents bloquants de rcepteurs ou
inhibiteurs de synthse sur les actions cardiovasculaires de la Nigelle. [73] [75]
- Action diurtique modre : tmoin positif le furosmide [169]
- Action relaxante sur le muscle vasculaire ([4] 1992)
8.1.2 Les rsultats
La thymoquinone
La TQ entrane une baisse dose-dpendante de la PA et de la FC par action centrale cholinergique
et srotoninergique chez les rats normo tendus anesthsis lurthane [75].
Lhuile essentielle
Effet de l'HE sur des rats normo tendus anesthsis lurthane [75] :
LHE entrane une baisse dose-dpendante de la PA et de la FC.
Elle agit par mcanisme central, par stimulation directe et indirecte des rcepteurs cholinergiques
et srotoninergiques.
Son mcanisme d'action n'implique pas la libration dicosanodes, dhistamine, de PAF ou le
blocage des canaux calciques.
Nous remarquons que les doses de TQ utilises pour conduire au mme effet hypotenseur et
bradycardisant sont bien plus importantes que celles contenues dans les diffrentes doses dHE
testes.
Donc comme nous allons le voir ci-dessous, la TQ nest certainement pas le seul facteur
contribuant leffet dpresseur sur le systme cardiovasculaire.
Effet de l'huile essentielle prive de thymoquinone, de l' -pinne et du p-cymne sur des
rats normo tendus non anesthsis [73] :
LHE prive de TQ, l'-pinne et le p-cymne induisent une baisse dose-dpendante de la TA et
de la FC et agissent en partie, par mcanisme central : action cholinergique et srotoninergique.
Effet sur le muscle vasculaire [4]
Un effet relaxant sur le muscle vasculaire pourrait participer l'effet hypotenseur de la Nigelle.
Dans une tude ralise sur le lapin, l'HE inhibe les contractions induites par la nor-pinphrine
des anneaux aortiques isols, par effet inhibiteur calcique.
Or nous avons vu plus haut que leffet de lHE sur la PA et la FC ne provenait pas dun effet
inhibiteur calcique. Donc, soit les contradictions obtenues viennent de la variation de la
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composition de lHE ou alors cet effet relaxant sur le muscle vasculaire par effet inhibiteur
calcique est insuffisant pour entraner une baisse de la FC et de la PA.
Lhuile
Chez le rat, lhuile (1 2 ml/kg/jour en i.p. pendant 14 jours) supprime lhypertension induite par
un agoniste des rcepteurs
1
-adrnergiques (la phnylpinphrine) et potentialise lhypotension
induite par lisoprnaline (activateur des rcepteurs
2
-adrnergiques).
Donc lhuile pourrait agir en dsensibilisant les rcepteurs
1
-adrnergiques et en activant les
rcepteurs
2
-adrnergiques. [74]
Chez le rat hypertendu [169] lextrait dichloromthanolique (EDCM) qui permet dextraire lhuile,
abaisse la pression artrielle moyenne de 22% et de 18% pour la nifdipine par rapport aux rats
contrle non traits (P<0,001). Leffet de lEDCM est significativement suprieur celui de la
nifdipine (P<0,05).
L'observation des effets de l'EDCM sur la diurse et lexcrtion urinaire de sodium, potassium,
chlorure et ure montre une augmentation de tous les paramtres tudis, mais ces
modifications, bien que significatives restent modres en comparaison de celles induites par le
tmoin positif : le furosmide.
LEDCM entrane donc chez le rat hypertendu une forte diminution de la pression artrielle
accompagne dune activit diurtique modre. Cette dernire serait partiellement responsable
de leffet hypotenseur.
8.1.3 Discussion
Lhuile reflte par lEDCM est un bon antihypertenseur chez le rat hypertendu avec une activit
suprieure celle de la nifdipine aux doses testes. Un effet diurtique modr participe laction
cardiaque de lhuile. Elle agit galement en dsensibilisant les rcepteurs
1
-adrnergiques et en activant
les rcepteurs
2
-adrnergiques.
LHE et la TQ sont hypotenseurs et bradycardisants chez le rat normo tendu par une action
centrale (mcanismes cholinergiques et srotoninergiques) et peut tre aussi par relaxation du muscle
vasculaire.
Ces rsultats obtenus chez le rat normo tendu peuvent tre rellement gnants sils sont retrouvs en
essais cliniques, il conviendra donc dvaluer ce phnomne.
8.2 Action hypolipmiante
8.2.1 Les tests
In vivo chez le rat : effets sur les lipides sanguins de :
La TQ :
- chez le rat normal (0,5 ; 1 ; 2 ; 4 ; 6 et 8 mg/kg/jour en i.p.) pendant 1, 4, 7, 10 ou 14 jours
([36] 2002)
- chez le rat en hypercholestrolmie : dose par v.o. de 5mg/kg/jour, administre 5 jours avant
et les 15 jours durant une dite hypercholestrolmiante ([127] 2003).
L'huile donne par v.o. pendant 12 semaines (1 ml/kg/jour) ([168] 2002)
Lextrait mthanolique (160 mg/kg/jour), lextrait lther de ptrole (215 mg/kg/jour) et la poudre
de graines (6,4 g/kg/jour), administrs par v.o. pendant un mois ([18] 1997)
In vitro sur des hpatocytes isols de souris : effet des alcalodes sur les triglycrides sanguins (TG).
([133] [134] 2004).

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8.2.2 Rsultats
L'huile
Elle entrane au bout de 12 semaines une baisse de 15,5% et de 22,2% du taux de cholestrol et de
TG respectivement par rapport au groupe non trait (P<0,05). [168]
LEEP entrane une baisse du cholestrol de 11,5% par rapport au groupe contrle (P<0,025).
Il nagit pas sur les TG. [18] Peut tre est-ce d une dure dadministration insuffisante (1 mois au
lieu de 3 pour lhuile).
La poudre
Elle ne modifie pas le taux de cholestrol par contre elle abaisse le taux de TG de 13,2% par rapport
au contrle (P<0,01). [18]
L'extrait mthanolique
Il entrane une baisse du cholestrol de 17,4% par rapport au groupe contrle (P<0,001).
Il nagit pas sur les TG. [18]
Les alcalodes
Ce sont les seules recherches pharmacologiques portant sur les alcalodes.
4 des alcalodes tudis se montrent aussi puissants que le tmoin positif : le clofibrate (mdicament
normolipmiant) pour rduire le taux de TG : la nigellamine A
1
, A
5
, B
1
et B
2
. [133] [134]
La thymoquinone
Chez le rat en hypercholestrolmie [127]
Elle rduit significativement lhypercholestrolmie, llvation de LDL et prvient la baisse de
HDL et des rapports cholestrol total/HDL et LDL/HDL induits par la dite.
La TQ na ici pas deffet sur les TG.
Chez le rat normal [36] :
La dose de 8 mg/kg sest rvle tre toxique ds la fin de la 1
re
semaine.
Toutes les autres doses modifient les paramtres tudis partir de 4 jours dadministration, la
prise de TQ pendant un seul jour tant insuffisante exercer quelque effet (sauf sur les
triglycrides : TG) :
- Pour le cholestrol : effet maximum le 7
me
jour la dose de 1 mg/kg avec une baisse de
54,2% par rapport au contrle (P<0,001).
- Pour les TG : effet maximum le 10
me
jour la dose de 6 mg/kg avec une baisse de 47,4%
par rapport au contrle (P<0,001).
- Pour le taux de LDL : effet maximum le 14
me
jour la dose de 4 mg/kg avec une baisse de
70% par rapport au contrle (P<0,001).
- Pour rapport HDL/LDL : effet maximum le 14
me
jour la dose de 0,5 mg/kg avec un taux
multipli par 3 par rapport au contrle (P<0,01).
- Pour le rapport HDL/cholestrol total : augmentation de 66,7% au 7
me
jour (1 mg/kg) par

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