Instituto Politcnico Nacional

Escuela Superior de Ingeniera Qumica e Industrias Extractivas

LABORATORIO DE QUIMICA ANLITICA III.

PRACTICA 1- RUTINAS DE DIAGNOSTICO
Presenta:
SANDOVAL GUERRERO GRACIELA DEL CARMEN VEGA VILLALOBOS DIANA

GRUPO: 6IM4 SECCIN:1 Profr:

Samuel Siles

11 de FEBRERO del 2011 OBJETIVOS:

Aprender como utilizar un espectrofotmetro de UV-Visible Saber para que nos sirve, donde aplicar y que es en si un espectrofotmetro de UVVisible Verificar si funciona el espectrofotmetro

INTRODUCCIN:
Para poder entender los mtodos espectroscpicos de anlisis es necesario comprender primero las transiciones elctronicas. TRANSICIONES ELECTRICAS y TEORIA DEL ORBITAL: al aumentar el valor de n, los niveles de energa tambin aumentan, porque se necesita ms energa para colocar a los electrones de carga negativa en una rbita ms lejana del nucleo con carga positiva. El principio de exclusin de Pauli establece que cada orbital podr ser ocupado por un mximo de dos electrones, y solamente si sus spines son en sentido opuesto. Los enlaces qumicos se forman por superposicin de los orbitales atmicos, lo cual da lugar a orbitales moleculares, en los cuales los electrones suelen estar mas cerca de los ncleos atmicos que en los orbitales atmicos. Como cada orbital atmico puede contener un maximo de dos electrones, la combinacin de dos orbitales atmicos para formar un elance quimico dar como resultado no solamente la formacin de un orbital de enlace molecular, sino tambin la formacin de otro orbital molecular para acomodar a los dos electrones restantes que pueden haber estado presentes en los orbitales atmicos originales. Este orbital molecular se denomina orbital de antienlace: sus electrones suelen estar mas lejos de los nucleos atomicos que antes, y por lo tanto se encuentran en un nivel de energa superior. NATURALEZA Y PROBABILIDAD DE LAS TRANSICIONES ELECTRICAS:Cuando una molecula quimica absorbe luz en la regin del espectro visible o del ultravioleta, un electron de la misma es promovido del orbital ms estable en el estado basal a un orbital de mayor energia, en el estado exitado. Aplicando la teoria del orbital molecular generalmente podr deducirse la naturaleza de la transicion electronica y su energia relativa con respecto a otras transiciones. La informacin sobre la naturaleza, energa y probabilidad de una transicion electronica es muy util para correlacionar la estructura quimica con los espectros de absorcin. La correlacion de la estructura con los espectros se ilustra considerando la absorcion de energia radiante ultravioleta por un grupo carbonilo organico, de un aldehido o cetona. La transicion electronica que requiere el minimo de energia es la promocion de un electron de no union (n) al orbital de enlace *, esta en una transicion prohibida o de baja probabilidad porque el orbitall no enlazado est en un plano perpendicular y al plano del orbital *. Por lo tanto la probabilidad de que se efectue la transicion es baja. DESTINO DE LA ENERGIA ABSORVIDA: el tiempo requerido para la absorcion de luz es exageradamente corto. El proceso de absorcion es uno de los acontecimientos ms rapidos que pueden efectuarse despues de la absorcin. Puede demostrarse que solo una fraccion muy pequea de moleculas en solucion son exitadas por la absorcion de energia radiante en las condiciones que se emplean en analisis espectrofotomtrico. Los metodos espectrofotometricos cuantitativos se basan en que el numero de moleculas que absorben luz, aunque sean una fraccion diminuta del total, es proporcional al numero total de moleculas presentes. Esto es realmente una forma cuantitativa de enunciar la ley de Beer. Despues de que las moleculas exitadas han absorbido la energia radiante visible o ultravioleta, no permanecen mucho tiempo en estados electrnicos elevados.

Las bandas de absorcion en el ultravioleta y el visible suelen ser bastante amplias; los picos de absorcion abarcan un intervalo de longitud de onda muy grande y el pico de absorbencia esta bien redondeado. La causa parece consistir qn que los electrones del estado basal pueden promoverse a varios niveles de vibracin y rotacin en estado exitado. La interacion de moleculas con el disolvente tambien amplia el intervalo de energia en las transiciones que pueden ocurrir. En realidad, estos espectros tienen gran cantidad de estructura fina complicada que no puede resolverse con la mayoria de los instrumentos opticos; por lo tanto los espectros aparecen como curvas anchas y bien redondeadas. METODOS DE ANALISIS: los metodos colorimtrico y espectrofotomtrico probablemente son los mas importantes del analisis cuantitativo y tambien los que se emplean ms a menudo. Se basan enla absorcion de luz visible o de otro tipo de energia radiante por una solucion. La cantidad de energia radiante absorbida es procporcional a la concentracion del material en la solucion que realiza la absorcion. Mieidendo la absorcion de la luz o de otro tipo de energia radiante es posible determinar cuantitativamente la cantidad de sustancia absorbente presente. En los metodos fotometricos se mide la relacion de poder de radiacion de los rayos de luz incidente y luz transmitida, empleando un detector, del tipo de las fotoceldas. Cuando esta relacion se mide a una longitud de onda determinada, el mtodo analitico se denomina espectrofotometrico. Estos metodos no se limitan al uso de la luz visible, sino que tambien incluyen a aquellos que emplean energia radiante de otras regiones del espectro electromagnetico, como el ultravioleta o el infrarrojo. Los metodos que se basan en la absorcion de la luz sirven perfectamente para detrerminar constituyentes de las muestras, desde cantidades minimas hasta cantidades del 1% aproximadamente, pero no se usan con tanta frecuencia para analizar cantidades mayores de sustancias. En espectofotometria hay dos formas principales de analizar. Una de ellas es empleando el color natural de un ion o compuesto, la otra es utilizando la radiacion ultravioleta e infrarroja para la determinacion espectrofotometrica de sustancias, que no presentan color en la region visible pero si absorben fuertementeen las regiones espectrales del infrarrojo o del ultravioleta. Los iones o moleculas que tienen poco o ningun color natural pueden determinarse espectrofotometricamente despues de hacerlas reaccionar con un reactivo apropiado que las convierta en un producto muy colorido. La concentracion del ion o compuesto original se determina midiendo la absorcion de luz. ESPECTRO ELECTREOMAGNETICO: para medir la energia radiante se emplean comunmente las siguientes unidades: m= micrometro= 10-6 metros= 10-4 centimetros Nm= nanometro= 10-9 metros= 10-7 centimetros = angstrom= 10-10 metros= 10-8 centimetros El nanometro a sustituido a la antigua unidad ,milimicron, y el micrometro ha sustituido a la antigua unidad, micra. La luz es la energia radiante en la region espectral visible para el ojo humano normal. El intervalo de longitud de onda de la luz es aproximadamente de 380 a 750nm. La radiacin ultravioleta abarca el intervalo espectral desde 10 hasta 380nm aproximadamente, pero la region que se emplea en el analisis espectrofotomtrico generalmente se limita al intervalo de 200 a 380nm. VARIACIN DE LA ABSORCION CON LA LONGITUD DE ONDA: en los metodos espectofotometricos de analisis es de gran utilidad saber que longitudes de onda de la energia radiante se absorben con mayor fuerza. Esto se hace irradiando la solucion de la muestra con un rayo de una sola longitud de onda y medir la cantidad de absorcion conforme se hace variar la longitud de onda del rayo incidente. Al graficar la absorbancia en funcion de la longitud de onda, se obtiene un espectro de absorcion (empleando un espectofotometro para obtener dicha informacion). Los espectros son importantes para seleccionar una longitud de onda adecuada para analisis cuantitativo. La longitud de onda elegida debera estar en el intervalo de longitudes

de onda que la sustancia que va a determinarse absorbe fuertemente y que otras sustancias extraas absorben debilmente. ESPECTOFOTOMETROS: en un espectrofotometro la luz policromatica de una fuente pasa a traves de un prisma o es refeljada mediante una rejilla de difraccion, y como resultado, el rayo original se descomponen los colores que lo componen,como un arco iris. La luz con logitudes de onda de solo unos cuantos nanometros entra a la parte del instrumento que contiene la muestra y la fotocelda. El intervalo de longitudes de onda depende del ancho de la rendija. La longitud de onda de la luz que penetra por la rendija puede hacerse variar mediante rotacin del prisma o la rejilla de difraccin. La espectrofotometria de ultravioleta mide la absorcion de la energia radiante en la region espectral de 200 a400nm. Aunque algunas mediciones en el ultravioleta pueden efectuarse con el espectrofotometro equipado paea la region visible, para efectuar mediciones por debajo de 325nm, el espectrofotometro debera estar equipado con una fuente de radiacin uiltravioleta, como un tubo de descasrga de hidrogeno p deuterio.

DESARROLLO EXPERIMENTAL:

Tablas de Datos a) Exactitud Fotomtrica

Intevalo de (nm) 660 a 650 Velocidad deBarrido(nm/min) 15 Velocidad de Carta(mm/min) 60 Ordenada limite 0-30 maX ,Terico (nm) 656.1

b) Ancho de Banda Espectral De la lnea de emisin de la Lmpara de Deuterio

Intevalo de (nm) 490 a 480 Velocidad deBarrido(nm/min) 15 Velocidad de Carta(mm/min) 60 Ordenada limite 0-30 maX ,Terico (nm) 486.1

Espectro completo de la Lmpara de Deuterio

Intevalo de (nm) 750 a 190 Velocidad deBarrido(nm/min) 120 Velocidad de Carta(mm/min) 30 Ordenada limite 0-30 maX ,Terico (nm) 486.1

Espectro del Vapor de Benceno

Intevalo de (nm) 280 a 220 Velocidad deBarrido(nm/min) 15 Velocidad de Carta(mm/min) 30 Ordenada limite 0-30

Va lores Teticos de : [237, 242.2, 247.8, 253.6, 259.6, 266.8]nm c) Empleando el Filtro de xido de Holmio
Intevalo de (nm) 700 a 200 Velocidad deBarrido(nm/min) 120 Velocidad de Carta(mm/min) 30 Ordenada limite 0-30

Va lores Teticos de : [648.5, 637, 536, 459.5, 453, 445, 418, 360.5, 333.5, 287, 279]nm d) Linealidad Fotomtrica
Intevalo de (nm) 450 a 250 Velocidad deBarrido(nm/min) 120 Velocidad de Carta(mm/min) 30 Ordenada limite 0-1.5 maX ,Terico (nm) 350

CALCULOS: a) Exactitud Fotomtrica 60mm 15mm 1 min x= 0.25 min 15 nm x= 3.75 nm 1 min 0.25 min

max = (660 3.75)nm = 656.25 nm b) Ancho de Banda Espectral De la lnea de emisin de la Lmpara de Deuterio 60mm 15mm 1 min x= 0.25 min 15 nm x= 3.75 nm 1 min 0.25 min

max = (490 3.75)nm = 486.25 nm Espectro completo de la Lmpara de Deuterio 30mm 66.5mm 1 min x= 2.2167 min 120 nm x= 266 nm 1 min 2.2167 min

max = (750 - 266)nm = 484 nm Espectro del Vapor de Benceno 30mm 39mm 1 min x= 1.3min 15 nm x= 19.5 nm 1 min 1.3min

= (280 19.5)nm = 260.5nm 30mm 51.5mm 1 min x= 1.7167min 15 nm x= 25.65 nm 1 min 1.7167min

= (280 25.65)nm = 254.25nm 30mm 63.5mm 1 min x= 2.1167min 15 nm x= 31.75 nm 1 min 2.1167min

= (280 31.75)nm = 248.25nm 30mm 74mm 1 min x= 2.4667min 15 nm x= 37 nm 1 min 2.4667min

 = (280 37)nm = 243nm 30mm 84mm 1 min x= 2.8min 15 nm x= 42 nm 1 min 2.8min

= (280 42)nm = 238nm 30mm 93.5mm 1 min x= 3.1167min 15 nm x= 46.75 nm 1 min 3.1167min

= (280 46.75)nm = 233.25nm a) Empleando el Filtro de xido de Holmio 30mm 14mm 1 min x= 0.4667min 120 nm x= 56 nm 1 min 0.4667min

= (700 56)nm = 644 nm 30mm 40mm 1 min x= 1.3333 min 120 nm x= 160 nm 1 min 1.3333min

= (700 160)nm = 540nm 30mm 59mm 1 min x= 1.9667min 120 nm x= 236 nm 1 min 1.9667min

= (700 236)nm = 464nm 30mm 60mm 1 min x= 2min 120 nm x= 240 nm 1 min 2min

= (700 240)nm = 460nm b) Linealidad Fotomtrica 30mm 24mm 1 min x= 0.8min 120 nm x= 96 nm abs=0.336 1 min 0.8min

max = (450 96)nm = 354nm

TABLA DE RESULTADOS: a) Exactitud Fotomtrica

Longitud de Onda max, nm 656.25 maX ,Terico (nm) 656.1

b) Ancho de Banda Espectral De la lnea de emisin de la Lmpara de Deuterio

Longitud de Onda max, nm 656.25 maX ,Terico (nm) 656.1

Espectro completo de la Lmpara de Deuterio

Longitud de Onda max, nm 486.25 maX ,Terico (nm) 486.1

Espectro del Vapor de Benceno

Longitud de Onda, nm 260.5 254.25 248.25 243 238 233.25 ,Terico (nm) 266.8 259.6 253.6 247.8 242.2 237

c) Empleando el Filtro de xido de Holmio

Longitud de Onda , nm 644 540 464 ,Terico (nm) 648.5 637 536

460 452 424 392 372 340 292 284

459.5 453 445 418 360.5 333.5 287 279

a) Linealidad Fotomtrica
Longitud de Onda max, nm 354 Absorbancia 0.336

A diferentes concentraciones Longitud de Onda max (nm) 350 350 350 TEORICO Absorbancia Concentracin (ppm) 0.340 0.444 0.887 25 50 75 Longitud de Onda max(nm) 354 354 354 EXPERIMENTAL Absorbancia Concentracin (ppm) 0.336 0.451 0.878 25 50 75

Cuestionario: 1. Cul es el fundamento de los Mtodos espectroscpicos de anlisis?

= medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe un sistema qumico en funcin de la longitud de onda de la radiacin, as como las mediciones por separado a una longitud de onda determinada 2. Qu se entiende por transicin electrnica? =se refiere a el cambio de energa de los electrones de enlace , hacindolos pasar de el orbital molecular de enlace(baja energa) a un orbital molecular de anti enlace (alta energa), es decir de un estado basal pasan a un estado excitado 3. Cules son las transiciones electrnicas que se presentan en compuestos orgnicos? = a *; a *; n a * ;n a * 4. Qu tipo de compuestos se pueden analizar en esta tcnica? =Todas las molculas pueden absorber radiacin en la regin uv-vis debido a que contienen electrones compartidos y sin compartir que pueden ser excitados. Compuestos como orgnicos e inorgnicos; orgnicos como cetonas, aldehdos y de carbonilo orgnico; inorgnicos como cobalto. 5. De ejemplo de dos compuestos que absorban en la regin UV-Vis. Proporcione la frmula desarrollada. O = Benceno CH3 C CH2 CH3 Metil etil cetona

6. Describa brevemente cual es el objetivo de la prctica = verificar si el espectrofotmetro trabaja de manera adecuada, siguiendo las rutinas de diagnostico 7. Mencione cuales son las partes que constituyen un espectrofotmetro UV-Vis. =Fuente de energa Radiante: lmpara de tungsteno o un tubo de descarga de hidrogeno (o Deuterio) Monocromador: instrumento ptico que sirve para separar de una fuente de radiacin continua un haz de elevada pureza espectral y de cualquier longitud de onda. Recipiente para la muestra: celdas que deben transmitir la energa radiante en la regin espectral de inters; de vidrio, regin visible; de cuarzo o vidrios con slice , regin ultravioleta; de sal de piedra, regin infrarroja Detector: sensibilidad elevada en la regin espectral de inters.

Amplificacin y lectura . 8. Explique cul es el propsito de calibrar los equipos antes de realizar cualquier tipo de anlisis instrumental =se calibran loa equipos antes de su uso con el propsito de evitar errores al dar inicio los anlisis cualitativos y cuantitativos, y de esa manera obtener las caracterizaciones de los compuestos correctos. 9. Qu se entiende por barrido espectral? =es la variacin de la longitud de onda., necesario para la bsqueda de una mximo donde el analito absorbe ms energa radiante. 10. Qu informacin analtica proporcionan los resultados de un espectrograma? =Se basan en la absorcin de luz visible o de otro tipo de energa radiante por una solucin. La cantidad de energa radiante absorbida es proporcional a la concentracin del material en la solucin que realiza la absorcin. Midiendo la absorcin de la luz o de otro tipo de energa radiante es posible determinar cuantitativamente la cantidad de sustancia absorbente presente. 11. En qu tipo de industrias se puede aplicar la tcnica UV-Vis? = Industrias Farmacuticas como Bayer y Birmex; Pemex, en laboratorios de anlisis y caracterizacin de materiales.

OBSERVACIONES: Para hacer el anlisis de la lmpara de deuterio hay que asegurarse que se encuentre apagada la ultravioleta, para evitar interferencias en el anlisis. Al colocar la muestra en la celda, por ningn motivo se debe tocar la parte tranparente de esta, solo la parte opaca y colocarle su tapa. La muestra de referencia debe de ser elegida de acuerdo a la fase que la muestra sea utilizada. Se deben guardar los datos, que se deseen trabajar, en la memoria del equipo y verificar si se han guardado los datos correctos, de lo contrario no se trabajara con las condiciones deseadas. Sandoval Guerrero Graciela del Carmen Antes de prender el espectrofotmetro hay que verificar que est conectado a un regualdor para que no se descomponga por algun problema electrico. En los primeros anlisis con la lampara de deuterio hay que verificar que este apagada la funcin del ultravioleta, para que no haya interferencias. Dependiendo de la velocidad de carta y de la velocidad de barrido se tiene que tomar en cuenta el tamao del papel milimetrico, ya que si es muy pequeo entonces se deberia cambiar la velocidad de carta para poder tener todo el espectro en la misma hoja. Al momento de introducir los intervalos de longitud de onda se tienen que guardar los datos en la memoria del equipo, para que no haya malas condiciones de trabajo. En el momento que uno va a colocar la muestra en la celda, debemos de tener en cuenta que esta se tiene que agarrar por la parte opaca y no por la parte transparente; asi mismo hay que

colocarle la tapa, la muestra de referencia se selecciona dependiendo de la sustancia que se va a utilizar y tambien verificando la fase en que esta muestra se encuentra. Vega Villalobos Diana CONCLUSIONES: Teniendo en cuenta los resultados obtenidos experimentalmente y comparndolo con los valores tericos, donde estos presentan una diferencia mnima, el espectrofotmetro empleado, cumple con las caractersticas de operacin adecuadas, por lo tano el equipo puede ser utilizado en los diferentes tipos de anlisis, como son: la identificacin de compuestos, detectar grupos funcionales y analizar mezclas del espectrograma que se obtiene, al igual que se puede conocer la concentracin de la muestra analizada, ya que esta est relacionada directamente con la absorbancia: a mayor concentracin es mayor la energa radiante que se absorbe, es decir son directamente proporcionales. Entonces la principal funcin del equipo es ocasionar la transicin electrnica mediante la exposicin de una muestra en una fuente de energa radiante. Es primordial la verificacin de un equipo de anlisis instrumental para realizar anlisis cualitativos y cuantitativos de manera exacta y confiable, minimizando los errores lo ms posible, lo cual se logra con el adecuado conocimiento de las parte principales del equipo, donde se verifica la exactitud fotomtrica, linealidad fotomtrica y ancho de la banda espectral. Sandoval Guerrero Graciela del Carmen____________________ En base a los resultados que se obtuvieron experimentalmente se puede ver que presentan una diferencia minima con respecto a los valores teoricos; lo cual nos dice, que el espectrofotmetro utilizado para la experimentacin si cumple con las caractersticas de operacin adecuadas. Es indispensable hacer la verificacin del equipo de anlisis instrumental para as poder realizar con toda seguridad, de una manera mas exacta, los anlisis cualitativos y cuantitativos, para minimizar los errores; por eso, es necesario verificar que la exactitud fotometrica, el ancho de banda espectral y la linealidad fotometrica.Para no tener problemas de incertidumbre, se puede utilizar un filtro de xido de holmio. Los metodos espectroscpicos de anlisis miden principalmente la absorcin de la luz para poder determinar cuantitativa cualitativamente la cantidad de sustancia absorbente presente; los metodos que se basan en absorcion nos ayudan a determinar los contribuyentes de una mnuestra. Este equipo puede ser utilizado para distintpos tipos de analisis; dado que su funcin principal es ver el comportamiento de las transiciones electronicas que se llevan a cabo en una muestra cuando es sometida a una energia radiante o de la luz visible. Vega Villalobos Diana____________________

Bibliografa: Qumica Analtica Cuantitativa

Autores: R.A. Day, Jr. y A.L. Underwood Editorial: Prentice Hall Quimica Analtica Cuantitativa

Autores: James S. Fritz y George H. Schenk Editorial: Limusa, Mxico 1979