RESUMEN.

Formacin de cristales de oxalato de calcio en las plantas parece jugar un papel central en una variedad de funciones importantes, incluyendo el tejido la regulacin del calcio, la proteccin contra herbvoros, y la desintoxicacin de metales. Se estn acumulando pruebas para apoyar el cido ascrbico como el precursor primario para la biosntesis de oxalato. El cido ascrbico utilizado en la biosntesis de oxalato se sintetiza directamente dentro de la oxalato de calcio cristalina de acumulacin de clulas, llamado el idioblast cristal. Varias caractersticas nicas de la idioblast cristal han sido propuesto como factores que influyen en la formacin de oxalato de calcio. Estas caractersticas incluyen una abundancia de retculo endoplsmico (ER), protenas cidas, componentes del citoesqueleto y la matriz intravacuolar. Un nmero de mutantes defectuosos en diferentes aspectos de la formacin de cristales de oxalato de calcio se han aislado. Caracterizaciones celulares y bioqumicos de los diversos mutantes tienen mutaciones reveladas que afectan a la nucleacin de cristales, morfologa, distribucin, y / o cantidad. Tales mutantes sern herramientas tiles en continuos esfuerzos para descifrar los caminos de la formacin de cristales y la funcin de las plantas. Publicado por Elsevier Science Ireland Ltd.

INTRODUCCION. Los cristales de oxalato de calcio planta es considerada una de los primeros objetos de informes, fueron vistos bajo una luz microscopio [1]. Dado que este informe inicial, cristales de oxalato han sido encontrados en la naturaleza. Ellos han sido observado [2] en las rocas, el suelo, y entre varios miembros del de todos los cinco reinos (Monera, Protista, Hongos, Plantae y Animalia). En todos los casos, los cristales son

formada a partir de calcio derivado del medio ambiente y desde sintetizado biolgicamente oxalato. En las plantas, la deposicin de oxalato de calcio es comn. Los miembros de ms de 215 familias de plantas acumulan Cristales dentro de sus tejidos [3]. Oxalato-producir plantas, que incluyen muchas plantas de cultivo, se acumulan oxalato en el rango de 3? / 80% (w / w) de su peso en seco. Hasta el 90% del calcio total de una planta puede ser encontrado como la sal de oxalato de [4? / 7]. Los cristales han sido observado en prcticamente todos los tejidos de una planta. en cualquier tejido que se encuentran los cristales, lo ms a menudo acumularse dentro de las vacuolas de las clulas especializadas denominadas idioblastos cristal [7]. Las plantas producen una variedad de cristales de oxalato de calcio formas y tamaos. La mayora de los cristales se pueden clasificar en uno de cinco categoras, en funcin de su morfologa: cristal arena, rafidios, drusa, estiloides, y prismticas [8]. Por lo general, la morfologa de un cristal, as como su espacial distribucin, se conserva dentro de taxones especficos. varios funciones para la formacin de cristales en las plantas han sido propuesta, sobre la base de tales propiedades [8]. Esta revisin delinear las formas en que las zancadas hecho en estudios recientes contribuir a nuestro entendimiento actual de formacin de oxalato de calcio y sus funciones en las plantas. Informacin adicional est disponible para obtener una comprensin ms completa de oxalato de calcio

en las plantas de los comentarios anteriores [5,7? / 12].

Funciones propuestas de oxalato de calcio

La diversidad de formas de cristal y tamaos, as como su prevalencia y distribucin espacial, han llevado a un nmero de hiptesis sobre la funcin de cristales en plantas. Las funciones propuestas incluyen la regulacin del calcio, equilibrio inico (por ejemplo, sodio y potasio), planta la proteccin, el apoyo del tejido (rigidez de la planta), la desintoxicacin (por ejemplo, metales pesados o cido oxlico), y la captacin de luz y la reflexin [8]. A pesar de la evidencia en apoyo de muchos de estas hiptesis que an falta, apoyo para un papel en regulacin de los tejidos el calcio, proteccin de plantas, y de metal desintoxicacin ha ido en aumento.

la regulacin del calcio

Se ha propuesto que la funcin primaria de la idioblast cristal es la de servir como un disipador de calcio localizada (Fig. 1) para reducir la concentracin de calcio apoplsica alrededor de las clulas adyacentes [11,13? / 15]. Los estudios realizados en apoyo de esta hiptesis han demostrado, utilizando una variedad de plantas, que el tamao y nmero de cristales de oxalato de calcio son sensible a los cambios en la concentracin de calcio en

el entorno de la planta [13? / 17]. Varios informes recientes [18? / 24] apoyan el papel de formacin de oxalato de calcio en regulacin del calcio. Dos de estas memorias examinadas si los cristales de diferentes morfologas haban variando sensibilidad a las fluctuaciones en las concentraciones de calcio [20,23]. Usando el rafidios y drusa acumulacin Planta de agua, Pistia stratiotes, Volk y sus colegas propusieron que drusa y la formacin de cristales rafidios sirven diferentes pero relacionados funciones. Los autores presentaron evidencia que indica que rafidios (en forma de aguja) crystal formacin puede servir una doble funcin de la regulacin del calcio y la defensa de la planta, mientras que la formacin de cristales (en forma globular) drusa est estrictamente implicada en la regulacin del calcio [23]. Se encontr la formacin de cristales drusa ser dinmico y sensible a las fluctuaciones de calcio niveles. Cuando los niveles de calcio son altos, cristal drusa tamao y el nmero aumentaron rpidamente. Cundo fue el calcio limitar, tamao del cristal drusa y el nmero disminuy, presumiblemente, liberando el calcio para su utilizacin por la planta. La desaparicin de los cristales en los tejidos bajo condiciones de deficiencia de calcio y el crecimiento activo tiene ha informado en un nmero de plantas [9,15,17,25? / 27]. en Adems, Volk y sus colegas identificaron un putativo enzima, utilizando un anticuerpo oxalato oxidasa, que puede desempear un papel en la degradacin del oxalato liberado. este antgeno era abundante en el idioblast cristal bajo

las condiciones de crecimiento de las plantas de prescripcin de calcio, y fue ausente en condiciones de crecimiento de la disponibilidad de calcio

Proteccin de las plantas

Obras recientemente publicadas [28? / 32] han citado un papel para la formacin de cristales en la proteccin de plantas, basado principalmente en parmetros temporales, espaciales y / o morfolgico de la formacin de cristales. Dos estudios han informado que la acumulacin de cristales de oxalato de calcio se increment en hojas de Sida rhombilfolia [33] y las semillas de Noruega abeto [29], en respuesta a la herbivora o tejido artificial hiriendo. Por lo tanto, en algunas plantas, oxalato de calcio formacin parece ser una respuesta de defensa inducible. En un estudio gacela herbvoros [30,34], los autores cuenta de que slo las puntas de las hojas de los lirios del desierto eran consumido. Tras el examen microscpico de las hojas, se hizo evidente que las puntas eran las nicas reas de la hoja desprovista de cristales rafidios [34]. Ruiz et al. [31] en comparacin con la cantidad de oxalato de calcio de las plantas acumulada a la cantidad de herbvoros que se produjo en un lugar determinado. Lirios del desierto en tres diferentes ubicaciones (valle Ardon, Neqarot can, y Machmal valle) se estudiaron. Los autores encontraron que los lirios

que se hicieron crecer en los lugares donde era el pastoreo alto contena la mayor cantidad de cristales, mientras que los que se hicieron crecer en lugares donde era pastoreo mnima acumulada pocos cristales, si los hay,. Recorte o hiriendo a las hojas de las plantas, sin embargo, no dio lugar a una aumento en la acumulacin de oxalato de calcio, lo que indica que la formacin de cristales no era inducible en este caso. Por lo tanto, parece que la formacin de cristales en ese estudio era un proceso de desarrollo programado, y que la formacin de cristales puede haber estado bajo el selectiva presin de herbivora [31]. Investigaciones [35/39]? En brotes de contacto dermatitis entre los trabajadores de campo y los procesadores, como resultado en el descubrimiento de una relacin entre la presencia de cristales de oxalato de calcio y las erupciones cutneas. La agujas rafidios de oxalato de calcio perforaron la piel de los trabajadores que permiten la savia de las plantas para entrar en el cuerpo en el sitio de la herida. Ejemplos de tales drmica irritaciones se inform a ser comn en la flor creciente [35,36] y las industrias de destilera [38], donde un abundancia de agujas rafidios se libera durante el la recoleccin y procesamiento de tejidos de la planta. El agave jugo que se utiliza para hacer tequila se ha informado que contener hasta 6.000 cristales / ml [38].

La desintoxicacin de metales pesados

Varios estudios han demostrado que las plantas utilizan orgnica cidos (por ejemplo, citrato, malato, y / u oxalato) como mecanismos lo que les permite tolerar diferentes metales pesados [40]. Algunas plantas utilizan oxalato de desintoxicar peligrosos metales, como el plomo [41], de aluminio [42], estroncio [43,44], y el cadmio [45], cuando estn presentes en el medio ambiente. Los estudios han indicado que la aplicacin exgena de tales metales en el entorno de la planta a menudo resulta en la incorporacin de los metales pesados en oxalato cristales [43? / 46]. En suelos cidos (aproximadamente el 40% de la tierra cultivable del mundo), la toxicidad del aluminio es un importante problema que limita la produccin de cultivos [47]. micromolar concentraciones de aluminio pueden inhibir el crecimiento de races y afectar a la adquisicin de nutrientes y agua. este reduccin de la funcin de la raz es un problema importante en la la produccin de muchos cultivos importancia agrcola especies [42,48]. Dos mecanismos de utilizacin de oxalato, la exclusin y la tolerancia interna, se han desarrollado en las plantas para que puedan resistir la toxicidad del aluminio [48,49]. la mecanismo de exclusin implica la excrecin de oxalato en el medio ambiente por las races y se produce en respuesta al estrs de aluminio externa [46]. El interno mecanismo de tolerancia implica el secuestro de

de aluminio en forma no txica de aluminio-oxalato dentro de la parte area de la planta [50]. Plantas como trigo sarraceno utilizar ambos mecanismos de desintoxicacin de aluminio.

oxalato biosntesis

Una serie de vas para la produccin de oxalato tienen ha planteado la hiptesis. Estas vas incluyen la escisin de isocitrato, hidrlisis de oxaloacetato, glicolato / glioxilato la oxidacin, y / o escisin oxidativa de L-ascrbico cido [2]. Mediciones bioqumicas, utilizando radiomarcada precursores, admiten una divisin C2/C3 de cido ascrbico como una va importante de la produccin de oxalato [51? / 57]. Recientemente, se ha renovado el inters por el ascorbato como el precursor de la biosntesis de oxalato. Mediante la incorporacin microautoradiography en el radiotrazador estudios, los investigadores han fortalecido esta propuesta [58? / 60]. En estos estudios, se introdujeron compuestos radiomarcados en cultivos de Pistia stratiotes plntulas [58], Yucca torreyi races [59] cristal Pistia, o aisladas idioblastos [60]. El radiomarcaje se incorpor en los cristales de oxalato cuando se suministra en forma de C1ascorbato etiqueta [58,59] o un precursor que lleva a C1etiqueta ascorbato [60]. Tomados en conjunto, estos estudios cido ascrbico sugerido como el precursor de cido oxlico

produccin, y por otra parte, que el precursor de ascorbato es ms probable producido dentro del propio cristal idioblast [60] a travs de la va de Wheeler-Smirnoff [61,62]. la presencia de L-galactono-g-lactona deshidrogenasa dentro de la mitocondria de la idioblast cristal, la enzima responsable de la conversin de L-galatonolactone a cido ascrbico, apoya estos resultados [63].

Oxalatos plantas y la salud humana

Oxalato en los alimentos vegetales impactos en la salud humana en al menos dos maneras significativas [2,5,95]. En primer lugar, es un oxalato antinutrientes, ya que hace que el calcio disponible para la absorcin nutricional por los seres humanos [96,97]. Este nmero de biodisponibilidad de calcio es importante cuando se tiene en cuenta la dependencia de las diferentes poblaciones de todo el mundo en alimentos vegetales como su principal fuente de calcio y otros minerales, as como el fracaso de muchas personas en el Estados Unidos para satisfacer la cantidad diaria recomendada (RDA) para la ingesta de calcio. En segundo lugar, oxalatos solubles Se ha demostrado que suponen un peligro en algunos casos, cuando ingeridas por el ganado de pastoreo [98] y los seres humanos [95,99,100]. Desde la dcada de 1940 a travs de la dcada de 1970, la planta de oxalato de acumulacin halogeton se consider uno de los venenosa econmicamente ms destructiva las plantas [98]. El consumo de grandes cantidades de esta planta,

lo que puede ocurrir durante el pastoreo, como resultado grandes prdidas de las ovejas y el ganado. La causa de la muerte fue atribuible a la formacin de cristales de oxalato de calcio en las paredes del rumen, arterias y riones (clculos renales). Prosiguen los esfuerzos para rastrear germoplasma [101] y evaluar cuidadosamente las condiciones de crecimiento de las plantas [102? / 104] en para producir cultivos con menores niveles de oxalato en tejidos comestibles. La evidencia reciente indica que gentica manipulacin para reducir el contenido de oxalato en planta alimentos es otra alternativa viable [93]. Ejemplos de algunos de los alimentos vegetales que contienen sustancial cantidades de oxalato son las espinacas, el ruibarbo, y frijoles secos [5,27,101,105]. Una mejor comprensin de los mecanismos regulacin de la formacin de oxalato de calcio en las plantas podra dar lugar a estrategias para mejorar la nutricin composicin de alimentos de origen vegetal.

conclusin

Aunque todava queda mucho por descubrir sobre formacin de cristales de oxalato de calcio y la funcin en las plantas, los ltimos informes indican que se est avances hecho. Los estudios indican que la va de oxalato la biosntesis utiliza ascorbato como el precursor principal, y que el ascorbato utilizado se produce directamente

dentro de la propia idioblast cristal. Planta de produccin de oxalato parece servir diversos roles funcionales que proteger a la planta de sucumbir a una variedad de medioambiental destaca como la herbivora o exceso metales en el suelo en el que crece. resultados recientes sugieren que la manipulacin de la cantidad y espacial distribucin de la formacin de oxalato de calcio es factible. Mejoras en la produccin (por ejemplo, mediante la mejora de la planta defensa) y la mejora de la calidad nutricional de los cultivos plantas (por ejemplo, mediante el aumento de la biodisponibilidad de calcio) pueden pronto ser posible a travs de la manipulacin de calcio formacin de cristales de oxalato.

Aislamiento de mutantes de formacin de oxalato de calcio

Para complementar las bioqumicas y celulares Se han hecho esfuerzos investigaciones para identificar un sistema gentico adecuado para estudiar la formacin de oxalato de calcio. Un informe reciente [89] que ofrece el modelo de leguminosas Medicago truncatula, como tal, un sistema. Los principales atributos de M. truncatula incluye el tiempo de generacin corto, pequeo tamao del genoma (de tres a cuatro veces el tamao de Arabidopsis), capacidad de ser transformado, autgama y diploides naturaleza, y el patrn espacial de cristales de oxalato de calcio formacin [90]. Por inspeccin visual de un SGA-mutado Poblacin de M. truncatula, mutantes han sido

identificado que difieren en el contenido de cristales de oxalato de calcio, distribucin espacial, nmero y morfologa [89,91]. Como se prevea anlisis, gentica de los diferentes mutantes indica que la formacin de cristales es un proceso complejo participacin de mltiples loci [89,91].

Las alteraciones en el contenido de oxalato de calcio

Se aislaron una serie de mutantes de un mutagenizado Poblacin de M. truncatula que mostr una alteracin en el contenido de oxalato de calcio. Dos de las ms extremas mutantes en este sentido fueron c alcium o xalate d efective 4 (cod4) y cod5 [89]. El cod4 mutante acumulada ms oxalato de calcio, mientras que cod5 acumula menos oxalato de calcio que los controles (Fig. 3A). De tipo salvaje M. plantas truncatula acumulados a lo largo de cristales prismticos los haces vasculares en todos los diferentes tejidos de la planta con la excepcin de races, en el que no hay cristales se observado. Las mediciones de contenido de oxalato en la

cod4 diferentes tejidos mostraron elevada oxalato tejido niveles como resultado de la acumulacin de cristal drusa. El contenido de calcio, sin embargo, no aument en proporcin para el aumento de oxalato (Fig. 3B). Por lo tanto, ms de el calcio tejido se reparti en el cristalino se forman en las hojas y tallos de cod4 que los controles. Mediciones de biomasa y la clorofila mostraron que la cod4 mutacin tambin dio como resultado una reduccin global de crecimiento de las plantas y el contenido de clorofila [92]. En contraste, no se detectaron cristales prismticos en cualquier de los diferentes tejidos del mutante cod5. mediciones del contenido de oxalato en los diferentes tejidos confirm el fenotipo cristal cod5 exhibiendo bajos niveles de oxalato en comparacin con los de los controles. aunque comprometidos en su capacidad de acumular cristales de oxalato de calcio, cod5 exhibi un crecimiento similar a la de los controles [93]. Por otra parte, cod5 y los controles contenidos cantidades similares de calcio (Fig. 3B), sodio, y potasio [93]. Estos hallazgos sugieren que el calcio formacin de cristales de oxalato no es esencial para la planta crecimiento o desarrollo en el caso de M. truncatula.