CTEDRA DE BIOLOGA

Apunte Terico: COMPARTIMENTACIN CELULAR SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS

Lic. Valeria Caramuti 2006

LA CLULA EUCARIOTA Y LA COMPARTIMENTACIN A diferencia de la clula procariota, que generalmente consta de un solo compartimiento rodeado por la membrana plasmtica, la clula eucariota est subdividida en compartimientos rodeados por membrana, que son funcionalmente distintos. Cada compartimiento u orgnulo (u organela) contiene su propia dotacin de enzimas, otras molculas especializadas y un complejo sistema de distribucin que transporta especficamente los compuestos de un compartimiento a otro. Por lo tanto, la compartimentacin, o subdivisin celular en compartimientos, conduce a la especializacin funcional. Las protenas confieren a cada compartimiento sus propiedades estructurales y funcionales. Catalizan las reacciones que tienen lugar en cada orgnulo y transportan selectivamente pequeas molculas hacia dentro y hacia fuera del interior del orgnulo o lumen. Tambin actan como marcadores especficos de superficie de las organelas que dirigen el destino de protenas y de lpidos al orgnulo apropiado. Todas las clulas eucariotas tienen la misma dotacin bsica de orgnulos rodeados de membrana. Muchos procesos bioqumicos vitales ocurren en, o sobre, superficies de membrana. Por ejemplo, el metabolismo lipdico catalizado por enzimas unidas a membranas; o la fosforilacin oxidativa (formacin de ATP) y la fotosntesis, que requieren de una membrana semipermeable para acoplar el transporte de protones H+ con la sntesis del ATP. Dado que la bicapa lipdica de los orgnulos de membrana es impermeable a la mayora de las molculas hidroflicas, la membrana de cada orgnulo ha de disponer de protenas transportadoras encargadas de la importacin o exportacin de determinados metabolitos. Asimismo, ha de tener un mecanismo de importacin y de incorporacin al orgnulo de las protenas caractersticas de dicho orgnulo. En la Fig. 1 se muestran los principales compartimentos de la clula eucariota vegetal.

Figura 1: Esquema de una clula eucariota vegetal.

Los dos compartimentos ms importantes son: ) el ncleo con el genoma, en donde se sintetizan el ADN (replicacin) y el ARN (transcripcin) ) el citoplasma, que a su vez comprende las distintas organelas y el citosol, ste ltimo responsable de la mitad del volumen celular, lugar de sntesis de las protenas, y donde se desarrolla el metabolismo intermediario (molculas pequeas que son degradadas y sntesis de pequeas molculas). En cuanto a las organelas, cada una tiene una posicin caracterstica que depende de la interaccin con el citoesqueleto, por ejemplo el Aparato de Golgi est cerca del ncleo y el retculo endoplasmtico se extiende desde el ncleo por todo el citosol, ambos dependen de la red de microtbulos del citoesqueleto. A su vez, en el citosol se encuentran los siguientes organelos membranosos: Retculo endoplasmtico (RE): representa la mitad del rea total de membrana. Se subdivide en: - Retculo endoplasmtico rugoso (RER): con ribosomas para la sntesis de protenas integrales de membrana o de protenas solubles de secrecin intra o extracelular. - Retculo endoplasmtico liso (REL): produce lpidos y almacena Ca++. Complejo de Golgi: recibe lpidos y protenas del RE y las distribuye a los distintos destinos intracelulares, generalmente modificndolos covalentemente durante el viaje. Lisosomas: con enzimas digestivas que degradan orgnulos y macromolculas, y partculas del exterior captadas por endocitosis. Endosomas: compartimentos con partculas endocitadas que van en camino hacia los lisosomas. Vacuolas: de mayor desarrollo en clulas vegetales, en las que cumplen mltiples funciones. Peroxisomas o microcuerpos: con ezimas que participan en reacciones oxidativas. Mitocondrias y cloroplastos (estos ltimos slo en cl. vegetales): generan la mayor parte del ATP que se utiliza para desplazar las reacciones biosintticas que requieren aporte de energa libre. En general, cada orgnulo rodeado por membrana realiza el mismo tipo de funciones bsicas en todos los tipos celulares. No obstante, para poder cumplir las funciones especializadas de las clulas de los organismos pluricelulares, estos orgnulos varan en abundancia y pueden tener propiedades adicionales que difieren de un tipo celular a otro. Entonces: La compartimentacin crea una superficie extra de membrana a la vez que crea espacios separados del citosol dando a la clula espacios acuosos funcionalmente especializados, con composicin particular merced a las protenas transportadoras de su membrana. La relacin topolgica 1 de los orgnulos rodeados de membrana puede ser interpretada a partir de sus orgenes evolutivos.
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La relacin de las superficies.

Los precursores de las primeras clulas eucariotas habran sido organismos parecidos a bacterias (de clulas procariotas), las cuales tienen membrana plasmtica pero no membranas internas. En estas clulas, por lo tanto, la membrana plasmtica realiza todas las funciones dependientes de membrana, como el bombeo de protones, la sntesis de ATP y la sntesis de lpidos. No obstante, las clulas eucariotas actuales tienen una dimensin lineal entre 10 y 30 veces mayor y un volumen entre 1.000 y 10.000 veces mayor que una bacteria tpica. La profusin de membranas internas, entonces, surgi como adaptacin al incremento de tamao: las clulas eucariotas tienen una relacin entre superficie y volumen ( s ) mucho menor, de forma que v probablemente el rea de su membrana plasmtica es demasiado pequea para contener la gran cantidad de funciones vitales ligadas a membrana que precisa. El extenso sistema de membranas intracelulares de una clula eucariota compensa ese desequilibrio. Evidentemente, la evolucin de las membranas internas ha sido paralela a la especializacin de sus funciones. Estas zonas especializadas de la membrana plasmtica, por invaginacin, da varios de los orgnulos de la clula eucariota, como por ejemplo el retculo endoplasmtico, complejo de Golgi, lisosomas, endosomas y vesculas de transporte. Todas estas estructuras tienen un interior topolgicamente equivalente al exterior de la clula. Su interior se conecta entre s y con el exterior celular por la va del transporte vesicular y la secrecin. Mitocondrias y plastos (como los cloroplastos) son organelas que difieren de las restantes en que tienen su propio genoma (ADN) de tipo procariota que, sumado a la estrecha similitud entre las protenas de estos orgnulos y las de algunas bacterias actuales, evidencia su origen en bacterias fagocitadas por otras de mayor tamao, con las que inicialmente vivieron en simbiosis (Teora Endosimbitica). La membrana interna de estas organelas corresponde a la membrana original de las bacterias, mientras que el lumen evolucion a partir del citoplasma bacteriano. Como podra esperarse de su origen endoctico, estas dos organelas estn formados por una doble membrana y permanecen aisladas del extenso trnsito vesicular que conecta a la mayora de los organelos entre s y con el exterior celular. El ncleo tiene una doble membrana o carioteca, que se habra formado por invaginacin profunda de la membrana plasmtica desde el mesosoma 2 de la clula procariota. As se explica por qu el compartimento nuclear es topolgicamente equivalente al citosol. En las clulas eucariotas, durante la mitosis la carioteca se desintegra y el contenido nuclear queda en contacto con el citosol, como no ocurre con ningn otro orgnulo. El espacio entre ambas membranas es topolgicamente equivalente al exterior celular y es continuo con el lumen del RE. De esta manera podemos dividir a los principales compartimentos celulares en cuatro grupos: 1. Ncleo y citosol: conectados por los complejos de poro nuclear, por lo que son topolgicamente continuos (a pesar de ser funcionalmente diferentes). 2. Orgnulos que actan en rutas de secrecin y de endocitosis: RE, complejo de Golgi, endosomas, lisosomas y vesculas de transporte (ms vacuolas en clulas vegetales). El conjunto de estas estructuras constituye el Sistema de Endomembranas (SE) o Sistema Vacuolar Citoplasmtico (SVC).
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Sitio de unin especfico para la molcula de ADN en la membrana plasmtica de la clula procariota.

3. Mitocondrias y posiblemente peroxisomas 4. Plastos en vegetales

SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS Observado con el microscopio ptico, el citoplasma de casi todas las clulas vivas parece relativamente desprovisto de estructura. Pero a partir del desarrollo del microscopio electrnico en la dcada del 1940, se pudo conocer la subdivisin del citoplasma en compartimentos rodeados por barreras membranosas. A los estudios con microscopa electrnica se le sumaron investigaciones bioqumicas en distintos tipos de clulas y as se demostr que las estructuras membranosas del citoplasma formaban las distintas organelas ya citadas, identificables en diversas clulas, desde levaduras hasta plantas y animales evolutivamente desarrollados. El sistema de endomembranas (SE) o sistema vacuolar citoplasmtico (SVC), es un sistema tridimensional de tubos, cisternas (bolsas aplanadas) y vesculas de diferentes formas, constituidas por membranas con estructura y composicin qumica semejantes a la membrana plasmtica. Dividen al citoplasma en dos compartimentos: el de la matriz citoplasmtica o citosol y el contenido dentro del sistema de endomembranas. Estos dos compartimentos contienen volmenes similares y se comunican entre s por mecanismos semejantes a los que existen entre la clula y el medio externo, a travs de la membrana plasmtica. Estas membranas tambin presentan permeabilidad selectiva. Tiene funciones comunes en todas sus partes, como: 9 Compartimentalizacin del citoplasma y en particular, de los distintos sistemas enzimticos. 9 Realizar intercambios con el citosol por permeabilidad selectiva de sus membranas. 9 Proporcionar vas de conduccin intracelular para diversas sustancias. 9 Contribuir al sostn y mantenimiento de la estructura celular. Los compartimentos del SE tienen diferente concentracin de solutos que el citosol y se establecen gradientes de concentracin debidos a canales especiales o bombas selectivas que estn en sus membranas y que son diferentes de los que estn en la membrana plasmtica. La disposicin de las cavidades del SE entre s y en relacin a los otros componentes celulares vara, dando como resultado distintos conjuntos de estructuras membranosas, con formas y distribuciones caractersticas. Su ubicacin en la clula se debe a que estn en relacin con el citoesqueleto. El SE est constituido por las organelas membranosas conocidas como: Retculo endoplasmtico liso (REL). Retculo endoplasmtico rugoso (RER). Complejo de Golgi. Lisosomas, vacuolas (de mayor desarrollo en clulas vegetales), endosomas (estos ltimos en las clulas animales) y vesculas de secrecin. Envoltura nuclear. Todas estas organelas estn relacionadas estructural y funcionalmente. Figura 2.

Figura 2: Distintos compartimentos del Sistema de Endomembranas. Las mitocondrias y los plastos de las clulas vegetales son organelas membranosas con un origen diferente y por lo tanto no forman parte del SE. En cuento a los peroxisomas su pertenencia o no a este sistema es discutido. RETCULO ENDOPLASMTICO El Retculo Endoplasmtico (RE) se divide en dos categoras: Retculo Endoplasmtico Rugoso (RER) y Retculo Endoplasmtico Liso (REL). Ambos retculos constituyen un sistema de membranas que encierran un espacio. En consecuencia, el contenido lquido del citoplasma est dividido por el RE en dos compartimentos: un espacio encerrado dentro de sus membranas, denominado espacio luminar o cisternal, y la regin situada por fuera de las membranas, que es el espacio citoslico. La distincin morfolgica entre RER y REL consiste en la presencia de ribosomas unidos en el primero y ausencia de los mismos en el ltimo. Cuando estn presentes siempre se encuentran en la superficie que enfrenta el espacio citoslico. El RER aparece como una organela membranosa extensa compuesta principalmente de sacos aplanados (cisternas). Los elementos membranosos del REL son tpicamente tubulares y forman un sistema interconectado de tuberas que se incurvan a travs del citoplasma en el cual se presentan. Diferentes tipos de clulas tiene cantidades notablemente distintas de un tipo de RE o del otro, segn las actividades de la clula. Retculo Endoplasmtico Rugoso El RER est ntimamente ligado a la sntesis proteica, encontrndose presente en la mayora de las clulas, al menos en alguna etapa de su vida.

El RER est usualmente formado por sistemas de cisternas amplias (bolsas aplanadas), paralelas entre s, con una disposicin ordenada, formando pilas de membranas que a veces se comunican directamente por delgados tbulos membranosos. Las dependencias de este sistema vacuolar tambin se comunican indirectamente a travs de vesculas membranosas que se desprenden de alguna regin (gemacin) y se fusionan en otra. De esta manera, se transfieren de un lado a otro fragmentos de membranas y sustancias contenidas en su interior. El RER se caracteriza por tener ribosomas adosados a la cara externa de sus membranas, es decir, del lado de la matriz citoplasmtica. Los ribosomas son estructuras granulosas, desprovistas de membrana, formados por distintas molculas de cidos ribonucleicos (ARN) y protenas, y son parte fundamental de la maquinaria para la sntesis proteica. Las protenas se pueden dividir en dos clases, segn el sitio donde se ensamblen en la clula: 1. Un tipo de polipptido se ensambla en los ribosomas unidos a la superficie externa (citoslica) de las membranas del RER. Este tipo incluye: a. Protenas secretadas por la clula, por ejemplo enzimas digestivas del pncreas b. Protenas integrales de membrana c. Protenas de ciertos organelos, incluyendo el complejo de Golgi, lisosomas, endosomas y vacuolas de plantas. 2. El otro tipo de protenas se ensambla en ribosomas libres y posteriormente se libera en el citoplasma. Este tipo incluye: a. Protenas destinadas a permanecer en el citoplasma (como las enzimas glucolticas o las protenas del citoesqueleto). b. Protenas perifricas de la superficie interna de la membrana plasmtica (como espectrinas y anquirinas, que slo se unen dbilmente a la superficie de la membrana). c. Protenas que normalmente se encuentran en corpsculos microscpicos, cloroplastos y mitocondrias. Este ltimo grupo de protenas se sintetizan en el citoplasma y luego se importan totalmente formadas a travs de la membrana interior del organelo apropiado. Cmo identifica la clula estos dos tipos de protenas y delimita sus sitios de sntesis? La sntesis de una protena en un ribosoma rodeado de membrana o en un ribosoma libre depende de la informacin contenida en la porcin N-terminal del polipptido, que es la primera parte que surge del ribosoma durante la sntesis proteica. Las protenas secretorias contienen una secuencia de seales especial en el N-terminal que provoca la unin del ribosoma con una membrana del RE y el desplazamiento del polipptido naciente al interior del espacio cisternal del RE. Esta hiptesis, conocida como hiptesis de la seal, ha sido apoyada por numerosas pruebas experimentales. La estructura del RE es ideal para cumplir su papel como sitio de entrada a la va biosinttica de la clula. Su membrana proporciona una gran superficie sobre la cual se pueden fijar muchos ribosomas. La luz del RE proporciona un ambiente local que favorece el plegamiento y ensamblado correctos de protenas y un compartimiento donde pueden separarse protenas secretorias, lisosmicas y vacuolares de otras protenas recin sintetizadas. El aislamiento de protenas recin sintetizadas en las cisternas del RE prcticamente las elimina del citoplasma y permite enviarlas a su destino final. Este proceso es un claro ejemplo del papel de las membranas en la

compartimentacin del espacio dentro de la clula de modo que puedan separarse los diferentes tipos de actividades. Biosntesis de membranas en el retculo endoplasmtico Las membranas no se originan de novo, sino que se originan de membranas preexistentes. Las protenas y lpidos recin sintetizados se introducen continuamente a las membranas ya existentes, proceso que en su mayor parte ocurre en el RE. Conforme la membrana se desplaza a travs de la clula, las enzimas que residen en los diferentes compartimientos de la clula modifican su composicin de diferente manera. Por lo tanto, aunque la membrana pueda fluir por medio de vesculas desde el RE, a travs del complejo de Golgi hacia la membrana plasmtica, las membranas que constituyen cada uno de estos compartimientos tienen su propia composicin nica y mantienen su identidad propia. Este flujo continuo de membranas se da por procesos de gemacin y fusin de vesculas, desde el RE, hacia el Golgi, hasta la membrana plasmtica. Recordemos que las membranas celulares son asimtricas. Esta asimetra se establece inicialmente en el retculo endoplasmtico conforme lpidos y protenas se incorporan a la bicapa. Como resultado, los componentes situados en la superficie cisternal de la membrana del RE se pueden identificar en la superficie luminar de las vesculas de transporte, la superficie luminal de las cisternas del Golgi y la superficie externa (exoplsmica) de la membrana plasmtica. Retculo Endoplasmtico Liso El REL est muy desarrollado en clulas de tejidos animales como las del msculo esqueltico, tbulos renales y glndulas endcrinas productoras de esteroides. En tejidos vegetales es abundante en clulas epidrmicas que producen cutina y suberina para la pared celular; en clulas del tapete de las anteras que fabrican derivados carotenides; o en clulas ricas en cromoplastos que requieren de la sntesis de carotenoides y de xantfilas. Dentro de sus funciones se encuentran: - Sntesis de la mayora de los lpidos de las organelas, vesculas y membrana plasmtica, incluyendo los lpidos de las membranas de las mitocondrias y de los peroxisomas. Adems all se encuentran las enzimas para la sntesis del colesterol y tambin algunas que lo modifican para dar lugar a hormonas esteroideas. - Detoxificacin en el hgado de gran variedad de compuestos orgnicos, incluyendo, por ejemplo, barbitricos y etanol. - En las clulas animales grandes reservas de glucgeno se encuentran almacenadas en el hgado en forma de grnulos o rosetas unidas a la superficie externa de las membranas del REL. Cuando se requiere energa se produce la degradacin del glucgeno (glucogenlisis), liberndose glucosa. - A travs de sus membranas se producen intercambios inicos activos y pasivos y se crean diferencias de potencial elctrico y de concentracin de iones. Estos gradientes y potenciales son motores del movimiento de otras molculas, posibilitando funciones tan importantes como la contraccin muscular o la secrecin de hormonas. En el msculo, por ejemplo, hay una bomba de Ca++ propia del REL que puede acumular altas concentraciones de Ca++ en las vesculas. La rpida liberacin de Ca++ posibilita las contracciones del msculo esqueltico.

COMPLEJO DE GOLGI El complejo de Golgi tiene una morfologa caracterstica que consiste en pilas de cisternas aplanadas, paralelas (3 a 7), concntricas, que generalmente tienen una curvatura, presentando una cara cncava y otra convexa, estando relacionados con vesculas y tbulos. Las cisternas, limitadas por una membrana, tienen dimetros de entre 0.5 a 1.0 m. En las clulas vegetales, una sola pila de Golgi casi siempre se denomina dictiosoma. Puesto que las membranas del Golgi estn desprovistas de ribosomas se clasifican como membranas lisas. Las cisternas que constituyen las pilas del Golgi tienen una orientacin polarizada; las ms prximas al ncleo y RE, convexas, se consideran de la cara cis (tambin llamada de entrada o de formacin), en tanto que las cisternas del extremo opuesto de la pila, cncavas, se encuentran en la cara trans (tambin llamada de salida), siendo la composicin diferente de un extremo al otro. La cara trans se considera la cara de maduracin o de produccin por gemacin de vesculas de secrecin. Ambas caras estn estrechamente asociadas a unos compartimentos especiales, formados por una red de estructuras tubulares y cisternas: la red del cis Golgi (RCG), o compartimento intermediario y la red del trans Golgi (RTG), respectivamente. Las protenas y los lpidos entran por la red del cis Golgi en agrupaciones tbulo-vesiculares que proceden del RE y salen por la red del trans Golgi en vesculas de transporte con destino a la superficie celular o a otro compartimiento. Se cree que ambas redes son importantes en la clasificacin de las protenas. La protenas que entran en la RCG pueden o bien seguir a travs del Golgi o volver al RE. Las protenas que salen de la RTG pueden seguir hacia delante y ser clasificadas para cualquier sitio al que sean destinadas, como lisosomas, vesculas de secrecin o la superficie celular, o bien ser devueltas al compartimiento anterior. Una clula individual puede contener desde unas cuantas hasta varios miles de pilas de cisternas, segn el tipo de clula. Por ejemplo, el complejo de Golgi es particularmente abundante en clulas jvenes metablicamente muy activas; all actan como orgnulos secretores de materiales para la formacin de la membrana plasmtica durante la divisin celular y de polisacridos estructurales de la pared celular, constituyendo las vesculas que al confluir formarn el fragmoplasto. En cuanto a sus funciones, el complejo de Golgi es el lugar donde se realiza la mayora de la sntesis de carbohidratos, incluyendo la pectina, hemicelulosa y celulosa de las paredes celulares de las plantas; la mayora de los proteoglicanos que son secretados para formar la matriz extracelular animal y/o sustancia intercelular de tejidos animales; y de los carbohidratos que, quedando unidos a la membrana plasmtica, forman el glucoclix. Tal como se mencion, el Golgi tambin es el lugar de clasificacin y distribucin de productos del RE, envindolos principalmente a la membrana plasmtica, a los lisosomas o formando vesculas de exportacin de productos (secrecin). Una gran parte de los glcidos que fabrica el Golgi se unen como cadenas de oligosacridos a las protenas y lpidos que el RE le enva. Algunos de estos oligosacridos actan como seales que dirigen determinadas protenas hacia vesculas que las enviarn a los lisosomas. No obstante, la mayora de las protenas y lpidos, una vez adquiridos los oligosacridos apropiados en el complejo de Golgi, son reconocidos por otros mecanismos y dirigidos mediante vesculas de transporte a otros destinos. (Figura 3)

En resumen, algunas funciones del Golgi son: 9 Distribucin de los productos del RE, y direccionamiento, especialmente de protenas, a las diferentes organelas, a la membrana plasmtica y al exterior de la clula. 9 Glucosilacin (o adicin de oligosacridos) de protenas y de lpidos. 9 Sntesis de polisacridos de la pared celular de la clula vegetal. 9 Sntesis de proteoglicanos. 9 Concentracin y empaquetamiento de protenas de exportacin (a veces se almacenan). 9 Concentracin y empaquetamiento de enzimas hidrolticas, es decir formacin de lisosomas. 9 Provisin de membranas a travs de flujo permanente, desde el RE hacia la membrana plasmtica y tambin hacia otras organelas.

Figura 3: Esquema de un dictiosoma mostrando la cara de formacin (cis) y de maduracin (trans) y micrografa electrnica del mismo. 10

LISOSOMAS Los lisosomas son compartimientos delimitados por membrana rellenos de enzimas hidrolticas usadas para la digestin intracelular controlada de macromolculas. Contienen unos 40 tipos de enzimas hidrolticas, entre las que se encuentran proteasas, nucleasas, glucosidasas, lipasas, fosfolipasas, fosfatasas y sulfatasas. Todas ellas son hidrolasas cidas, cuya actividad ptima se expresa a un pH cercano a 5, que es el pH que se mantiene en el interior de los lisosomas. En este sentido el citosol est doblemente protegido contra el ataque de su propio sistema digestivo. Normalmente, la membrana del lisosoma mantiene las enzimas alejadas del citosol, pero incluso si se produce alguna fuga la dependencia cida de la actividad de estas enzimas protege el contenido del citosol, cuyo pH es de aproximadamente 7.2. Como en el caso de otros orgnulos intracelulares, el lisosoma no slo contiene una dotacin caracterstica de enzimas sino tambin una membrana envolvente caracterstica. Por ejemplo, la membrana lisosmica contiene protenas de transporte que permiten que se escapen los productos finales de la digestin de macromolculas, como los aminocidos, los azcares y los nucletidos, de tal manera que estos productos puedan ser excretados o reutilizados por la clula. Tambin contiene una bomba de protones que utiliza la energa de hidrlisis del ATP para bombear H+ al interior del lisosoma, manteniendo as el lumen a un pH cido. La mayora de las protenas de la membrana lisosmica estn altamente glucosiladas 3 , lo cual puede ayudar a protegerlas frente a las proteasas lisosmicas del lumen. Los lisosomas muestran una notable heterogeneidad en cuanto a su morfologa, lo cual contrasta con la uniformidad relativa de la mayora de los otros orgnulos celulares. La diversidad refleja la amplia variedad de funciones digestivas mediadas por las hidrolasas cidas, como la digestin de desechos intra y extracelulares, la digestin de microorganismos fagocitados e incluso la nutricin celular. Por esta razn, a veces se considera a los lisosomas como una coleccin heterognea de orgnulos distintos cuya caracterstica comn es un elevado contenido en enzimas hidrolticas. En las clulas animales, las rutas que llevan hacia los lisosomas desde la superficie celular empiezan con la endocitosis, mediante la cual las clulas captan macromolculas, sustancias particuladas y, en casos especiales, otras clulas. En este proceso, el material que va ser ingerido es rodeado progresivamente por una pequea porcin de la membrana plasmtica, que primero se invagina y luego se estrangula formando una vescula endoctica que contiene el material o partcula ingeridos. En funcin del tipo de vesculas que se forman, se pueden distinguir dos tipos de endocitosis: 1. Fagocitosis o ingestin celular: comprende la ingestin de grandes partculas, tales como microorganismos o restos celulares, mediante grandes vesculas o fagosomas (generalmente de dimetro mayor a 0.25 m). Este proceso lo llevan a cabo clulas fagocticas especializadas, como los neutrfilos y macrfagos, clulas sanguneas de los vertebrados. 2. Pinocitosis o bebida celular: implica la ingestin de fluidos y de solutos va pequeas vesculas, de un tamao de 0.1 a 0.2 m. La mayora de las clulas eucariotas ingieren continuamente fluidos y solutos por pinocitosis.

Unidas a oligosacridos.

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Este tipo de endocitosis se puede dividir de manera muy general en dos categoras: a. endocitosis a granel: consiste en la captacin de lquidos extracelulares que la superficie de la membrana no reconoce. Cualquier molcula, grande o pequea, incluida en el lquido tambin penetra a la clula. Puede ocurrir de manera continua en muchos tipos de clulas y su funcin primaria puede centrarse en la recuperacin de membrana plasmtica luego de perodos de secrecin o durante el ingreso de lquido extracelular. b. endocitosis mediada por receptores (EMR): consiste en la captacin de macromolculas extracelulares especficas (ligandos) luego de unirse a receptores en la superficie exterior de la membrana plasmtica. Proporciona un medio para la captacin selectiva y eficiente de macromolculas que pueden estar presentes en concentraciones relativamente bajas dentro del lquido extracelular. Constituye un mecanismo muy refinado destinado a llevar al interior de la clula una cantidad de molculas especficas, que en general son portadoras de un mensaje. Estas molculas pueden ser hormonas, factores de crecimiento, enzimas y protenas plasmticas, para los cuales las clulas cuentan con los receptores especficos. La Autofagia: constituye una tercer va que entrega materiales para su digestin en los lisosomas. Corresponde a la destruccin de partes obsoletas de la propia clula. El proceso de digestin supone que el orgnulo sea envuelto por membranas derivadas del RE, generndose un autofagosoma. Se cree que el autofagosoma se fusiona con un lisosoma (o un endosoma tardo). El proceso est altamente regulado, de forma que durante la remodelacin celular se pueden seleccionar diferentes componentes celulares y ser destinados a su destruccin. (Figura 4) ENDOSOMAS Las vesculas producto de la endocitosis, generalmente se fusionan con los endosomas, que son un conjunto de vesculas y tmulos presentes en las clulas de tipo animal. Los endosomas se dividen en dos tipos de compartimientos: los endosomas tempranos, que son los recin formados y estn cerca de la membrana plasmtica, y los endosomas tardos, ms alejados de la membrana plasmtica. Son diferentes de los lisosomas por su contenido en enzimas y su menor grado de acidez; en ellos tambin hay una bomba de H+ que mantiene un pH cido (~6), aunque no tan bajo como el de los lisosomas. A veces, los materiales volcados en los endosomas tempranos son descargados en los tardos. All comenzara la digestin celular. DIGESTIN INTRACELULAR Los lisosomas primarios van hacia las vesculas endosomales, fusionndose las membranas respectivas. As se forman cuerpos de mayor tamao, los lisosomas secundarios, que contienen gran cantidad y variedad de enzimas hidrolticas que atacan el material incorporado, degradndolo a partculas simples. A estas vesculas tambin se las llama vacuolas digestivas o heterofagosomas. Las molculas simples como monosacridos, aminocidos y nucletidos, resultantes de la digestin, pueden pasar al citoplasma a travs de la membrana del lisosoma secundario o vacuola digestiva, gracias a protenas transportadoras especiales.

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Si quedan porciones sin digerir y se mantienen las vacuolas, constituirn los cuerpos residuales, que se van acumulando en el citoplasma a medida que la clula envejece.

Figura 4: Esquema que muestra la ruta para la digestin intracelular (en este caso para la autofagia)

SECRECIN CELULAR Secrecin es la descarga, a travs de la membrana celular, de molculas sintetizadas por una clula que desempea su funcin fuera de la misma. La secrecin celular es una de las principales funciones del complejo de Golgi. Este complejo mantiene un flujo constante de vesculas de transporte destinadas a la membrana plasmtica. La fusin de estas vesculas con la membrana celular se llama exocitosis. Es decir que la membrana plasmtica recibe aporte de endomembranas gracias a este proceso de exocitosis. El aumento de la superficie de la membrana suele estar compensado por un proceso de endocitosis que mantiene relativamente estable la superficie celular. En general, todos los procesos de secrecin activa requieren de un aumento en la concentracin del Ca2+ intracelular. Existen dos tipos de secrecin celular: Secrecin constitutiva: es la secrecin por exocitosis de fosfolpidos y protenas de membrana, como as tambin de proteoglucanos y glucoprotenas de la matriz extracelular. Esta es una ruta de secrecin no selectiva. Dado que la entrada en esta ruta no requiere ninguna seal particular, tambin se denomina va por defecto. As, parece que cualquier protena o lpido del lumen del complejo de Golgi es automticamente arrastrada por la va constitutiva a menos que sea devuelta especficamente al RE, sea retenida

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como protena residente en el propio complejo de Golgi o sea seleccionada para las rutas que conducen a la secrecin regulada o a los lisosomas. Secrecin regulada: requiere de seales qumicas para que la exocitosis se produzca. Esta va se encuentra en clulas especializadas en secretar rpidamente productos cuando son necesarios (como hormonas, neurotransmisores o enzimas digestivas). En este caso las protenas solubles y otras sustancias se almacenan primero en vesculas de secrecin.

ENVOLTURA NUCLEAR La envoltura nuclear (tambin llamada carioteca) encierra el ADN y define el compartimiento nuclear. Esta envoltura est formada por dos membranas concntricas que estn perforadas por complejos de poro nuclear. A pesar de que la membrana nuclear interna y la externa son un continuo, presentan una composicin proteica diferente. La membrana nuclear interna contiene protenas que actan como lugares de unin especficos de la cromatina y de la red proteica de la lmina nuclear, que aporta soporte estructural a la membrana. La membrana nuclear interna est rodeada por la membrana nuclear externa, que es continua con la membrana del RE, y est tapizada por ribosomas que realizan sntesis de protenas. Las protenas producidas por estos ribosomas son transportadas al espacio que queda entre las membranas nuclear interna y externa (el espacio perinuclear), el cual, a su vez, es continuo con la luz del RE. Existe un trfico bidireccional continuo entre el citosol y el ncleo. La gran cantidad de protenas que actan en el ncleo incluyendo las histonas,, las ADN y ARN polimerasas, las protenas reguladoras de los genes y las protenas de procesamiento del ARN- son importadas de forma selectiva desde el citosol, donde son fabricadas, hasta el compartimiento nuclear. Al mismo tiempo, los ARNt y los ARNm son sintetizados en el compartimiento nuclear y luego son exportados al citosol. Al igual que el proceso de importacin, el proceso de exportacin es tambin selectivo; por ejemplo, los ARNm slo son exportados si han sido modificados correctamente en el ncleo por reacciones de procesamiento de ARN. En algunos casos, el proceso de transporte es complejo: por ejemplo, las protenas ribosmicas son fabricadas en el citosol, importadas al ncleo donde se ensamblan con ARN ribosmicos recin fabricados, formando partculas- y luego son exportados de nuevo al citosol como parte de una subunidad ribosmica; cada uno de estos pasos implica un transporte selectivo a travs de la envoltura nuclear. En todas las clulas eucariotas la envoltura nuclear est perforada por los complejos de poro nuclear. Se cree que estn formados por ms de 50 protenas diferentes, denominadas nucleoporinas, ordenadas segn una sorprendente simetra octogonal. En general, cuanto ms activa sea la transcripcin nuclear, mayor ser el nmero de complejos de poro presentes en la envoltura nuclear. La envoltura nuclear de una clula tpica de mamfero contiene entre 3000 y 4000 complejos de poro. Si la clula est sintetizando ADN, necesita importar aproximadamente 106 molculas de histona desde el citoplasma cada 3 minutos para poder empaquetar el ADN recin sintetizado en forma de cromatina, lo cual significa que, por trmino medio, cada poro ha de transportar alrededor de 100 molculas de histona por minuto. Si la clula est creciendo rpidamente, cada poro tambin ha de transportar por trmino medio 6 subunidades ribosmicas mayores y menores recin ensambladas por minuto desde el ncleo, donde son producidas, hasta el citosol, donde son utilizadas.

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Cada complejo de poro presenta uno o ms canales acuosos abiertos, a travs de los cuales pueden difundir pasivamente las molculas pequeas solubles en agua. Dado que muchas protenas celulares son demasiado grandes para pasar por difusin a travs de los complejos de poro nuclear, la envoltura nuclear permite que el compartimiento nuclear y el citosol mantengan diferentes conjuntos de protenas. Para que sean transportadas molculas especficas de gran tamao se requiere de la unin a protenas receptoras que las transportan activamente a travs de los complejos de poro. Por ejemplo, las protenas nucleares son dirigidas hacia el ncleo mediante seales de localizacin nuclear, consistentes en ciertas secuencias de aminocidos, las cuales a su vez han de ser reconocidas por receptores de importacin al ncleo. La exportacin del ncleo funciona como la importacin, pero en el sentido opuesto. La lmina nuclear es una red de subunidades proteicas interconectadas, denominadas tambin lminas nucleares. Las lminas son un tipo especial de filamentos intermedios que polimerizan formando una red bidimensional.. La lmina nuclear da forma y estabilidad a la envoltura nuclear, a la cual se halla anclada por la unin de los porors nucleares y protenas integrales de membrana de la membrana nuclear interna. La lmina tambin interacciona directamente con la cromatina, que a su vez lo hace con protenas integrales de la membrana nuclear interna. Junto con la lmina, estas protenas de membrana actan como unin estructural entre el ADN y la envoltura nuclear. Cuando el ncleo se desorganiza durante la mitosis, la lmina nuclear se despolimeriza. Los complejos de poro nuclear tambin se desensamblan y se dispersan en el citosol. Las protenas de membrana de la envoltura nuclear ya no unidas a los complejos de poro, cromatina o lmina nuclear- difunden en la membrana del RE. En conjunto, estos fenmenos provocan la rotura de las barreras que normalmente separan el ncleo y el citosol, de forma que las protenas nucleares, que ya no estn unidas ni a las membranas ni a los cromosomas, se diluyen en el citosol de la clula en divisin. Posteriormente en la mitosis (en la anafase tarda), la envoltura nuclear se reorganiza sobre la superficie de los cromosomas, a medida que las protenas de la membrana nuclear interna y las lminas se unen de nuevo a la cromatina. Las membranas del RE rodean grupos de cromosomas y continan fusionndose hasta que se forma de nuevo la envoltura nuclear cerrada. Durante este proceso los complejos de poro nuclear tambin se vuelven a ensamblar y se inicia la reimportacin activa de protenas que presentan secuencias de localizacin nuclear. (Figura 5)

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Figura 5: Envoltura nuclear. A la izquierda se muestra complejos de protenas y ARN saliendo por los poros de la membrana nuclear. A la derecha se muestra la correspondiente micrografa electrnica.

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