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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS.

2013

INTRODUCCIN. En biologa, un virus es un agente infeccioso microscpico que slo puede multiplicarse dentro de las clulas de otros organismos. Los virus infectan todos los tipos de organismos, desde animales y plantas, hasta bacterias y arqueas. Los virus son demasiado pequeos para poder ser observados con la ayuda de un microscopio ptico, por lo que se dice que son sub-microscpicos Los Geminivirus son una familia diversa de virus que infectan a las plantas, todos los miembros de la familia poseen un genoma de ADN de cadena sencilla, circular, empacado en partculas cosahdricas geminadas. Los cuatro gneros reconocidos dentro de la familia Geminiviridae son: Begomovirus, Curtovirus, Mastrevirus y Topocuvirus. A continuacin se presenta informacion importante sobre estos virus desde su descubrimiento hasta algunos ejemplos de prctica de donde se han incorporado tcnicas para controlarlos.

FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 OBJETIVOS. GENERALES:


Conocer la estructura de los virus vegetales y el impacto negativo que las enfermedades virales tienen en la produccin de los cultivos, para darle el control adecuado ya que no se pueden erradicar pero si controlar con las labores culturales eliminando los vectores que ocasionan los virus. ESPECIFICOS:

Conocer la clasificacin de los virus geminivirus. Identificar los sntomas y de los virus para no confundirles con otros factores como falta de nutrientes.

Analizar que tipos de labores son necesarios para poder controlar un poco los virus. Reconocer los vectores que transmiten los virus para eliminarlos antes que infecten las plantas.

FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 Johnny QUE SON VIRUS

Un virus no es ms que un agente infeccioso que vive y se reproduce dentro de las clulas vivas. Son tan diminutos que ni siquiera se ven directamente con microscopios de luz. Pueden infectar a cualquier tipo de organismo, animales, plantas e incluso bacterias. Al parecer se les haya en todos los ecosistemas del planeta y son los ms abundantes entre los conjuntos biolgicos. La estructura de un virus es muy simple. Se compone de dos o tres partes: el material gentico a partir del ADN o ARN, una capa proteica protectora de estas molculas genticas, y en ocasiones una cubierta de lpidos que rodea a la protena cuando est fuera de la clula. Los virus tienen formas helicoidales que pueden variar hasta ser mucho ms complicadas. Se cree que estas estructuras tuvieron su origen en fragmentos de ADN que se mueven entre las clulas (plsmidos) o en la evolucin de algunas bacterias. La propagacin de los virus vara en dependencia del agente al que infecten. En las plantas los virus se transmiten por los insectos que se alimentan de la savia. ORIGEN DE LOS VIRUS. Los virus son organismos parsitos que infectan clulas y producen viriones para difundir sus genes. La mayora de las protenas virales no tienen homlogos en las clulas modernas, en contradiccin con la visin tradicional de los virus como los ladrones de genes celulares. Esto sugiere que los genes virales bsicamente tienen su origen durante la multiplicacin de los genomas virales o provienen de linajes celulares ahora extintos. Algunas protenas virales especficas estn presentes en virus que infectan a los miembros de los tres dominios de la vida, lo que sugiere que los virus son en realidad muy antiguos. Los avances en la caracterizacin de los virus a nivel molecular sugieren que los virus coevolucionan con sus organismos huspedes, debido a que los virus son parsitos intracelulares extremos y, por lo tanto, requieren de la supervivencia del husped para poder asegurar su propia supervivencia. Es interesante notar que cuando un virus se multiplica en su husped natural, tiende a no causar una

FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 enfermedad en l o causa una enfermedad leve y limitada en la mayora de los casos. Varios de los virus conocidos producen enfermedades graves slo cuando infectan organismos diferentes de sus huspedes naturales. Se pueden encontrar virus donde quiera que haya organismos vivos, y probablemente existen desde la aparicin de las primeras clulas. Su origen es incierto, puesto que no fosilizan, de manera que slo se puede especular a partir de diferentes tcnicas y ensayos de biologa molecular. Hay tres teoras principales sobre el origen de los virus:

Teora de la regresin: es posible que los virus fueran pequeas clulas que parasitaban clulas ms grandes. A lo largo del tiempo, desaparecieron los genes que no necesitaban a causa de su parasitismo.

Teora del origen celular (tambin llamada hiptesis del nomadismo o hiptesis del vagabundeo): algunos virus podran haber evolucionado a partir de fragmentos de ADN o ARN que escaparon de los genes de un organismo mayor. El ADN fugitivo podra haber provenido

de plsmidos (fragmentos de ADN que pueden moverse entre clulas) o transposones.

Teora de la coevolucin: los virus podran haber evolucionado de complejas molculas de protenas y cido nucleico, al mismo tiempo que aparecieron las primeras clulas en la Tierra. El primer virus conocido, el virus del mosaico del tabaco, fue descubierto por Martinus Beijerinck en 1899, y actualmente se han descrito ms de 5.000, si bien algunos autores opinan que podran existir millones de tipos diferentes. Los virus se hallan en casi todos los ecosistemas de la Tierra y son el tipo de entidad biolgica ms abundante. El estudio de los virus recibe el nombre de virologa, una rama de la microbiologa

El paso siguiente en el ciclo de reproduccin viral es la propagacin del virus. Dependiendo del tipo de virus, el transporte de los viriones a otras clulas se produce a travs de los plasmodesmos. Otros producen protenas de movimiento

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que modifican los canales plasmodesmticos y posibilitan el movimiento viral hacia las clulas vecinas. Para poder colonizar exitosamente toda la planta, el virus necesita ingresar al sistema vascular normalmente a travs de los tubos cribosos del floema. Luego el virus pasa del floema a las clulas circundantes, donde se reproduce y se mueve de clula a clula. El tiempo entre la infeccin inicial de una o pocas clulas y la infeccin sistmica del hospedante vara entre unos pocos das a pocas semanas, dependiendo del virus, el hospedante y las condiciones ambientales.

FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 PROPIEDADES DE LA VIDA. Existen opiniones dispares sobre si los virus son una forma de vida o estructuras orgnicas que interactan con los seres vivos. Por ello algunos autores se refieren a ellos como organismos al lmite de la vida. Por una parte se asemejan a los organismos que tienen genes y evolucionan por seleccin natural, y se

reproducen creando mltiples copias de s mismos para auto-ensamblarse. Sin embargo, carecen de estructura celular, lo cual es considerado la unidad bsica de la vida. Adems, los virus no tienen un metabolismo propio, y necesitan una clula hospedadora para crear nuevos productos. Estructura

Diagrama de cmo se puede construir una cpside vrica a partir de mltiples copias de slo dos molculas proteicas. Los virus presentan una amplia diversidad de formas y tamaos, llamadas morfologas. Son unas 100 veces ms pequeas que las bacterias. La mayora de los virus estudiados tienen un dimetro de entre 10 y 300 nanmetros. Algunos Filovirus tienen un tamao total de hasta 1.400 nm, sin embargo, slo miden unos 80 nm de dimetro. La mayora de virus no pueden ser observados con un microscopio ptico, de manera que se utilizan microscopios electrnicos de barrido y de transmisin para visualizar partculas vricas. Para aumentar el

FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 contraste entre los virus y el trasfondo se utilizan tinciones densas en electrones. Son soluciones de sales de metales pesados como wolframio, que dispersan electrones en las regiones cubiertas por la tincin.

Diagrama de la estructura del virus del mosaico del tabaco: el ARN viral est enrollado en la hlice formada por sub-unidades proteicas repetidas.

Bacterifago perteneciente al orden de los Caudovirales.

FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 El Comit Internacional de Taxonoma de Virus (ICTV) desarroll el sistema de clasificacin actual y escribi pautas que daban ms importancia a ciertas propiedades de los virus para mantener la uniformidad familiar. Un sistema universal para clasificar los virus y una taxonoma unificada han sido establecidos desde 1966. El 7 Informe del ICTV formaliz por primera vez el concepto de especie vrica como el taxn ms bajo de una jerarqua ramificada de taxones de virus. Sin embargo, actualmente slo se ha estudiado una pequea parte de toda la diversidad de los virus, y anlisis de muestras obtenidas de humanos revelan que aproximadamente un 20% de secuencias vricas recuperadas no han sido observadas anteriormente. Muestras del ambiente, como sedimentos marinos y ocenicos, revelan que la gran mayora de secuencias son completamente nuevas La estructura general taxonmica de los virus es la siguiente: Orden (-virales) Familia (-viridae) Subfamilia (-virinae) Gnero (-virus) Especie (-virus) La taxonoma actual del ICTV (2008) reconoce cinco rdenes:

los Caudovirales, los herpes virales, los mono-negavirales, los nido virales y los picornavirales. El comit no distingue formalmente

entre subespecies, cepas y aislamientos. En total, hay cinco rdenes, 82 familias, 11 subfamilias, 307 gneros, 2.083 especies y unos 3.000 tipos que an no han sido clasificados.

FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 Clasificacin Baltimore

Esquema de la clasificacin Baltimore de los virus. David Baltimore, bilogo ganador del Premio Nobel, dise el sistema de clasificacin que lleva su nombre. El sistema de clasificacin del ICTV es utilizado en combinacin con el sistema de clasificacin de Baltimore en la clasificacin moderna de los virus. La clasificacin de Baltimore de los virus se basa en el mecanismo de produccin de ARNm. Los virus deben generar ARNm de su genoma para producir protenas y replicarse, pero cada familia de virus utiliza mecanismos diferentes. El genoma de los virus puede ser monocatenario (ss) o bicatenario (ds), de ARN o ADN, y pueden utilizar o no la transcriptasa inversa.

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Anahy

PLANTAS

Hay muchos tipos de virus de las plantas, pero a menudo slo causan una prdida de produccin, y no es econmicamente viable intentar controlarlos. Los virus de las plantas a menudo son transmitidos de una planta a otra por organismos conocidos como vectores. Normalmente son insectos, pero tambin se ha demostrado que

algunos hongos, nematodos y organismos unicelulares son vectores. Cuando se considera econmico el control de infecciones por fitovirus (en los frutos perennes, por ejemplo), los esfuerzos se concentran en matar a los vectores y eliminar huspedes alternativos como malas hierbas. Los fitovirus son inofensivos para los humanos y dems animales, pues slo se pueden reproducir en clulas vegetales vivas. Las plantas tienen mecanismos de defensa elaborado y eficiente contra los virus. Uno de los ms eficientes es la presencia de los llamados genes de resistencia (R). Cada gen R confiere resistencia a un virus determinado desencadenando zonas localizadas de muerte celular alrededor de la clula infectada, que se pueden ver a simple vista en forma de manchas grandes. Esto detiene la expansin de la infeccin. La interferencia del ARN tambin es una defensa efectiva en las plantas. Cuando estn infectadas, las plantas a menudo producen desinfectantes naturales que matan los virus, como el cido saliclico, el xido ntrico y molculas reactivas de oxgeno BACTERIOFAGOS. Los bacterifagos son un grupo extremadamente comn y diverso de virus. Por ejemplo, los bacterifagos son la forma ms comn de entidad biolgica en los medios acuticos; en los ocanos hay hasta diez veces ms de estos virus que de bacterias, alcanzando niveles de 250 millones de bacterifagos por milmetro cbico de agua marina. Estos virus infectan

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 bacterias especficas unindose a molculas receptoras de superficie y entrando en la clula. En un periodo corto de tiempo (en algunos casos en unos minutos), las polimerasas bacterianas empiezan a traducir ARN vrico en protena. Estas protenas se convierten en nuevos viriones dentro de la clula, protenas colaboradoras que ayudan a parecerse nuevos viriones, o protenas implicadas en la lisis celular. Los enzimas vricos colaboran en la destruccin de la membrana celular y, en el caso del fago T4, un poco ms de veinte minutos despus de la inyeccin ya se pueden liberar ms de 300 fagos. El mecanismo principal por el que las bacterias se defienden de los bacterifagos es produciendo enzimas que destruyen el ADN ajeno. Estas enzimas, llamadas endonucleases de restriccin, fragmentan el ADN vrico que los bacterifagos introducen en las clulas bacterianas. Las bacterias tambin tienen un sistema que utiliza secuencias CRISPR para retener fragmentos del genoma de virus que se han encontrado en el pasado, lo que les permite impedir la replicacin del virus mediante una forma de interferencia del ARN. Este sistema gentico proporciona a las bacterias una inmunidad adquirida a las infecciones. ARCHAEA. Algunos virus se replican dentro de los arqueas, se trata de virus ADN que parecen no tener relacin con ninguna otra forma de virus y que tienen una variedad de formas inusuales, como botellas, barras con un gancho o incluso lgrimas. Estos virus han sido estudiados en mayor detalle en los termfilos, en particular los rdenes Sulfolobales y Thermoproteales. La defensa contra estos virus puede incluir la interferencia del ARN de secuencias repetidas de ADN del genoma arqueobacterial que estn relacionadas con los genes de los virus.

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Virus en plantas-mosaico.

Mosaico, manchas en hojas y enanismo respectivamente Hay bastantes virus que pueden atacar las plantas, sobre todo herbceas. Se transmiten sobre todo por pulgones, algunos por nematodos, mosca blanca, mosquito verde, trips e incluso hongos. Hay otras formas: por semilla, injerto (rboles), heridas, poda, etc. Sntomas de virosis Los sntomas de virosis son muy diversos y difciles de diagnosticar, ya que se confunden con otras patologas y trastornos como desrdenes nutricionales, daos por insectos, bacterias y hongos. La determinacin precisa es de laboratorio. Algunos ejemplos:

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Deformaciones y enrollamientos en sus hojas. Puntea duras amarillentas conocidas con el nombre de mosaicos. Raquitismo. No tienen un crecimiento normal, quedando raquticas. Sntomas sobre las flores. Variegados en ptalos que forman zonas decoloradas.

Por los sntomas es bastante difcil determinar que es un virus; hay que conocer bien los distintos sntomas. Para saberlo con seguridad sera necesario confirmarlo en laboratorio. Control Una vez infectada la planta no hay nada que hacer, no hay producto que aplicar, por lo que hay que prevenir. Elimina plantas infectadas por virus para que no contagie a otras. Elimina malas hierbas del jardn para que no queden en ellas los virus.

Pulgones Controla los insectos vectores que son los que llevan la enfermedad de una planta a otra. En especial los pulgones (en invernaderos se usan mallas para evitar que entren). Los tratamientos contra pulgones, mosca blanca, Trips,... reducir las posibilidades de transmisin. Compra plantas libres de virus. Por ejemplo, en ctricos, para evitar el Virus de la tristeza, los viveristas injertan sobre los patrones tolerantes a este virus, yemas certificadas o exentas virus.

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Limpia bien las herramientas de corte despus de podar. Elige variedades resistentes (por ej. hay vdes. de tomate que no les afectan los virus).

Virosis de frutales

Virosis En frutales se han detectado un gran nmero de virosis y cada da aumentan ms. - Virosis que alteran el desarrollo del rbol: Proliferaciones del manzano, colapso del peral, enanismo del membrillero y del cerezo, enrollado clortico del melocotonero. - Virosis con mosaicos en hojas. Acaba en defoliaciones ms o menos importantes. - Virosis que afectan a los frutos: Asperezas epidrmicas y manchas anulares de las manzanas.

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Virosis en hortalizas

Sntomas de virosis: - Mosaicos. Puntea duras amarillentas conocidas con el nombre de mosaicos. Mosaico del pepino Mosaico de la sanda Mosaico del calabacn Mosaico del meln - Deformaciones y enrollamientos en sus hojas. - Raquitismo. No tienen un crecimiento normal, quedando raquticas. - Sntomas sobre las flores. Variegados en ptalos que forman zonas decoloradas. - Entrenudos cortos (enanismo) - Clorosis - Engrosamiento de hojas, etc. * Virus del bronceado del tomate - Afecta a pimiento y tomate principalmente. Sntomas muy variados. - Eliminar plantas afectadas y malas hierbas. - Control de vectores (Trips), aunque es complicado controlar al Trip. * Virus del mosaico del pepino - Este virus afecta a muchas plantas, tanto hortcolas como ornamentales y malas hierbas. Pimiento, tomate, berenjena, meln, sanda, pepino, calabacn, calabaza,... - Vectores son los pulgones.

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Madelyn

Virus Y de la patata

- Adems de la patata afecta a tomate y pimiento. - Eliminar malas hierbas y pulgones (utilizar mallas en invernaderos para evitarlos). - Eliminar las plantas afectadas lo antes posible. - Los tratamientos contra pulgones reducen las posibilidades de transmisin. * Virus del rizado amarillo del tomate - Slo afecta al tomate. - Eliminar malas hierbas y moscas blancas vectores (Bemisia tabaci), tambin controlarlas con mallas, trampas amarillas, etc.. - Uso de variedades resistentes. - Eliminar plantas afectadas. * Virus del mosaico del tomate

Afecta a tomate y a pimiento, aunque existen muchas variedades resistentes. La transmisin se realiza por semillas y mecnicamente por contacto de manos, herramientas, etc. * Virus del moteado suave del pimiento Afecta a pimiento. La transmisin es por semilla y de forma mecnica en la manipulacin de las plantas. Control para estos 2 casos

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 - Utilizar semillas libres de virus y variedades resistentes. - Desinfeccin del suelo para evitar contaminaciones producidas por races y restos vegetales contaminados (solarizacin o Bromuro). - Desinfeccin de tiles de trabajo y manos. * Virus del mosaico amarillo del calabacn Este virus es el ms comn en Cucurbitceas, afectando sobre todo a meln, pepino, calabacn y, ms espordicamente, a sanda. Control - Eliminar malas hierbas que actan como reservorios de virus, as como los vectores (pulgones). - Utilizar mallas en invernaderos que dificulten la entrada de pulgones. - En pepino hay variedades resistentes. Usarlas. - Eliminar plantas infectadas. - Tratar los pulgones disminuye la posibilidad de transmisin. * Virus del cribado del meln En meln produce graves daos. Tambin afecta a sanda. Muerte de plantas. Hay variedades resistentes en el mercado a esta virus. * Virus del mosaico de la calabaza Afecta a meln principalmente. Se transmite por semillas y por contacto entre hojas, poda, en tutorado, etc., as como por insectos masticadores. Control - Utilizar semillas libres de virus. - Desinfectar manos y herramientas, procurando tocar las plantas lo menos posible. - Arrancar pronto las enfermas. * Virosis transmitidas por pulgones - Manchas anulares negras: coles, repollos y coles de Bruselas. - Mosaico de la coliflor. - Mosaico de la lechuga. - Mosaico de la remolacha.

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PRUEBA DE CAMPO - PIMENTON INFECTADO DEL VIRUS DEL MOSAICO DEL PEPINO. El pimentn (Capsicum annum L.) es una hortaliza de gran consumo, cuya productividad se ve comprometida por el ataque de diversas virosis, cuyos efectos ocasionan disminucin de los rendimientos y baja calidad del fruto. Con miras a obtener informacin que sirva de base a la formulacin de medidas de control contra estas enfermedades, se han venido realizando investigaciones para tratar de identificar los virus que atacan al pimentn, habindose detectado hasta el presente los siguientes: grabado del tabaco (VGT), mosaico del tabaco (VMT), mosaico suave del pimentn. En reconocimientos realizados con el mismo propsito ms recientemente, se ha detectado la infeccin de plantas de pimentn con un virus que hasta el presente no haba sido sealado atacando a esta hortaliza en Venezuela. En este trabajo se detallan los estudios que permitieron identificar a dicho virus como el mosaico del pepino (VMP). MATERIALES Y METODOS Muestras de follaje de pimentn con sntomas del virus en estudio fueron colectadas en siembras localizadas en varios sitios del pas, durante visitas de campo ocasionales realizadas durante un lapso de cinco aos. Las muestras fueron inoculadas por va mecnica sobre diversas especies de plantas indicadoras. Se emple el mtodo de inoculacin mecnica, macerando el inculo en buffer Trisilicato de Magnesio pH 8,5 (10) Y espolvoreando las hojas a inocular con el abrasivo Carborundum 600. Para las pruebas de transmisin con fidos, se emplearon pteros de la especie Myzus persicae Sulz., provenientes de una cra sana mantenida sobre berenjena (Solanum melongena L.). Los fidos se sometieron a ayuna durante un

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 perodo de 3-4 h, seguido inmediatamente por un perodo de acceso de 2' sobre una hoja de pimentn infectada con el virus en estudio. Al cabo de ese lapso, se colocaron 10 de estos fidos sobre cada una de las plantas sanas de pimentn varo California Wonder usadas en la prueba, en donde permanecieron por 30'. Finalizado ese lapso de tiempo, los fidos fueron eliminados mediante aspersin de las plantas con un insecticida. Las plantas utilizadas en las pruebas de transmisin mecnica o por fidos, fueron cultivadas en suelo esterilizado y se mantuvieron, antes y despus de esas pruebas, en invernaderos libres de insectos con una temperatura de 20-34 C. El antisuero contra el VMP usado en las pruebas serolgicas de doble difusin en agar, para confirmar la identidad del virus, proceda de la American Type Culture Collection bajo .el N 242. Dichas pruebas fueron hechas en un medio compuesto por 0,9 % Ionagar N 2 Y 0,1 % Azida de Sodio, todo disuelto en agua destilada. RESULTADOS Sntomas en el Campo. Los sntomas que mostraban en el campo las plantas de pimentn afectadas con el VMP, diferan ligeramente de los inducidos por los otros virus que comnmente lo atacan. El indicio ms claro de la presencia del VMP era la manifestacin de un mosaico verde-amarillento en el follaje de las plantas afectadas. Las plantas exhiban adems diversos grados de enanismo y deformacin leve del follaje y los frutos. Ocasionalmente, algunas de las hojas ms viejas mostraban dibujos en forma de rayas paralelas verde oscuro y crculos concntricos. Diagnstico de los Virus. a) Reaccin de plantas inoculadas mecnicamente.

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 Para detectar al VMP y a otros virus que pudieran estar presentes en las muestras sealadas stas fueron inoculadas por va mecnica sobre varias variedades de pimentn, as como sobre diversas especies de plantas indicadoras. De acuerdo a las reacciones que mostraron las plantas inoculadas en un lapso de unas 3 semanas despus de la inoculacin, fue posible hacer el diagnstico de los virus presentes en las muestras. A continuacin se describen los principales sntomas que fueron tomados en cuenta para detectar al VMP: Capsicum annum L., Delray Bell, Florida VR-2, Early Cal Wonder y Yolo Wonder: Aquellas muestras que slo contenan al VMP indujeron sntomas similares a los que en el campo asociamos con la infeccin por este virus. Dichos sntomas consisten en mosaico verde-amarillento, enanismo, leve deformacin del follaje y ocasionalmente los caractersticos dibujos en las hojas ms viejas, semejantes a los observados en el campo. b) Transmisin por fidos. Un aislamiento del VMP obtenido a partir de una muestra de pimentn Florida VR2, colectada en Cagua, Edo. Aragua, fue transmitido en forma no-persistente por el fido M. persicae a 6 de un total 8 de plantas sanas de pimentn California Wonder usadas en el experimento.

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Pimentn Florida VR-2 infectado en el campo con el virus mosaico del pepino, mostrando mosaico verde-amarillo y deformacin del follaje. A la derecha follaje de una planta sana. Fig. 2. Hoja de la misma planta en donde se observa el mosaico verde-amarillo y los dibujos en forma de rayas paralelas y crculos hacia el pice de la misma. Fig. 3. Lesiones locales necrticas en hojas cotiledonares de frijol (Vigna sinensis) SR, inoculadas mecnicamente con el virus mosaico del pepino. No se observa infeccin sistmica. Fig. 4. Mosaico sistmico en trifolio de frijol 'RS' inoculado mecnicamente con el virus mosaico del pepino. Fig. 5. Lesiones locales con borde necrtico en hojas de aj (C. frutescens) Tabasco, inoculadas mecnicamente con el virus mosaico del pepino, y necrosis sistmica del cogollo de la planta. Fig. 6. Mosaico sistmico en Zinnia

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 elegans Canary Yellow, inoculado mecnicamente con el virus mosaico . Descripcin de la Mancha Anillada de la Papaya. El virus de la mancha anillada o mancha anular de la papaya causa la enfermedad llamada comnmente mosaico, la cual es la ms limitante de este frutal en el mbito mundial y ocasiona prdidas de rendimiento y calidad de los frutos, esta problemtica ha trado como consecuencia cambios en el manejo del cultivo: las plantaciones son sustituidas despus de las primeras cosechas para mantener la productividad, convirtindose en un cultivo bianual en las zonas afectadas y las siembras se han desplazado de las zonas productoras, donde la incidencia de la enfermedad es alta, a otras zonas geogrficas. SINTOMAS DE LA ENFERMEDAD. Las plantas afectadas desarrollan primero una clorosis en las hojas ms jvenes, seguida por el aclareo de las nervaduras, encrespamiento, ampollamiento, moteado y reduccin de la lmina foliar. En el tallo y los pecolos se forman manchas grasientas alargadas de color verde oscuro. Los frutos se reducen de tamao, se ampollan, se deforman y producen manchas grasientas en forma de anillo, las cuales constituyen uno de los sntomas ms tpicos de la enfermedad. Las plantas infectadas a temprana edad o antes de la floracin, no producen pero rara vez mueren, sin embargo algunos aislamientos en otros pases como Taiwn causan marchitamiento y a veces la muerte.

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Sntomas tpicos del virus de la mancha anillada de la papaya (PRSV). 1a. Clorosis, moteado, encrespamiento y ampollamiento de la lmina foliar. 1b. Severo moteado, encrespamiento, ampollamiento y reduccin de la lmina foliar en las hojas del cogollo de la planta.

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Sntomas tpicos del virus de la mancha anillada de la papaya (PRSV). En el tallo y los pecolos se forman manchas grasientas alargadas de color verde oscuro. Los frutos se reducen de tamao, se ampollan, se deforman y producen manchas grasientas en forma de anillo, las cuales constituyen uno de los sntomas ms tpicos de la enfermedad. Vinicio VARIABILIDAD GENETICA DEL VIRUS.

Por sus caractersticas, el virus pertenece a la familia de los Potyviridae, gnero Potyviru. En la actualidad los aislamientos descritos en papaya y en cucurbitceas (meln, sandia, pepino) se consideran serolgicamente idnticos y son biotipos del virus de la mancha anillada de la papaya o PRSV por sus siglas en ingls ("Papaya ringspot virus"). Aislamientos del biotipos PRSV-P afectan a la lechosa o papaya, otras caricceas y cucurbitceas. El biotipo PRSV-W infecta

cucurbitceas pero no causa dao a la papaya y previamente se identific como virus del mosaico de la patilla o sandia MODO DE TRANSMICION DEL VIRUS. En la naturaleza, el virus se trasmite a travs de los fidos o pulgones. Los fidos normalmente no colonizan las plantas de papaya. Los procesos de adquisicin e inoculacin del virus ocurren debido a las picadas de prueba durante el reconocimiento de sus plantas hospederas cuando visitan plantas infectadas y luego plantas sanas. La eficiente dispersin del virus se debe a los movimientos constantes de los vectores dentro de la plantacin. El modo de transmisin se denomina no persistente, lo cual significa que el virus persiste pocas horas a 20C y es llevado en el aparato bucal o estilete del fido hasta que el insecto se alimente de la prxima planta.

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Modo de transmisin del virus de la mancha anillada de la papaya (PRSV). Los fidos o pulgones transmiten el virus. En la figura se muestran colonias del fido Myzus persicae sobre una planta

hospedera. El virus es llevado en el aparato bucal o estilete del fido e infecta a la papaya si la planta hospedera estuviera infectada con el PRSV.

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EPIDEMIOLOGA DE LA ENFERMEDAD. El desarrollo de la enfermedad en la plantacin sigue el patrn general de dispersin de los virus transmitidos por fidos de una manera no persistente. La cantidad de infeccin primaria aumenta mientras la distancia de las plantas de papaya infectadas disminuye. Una rpida infeccin secundaria puede ocurrir y la plantacin puede infectarse totalmente en tres a cuatro meses. Esta situacin se produce cuando se combinan dos factores, en plantaciones nuevas localizadas cercanas de las plantas infectadas y altas poblaciones de fidos alados MALEZAS COMO RESERVORIOS DE VIRUS EN EL CAMPO. Experimentalmente se ha demostrado que malezas comunes en los campos de papaya pertenecientes a la familia de las cucurbitceas pueden ser reservorio del virus, entre ellas: Cucumis anguria(pepino de de culebra) monte), Cucumis y Momordica

dipsaceus, Melothria charantia (cundeamor)

pendula (pepinillo

DIAGNSTICO DE LA ENFERMEDAD. Los sntomas tpicos que permiten la identificacin de la enfermedad en el campo consisten en mosaico severo en las hojas jvenes, a menudo acompaado por la decoloracin de las nervaduras. A medida que la enfermedad avanza, las hojas se deforman a manera de flecos (filodia), y en el tallo y pecolos se forman manchas irregulares de aspecto aceitoso y de color verde oscuro. Estos sntomas son fcilmente distinguibles de aquellos producidos por el virus del amarilla miento leve de la papaya, o PMYV (por sus siglas en ingls Papaya mild yellowing virus). MEDIDAS DE PREVENCIN Y CONTROL DEL VIRUS. Las medidas de prevencin incluyen: proteccin de las plntulas en el vivero mediante mallas antifidos y aspersiones con aceite blanco al 1%, ms surfactante

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 al 0,025%, cada dos semanas para evitar llevar plantas infectadas al campo. Una vez establecida la siembra se recomienda continuar con las aspersiones de aceite blanco, el aislamiento fsico mediante barreras (cultivos) rompe viento o en contra viento de la fuente de inculo. Los fidos que vuelan hacia el campo de la papaya primero aterrizan y se alimentan en el cultivo no hospedero o barrera, por ejemplo maz, de esta manera perdern su habilidad para transmitir el virus de la papaya.

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GEMINIVIRUS. GEMINIVIRIDAE. Clasificacin de los virus Grupo: Familia: Gneros Mastrevirus Curtovirus Begomovirus Topocuvirus Geminiviridae es una familia de virus que infectan plantas. Tienen genomas de ADN circular de cadena nica ambisentido y se incluyen en el Grupo II de la Clasificacin de Baltimore. El genoma puede ser un solo segmento de 25003000 nucletidos o dos segmentos de tamao similar. Tienen II (Virus ADN Mono catenario) Geminiviridae

una cpside alargada formada por la unin de dos icosaedros T=1 incompletos (de ah el nombre de gemelos). La cpside tiene un dimetro de 18-20 mm. y una longitud de unos 30 mm. Los virus con genomas bipartitos (Begomovirus slo) tienen estos componentes separados en dos partculas, y por lo tanto, se requiere ms de una partcula de virus para infectar una clula. Estos virus son responsables de una cantidad significativa de daos en las cosechas de todo el mundo. Las epidemias por geminivirus se deben a una serie de factores, tales como el transporte de material vegetal infectado, la expansin de la agricultura hacia nuevas zonas de cultivo y la expansin de los vectores que transmiten el virus de una planta a otra. Adems, la recombinacin de diferentes geminivirus infectando a una planta podra dar lugar a que un nuevo y posiblemente virulento virus se desarrolle.

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 Geminiviridae incluye los siguientes gneros:

Gnero Mastrevirus; especie tipo: Virus del estriado del maz. Gnero Curtovirus; especie tipo: Virus de la rizomana de la remolacha. Gnero Begomovirus; especie tipo: Virus del mosaico dorado del haba. Gnero Topocuvirus; especie tipo: Virus del seudorizado del tomate.

La transmisin se realiza mediante cicadellas (Mastrevirus, Curtovirus), moscas blancas (Begomovirus) o membranceos (Topocuvirus). Replicacin Los genomas de los geminivirus codifican solo unas pocas protenas, por lo que son dependientes de la maquinaria de la clula husped para la replicacin: estos incluyen factores tales como el ADN polimerasa y probablemente las polimerasas de reparacin, con el fin de amplificar sus genomas, adems de los factores de transcripcin. Los geminivirus se replican a travs de un mecanismo de crculo mvil similar al de lo bacterifagos tales como M13 y muchos plsmidos. La replicacin se realiza en el ncleo de la clula vegetal infectada. En primer lugar, el ADN circular de cadena nica se convierte en una doble cadena circular intermedia. Este paso implica el uso de enzimas de reparacin del ADN celular para producir una cadena complementaria de sentido negativo usando la cadena positiva como plantilla. El siguiente paso es la fase del crculo mvil, en donde la cadena viral es situada en un lugar especfico para dar inicio al proceso de replicacin. Este proceso en un ncleo eucariota puede dar lugar a concatmeros de doble cadena que constituyen formas intermedias del genoma viral. Nuevas formas de ADN de cadena nica del genoma del virus (de sentido positivo) se forman probablemente por interaccin de las protenas con el ADN intermedio, puesto que los genomas que carecen del gen CP no forman ADN mono catenario. El ADN mono catenario es envasado en partculas germinativas en el ncleo. No est claro si estas partculas pueden salir del ncleo y transmitirse a las clulas vecinas como viriones, o son las cadenas mono catenarias asociadas con la

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 cubierta protenica que a travs de un movimiento de protenas encaminan el genoma de clula a clula a travs de los plasmodesmos. Los geminivirus tienden a ser introducidos en clulas vegetales diferenciadas a travs de las piezas bucales de un insecto vector. Sin embargo, estas clulas generalmente carecen de las enzimas necesarias para la replicacin del ADN, lo que hace difcil que el virus se replique. Para superar esta dificultad, los geminivirus pueden inducir a las clulas vegetales a re-entrar en el ciclo celular desde el estado inactivo a fin de que pueda llevarse a cabo la replicacin viral. Gamboa Enfermedad Geminivirus

Descripcin: El grupo de geminivirus estn compuesto por varios gneros: Begomovirus (virus del mosaico dorado de la haba), Curtovirus (virus de la rizomana de la remolacha), Mastrevirus (virus del estriado del maz) y Topocuvirus (virus del seudorizado del tomate). Este grupo constituye a los virus que afectan plantas con ms rpido crecimiento. El nombre viene dado por la estructura de su partcula (Gemini = gemelo). Los sntomas causados por el geminivirus, a simple vista, se pueden confundir con los sntomas asociados a deficiencias nutricionales en las plantas o bien a los causados por otros virus como el Potyvirus. Esto dificulta en gran medida la diagnosis con tcnicas convencionales.

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 El rizado, clorosis marginal, epinastias, deformaciones, enanismo y amoratamiento de las hojas, junto con abscisin floral o la reduccin drstica del tamao de los frutos son sntomas tpicos de la infeccin por geminivirus. Evidentemente y siempre dependiendo del tipo de virus, del husped y del estado de la infeccin, los sntomas sern unos u otros. La trasmisin de este virus se da con vectores como cicadlidos (chicharritas o salta hojas), aleurdidos (mosca blanca) y membranceos.

Prevencin: Aunque se han desarrollado anticuerpos efectivos contra el geminivirus, la prevencin pasa por el correcto tratamiento de los deshechos propios al finalizar el cultivo junto con las malezas colindantes (incineracin), siembra en pocas apropiadas, alejar los cultivos de campos infectados y utilizacin de especmenes sanos.

Tratamiento: Dado que se trata de un virus, aparte de desechar las plantas infectadas, el nico tratamiento posible es inocular anticuerpos; aunque el virus seguir presente. Mantener a raya los vectores de transmisin puede ayudar a la no propagacin de la enfermedad hacia especmenes sanos.

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 MANEJO INTEGRADO DE MOSCA BLANCA GEMINIVIRUS EN TOMATE. En la temporada agrcola 2005-2006 elevadas poblaciones de mosca

blanca Bemisia argentifolii Bellows y Perring o B. tabaci biotipo B y el geminivirus Tomato Yellow Leaf Curl Virus (geminiviridae) provocaron el siniestro total de 6 mil 100 hectreas de tomate; 4 mil 800 hectreas con siniestros parciales y totales en tomate de cscara y una reduccin promedio de 30% en rendimiento de frijol. En las temporadas de cultivo hasta la fecha la presencia de mosca blanca se ha reducido, pero los geminivirus que transmite permanecen en el ambiente, en plantas arvenses como frijolillo (Rhynchosia nigrum L) y chual mnima L), malva cenizo (Chenopodium

blanca(Sida sp.), chiquelite (Solanum

album L), entre otras, esto se sabe porque el virus contina manifestndose en plantas de tomate. Es necesario seguir con la campaa fitosanitaria contra Mosca Blanca-Geminivirus a nivel regional, con la implementacin de la ventana libre de hospederos preferidos de mosca blanca durante junio, julio y agosto, respeto de la fecha de siembra de cultivos hospederos de mosca blanca y principalmente con la produccin de plntula de tomate sana en invernaderos, con las medidas fitosanitarias necesarias; trasplantar planta libre de geminivirus; destruir

inmediatamente la soca de cultivos preferidos por mosca blanca al final de la cosecha; capacitar y divulgar, etctera. A nivel de predio, se deben realizar todas las estrategias posibles, pues el riesgo de la presencia abundante del insecto vector y la enfermedad pueden incrementarse en cualquier momento. El objetivo del presente trabajo fue validar un programa de manejo integrado ecolgicamente {a nivel predio) sobre Mosca Blanca-Geminivirus en tomate.

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Contenido El Manejo Integrado de Plagas de Mosca Blanca-Geminivirus (MIP MBGeminivirus) se realiz en las instalaciones del Campo Experimental Valle del Fuerte, latitud 25 45 39.1 y longitud 108 48 42.9, en Juan Jos Ros, Sinaloa, en el sub-ciclo agrcola otoo-invierno 2008-2009 y 2009-2010. Metodologa de la validacin en el ciclo 2008-2009 Tratamientos probados

Validacin de un programa de MIP MB-Geminivirus, de acuerdo a resultados de estudios desarrollados por innumerables autores.

Manejo comercial de MB-Geminivirus.

Tcticas implementadas en la parcela de validacin del programa MIP MBGeminivirus

Establecimiento de cultivos asociados, como propuesta de diversificacin de los sistemas de produccin, as como establecimiento de cultivos trampa (cilantro y sorgo forrajero).

Eliminacin del terreno de cultivo y reas adyacentes de plantas reservorios de Mosca Blanca-Geminivirus.

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013

Seleccin de genotipo de tomate con alguna caracterstica de resistencia a MB-Geminivirus: Se utilizaron los hbridos Seri (en aproximadamente mil 100 m2) 287 y 288, de Sanson Seeds (en unos mil 400 m2).

En la parcela testigo se trasplantaron 3 mil m2 con el hbrido CDX-152 y en el resto de la superficie (cerca de mil m2) se estableci la variedad Sun 6200, ambos susceptibles al virus del rizado amarillo del tomate (TYLCV, por sus siglas en ingls).

Produccin de plntula en invernadero, libre de geminivirus. Tratamiento de plntulas, en pretrasplante, con insecticidas sist-micos (Imidacloprid, a 3 mililitros por mil plantas).

Fecha de siembra (trasplante) recomendada: 26 de octubre de 2008. Monitoreo y supresin de mosca blanca con trampas amarillas de impactacin.

Deteccin y eliminacin de plantas infectadas con geminivirus antes del incremento de la poblacin de mosca blanca.

Aspersin de insecticidas biorracionales (extractos botnicos, aceites, jabones y entomopatgenos) al detectar un promedio de un adulto de mosca blanca en la tercera hoja del estrato apical.

Liberaciones masivas de crisopa, cada 15 das, en presencia de inmaduros de mosca blanca.

Conservacin de enemigos naturales presentes (ensopa, catarini-ta gris, catarinita rosada, chinche pirata, chinche ojona, chinche pajiza y chinche asesina).

Aspersin

de

insecticidas

selectivos

(sistmicos,

reguladores

de

crecimiento e inhibidores de la alimentacin) al detectar un promedio de dos adultos de mosca blanca en la tercera hoja del estrato apical. Se efectu una sola aplicacin de insecticida qumico sinttico convencional (Endosulfn), casi al final del desarrollo del cultivo.

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 El resto del manejo agronmico, igual que en la parcela testigo, se realiz de acuerdo al manejo comercial del cultivo. Variables medidas

Nmero promedio de adultos de mosca blanca capturado en tomate (en charolas con agua jabonosa) y de adultos presentes en plantas, mediante muestreo directo, de acuerdo a la tcnica binomial negativa.

Ambos muestreos se realizaron dos veces por semana, desde el estado de plntula hasta la cosecha.

Nmero de plantas y frutos con sntomas de geminivirus. Nmero promedio de adultos de insectos benficos comunes capturados en charolas de agua en dos muestreos semanales.

Se utiliz un diseo completamente aleatorio con tres y cuatro repeticiones, de acuerdo a la variable determinada, y una comparacin de medias por Tukey (0.05%). Adems, se compar el nmero y costo econmico de la aplicacin de insecticidas.

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Metodologa de la validacin en el ciclo 2009-2010 Tratamientos probados

Validacin de un programa MIP MB-Geminivirus, de acuerdo a resultados de estudios desarrollados por diversos autores, con dos hbridos de tomate (Seri, tolerante a geminivirus, y Brigade, susceptible a geminivirus).

Cada hbrido cont con una superficie de mil 760 m 2.

Manejo convencional de MB-Geminivirus en parcela de tomate del hbrido Brigade, en 3 mil 520 m2, de acuerdo al manejo acostumbrado en forma comercial en la regin (basado en el control qumico con insecticidas convencionales, en su mayora).

Parcela de testigo absoluto de tomate con hbrido Brigade, en 2 mil 520 m2, sin proteccin contra mosca blanca.

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Angelina

Planta de tomate afectada por Geminivirus Tomato Yellow Leaf Curl Virus (TYLCV)

El MIP MB-Geminivirus de hbridos Seri, Brigade y del testigo absoluto resultaron estadsticamente diferentes a la parcela con manejo convencional (5%). El nmero promedio de ninfas de mosca blanca por hoja fueron 0.5, 0.6, 6.1 y 80.2 para Brigade MIP, Seri, testigo absoluto y manejo convencional,

respectivamente. En el nmero promedio de insectos benficos, el tratamiento MIP MB-Geminivirus mostr una incidencia de fauna benfica generalmente mayor que el tratamiento con manejo convencional (P<0.05).

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 Con avispitas parasitoides Ichneumonidae y depredadores Staphilynidaeno se detect diferencia significativa. En el caso de la avispita lisiflebus, parasitoide de fidos y de moscas Tachinidae, parasitoide de larvas de lepidptera, la presencia fue altamente significativa para el testigo absoluto, probablemente debido a una mayor incidencia de insectos plaga hospederos en ese tratamiento (datos no incluidos). Nmero de plantas y frutos con sntomas de geminivirus En la variable nmero de plantas con sntomas de virus se detect diferencia significativa entre los tratamientos (P<0.05). Los dos hbridos de la parcela de validacin mostraron un nmero mucho menor de plantas infectadas con virus, especialmente el hbrido Seri , tolerante a geminivirus. Estos resultados prueban que el programa de estrategias para el MIP MBGeminivirus en tomate es mejor para reducir la infeccin de virus que el manejo convencional, como respecto al testigo absoluto sin proteccin contra MBGeminivirus. La mayor cantidad de plantas con sntomas de virus en el manej convencional, respecto al testigo absoluto, pudo deberse a que el insecto infectivo, al ser afectado por insecticidas con efecto neurotxico, increment su actividad, con lo que provoc mayor alimentacin, mayor inoculacin y diseminacin del patgeno. La presencia de mosca blanca fue reducida en todos los tratamientos durante la mayor parte de desarrollo del cultivo, sin embargo, al incrementarse la poblacin del insecto a nivel regional, el manejo convencional present una mayor incidencia de ninfas que el resto de los tratamientos. Adems, el efecto del programa de MIP mosca blanca se reflej en el nmero de plantas con sntomas de TYLCV.

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 El empleo de insecticidas biorracionales permiti mayor abundancia de fauna benfica. El tratamiento MIP fue ms econmico en el control qumico de mosca blanca.

Comentarios finales Para que el manejo de mosca blanca sea satisfactorio es necesario realizarlo de manera integrada, pues ninguna prctica de control por s sola es suficiente para obtener un control efectivo. Adems, se requiere que la implementacin de las medidas fitosanitarias sea a nivel regional, considerando la secuencia de los cultivos hospedantes preferidos establecidos a travs del ao complet. Es difcil controlar esta plaga adecuadamente en uno o unos cuantos lotes, en slo una determinada poca del ao. Tambin se necesita de la participacin de todas las instancias involucradas con la sanidad vegetal, principalmente de los productores agrcolas. Dentro de las medidas de combate contra la mosca blanca, indudablemente las ms importantes son las orientadas a prevenir su elevado desarrollo poblacional, especialmente aquellas prcticas que se implementan a escala regional (ventana

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FITOPATOLOGA. LOS VIRUS GEMINIVIRUS. 2013 libre de hospederos preferidos, produccin de plntula en invernadero, periodo de siembra recomendado, destruccin oportuna de socas, etctera), por encima de las estrategias a nivel predio. Las medidas de control correctivas, generalmente implementadas a nivel predio, como las aplicaciones de insecticidas (cuando se tiene ya una elevada poblacin de la plaga) logran reducir momentneamente (unos cuantos das) su incidencia y dao, pero el insecto se recupera pronto con las fuertes migraciones. Sin embargo, todas las tcticas tienen importancia y contribuyen por s solas, en menor o mayor grado, al manejo de la plaga; pero seleccionadas, integradas e implementadas adecuadamente pueden ser determinantes. La fecha de siembra es una prctica fitosanitaria muy importante, posiblemente en mayor grado que otras. En las dos temporadas de validacin se observ que las poblaciones de mosca blanca se redujeron durante todo el desarrollo de cultivo, incluso en las parcelas testigo. Si las parcelas testigo se hubieran establecido ms tarde, la poblacin del insecto y el dao como fitfago y como vector habra sido elevado. En todo caso, lo ms recomendable es realizar, en forma simultnea, el MIP MBGeminivirus en forma regional y a nivel predio.

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CONCLUSIN. En la mayora de las regiones no se ha logrado un manejo exitoso de los virusgeminivirus transmitidos por mosca blanca, fidos, y otros vectores. Se puede decir que para la mayora de estos virus, las estrategias de manejo debern tener varios componentes y estar basadas en el entendimiento total de los patosistemas involucrados. La piedra angular de la proteccin de cultivos ser el uso de cultivares resistentes, de manera que el desarrollo de la resistencia en los cultivos, para consumo fresco como para uso industrial es crucial. Sin embargo, un buen programa de mejoramiento depender del entendimiento total de los patgenos involucrados. Por tanto, la caracterizacin de los geminivirus, es el paso ms importante para establecer un programa exitoso de mejoramiento. La liberacin de cultivares debera ser complementado por estrategias de manejo del vector, las cuales actualmente se apoyan exclusivamente en insecticidas qumicos. Desafortunadamente, las poblaciones de mosca blanca ya estn desarrollando resistencia a los productos qumicos. La falta de estrategias de manejo del vector, se debe en parte, al poco conocimiento de la epidemiologa de los geminivirus. Considerando la alarmante tasa de emergencia de geminivirus, se ve la necesidad urgente de desarrollar planes de trabajo apropiados. Es probable, que slo mediante un enfoque de componentes mltiples, se puedan desarrollar estrategias econmica y ambientalmente viables para el manejo exitoso de estos virus.

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