Captulo 5 Identificao e Utilizao de Biomarcadores Moleculares para Caracterizao de leo Derramado em Manguezais

5.1. Introduo Uma das grandes dificuldades na avaliao da extenso dos danos de derramamentos de petrleo e/ou derivados no ambiente , sem dvida, o intemperismo. A evaporao, fotooxidao, biodegradao, entre outros processos, podem mascarar a distribuio de hidrocarbonetos no sedimento, dificultando a identificao do produto derramado. Uma ferramenta que vem
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sendo muito utilizada na avaliao ambiental de acidentes envolvendo petrleo e derivados so os biomarcadores. Biomarcadores so compostos orgnicos que possuem uma fonte especfica e estabilidade molecular, mantendo a assinatura de origem (Simoneit, 1984). A sua utilizao de grande importncia na identificao da origem de depsitos petrolferos e a evoluo de derramamentos no ambiente, pois possuem informaes relevantes que podem caracterizar o leo, alm de avaliar o grau de intemperismo do produto no ambiente. Entre os biomarcadores, os hopanos, terpanos e esteranos tm sido utilizados em estudos ambientais em funo da sua alta resistncia degradao (Volkman et al., 1983; Chosson et al., 1992; Moldowan et al., 1992). Suas molculas possuem peso molecular entre 250 500 u.m.a. e tem alta concentrao relativa no petrleo (Hauser et al., 1999). Alguns exemplos da utilizao de hopanos, terpanos e esteranos podem ser citados. Em estudo realizado por Grossi et al. (2002), a concentrao de hidrocarbonetos foi determinada em funo do tempo e profundidade do sedimento. O uso do 17(H),21(H)C30 hopano como padro interno possibilitou distinguir a frao de hidrocarbonetos que foi biodegradada. Ou seja, como um composto de difcil degradao, e levando em considerao o tempo estimado para um estudo relativo a possvel degradao do leo decorrente do derrame, utiliza-se esse composto para avaliar o grau de

47 degradao desse leo. Pois utilizando apenas os valores absolutos dos compostos teremos na realidade, a estimativa da diminuio das

concentraes por diversos processos e, com o biomarcador como padro interno pode-se quantificar apenas a degradao. Hauser et al. (1999) identificou 18 hopanos e 14 esteranos, utilizando-os para calcular vrios ndices de biomarcadores. Esses ndices fornecem caractersticas do leo, podendo auxiliar na identificao do leo derramado e a sua presena ou no no ambiente. Neste estudo pretende-se analisar os compostos diterpanos, hopanos e esteranos como uma ferramenta para identificar a possvel presena do leo derramado em manguezais da baa de Guanabara.
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5.2. rea de Estudo A descrio da rea de estudo j foi realizada no Captulo 3.

5.3. Metodologia 5.3.1. Metodologia de Amostragem Como para o estudo dos hidrocarbonetos, foram fixadas duas estaes de coleta nos manguezais do Suru e Nova Orleans, a primeira na floresta de franja e outra, distante cerca de 100 m, em direo ao interior do manguezal. Estas duas estaes foram selecionadas uma vez que sofreram impacto do derramamento de leo MF380 em janeiro de 2000. No manguezal de Piedade, considerado como controle, uma vez que aparentemente no foi atingido pelo derramamento de 2000 (UFRJ et al, 2000), foi amostrada apenas uma estao, a mais prxima da franja Baa de Guanabara. Em cada estao foram obtidos 6 testemunhos, sendo 2 no ponto central, 2 distantes 10m, para cada lado, do ponto central, e, finalmente, mais 2 a 20 m do ponto central. Esta distribuio foi paralela margem do manguezal na Baa de Guanabara.

48 Os testemunhos foram retirados com tubos de alumnio de 7 cm de dimetro que foram enterrados e com o auxlio de um pisto, amostrando cerca de 1 m de coluna sedimentar. As amostragens foram realizadas anualmente, totalizando cinco

amostragens, sendo assim distribudas: novembro de 2000, setembro de 2001, setembro de 2002, setembro de 2003 e setembro de 2004, resultando em 264 amostras de sedimento. 5.3.2. Metodologia de Anlise 5.3.2.1. Hopanos e Esteranos Ao chegar no laboratrio, os testemunhos foram seccionados da seguinte maneira: a 1 camada (camada superficial) com 3 cm de espessura, as
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camadas seguintes foram cortadas, a partir da 1, de 5 em 5 cm at 38 cm de profundidade (camada 9). A partir desta, as camadas foram seccionadas a cada 10 cm. Geralmente os testemunhos coletados proveram cerca de 13 camadas (88 cm). As camadas correspondentes dos 5 testemunhos obtidos em cada estao foram homogeneizadas para a formao de amostras compostas para as anlises dos biomarcadores. Para a extrao nos sedimentos foi utilizado o mtodo EPA 3540C, onde foram pesados cerca de 12g de sedimento mido, misturado com aproximadamente 30 g de sulfato de sdio anidro para a retirada de gua. Para o controle da recuperao de todo o procedimento analtico para a determinao de hidrocarbonetos alifticos, utilizou-se padres deuterados nC16D34 e nC30D62 como subrogados, que foram adicionados s amostras, no incio do processamento. A extrao dos hidrocarbonetos das amostras de sedimento foi realizada em Soxhlet por 24 horas com uma mistura de diclorometano-acetona (1:1, V/V). O volume do extrato foi reduzido em evaporador rotatrio, efetuando-se a troca de solvente para n-hexano, antes do fracionamento por cromatografia lquida.

49 O extrato j concentrado (prximo a 1 mL) foi fracionado em uma coluna de vidro com 1,3 cm de dimetro contendo 11 g de slica e 1 g de alumina (5 %, p/v, desativada). A frao de hidrocarbonetos saturados (F1) que contm os nalcanos, os hopanos e esteranos, foi eluda com hexano, concentrada em evaporador rotatrio, avolumada e dividida em duas partes iguais. Uma foi avolumada a 1 mL e analisada por cromatografia gasosa acoplada espectrometria de massas (CG/EM) para a determinao dos hopanos e esteranos utilizando-se o Pregnano d4 como padro interno. As anlises foram realizadas em um equipamento tipo on-trap, marca Thermo Finnigan, modelo Polaris Q, com um cromatgrafo Trace 2000. Utilizou-se uma coluna J&W DB5ms-HSD, de 30 m, 0,25 mm e filme de 0,25 m. As condies analticas foram:
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CG: 50 C 5min; 50 C min-1 at 80 C 6 C min-1 at 280 C, permanecendo esta temperatura por 25 minutos. MS Polaris Q: Full scan 55-500 u.m.a. Fonte 175 C Scan time 0,48 seg Energia do feixe de eltrons 30 eV Corrente de emisso 250 A O equipamento foi calibrado com solues de diferentes concentraes dos padres 17(H),21(H)C30 hopano, 20S Colestano (Chiron) em hexano e, utilizando-se a frao de hidrocarbonetos saturados de um leo iraniano leve, como padro, para determinar o tempo de reteno e o espectro de massas dos principais homlogos da srie matura dos hopanos, dos diterpanos tricclicos e tetracclicos e dos esteranos. Os diterpanos e os hopanos, total de 32 compostos, foram todos determinados utilizando-se o meso fator de resposta do 17,21()C30 hopano, enquanto os esteranos, 14 compostos,

50 foram determinados pelo fator de resposta do 20S Colestano. Foi utilizado como padro interno o Pregnano-d4. A lista dos compostos com suas nomenclaturas est apresentada na Tabela 5.1. A literatura mostra que a anlise de hopanos e esteranos normalmente realizada utilizando equipamento com analisador magntico ou quadrupolos (Peters & Moldowan, 1993; Douglas et al., 1996; Munoz et al., 1997; Hauser et al., 1999; Yunker et al., 2003; Dahl, 2004; Burns et al., 2004; Colombo et al., 2005; Boonyatumanond et al., 2006). O problema que com as condies normais de ionizao, o espectro de massa de hopano obtido em um espectrmetro de massa tipo on-trap no possibilita a identificao devido baixa sensibilidade apresentada para o on molecular, o M-15 e o m/z 369, relativo perda da cadeia hidrocarbnica ligada ao carbono 21.
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Observou-se que, com o decrscimo da temperatura da fonte de ons e da energia de ionizao, foi possvel melhorar a intensidade relativa do on molecular, do M-15]+ e do m/z 369, porm, ao contrrio do que deveria se esperar, a intensidade absoluta do espectro aumentou, melhorando a detectabilidade do sistema para a anlise de biomarcadores moleculares, tipo hopanos. Aps vrios testes otimizou-se o sinal dos ons a uma temperatura de 175 C e energia de ionizao igual a 30 eV. Sob estas condies, pde-se observar um aumento na intensidade do sinal de 384 % do on 369 e 374 % do on 397, em relao s intensidades medidas utilizando as condies padro para a determinao no quadrupolo. As figuras a seguir apresentam os espectros de massa obtidos nas condies normais de funcionamento do detector on-trap (Figura 5.1), e nas otimizadas, mais adequadas para a anlise de hopanos neste mesmo detector (Figura 5.2) e em um detector quadrupolo (Figura 5.3).

51
Tabela 5.1 - Nomenclatura dos diterpanos, hopanos e esteranos identificados.
Nomenclatura 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 23 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 C19_Triciclico C20_Triciclico C21_Triciclico C22_Triciclico C23_Triciclico C24_Triciclico C25_Triciclico C26_Triciclico a C26_Triciclico b C2713b17a_20S C2713b17a_20R C28_Triciclico a C28_Triciclico b C27aaa_S C29_Triciclico a C27abb_R C27abb_S C29_Triciclico b C27aaa_R Ts C28aaa_S C28abb_R Tm C30_Triciclico a C28abb_S C28aaa_R C29aaa_S C30_Triciclico b C29abb_R C29abb_S C29aaa_R C29_Hop M29 C30_Hop M30 C31_Hop_S C31_Hop_R GAM C32_Hop_R C32_Hop_S C33_Hop_S C33_Hop_R C34_Hop_S C34_Hop_R C35_Hop_S C35_Hop_R Nome Tricclico (C19) Tricclico (C20) Tricclico (C21) Tricclico (C22) Tricclico (C23) Tricclico (C24) Tricclico (C25) Tricclico (C26)a Tricclico (C26)b 13,17 diacolestano 20S 13,17 diacolestano 20R Tricclico (C28) Tricclico (C28) 5,14,17 colestano 20S Tricclico (C29)a 5,14,17 colestano 20R 5,14,17colestano 20S Tricclico (C29)b 5,14,17 colestano 20R 22,29,30-Trisnorhopano-II 5,14,17 ergostano 20S 5,14,17 ergostano 20R 22,29,30 Trisnorhopano Tricclico (C30)a 5,14,17 ergostano 20S 5,14,17 ergostano 20R 5,14,17 estigmastano 20S Tricclico (C30)b 5,14,17 estigmastano 20R 5,14,17 estigmastano 20S 5,14,17 estigmastano 20R 17, 21(H)-30 norhopano 17, 21(H)-30 norhopano (normoretano) 17, 21(H)-30 hopano 1721(H) hopano (moretano) 17, 21(H)-29 homohopano 22s 17, 21(H)-29 homohopano 22R Gamacerano 17, 21(H)-29 bishomohopano 22R 17, 21(H)-29 bishomohopano 22S 17, 21(H)-29 trishomohopano 22S 17, 21(H)-29 trishomohopano 22R 17, 21(H)-29 tetrakishomohopano 22S 17, 21(H)-29 tetrakishomohopano 22R 17, 21(H)-9 pentakishomohopano 22S 17, 21(H)-29 pentakishomohopano 22R

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52 A partir das figuras, nota-se uma grande semelhana entre os espectros das figuras 5.1 e 5.3, o que j no se v na Figura 5.2. Isso demonstra que ao configurar o detector on-trap nas condies otimizadas, alm de se promover um aumento das intensidades dos ons produzidos, tambm foi obtido um espectro mais semelhante ao quadrupolo. Este fato muito importante na comparao de espectros com os presentes na literatura, uma vez que, conforme j destacado, todos os trabalhos at agora publicados obtiveram espectros com detectores quadrupolo.

Hop 160002 #3963 RT: 42.68 AV: 1 SB: 1 42.55 NL: 1.09E6 T: + c Full ms [ 55.00-500.00] 191.31 100 95 90 85

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80 75 70 65 Relative Abundance 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 95.26 10 5 0 100 150 200 81.21 109.37 190.33 193.28 206.26 247.35 273.26 301.32 342.36 250 m/z 300 350 369.46 397.48 413.35 414.45 400 450 470.00 500 412.36 192.22

Figura 5.1 - Espectro de Massa do 17(H), 21(H)C30-hopano obtido de uma soluo do padro de hopano com concentrao de 1.600 ng mL-1. Equipamento: Finnigam Ion-Trap Polaris Q. Energia de ionizao: 30 eV e fonte a 175 oC.

53
Hop 160001200C #4169 RT: 43.22 AV: 1 SB: 1 43.07 NL: 4.79E5 T: + c Full ms [ 55.00-450.00] 191.23 100 95 90 85 80 75 70 65 Relative Abundance 60 55 50 45 40 35 30 25 192.25 20 15 10 5 109.24 81.26 67.19 121.25 135.24 149.26 193.21 218.26 100 150 200 259.28 301.25 300 356.26 369.42 350 397.42 412.30 413.32 400 450 95.26

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0 250 m/z

Figura 5.2: Espectro de Massa do 17(H), 21(H)C30-hopano obtido de uma soluo do padro de hopano com concentrao de 1.600 ng mL-1. Equipamento: Finnigam Ion-Trap Polaris Q. Energia de ionizao: 70 eV e fonte a 200 oC (condies usuais de funcionamento).

HOP16001_060530142300 #1429 RT: 39.04 AV: 1 SB: 1 39.21 NL: 6.64E5 T: + c Full ms [ 50.00-500.00] 191.1 100 90 80 70 Relative Abundance 60 50 40 30 20 10 0 50 100 150 200 95.0 81.0 69.0 123.0 137.1 163.0 193.1 218.1 412.3 397.3 413.3 369.3 414.4 350 400 450 192.1

231.1 281.2 250 m/z 300

328.4

482.9 500

Figura 5.3 - Espectro de Massa do 17(H), 21C30 Hopano obtido de uma soluo do padro de hopano com concentrao de 1.600 ng mL-1. Equipamento: Finnigam Quadrupolo DSQ. Energia de ionizao: 70 eV e fonte a 200 oC (condies usuais de funcionamento).

54

As figuras 5.4, 5.5 e 5.6 apresentam mais um exemplo da semelhana entre espectros obtidos no detector ion-trap (nas condies otimizadas e normais) e quadrupolo. Nos dois equipamentos foi injetada uma soluo da frao de hidrocarbonetos saturados de um petrleo iraniano leve, onde v-se o espectro do composto C29 17, 21(H) hopano. Conforme pode-se observar, a intensidade do on m/z 398 a mesma nos dois equipamentos. O mesmo pode ser observado nas Figuras 5.7, 5.8 e 5.9, onde esto apresentados os espectros do composto C31 17, 21(H)(22S) hopano, da mesma soluo da frao de hidrocarbonetos saturados de um leo iraniano leve obtida nos dois tipos de espectrmetro de massa (on-trap e quadrupolo), onde observa-se uma intensidade semelhante do on m/z 426.
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iraniano leve diluido 5x #4288 RT: 42,11 AV: 1 SB: 1 42,22 NL: 2,45E5 T: + c Full ms [ 55,00-500,00] 191,4 100 95 90 85 80 75 70 65 Relative Abundance 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 100 150 200 250 m/z 300 350 400 95,3 81,3 57,2 70,3 109,4 123,3 149,4 163,4 206,4 231,4 205,4 177,4 192,3 398,5

383,7 369,6

399,6 412,6 442,8 450,8 490,9 450 500

259,4 287,5 306,5 342,5

Figura 5.4 Espectro de massa do C29 17, 21(H) hopano obtido com detector do tipo onTrap. Condies: energia de ionizao - 30eV e fonte a 175C. Frao de hidrocarbonetos saturados de um petrleo iraniano leve.

55
F1 Iraniano leve #4508 RT: 42.01 AV: 1 SB: 1 41.92 NL: 1.90E5 T: + c Full ms [ 55.00-450.00] 191.2 100 90 80 70 Relative Abundance 60 50 95.3 40 30 20 10 81.3 79.3 109.3 177.2

121.3 135.2 163.2

192.2 205.2

206.2 207.1 100 150 200

263.2 250 m/z

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311.3 300

370.2 350

383.3

397.3 426.4 450

400

Figura 5.5 Espectro de massa do C29 17, 21(H) hopano obtido com detector do tipo onTrap. Condies: energia de ionizao - 70eV e fonte a 200C. Frao de hidrocarbonetos saturados de um petrleo iraniano leve.

F1_IranianoL_5x_02 #1383 RT: 37.86 AV: 1 SB: 1 38.01 NL: 2.26E6 T: + c Full ms [ 50.00-500.00] 191.1 100 90 80 70 Relative Abundance 60 50 40 95.0 30 20 10 0 50 100 150 200 250 m/z 300 350 400 81.0 69.0 163.1 205.2 253.2 281.1 355.1 398.4 383.3 436.5 444.4 489.2 450 500 123.1 192.2 177.1

Figura 5.6 - Espectro de massa do C29 17, 21(H) hopano obtido com detector do tipo Quadrupolo DSQ (Finnigan). Energia de ionizao: 70 eV e fonte a 200 oC (condies usuais de funcionamento). Frao de hidrocarbonetos saturados de um petrleo iraniano leve.

56
iraniano leve diluido 5x #4674 RT: 45,32 AV: 1 SB: 1 45,44 NL: 1,03E5 T: + c Full ms [ 55,00-500,00] 191,4 100 95 90 85 80 75 70 65 Relative Abundance 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 81,2 71,3 149,3 163,4 177,4 219,4 232,5 267,3 250 m/z 299,4 300 332,6 369,5 386,6 350 400 206,3 95,2 109,3 205,4

426,7 411,6 427,7 428,7 450 470,7 494,2 500

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0 100 150 200

Figura 5.7 - Espectro de massa do C31 17, 21(H)(22S) hopano obtido com detector do tipo on-Trap. Condies: energia de ionizao 30eV e fonte a 175C. Frao de hidrocarbonetos saturados de um petrleo Iraniano leve.
F1 Iraniano leve #4971 RT: 45.59 AV: 1 SB: 1 45.44 NL: 1.13E5 T: + c Full ms [ 55.00-450.00] 191.2 100 90 80 70 Relative Abundance 60 50 95.3 205.2 40 109.3 30 81.3 20 10 0 100 150 200 250 m/z 300 350 400 450 67.2 206.2 219.2 232.2 274.2 287.3 343.3 369.3 411.3 412.3 135.2 163.2

402.4

Figura 5.8 - Espectro de massa do C31 17, 21(H)(22S) hopano obtido com detector do tipo on-Trap. Condies: energia de ionizao 70eV e fonte a 200C. Frao de hidrocarbonetos saturados de um petrleo Iraniano leve.

57
F1_IranianoL_5x_02 #1511 RT: 40.63 AV: 1 SB: 1 40.74 NL: 1.05E6 T: + c Full ms [ 50.00-500.00] 191.1 100 90 80 70 Relative Abundance 60 50 205.2 40 30 20 206.2 10 219.2 411.4 253.2 250 m/z 273.2 300 341.0 369.3 350 400 427.4 442.5 475.5 450 500 95.0

81.0 69.0 109.1

163.1 426.4

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0 50 100 150 200

Figura 5.9 - Espectro de massa do C31 17, 21(H)(22S) hopano obtido com detector do tipo Quadrupolo (Finnigam). Energia de ionizao: 70 eV e fonte a 200 oC (condies usuais de funcionamento). Frao de hidrocarbonetos saturados de um petrleo Iraniano leve.

5.4. Resultados e Discusso As tabelas que contm as concentraes dos 14 esteranos e 32 diterpanos e hopanos identificados e quantificados nas amostras de sedimento esto no Anexo 1. Nas amostras de sedimento analisadas houve o predomnio do C30 hopano seguido do C29 hopano, nas reas que foram afetadas pelo derrame de leo, como o caso dos manguezais de Suru e Nova Orleans. J que caracterstico da maioria dos leos o predomnio desses compostos. Na camada superficial em Suru o C30-hopano chegou a alcanar um valor de 6586 ng g-1. No manguezal de Piedade, em todas as amostragens, as concentraes obtidas para a maioria dos compostos diterpanos e hopanos foram menores que o limite de quantificao (16 ng g-1). Este fato um forte indicativo da ausncia de grandes quantidades de petrleo e/ou derivados neste ambiente e,

58 portanto, corrobora a informao que no houve impacto direto do derramamento de leo de 2000 sobre este manguezal. Medeiros et al., 2004a encontrou altas concentraes de hopanos em amostras de sedimento do infralitoral da baa de Santos, regio essa impactada por petrleo, onde os valores de C30 hopano chegaram a atingir 604,3 ng g-1. J em outra regio (no canal de So Sebastio), o mesmo autor obteve valores do C30 hopano entre 31,2 e 118,5 ng g-1, local este onde o predomnio dos compostos de origem biognica, mas com a presena de material petrognico. Esses resultados esto dentro da faixa de concentrao de C30 hopano encontrados no manguezal de Nova Orleans, que foi atingido parcialmente pelo leo, onde a variao observada foi de 16 a 326 ng g-1 e, no manguezal de Piedade, que apresentou uma variao entre 16 e 75,0 ng g-1.
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J o manguezal de Suru mostrou uma grande variao (16 a 10545 ng g-1), apresentando elevados valores de concentrao, tpicos de ambientes contaminados. Em relao distribuio dos hopanos, observa-se que sempre os compostos S apresentaram concentraes superiores aos seus

correspondentes R. Este comportamento citado por Peter & Moldowan (1993), onde os compostos S tem uma maior contribuio do que os compostos R na composio final do leo. Tambm houve um decrscimo das concentraes dos hopanos com o aumento do peso molecular, ou seja, C31 > C32 > C33 > C34 > C35, o que j foi observado por Wang et al. (1995) quando h a ausncia do 25 norhopano. No presente estudo no foi verificada a presena do 25 norhopano, j que este composto resultante da biodegradao do C30 hopano e na escala de tempo que estamos estudando essa degradao difcil de ocorrer. Esta escala de degradao sugerida tambm por Peter & Moldowan (1993), onde o ataque microbiano mais efetivo nos compostos hopanos mais pesados. Munoz et al. (1997), ao analisar amostras de sedimento do manguezal contaminado com petrleo rabe Leve em Guadalupe, tambm encontrou esta tendncia de degradao dos hopanos. As Figuras 5.10, 5.11 e 5.12 a seguir mostram a distribuio dos marcadores moleculares (hopanos e esteranos) no leo MF380 (derramado no

59 acidente de 2000) e em amostras de sedimento da camada superficial do manguezal do Suru (rea mais atingida pelo acidente) obtidas na 1a e 5a coleta. Observa-se que o perfil da amostra coletada na 1 amostragem (Figura 5.11) muito semelhante ao do leo derramado. J na Figura 5.12, referente amostra de sedimento obtida na ltima amostragem (4 anos aps o derrame), j existem sinais claros de degradao de alguns compostos, principalmente os esteranos e os hopanos C34_hop_S, C34_hop_R, C35_hop_S e C35_ hop_R. Nos outros dois manguezais (Nova Orleans e Piedade) no possvel a visualizao do mesmo perfil do leo, o que, mais uma vez, comprova a baixa ou ausncia (como o caso de Piedade) da influncia do derrame nesses ambientes.

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leo MF380 120000

100000

80000 ng g-1

60000

40000

20000

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46

Figura 5.10 Distribuio dos marcadores moleculares no leo MF380, onde os nmeros do eixo X representam os compostos identificados na Tabela 5.1.

60

S111 7000 6000 5000 4000 ng g-1 3000 2000 1000 0

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46

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Figura 5.11 Distribuio dos marcadores moleculares no manguezal do Suru para a amostra superficial coletada na 1 amostragem, onde os nmeros do eixo X representam os compostos identificados na Tabela 5.1.

S511 3000

2500

2000 ng g -1

1500

1000

500

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46

Figura 5.12 Distribuio dos marcadores moleculares no manguezal do Suru para a amostra superficial coletada na 5 amostragem, onde os nmeros do eixo X representam os compostos identificados na Tabela 5.1.

61 Cada leo possui caractersticas prprias, onde a relao entre os compostos nica, o que permite a sua identificao e presena no ambiente atravs dessas razes. Neste estudo foram calculadas as razes Tm/Ts, C23/C24, C29/C30, C23/C30, C24/C30, C31S/(S+R), C32S/(S+R), C33S/(S+R), C27abb/C29abb, C28abb/(abb+aaa), C29abb/(abb+aaa) para a avaliao da degradao do leo e a sua permanncia nos sedimentos dos manguezais. Analisando as razes calculadas de hopanos e esteranos do leo e relacionando-as com as obtidas para as amostras de sedimento dos manguezais, pode-se detectar a presena do leo derramado em todas as amostras superficiais de sedimento do manguezal de Suru, como mostra a Tabela 5.2. Destaque para a camada 6 (28 cm), coletada na ltima
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amostragem, ou seja, 4 anos aps o derrame, onde ainda so encontrados vestgios do leo derramado em 2000. A infiltrao do leo para camadas mais profundas muito comum em ambientes com baixo hidrodinamismo, com alta salinidade e rico em matria orgnica (Jacobi & Schaeffer-Novelli, 1990) e que tambm est sujeito atividade dos caranguejos que ali vivem.

Tabela 5.2 - Razes de hopanos e esteranos calculadas para as amostras superficiais coletadas na 1 amostragem e para o leo MF380.
Relaes Tm/Ts C23/C24 C29/C30 C23/C30 C24/C30 C31S/(S+R) C32S/(S+R) C33S/(S+R) C27abb/C29abb C28abb/(abb+aaa) C29abb/(abb+aaa) S111 2,40 1,64 0,93 0,67 0,41 0,57 0,55 0,57 1,10 0,52 0,44 NO111 1,64 1,49 1,08 1,02 0,69 0,50 0,60 0,63 P111 2,14 1,16 0,28 0,38 leo MF380 2,09 1,75 0,89 0,70 0,40 0,59 0,56 0,65 1,25 0,59 0,40

Aplicando as mesmas razes no manguezal de Piedade, os valores indicam a ausncia do leo derramado em 2000 nesse ambiente

62 Outro ponto importante a ser destacado nos resultados de hopanos e esteranos (Tabelas Anexo 1) que a partir da segunda coleta, um ano aps o acidente, tanto no manguezal do Suru como em Nova Orleans, j foi notada a ausncia, em grande parte das amostras, de alguns esteranos, justificando a sua maior degradabilidade em relao aos hopanos. Os esteranos so mais suscetveis degradao que os hopanos (Peter & Moldowan, 1993). Observando a srie de compostos dos esteranos, pode-se ver que a tendncia de degradao do presente estudo de 20S > 20S > 20R > 20R. J Hauser et al. (1999) sugere uma outra tendncia de degradao: 20R > 20S > 20R > 20S. Munoz et al. (1997) em seu estudo no manguezal contaminado com leo rabe Leve a seqncia de degradao dos esteranos apresentada tambm foi distinta
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obtida para os manguezais da baa de Guanabara: 20R > 20 (R+S) > 20S, confirmando a biodegradao em funo da sua estequiometria. A degradabilidade de um dado componente do petrleo no s funo de sua estrutura, mas, como sugeriu Sugiura et al. (1997) ela ir diferir de estudo para estudo, de acordo com a composio do leo cru, porque diferentes componentes podem induzir a atividade de diferentes espcies microbianas. Em se tratando do ambiente manguezal, como o nosso caso, alm da ocorrncia de vrias espcies microbianas, existem importantes forantes fsicas que atuam intensamente, favorecendo a remoo e/ou degradao do leo derramado. Estudos publicados tm mostrado que a diminuio da razo Tm/Ts est associada processos de fotodegradao do leo (Jacquot et al., 1996; Munoz et al., 1996). Analisando os dados, nota-se um decrscimo na razo Tm/Ts nas amostras superficiais do manguezal de Suru a cada amostragem realizada, variando de 2,4 (campanha 1) a 1,7 (campanha 5). No manguezal de Nova Orleans a variao observada foi de 1,64 a 1,89, apresentando um aumento nessa razo, com isso no se encontram evidncias de fotodegradao. A diminuio da razo C23/C30-hopano tambm indica a maior taxa de degradao do composto mais leve, em relao ao mais pesado, que de

63 mais difcil degradao. Esta queda foi observada a partir da 3 amostragem no manguezal de Suru em todas as camadas analisadas. Em Nova Orleans foi observada uma diminuio dessa relao at a 3 amostragem. De acordo com os dados obtidos a contaminao no manguezal de Suru clara, onde a presena do leo pode ser notada. Em Nova Orleans, essa evidncia j no to acentuada, o que sugere uma pequena contribuio do derrame na contaminao. No manguezal de Piedade no foram encontrados vestgios do leo derramado, caracterizando a regio como no contaminada em relao ao acidente de 2000.

5.5. Concluses De uma forma geral, a anlise dos hopanos permitiu a identificao do
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leo derramado nos manguezais e o acesso degradao do mesmo durante o perodo estudado. Pde-se afirmar que, aps 4 anos do acidente, ainda notada a presena do leo MF380 no manguezal de Suru, inclusive em camadas mais profundas, enquanto que em Nova Orleans essa presena j no evidenciada. Comparando o perfil do leo derramado com as amostras superficiais do manguezal de Suru na 1 e 5 amostragens, pode-se observar a semelhana entre os perfis, porm o obtido na ltima amostragem indica o processo de degradao de alguns compostos, principalmente os esteranos e os hopanos C34_S, C34_R, C35_S e C35_R. A ordem de degradao encontrada para os hopanos foi coincidente com as propostas pela literatura, ocorrendo o aumento da degradao dos compostos com o aumento do peso molecular, ou seja, seguindo a seqncia de degradao: C35 > C34 > C33 > C32 > C31. De acordo com os resultados da ltima amostragem j existem sinais claros de degradao de alguns compostos, principalmente os esteranos e os hopanos C34_hop_S, C34_hop_R, C35_hop_S e C35_ hop_R.

64 5.6. Referncias Bibliogrficas Boonyatumanond, R.; Wattayakorn, G.; Togo, A.; Takada, H. 2006. Distribution and origins of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in riverine, estuarine, and marine sediments in Thailand. Marine Pollution Bulletin , in press. Burns, K.A.; Greenwood, P.; Benner, R.; Brinkman, D; Brunskill, G.; Codi, G.; Zagorskis, I. 2004. Organic biomarkers for tracing carbon cycling in the Gulf of Papua (Papua New Guinea). Continental Shelf Research, 24: 23732394. Chosson, P.; Connan, J.; Dessort, D.; Lanau, C. 1992. In vitro biodegradation of steranes and terpanes: A clue to understanding geological situations. In: Biological markers in sediments and petroleum. (Eds) Moldowan, J.M.;
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