ENOS, sndrome metablico y enfermedades cardiovasculares

Los grandes estudios epidemiolgicos han establecido que la diabetes, la hiperlipidemia y la obesidad todo aumentan el riesgo de enfermedad cardiovascular. Sin embargo, no se conocen los mecanismos precisos por los que estos trastornos metablicos aumentan la propensin al desarrollo de la aterosclerosis.Recientemente, el concepto del sndrome metablico - una constelacin de condiciones como la obesidad, la hipertensin, la hiperlipidemia y la resistencia a la insulina - ha recibido mucha atencin. Los estudios sobre el sndrome metablico podran permitir una mejor comprensin de los mecanismos biolgicos sub yacentes que conducen a la enfermedad cardiovascular. Esta revisin se centra en la sintasa de xido ntrico endotelial y resume evidencia de que una reduccin de la biodisponibilidad de xido ntrico derivado del endotelio sirve como un vnculo clave entre los trastornos metablicos y el riesgo cardiovascular.

Por qu es importante para la enfermedad cardiovascular, sndrome metablico?

El sndrome metablico es una agrupacin de factores de riesgo cardiovascular, como la obesidad, la hiperglucemia, la di slipidemia y la hipertensin. A pesar de que haba sido conocido por muchos aos que cada una de las caractersticas de los componentes del sndrome metablico es un factor de riesgo cardiovascular, este concepto ha recibido un renovado inters en la descripcin de "Sndrome X" por Gerald Reaven en el 1988 Banting Conferencia de la Asociacin Americana de la Diabetes [1] . El concepto del sndrome metablico tiene varias consecuencias importantes. En primer lugar, cuando se aplica a la prctica clnica, se identifica un grupo de pacientes con mayor riesgo de desarrollar diabetes tipo 2 (DM2) y enfermedad cardiovascular (ECV). Dependiendo de la definicin utilizada, las personas con sndrome metablico tienen hasta cinco veces ms riesgo de diabetes tipo 2 y de dos a tres veces mayor riesgo de enfermedad cardiovascular aterosclertica que los que no 2 y 3 . En segundo lugar, el hecho de que las caractersticas clster de componentes individuales juntos proporciona informacin acerca d e sus interrelaciones y mecanismos fisiopatolgicos compartidos. Un rea activa de investigacin son los mecanismos moleculares por los que el riesgo de enfermedad cardiovascular se incrementa por el sndrome metablico y si los nuevos enfoques de tratamie nto puede ser desarrollado para tratar estos mecanismos.Esta opinin explora las relaciones entre el sndrome metablico, disfuncin endotelial y la sintasa de xido ntrico endotelial (eNOS).

El concepto del sndrome metablico

Definicin de sndrome metablico El Programa de Educacin (NCEP) del Panel III del National Cholesterol (ATPIII) 's fue desarrollado en 2001 [4] y revisado en 2005 [3] ( Tabla 1 ). Esta definicin establece que el sndrome metablico est presente si se cumpl en cualquiera de los tres de los cinco criterios: obesidad (circunferencia de cintura de ms de 40 pulgadas para los hombres o 3 5 pulgadas para las mujeres), hipertensin (ms de 135 sistlica o diastlica de ms de 85), hipertrigliceridemia en ayunas (m s de 150 mg / dl), lipoprotena de alta densidad (HDL) colesterol (menos de 40 en los hombres o 50 en las mujeres) y la hiperglucemia en ayunas (Actualmente, la glucosa superiores a 100 mg / dl). Ser en la medicacin para estas condiciones (por ejemplo, antihipertensivos o fibratos) tambin cumple con estos criterios. Estos criterios se seleccionaron debido a que son fcilmente evidentes a partir de la exploracin fsica y / o pruebas de laboratorio comnmente obtenidos. Por lo tanto, los criterios del NCEP ATP III se aplican fcilmente en los entornos de atencin de pacientes y estudios epidemiolgicos grandes. Dos caractersticas adicionales cree que desempean un papel en la fisiopatologa del sndrome metablico son la hipercoagulabilidad y la inflamacin sistmica 5 y 6 .
Tabla 1. Definicin de sndrome metablico NCEP ATP III (2005 revision) Absolutamente necesaria Ninguno OMS (1999) Resistencia a la insulina un(ITG, GBA, T2D, u otra evidencia de IR) Resistencia a la insulina o diabetes, adems de dos de los cinco criterios ms abajo ndice cintura / cadera> 0,90 (M) EGIR (1999) La hiperinsulinemia c(insulina plasmtica> 75 percentil) IDF (2005) Obesidad central: circunferencia de la cintura d 94 cm (M) o 80 cm (F) La obesidad, adems de dos de los cuatro criterios que a continuacin La obesidad central ya

Criterios

Cualquier tres de los cinco criterios ms abajo Circunferencia de la

Hiperinsulinemia, adems de dos de los cuatro criterios abajo Circunferencia de la cintura 94

Obesidad

NCEP ATP III (2005 revision) cintura> 40 cm (M) o> 35 pulgadas (F) La hiperglucemia Dislipidemia Dislipidemia (segundo criterio, separadas) Hipertensin La glucosa en ayunas 100 mg / dl o Rx TG 150 mg / dl o Rx Colesterol HDL <40 mg / dl (M) o <50 mg / dl (F), o Rx > 130 mm Hg sistlica o> 85 mm Hg diastlica, o Rx 3 y 4

OMS (1999) o> 0,85 (F), o IMC> 30 kg/m2 Resistencia a la insulina ya requiere TG 150 mg / dl, o C-HDL <35 mg / dl (M) o <39 mg / dl (F)

EGIR (1999) cm (M) o 80 cm (F) Resistencia a la insulina ya requiere TG 177 mg / dl o el C-HDL <39 mg / dl

IDF (2005) requiere La glucosa en ayunas 100 mg / dl TG 150 mg / dl o Rx Colesterol HDL <40 mg / dl (M) o <50 mg / dl (F), o Rx

140/90 mmHg

140/90 mmHg o Rx

> 130 mm Hg sistlica o> 85 mm Hg diastlica, o Rx

Otros criterios Refs

a

Microalbuminuria b [7] [8] [9]

IGT, intolerancia a la glucosa, IFG, la glucosa en ayunas; DT2, la diabetes tipo 2, IR, resistencia a la insulina;. otra evidencia incluye

estudios de clamp euglucmico b La excrecin urinaria de albmina 20 mg / min o cociente albmina-creatinina 30 mg . / g c . fiable slo en pacientes sin diabetes tipo 2 d Criterios para la obesidad central (permetro de cintura) son especficos para cada poblacin, los valores dados son para hombres y mujeres de Europa.

Los criterios del NCEP ATP III son similares a las otras definiciones principales del sndrome metablico ( Tabla 1 ), incluidos los de la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) [7] , el Grupo Europeo para el Estudio de la Resistencia a la Insulina (EGIR) [8] y el Federacin Internacional de Diabetes (IDF) [9] . Las caractersticas comunes de todas estas definiciones incluyen la intolerancia a la glucosa o resistencia a la insulina, la o besidad, la hipertensin y la dislipidemia. Sin embargo, hay varios puntos importantes que merecen ser mencionados 10 y 11 . En primer lugar, los criterios absolutos especficos son particulares para cada poblacin; normas para la circunferencia de la cintura, por ejemplo, son diferentes para los diversos grupos tnicos y nacionalidades. En segundo lugar, las diversas definiciones difieren en la forma en que estn estructurados. La definicin del NCEP ATPIII requiere tres de las cinco caractersticas definitorias, pero no uno solo es absolutamente necesario. Por el contrario, la OMS y las definiciones EGIR requieren la presencia de diabetes, intolerancia a la glucosa o resistencia a la insulina para el diagnstico del sndrome metablico y de la IDF requiere la obesidad central. Estas diferencias reflejan probablemente los componentes de cada organizacin considere como las causas primarias y centrales de la agrupacin general de los componentes de riesgo. En tercer lugar, las definiciones ms complicadas comprenden pruebas y mediciones que no se utilizan de forma rutinaria en la atencin al paciente, tales como medidas con la pinza euglucmicos, lo que limita su aplicacin generalizada. Finalmente, la utilidad del sndrome depende de si su propsito es identificar a los pacientes en mayor riesgo de enfermedad coronaria o diabetes tipo 2. A pesar de estas diferencias en la definicin y controversia acerca de la utilidad del concepto 10 , 11 , 12 y 13 , la agrupacin de definicin de caractersticas en el sndrome metablico indica que estas caractersticas individuales - la obesidad central, resistencia a la insulina, hipertensin y dislipidemia - no son independientes de uno s y son probablemente relacionados entre s de muchas maneras complejas. Un marco sostiene que la obesidad, particularmente la obesidad visceral o central, es la anormalidad primaria 7 y 8 . La obesidad visceral podra llevar a la resistencia a la insulina y diabetes tipo 2, y adipoquinas segregadas por la gras a visceral puede tener consecuencias vasculares que aumentan el riesgo de ECV[14] . Otro marco sostiene que la resistencia a la insulina es la anormalidad y resulta en alteraciones metablicas primaria que conducen a hipertensin, dislipidemia y un mayor riesgo de enfermedades cardiovasculares [9] . Las conexiones entre obesidad o resistencia a la insulina y los mecanismos reales de aumento de la aterognesis implican efectos sobre el endotelio vascular.

La disfuncin endotelial y eNOS

El endotelio comprende el revestimiento interno de los vasos sanguneos. En contraste con el punto de vista anterior de que la funcin del revestimiento endotelial de los vasos es servir como una barrera mecnica, ahora sabemos que el endotelio tambin detecta y responde a los estmulos fisiolgicos y patolgicos 15 y 16 . Se produce sustancias vasoactivas, incluyendo el xido ntrico (NO), prostaciclina y endotelinas. La expresin de molculas de adhesin de la superficie celular regula las interacciones con las clulas

circulantes, que son los leucocitos y monocitos, que afecta a la inflamacin, las plaquetas y, en ltima instancia, afecta a la trombosis. El endotelio tambin modula la respuesta de proliferacin y lesiones de la capa de msculo liso vascular, lo que contribuye a la formacin de neontima durante el desarrollo de placas aterosclerticas. Estas funciones de los conceptos actuales paralelas endotelio sobre la patognesis de la aterognesis 17 y 18 , que implican anomalas en la sealizacin vasculares, el estrs oxidativo, las clulas inflamatorias y la trombosis. La funcin endotelial normal protege contra estos procesos, y la disfuncin endotelial es central a la patognesis de desarrollo de la lesin aterosclertica. El NO es un gas producido por la sintasa (NOS) enzimas xido ntrico 19 y 20 . Hay tres isoformas de NOS, codificadas por genes separados en los cromosomas separados ( Tabla 2 ): NOS neuronal (nNOS), o tipo 1 NOS, NOS inducible (iNOS) o tipo 2 NOS, y eNOS o tipo 3 NOS. El papel esencial de NO como el factor relajante derivado del endotelio esquiva (EDRF) fue el tema del Premio Nobel 1998 de Fisiologa o Medicina21 y 22 . eNOS NO derivado sirve funciones importantes, incluyendo la regulacin del tono vascular y el flujo sanguneo regional, la supresin de la proliferacin de clulas del msculo liso vascular, la modulacin de las interacciones de leucocitos endoteliales y la modulacin de la trombosis. Estas funciones han sido confirmados por los fenotipos de los ratones knock-out para eNOS. gen eNOS deficiencia da lugar a hipertensin [23] , el aumento de la proliferacin de clulas del msculo liso vascular en respuesta a la lesin de los vasos [24] , el aumento de las interacciones de leucocitos endoteliales [25] , hipercoagulabilidad [26]y el aumento de la aterosclerosis inducida por la dieta 27 y 28 .
Tabla 2. isoformas de NOS Escriba 1 NOS Nombre comn Tipo de la clula Cromosoma Patrn de expresin Localizacin intracelular Localizacin Regulacin Salida Funcin Los procesos biolgicos nNOS Las neuronas 12 Constitutivo Soluble, sarcolema N-terminal de dominio PDZ Calcio-CaM Moderado (nM a mM) Sealizacin Aprender de memoria / Neurotransmisin Funciones autonmicas Fenotipo de ratones knockout El desarrollo del sistema nervioso central normal La estenosis pilrica Resistencia a un accidente cerebrovascular La susceptibilidad a las infecciones Resistencia a la hipotensin sptico Escriba 2 NOS iNOS Los macrfagos 17 Inducible Soluble N/A Transcripcin Alta (M) Toxina Inflamacin Defensa inmune Escriba 3 NOS eNOS Endotelio 7 Constitutivo Caveolas (asociada a la membrana) N-terminal de miristoilacin Calcio-CaM La fosforilacin Low (pM a nM) Sealizacin La vasodilatacin La proliferacin celular Adhesin leucocitaria Trombosis Ausencia de EDRF Hipertensin El aumento de la respuesta vascular a la lesin El aumento de la aterosclerosis Opciones de tabla

Una caracterstica comn de muchos factores de riesgo cardiovasculares (incluyendo la hipertensin, la diabetes, resistencia a la insulina, la obesidad y la hiperlipidemia) es la disfuncin endotelial. Debido a que el endotelio normalmente protege contra los procesos implicados en la aterognesis - a saber, la proliferacin de clulas del msculo liso, la inflamacin y la trombosis - la disfuncin endotelial es una importante va comn final en la que estos factores de riesgo aumentan la aterosclerosis. La disfuncin endotelial, en sentido amplio, se produce cuando el endotelio no para servir a sus mecanismos fisiolgicos normales y de proteccin 29 y 30 . Esto podra ocurrir debido a que el endotelio est daado o falta, com o en el caso de endotelio denudado en las arterias coronarias sometidas a angioplastia o intervencin percutnea. Tambin podra ocurrir como resultado de las toxinas metablicas, tales como cidos grasos libres (AGL) y citoquinas inflamatorias, incluyendo IL-6 y TNF-. La hiperglucemia, productos de glicosilacin avanzada y otras anormalidades metablicas podran alterar endoteliales vas de sealizacin intracelular, t ales como la va PI3K-Akt. Por ltimo, las especies reactivas de oxgeno (ROS), especialmente superxido, pueden secuestrar NO vascular y evitar que la induccin de la relajacin del msculo liso vascular 31 , 32 y 33 .

Aunque es difcil de evaluar todas las funciones del endotelio, uno de uso comn criterio indirecto de valoracin para la disfuncin endotelial es si las respuestas vasodilatadoras fisiolgicos estn intactos 29 y 30 . La dilatacin vascular a los mediadores tales como la acetilcolina o aumento del flujo sanguneo depende de NO producido por el endotelio 15 , 34 , 35 y 36 . En el laboratorio de cateterismo, este se puede medir mediante la supervisin del efecto de la infusin intracoronaria de acetilcolina. En el mbito clnico, que se refleja por la dilatacin mediada por flujo (FMD), medido por ecografa de deteccin de la respuesta del dimetro de la arteria braquial a reflujo despus de un perodo de oclusin vascular por un manguito de presin arterial [37] . Aunque cada mtodo mide las respuestas en diferentes lechos vasculares, la fiebre aftosa se correlaciona con las mediciones de laboratorio de cateterizacin de las respuestas de la circulacin coronaria [38] . Por otra parte, la fiebre aftosa predice futuros eventos cardiovasculares [39] . Por lo tanto, la fiebre aftosa es un mtodo comnmente utilizado para evaluar la funcin endotelial y alteracin de la fiebre aftosa se toma para reflejar la disfuncin endotelial. En general, la disfuncin endotelial es un importante vnculo fisiopatolgico entre la aterognesis y muchos factores de riesgo cardiovasculares conocidos, tales como la hipertensin, la obesidad, la diabetes y la dislipidemia. Hay varios mecanismos para la disfuncin endotelial 20 y 40 , como se muestra en la Figura 1 . Una caracterstica comn de la disfuncin endotelial se reduce la biodisponibilidad de NO en la vasculatura. Los posibles mecanismos de alteracin de la disponibilidad de NO incluyen una re duccin de la eNOS mRNA y los niveles de expresin de protenas [41] . Sin embargo, los estudios en modelos animales y seres humanos sugieren que la diabetes y la aterosclerosis no estn necesariamente asociados con una disminucin en la cantidad de la eNOS total de 42 y 43 . L-arginina, el sustrato para la eNOS, tambin puede ser un factor limitante en los tejidos [44] . Un inhibidor competitivo endgeno, dimetilarginina asimtrica (ADMA), podra reducir la produccin de NO endotelial incluso en la presencia de los niveles de L-arginina adecuados [44] . Esta es la base para las recomendaciones para los suplementos de arginina para aumentar la eNOS deriva la produccin de NO. Sin embargo, bajo ciertas condiciones, aumento de la actividad enzimtica de eNOS en el entorno de la deficiencia de cofactor podra ser ms perjudicial que beneficioso [45] . eNOS requiere cofactores enzimticos, como la flavina adenina dinucletido, flavinmononucletido, adenina dinucletido fosfato cido de nicotina (NADPH), y tetrahidrobiopterina (BH 4 ).BH 4 , la sntesis de las cuales es la tasa mxima por guanosina 5 'trifosfato ciclohidrolasa, es particularmente importante porque en su ausencia, el transporte de electrones a travs de la eNOS puede convertirse en' desacoplado ', lo que resulta en la generacin de anin superxido [46] . Para la actividad enzimtica completa, eNOS requiere la dimerizacin correcta y localizacin intracelular de caveolae, mediada en parte por las interacciones protena -protena con caveolina y protena de choque trmico 90 (Hsp90) 15 y 47 . eNOS est fosforilada en la serina 1177 (S1177) por Akt quinasa y otras quinasas 48 , 49 ,50 y 51 , se discute en detalle a continuacin. Por ltimo, el NO producido por la eNOS puede ser inactivado rpidamente por reaccin con superxido (O 2 - ) para formar anin peroxinitrito (OONO - ) [52] . El superxido se puede formar por el NAD (P) H oxidasa [53] o por la eNOS desacoplada [46] . Por lo tanto, hay mltiples mecanismos que pueden conducir a la disfuncin endotelial. Ellos no son mutuamente excluyentes, y mltiples mecanismos pueden operar simultneamente. Sin embargo, la caracterstica comn es una reduccin en la cantidad de NO biodisponible, que sirve normalment e para proteger el recipiente de los eventos moleculares que conducen a la aterosclerosis.
Figura 1. Regulacin de la actividad y mecanismos de la disfuncin endotelial eNOS. La biodisponibilidad de NO producido por la eNOS puede verse afectada en mltiples niveles, incluyendo (i) eNOS mRNA o expresin de la protena, (ii) la disponibilidad de la L-arginina, su sustrato, lo que podra ser compiti por ADMA; (iii) la disponibilidad de sus cofactores , incluyendo BH4, para el cual GTP ciclohidrolasa cataliza la etapa limitante de la velocidad, (iv) las interacciones protena-protena, por ejemplo, con caveolina (inhibidor; rojo) o hsp90 (estimulador; verde); (v) modificaciones post-traduccionales, tales como fosforilacin en S1177 por Akt y otras quinasas (estimulador; verde), y (vi) reaccin del NO con el superxido para producir peroxinitrito anin. Abreviaturas: ADMA, dimetil arginina asimtrica; BH4, tetrahidrobiopterina; eNOS, la sintasa de xido ntrico endotelial; GTP, guanosina 5'-trifosfato; hsp90, protena de choque trmico 90; NO, xido ntrico; O 2 - , superxido; OONO - , peroxinitrito anin; PKG, protena quinasa G; SOD, superxido dismutasa. Opciones Figura

Sealizacin de la insulina

Insulina normal de sealizacin resultados en la captacin de glucosa por el msculo esqueltico y la grasa, la supresin de la gluconeognesis heptica, y la vasodilatacin de aumento de la actividad enzimtica de eNOS 32 y 33 . Estos efectos estn mediados por la unin al receptor de insulina, un receptor de tirosina q uinasa activada por ligando insulina. Encuadernacin y la activacin de los resultados de la insulina del receptor en la fosforilacin de tirosina de sustratos del receptor de insulin a (IRS) y Shc, lo que resulta en la activacin de dos vas paralelas: la PI3 quinasa (PI3K)-Akt va y la quinasa va de Ras / Raf / MAP ( Figura 2). La fosforilacin de IRS-1 conduce a la activacin de la va PI3K-Akt. Akt quinasa fosforila eNOS en S1177 y lo activa, como se discute a continuacin. En los msculos esquelticos y tejido adiposo, Akt estimula la expresin del transportador de glucosa GLUT4, que resulta en la captacin de glucosa. La fosforilacin de Shc lleva a la activacin de las vas de la quinasa Ras / Raf / MAP, que resulta en efectos mitognicos, as como el aumento de la endotelina 1 (ET -1) la expresin 54 y 55 .
Figura 2. sealizacin de insulina. Sealizacin de la insulina en las clulas endoteliales se produce despus de la unin al receptor de insulina insulina. Esto hace que la activacin de dos vas separadas y paralelas: (i) PI3K-Akt y (ii) de Ras / Raf / MAP quinasa. (I) Akt quinasa fosforila eNOS en S1177, lo que resulta en aumento de la produccin de NO y la vasodilatacin. (Ii) Los MAP quinasa va da lugar a la endotelina-1 en la produccin y la vasoconstriccin. En otros tejidos, estas vas tienen efectos (que se muestra en letras de color azul oscuro). En el msculo esqueltico (a la izquierda), los resultados va PI3K-Akt en la translocacin de GLUT4 y la captacin de glucosa. En el msculo liso vascular (derecha), la MAP quinasa va da lugar a crecimiento y mitognesis. Abreviaturas: Enos, la sintasa de xido ntrico endotelial, ET-1, ET-1, transportador GLUT4, dependiente de la insulina la glucosa 4 '; MAP quinasa, la protena quinasa activada por mitgenos, PI3K, fosfatidilinositol-3-quinasa. Opciones Figura

Resistencia a la insulina se define como disminucin de la sensibilidad de los tejidos perifricos a efectos de la insulina 32 y 33 . Resistencia a la insulina altera el equilibrio entre las dos vas de sealizacin de la insulina aguas abajo. Especficamente, la va PI3K-Akt se altera en resistencia a la insulina 56 y 57 . Esto se traduce en disminucin de la actividad de la eNOS, menos la generacin de NO y la disminucin de la vasodilatacin mediada por la insulina [32] . En los tejidos perifricos, resistencia a la insulina conduce a una disminucin de la captacin de glucosa en los tejidos del msculo esqueltico y el tejido adiposo, debido a la regulacin negativa de la translocacin de GLUT4 54 y 55 . Por el contrario, la ruta de la quinasa Ras / Raf / MAP generalmente se preserva en la resistencia a la insulina [32] . Por lo tanto, sin oposicin ET-1 y la produccin de efectos mitognicos persisten y contribuyen a los efectos vasculares de la resistencia a la insulina. La relacin entre la disfuncin endotelial y la resistencia a la insulina es complejo, como se muestra en la Figura 3 . Las anormalidades metablicas observadas en el sndrome de la obesidad, la diabetes y metablico incluyen resistencia a la insulina y la adipos idad visceral. Ambos pueden causar disfuncin endotelial y, como resultado, conducir al desarrollo de la aterosclerosis 33 , 58 y 59 . Por el contrario, la disfuncin endotelial, especficamente la deficiencia de NO endotelial, podra dar lugar a alteraciones metablicas, incluyendo la resistencia a la insulina 31 y 60 . Adems, resistencia a la insulina puede causar dislipidemia aterognica y contribuir a la adiposidad visceral [32] .
Figura 3. Relacin entre resistencia a la insulina, la adiposidad visceral, y la disfuncin endotelial. Resistencia a la insulina puede causar disfuncin endotelial a travs de alteracin de sealizacin PI3K-Akt. La disfuncin endotelial, a su vez, puede causar resistencia a la insulina debido a la disminucin del flujo sanguneo y el reclutamiento capilar, lo que lleva a la disminucin de sustrato y la administracin de insulina. La disfuncin endotelial puede conducir a la resistencia a la insulina, as como la adiposidad visceral por alteracin de la biognesis mitocondrial. El tejido adiposo visceral puede secretar adipoquinas y cidos grasos libres, que pueden causar la disfuncin endotelial y la resistencia perifrica a la insulina. Por ltimo, resistencia a la insulina puede dar lugar a la dislipidemia aterognica, lo que puede contribuir a la obesidad visceral. Abreviaturas: PI3K, fosfatidilinositol-3-quinasa; cidos grasos libres, cidos grasos libres. Opciones Figura

El estrs oxidativo y la eNOS

En condiciones de estrs oxidativo, O

aumenta la produccin. O 2 - reacciona con NO para formar OONO -en una reaccin

extremadamente rpida que es esencialmente difusin limitada [52] . Por lo tanto, O 2 - barre NO y la hace disponible para mediar en sus funciones fisiolgicas, incluyendo la unin a la guanilato ciclasa soluble para estimular la vasodilatacin. Adems, OONO - puede causar dao oxidativo directa, as como la fosforilacin de la tirosina de las protenas endgenas, lo que afecta su funcin [61] . Debido eNOS desacoplada no slo no genera sino tambin genera O
2 -

, el aumento de la transcripcin de eNOS, la traduccin o la

2 -

actividad no garantiza la mejora de la funcin endotelial [47] . De hecho, como una fuente potencial de O para transgnica o la terapia gnica se acerca para aumentar la expresin de eNOS vascular.

, eNOS desacoplada puede

en realidad empeorar la situacin en comparacin con la eNOS enzimticamente inactiva o ausente. Esta es una limitacin importante

Efectos sobre la fosforilacin de la eNOS S1177

eNOS est fosforilada en varios residuos de serina y treonina 20 y 62 . De estos sitios potenciales de fosforilacin, S1177 parece ser un regulador crucial de su actividad enzimtica. S1177 resultados de fosforilacin en el aumento de flujo de electrones a travs del dominio reductasa y reducen calmodulina disociacin. Como resultado, la eNOS se vuelve ms activo y produce ms NO, incluso a los niveles de reposo de calcio intracelular [63] . Hay varias lneas de evidencia que indican que la fosforilacin de la eNOS S1177 es crucial para la relacin entre el metabolismo y la disfuncin vascular. En primer lugar, los modelos animales de diabetes, la hipercolesterolemia y la aterosclerosis, tales como db / db ratones y ratones apoE-knockout, muestran disminucin de la fosforilacin de la eNOS 64 y 65 . En segundo lugar, los estrgenos [66] , las estatinas[67] , y el proliferador de peroxisoma activado receptores PPAR y PPAR? agonistas de 68 y 69 aumento de fosforilacin de la eNOS S1177. Tercer molculas, vasculoprotectoras de sealizacin tales como la insulina, IGF-1, factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), la adiponectina y la leptina 49 , 51 , 70 , 71 y 72 todo aumento de eNOS S1177 fosforilacin. En cuarto lugar, el estrs de cizallamiento laminar y el flujo de aumento S1177 fosforilacin 48 , 50 y 73 . Por lo tanto, eNOS S1177 fosforilacin parece ser un paso crucial en la regulacin de la actividad de eNOS y un objetivo importante para la intervencin para tratar la disfuncin endotelial [40] . Adems de la quinasa Akt 48 , 49 , 50 y 51 , la eNOS S1177 se sabe que est fosforilada por varias otras quinasas, incluyendo la quinasa AMP [70] , la protena quinasa A (PKA) y la protena quinasa G (PKG) [74] , y dependiente de calmodulina quinasa II (CaMKII) [75] . El esfuerzo cortante, VEGF, la insulina, los estrgenos, las estatinas y la leptina estimula eNOS S1177 fosforilaci n de Akt quinasa activacin 66 , 67 ,72 y 76 . Por el contrario, la adiponectina y la resistina modular S1177 fosforilacin por la quinasa AMP 70 y 77 . Que las diversas vas de sealizacin afectan a mltiples quinasas que convergen para modular la actividad de eNOS por S1177 fosforilacin sugiere que esto podra ser un punto de integracin comn que subyace a la disfuncin endotelial por diversas causas ( Figura 4 ).
Figura 4. Papel de eNOS S1177 fosforilacin en la integracin de efectos de mltiples mediadores. eNOS S1177 es fosforilada por quinasas mltiples, incluyendo (i) la quinasa Akt y (ii) la quinasa AMP. El esfuerzo cortante, VEGF, la insulina, los estrgenos, las estatinas y la leptina actan todos a travs de Akt quinasa para aumentar S1177 fosforilacin. La adiponectina, resistina y otras seales metablicas actan a travs de AMP quinasa de influir S1177 fosforilacin. (Iii) El S1177 forma no fosforilada de la eNOS tiene menos actividad enzimtica y se asocia con menores niveles de NO vasculares que la forma fosforilada. (Iv) Por el contrario, S1177 fosforilada eNOS se asocia con un aumento de la reactividad vascular, los niveles de NO vascular ms alta, y efectos protectores sobre la proliferacin del msculo liso vascular, las interacciones de leucocitos endoteliales y la agregacin plaquetaria. Abreviaturas: AMP, monofosfato de adenosina; eNOS, la sintasa de xido ntrico endotelial; LE, leucocitos del endotelio; plt, plaquetas, factor de crecimiento endotelial VEGF, vascular. Las flechas verdes indican la estimulacin de la fosforilacin de la eNOS S1177, y la seal inhibidora rojo indica la inhibicin de la fosforilacin por la resistina S1177. Opciones Figura

Resistencia a la insulina causa la disfuncin endotelial por la disminucin de la actividad de Akt quinasa, lo que resulta en la disminucin de la fosforilacin y la actividad de la eNOS. Dado que se requiere la fosforilacin de la eNOS S1177 para las acci ones hemodinmicas de la insulina, su falta de resultados de fosforilacin en disminucin del flujo sanguneo al msculo esquelti co,

creando un crculo vicioso [32] .Adems, la insulina mediada por ET-1 de expresin y efectos mitognicos no se ven afectados por resistencia a la insulina [32] , lo que contribuye a la disfuncin endotelial.

Efectos de las adipoquinas y FFA de la grasa visceral

Las anormalidades metablicas primaria observadas en el sndrome metablico conducen a la acumulacin de grasa visceral. El tejido adiposo blanco se sabe que juega un papel no solo en el almacenamiento de energa, sino tambin en la produccin de factores que afectan a otros tejidos, incluyendo la vasculatura 14 y 78 . Estos factores incluyen la resistina, IL-6 y TNF-, que disminuyen la eNOS S1177 fosforilacin, lo que resulta en la disminucin de la actividad de eNOS y menos generacin de NO. Adems de bloquear la activacin del IRS-1, TNF- activa directamente la NADPH oxidasa, el aumento de O
2 -

generacin, y estimula la liplisis, lo que resulta

en ms la liberacin de AGL [79] . En la grasa visceral, la resistencia a la leptina tambin aumenta la generacin de ROS [80] . En contraste con estas otras adipoquinas, la adiponectina es protectora contra las enfermedades cardiovasculares 14 y 77 , en que estimula la eNOS S1177 fosforilacin por la quinasa AMP para mejorar la funcin endotelial fisiolgica y la produccin de NO.Curiosamente, los niveles de adiponectina estn disminuidos en diabetes tipo 2, la obesidad y el IR 58 y 59. Produccin FFA de la grasa visceral se incrementa en condiciones de resistencia a la insulina. FFA contribuye a la disfuncin endotelial por una combinacin de la disminucin de la sealizacin de PI3K-Akt, el aumento de ROS y el aumento de ET-1 de produccin 32 , 58 y 59 .

La disfuncin endotelial provoca resistencia a la insulina

Adems de los efectos de la obesidad, resistencia a la insulina y anormalidades metablicas en la eNOS y la funcin endotelia l, eNOS en s es necesaria para la sealizacin de la insulina intacta 54 , 71 y 81 .Aumenta la insulina mediada por la actividad eNOS y sin conductor de produccin para aumentar el flujo sanguneo y el reclutamiento capilar funcional a los tejidos perifricos [32] . Esto se traduce en una mayor prestacin de insulina y glucosa en el msculo esqueltico y la grasa, lo que contribuye a la captacin de glucosa mediada por la insulina. Por lo tanto, cuando se produce la disfuncin endotelial y efectos de redistribucin vasculares de la insulina se embota, hay un ciclo vicioso que resulta en una mayor reduccin en los efectos metablicos de la insulina en los tejidos perifricos debido a la disminucin del aporte de glucosa y la insulina en los tejidos.

eNOS y la funcin mitocondrial

Un enlace adicional importante entre la eNOS y la resistencia a la insulina es el papel esencial de la eNOS NO derivado en la biognesis mitocondrial 82 , 83 , 84 y 85 . En muchos tipos de clulas diferentes, incluyendo adipocitos blancos y marrones, donadores de NO o la expresin exgena de eNOS estimula la biognesis mitocondrial a travs de un mecanismo dependiente de GMP cclico [86] . Una reduccin en la biodisponibilidad de eNOS NO derivado podra d ar lugar a alteraciones en la homeostasis de la energa, lo que resulta en la generacin insuficiente de energa de la grasa almacenada en el tejido adiposo blanco y la insu ficiente generacin de calor (termognesis) del tejido adiposo marrn. Ambos efectos llevara a un mayor almacenamiento de grasa. El tratamiento sistmico de ratones con inhibidores farmacolgicos de la eNOS resultado defectuoso termognesis adaptativa. Adems, los ratones knock-out para la eNOS no responden a la exposicin al fro por la termognesis, y su desarrollo del tejido adiposo marrn y la funcin son defectuosos [86] . eNOS ratones knock-out tambin no muestran la biognesis mitocondria l en respuesta al ejercicio o restriccin calrica [87] . En conjunto, estos resultados muestran que la reduccin de la biodisponibilidad eNOS derivados de NO puede conducir a alteraciones en la homeostasis de la energa y la diferenciacin de los adipocitos que aumentan el riesgo para el sndrome metablico. De hecho, los ratones knock-out para la eNOS se han considerado para ser un modelo de ratn importante para el sndrome metablico [83] , ya que combinan muchas de sus caractersticas definitorias, incluyendo la hipertensin, la disfuncin endotelial, resistencia a la insulina y la obesidad.

Indicaciones para la investigacin futura

Resistencia a la insulina y la adiposidad visceral, dos caractersticas clave del sndrome metablico, contribuyen a la disfuncin endotelial mediante la reduccin de la biodisponibilidad de NO endotelial. Los mecanismos de estos efectos incluyen alteraciones en la

PI3K-Akt sealizacin, lo que resulta en la disminucin de la fosforilacin de la eNOS en S1177, los efectos directos de adipoquin as y FFA en funcin de la clula endotelial, y la generacin de ROS y la compactacin de NO ( Figura 3 ). Adems, la disfuncin endotelial en s afecta a la sealizacin de la insulina y perpeta un ciclo vicioso en el que la reduccin de la perfusin tisular y la entrega de la glucosa y de la insulina provoca ms resistencia a la insulina, resultando en efectos continuos sobre la funcin endotelial. La disfuncin endotelial tambin conduce a defectos en la biognesis mitocondrial, que contribuyen a la resistencia a la insulina y la homeostasis anormal de la energa. Una importante pregunta sin respuesta es si la intervencin en cualquiera de estos puntos relacionados entre s - resistencia a la insulina, la adiposidad visceral o disfuncin endotelial - puede efectivamente romper este ciclo. Por ejemplo, pueden intervenciones diseadas para aumentar la sensibilidad a la insulina a nivel de los tejidos perifricos traducirse en disminucin de la adip osidad o mejora de la funcin endotelial?Pueden las intervenciones diseadas especficamente para mejorar la funcin endotelial mejorar la sensibilidad a la insulina? Can pequeas molculas que aumentan la eNOS S1177 fosforilacin de la disfuncin endotelial inversa asociada con la diabetes, la obesidad o el sndrome metablico? Tales molculas pequeas pueden actuar sobre las quinasas que fosforilan S1177 (Akt, la AMPK, PKA, PKG y CaMKII) o las fosfatasas que median su desfosforilacin, que an no han sido bien caracterizado. En este sentido, los ratones genticamente alterados que lleva n mutaciones phosphomimetic o unphosphorylatable en eNOS S1177 pueden servir como herramientas tiles para establecer la prueba de principio de la eNOS fosforilacin como un obj etivo de frmaco efectiva [88] . Con farmacolgica o intervenciones transgnicos diseados para aumentar la actividad de la eNOS, ser importante para evaluar los posibles efectos sobre la eNOS desacoplamiento debido a la eNOS puede servir n o slo como una fuente de NO, sino tambin como una fuente de O 2 - . Para futuros estudios, ser fundamental utilizar modelos experimentales de enfermedades humanas en animales intactos que reflejan estas complejidades NO sealizacin. Mejor an, a la medida de lo posible, el examen de las respuestas en pacientes dar la informacin ms clnicamente relevante y confiable. Ahora que entendemos las relaciones complejas entre la resistencia a la insulina, la adiposidad visceral y la disfuncin endotelial, la tarea que tenemos ante nosotros es traducir este conocimiento en tratamientos efectivos para reducir las enfermedades cardiovasculares, que es la principal causa de morbilidad y mortalidad de la diabetes y las enfermedades metablicas relacionadas.