Anlise do DNA em vestgios encontrados na cena de crime por meio de microssatlites

Thas de Miranda Grochocki ; Paulo Roberto Martins Queiroz ;

Biloga. Aluna da Ps-Graduao em Biocincias Forense, pela Universidade Catlica de Gois/IFAR. Bilogo. PhD. Biologia Animal. UnB. Professor do IFAR/PUC-GO. Endereo: IFAR Instituto de Estudos Farmacuticos. SHCGN 716 BL B Lj 05 Braslia-DF CEP: 70770-732. E-mail: pqsilva@uol.com.br

RESUMO
Nos ltimos anos, a percia tem sido um tema muito presente nas atividades forenses. O objetivo deste trabalho foi descrever a importncia da anlise do DNA nos vestgios encontrados na cena de crime e os procedimentos de identificao por meio das tcnicas de PCR utilizando microssatlites. A anlise comea a partir do momento em que o perito chega na cena de crime, pois l sero encontrados os vestgios que ajudam a descobrir o que aconteceu, como ocorreu e quem foi o responsvel. A anlise do DNA nos vestgios coletados tm sido de grande utilidade e importncia na percia, pois tem ajudado a desvendar as investigaes de forma mais precisa. Com a tcnica do STR (do ingls, short tandem repeat), por exemplo, possvel fazer a anlise do DNA utilizando quantidades mnimas de amostra. Estas so tcnicas que esto revolucionando a rea forense e contribuindo para a soluo dos casos. Palavras chave: DNA; Microssatlites; Vestgios; Perito; Cena do crime;

ABSTRACT
In recent years, expertise has been a topic very present in forensic activities. The objective of this work was to describe the importance of DNA analysis in traces found in the crime scene and the procedures for the identification by means of the techniques of PCR using microsatellite. The analysis starting from the moment that the expert arrives in the crime scene, because there will be found traces that help to discover what happened, as has happened and who was responsible the forensic field and contributing to solve the cases. With the STR (short tandem repeat) technique, for example, it is possible to do DNA analysis using minimal amounts of sample. These are techniques that are revolutionizing the forensic field and contributing to solving the cases. Keywords: ADN; Microssatelite; Traces; Expert; Crime Scene;

1. INTRODUO Segundo Espndula (2003) um dos graves problemas encontrados pelos peritos em locais de crimes a dificuldade das entidades policiais em isolar e preservar o local. Este um dos requisitos cruciais para que os peritos possam realizar o exame pericial de forma satisfatria, a fim de no se perder qualquer vestgio que tenha sido produzido no ato do crime. Os vestgios constituem-se em qualquer marca, objeto ou sinal sensvel que possam ter relao com o fato investigado (MALLMITH, 2007). Os vestgios so de grande importncia na resoluo dos casos, pois por meio das anlises feitas nestes que o perito consegue descrever o que ocorreu, como ocorreu e quem cometeu o crime. Com o uso das tcnicas baseadas em DNA as anlises progrediram tecnicamente e foram desenvolvidos protocolos de anlise cada vez mais precisos. Convm ressaltar que as anlises de DNA podem ser complementadas a partir da deteco de protenas presentes em fluidos corporais, tais como, sangue, saliva e smen, permitindo esclarecer os fatos ocorridos em uma cena de crime (KOSHINO, 2010). As tcnicas de biologia molecular permitem a caracterizao da variabilidade do genoma humano ajudando, assim, na identificao de indivduos que possam estar relacionados direta ou indiretamente a um crime por meio de seu material biolgico (MARANO et al., 2010). A molcula de DNA possui regies polimrficas que so utilizadas como marcadores genticos, determinando a identidade gentica de cada pessoa e estabelecem um vnculo entre indivduos (SILVA, 2009). A tipagem de polimorfismos humanos ao nvel do DNA hoje considerada um dos mtodos mais sensveis, especficos e informativos para a identificao humana (PENA, 2005; LIMA, 2006; KOCK; ANDRADE, 2008). Os primeiros marcadores de DNA utilizados na identificao humana eram conhecidos como minissatlites. Estes ocupam loci ou regies nas quais acontecem repeties de conjuntos de oligonucleotdeos in tandem, que significa que ocorrem de forma consecutiva, porm foram substitudos pelos microssatlites (STRs -

do inlgs, short tandem repeats), que so repeties curtas in tandem (JOBIM et al., 2008). Os microssatlites so utilizados como marcadores genticos por possurem um alto nvel de polimorfismo encontrado em seu locus proporcionando, assim, sua utilizao em diversos estudos de anlise de indivduos (PROSDOCIMI, 2011). A deteco de regies repetitivas do DNA, tais como, os minissatlites (VNTR - do ingls, variable number of tandem repeat) e os STRs so os mtodos mais utilizados na identificao humana (SILVA, 2009). A anlise dos vestgios deixados na cena de crime fundamental para a identificao do criminoso e para a resoluo dos casos investigados pelos peritos criminais, sendo a anlise do DNA um dos mtodos mais precisos para a identificao humana. Sendo assim, faz-se necessria uma descrio dos principais mtodos de coleta e de anlise de DNA de vestgios para servir de consulta queles interessados nesse assunto contribuindo, assim, no aperfeioamento tcnico e obteno de resultados mais precisos. O objetivo deste trabalho foi descrever a importncia da anlise de DNA nos vestgios encontrados na cena do crime e os procedimentos de identificao por meio das tcnicas de PCR utilizando microssatlites.

2. METODOLOGIA

A metodologia consistiu em buscas em bases de dados nacionais e internacionais, tais como, Scielo, Google Acadmico, NCBI e BIREME. Foram utilizados artigos e livros relacionados criminalstica para a elaborao do texto. Por ser um assunto recente foram utilizadas bibliografias publicadas nos ltimos de anos. Os termos utilizados na pesquisa foram DNA forense, identificao humana, anlise de DNA, vestgios na cena do crime, forensic science e human DNA identification.

3. DESENVOLVIMENTO

3.1 Vestgios

Segundo White (2010) o valor probatrio dos vestgios comea no local investigado, pois se algum vestgio for deixado para trs ou, ento, for manuseado incorretamente de forma que este procedimento o inviabilize ou o contamine, mesmo que ocorra uma anlise laboratorial, no ser possvel corrigir o problema, pois a cena do crime no pode ser reanalisada de forma a tentar obter vestgios adicionais. O local de crime no se restringe apenas rea na qual o ato foi praticado, sendo dividido em duas partes: a) cena primria, sendo um local ou objeto onde o crime ocorreu ou onde h grande concentrao de vestgios fsicos; b) cena secundria, locais ou objetos onde vestgios fsicos so encontrados, porm longe da cena primria do crime, mas tendo relao com o fato (MONTEIRO, 2010). Uma investigao de crime para os peritos pode levar semanas ou meses, para ento conseguir identificar criminosos ou vtimas, ao invs de procedimentos que levam apenas algumas horas. Nem sempre consegue-se chegar a um suspeito em todos os casos analisados (YOUNT, 2007). Cabe ao perito providenciar provas incriminatrias ou inocentrias, quando h indiciao de suspeitos (WHITE, 2004). Segundo Monteiro (2010) o perito deve saber lidar com as cenas de crime, protegendo e processando os vestgios antes que os mesmos se danifiquem ou sejam destrudos. A investigao e o exame da cena de crime possuem diferentes anlises como identificao, registro e recolha de potenciais vestgios, sendo a investigao tambm responsvel pela interpretao das circunstncias envolventes do cometimento do crime. Os locais de crime, assim como, os vestgios nele contidos devem ser fotografados do modo como foram encontrados ou feitos desenhos esquemticos (OLIVEIRA, 2006). Durante a coleta e manipulao de material biolgico indispensvel a utilizao de luvas descartveis que devero ser trocadas a cada coleta, mscara cirrgica, touca, avental e sapatilha, para que no haja contaminao do material. O ideal utilizar instrumentos e

materiais estreis e descartveis, devendo ser reutilizados somente se houver limpeza e esterilizao, para que no haja mistura de materiais biolgicos. Os vestgios coletados devem ser colocados em embalagens adequadas conforme a natureza de cada amostra. As amostras destinadas ao exame de DNA no devero entrar em contato com substncias qumicas como, por exemplo, gua oxigenada, formol, substncias custicas podendo causar prejuzo a viabilidade da anlise (SILVEIRA, 2009). O uso do material protetor minimiza a hiptese de os peritos deixarem evidncias, quer na cena de crime, que nos prprios vestgios, como DNA, impresses digitais, clulas da pele, podendo causar contaminao da amostra, mudando, assim, a interpretao dos resultados. Alm disso, caso no haja proteo por parte do perito, pode este levar consigo vestgios da cena de crime para o laboratrio ou para junto de outros vestgios do crime. E, tambm, o uso do material protetor dificulta a ocorrncia de acidentes de natureza biolgica, fsica e qumica na cena de crime ou que possam estar relacionados com a investigao (MONTEIRO, 2010).

3.1.1. Vestgios Fsicos

Os vestgios fsicos podem ser de variadas formas: macroscpicas, microscpicas, vivas, inanimadas, slidas, lquidas ou gasosas (MONTEIRO, 2010). O perito deve procurar por vestgios fsicos, porm a sua ausncia tambm ser uma informao valiosa, podendo ser sinal que a cena de crime analisada secundria, sendo necessria a expanso do local de anlise ou procura por um local no qual tenha ocorrido a cena primria (CHISUM; TURVEY, 2007). Um detalhe muito importante que o perito precisa se atentar para os vestgios que j se encontravam no local antes da ocorrncia do delito. O perito ter que identificar quais os vestgios que podem estar associados ao crime e quais j estavam no local quando ocorreu o fato, sendo a parte mais difcil da anlise (MOZAYANI; NOZIGLIA, 2006).

3.1.2. Vestgios biolgicos e no biolgicos

Os principais vestgios encontrados e aqueles em que se pode fazer anlise de DNA so: - Marcas de dentadas: comum em casos de ofensas sexuais, permitindo estabelecer ligaes entre ofensor e vtima e ofensor e cena de crime. Podendo ser marcas feitas pelo ofensor na vtima ou as marcas da vtima no ofensor ou, ento, encontradas em objetos deixados pelos ofensores (MONTEIRO, 2010). - Impresses digitais: os peritos devem se atentar para trs tipos de impresses: latentes, visveis e plsticas. A impresso latente pode estar incompleta ou ser de difcil observao. J a visvel aquela que logo se identifica e as plsticas so aquelas que so impressas, geralmente em superfcies argilosas, de cimento, dentre outras. Outro fator importante das impresses digitais so as trs caractersticas dos desenhos digitais: a imutabilidade (o desenho digital no muda desde o sexto ms de vida fetal at a putrefao cadavrica), variabilidade (o desenho digital varia de dedo para dedo e de pessoa para pessoa) e perenidade (o desaparecimento do desenho digital s se d com a putrefao cadavrica) (ADLER et al., 2009). - Saliva: sua amostra relativamente simples e no invasiva e por meio de pequenas quantidades pode-se extrair DNA para comparao, assim como, inferir o tipo de sangue do doador. A sua presena pode ser detectada por meio de utilizao de luzes ultravioleta e sua coleta por esfregaos que precisam secar, ao ar livre, antes de serem colocados em embalagens apropriadas (GUNN, 2009). - Cabelos: pode-se identificar, pela anlise desse vestgio, se proveniente de um animal ou de um indivduo e se for deste, se da vtima ou de um possvel agressor. O mais importante que pelo cabelo revela-se a possvel raa do indivduo e de que parte do corpo proveniente. Pela anlise da raiz do cabelo possvel extrair o DNA que vai permitir a

identificao do doador. Para sua coleta necessria a utilizao de luvas ou pinas e seu armazenamento dever ser feito em envelopes de papel, selados (GUNN, 2009; SILVEIRA, 2009; MONTEIRO, 2010). - Fibras e filamentos: estes vestgios incluem fios de origem natural e manufaturadas e so encontrados e recolhidos nas cenas de crime e nas vtimas e ofensores, sendo importantes por serem transferidos facilmente entre pessoas e entre pessoas e objetos, podendo tambm sua presena indicar a natureza do crime. Podem ser recolhidas manualmente ou com o uso de fitas, pinas e aspirao e embrulhados em papel, depois transferidos para envelopes de papel selado (MONTEIRO, 2010). - Smen: um dos vestgios mais encontrados e recolhidos durante a investigao. A anlise de DNA a partir destas amostras pode estabelecer ou anular ligaes sobre determinados suspeitos de crime. A mancha do smen pode ser detectada mesmo depois de anos, sob luz azul e so facilmente detectadas nas cenas de crime ou roupas. Sua deteco pode ser feita por meio de um esfregao, utilizando uma fibra de algodo ou um cotonete umedecido com a adio de uma soluo cida. Caso seja uma mancha, deve ser seco, ao ar livre, sem a adio do cido e colocado em envelopes de papel (GUNN, 2009; MONTEIRO, 2010;). - Unhas: os fragmentos de unhas apresentam determinadas estrias que podem ter correspondncia com o suspeito. Podem ser encontrados fragmentos ou unhas inteiras na cena de crime (DEL-CAMPO, 2008). - Armas de fogo: nunca devem ser transportadas para o laboratrio, carregadas. Devem ser envoltas em papel e colocadas em caixa resistente (ADLER, et al., 2009). - Clulas epiteliais: podem estar presentes na roupa, nas pontas de cigarro, na urina, vmito, garrafas de gua, dependendo do contato que o indivduo teve com o objeto. Este material pode ser coletado pelo uso de fita ou por esfregao (GOODWIN et al., 2007). - O sangue tambm um vestgio muito importante, a identificao dele e a sua classificao, levando em conta o tipo de grupo sanguneo e o fator rh, a caracterizao das

enzimas das clulas vermelhas, os marcadores genticos e o perfil de DNA, tem permitido cada vez maior nvel de individualizao do sangue. A informao fornecida pela anlise do sangue tem muita importncia, pois ajudam na identificao do indivduo responsvel pelo sangue e tambm revela como o sangue est depositado (MOZAYANI; NOZIGLIA, 2006). As manchas de sangue s vezes no so visveis na cena de crime, pois dependem de como elas se formaram ou, por vezes, o ofensor limpa. Porm, uma vez o sangue estando derramado, muito difcil eliminar completamente a sua presena. Por isso, so utilizados mtodos quimioluminescentes nas cenas de crime, revelando assim resduos provenientes de tentativas de limpeza ou reduo da visibilidade da mancha (MONTEIRO, 2010). Manchas de sangue podem ser encontradas em diversos locais como cho, teto, objetos presentes no ambiente, dentre outros. A interpretao das manchas de sangue deve ser completa aps anlise no laboratrio, para ento saber se pertence ao crime investigado ou, ento, a outra situao ocorrida anteriormente, pois pode ocorrer em locais onde j possui uma histria de violncia, confundindo assim os vestgios anteriores com os atuais (CHISUM; TURVEY, 2007). Alm dos vestgios relatados encontram-se tambm em cenas de crime roupas, ossos, dentes, lquido amniticos, fezes, urina, entre outros (DOLINSKY et al., 2007). Aps a coleta dos vestgios cabe ao perito criminal proceder anlise laboratorial dos mesmos. Estas podem ser realizadas utilizando-se mtodos fsicos e qumicos (OLIVEIRA, 2006).

3.2. DNA e sua importncia na percia

Os cidos nuclicos foram descobertos, em 1869, por Friedrich Miescher. Este isolou, por meio de tcnicas, dos ncleos de clulas de pus de esperma de salmo, uma macromolcula, nunca antes identificada, que chamou de nuclena. Mais tarde passou a se chamar cido nuclico. No incio do sculo XX o bioqumico Kossel evidenciou a existncia de dois cidos

nuclicos: o cido desoxirribonuclico (DNA) e o cido ribonuclico (RNA). O DNA contm o gene enquanto que o RNA serve como agente intermedirio na atividade do gene (GRIFFITHS et al., 2001). O DNA pode ser extrado de amostras de sangue, esfregaos bucais, saliva, osso, dente, tecidos, rgos, fios de cabelo, smen, urina, entre outros materiais biolgicos que so geralmente encontrados no local de crime. Encontra-se o DNA nos cromossomos do ncleo (DNA genmico) e nas mitocndrias. A anlise do DNA mitocondrial para fins forenses fica reservada para tecidos antigos como ossos, cabelos, dentes e em grandes desastres (incndios, exploses e queda de avies) nos quais o DNA nuclear j no oferece mais condies de anlise (VIEIRA et al., 2010). Apenas 0,1% das regies da molcula de DNA apresentam variaes na sequncia de nucleotdeos, so os polimorfismos do DNA. As tcnicas de identificao humana se apiam na anlise dessas regies variveis, de acordo com estudos de variabilidade no existem duas pessoas que apresentem a mesma sequncia de DNA, com exceo dos gmeos univitelinos (SILVA; PASSOS, 2006). Na rea criminal, um dos objetivos da identificao humana por DNA comprovar uma hiptese de que determinada pessoa a fonte doadora de uma evidncia biolgica, est inclusa (quando as amostras biolgicas so similares e originaram-se da mesma fonte), ou ento exclusa (quando as amostras biolgicas possuem origens diferentes) (PARADELA Et al., 2008). O DNA uma molcula biolgica que possui um importante papel na clula, pois a fonte intrnseca de toda a informao gentica, que determina as caractersticas individuais. Encontra-se no ncleo das clulas e todas que o contm possuem cpias idnticas, durante a vida toda. Mesmo os indivduos sendo nicos, a maior parte da sequncia da molcula de DNA semelhante para todos, sendo importante para o interesse forense a parte que difere entre indivduos (MOZAYANI; NOZIGLIA, 2006; WONDER, 2007). A identidade gentica pelo DNA uma tcnica complementar s impresses digitais

clssicas. A anlise de amostras biolgicas nos casos forenses teve incio no sculo XX, utilizando-se os grupos sanguneos ABO. Em 1985, a tipagem molecular do material gentico foi utilizada pela primeira vez. Hoje so utilizados vrios loci diferentes na investigao por anlise de DNA (LIMA, 2006). Com o estudo do DNA, utilizando-se uma pequena quantidade de qualquer material biolgico pode-se fazer uma anlise ligando um suspeito ao crime. O DNA muito sensvel, podendo ser efetuada com o DNA de poucas clulas a tipagem do polimorfismo do DNA por PCR, a reao em cadeia da polimerase (BONACCORSO, 2005). O DNA presente em cromossomos composto por regies codificantes e no codificantes. Encontram-se presentes na regio no codificante marcadores genticos polimrficos, quer seja entre genes ou dentro de genes, que so empregados na atividade de identificao humana. A localizao cromossmica de um gene ou marcador gentico denominado locus, podendo um segmento de DNA que ocupa um mesmo locus em diferentes cromossomos homlogos ser idntico ou diferente (BUTLER, 2005). Nos ltimos anos foram desenvolvidas diferentes tcnicas de anlise de DNA podendo, assim, os cientistas escolherem o mtodo mais adequado para solucionar o caso. O mtodo mais usado hoje o estudo de regies repetitivas de DNA, os STRs, podendo o nmero de repeties variar entre indivduos e ser estudado pela metodologia de PCR (PENA, 2005). Com a tcnica do STR possvel fazer a tipagem do DNA utilizando quantidades mnimas de amostra, desde um fio de cabelo at uma mancha de sangue. O resultado do estudo de vrios marcadores denominado perfil de DNA ou perfil gentico, com isso se for feito um estudo de DNA extrado de algum vestgio coletado no local de crime utilizando-se treze marcadores genticos, o resultado desse estudo ser o perfil gentico da pessoa que doou a amostra. Utilizando-se um nmero suficiente de marcadores genticos, o resultado ser um perfil de DNA que no se repetir em nenhuma outra pessoa, sendo nico daquela pessoa (SILVA; PASSOS, 2006). A anlise do mtDNA para fins forenses utilizada na anlise de tecidos antigos como

ossos, cabelos e dentes quando o DNA nuclear j no oferece mais condies de anlise (REMUALDO, 2004; BONACCORSO, 2005).

3.3. Marcadores genticos minissatlites e sua importncia na anlise forense

A identificao humana surgiu para permitir analisar a variao do comprimento das sequncias de repeties do DNA. Essas regies de repeties so os VNTRs e, tambm, a tcnica utilizada, conhecida como Restriction Fragment Lenght Polimorphism (RFLP), que faz com que uma enzima corte regies de DNA envolventes aos VNTRs (BUTLER, 2005). Os VNTRs so marcadores genticos altamente polimrficos que so gerados por um arranjo em sequncia de mltiplas cpias de um pequeno segmento de DNA de 500 a 1000 pb de comprimento. A primeira tcnica usada em tribunal para identificao humana foi o RFLP, no qual vrios fragmentos da cadeia dupla de DNA so cortados por enzimas de restrio. Esta tcnica estabelece diferenas entre os indivduos, por meio dos padres que os segmentos de DNA assumem quando so separados por tamanho. A presena ou ausncia dos locais de restrio produzem fragmentos de DNA com comprimentos diferentes nas amostras de DNA. Ento, os fragmentos so separados em gel de eletroforese e detectados por hibridao. Porm, o RFLP no mais utilizado para identificao humana, sendo substitudo pelo PCR, pois este aumenta o nmero de cpias a partir de uma pequena quantidade de DNA recolhida no local de crime, possibilitando a anlise at de um material degradado, algo que no era possvel com o RFLP, que precisa de grandes quantidades de amostra (JOBLING; GILL, 2004; KOCH; ANDRADE, 2008; MARANO et al., 2010; MONTEIRO, 2010).

3.4. Tcnica de PCR

A tcnica de PCR foi descrita pela primeira vez em 1985, sendo reconhecida como uma tcnica com potencial de utilizao para anlise de quantidades-trao de lquido biolgico,

encontrado em rea de interesse forense (GRIFFITHS et al., 2001). Esta tcnica revolucionou a identificao humana por DNA, pois em poucas horas se obtm bilhes de cpias de um determinado locus presente em um pequeno fragmento de DNA. A amplificao do DNA por PCR resulta em um grande aumento de sensibilidade, fazendo com que sejam analisados materiais biolgicos degradados, encontrados em pequenas quantidades na cena de crime, sendo os marcadores genticos representantes da identificao humana por DNA (JOBLING; GILL, 2004; BUTLER, 2005; GOODWIN et al., 2007). O uso da tcnica de PCR tem duas vantagens: a identificao dos alelos simples e a sensibilidade elevada, porm tambm existe a desvantagem de ser suscetvel a contaminao pela sua alta sensibilidade, exigindo cuidados especiais na hora da anlise no laboratrio (PENA, 2005). Outro fator que os vestgios podem afetar na amplificao do PCR pela ao de inibidores presentes em amostras contendo substncias como sangue ou smen depositados no solo, madeira ou outros materiais (MONTEIRO, 2010). Esses inibidores comprometem a amplificao causando a perda dos alelos dos segmentos de maiores dimenses de STRs ou mesmo perda total dos segmentos (BUTLER, 2005). Os fragmentos de STR so mais suscetveis anlise por instrumental automatizado do que os fragmentos de DNA maiores de outros sistemas e, por isso, so normalmente empregados nos laboratrios de natureza forense (SILVA; PASSOS, 2002).

3.5. Marcadores genticos microssatlites e sua importncia na anlise forense

Os STRs so pequenas regies que possuem pequenos segmentos de DNA (2 a 6 pares de base) em forma de arranjo que se repetem, ao longo da cadeia, uns atrs dos outros. Por isso, diz-se que in tandem, sendo tambm encontrados em diferentes nmeros entre os indivduos de uma populao. Os microssatlites mais informativos chegam a apresentar mais de uma dezena de alelos diferentes, cada alelo contendo um nmero especfico de cpias.

Estes segmentos no codificam para nenhuma protena. As diferenas detectadas nos alelos STRs devem-se ao tamanho das variaes. So utilizados para as anlises, uma vez que, so altamente polimrficos, independentes entre si, uma vez que, se localizam ou em diferentes cromossomos, ou em regies muito afastadas no mesmo cromossomo. Quanto maior o nmero de microssatlites analisados, maior a populao que pode ser excluda como possvel suspeita do crime (BUTLER, 2005; GOODWIN et al., 2007; WONDER, 2007). O FBI (do ingls, Federal Bureau of Investigation) selecionou um conjunto de 13 STRs que passaram a compor o sistema CODIS (do ingls, Combined DNA Index em 1997 (MONTEIRO, 2010). O sistema CODIS consiste em um banco de dados de perfis de DNA de criminosos. Segundo Souza (2011) os principais marcadores utilizados pelo sistema CODIS na identificao criminal dos indivduos so: TPOX (cromossomo 2), D3S1358 (cromossomo 3), FGA (cromossomo 4), D5S818 e CSF1PO (cromossomo 5), 11 D7S820 (cromossomo 7), D8S1179 (cromossomo 8), TH01 (cromossomo 11), VWA (cromossomo 12), D13S317 (cromossomo 13), D16S539 (cromossomo 16), D18S51 (cromossomo18), D21S11 (cromossomo 21), AMEL (cromossomo X) e AMEL (cromossomo Y). As sequncias de STRs so responsveis por cerca de 3% do genoma humano (BUTLER, 2006). Segundo Butler (2006) com o avano das pesquisas, os cientistas descobriram os marcadores Y-STR e mini-STR. Sendo mais importante neste estudo o uso dos marcadores mini-STR que esto sendo criados para uma melhor recuperao de informaes a partir de DNA degradado. Estes STRs flanqueiam regies curtas da sequncia de repetio melhorando a eficincia da amplificao (BUTLER, 2003; DIXON et al., 2006). Os SNPs (do ingls, Single Nucleotide Polymorphisms) so menos informativos para a identificao humana do que os marcadores STRs, pois eles so em sua maioria bi allicos. J os STRs apresentam mais de dez alelos por locus (GOODWIN et al., 2007). As vantagens dos SNPs a facilidade desses polimorfismos serem analisados em larga escala por meio de tecnologias modernas. Milhares de SNPs podem ser analisados simultaneamente em um

nico indivduo. Alm de serem teis na anlise de amostras degradadas encontradas na cena de crime (ALONSO et al., 2005). Na anlise forense, a caracterizao do material biolgico tem por meta limitar ou reduzir o nmero de indivduos que poderiam ser a fonte de material em anlise. Quando a populao analisada no limitada pelas circunstncias do caso, os mtodos de maior poder discriminatrio tornam-se recursos importantes. Por meio do estudo com o DNA, o poder discriminatrio pode mudar isso e permitir a identificao (SILVA; PASSOS, 2002). Os vestgios encontrados na cena do crime no fornecem quase nenhuma informao por si s, porm quando se faz anlise por DNA, pode-se encontrar provas que identifiquem o suspeito (MONTEIRO, 2010). Para que a tcnica de identificao pelo DNA tenha sucesso a amostra biolgica a ser analisada deve ser corretamente escolhida, coletada, transportada e armazenada (SILVA; PASSOS, 2006). O DNA pode identificar e vincular suspeitos ao crime e pode distinguir crimes isolados de crimes em srie, pode inocentar pessoas falsamente acusadas e pode identificar restos mortais de uma vtima pela comparao com DNA dos parentes biolgicos. Se o perfil de DNA obtido pela amostra for coincidente com o perfil gentico do suspeito, pode-se afirmar que o suspeito doador da amostra encontrada no local de crime (SILVA; PASSOS, 2006). A variabilidade humana em termos de DNA enorme. Se forem escolhidos dois genomas humanos ao acaso ir diferir aproximadamente uma de cada 500 bases do DNA (STRACHAN; READ, 2002). At maro de 2004, tramitavam na Cmara Federal, trinta e um projetos de lei relacionando o papel do exame de DNA para fins de identificao humana. Observa-se a cobrana da sociedade e a preocupao do Estado nos ltimos anos em respaldar legalmente a utilizao do DNA para tal fim (VIEIRA et al., 2010).

4. CONSIDERAES FINAIS

A anlise forense do DNA um campo que est em constante desenvolvimento, principalmente na rea cientfica e tecnolgica. Perceber as propriedades e os princpios cientficos da deteco e dos testes de DNA tem refletido numa escolha mais correta e apropriada por parte dos peritos a partir dos vestgios que devem ser colhidos na cena do crime, uma vez que, os peritos esto cada vez mais aptos a interpretar os dados aps a anlise do local investigado. Por meio de tcnicas de anlise de DNA, suspeitos podem ser ligados a locais de crime pelo estudo de pequenos vestgios biolgicos oriundos como, por exemplo, sangue impregnado em algum objeto encontrado ou plos e cabelos em roupas. O sucesso na anlise de DNA comea com o devido isolamento do local do crime. Cuidados na hora da coleta dos vestgios para que no haja contaminao e, tambm, para que todos os vestgios importantes sejam analisados. Por fim, a interpretao adequada na hora da anlise dos resultados. necessrio que invistam na tcnica de anlise de DNA por meio de microssatlites por serem de grande utilidade e eficincia na elucidao de crimes. A anlise de DNA contribui de forma importantssima nos processos de identificao humana. Os microssatlites so abundantes no genoma humano, fornecendo uma variedade para escolha dos loci para os testes de identificao. H necessidade de aumentar a utilizao da anlise de DNA para identificao humana nos casos forenses. Percebe-se, de acordo com os trabalhos publicados nos ltimos anos, que a identificao humana tem sido uma rea de constante crescimento, ajudando os peritos nas anlises cada vez mais precisas dos casos investigados.

5. REFERNCIAS ADLER, Joanna et al. Forensic Science. California: Salem Presso, 2009. ALONSO, Antonio et al. Challenges of DNA Profiling in Mass Disaster Investigations. Croatian Medical Journal, Croatia, v. 46, n. 4, p. 540-548, 2005.

BONACCORSO, Norma Sueli. Aplicao do exame de DNA na elucidao de crimes. 2005. 193 f. Dissertao (Mestre) - Curso de Medicina Forense, Faculdade de Direito da Universidade de So Paulo, So Paulo, 2005. BRAMMER, Sandra Patussi. Marcadores moleculares: princpios bsicos e uso em programas de melhoramento gentico vegetal. Documentos Online, Passo Fundo, v. 3, p. 1-12; dez. 2000. BUTLER, John Marshall. The Development of Reduced Size STR Amplicons as Tools for Analysis of Degraded DNA. Journal of Forensic Science, American, v. 48, n. 5, p. 10501064, 2003. BUTLER, John Marshall. Forensic DNA Typing: Biology, Tecnology and Genetics of STR Markers. 2. ed. USA: Elsevier Academic Press, 2005. BUTLER, John Marshall. Genetics and Genomics of Core Short Tandem Repeat Loci Used in Human Identity Testing. Journal of Forensic Science, American, v. 51, n. 2, p. 253-265, 2006. CHISUM, William Jerry; TURVEY, Brent E. Crime Reconstruction. San Diego: Elsevier Academic Press, 2007. 215 p. COSTA FILHO, Paulo Enio Garcia da; ABDALLA-FILHO, Elias. Diretrizes ticas na prtica pericial criminal. Biotica, Braslia, v. 3, n. 18, p. 421-437, 2010. DEL-CAMPO, Eduardo Roberto Alcntara. Exame e levantamento tcnico pericial de locais de interesse justia criminal: abordagem discritiva e crtica. 2008. 276 f. Dissertao (Mestre) - Curso de Medicina Legal, Faculdade de Direiro da Universidade de So Paulo, So Paulo, 2008. DIXON, L. A. et al. Analysis of artificial degraded DNA using STRs and SNVS - results of a collaborative European (EDNAP) exercise. Forensic Science International, American, n. 164, p. 33-44, 2006. DOLINSKY, Luciana Cresta; PEREIRA, Lissiane Miranda Campelo Veras. DNA Forense Artigo de Reviso. Sade & Ambiente, Duque de Caxias, v. 2, n. 2, p.11-22, 2007. ESPNDULA, Alberi. Isolamento e preservao dos locais do crime com cadver. Disponvel em: http://www.igp.ac.gov.br/artigos09.html. Acesso em: 15 jan. 2011.

GRIFFITHS, Anthony J. F et al. Gentica moderna. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2001. GOODWIN, William; LINACRE, Adrian; HADI, Sibte. An introduction to Forensic Genetics. New Delhi: Wiley, 2007. 147 p. GUNN, Alan. Essential Forensic Biology. 2. ed. UK: Wiley-blackwell, 2009. 417 p. JOBIM, Maria Regina et al. Novos Testes de DNA na Investigao de Paternidade com Suposto Pai Falecido. Rt/Fasc, Civ., Rio Grande do Sul, v. 874, n. 97, p. 55-69, ago. 2008. JOBLING, Mark A; GILL, Peter. Encoded Evidence: DNA in Forensic Analysis. Nature Publishing Group, United Kingdom, v. 5, p. 739-751, 2004. KOCH, Analara; ANDRADE, Fabiana Michelsen de. A utilizao de tcnicas de biologia molecular na gentica forense: uma reviso: The use of molecular biology techniques in foresinc genetis: a review. Revista Brasileira de Anlises Clnicas, Rio de Janeiro, v.1, n. 40, p.17-23, 2008. KOSHINO, Lvia Luiza do Nascimento. A protemica forense no Brasil: estado atual e perspectivas. 2010. 19f. Reviso Bibliogrfica (Especializao) - IFAR/PUC, Braslia, 2010. Disponvel em: http://www.cpgls.ucg.br/ArquivosUpload/1/File/V%20MOSTRA%20DE%20PRODUO%20 CIENTIFICA/SAUDE/69.PDF. Acesso em: 28 jan. 2011. LIMA, Luciana Otero. Utilizao dos polimorfismos em anlises forenses, 2006. Disponvel em: http://genetica.ufcspa.edu.br/biomedic/seminarios&20monitores/polimforense.pdf. Acesso em: 09 fev. 2011. MALLMITH, Dcio de Moura. Portal Segurana com Cidadania. Local de Crime. Porto Alegre, Rio Grande do Sul. 66f, ago. 2007. Disponvel em: http://solatelie.com/cfap/html3/local_de_crime.pdf. Acesso em: 24 jan. 2011. MARANO, Leonardo Arduino et al. Polimorfismos genticos e identificao humana: o DNA como prova forense. Gentica na Escola, Ribeiro Preto, v. 5, n. 1, p. 53-56, 2010. MONTEIRO, Ins Viana de Paula. Vestgios Hemticos no local de crime sua importncia Mdico-Legal. 2010. 141 f. Dissertao (Mestre) - Curso de Medicina Legal, Instituto de Cincias Biomdicas de Abel Salazar da Universidade do Porto, Porto Portugal, 2010. MOZAYANI, Ashraf; NOZIGLIA, Carla. The Forensic Laboratory Handbook:

Procedures and Pratice. New Jersey: Humana Press, 2006. 291 p. OLIVEIRA, Marcelo Firmino de. Qumica Forense: A utilizao da qumica na pesquisa de vestgios de crime. Qumica Nova na Escola, So Paulo, n.24, p. 17-19, 10 out. 2006. PARADELA, Eduardo Ribeiro. Percias em DNA: a coisa certa pode ser feita de forma errada? Um estudo de caso hipottico. Clubjus, Braslia-DF: 09 fev. 2008. Disponvel em: http://www.clubjus.com.br/:?artigos&ver=2.15602. Acesso em: 15 jan. 2011. PENA, Sergio Danilo Junho. Segurana Pblica: determinao de identidade gentica pelo DNA. Parcerias Estratgicas (Braslia), v. 20, p. 447-460, 2005. PROSDOCIMI, Francisco. Marcadores moleculares de DNA microsatlite. Disponvel em: http://www.drashirleydecampos.com.br/noticias/1259. Acesso em: 10 jan. 2011. REMUALDO, Vanessa Roslia. Avaliao de trs mtodos de extrao de DNA de dente humanos submetidos ao calor. 2004. 75f. Dissertao (Mestre) - Curso de Odontologia, Faculdade de Odontologia da Universidade de So Paulo, 2004. SILVA, Joana Darc Rodrigues Da. O DNA como ferramenta na investigao criminal. 2009. 52f. Dissertao (Especializao) - Curso de Percia Criminal, Faculdade Cmara Cascudo, Natal/RN, 2009. SILVA, Luiz Antonio Ferreira da; PASSOS, Nicholas Soares. DNA Forense - Coleta de amostrar biolgicas em locais de crime para estudo do DNA. 2. ed. Macei: Edufal, 2006. 86 p. SILVEIRA, Braz Felizardo Da. Fontes de contaminao de vestgios que sero objetos de exame de DNA. 2009. 24 f. Dissertao (Especializao) - Curso de Ps Graduao, Departamento de Academia de Polcia do Distrito Federal, Faculdades Fortium, Braslia (df), 2009. SOUZA, Jane Carmem de. Aplicaes dos marcadores moleculares baseados em DNA nas questes de identificao humana no mbito cvel e forense. Disponvel em: http://www.cpgls.ucg.br/ArquivosUpload/1/File/V%20MOSTRA%20DE%PRODUO%20CI ENTIFICA/SAUDE/60.pdf. Acesso em: 15 jan. 2011. STREACHAN, T; READ, AP. Gentica molecular humana. Porto Alegre: Artmed; 2002. VIEIRA, Grasiele de Sousa; TAVARES, Carlos Alberto Pereira; BOUCHARDET, Fernanda

Capurucho Horta. Anlise de DNA em Odontologia Forense: Analysis of DNA in Forensic Dentistry. Arquivo Brasileiro de Odontologia , Minas Gerais, v. 2, n.6, p. 64-70, 2010. WHITE, Peter. Crime Scene to Court: The Essentials of Forensic Science. 3. ed. Cambridge: Royal Society of Chemistry, 2010. WONDER, Anita Y. Bloodstain Pattern Evidence: Objective Approaches and Case Applications. San Diego: Elsevier Academic Press, 2007. 377 p. YOUNT, Lisa. Forensic Science: from fibers to fingerprints. New York: Chlesea House Publishers, 2007. 199 p.