Toma de la Muestra: (Secreci n farngea)

La muestra se siembra en el agar sangre

1-Con asa bacteriolgic a estril trabajando siempre a la llama del mechero, tomar una mnima muestra.

2. Sembrar suavemente sobre la superficie tersa del medio por el procedimient o de agotamiento.

3. Incubar las placas en posicin invertida a 37C en aerobiosis atmsfera de CO2.

4. Al trmino de 24 horas de incubacin examinar el cultivo y determinar los estudios a seguir segn las caractersticas de las colonias y el tipo de hemlisis observada

En este trabajo diferenciaremos 3 tipos de Estafilococos: Aureus, Epidermidis, Saprophyticus, mediante el uso de pruebas como: Manitol salado, Coagulasa, Catalasa, Novobiosina.

Catalasa:

Mtodo del portaobjetos (recomendado) :

Con el asa de siembra recoger el centro de una colonia pura de 18-24 horas y colocar sobre un portaobjetos limpio de vidrio.

Agregar con gotero o pipeta Pasteur una gota de H2O2 al

Si se invierte el orden del mtodo (extender la colonia sobre el agua oxigenada) pueden producirse falsos positivos.

Desechar el portaobjetos en un recipiente con desinfectante.

Observar la formacin inmediata de burbujas (resultado positivo).

30% sobre el microorganismo sin mezclarlo con el cultivo.

Mtodo del tubo de ensayo:

Agregar 1ml de H2O2 al 3% directamente a un cultivo puro densamente inoculado.

Observar la formacin inmediata de burbujas (resultado positivo).

Manitol Salado
: Sirve para detectar si los grmenes son capaces de fermentar el manitol cidos que sern detectados gracias al indicador rojo de fenol que cambiar a color amarillo, este puede salir variable en S. Saprophyticus as que para confirmar se utilizan las dems pruebas

Coagulasa : Prueba de portaobjet os

Se ponen 2 gotas de solucin salina en el portaobjetos microescpico rotulado con un nmero de muestra, Test (T) y control (C).

Las 2 gotas son emulsionadas con la prueba de organismo mediante el uso de un cable de lazo, cable recto, o un palo de madera.

Se pone una gota de plasma (plasma de conejo con anticoagulante (EDTA)1 ) en la gota de solucin salina inoculada correspondiente a la prueba y se mezcla bien con un una varilla de madera.

Agitar el portaobj eto con cuidado unos 10 segundos .

Si es positivo: Se podr observar aglutinacion macroescopica en el plasma en los 10 segundos mientras que no se observara aglutinamiento en la gota de solucion salina.

Si es negativo: No se observara aglutinamiento.

Novob iosina:

Se inocula el microorganismo en agar Mueller Hinton segn tcnica de KirbyBauer, utilizando discos de Novobiocina (5 g).

sembrar el inculo por estria para obtener colonias

Incubar las placas en condiciones de aerobiosis a 27C

Examinar las placas a las 24 y en caso necesario a las 48 72 horas el lote, a los 3 das.

Resultados: Bacteria.
S. aureus S.saprophyticus S. epidermidis

Manitol. Coagulasa. Novobiocina. Catalasa

Positivo Variable Negativo Positivo Negativo Negativo Sensible Resistente Sensible Positivo Negativo Negativo

Bibliografa
https://www.google.com.ec/search?q=toma+de+la+muestra+secrecion+faringea&hl=es&source=lnms&tbm=isch&sa =X&ei=V0iFUcOFNIWg9QSiqIDwBg&ved=0CAcQ_AUoAQ&biw=1280&bih=923#hl=es&biw=1280&bih=923&tbm=isch &q=manitol+salado&spell=1&sa=X&ei=i0qFUfHsJIfW9AT7uoC4Cw&ved=0CEoQvwUoAA&bav=on.2,or.r_cp.r_qf.&bv m=bv.45960087,d.eWU&fp=baaefe2dd9b8097c&imgrc=5G5CfUtW-64X6M%3A%3BQsrXBdj9XMoQM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.austincc.edu%252Fmicrobugz%252Fimages%252FMSA.jpg%3Bhttp%253A%252 F%252Fwww.austincc.edu%252Fmicrobugz%252Fmannitol_salt_agar.php%3B475%3B360

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