NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5294
2004-09-29

BEBIDAS ALCOHLICAS. MTODOS PARA DETERMINAR EL CONTENIDO DE HIERRO

E:

ALCOHOLIC BEVERAGES. DETERMINATION.

METHODS

FOR

IRON

CORRESPONDENCIA:

DESCRIPTORES:

bebida alcohlica; hierro; anlisis de hierro.

I.C.S.: 67.160.10
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC) Apartado 14237 Bogot, D.C. - Tel. (571) 6078888 - Fax (571) 2221435

Prohibida su reproduccin

Editada 2004-10-08

PRLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993. ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo caracterizado por la participacin del pblico en general. La NTC 5294 fue ratificada por el Consejo Directivo del 2004-09-29. Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades y exigencias actuales. A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a travs de su participacin en el Comit Tcnico 57 Destilacin, rectificacin y mezcla de bebidas espirituosas y 58 Industrias vincolas.

ASOCIACIN COLOMBIANA DE EMPRESAS LICORERAS -ACILASOCIACIN COLOMBIANA DE IMPORTADORES DE LICORES Y VINOS -ACODILBODEGAS AEJAS LTDA. BODEGAS DEL RHIN COLOMA LTDA. CONCESIN LICORSA INDUSTRIA DE LICORES DEL HUILA DE SARGO LTDA. EMPRESA DE LICORES DE CUNDINAMARCA

FBRICA DE LICORES DEL TOLIMA FBRICA DE LICORES Y ALCOHOLES DE ANTIOQUIA FRUVER Y CA. LTDA. INDUSTRIA DE LICORES DEL VALLE INDUSTRIA LICORERA DE CALDAS INSTITUTO COLOMBIANO DE GEOLOGA Y MINERA -INGEOMINASMERCK COLOMBIA PEDRO DOMECQ COLOMBIA S.A. SABAJN APOLO S.A. UNIDAD DE LICORES DEL META

Adems de las anteriores, en Consulta Pblica el Proyecto se puso a consideracin de las siguientes empresas: LABORATORIO DE ANLISIS: AMBIENTAL, ALIMENTOS, AGUAS, PETROQUMICO, FARMACUTICO, HIGIENE INDUSTRIAL -ASINALBODEGAS VIEJAS CEPAS MEDICAMENTOS Y ALIMENTOS -INVIMAMARPICO S.A. SECRETARA DISTRITAL DE SALUD EMPRESA DE LICORES DE CAQUET INSTITUTO NACIONAL DE VIGILANCIA DE

ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados normas internacionales, regionales y nacionales. DIRECCIN DE NORMALIZACIN

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5294

BEBIDAS ALCOHLICAS. MTODOS PARA DETERMINAR EL CONTENIDO DE HIERRO

1.

OBJETO

Esta norma establece los mtodos para determinar el contenido de hierro en bebidas alcohlicas.

2. 2.1

MTODOS DE ENSAYO MTODO A

Mtodo empleando la sal sdica de 3- (2- piridil) - 5,6- bis(4-fenilsulfnico) -1,2,4 -triacina o Ferrospectral. 2.1.1 Fundamento del mtodo El hierro ferroso forma un complejo de color violeta con Ferrospectral o la sal sdica de 3-(2-piridil)5,6-bis(4-fenilsulfnico)-1,2,4-triacina el cual puede leerse en un fotmetro en el intervalo visible a una longitud de onda de 565 nm. La concentracin de hierro se determina usando una grfica patrn. 2.1.2 Reactivos Agua destilada libre de hierro. Solucin de cido ascrbico al 1 % en agua destilada. Solucin de Ferrospectral (C20H12N4Na2O6S2) de 5 mg/L (ppm). Solucin patrn de hierro de 1 000 mg/L (ppm) de Fe2+: Se disuelven 4,987 g de sulfato ferroso heptahidratado (FeSO4.7H2O) y 3,154 g de cido ascrbico, se completa a 1 000 ml con agua destilada y se mezcla. Tambin se puede utilizar una solucin estndar de 1 000 mg/L (ppm) de Fe2+ trazable, lista para usar con su respectivo certificado. Solucin de trabajo de hierro de 100 mg/L (ppm) Fe2+: Se agregan 5ml de cido ascrbico al 1 % a 100 ml de solucin patrn de hierro de 1 000 mg/L (ppm) y se lleva a un litro con agua destilada. 1

NORMA TCNICA COLOMBIANA

2.1.3 Equipos y materiales Balanza analtica.

NTC 5294

Espectrofotmetro con sus respectivas celdas de medicin de 50, 20, 16, 10 mm segn el intervalo de medicin que permita leerse a 565 nm. 50 mm 20 mm 10 mm 0,005 1,000 mg/L (ppm) 0,03 2,50 mg/L (ppm) 0,05 5,00 mg/L (ppm)

Material de vidrio de laboratorio.

2.1.4

Procedimiento

2.1.4.1 Preparacin de las soluciones de Fe+2 estndar para la calibracin: Dependiendo de la celda a utilizar se preparan las soluciones a las siguientes concentraciones: Celda de 50 mm: (0,01; 0,1; 0,25; 0,5; 1) mg/L (ppm) de Fe2+ Celda de 20 mm: (0,05; 0,1; 0,5; 1; 2,5) mg/L (ppm) de Fe2+ Celda de 10 mm: (0,05; 1,25; 2,5; 5) mg/L (ppm) de Fe2+
NOTA La norma de calibracin DIN 38402-511) recomienda la preparacin de 10 puntos dentro del intervalo de medicin.

Las soluciones de Fe2+ estndar para calibracin deben ser frescas y preparadas a partir de la solucin de hierro de 1 mg/L (ppm) y de 100 mg/L (ppm) como Fe2+ tomando los siguientes volmenes: Patrn de 0,01 mg/L (ppm) de Fe2+: Se toman 10 ml del patrn de 1 mg/L (ppm) Fe2+ y se completa a 1 L con agua destilada. Patrn de 0,05 mg/L (ppm) de Fe2+: Se toman 50 ml del patrn de 1 mg/L (ppm) Fe2+ y 5 ml de solucin al 1 % de cido ascrbico, se completa a 1 L con agua destilada. Patrn de 0,1 mg/L (ppm) de Fe2+: Se toman 100 ml del patrn de 1 mg/L (ppm) Fe2+, 5 ml de solucin al 1 % cido ascrbico y se completa a 1 L con agua destilada. Patrn de 0,25 mg/L (ppm) de Fe2+: Se toman 250 ml del patrn de 1 mg/L (ppm) Fe2+, 5 ml de solucin al 1 % cido ascrbico y se completa a 1 L con agua destilada. Patrn de 0,5 mg/L (ppm) de Fe2+: Se toman 5 ml de la solucin de trabajo hierro de 100 mg/L (ppm) Fe+2, 5 ml de solucin al 1 % cido ascrbico y se completa a 1 L con agua destilada.

1)

German Standard Methods for the Examination of Methods for the Examination of Water, Waste Water and Sludge; General Information (Group A); Calibration of Analytical Methods, Evaluation of Analytical Results and Linear Calibration Functions Used to Determine the Performance Characteristics of Analitical Methods (A 51)

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5294

Patrn de 0,75 mg/L (ppm) de Fe2+: Se toman 7,5 ml de la solucin de trabajo de hierro de 100 mg/L (ppm) Fe+2, 5 ml de solucin al 1 % cido ascrbico y se completa a 1 L con agua destilada. Patrn de 1 mg/L (ppm) de Fe2+: Se toman 10 ml de solucin de trabajo de hierro de 100 mg/L (ppm) Fe+2, 5 ml de solucin al 1 % de cido ascrbico y se completa a 1 L con agua destilada. Patrn de 1,25 mg/L (ppm) de Fe2+: Se toman 12,5 ml de la solucin de trabajo de hierro de 100 mg/L (ppm) Fe+2, 5 ml de solucin al 1% cido ascrbico y se completa a 1 L con agua destilada. Patrn de 2,5 mg/L (ppm) de Fe2+: Se toman 25 ml de la solucin de trabajo de hierro de 100 mg/L (ppm) Fe+2, 5 ml de solucin al 1% de cido ascrbico y se completa a 1 L con agua destilada. Patrn de 5 mg/L (ppm) de Fe2+:Se toman 50 ml solucin de trabajo hierro de 100 mg/L (ppm) Fe2+ mas 5 ml de solucin al 1 % de cido ascrbico y se completa a 1 L con agua destilada. 2.1.4.2 Elaboracin de la curva de calibracin de hierro con el reactivo Ferrospectral Se toman 10 ml de agua destilada y se agregan 0,5 ml de solucin de Ferrospectral de 5 mg/L (ppm). Se mezcla y se espera durante 10 min la formacin de color violeta, el cual se lee a 565 nm. Este dato es considerado como blanco de la determinacin el cual debe restarse a los datos obtenidos con los patrones. De acuerdo con el tamao de las celdas a utilizar, se toman 10 ml de los respectivos patrones (vase el numeral 2.1.3.), se adiciona 0,5 ml de solucin de Ferrospectral de 5 mg/L (ppm). Se mezcla y se espera durante 10 min la formacin de color violeta, el cual se lee a 565 nm. Con los resultados de las lecturas, se construye una curva de calibracin y en ella se calculan las concentraciones de las muestras. Se determina la pendiente, el punto de corte en el eje Ao (Ordenada 0) y el coeficiente de correlacin de datos.
NOTA1 Las muestras se analizan inmediatamente despus de ser tomadas. En caso diferente se deben conservar con cido ntrico al 65 % (se adiciona 1 ml de cido ntrico a 1 L de solucin de la muestra). NOTA 2 El valor del pH debe encontrarse en el intervalo entre 1 y 10. Si es necesario, se ajusta con solucin de hidrxido de sodio o con cido clorhdrico. NOTA 3 Las muestras turbias se deben filtrar.

2.1.4.3 Determinacin de hierro en las muestras Se toman 10 ml de agua destilada y se agrega 0,5 ml de solucin de Ferrospectral de 5 mg/L (ppm). Se mezcla y se espera durante 10 min la formacin de color rojo violeta, el cual se lee a 565 nm. Este dato se considera como blanco de la determinacin el cual debe restarse a los datos obtenidos con la muestra. Se toman 10 ml de la muestra (entre 10 C 40 C) y se agregan 0,5 ml de solucin de Ferrospectral de 5 mg/L (ppm). Se mezcla y espera 10 min para que tenga lugar la formacin de color rojo violeta, el cual se lee a 565 nm. Este dato se considera como blanco de la determinacin el cual debe restarse a los datos obtenidos con los patrones.

NORMA TCNICA COLOMBIANA

2.1.5 Expresin de resultados

NTC 5294

El hierro presente se debe expresar como mg de Fe2+ por litro o dm3 de muestra. Debe tenerse en cuenta la dilucin si fuera necesario esta. 2.2 MTODO B

(Mtodo empleando ortofenantrolina) 2.2.1 Fundamento del mtodo

El hierro se determina directamente en los productos claros, previa una reduccin con clorhidrato de hidroxilamina, por la adicin de ortofenantrolina utilizando el valor de la absorbancia a 508 nm y una grfica de calibracin. Para los productos muy coloreados se opera sobre la solucin de las cenizas. 2.2.2 Reactivos Solucin de clorhidrato de hidroxilamina: se prepara disolviendo 10 g de Clorhidrato de hidroxilamina en 170 ml de cido clorhdrico concentrado y completando con agua hasta 1 L. Solucin de ortofenantrolina al 1 % Solucin de acetato de amonio al 18 %.

2.2.3

Equipos y materiales Balanza analtica Espectrofotmetro Estufa Cpsula de porcelana Material de vidrio de laboratorio

2.2.4

Procedimiento

2.2.4.1 Determinacin de hierro en productos claros En dos matraces volumtricos de 50 ml se colocan 10 ml de la muestra y enseguida 10 ml de la solucin de clorhidrato de hidroxilamina. A uno de los matraces se agrega 1 ml de la solucin de ortofenantrolina y se deja en reposo durante 5 min, despus de lo cual se agregan 10 ml de la solucin de acetato de amonio a cada matraz. Esta adicin hace virar hacia el rojo anaranjado la coloracin del lquido contenido en el matraz al que se le adicion la fenantrolina, mientras que el aspecto del segundo matraz (testigo) permanece inalterado o tiende simplemente hacia una opacidad griscea. En ambos matraces se completa el volumen con agua y se determina a 508 nm la absorbancia del lquido del primer matraz utilizando como blanco el lquido del segundo matraz. 4

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5294

Mediante una grfica de calibracin preparada como se indica a continuacin se calcula la cantidad de hierro presente. Los resultados se expresan en mg de hierro por dm3 o Litro de producto. Elaboracin de la grfica de calibracin Se disuelve en caliente 1 g de alambre de hierro r.a. previamente liberado de cualquier traza de xido, en 250 ml de cido sulfrico al 20 %, evitando las proyecciones. Cuando haya terminado la disolucin, se deja enfriar, se traslada cuantitativamente a un matraz volumtrico de 1 L y se completa a volumen con agua. Este lquido constituye la solucin madre. Tambin se puede preparar la solucin madre a partir de una solucin de sal de Mohr (sulfato ferroso amnico) de titulo conocido, teniendo en cuenta la siguiente equivalencia: 1 g de Fe = 7,018 g de sal de Mohr (suponiendo una pureza de 100 %). Se toman 20 ml de la solucin madre y se diluyen a 1 L con agua; con esta ltima dilucin que contiene 0,02 g de hierro por ml, se preparan nuevas diluciones que correspondan a contenidos de hierro comprendidos entre 2 mg/L (ppm) y 20 mg/L (ppm). Con cada una de ellas se procede como se indic en el mtodo para los productos claros. Con los resultados obtenidos se construye una grfica que permita calcular directamente los mg de hierro por litro o dm3. 2.2.4.2 Determinacin de hierro en productos oscuros En una cpsula de material y tamao adecuados, se introducen 10 ml de muestra. Se evapora en un bao de vapor y se seca en estufa entre 110 C y 120 C. Se calcina cuidadosamente, evitando la fusin de las cenizas (unos 500 C). Si quedan residuos carbonosos, se humedecen con agua y se repite el secado y la calcinacin. Despus de enfriar, se disuelven las cenizas en 10 ml de la solucin clorhdrica de clorhidrato de hidroxilamina y se calienta en bao de vapor. Despus de 5 min, se traslada el lquido a un matrz volumtrico de 50 ml, se lava tres veces la cpsula con porciones de 5 ml de agua, recogiendo los lavados en el matrz. Se deja enfriar y se agrega 1 ml de solucin de ortofenantrolina. En un segundo matrz de 50 ml se colocan 10 ml de solucin de clorhidrato de hidroxilamina (en este matrz, el cual contiene el blanco, no se agrega solucin de ortofenantrolina). Despus de 15 min, se continua la valoracin por el mtodo antes descrito. 2.2.5 Clculos y expresin de resultados

Teniendo en cuenta la grfica de calibracin y las diluciones realizadas, se calcula el contenido de Fe, que se expresa como mg/L o mg/dm3 de producto. 2.3 MTODO C

El contenido de hierro tambin se puede determinar empleando espectrofotometra de absorcin atmica, siguiendo las instrucciones del fabricante del equipo empleado.