PERGUNTAS DE GENTICA

Que tipo de mutaes causa o 5-bromouracilo? Transies Imprinting genmico regulao epigentica Genes reprter genes que permitem detectar promotores Enhancer cadeias de DNA no codificantes RNA guias - RNA editing FALSA: necessria hidrlise de GTP no final da traduo Anel deslizante - processividade da enzima FALSA: na cadeia de DNA as bases azotadas esto para fora Mutaes que criam codo stop - nonsense Chromossome walking refere-se a Isolamento de fragmentos de DNA

adjacentes

Para a identificao de um gene com anticorpos - necessrio que ele esteja

clonado num vector de expresso

No opero do triptofano - ocorre atenuao quando os ribossomas sintetizam

completamente um pptido leader

FALSA: A enzima RecA participa no mismatch repair Imunoglobulinas - variabilidade por causa dos arranjos do DNA FALSA: oncogenes precisam de ter os dois alelos activados para causar

tumores

FALSA: basta um gene supressor de tumores defeituoso para causar cancro Inverso DNA recombinao especfica entre sequncias repetidas Transposes bacterianos regulao por molculas de RNA FALSA: hepnavirus tem RNA de dupla hlice Letalidade sinttica 2 mutaes que quando ocorrem ao mesmo tempo so

letais para o ser vivo

cII provoca a lisogenizao do fago lambda porque activa cI Yeast two hybrid system detectar interaces entre protenas Heteroduplex resulta do fenmeno de migrao dos ramos Pergunta de RNA riboswitch e outra RNAi

PRTICA

I.

Pergunta sobre caractersticas dos plasmdeos (indicar a falsa) Tm grande peso molecular

II.

Alnea certa: 0,5 ml em 1 hora

III.

2 enzimas. A: 4, 3, 3 kb. B: 2.5 e 7.5 kb a. Mapa de restrio: 2.5/1.5/3/3 b. Ligase unia o DNA (ficava circular) e depois usava-se novamente as enzimas de retrio. Indicar os fragmentos obtidos: 1.5, 3 e 5.5 kb

IV. V.

Pergunta escolha mltipla sobre o PCR: alnea sobre os oligonucletidos Pergunta sobre trabalho de 2-AP. 2 estirpes mutadas no opero lacZ (original CTA) no conseguem fazer metabolismo de lactose. So tratados com 2-AP (mutagneo), para tentar que ela reconverta os genes mutados para a forma original. Depois as estirpes so colocadas num meio com lactose para ver se ocorreu mutao de volta ao normal a. Calcular a taxa de reverso para as 2 estirpes ESTIRPE A: 2 colnias ESTIRPE B: 35 colnias Concentrao: 108 UFC/ml Volume: 0.1 ml A: 2/(108 x 0.1) = 2 x 10-7 B: 35/(108 x 0.1) = 3.5 x 10-6 b. GENE ORIGINAL: CTA GENE POSSVEL PARA A: CGA (ou uma transverso equivalente) GENE POSSVEL PARA B: CCA (ou uma transcrio equivalente) 2-AP s reverte transies. Como a estirpe B tem mais colnias, significa que houve mais reverses, ou seja a estirpe B tem um gene que sofreu transio em relao ao original. Estirpe A tem poucas colnias, isto significa que a 2-AP no conseguiu reverter, logo o gene de A sofreu uma transverso (ou adio/deleco de pares de bases, ) em relao ao gene original (NUNCA UMA TRANSCRIO). As 2 colnias que aparecem foram devidas a mutaes espontneas. c. Taxa de resistncia rifampicina (antibitico) igual ou diferente nas 2 estirpes? igual. Estirpes so iguais excepto no gene que metaboliza a lactose (lacZ). Como os genes que conferem resistncia rifampicina no esto no

gene lacZ, a probabilidade de ocorrer uma mutao espontnea que confira resistncia ao antibitico igual nas 2 estirpes. VI. Tem a ver com o trabalho prtico n 6 TRANSFORMAO DE CLULAS BACTERIANAS COM DNA PLASMDICO (aconselho a ver o trabalho e os clculos efectuados na aula, porque esta parte est incompleta) a. Calcular a eficincia de transformao: 1.4 x 106 b. (Pergunta incompleta) Houve uns que foram colocados num meio com 1 antibitico (cresceram 700) e outros que foram colocados num meio com 2 antibiticos (cresceram 250). 700 corresponde ao nr total e 250 ao nmero de transformados (que so resistentes ao s 2 antibiticos). Era para calcular uma taxa: 250/700 = 36%