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IIN NS ST TIIT TU UT TO OS SU UP PE ER RIIO OR RT TE EC CN NO OL L G GIIC CO O C R CL LN NIIC CA AR RIIC CA A RD DO OP PA AL LM MA A

ALUMNO INVESTIGACIN CURSO PROFESORA CICLO SEDE

: Cajaleon Suarez, Yair Ismael : Hematocrito : Hematologa : Lic. : 4 Ciclo : San Isidro

I.- OBJETIVO: Realizar la tcnica de Widal en lmina.

II.- FUNDAMENTO: Las Aglutinaciones con Antgenos Febriles, son pruebas serolgicas rpidas para detectar semicuantitativamente anticuerpos contra salmonelosis (tifoidea, paratifoidea) y brucelosis. El Antgeno aglutina los anticuerpos presentes en el suero del enfermo, los cuales pueden ser cuantificados por diluciones. Cuando hablamos de Aglutinaciones podemos dividirlas en 2 grupos: Aglutinaciones en Lmina: Es una prueba rpida y especfica para despistaje. Los valores positivos deben ser interpretados clnicamente y/o evaluados con pruebas ms sensibles, como son las aglutinaciones en tubo. Las Aglutinaciones en Tubo proporcionan un menor nmero de reacciones falsas negativas /positivas. Por lo tanto, cuantifica mejor los anticuerpos. Es necesario mencionar que las pruebas de aglutinacin en lmina son pruebas de rpida respuesta, en cambio la aglutinacin en tubo demoran 48 horas. Las pruebas de aglutinacin para antgenos febriles son pruebas indirectas y no concluyentes. Entonces, estos resultados deben de ser interpretados cuidadosamente de acuerdo al a la clnica del paciente y por el profesional mdico tratante. . Particularmente en pases como el Per, que presentan una alta incidencia de enfermedades infecciosas del tracto gastrointestinal, podemos encontrar, con mucha frecuencia, reacciones cruzadas con otras bacterias o personas que presentaron una infeccin anterior, en las cuales se evidencia aglutinacin como resultado de la memoria inmunolgica.

III.- BASES INMUNOLOGICAS DE LA REACCION DE WIDAL:

IV.- MATERIALES Muestra: Suero (Libre de Hemolisis) Reactivos: Reactivos Provistos: Antgeno Tfico O x 5 ml. Antgeno Tfico H x 5 ml. Antgeno Paratfico A x 5 ml. Antgeno Paratfico B x 5 ml. Antgeno Brucella Abortus x 5 ml. Preservantes: Salmonella tfico O con fenol al 0.5%. Salmonella tfico H con formalina al 0.5%. Salmonella Paratfico A y B con formalina al 0.5%. Brucella Abortus con fenol al 0.5%. Precauciones: Solo para uso diagnostico In Vitro. Condiciones de Almacenaje: o Los antgenos deben ser almacenados de 2-8 C. No Congelar.

Materiales: Lamina de Vidrio Transparente Lpiz marcador Pipetas y Micropipetas Aplicadores Tubos de Prueba Solucin de NaCl 0.9 % Rotador (opcional) Timer

V.- PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS: V-1.- Prueba Rpida de Aglutinacin en Placa:

Resultados:

Paciente 1.- Yair Ismael Cajaleon Suarez, en la prueba rpida de aglutinacin en placa aglutinaron para Tfico O y Tfico H.

V-2.- Prueba de Titulacin en Placa:

Suero

Antgeno O

Antgeno H

Antgeno Paratfico A

Antgeno Paratfico B

Brucella

0.08

0.04

0.02

0.01

0.005

Volumen de Suero (mL) 0.08 0.04 0.02 0.01 0.005

Antgeno (mL) 0,03 ( 1 gota) 0,03 ( 1 gota) 0,03 ( 1 gota) 0,03 ( 1 gota) 0,03 ( 1 gota)

Titulo para Salmonella 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320

Titulo para Brucella 1/25 1/50 1/100 1/200 1/400

Paciente N 1: Yair Ismael Cajaleon Suarez, en la Prueba de Titulacin en Placa Aglutinaron en O - 0.02 y en H 0.02. VI.- INTERPRETACION: Prueba Cualitativa reporte NEGATIVO. reporte POSITIVO.

Tcnico observa NO AGLUTINACIN Tcnico observa AGLUTINACIN Prueba de Titulacin en Placa Ttulo 1/80 1/40 1/40 1/50 a 1/100

Antgeno Salmonella Typhi O Salmonella Typhi H Salmonella Paratfica A y Paratfica B Brucella

Interpretacin Sospechoso Sospechoso Sospechoso Sospechoso

Ttulo 1/160 1/80 1/160 1/200 a ms

Interpretacin Indicativo Indicativo Indicativo Indicativo

Nota: Ttulos de 1/40 a 1/80 son sospechosos de enfermedad Solo ttulos mayores a 1/80 pueden considerarse probatorios de enfermedad cuando estn acompaados de sintomatologa clnica. Ttulos mayores de 1/320, son concluyentes. Por otro lado para la interpretacin considerar las limitaciones del Procedimiento.

Resultados Del Paciente: Paciente N 1: Yair Ismael Cajaleon Suarez, en la Prueba de Titulacin en Placa Aglutinaron en O 0.02 y en H - 0.02. Donde: 1/80 para Antgeno Tfico O Sospechoso 1/80 para Antgeno Tfico H Sospechoso

VII.- CUESTIONARIO: 1. Cules son los agentes etiolgicos de Fiebre Tifoidea, Fiebres Paratficas. y Fiebre Malta? 2. Fiebre Tifoidea Salmonella Typhi. Fiebre Paratfica A Salmonella Paratiphy A. Fiebre Paratfica B Salmonella Paratiphy B. Fiebre Malta Brucella Abortus.

Cules son las Vas de infeccin de las salmonelosis y cul es el periodo de Incubacin? Todas las salmonellas se transmiten por va oral, generalmente vinculadas a ingestin de alimentos contaminados e insuficientemente cocinados. Puede haber tambin transmisin fecaloral de persona a persona y de animal a persona. El perodo de incubacin es por lo general entre 12 a 36 horas, a veces hasta 6 y 48 horas. El tamao del inculo de Salmonella requerido para causar enfermedad sintomtica en adultos sanos 5 no est bien establecido. En general, es necesaria una inoculacin relativamente grande, entre 10 6 y 10 organismos. En un humano voluntario, apenas 25 organismos fueron suficientes para 11 producir la enfermedad. En otro estudio con 12 voluntarios, que ingirieron entre 17 y 10 organismos, en ms de la mitad de los casos menos de 1000 organismos fueron suficientes.

3.

Cules son las Vas de infeccin de la Brucelosis y cul es el periodo de Incubacin? Las vas de contagio pueden ser oral, por contacto, respiratoria o parenteral. Por la va oral las bacterias pasan al aparato digestivo, siendo la fuente principal de esta va de infeccin la leche no pasteurizada o productos lcteos. El contacto directo permite a las bacterias ingresar al organismo por heridas en la piel, o la conjuntiva ocular, o la mucosa nasal. La fuente principal de estas infecciones es la manipulacin de animales infectados o sus productos, afectando de esta manera a veterinarios, matarifes, investigadores de laboratorio y cuidadores de animales. Por la va inhalatoria las bacterias ingresan por la mucosa nasal. La fuente principal de bacterias que ingresan por esta va son aerosoles en laboratorios con muestras contaminadas, vacunas vivas, aerosoles en establos y lanas, afectando a personal de laboratorio, trabajadores de la lana y aseadores de establos. Por ltimo, la va parenteral, se da principalmente por inoculacin accidental en laboratorios, o en ambientes de trabajo veterinario, y tambin puede darse la contaminacin de transfusiones que pueden afectar a cualquier persona. En pases desarrollados es una enfermedad tpicamente ocupacional donde las personas ms expuestas son veterinarios, peones de campo y trabajadores de la industria de la carne. El perodo de incubacin es usualmente de 1 a 3 semanas, pero eventualmente puede ser de varios meses.

4.

En una Bacteria donde se ubica el Antgeno H, Antgeno O y el Antgeno K :

5.

En el proceso infeccioso, A qu se denomina infeccin aguda y qu tipo de anticuerpos predominan y a que se denomina Infeccin Crnica y qu tipo de Anticuerpos predominan?

6.

Qu caractersticas presentan los antgenos de Salmonella Typhi, Paratiphy A y B y Brucella?

7.

Qu es un Titulo de Anticuerpos? Es un examen de laboratorio que mide el nivel de anticuerpos en una muestra de sangre. El nivel de anticuerpos en la sangre le indica al mdico si usted ha estado expuesto o no a un antgeno o a algo que el cuerpo reconoce como extrao. El cuerpo utiliza los anticuerpos para atacar y eliminar las sustancias extraas. Cantidad de Anticuerpos presentes en el suero del paciente para pruebas inmunolgicas expresadas en quebrados. Dilucin + Anticuerpo = Titulo

8.

Qu titulo se considera una Infeccin aguda para Fiebre Tifoidea? Qu contienen los antgenos comerciales usados en la Prctica?

9.

En qu casos hay interferencia en la Reaccin de aglutinacin de antgenos febriles. Antibioticoterapia temprana, la cual, retrasa la aparicin de anticuerpos (descrito principalmente con cloranfenicol). Utilizacin de corticosteroides. Medicin temprana de anticuerpos (primera semana). Inmunodeficiencias adquiridas y congnitas. Portadores crnicos de Salmonella Typhi. Relacionadas a estandarizacin de la prueba. Bilirrubina (20 mg/dL). Hemoglobina (10 g/L). Lpidos (10 g/L). Factores reumatoides (300 UI/mL), no interfieren.

10. Qu es un fenmeno de Prozona? Ausencia de reaccin inmune cuando hay altas concentraciones de Ac. Efecto Prozona: Pueden obtenerse falsos resultados negativos en muestras que contengan un elevado ttulo de anticuerpos. Una dilucin de estas muestras proporcionar un resultado positivo.

11. Por qu se denomina un diagnostico Indirecto a la reaccin de aglutinacin?

12. Porque se llama diagnostico directo al microbiolgico y que medios usa para el aislamiento de las bacterias estudiadas?

Medio usados en el aislamiento de las Bacterias:

VIII.- CONCLUSIONES: Las Reacciones Febriles son pruebas diagnsticas que cada vez van cayendo mas en desuso debido a su poco valor diagnstico. Con ninguna de las reacciones febriles se puede hacer un diagnstico definitivo de cualquier enfermedad comprendida en ellas. Para todas las enfermedades febriles que abarcan existen pruebas ms confiables y con las que se pueden hacer diagnsticos definitivos. El uso inadecuado de estas pruebas o su mala interpretacin generalmente derivan en el uso injustificado de antibiticos.

IX.-RECOMENDACIONES: En caso de evaluar Brucellosis, se sugiere complementar el estudio con otras pruebas como: Rosa de Bengala, 2 Mercaptoetanol, anticuerpos bloqueadores, entre otras. Estas pruebas debern ser solicitadas por el mdico tratante segn el cuadro y la historia clnica del paciente. Los cultivos, (Hemocultivo o Coprocultivo) permiten el aislamiento de las bacterias, es la tcnica directa: para el diagnostico de Salmonelosis y Brucelosis. Causas que puedan tener influencia sobre los resultados: Enfermedades por otras bacterias

Medicamentos (principalmente antibiticos) Entre otras: la Tcnica Utilizada Aglutinacin en Lmina o Tubo.

X.- BIBLIOGRAFA:

Paginas Webs:

http://es.wikipedia.org/wiki/Salmonella http://es.wikipedia.org/wiki/Salmonelosis http://es.wikipedia.org/wiki/Brucelosis http://www.madrimasd.org/blogs/salud_publica/2007/07/29/70802 http://es.scribd.com/doc/97247449/AGLUTINACIONES-FEBRILES

IIN NS ST TIIT TU UT TO OS SU UP PE ER RIIO OR RT TE EC CN NO OL L G GIIC CO O C R L CL LN NIIC CA AR RIIC CA A RD DO OP PA A LM MA A

ALUMNO INVESTIGACIN CURSO PROFESORA CICLO SEDE

: Cajaleon Suarez, Yair Ismael : Hematocrito : Hematologa : Lic. Aysanoa Moore, Esar : 4 Ciclo : San Isidro

I.- INTRODUCCION: La hematologa se dedica al estudio de las clulas sanguneas y de la coagulacin. Comprendidos en su campo se encuentran los anlisis de concentracin, la estructura y funcin de las clulas de la sangre, los precursores en la mdula sea, los componentes qumicos del plasma o suero ntimamente unidos con la estructura y funcin de la clula sangunea y la funcin de las plaquetas y protenas que intervienen en la coagulacin de la sangre. El hematocrito (Hto) es la relacin existente entre el volumen de eritrocitos y el volumen total de sangre, expresado como porcentaje. Est directamente relacionado con la concentracin de hemoglobina, por lo que su determinacin constituye el procedimiento ms simple para el diagnstico de anemia. La sangre est formada por una parte corpuscular (clulas sanguneas) y una parte lquida (plasma). De la parte corpuscular aproximadamente el 90% corresponde a glbulos rojos. II.- FUNDAMENTO: Definicin:

Es un examen de sangre que mide el porcentaje de volumen que ocupan los glbulos rojos en la sangre. La medicin depende del nmero de glbulos rojos y de su tamao. El valor hematocrito tambin comprende otros elementos formes de la sangre. El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguneo completo. El hematocrito se basa en al centrifugar el capilar, la parte ms densa de la sangre (los hemates) sedimentan en el fondo del tubo, mientras que arriba queda la parte plasmtica. Calcularemos el porcentaje que hay en el capilar de glbulos rojos. Hay medidores, pero nosotros utilizaremos una regla graduada y situaremos el capilar de modo que la plastilina quede en la base 0. Veremos que hay hematocrito y parte no celular. Mediremos el hematocrito (Y) y todo el capilar (X). Valores Normales:

Los resultados normales varan, pero en general son como sigue: Hombres: de 40.7 a 50.3 % Mujeres: de 36.1 a 44.3 % Significado de los resultados anormales:

Los valores bajos de hematocrito pueden deberse a: Anemia Sangrado Destruccin de los glbulos rojos Leucemia Desnutricin Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitaminas B12 y B6 Sobrehidratacin

Los valores altos de hematocrito pueden deberse a: Cardiopata congnita Deshidratacin Eritrocitosis Niveles bajos de oxgeno en la sangre (hipoxia) Fibrosis pulmonar Policitemia vera III.- PROCEDIMIENTOS:

Extraccin de sangre venosa siguiendo la misma metodologa que en la primera prctica.

La aguja de extraccin va acoplada a un tubo estril con EDTA o citrato sdico para permitir la obtencin de sangre no coagulada.

Introducimos un tubo de capilaridad en el tubo con la muestra de sangre y dejaremos que se llene por capilaridad.

Centrifugar durante 5 minutos a 3500 rpm

Colocar el tubo de capilaridad en la centrfuga, asegurndose de que el peso est equilibrado. Esto significa que siempre que pongamos un tubo, deber haber otro en el lado opuesto. Si las muestras no son pares, rellenaremos con tubos vacos.

Sellar uno de los extremos del tubo de capilaridad para evitar la salida de sangre durante la centrifugacin.

IV.- RESULTADOS: Muestra 01: El paciente Yair, Cajaleon presenta un Hematocrito de 44%, por cual se encuentra dentro de los valores normales de un hombre (40.7 a 50.3 %) Muestra 02: El paciente Rodrigo, Snchez presenta un Hematocrito de 48%, por cual se encuentra dentro de los valores normales de un hombre (40.7 a 50.3 %) Muestra 03: La paciente Katherine, Espinoza presenta un Hematocrito de 42%, por cual se encuentra dentro de los valores normales de una Mujer (36.1 a 44.3 %)

V.- DISCUCIONES: A qu se debe que el porcentaje del Hematocrito disminuya o aumente? - Anemia - Sangrado - Destruccin de los glbulos rojos - Leucemia - Desnutricin - Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitaminas B12 y B6

Sobrehidratacin Cardiopata congnita Deshidratacin Eritrocitosis Niveles bajos de oxgeno en la sangre (hipoxia) Fibrosis pulmonar Policitemia vera

Se puede realizar la prueba del hematocrito en casa? - No. Este anlisis lo realizan especialistas de laboratorio cualificados. Existe alguna poblacin con mayor riesgo de tener valores anormales de hematocrito? - Las personas que sufren enfermedades crnicas (como artritis reumatoide), trastornos hereditarios de la sangre o malnutricin pueden tener valores de - hematocrito anormalmente bajos. Las mujeres en edad frtil pueden tener disminuciones transitorias del hematocrito durante periodos menstruales y el - embarazo. Las mujeres en edad frtil tienen ms riesgo de presentar un valor bajo del hematocrito debido a deficiencia de hierro. Es igual un Hematocrito de un Nio que de un Adulto? - No es igual, porque los valores varan debido a varios factores fisiolgicos. Los valores normales son: Nio 37 a 45 % Hombre adulto 40 a 54 %

VI.- BIBLIOGRAFA:

Pg. Webs: http://edurirom.blogspot.com/2012/03/practica-no-3-determinacion-de.html http://es.wikipedia.org/wiki/Hematocrito

INSTITUTO SUPERIOR TECNOLGICO CLNICA RICARDO PALMA Alumno : Cajaleon Suarez, Yair Ismael

Investigacin : Reconocimiento y Uso del Espectrofotmetro. Curso Profesor Ciclo Sede : Instrumentos y Equipos I : Lic. Aguilar Campos, Maximiliana : 3 Ciclo : San Isidro

I.- INTRODUCCIN: Un espectrofotmetro es un instrumento usado en la fsica ptica que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones. Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos. Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin atmica o espectrofotmetro de masa. Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto permite al operador realizar dos funciones: Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra. Indicar indirectamente que cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra.
II.- OBJETIVO:

Aprender el uso adecuado del espectrofotmetro. Entender la ley de Lambert y Beer. Ver las diversas relaciones que existen entre absorbancia y transmitancia. Reconocer las diversas partes del espectrofotmetro. Realizar una curva de calibracin y saber su uso dentro del laboratorio. Aprender el uso del factor de calibracin en el laboratorio.

III.- MATERIALES Y EQUIPO: Espectrofotmetro. Centrifuga. Tubos de Ensayo. Kit de Glucosa. Micropipeta. Pipetas serolgicas. Tips o Punteras. Matraces. Agua destilada. Material para toma de muestra. Bebidas de diferentes colores (Rojo, Amarillo, Verde, Azul).

IV.- PROCEDIMIENTOS: Experiencia 1: Curva de Absorbancia Espectral. Vertimos en un matraz la bebida de color rojo. Previamente como es gaseosa, le sacamos el gas, ya que altera la lectura. Luego con la ayuda de una pipeta + una bombilla de succin colocamos 1ml. de la bebida a cada tubo de ensayo previamente rotulado del 1 al 10. Posteriormente prendemos el espectrofotmetro para su calibracin. Pasamos a calibrar el espectrofotmetro con un blanco (AGUA) que agregamos a una cubeta. Una vez calibrado el espectrofotmetro, colocamos el 1ml. de cada tubo en la cubetas (previamente limpiadas) para su lectura al espectrofotmetro. Teniendo en cuenta las siguientes longitudes de onda: Rojo: 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580. Anotamos las Absorbancias para realizar el grafico de la Absorbancia Espectral.

Experiencia 2: Curva de Calibracin. Preparar una solucin porcentual segn el siguiente esquema: 100 1 1 50 2 0.9 0.1 2.725 25 3 0.8 0.2 2.519 12.5 4 0.7 0.3 2.341 6.25 5 0.6 0.4 2.642 3.125 6 0.5 0.5 2.034 1.56 7 0.4 0.6 1.642 0.78 8 0.3 0.7 1.288 0.39 9 0.2 0.8 1.045 0.19 10 0.1 0.9 0.635 0.09 11 0 1 0.380

Concentracin Tubo Solucin Coloreada Agua Destilada Absorbancia

Una vez realizadas las diluciones, leerlas en el espectrofotmetro. Buscar la longitud de onda para dicha solucin. Anotar tanto los datos de absorbancia y transmitancia. De dichos datos elaborar las curvas de Abs. Y %T en el papel milimetrado.

Experiencia 3: Determinacin de Glucosa en Suero. Sacar una muestra a uno de los integrantes de su grupo. Centrifugarla por 5 min. a 3000 RPM. Del sobrenadante coger 10ul. Y colocarlos en un tubo de ensayo. Posteriormente agregar 1ml. del reactivo del Glucosa. Incubar por 5 min. a 37 oC y llevarlo al espectrofotmetro. Anotar los datos requeridos y proceder al clculo. Para este proceso se deber saber el factor de calibracin o si no se deber procesar el estndar para obtener dicho parmetro.

Experiencia 4: Partes del Espectrofotmetro.

V.- CUESTIONARIO: Cuntos tipos de blancos existen dentro de un proceso bioqumico en el laboratorio?

Explique en forma grafica la ley de Lambert y Beer.

Diferencias entre espectrofotometra, nefelometra y turbidimetra.

INSTITUTO SUPERIOR TECNOLGICO CLNICA RICARDO PALMA Alumno : Cajaleon Suarez, Yair Ismael

Investigacin : Baciloscopa Curso Profesor Ciclo Sede : Obtencin y Conservacin de Muestra : Lic. Sanabria, Oswaldo : 3 Ciclo : San Isidro

I.- Fundamento: Las paredes celulares de ciertos parsitos y bacterias contienen cidos grasos (cidos miclicos) de cadena larga (50 a 90 tomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloracin con alcohol-cido, despus de la tincin con colorantes bsicos. Por esto se denominan cido-alcohol resistente. Las micobacterias como M. tuberculosis y M. marinum y los parsitos coccdeos como Cryptosporidium, Ciclosporidium e Isospora Belli se caracterizan por sus propiedades de cido-alcohol resistencia. La coloracin clsica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificacin de los cidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energa cintica de las molculas del colorante lo cual tambin facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloracin son de color rojo y las que no, se ven de color azul ya que se utiliza azul de metileno como tincin de contraste.
II.- Objetivos:

Reconocer a los Bacilos Alcohol Acido Resistente (BAAR). Realizar los mtodos y pasos de una Baciloscopa.

III.- Materiales y Equipos: Microscopio con objetivo de inmersin. Envases para la recoleccin de muestras. Aplicadores. Laminas portaobjetos nuevas. Un soporte para laminas portaobjetos. Un mechero, preferentemente a gas. Aceite de inmersin. Alcohol Acido. Fucsina. Azul de metileno. Palillos baja lenguas. Guantes. Uniforme. Mascarillas, etc.

IV.- Procedimientos: Experiencia 1: Preparacin y Fijacin del Extendido. Se destap con cuidado el envase teniendo al mechero detrs del envase. Se parti un baja lenguas en dos, y se obtuvieron puntas speras. Tomar una parte de la baja lenguas con la mano izquierda y la otra con la derecha, entre el pulgar y el ndice, y con los extremos irregulares seleccionar la partcula ms densa o purulenta de la muestra de esputo. Enrollarla en una de los dos partes de la baja lenguas con la ayuda de la otra. Se colocaron las partculas seleccionadas sobre el portaobjetos y se extendieron con la baja lenguas con movimientos suaves, circulares, dispersndolas de forma homognea en el centro de la lmina. Flameando la muestra reiteradas veces. Se dej el extendido en un soporte ubicado al costado de la mesada para que se seque a temperatura ambiente por 5 min. Luego se desecha el baja lenguas previamente incinerado.

Experiencia 2: Tincin de cido-Alcohol Resistencia (Ziehl-Neelsen). Se coloca la fucsina sobre el frotis. Se humea con la ayuda de un mechero. Se repite 3 veces el flameo con el mechero; se lava. Se agrega el alcohol Acido y se deja reposar por 2 min; se lava. Se agrega el Azul de Metileno y se deja reposar por 1min; se lava. Dejar secar a temperatura ambiente por 15 min.

V.- Discusiones: INFORME DE RESULTADOS. Negativo: no se observan BAAR en 100 campos observados. Positivo +: se observan menos de un bacilo por campo en promedio en 100 campos observados. Positivo ++: se observan de 1 a 10 bacilos por campo en promedio en 50 campos observados. Positivo +++: Se observan ms de 10 bacilos por campo en promedio en 20 campos observados. Es necesario encontrar como mnimo 4 BAAR en la Baciloscopa para reportarlo positiva, si se encuentran de 1 a 3 bacilos esta es la conducta a seguir: 1. Ampliar la lectura a 200 campos. 2. Si lo anterior no modifica la lectura repetir la Baciloscopa. 3. Si se encuentra la misma cantidad de bacilos (1 a 3) se reporta como negativo poniendo una nota en el diario de trabajo sobre lo observado.

VI.- Conclusiones: La tincin de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una tcnica de tincin diferencial rpida y econmica. Determinamos que la pared celular rica en lpidos y cidos carboxlicos (cido miclicos) tienen la propiedad de unirse al colorante primario (Fuscina de Ziehl) cuando se usa el calor como mordiente.

IIN NS ST TIIT TU UT TO OS SU UP PE ER RIIO OR RT TE EC CN NO OL L G GIIC CO O C R CL LN NIIC CA AR RIIC CA A RD DO OP PA AL LM MA A

ALUMNO INVESTIGACIN CURSO PROFESORA CICLO SEDE

: Cajaleon Suarez, Yair Ismael : Determinacin de Glucosa : Bioqumica Clnica I : Lic. Albornos Andrade, Christiam : 4 Ciclo : San Isidro

I.- INTRODUCCION: La es la principal fuente de anergia para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (Glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el pncreas. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en la sangre, y si esta situacin se mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos rganos. Esta es la razn principal por la que se produce el aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que tambin la provocan. Por tanto, la determinacin de glucosa en sangre es til para el diagnostico de numerosas enfermedades metablicas, fundamentalmente de la Diabetes Mellitus. Tambin es necesaria esta prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de la insulina que se debe administrar para tratarla. La Diabetes Mellitus es una enfermedad que incapacita al cuerpo para metabolizar o usar eficazmente los carbohidratos, las protenas y las grasas. Cuando comemos, los alimentos (especialmente carbohidratos y frutas) se convierten en Glucosa. Todas las clulas del cuerpo necesitan glucosa para vivir, pero la glucosa no puede penetrar en la clulas sin la intervencin de la insulina, esto es debido a su faltan de produccin o la poca produccin de insulina la cual se lleva a cabo en las clulas beta, que estn ubicadas en el extremo del pncreas. Cuanta ms cantidad de glucosa haya en la sangre, mas se eliminara por la orina. La determinacin en orina es menos exacta y menos til que la determinacin en sangre. La glucosa postprandial es aquella que se hace presente en la sangres despus de comer y de haber ingerido los alimentos. Se denomina glucosa postprandial a la deteccin de los niveles de azcar en sangre despus de la comida. La hiperglucemia postprandial puede ser determinada midiendo la concentracin de glucosa 2 horas despus de la ingesta de un alimento. Una concentracin de Glucosa Postprandial superior a 200 mg/dl es un indicador de Diabetes Mellitus. Adems, diversos estudios cientficos han demostrado que los pacientes con Diabetes que presentan un nivel de glucosa normal de ayuno pero una elevada glucosa postprandial tienen un riesgo mayor de enfermedades cardiovasculares. La magnitud y la duracin del pico de glucosa en plasma dependen de una variedad de factores, que incluyen el horario, la cantidad y composicin de la comida. En personas sin diabetes el nivel de glucosa a los 60 minutos tras el inicio de la comida, rara vez excede de los 140 mg/dl y vuelven a niveles previos a la comida en 2-3 horas. A pesar de que los niveles de glucosa han llegado a niveles basales tras 3 horas, la absorcin de carbohidratos contina durante al menos 5-6 horas tras la comida. La prueba de glucosa postprandial es de gran importancia, ya que gracias a ella podemos saber los niveles de glucosa presentes en la sangre despus de la ingesta de los alimentos y saber si un paciente padece de diabetes. La palabra postprandial quiere decir despus de una comida; por eso, la glucemia postprandial hace referencia a las concentraciones de glucosa en sangre despus de comer. Muchos factores determinan el perfil de glucemia postprandial.

II.- OBJETIVOS: Determinacin de Glucosa Postprandial por el mtodo de la Glucosa Oxidasa

III.- MATERAIL Y METODOS:

IV.- Resultados: Muestra: Suero (Libre de Hemolisis) Reactivos: Reactivos Provistos: Antgeno Tfico O x 5 ml. Antgeno Tfico H x 5 ml. Antgeno Paratfico A x 5 ml. Antgeno Paratfico B x 5 ml. Antgeno Brucella Abortus x 5 ml. Preservantes: Salmonella tfico O con fenol al 0.5%. Salmonella tfico H con formalina al 0.5%. Salmonella Paratfico A y B con formalina al 0.5%. Brucella Abortus con fenol al 0.5%. Precauciones: Solo para uso diagnostico In Vitro. Condiciones de Almacenaje: o Los antgenos deben ser almacenados de 2-8 C. No Congelar.

Materiales: Lamina de Vidrio Transparente Lpiz marcador Pipetas y Micropipetas Aplicadores Tubos de Prueba Solucin de NaCl 0.9 % Rotador (opcional) Timer

V.- Discusion: V-1.- Prueba Rpida de Aglutinacin en Placa:

Resultados:

Paciente 1.- Yair Ismael Cajaleon Suarez, en la prueba rpida de aglutinacin en placa aglutinaron para Tfico O y Tfico H.

V-2.- Prueba de Titulacin en Placa:

Suero

Antgeno O

Antgeno H

Antgeno Paratfico A

Antgeno Paratfico B

Brucella

0.08

0.04

0.02

0.01

0.005

Paciente N 1: Yair Ismael Cajaleon Suarez, en la Prueba de Titulacin en Placa Aglutinaron en O - 0.02 y en H 0.02. VI.- Conclusion: Prueba Cualitativa reporte NEGATIVO. reporte POSITIVO.

Tcnico observa NO AGLUTINACIN Tcnico observa AGLUTINACIN Prueba de Titulacin en Placa Ttulo 1/80 1/40 1/40 1/50 a 1/100

Antgeno Salmonella Typhi O Salmonella Typhi H Salmonella Paratfica A y Paratfica B Brucella

Interpretacin Sospechoso Sospechoso Sospechoso Sospechoso

Ttulo 1/160 1/80 1/160 1/200 a ms

Interpretacin Indicativo Indicativo Indicativo Indicativo

Nota: Ttulos de 1/40 a 1/80 son sospechosos de enfermedad Solo ttulos mayores a 1/80 pueden considerarse probatorios de enfermedad cuando estn acompaados de sintomatologa clnica. Ttulos mayores de 1/320, son concluyentes. Por otro lado para la interpretacin considerar las limitaciones del Procedimiento. Volumen de Suero (mL) 0.08 0.04 0.02 0.01 0.005 Antgeno (mL) 0,03 ( 1 gota) 0,03 ( 1 gota) 0,03 ( 1 gota) 0,03 ( 1 gota) 0,03 ( 1 gota) Titulo para Salmonella 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 Titulo para Brucella 1/25 1/50 1/100 1/200 1/400

Resultados Del Paciente Cajaleon Titulacin O - 0.02 y

Paciente: N 1: Yair Ismael Suarez, en la Prueba de en Placa Aglutinaron en en H - 0.02.

Donde: 1/80 para Antgeno Tfico O Sospechoso 1/80 para Antgeno Tfico H Sospechoso

VI.- Bibliografia: