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R p u b l i q u e d u M a l i

U n P e u p l e - U n B u t - U n e F o i

MI NI S T RE DE l DUCAT I ON NAT I ONAL E

UNI VERSI T DE BAMAKO

Facult de Mdecine de Pharmacie et DOdonto-Stomatologie



ANNEE : 2002-2003 Thse N..


E Et tu ud de e d de es s a ac ct ti iv vi it t s s b bi io ol lo og gi iq qu ue es s d de e f fa ag ga ar ra a
z za an nt th ho ox xy yl lo oi id de es s L La am m ( (R Ru ut ta ac ce ea ae e) )



Thse prsente et soutenue publiquement le ..
Facult de Mdecine de Pharmacie et DOdonto-Stomatologie
Par Monsieur Igor Passi Lysette Bossokpi
Pour obtenir le grade de Docteur en Pharmacie (Diplme dEtat)

JURY :
Prsident : Pr Amadou Diallo
Membres Pr Abdel Kader Traor
Dr Kamissoko Fanta Traor
Directeur de thse : Dr Drissa Diallo





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

1
















CHAFTRE 1






















Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

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1.1. NTRODUCTON

Dans de nombreux pays en voie de dveloppement, l'accs la mdecine
conventionnelle reste limit aux grandes agglomrations. Les difficults de
dplacements, l'insuffisance du personnel qualifi, le cot lev des prestations et des
mdicaments conventionnels et les facteurs socio-conomiques, ne laissent une
grande partie de la population, d'autres choix, que celui de la mdecine traditionnelle
pour traiter leurs maladies courantes (Bayes, 1997).
Depuis quelques dcennies, les tats africains particulirement ceux au sud du Sahara
ont mis en place des politiques visant valoriser la mdecine traditionnelle afin d'assurer
une bonne sant de leurs populations.
La flore africaine rpute pour sa richesse comprend des milliers d'espces vgtales
parmi lesquelles certaines ont t scientifiquement tudies et ont abouti des
mdicaments utilisables dans les soins de sant primaire selon les recommandations de
l'Organisation Mondiale de la Sant (Kita, 1993).
C'est dans cette perspective que le Dpartement de Mdecine Traditionnelle de
Bamako, centre de rfrence de l'OMS, travaille en collaboration avec les
tradithrapeutes afin de mettre la disposition de la population des mdicaments
traditionnels amliors (MTA) base de plantes. C'est ainsi que 7 mdicaments
traditionnels amliors ont t mis sur le march pharmaceutique malien (Diallo, 2000).

Fagara zanthoxylodes Lam. (Rutaceae) est une plante qui pousse spontanment en
afrique tropicale et de prfrence sur les sols frais et humides.
Ce sont les racines qui sont utilises et vendues sur les marchs africains; elles ont une
saveur piquante trs apprcie et servant calmer les douleurs dentaires. Son emploi
comme cure-dents est particulirement recommand. Cette plante, bien connue des
tradithrapeutes, est utilise traditionnellement pour soigner les crises drpanocytaires
en empchant l'hmolyse des hmaties (Sofowara, 1971).

Les alcalodes de Fagara zanthoxylodes possdent en outre une activit
antibactrienne et antileucmique (Metou et al, 1988).


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

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Notre travail porte sur l'tude de l'activit biologique des extraits de la poudre d'corces
de racines de Fagara zanthoxylodes savoir : l'valuation des activits antioxydante,
antalgique, hmostatique, anti-inflammatoire et antifongique ainsi que la dtermination
de la toxicit aigu (DL
50
).




1.2. MOTVATON$


En 1978, l'Organisation Mondiale de la Sant s'est rsolument engage la recherche
et la valorisation de la pharmacope traditionnelle afin de pouvoir satisfaire aux besoins
de sant des populations (Diab, 2001).
Notre travail s'inscrit dans cette perspective et a t motiv par :

- La volont de valoriser et de promouvoir l'utilisation des plantes mdicinales pour
l'amlioration de la sant.

- La ncessit de faciliter l'accs des populations aux mdicaments moindre cot,
compte tenu du cot lev des mdicaments conventionnels.

- L'intrt que suscite l'tude des biomolcules naturelles activits antioxydante,
antalgique, hmostatique, anti-inflammatoire et antifongique.

- Objectiver l'utilisation traditionnelle de Fagara zanthoxylodes dans le traitement
des affections bucco-dentaires.







Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

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1.3. O]ECTF$


3.1. Objectif nral :
- Notre objectif gnral est d'valuer les activits biologiques ainsi que la toxicit
aigu des extraits de la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.

3.2. Objectifs spcifiques :
- Dterminer l'activit antalgique des extraits aqueux de la poudre d'corces de
racines de Fagara zanthoxylodes.

- Dterminer les activits hmostatiques des extraits aqueux et organiques de la
poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.

- Dterminer l'activit anti-inflammatoire des extraits aqueux de la poudre d'corces
de racines de Fagara zanthoxylodes.

- Dterminer l'activit antioxydante des extraits aqueux et organiques de la poudre
d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.

- Dterminer l'activit antifongique des extraits aqueux et organiques de la poudre
d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.

- Dterminer la toxicit aigu (DL
50
) par voie orale des extraits aqueux de la poudre
d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.

- Dterminer la toxicit aigu (DL
50
) par voie intra-pritonale des extraits aqueux
de la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

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CHAFTRE 2 :

GENERALTE$






























Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

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2.1.1. LE$ ANTOXYDANT$

2.1.1.1. Gnralits
Prsent dans lair pour environ une partie sur cinq, loxygne est indispensable la vie de la
plupart des tres vivants et permet la respiration, plus gnralement les oxygnations. On
lutilise en thrapeutique en inhalation contre lanoxie globale ou cellulaire, les hmorragies,
de nombreuses affections pulmonaires, les embolies gazeuses des plongeurs etc.
Elment gazeux de la seizime colonne de la classification priodique des lments, tous
les organismes vivants anarobies utilisent le haut niveau nergtique de loxygne
molculaire (O
2
) pour oxyder les hydrates de carbone, les protines et les graisses afin de
produire du CO
2
, de leau et de lnergie ncessaire au processus de la vie. En plus de son
rle dans la conversion de l'nergie, loxygne est utilis par des enzymes telles que les
monoamino-oxydases pour mtaboliser des composs endognes et exognes (Cavin,
1999).
Indispensable la vie, lO
2
est galement une source dagression laquelle sont soumis
tous les tres vivants. En effet, sous laction des rayons UV, des radiations ionisantes, de
nombreux mtaux de transition et au cours de diverses ractions enzymatiques, des formes
hautement ractives de loxygne apparaissent telles que loxygne singulet
1
O
2
, le
peroxyde dhydrogne H
2
O
2
, les peroxydes alkyles ROOH et les radicaux hydroxyles OH,
peroxyles ROO, et alkoxyles RO. On les dsigne souvent comme espces ractives de
loxygne. Ces dernires sont utilises par les cellules phagocytaires de lorganisme (les
macrophages) pour combattre les agents infectieux tels que les bactries ou les virus.
Toutefois, les bienfaits de ces composs hautement toxiques ne restent pas sans
consquence principalement pour les structures biologiques des cellules (protines lipides,
ADN). De nombreuses pathologies parmi lesquelles lathrosclrose, larthrite, lasthme, la
maladie de Parkinson, le mongolisme, et la neurodgnration sont en partie lies laction
de ces formes ractives de loxygne. (Mller, 1992 ; Harman, 1992).
Les radicaux libres semblent galement participer aux phnomnes de vieillissement qui
pourraient tre la consquence des dommages oxydatifs irrversibles accumuls tout au
long de lexistence (Seelert, 1992).

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On entend par radical libre, nimporte quelle molcule contenant un ou plusieurs lectrons
non apparis. Bien que le terme de radical libre ait souvent t assimil une espce
ractive ou un oxydant, il est important de signaler que les radicaux libres ne sont pas
forcment des oxydants. De mme tous les oxydants ne sont pas des radicaux libres.
Les radicaux libres sont cependant une cible particulirement prometteuse pour amliorer
les traitements thrapeutiques diffrents stades pathologiques (Harman, 1992).
Lhomostasie de la cellule normale est un quilibre fragile entre la formation de pro-
oxydants et leur limination (antioxydant). Si cet quilibre est rompu en faveur de la
formation des pro-oxydants, lorganisme endure ce quon appelle le stress oxydatif. Il y a
donc une surproduction de pro-oxydants que la cellule ne peut plus liminer.

Dans la majorit des cas les pro-oxydants ne sont pas les causes mais jouent plutt un rle
secondaire dans le processus primaire de la maladie. Ceci ne signifie pas pour autant que
le stress oxydatif est sans importance. Ainsi par exemple, les dommages oxydatifs
secondaires causs aux lipides des parois des vaisseaux sanguins contribuent
significativement au dveloppement de lathrosclrose (Halliwell, 1996).

2.1.1.2. Dfinition des Antioxydants
On entend par antioxydant, toute substance qui lorsquelle est prsente en faible
concentration compare celle du substrat oxydable, retarde ou prvient de manire
significative loxydation de ce substrat.
Le terme de substrat oxydable inclut toutes sortes de types de molcules in vivo. Ainsi
lorsque des espces ractives de loxygne sont gnres in vivo, de nombreux
antioxydants interviennent. Il sagira principalement denzymes : la superoxyde dismutase,
la gluthation peroxydase, la catalase et aussi des molcules de faibles masses molculaires
comme le tripeptide gluthation ou lacide urique (Michiels et al, 1994).
En plus de ces substances propres lorganisme, les mdicaments et lalimentation
peuvent tre galement dautres sources dantioxydants.
En ce qui concerne les mdicaments, de nouveaux composs aux proprits antioxydantes
sont en cours de dveloppement.


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Actuellement, plusieurs agents thrapeutiques comme les anti-inflammatoires non
strodiens, les antihyperlipoprotiniques, les -bloquants, et les antihypertensifs ont t
valus pour leur proprits antioxydantes. Citons deux exemples :
Le Frobucol
`
(Lurselle): est un mdicament qui en plus de ces effets reconnus dans la
baisse du taux sanguin de cholestrol, prvient lathrogense en agissant comme
antioxydant et en supprimant l' oxydation des lipoprotines de faible densit (LDL).
La N - actylcystine : est une molcule intressante qui pntre les cellules et agit de
manire trs efficace dans la rgnration du gluthation. Des recherches ont galement
dmontr que la N acetylcystine peut tre utile dans le traitement des blessures de
poumon dues des espces ractives de loxygne.

Pour ce qui concerne lalimentation, lorganisme utilise les substances ingres comme
antioxydants. Les principaux antioxydants naturels sont les Acide ascorbique et la
Tocophrol ainsi que le -carotne.
Acide ascorbique : Vitamine C : est un puissant rducteur et joue un rle important
dans la rgnration de la vitamine E ( Sies et Sthal, 1995). On retrouve la vitamine C
principalement dans les aliments suivants : les lgumes, le chou, le poivron, le persil, les
agrumes et la kiwi.
Tocophrol : Vitamine E prvient la peroxydation des lipides membranaires in vivo en
capturant les radicaux peroxyles. Elle est prsente dans les huiles vgtales ( huiles
darachide, de soja, de chardon, de tournesol et dolive presses froid) ainsi que dans les
noix, les amandes, les graines, le lait, les ufs, et les lgumes feuilles vertes.

Le -carotne : qui outre lactivit provitaminique A possde la capacit de capter
loxygne singulet. On le retrouve dans les lgumes verts, la salade, les carottes, labricot,
le melon, les pinards, la papaye et autres fruits jaunes.
La recommandation officielle parle dun apport quotidien de 60 mg de vitamine C et 10 mg
de vitamine E. Il nen existe pas pour le -carotne. Toutefois ces quantits suffisent juste
pour prvenir les phnomnes de carences. Cest la raison pour laquelle les spcialistes
recommandent en gnral un apport quotidien nettement plus lev : 150 300 mg de
vitamine C, 50 150 mg de vitamine E et 2 6 mg de -carotne.


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2.1.1.3 Les antioxydants naturels
Lintrt port aux antioxydants naturels ne cesse de crotre ces dernires annes. En effet,
on trouve dans la littrature de plus en plus de publications sur des composs naturels aux
proprits antioxydantes ( Potterat, 1997).
Les procyanidines du th vert et du th noir (Weissburger, 1997) et les polyphnols du vin
rouge ont t particulirement tudis dans cette optique ( Tamura et Yamagami, 1994).
En ce qui concerne les plantes mdicinales bien connues et conomiquement importants,
nous pouvons citer lail ( Allium sativum L ; Liliaceae) et le ginkgo ( Ginkgo biloba L ;
Gingkoaceae) qui sont utiliss dans le traitement des maladies cardio-vasculaires et
circulatoires dues la vieillesse (Yamasaki et al, 1994).
Les antioxydants naturels sont galement tudis dans le but de trouver de nouvelles
structures modles pour le dveloppement des mdicaments thrapeutiques ou
protecteurs. Ils reprsentent une alternative lutilisation dantioxydants synthtiques tel
que le butylhydroxytolune (BHT) ou le butylhydroxyanisol (BHA). Depuis ces 10 dernires
annes, il a t dcouvert de nombreuses classes de substances naturelles ; le nombre de
composs connus ne cesse daugmenter (Cavin, 1999).

Les antioxydants naturels sont prsents dans toutes les parties des plantes suprieures.
Ce sont pour la plupart des composs phnoliques.
On dfinit par compos phnolique, tout compos possdant un noyau aromatique
contenant un ou plusieurs substituants hydroxyles, incluant diffrents groupes fonctionnels
drivs (esters, glycosides, etc.). Ils sont rpandus parmi les plantes alimentaires et sont
rgulirement consomms par un grand nombre de personnes. Parmi ces composs, les
flavonodes reprsentent la classe de substances la plus tudie (Bors et al, 1990).
Noublions cependant pas de mentionner dautres classes de substances telles que les
xanthones, les carotnodes, les drivs de lacide hydroxycinnamique, les tanins et les
lignanes pour lesquelles on a galement pu tablir des activits antioxydantes.

2.1.1.3.1. Les Flavonodes
Ce sont des groupes de mtabolites secondaires les plus rpandus parmi les plantes et par
consquent galement un des groupes les plus tudis. On les trouve dans presque toutes
les parties de la plante diffrentes concentrations, o ils jouent un rle dterminant dans

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le systme de dfense. Les flavonodes sont largement prsents dans les fruits, les
lgumes, le th et le vin.
Lapport quotidien de flavonodes au sens large est estim 1 g dans les pays de louest,
mais ils sont gnralement trs mal rsorbs dans le tractus gastro-intestinal (Formica et
Regelson, 1995). Les flavonodes sont galement trs intressants du point de vue mdical
car ils sont associs de nombreuses activits biologiques telles que anti-inflammatoires,
antihpatotoxiques, anti-tumorales, anti-hypertensives, antithrombotiques, antibactriennes,
antiallergiques et antioxydants (Anderson et al. 1996).
Les flavonodes peuvent fonctionner soit comme chlateurs de mtaux (querctine,
catchine), soit comme capteurs de radicaux hydroxyles, superoxydes, alkoxyles, et
peroxydes (Madhavi et al. 1996).
Les relations structure-activit antioxydantes des flavonodes et de composs phnoliques
ont dmontr que lactivit antioxydante tait dtermine par la position et le degr
dhydroxylation (Salvi, 1998).
Parmi les flavonodes, citons la morine qui prsente non seulement une activit
antioxydante envers les radicaux proxyles, mais galement une activit hpato-protectrice.
Elle contribue aussi linhibition de loxydation des lipoprotines faibles densits (LDL)
qui sont impliques dans lathrogense.
O HO
HO
OH O
OH HO
OH


Morine
2.1.1.3.2 Les xanthones
Les proprits pharmacologiques reconnues des xanthones sont linhibition de la mono
amine oxydase, leurs activits antimicrobiennes et leurs cytotoxicits ( Hostettmann, 1989).
Cependant, suite au rapport sur les proprits antioxydantes de la mangifrine (Sato et al.
1992), de nombreuses tudes ont dmontr que ces polyphnols possdent galement de
trs intressantes proprits dinhibition envers la peroxydation des lipides, ainsi que des
proprits capteurs de radicaux libres contre les anions superoxydes (Andersson et al,
1996)

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O HO
HO
OH
O
OH O
Glc


Mangifrine

2.1.1.3.3. Les coumarines
Les coumarines sont capables de prvenir la peroxydation des lipides membranaires et de
capter les radicaux hydroxyles, superoxydes et peroxyles. Les conditions structurales
requises pour lactivit antiperoxydante des coumarines sont similaires celles signales
pour les flavonodes (Andersson et al. 1996).

2.1.1.3.+. Les carotnodes
Les carotnodes sont des constituants membranaires des chloroplastes et forment un
groupe de pigments liposolubles. Ils contribuent la coloration jaune, orange ou rouge des
fruits et lgumes. On les retrouve souvent dans les plantes alimentaires.
Le -carotne est le carotnode le plus abondant dans la nourriture et il semblerait quil
diminue les risques de certains cancers ( Peto et al. 1981).
Les carotnodes ragissent avec loxygne singulet, les radicaux peroxyles et alkoxyles en
capturant les radicaux libres (Krinsky, 1989).


2.1.1.3.5. Les drivs d'acides phnoliques
Ils sont prsents dans de nombreux fruits et lgumes, soit sous forme libre, soit sous forme
de drivs. On les retrouve principalement dans le caf (4%), les prunes(0,9%), les myrtilles
(0,2%), le raisin (0,2%), et les pommes (0,1%) (Huang et Ferraro, 1991).
Ces drivs possdent galement des proprits antitumorales ; En effet, ils peuvent
bloquer la nitrosation des amines soit par rduction du nitrite en oxyde nitrique, soit par
formation de drivs C-nitroso en agissant non seulement in vitro, mais galement in vivo
(Huang et Ferraro, 1991). Ces composs possdent des activits antioxydantes et
antiradicalaires. Ainsi, lacide cafique, lacide gallique et lacide chorognique captent non
seulement les radicaux superoxydes produits par le systme NADPH/methosulfate de

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phnazine mais prsente en plus de fortes activits antioxydantes et antiradicalaires envers
le radical DPPH (Ohnishi et al, 1994).
De nombreux glycosides du phnylpropane, en particulier ceux qui possdent une partie
catchole, ont montr de fortes activits antioxydantes. Ainsi, le verbascoside , un compos
ubiquitaire trs tudi, inhibe lauto oxydation de lacide linolique et la peroxydation
lipidique microsomale. Il prsente galement une forte inhibition de la peroxydation lipidique
dpendante du fer dans les mitochondries et possde une forte capacit de capter le radical
libre DPPH (Potterat, 1997)

HO
HO
O
O
O
O
OH
H
O
OH
OH
O
HO
HO
OH
OH


Verbascoside

Parmi les drivs phnoliques, le resvratrol est le compos qui est le plus tudi. En effet,
ce stilbne, isol du raisin possde de fortes proprits antioxydantes. Il inhibe galement
le dveloppement des lsions prnoplastiques de la souris et rencontre un certain intrt
en tant quagent chimioprventif potentiel chez ltre humain (Jang et al. 1997)

HO
OH
OH

Resvratrol

2.1.1.3.6. Les tanins
Les tanins hydrolysables et les procyanidines prsentent des proprits antioxydantes
significatives. On a pu dmontrer quils inhibent aussi bien lauto oxydation de lacide
ascorbique et du linolate que la peroxydation lipidique des mitochondries du foie et des
microsomes.

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Les tanins agissent en donneurs de protons face aux radicaux libres lipidiques produits lors
de la peroxydation. Des radicaux taniques plus stables sont alors forms, ce qui a pour
consquence de stopper la raction en chane de lauto oxydation lipidique. Ils sont par
consquent de trs bons capteurs de radicaux libres. Un exemple trs souvent relat est
celui du th vert ( Camellia sinensis O.Kuntze, Theaceae). En effet, de part son utilisation
abondante dans lalimentation, de nombreuses recherches ont t effectues sur les
proprits antioxydantes ainsi que sur les mcanismes daction de cette plante.
Les substances actives sont les gallocathchines. Le th vert contient 9 13 % de gallate
dpigallocathchine , 3 6% de gallate dpicathchine et 3 6% dpigallocathchine.
La Chine et le Japon sont les plus grands consommateurs de th vert ; certains grands
buveurs peuvent consommer jusqu 1 g de gallate dpigallocatchine par jour (Huang et
Ferraro, 1991).
Les effets bnfiques des polyphnols du th vert, particulirement le gallate
dpigallocathchine sont attribus leurs proprits antioxydantes et leurs capacits de
capter les radicaux libres.
Ces substances prsentent galement des proprits anticancreuses non ngligeables.
De nombreuses tudes ont montr, qu'aprs administration dextraits de th vert, on a
constat une diminution significative des cancers (Gutman et Ryu, 1996). Les polyphnols
du th vert ont aussi montr des proprits antimutagnes (Weissburger, 1997).

O
O
OH
OH
OH
OH
HO
C
O
OH
OH
OH

Gallate dpigalocatchine

2.1.1.3.7. Les linanes
Les lignanes les plus tudis du point de vue de leurs activits antioxydantes sont les
drivs bifuranyles des graines de ssames (Sesamum indicum DC. Pedaliaceae).

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Les lignanes diarylfuranofuraniques tels que le sesaminol ont demontr des proprits
antioxydantes expliquant ainsi la stabilit de cette huile (Potterat, 1997).
O
O
O
O
O
O
HO

Ssaminol

2.1.1.+. Mthodes de tests antioxydants
2.1.1.+.1. Test en solution
Frincipe :
Dtection de l'activit antioxydante d'une substance en solution par dcoloration de la
Crocine isole du Safran (Crocus sativa L., Iridaceae) (Bors et al, 1984).

2.1.1.+.2. Test mesurant l'activit antioxydante contre le lysosyme
Frincipe :
Dtection de l'activit antioxydante d'une substance par oxydation des lysosymes par le
2,2'-azobis, 2-amidinopropane (Salvi, 1998).

2.1.1.5.3. Dpistae de l'activit antioxydante sur CCM par le DFFH
Frincipe : Rduction des radicaux libres fournis par le DPPH sur des plaques CCM.
Nous avons utilis ce test dans notre mthodologie pour dterminer l'activit antioxydante.
(Takao et al, 1994)





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2.1.2. LA DOULEUR
2.1.2.1. Gnralits
La douleur est un phnomne dont la dualit rend souvent le praticien perplexe. Cette
dualit est un phnomne manifeste plusieurs gards.
Du point de vue smiologique, la douleur est un symptme, un signal souvent salvateur car
le premier attirer lattention sur un phnomne pathologique ; elle peut aussi, par son
intensit et sa dure, devenir un vritable syndrome, retentissant sur les grandes fonctions
organiques, capable lui seul daggraver ltat du malade.
La Douleur a t dfinie comme une exprience sensorielle et motive dsagrable,
associe des lsions tissulaires prsentes ou potentielles ou dcrites comme telles.
Les douleurs par excs de nociception proviennent dun accroissement de linformation
porte par les fibres fines, secondaires une agression somatique ou viscrale ; elles
relvent dun traitement par les analgsiques proprement dits ( Maga, 1989 ).

2.1.2.2. Caractristiques de la douleur
La douleur est caractrise par un ensemble de manifestations qui sont en gnral des :
- Manifestations cliniques : troubles trophiques, oedmes.
- Manifestations vgtatives : vasoconstriction, mydriase, tachycardie.
- Modifications de la pression artrielle, sudations
- Manifestations motrices : retrait, sursaut, fuite.
- Manifestations psychiques : la souffrance cause par une douleur peut affecter la vie
psychique et affective dun individu.

2.1.2.3. Mcanismes de dclenchement de diffrents types de douleur
a) Les douleurs superficielles peuvent tre dclenches par des stimuli mcaniques
(pression exerant au niveau des tguments) et par des stimuli thermiques (froid ou
chaleur)
b) Les douleurs profondes sont dues divers phnomnes dont les plus courants sont :
- augmentation de la pression au niveau des viscres
- action mcanique de compression dun nerf


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2.1.2.+. Diffrents types de douleur
On peut distinguer trois principales classes de douleurs :
- Douleurs physiologiques
- Douleurs neurologiques
- Douleurs psychognes
a) Douleurs physioloiques :
Elles sont dues une hyperstimulation de terminaisons libres. Ces stimulations peuvent
tre mcaniques ou chimiques :
- stimulations mcaniques :
exemple : douleurs osseuses
- stimulations chimiques :
exemple : douleur de lulcre, goutte aigu, dpt durate de sodium dans larticulation

b) Douleurs neuroloiques :
Elles sont dues des lsions des voies nerveuses ; elles peuvent tre spontanes ou
provenir dune stimulation peu intense.
Ces douleurs proviennent des lsions du SNC ; dans ce cas il y a une leve de linhibition
exerce par le systme de contrle (cortex) .
Elles peuvent tre aussi secondaires des lsions du SNP.

c) Douleurs psychones :
Ce sont des douleurs dont la cause relve du fonctionnement psychique. elles ne rpondent
pas rellement au traitement par les antalgiques (Rainsford, 1984).

2.1.2.5. ANTALGQUE$ CONVENTONNEL$
2.1.2.5.1. Dfinition
Ce sont des mdicaments action symptomatique qui attnuent ou abolissent les
sensations douloureuses sans provoquer une perte de conscience ou une dpression des
autres sensations. Ils constituent une famille htrogne du point de vue chimique et
pharmacologique mais possdent en commun des effets regioslectifs sur les influx
nociceptifs avec dans certains cas une action centrale dans les hyperthermies.

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2.1.2.5.2 Classification des antaliques
Deux grandes familles thrapeutiques composent cette classe pharmacologique :
2.1.2.5.2.1. Antaliques centraux
La morphine, originaire d'une plante: Papaver somniferum L. exerce son effet en agissant
sur des rcepteurs spcifiques prsents dans diffrentes rgions du systme nerveux
central. Elle participe l'analgsie et aux autres actions pharmacologiques qui y sont
associes.
2.1.2.5.2.2 Analsiques priphriques
Ils agissent localement au niveau du stimulus douloureux ; leur mode daction, souvent
proche, fait intervenir pour lessentiel linhibition des prostaglandines. On y retrouve des
antalgiques purs, des analgsiques antipyrtiques et des anti-inflammatoires.
2.1.2.5.3 Mcanisme d'action antalique
Prenons comme rfrence, le chef de fil qui est un salicyl : acide actyle salicylique (AAS)
ou Aspirine

.
Acide Actyle - $alicylique : (AA$)
Laction antalgique de lAAS sexplique principalement par un mcanisme priphrique.
En injectant de la bradykinine comme stimulus dans lartre splnique, ladministration
dAAS prvient lapparition de la dcharge de potentiels affrents au niveau du nerf
splanchnique qui est normalement voque par ce stimulus chimique.
Les tudes sur le rle des prostaglandines apporteront dautres prcisions.
La prostaglandine E
1
contribuerait la douleur de linflammation en sensibilisant les
terminaisons nerveuses affrentes laction algogne dautres mdiateurs librs dans le
foyer inflammatoire, comme la bradykinine ou lhistamine.
LAAS qui inhibe la synthse des prostaglandines sopposerait cette sensibilisation en
exerant ainsi un effet antalgique modr.
Une telle explication de laction des salicyls nest concevable que dans le cas de douleurs
associes une lsion tissulaire entranant la libration de facteurs de linflammation.
La douleur ne constituant quun des symptmes de linflammation, on ne peut donc
assimiler leffet antalgique un effet anti-inflammatoire. Dailleurs certains antalgiques
antipyrtiques (Drivs du para amino phnol) sont pratiquement dpourvus d'activits anti-
inflammatoires (Rainsford, 1984).


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

19
2.1.2.5. $tructures chimiques de quelques antaliques conventionnels


O
H
NCH
3
HO
HO


morphine


OH
HN
C CH
3
O
O
HN
C CH
3
C
2
H
5
O


Paractamol Phnactine

N
CH
3
C Cl
O
CH
2
COOH
H
3
CO

N
HN
C O C
H
2
C
HOH
CH
2
OH
CF
3
O

Clomtacine (Duperan

) Floctafnine (Idarac

)


N
N
O
CH
3
N
CH
3
CH
3
H
2
C NaO
3
S
N
N
O
CH
3
H
CH
3

Novalgine Phnazone



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

20
2.1.2.7. Tests de l'activit antalique
2.1.2.7.1. Test la queue
Frincipe :
Rduire par des substances antalgiques, la douleur provoque chez les rats, par
stimulation dune douleur au niveau de la queue
.
2.1.2.7.2. Test la plaque chauffante (Hot plate test)
Frincipe :
Rduire, par des substances antalgiques, la douleur provoque en dposant une souris sur
une plaque chauffante.

2.1.2.7.3. Test de torsion ( Writhin test)
Frincipe :
Rduire par des substances antalgiques, la douleur provoque chez les souris par l'injection
d'une substance irritante capable d'entraner des mouvements de torsion (Elizabeth, 1996).
Nous avons utilis les deux derniers tests dans notre mthodologie pour dterminer
l'activit antalgique.

2.8. Quelques plantes activit antalique

TALEAU : QUELQUES PLANTES A ACTIVITE ANTALGIQUE

Nom scientifique Famille Parties utilises Rfrences
Argemone mexicana L. Papavraceae Feuilles Kerharo et Adams, 1974
Maytenus senegalensis Lam Celastraceae Racines Mariko et al, 2002
Sterculia setigera Del. Sterculiaceae Racines Kerharo et Adams, 1974
Trichilia catigua A.Juss Meliaceae Racines --









Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

21


2.1.3. L' HEMORRAGE
2.1.3.1 Gnralits
La survenue dune plaie vasculaire entrane un mcanisme de dfense qui lutte contre la
perte du sang hors du systme vasculaire. Ce mcanisme est dampleur variable selon
limportance des dgts.
Sil sagit de la plaie de vaisseaux capillaires , lhmostase primaire sera suffisante pour
arrter lhmorragie.
Sil sagit de la plaie dun vaisseau de plus gros calibre, lhmostase primaire sera
renforce par la coagulation plasmatique qui est ncessaire pour former un caillot de fibrine
insoluble et solide.
Lorsque la cicatrisation du vaisseau sera termine, les mcanismes de la fibrinolyse
permettront la dissolution du caillot qui constitue un obstacle la circulation vasculaire.
Si la plaie est trop importante : section dune artre ou dune veine fmorale sous-clavire
ou humorale, lhmostase et la coagulation sont inefficaces et seule la suture du vaisseau
peut arrter lhmorragie.
La thrapeutique anti-hmorragique a t longtemps domine par les hmostatiques
gnraux et locaux, seules armes disponibles souvent peu efficaces.
Deux lments ont t dterminants dans les progrs du traitement des maladies
hmorragiques : lamlioration et la prcision du diagnostic, la production en quantit
suffisante de fractions coagulantes isoles partir du plasma.
Les hmophilies A ou B reprsentent un exemple de cette volution. Le diagnostic du
facteur manquant est un acte de routine pour les laboratoires dhmostase et lon dispose
de produits de substitution qui contiennent spcifiquement le facteur manquant. Ces
lments ainsi que la pratique de lautomdication dans ces affections font que le mdecin
se trouve confront de nombreux problmes dordre thrapeutique dont les implications
conomiques ne peuvent tre mconnues. Paralllement ces progrs, des mdicaments
utiliss pour dautres proprits se sont rvls tre actif sur certains facteurs de
lhmostase et permettent ainsi de corriger, au moins partiellement, des dficits en facteurs
de coagulation.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

22
2.1.3.2 Fhysioloie de l'hmostase
Cest un ensemble de mcanismes mis en jeu par lorganisme pour prvenir les
saignements spontans ou larrt des hmorragies par rupture vasculaire ; ce processus
comporte schmatiquement trois grandes tapes.

2.1.3.2.1 Etapes de l'hmostase
- lhmostase primaire
- la coagulation
- la fibrinolyse
2.1.3.2.1.1. L'hmostase primaire
assure la formation du clou plaquettaire encore appel caillot blanc. Ce processus fait
intervenir des vaisseaux, des plaquettes et des facteurs plasmatiques qui sont le facteur
Von Wille brand (VWF) et le facteur fibrinogne .
Le temps vasculaire
Ce temps met en jeu lendothlium qui est une surface thrombo-rsistante et le sous
endothlium qui est une surface thrombognique. Aprs rupture du vaisseau, une
vasoconstriction instantane rduit le diamtre de celui-ci et diminue le flux sanguin local.
La mise niveau du sous-endothlium va initier le temps plaquettaire.
Le temps plaquettaire
comprend : - ladhsion
- lactivation
- lagrgation plaquettaire
L'adhsion plaquettaire :
cest laccolement des plaquettes aux lments du sous-endothlium. Elle fait intervenir
trois facteurs savoir :
- la glycoprotine Ib (Gp Ib) prsente dans la membrane plaquettaire,
- le facteur Von Wille brand prsent dans le plasma
- les constituants du collagne et les microfibrilles situs au niveau des vaisseaux.
L'activation plaquettaire :
cest le passage de ltat de repos un tat activ caractris par un changement de forme
de la plaquette, une scrtion et des synthses biochimiques. Le changement de forme
survient rapidement aprs ladhsion de la plaquette qui va mettre des pseudopodes et

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

23
des invaginations. Au cours de lactivation plaquettaire sont synthtises des
prostaglandines dont la thromboxane A
2
(Tx A
2
) qui est un puissant agrgant plaquettaire et
un puissant vasoconstricteur.
Au cours de cette activation apparat galement des activits procoagulantes notamment
lexpression du facteur III plaquettaire (F
3
P).
L'aration plaquettaire :
Cest laccolement des plaquettes les unes aux autres par des mcanismes actifs. Cette
agrgation est induite par de nombreux agents appels agents agrgants. On peut citer
dans ce cas lADP, la Tx A
2
qui sont librs au cours de lactivation plaquettaire.
Laccolement entre les plaquettes fait intervenir une glycoprotine plaquettaire appele
Gp II
b
III
a
, le fibrinogne plasmatique, la thrombospondine (TSP) et le calcium (Ca
2+
).

Le temps plasmatique :
assure la formation dun gel insoluble de fibrine travers le facteur VWF et le facteur
fibrinogne.

2.1.3.2.2. EXFLORATON DE L'HEMO$TA$E
2.1.3.2.2.1. Temps de sainement
Ce temps sera mesur globalement par trois techniques :
Technique de Duke
consiste faire une incision de 1 mm de profondeur au niveau du lobe de loreille et laide
dun chronomtre on mesure le temps . Selon cette technique, le temps de saignement dun
sujet normal est de 2 4 min et en cas de pathologie, il est suprieur 5 min.
Technique d' VY incision :
consiste faire une incision de 1 cm/mm, sous pression constante de 40 mm de Hg, au
niveau de la face intrieure de lavant bras. Selon cette technique, le temps est de 4 8 min
et en cas de pathologie, il est suprieur 10 min.
Technique d'VY 3 points :
consiste mesurer le temps de saignement selon le mme principe que d IVY incision mais
en procdant par la pratique de 3 points. Ce saignement varie de 2 5 min et en cas de
pathologie, il est suprieur 6 min (Bernard et al, 1996).


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

24
2.1.3.3. FHY$OLOGE DE LA COAGULATON
La coagulation du sang est un phnomne par lequel le sang fluide et circulant se
transforme en une masse insoluble et immobile. Ce phnomne est li la transformation
dune protine soluble ltat normal, le fibrinogne, en une masse insoluble : la fibrine.
On appelle caillot, les fibres de fibrine qui ont immobiliss lintrieur de leur rseau des
cellules du sang. La phase de la coagulation comprend 3 tapes :
- tape de la gnration de la prothrombinase
- tape de la thrombinoformation
- tape de la fibrinoformation
2.1.3.3.1. Facteurs de la coaulation :
Sont dsigns par des chiffres romains et affects du signe a lorsque le facteur est activ.
La synthse de ces facteurs a lieu pour la plus part dans le foie. Pour certains, la synthse
dpend de la vitamine K ; on les appelle facteurs dpendant de la vitamine K . Ce sont les
facteurs X, IX, VII, II.
A ct de ces facteurs plasmatiques, dautres interviennent dans la coagulation, ce sont :
la prkallicrine dont lactivation aboutit la formation de la kallicrine kilinogne de haut
poids molculaire (KHPM).
2.1.3.3.2. Etapes de la coaulation
tape de la nration de la prothrombinase :
Elle seffectue selon deux voies :
La premire voie dite intrinsque qui implique des facteurs dits contacts savoir le KHPM,
la prekallicrine, les facteurs XII, XI et dautres facteurs plasmatiques qui sont les facteurs
IX, X, V, II, le facteur III plaquettaire et le calcium.
Une deuxime voie dite extrinsque qui implique lactivit des facteurs VIII, X, V, II, la
thromboplastine tissulaire et le fibrinogne.
Il y a galement une troisime voie dite voie cellulaire qui fait intervenir les monocytes et les
macrophages.
L' tape de le thrombinoformation :
Elle assure la formation de la thrombine partir de la prothrombine grce lactivit
catalytique de la prothrombinase.
La fibrinoformation :
- Elle aboutit la formation de la fibrine insoluble partir du fibrinogne plasmatique.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

25
2.1.3.3.3. Exploration de la coaulation
2.1.3.3.3.1 Temps de coaulation : TC
il sagit dune technique dexploration globale au phnomne de coagulation qui consiste
prlever le sang dans un tube sans anticoagulant et observer le temps que met ce
prlvement pour coaguler.
Ce temps de coagulation varie normalement entre 8 12 min 37C.

2.1.3.3.3.2 Temps de Quick : TQ
Concerne la voie extrinsque tissulaire. On lexprime en taux de prothrombine (TP). Cest le
temps de coagulation dun plasma pauvre en plaquettes en prsence de thromboplastine
calcique 37c. Ce temps varie entre 11 12 s et lorsquon lexprime en TP, il est suprieur
70%.

2.1.3.3.3.3. Temps de cphaline active : TCA
explore la voie intrinsque. Cest le temps de coagulation dun plasma pauvre en plaquettes
en prsence dun activateur dont les plus utiliss sont le kaolin et la cphaline 37C.
Les rsultats sont exprims en seconde par rapport un tmoin. Le TCA est pathologique,
lorsquentre le malade et le tmoin, on observe une diffrence de 8 10 s.

2.1.3.+. FHY$OLOGE DE LA FRNOLY$E
La cicatrisation dune plaie vasculaire passe par la formation initiale dun caillot de bonne
qualit ; la cicatrisation termine, le caillot va tre dissout par un mcanisme enzymatique
trs semblable, quoi que moins complexe, celui de la coagulation.

2.1.3.+.1 Mcanisme de la fibrinolyse
Au contact des cellules endothliales qui fournissent lactivateur, le caillot de fibrine,
enserrant dans ses mailles le plasminogne, est lys ; cest dire que la plasmine forme
va dcouper le caillot insoluble en fragments (produits de dgradation de la fibrine) qui
seront limins dans la circulation.




Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

26

2.1.3.5. MEDCAMENT$ HEMO$TATQUE$ CONVENTONNEL$
Ce sont des mdicaments qui diminuent le phnomne hmorragique.
La comprhension du mode daction des hmostatiques na pas fait de progrs sensibles
dans les dernires annes. Leur mode daction peut se schmatiser en mdicaments
action vasculaire, plaquettaire, plasmatique ou inhibitrice de la fibrinolyse.

2.1.3.5.1 Hmostatiques action plaquettaire
Les cathcholamines :
- Pectine : Arhemapectine


- Adrenal : Levophed


- Drivs de lergot de seigle, Methergin


Vasopressine et apparents :
- Ornithine-8 vasopressine : Por 8 sandoz


- Arginine vasopressine : Pitression



2.1.3.5.2. Hmostatiques action plaquettaire
- Thromboplastine Erce

: en application locale, en cas dhmorragie en nappe,
dpistaxis, de saignement gyncologique et en per os lors dune prparation
opratoire.
- Thrombase Transglutine

: appliquer localement sous forme de poudre sur une


plaie, elle facilite la transformation du fibrinogne en polymre de fibrine.
En application locale sur la plaie sous forme de poudre.
- Etamsylate Dicynone

: augmente ladhsion et la rsistance plaquettaires
- Carbazochrome : Adrenoxyl



2.1.3.5.3. Hmostatiques action plasmatique
Agissent sur certaines tapes de la coagulation :
- Vitamine K : indispensable la synthse de certains facteurs de coagulation
Notons que l'effet de la vitamine K, administre un malade, apparat aprs 48 heures.
- Sels de Ca
2+
: assure la transformation du prothrombine en thrombine.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

27
2.1.3.5.+. $tructures de la vitamine K et de ses drivs

CH
3
H
3
C
O
O
CH
3
CH
3
n


Vitamine K

CH
3
O
O
CH
3
CH
3
O
O
CH
3
CH
3
n


Vitamine K
1
Vitamine K
2


2.1.3.6. Mthodes de tests hmostatiques
2.1.3.6.1. Test sur la coaulation sanuine
Frincipe :
Mesurer le temps d'apparition du caillot de fibrine dans un pool de plasma humain au
moyen d'un appareil spcifique.
a) Temps de thrombine
Frincipe :
Mesurer le temps d'apparition du caillot de fibrine d'un plasma en prsence de thrombine.
b) Temps de cphaline
Frincipe :
Mesurer le temps d'apparition du caillot de fibrine d'un plasma en prsence de cphaline
(Potterat,1991).

2.1.3.6.2. Mesure du temps de coaulation par la mthode de Lee et White
Frincipe : Mesurer le temps de coagulation du sang en prsence de substances
hmostatiques.
Nous avons utilis cette technique dans notre mthodologie pour dterminer l'activit
hmostatique.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

28

2.1.3.7. Quelques plantes activit hmostatique
Un groupe de chercheurs japonais a ainsi publi plusieurs tudes sur les principes actifs
anti-hmorragiques despces utilises dans la mdecine traditionnelle chinoise.
Sur la base de tests sur les souris in vivo, ces auteurs ont isol une dizaine de composs,
dont plusieurs flavonodes, possdant dans leur modle des proprits hmostatiques.
Leur mode daction na toute fois pas t dtermin.

TALEAU : SUBSTANCES HEMOSTATIQUES ISOLEES DES PLANTES UTILISEES EN MEDECINE
TRADITIONNELLE CHINOISE
Compos Source Rfrence
Deucichine Panax ginseng Kosuge et al (1981)
Acide 3,3,4-tri-O-methyl
ellagique
Sangnisorba officinalis -- (1984)
Wdlolactone Hypericum erectum Kosuge et al (1985)
Quercitrine Biota orientalis Kosuge et al (1985)
Querctine Sophora japonica Ishida et al (1987)
Querctine Nelumbo nucifera Ishida et al (1988)
Pectolinarine Cirsium japonicum Ishida et al (1987)
Isorahmntine 3-O-rutinoside
7-O-glucoside
Thympha lactifolia Ishida et al (1988)

Il faut galement relever les investigations de Kone-Bamba en 1987 consacres aux
plantes mdicinales prconises comme hmostatiques dans la mdecine traditionnelle
ivoirienne. Dans le cadre dun screening, ils ont dcel une activit procoagulante de cinq
espces : Jotropha curcas (Euphorbiaceae), Vernonia colorata (Compositeae),
Hyptis pectinata (Labiatae), Piliostigma thonningii ( Cesalpinaceae) et Spondias mombin
(Anacardiaceae). Le jus frais des racines de ces plantes modifie le temps de thrombine et
agit donc au niveau de la polymrisation de la fibrine. Les principes actifs ne sont pas
encore connus.



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

29
2.1.+. LE$ NFLAMMATON$


2.1.+.1. Dfinition de l'inflammation
Linflammation est un ensemble de phnomnes ractionnels se produisant au point irrit
par un agent pathogne. Elle se traduit ordinairement par quatre symptmes cardinaux :
chaleur, douleur, rougeur et tumfaction (quadrilatre de Celse)
Ce terme dsigne aussi un processus gnral ractionnel de tout ou une partie de
lorganisme une agression, quelle soit chimique, physique, bactrienne, virale,
antignique ou parasitologique.
Elle peut tre aigu, subaigu ou chronique. Ce processus de dfense de lorganisme peut
parfois voluer de faon anormale et dclenche des maladies auxquelles on oppose des
mdicaments dits anti-inflammatoires pouvant tre conventionnels ou traditionnels.
Linflammation ainsi dfinie se droule classiquement en trois phases :
Une premire phase qui consiste une augmentation de la permabilit capillaire
entranant dme et gonflement. Cest au cours de cette phase que les substances
responsables de la douleur sont libres.
Une deuxime phase caractrise par une prdominance des polynuclaires dans
linfiltration cellulaire puis il y a diminution de leur nombre pour faire place des cellules
mononucles.
Une troisime phase dite de rparation dans laquelle le fibroblaste est la cellule
dominante.
Les facteurs dclenchant une inflammation sont multiples et varies : chaleur, lumire,
traumatisme, microbe, toxique, etc.
Beaucoup dlments cellulaires interviennent dans les inflammations. Ce sont :
- les polynuclaires neutrophiles :
- les polynuclaires osinophiles
- les lymphocytes
- les plasmocytes
2.1.+.2. Effets locaux et nraux de l'inflammation
Un foyer inflammatoire, mme localis est susceptible davoir une rpercussion sur
lensemble de lorganisme.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

30
Lorsquil y a inflammation, surtout sil sagit dune raction lie un processus infectieux, le
taux de leucocytes sanguins augmente. Ce phnomne est d au dversement dans le
sang des leucocytes jeunes de la moelle et une acclration de la maturation des
mylocytes mdullaires. Il en rsulte une augmentation du taux des polynuclaires jeunes
aux noyaux peu segments dans le sang.
Les mcanismes rglant les modifications des leucocytes sanguins ne sont que
partiellement connus. En effet, la majorit des infections saccompagnent de leucocytes ; il y
a des cas nanmoins o le taux de leucocytes sanguins diminue (leucopnie) ; cest ce qui
se voit notamment dans la fivre typhode.
Outre les modifications de sa teneur en globules blancs, le sang prsente souvent au cours
de linflammation une altration de sa composition chimique et plus particulirement sa
teneur en fibrinogne. Ces changements peuvent avoir une rpercussion sur la coagulation
sanguine et favoriser le dveloppement dune thrombose.

2.1.+.3. ANT-NFLAMMATORE$ CONVENTONNEL$
2.1.+.3.1. Gnralits
Ds lpoque dHippocrate, il y a environ 2400 ans, les proprits analgsiques et anti-
inflammatoires de divers extraits vgtaux contenant des salicyls taient connues et mises
profit chez lhomme (Rainsford, 1984). En particulier taient utilises des prparations
partir de lcorce de saule Salix alba (Salicaceae). Lisolement de lacide salicylique et
lapprofondissement des connaissances pharmacologiques sur les salicyls ( proprits
antipyrtique, uricosuriques, toxicits digestives, auditives) datent du 19
e
sicle.
Le dveloppement commercial des salicyls devint important avec la synthse chimique,
par Flix Hoffman, de lacide actyle salicylique mis sur le march par les laboratoires
Bayer en 1899 sous le nom de spcialit Aspirine

.
Il a fallu attendre les annes 1950 pour voir apparatre sur le march la phnylbutazone,
suivit de lindomtacine quelques annes plus tard.
En effet, en 1949, les proprits anti-inflammatoires de la cortisone taient tablies;
stimulant ainsi la recherche dautres anti-inflammatoires dpourvus deffets nfastes des
hormones strodiennes do lappellation danti-inflammatoires non strodiens (AINS).



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

31
2.1.+.3.2. Anti-inflammatoires non strodiens (AN$ )
Les AINS sont mieux dfinis comme tant la classe mdicamenteuse qui possde les
mmes proprits pharmacologiques que lacide actyle salicylique (Aspirine

) :
analgsique, antipyrtique, anti-inflammatoire.
Les AINS ont une action symptomatique rapide. Ils permettent de rduire les signes locaux
dune raction inflammatoire : douleur, rougeur, chaleur, dme et impotence fonctionnelle
qui peuvent en rsulter.
Les AINS ont dautres effets en commun : toxicit gastro-intestinale, effets rnaux, action
anti-agrgante plaquettaire, retard laccouchement, asthme induit et dautres ractions du
type allergique. Certains peuvent, selon la circonstance, correspondre soit des effets
recherchs soit des effets indsirables.
2.1.+.3.3. Anti-inflammatoires strodiens (A$)
L'effet spectaculaire de la cortisone dans la polyarthrite rhumatode a t rapport par la
publication princeps de Hench en 1949. Cette cortisone avait t isole du cortex surrnal
par Kendal (Etats unis) et par Reichstain (Suisse) ds 1934 mais synthtise seulement en
1949. Depuis lors, grand nombre de ces drivs ont t obtenus plus spcifiquement et
puissamment anti-inflammatoire (Dembel, 1993).

2.1.+.3.+. Quelques structures des anti-inflammatoires
Driv salicyl


COOH
O C
CH
3
O


Acide actyle salicylique (Aspirine

)

Acide fnamique
N
S
CH
3
C N
H
N
OH
O
O
O

NH
Cl Cl
CH
2
-COOH

Piroxicam ( Feldene

) Diclofnac (Voltarene

)

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

32
N NH
COOH
CF
3

N
CO
CH
2
COOH H
3
CO
CH
3
Cl


Acide niflumique (Nifluril

) Indomtacine (Indocid

)



C C
H
2
C
H
2
COOH
O

Ibuprofene ( Brufen

)

2.1.+.3.5. Anti-nflammatoires $trodiens (A$) : Glucocorticodes
Lutilisation des glucocorticodes dans les affections inflammatoires rhumatismales a dj
une longue histoire depuis que Hench a administr la cortisone 21 patients atteints de
polyarthrite rhumatode en 1948.
On sait maintenant mieux apprcier les risques de cette thrapeutique et lon possde des
composs plus actifs et moins dangereux.

2.1.+.3.6. Quelques structures des A$


OH
CH
3
C O
CH
2
OH
HO
F
O

OH
C O
CH
2
OH
O
HO

Dexamthasone Prednisone


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

33
OH
C O
CH
2
OH
O
HO

Hydrocortisone (Hydroxy 17 corticostrone)

2.1.+.3.7. Mcanismes d'action des Anti-inflammatoires conventionnels
2.1.+.3.7.1. Les anti-inflammatoires non strodiens (AN$)
Les mcanismes daction des AINS ont t lobjet de trs nombreuses tudes in vivo et in
vitro chez lanimal mais aussi exceptionnellement chez lhomme ; les plus couramment
retenus se caractrisent par :
Leurs effets sur le mtabolisme des glucides qui peuvent se manifester par une
augmentation du taux du glucose sanguin, une diminution du glycogne hpatique ou une
inhibition de la fermentation lactique.
Les AINS diminuent lintensit de la synthse des lipides ainsi que leur accumulation
dans les tissus enflamms.
Les AINS diminuent les activits enzymatiques :
en rduisant lincorporation de la thymidine dans lADN et luridine dans lARN de
nombreuses cellules (lymphodes et pithliales )
en modifiant le rapport tryptophane libre / tryptophane li aux protines, ils provoquent
un dcouplement de la phosphorylation oxydative.
Tous les AINS inhibent sans spcificit la synthse des prostaglandines ce qui explique
certaines proprits thrapeutiques. Cependant il est probable que leffet de ces
mdicaments sur la synthse des prostaglandines soit lun de leurs mcanismes daction
trs importants sur les nombreux phnomnes biologiques, son inhibition non discriminative
par les AINS peut compter autant deffets bnfiques quindsirables.

2.1.+.3.7.2. Anti-inflammatoires strodiens (A$) :Glucocorticodes
Les glucocorticodes sont utiliss soit titre substitutif pour suppler une dficience
surrnalienne, soit dose pharmacologique o leurs proprits anti-inflammatoires

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

34
immunosuppressives sont recherches. Les glucocorticodes sont des strodes et comme
toutes les molcules de cette famille, ils agissent en se liant des rcepteurs ou en partie
l'albumine. La prsence d'un hydroxyle en fonction 11 est essentielle pour l'activit
glucocorticode. Les glucocorticodes sont peu solubles dans l'eau. Ils inhibent fortement la
raction inflammatoire prcoce et ses manifestations cliniques bien connues d'o leur grand
succs en thrapeutique (Neuwinger, 1996).

2.1.+.+. Mthodes de tests anti-inflammatoires
Odme la carrahnine sur rats surrenalectomiss
Frincipe :
Contrler si laction anti-inflammatoire des substances non strodiques est bien due une
activit propre et non une scrtion de corticodes partir des surrnales.
Odme par traumatisme exprimental selon Riester et ]acques
Frincipe :
Rduire un dme de patte, par traumatisme exprimental, par les anti-inflammatoires
comme prcdemment indiqu.

Tourniquets poditifs
Frincipe :
Rduire ldme provoqu chez le rat, par ligature de larticulation tibio-tarsienne, par les
anti-inflammatoires.

Abcs la Carrahnine
Frincipe :
Rduire un abcs provoqu chez le rat, par injection sous-cutane de la carraghnine, par
des substances anti-inflammatoires.
Arthrite de FREUD
Frincipe :
Rduire larthrite chronique provoque au niveau de la patte du rat, par linjection de
Mycobacterium butyricum par certaines substances anti-inflammatoires.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

35
Technique de l'effusion pleurale
Frincipe :
Rduire lpanchement pleural, provoqu par linjection intra-pleurale dun agent irritant,
laide de substances anti-inflammatoires.

L'inflammation locale de l'oreille
Frincipe :
Linflammation de loreille de rat, provoque par lapplication locale dhuile de croton peut
tre rduite par lapplication locale de substances anti-inflammatoires (Rainsford, 1984).

Odme la carrahnine
Frincipe :
Rduire, par des substance anti-inflammatoires, l'dme provoqu chez les souris par
l'injection intra-plantaire de la carraghnine.
C'est cette technique que nous avons utilise dans notre mthodologie pour dterminer
l'activit anti-inflammatoire

2.1.+.5. Quelques plantes activit anti-inflammatoire

TALEAU : QUELQUES PLANTES A ACTIVITE ANTI-INFLAMMATOIRE CONNUES

Nom scientifique Famille Parties utilises
Annona senegalensis Pers. Annonaceae Racines et feuilles
Biophytum petersianum Klotz. Oxalidaceae Plante entire
Cola nitida (Vent), Shlott. Sterculiaceae Coques
Combretum nigricans Lepr. Combretaceae Feuilles
Datura inoxia Mill. Solanaceae Feuilles
Securidaca longipedonculata Fres. Polygalaceae Racines
Tamarindus indica L. Caesalpiniaceae Rameaux feuills




Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

36
2.1.5. LE$ ANTFONGQUE$

2.1.5.1. Gnralits
La pathologie fongique a connu une progression au cours de ces dernires annes compte
tenu de l'augmentation des localisations mycosiques profondes, viscrales et
septicmiques. Les premires sont dues des champignons trs rpandus dans la nature,
habituellement saprophytes, ne devenant pathognes que dans certaines conditions :
- usage croissant des antibiotiques large spectre
- corticothrapie
- thrapeutiques immunosuppressives
- greffes
- patients atteints du sida ; on parle de mycoses iatrognes. Elles sont causes par
des champignons dits opportunistes qui sont soit lvuriformes (Candida,
Cryptococcus), soit filamenteux (Aspergillus, Cephalosporum).
Les secondes sont dues des champignons pathognes se dveloppant dans des pays
chauds et qui sont imports la faveur de l'extension du tourisme et des brassages de
populations. Ces mycoses exotiques sont l'histoplasmose, les blastomycoses et les
myctomes. Si le traitement des mycoses superficielles cutanes ou muqueuses ne
prsente plus de relles difficults, il en est tout autrement pour les mycoses profondes;
celles-ci prsentent toujours un caractre de gravit et sont rapidement volutives, car elles
surviennent sur un terrain affaibli ou immunodprim.
La composition de la paroi cellulaire, trs paisse du matriel qui lentoure et de la
membrane cytoplasmique, joue un rle considrable dans la permabilit de la cellule.
Le dveloppement des antifongiques se heurte trois obstacles :
- une faible activit fongicide in vivo en regard des rsultats in vitro
- une mauvaise diffusion travers la paroi trs paisse des champignons du fait de sa
composition (chitine, phospholipides, et strols); ces constituants sont absents chez
les bactries, ce qui explique que la plupart des antibiotiques antibactriens ne
soient pas des antifongiques. Les substances antifongiques doivent de ce fait
prsenter une hydrophobie leve.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

37
2.1.5.2. Classification des mycoses
Mycoses exclusivement superficielles
Ce sont les mycoses tropisme exclusivement cutan.
On distingue les dermatophytoses (dermatophyties) :
- de la peau glabre : herps circin
- des plis (intertrigos) eczma margin de Hbra (face intrieure des cuisses), "pied
d'athlte"
- des zones pileuses : sycosis (barbe)
- des ongles : onychomycoses ou onyxis (ongles des mains et des pieds)
Pityriasis versicolor :
Cette mycose due Malassezia se traduit par l'apparition de tches pigmentes et
squameuses.
Mycoses cutanomuqueuses
Elles sont essentiellement causes par les espces du genre Candida. On distingue des :
- Candidoses oropharynges et digestives
les atteintes buccales sont les plus importantes; elles se traduisent par un muguet, souvent
associ une glossite.
- Candidoses gnitales
Il s'agit de balanite chez l'homme et de vulvovaginite chez la femme. Les facteurs
favorisants sont nombreux : diabte, grossesse, contraception orale; la transmission peut se
faire galement par la voie vnrienne.
- Candidoses cutanes
Chaleur et macration sont les conditions favorables l'extension cutane de ces mycoses
(intertrigo des grands plis cutans, ou des espaces interdigitaux, prionyxis et onyxis
candidosiques)

Mycoses profondes
Quatre grands groupes de mycoses profondes peuvent tre individualises :
- Candidoses dissmines :
l'agent responsable est Candida albicans. Les localisations sont nombreuses : oculaires,
ostoarticulaires, cardiaques, urinaires, pulmonaires, crbrales ou septicmiques.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

38
- Aspergilloses :
La plus rpandue des mycoses pulmonaires. Le champignon responsable est Aspergillus
fumigatus qui possdent des spores ariennes pouvant tre inhales.
- Cryptococcoses:
L'agent responsable est Crytococcus neoformans. La dissmination se fait partir du foyer
pulmonaire, par voie hmatogne et aboutit un envahissement mning. La
cryptococcose neuromninge reprsente environ 10% des infections observes chez les
malades atteints du sida (Talbert et al., 2001).

2.1.5.3. ANTFONGQUE$ CONVENTONNEL$
2.1.5.3.1 $tructures et mode d'action des antifoniques
2.1.5.3.1.1. Nystatine et Amphotricine
Ils possdent le mme sucre amine : la mycosamine qui est lie un grand cycle lactone
contenant des groupements polyniques.
O OH OH OH OH O
O
O
O
OH
OH
OH
COOH
OH
NH
2
OH
CH
3
H
3
C
HO
H
3
C
H
3
C

Amphotericine B (Fungizone

)

OH OH OH O
O
O
O
OH
COOH
OH
NH
2
OH
CH
3
H
3
C
HO
H
3
C
H
3
C
O
HO
OH
OH

Nystatine (Mycostatine

)


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

39
Mode d'action :
Les polynes ont la fois une activit fongistatique et fongicide. Lactivit antifongique est
dpendante de la concentration des lments fongiques, du temps de contact avec
lantifongique, du pH du milieu et de la temprature ambiante.
A pH acide, la nystatine et lamphotricine sont rapidement absorbes en grande quantit
par les levures qu pH neutre ou alcalin. Le mode daction relve de divers mcanismes
dont la formation de complexes insolubles avec les strols de la membrane cellulaire
aboutissant des troubles de la permabilit cellulaire et entranant la mort des cellules.

2.1.5.3.1.2. La risofulvine
Mode d'action :
Elle inhibe des doses fongicides la synthse des acides nucliques. Elle affecte la mitose
cellulaire (arrt de la mtaphase). Son action fongistatique est responsable de laltration
de la paroi fongique saccompagnant danomalies de dveloppement des hyphes terminaux
qui slargissent , spaississent et senroulent.
H
3
CO
O
C
Cl
OCH
3
O CH
3
OCH
3
O


Grisofulvine (Grisofuline

)

2.1.5.3.1.3. La flucytosine
Mode d'action :
Cest un anti-mtabolique de la cystine, certains champignons ont une cytosine permase
ncessaire la traverse de leur membrane cellulaire et dautres bases pyrimidiques et
puriques. Une cytosine dsaminase transforme la flucytosine en fluoro 5-uridine, puis
phosphoryle en flucytosine triphosphate. Cette dernire, incorpore lARN, bloque la
synthse des protines indispensables la vie cellulaire fongique. Les cellules humaines ne
possdent pas la dsaminase.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

40
N
O
H
NH
2
F

Flucytosine (Ancotil

)


2.1.5.3.1.+. Drivs imidazols
Mode d'action :
Il est bas sur laltration de la structure de la paroi fongique et de la permabilit de la
membrane cytoplasmique avec blocage de strodes et sur linhibition de la synthse des
protines.


N
N
Cl

C
H
2
O O
H
2
C O N N COCH
3
N
N
Cl
Cl


Clotrimazole Ktoconazole


H
C O C
H
2
CH
2
Cl
Cl
N
N
Cl
Cl
N
N
H
2
C
H
C O C
H
2
Cl
Cl
Cl

Miconazole (Daktarin

) Econazole (Pevaryl

)








Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

41
2.1.5.+. Mthodes de tests antifoniques
2.1.5.+.1 Mthode par dilution en milieu liquide
Frincipe : Incuber un milieu de culture avec une dilution de doses croissantes des solutions
tester. L'activit antifongique se traduit par l'inhibition et l'absence de culture visible dans
les tubes (Sanou, 1997).

2.1.5.+.2. Mthode de diffusion
Frincipe : dtermination de l'activit antifongique d'un extrait sur un milieu de culture
travers des cylindres ou des disques contenant les solutions titrer. Il se forment des zones
circulaires sur le fond opaque du milieu de culture (Chevalley, 2000).

2.1.5.+.3. Mthode iautoraphique
Frincipe : dtection de l'activit antifongique d'une substance par inhibition d'un milieu de
culture de Candida albicans vers sur une plaque CCM (Diallo, 2000).
Nous avons utilis cette technique dans notre mthodologie pour dterminer l'activit
antifongique.

2.1.5.5. Quelques plantes activit antifonique

TALEAU V : PLANTES A ACTIVITE FONGICIDE CONNUE

Nom scientifique Famille Parties utilises Rfrences
Diospyros abyssinica Hiern. Ebenaceae Racines Diallo, 2000
Glinus oppositifolius L. ADC. Azoaceae Parties ariennes --
Parkia biglobosa K. Mimosaceae corce du tronc Kerharo, 1979
Stylosanthes micronata F. Fabaceae Plante entire --
Swartzia madagascariensis D. Leguminosae Racine Schaller, 1999
Ximenia americana Min. Oleraceae Racine --



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

42
2.1.6. FAGARA ZANTHOXYLODE$

Fagara zanthoxylodes, connu sous le nom vernaculaire de W au Mali, appartient la
famille des Rutaces.
Les Rutaces sont des plantes souvent ligneuses possdant des poches scrtrices. Cette
famille compte plus de 700 espces en grande partie, arborescentes et appartenant aux
pays tropicaux.
Suivant les variations de lovaire et du fruit, les Rutaces se divisent en 3 sous-familles :
- Les Rutodes
- Les Toddaliodes
- Les Aurantinodes
Le genre Zanthoxylodes appartient la sous famille des Rutodes .

2.1.6.1. Fosition dans la systmatique :

Rgne Vgtal
Embranchement Spermatophytes
Sous-embranchement Angiospermes
Classe Dicotyldones
Sous-classe Dialyptales
Ordre Rutales
Famille Rutaces
Genre Fagara ou Xanthozylum
Espce zanthoxylodes

2.1.6.2. $ynonymes :

- Fagara zanthoxylodes Lam.
- Fagara senegalensis (DC) A. Chev.
- Zanthoxylum senegalense (DC). A. Chev.
- Zanthoxylum polyganum Schum.
- Zanthoxylum zanthoxylodes Waterm.



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

43
2.1.6.3. Description botanique :

Fagara zanthoxylodes Lam. est un petit arbre de 5 6 m de hauteur. Les rameaux sont
trs arms avec des aiguillons trs recourbs et aigus, en forme de griffes, petits ou
atteignant jusqu 1 mtre de longueur. Le rachis et parfois la nervure mdiane portent de
grosses pines recourbes.
Les feuilles sont alternes, composes et imparipennes avec une ptiole de 2 5 cm de
rachis plus ou moins cylindriques ou aplatis, canaliculs, garnis daiguillons. Elles
comprennent 5 9 paires de folioles glabres opposes, sub-oppose ou alternes atteignant
6 cm ; une limbe aigu la base, de consistance coriace avec marge reborde au dessus;
nervure mdiane dprime au dessus, fortement saillante au dessous, garnie trs souvent
daiguillons sur les 2 faces.
Les fleurs mles possdent 5 tamines et un pistil rudimentaire, fusiforme. Les fleurs
femelles, avec un disque cylindrique peu lev, supportent un carpelle globuleux (plus ou
moins 0,8 mm) avec un style latral courb et un stigmate capit.
Les fruits, de la grosseur dun pois, sont des capsules souvrant par deux valves et
contenant une seule graine dun beau noir brillant.
Les tiges se prsentent sous forme de fragments cylindriques de 3 5 cm de diamtre.
Le bois est jaune clair ( do le nom de Xanthoxylum) et trs dur.
Lcorce, relativement mince de 2 3 mm, dun brun lgrement violac, est assez lisse et
de saveur amre ; sa mastication entrane un picotement de la langue et un accroissement
de la salivation.
Les racines mesurent 2 4 cm de diamtre ; le bois jaune, une texture compacte et
lcorce peu paisse (1 2 mm) se dtache facilement ; la surface externe, brun clair,
strie longitudinalement, sillonne transversalement, prsente des tches jaunes vives.
La saveur, plus intense que celle de la tige, est aromatique, amre et poivre.

2.1.6.+. Habitat et distribution oraphique

Espce des savanes pr-forestires et des fourrs littoraux, rpandue en Afrique tropicale
dans laire des massifs forestiers guino-congolais, Fagara zanthoxylodes Lam. est connu
au Ghana, au Mali, en Cote divoire, au Nigeria, au Sngal, au Togo et au Bnin.
Il pousse spontanment en Afrique et de prfrence dans les sols frais et humides.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

44




2.1.6.5. Noms locaux :

TALEAU V : NOMS VERNACULAIRES DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES SELON LES PAYS
(ADJANOUHOU ET COLL, 1986)




Pays Ethnies / Dialectes Appellations
Bnin Fon
Goun
Yoruba
H
H
Igui ata
Centrafrique Babinga pygmes, Sango
Gbaya
Mbimo
Bolongo
Nzototo
Akumbo
Congo Lingala
Mbaamba, Ndassa
Vili, Ndulu
Balongo
Mbulula
Ndungu
Mali Bambara
Malink
Peulh
Wo ; gozo-nguia
Wo
Bulbarkl ; barkley
Niger Haoussa Fasakwari
Nigeria Yoruba
Ibo ( igbo)
Igui ata ; ata
ukoh
Sngal Wolof
Soc
Niom
Srr
Dengidek, nden
Samatimo
Inok
noc
Togo Akasslem
Akposso
Moba
Tem
Bidjakogoro
Owlawu
Djomdiaq
Abalatchang a

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

45

1.6. U$AGE$ EN MEDECNE TRADTONNELLE

A. Appareil cardiovasculaire
Anine pharynite
Drogue : racine frache ou sche
Prparation : dcoction aqueuse dune botte de racines (100 200 grammes de racines
pour environ 2 litres deau).
Mode demploi et posologie : le dcoct aqueux bouillant est utilis en bains de vapeurs ;
tidi, il semploie en bains de bouche rpts.
Source : Mali (Adjanohoun et Coll. 1985)
Hmorrodes
Drogue : racine frache ou sche
Prparation : dcoction aqueuse dune botte de racines
Mode demploi et posologie : faire des bains de sige avec le dcoct chaud.
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986)
. Appareil diestif
Diarrhe
Drogue : feuille et racine fraches
Mode demploi et posologie : les thrapeutes traditionnels sngalais proposent la
dcoction des feuilles et des racines pour le traitement des diarrhes.
Source : Sngal (Kerharo et Adams, 1974).
Douleur abdominale
Drogue : corces de racines sches
Prparation : rduire en poudre lcorce sche de racines de Fagara zanthoxylodes Lam
et les gousses de Aframomum melegueta K. Schum., sparment.
Mode demploi et posologie : mlanger les quantits gales des deux poudres puis
dlayer une cuillre caf du mlange dans de leau chaude. Utilisation une fois par jour.
Source : Togo (Adjanohoun et Coll. 1986)
Gastro-entrites
Drogue : corces de racines
Mode demploi et posologie : les feuilles et les racines sont rputes efficaces dans le
traitement des gastro-entrites.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

46
Source : Sngal (Kerharo et Adams, 1974)
ctres
Drogue : racine sche
Prparation : piler les racines sches de la plante avec des corces de tiges de
Ostryoderris stuhlmanii ( Taub). Dunn ex Harm. des bulbes doignons ( Allium cepa L.) et du
poivre ( Piper guineense Schum. Et Thonn.)
Mode demploi et posologie : ajouter chaque jour une cuillre caf de la poudre
obtenue la sauce des repas de midi et du soir.
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986 )
Farasitoses intestinales
Drogue : corce de racine
Mode demploi et posologie : La dcoction de la poudre des corces des tiges et des
racines est rpute vermifuge.
Source : Sngal (Kerharo et Adams, 1974).
C. Appareil nital fminin
Gyncoloie
Leucorrhe
Drogue : feuille frache
Prparation : triturer des feuilles fraches dans de leau. Laisser macrer environ une heure
puis filtrer.
Mode et posologie demploi : boire le filtrat seul ou mlang de lakassa ( pte
alimentaire).
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986)
Amnorrhes
Drogue : racine sche
Prparation : piler les racines de la plante avec les corces sches des tiges de
Ostryoderris stuhlmanii ( Taub). Dunn ex Harm., des bulbes doignons ( Allium cepa L.) et
du poivre ( Piper guineense Schum. Et Thonn.) .
Mode demploi et posologie : ajouter une cuillre caf de la poudre obtenue la sauce
des repas du malade. Dure du traitement : 1 mois.
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986).



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

47

Obsttrique (suite de couches pathologiques)
Drogue : racine sche
Prparation : les racines de la plante associes celles de Flacourtia flavescens Willd.
sont rduites en poudre.
Mode demploi et posologie : prendre une fois par jour une pince de poudre dlaye
dans un demi-verre deau.
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986).

D. Appareil nital et urinaire de l'homme
lennorraie
Drogue : corce de tige
Prparation : macration aqueuse des corces de tige ou de la tige entire.
Mode demploi et posologie : donner boire au malade le macr aqueux additionn du
jus de citron.
Source : Cte dIvoire (Adjanohoun et Coll. 1979).
Urtrite
Drogue : feuille et racine
Mode demploi et posologie : La dcoction des feuilles et des racines sont signales
efficaces pour le traitement des urtrites.
Source : Sngal (Kerharo et Adams, 1974)
E. Appareil locomoteur
Courbature
Drogue : racine frache ou sche
Prparation : mettre dans un canari une botte de racines de chacune des plantes
suivantes : Fagara zanthoxylodes Lam., Citrus aurantifolia (Christm.) Swengle, Nauclea
latifolia Sm., Rhaphiostylis beninensis (Hook.f. ex Planch) Planch.ex Benth., Voacanga
africana Stapf. Ajouter une botte dcorces de tige de Antiaris africana Engl. et de Bridelia
ferruginea Benth. et 3 litres deau pour une dcoction dune heure environ .
Mode demploi et posologie : le dcoct aqueux filtr au travers dun linge est utilis par
voie orale raison de 75 150 ml, deux fois par jour pendant cinq jours.
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986 ).


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

48

F. Nez - ouche - Gore - Oreille
Carie dentaire
Drogue : racine frache ou sche
Prparation : pulvriser les racines sches ou raliser une dcoction aqueuse avec les
racines fraches ou sches.
Mode demploi et posologie : appliquer une fois par jour la poudre d'corces de racines
sur la dent carie ou boire le dcoct de la poudre au moment des douleurs.
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986).

Ginivites - Odontalie
Drogue : corces de racines
Mode demploi et posologie : mcher les corces de racines et faire des gargarismes
avec lextrait.
Source : Cte d Ivoire (Adjanohoun et Coll. 1979) ; Sngal (Kerharo et Adams, 1974)
Drogue : racine de tige
Mode demploi et posologie : lusage, comme cure dent, de la tige ou de la racine a t
maintes fois signal.
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986) ; Mali (Adjanohoun et Coll. 1985).

G. Feau
Abcs
Drogue : racine
Prparation : raliser un dcoct aqueux avec les racines de la plante associes avec
celles de Baissea zygodilioides et de Uvaria chamae Pal. Beauv.
Mode demploi et posologie : boire une cuillre du dcoct, 3 fois par jour.
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986)

Gale
Drogue : corce de racine
Prparation : rduire lcorce de la racine en poudre. Ajouter lhuile de palme.
Mode demploi et posologie : appliquer le mlange sur tout le corps.
Source : Congo (Adjanohoun et Coll. 1985)

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

49

Flaies chroniques
Drogue : feuilles, corces de racines.
Prparation : mlanger les feuilles et les corces de racines de la plante (500 g environ ).
Faire bouillir le mlange dans 3 litres deau jusqu ce que le volume soit ramen 1 litre.
Laisser refroidir.
Mode demploi et posologie : laver, chaque jour, la plaie avec le dcoct.
Source : Togo (Adjanohoun et Coll. 1986).
H. $ymptmes particuliers
Cphalalies
Drogue : feuille ; corce de tige et de racine
Prparation : fractionner et froisser les feuilles, corces de tige et de racines fraches.
Mode demploi et posologie : applications locales sur le front et la tte.
Source : Sngal (Kerharo et Adams, 1974)
Oedmes
Drogue : racine
Prparation : dcoction de 15 20 grammes de racines dans un quart de litre deau.
Mode demploi et posologie : boire une cuillre caf de dcoct 2 fois par jour ( le
matin jeun et le soir).
Source : Togo (Adjanohoun et Coll. 1986).
I. Maladies et indications particulires
Drpanocytose
Drogue : corce de racine
Prparation : pulvriser les corces sches de racines de la plante seules ou associes
soit aux feuilles et racines sches de Flacourtia flavescens Willd. ou de Uvaria chamae Pal.
Beauv., soit aux tiges feuilles sches de Hibiscus surratensis L.
Mode demploi et posologie : ajouter une petite cuillre de la poudre d'corces obtenue
aux repas du malade matin, midi, soir.
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986) , Togo (Adjanohoun et Coll. 1986)
Drogue : racine
Prparation : dcoction aqueuse des racines de la plante associes celles de
Newbouldia laevis (P. Beauv ) Seemann.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

50
Mode demploi et posologie : boire une cuillre caf du dcoct 3 fois par jour.
Drogue : racine
Prparation : scher 200 g environ de racines ( 3 jours lair libre ). Macration aqueuse
pendant 24 heures dans 5 litres deau.
Mode demploi et posologie : boire 2 cuillres caf du macr une fois par jour
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986).
Drogue : tige feuille frache
Prparation : aqueuse de la tige feuille : 100 g environ pour 1 litre deau .
Mode demploi et posologie : boire une cuillre caf du macr, une fois par jour .
Source : Bnin (Adjanohoun et Coll. 1986).

Envenimation (morsure de serpent)
Drogue : racine
Mode demploi et posologie : les prparation de racines sont prescrites en usage externe
dans les envenimations par morsure de serpent
Source : Sngal (Kerharo et Adams, 1974)

Foison de pche
Drogue : racine
Lactivit ichtyotoxique des racines a t signale.
Source : Congo (Adjanohoun et Coll. 1985).


















Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

51



2.1.6.7. COMFO$TON CHMQUE DE FAGARA ZANTHOXYLODE$

2.1.6.7.1. Constituants chimiques des feuilles

TALEAU V : CONSTITUANTS CHIMIQUES ISOLEES DES FEUILLES DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES

Groupe des substances Substances isoles Rfrences
Huile essentielle Dipenthne
Linalol
Methylnonyctone
Stamm (1984)


Coumarine Bergaptne Stamm (1984)



2.1.6.7.2. Constituants chimiques des ties

TALEAU V : CONSTITUANTS CHIMIQUES ISOLEES DES TIGES DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES

Groupe des substances Substances isoles Rfrences
Gomme
Arabinose
Galactose
Acide 4-mthylglucuronique
Acide aldobiuronique
Stamm (1984)


Torto (1966)


2.1.6.7.3 Constituants chimiques des fruits

TALEAU V : CONSTITUANTS CHIMIQUES ISOLEES DES FRUITS DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES

Groupe des substances Substances isoles Rfrences
Huile essentielle Methylnonylctone
Linalol
Ester caprique
Ester actique
Sesquiterpnes
Stamm (1984)




Coumarine Xanthotoxine Kerharo (1979)

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

52


2.1.6.7.+ Constituants chimiques des racines

TALEAU X : CONSTITUANTS CHIMIQUES ISOLEES DES RACINES DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES

Groupe de substances Substances isoles Rfrences
Alcalode 3-dimethylallyl 4-methoxy-2-quinone
skimmianine
Berbrine
Chlrithrine
Artarine ( 9-ethoxychlrythrine)
Angoline ( 9-methoxychlrythrine)
Fagaronine
Magnoflorine
N-methylcorydine
N-methylisocoydine
Tembtarine
Candine-6-one
Stamm (1984)
Paris (1947)
Hegnauer

Paris (1947)
Palmer (1956)
Messmer (1972)




Sofowara (1979)
Lignane Fagarol
Ssamines
Thoms (1911)
Kerharo (1973
Phnol Xanthoxylol Eshiet (1966)
Amide N-iso-butyldcadiennamide Bowden (1963)
Acide phnol Acide 2-hydroxymthylbenzoque
Acide vanillique
Acide para hydroxybenzoque
Sofowara (1979)





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

53



2.1.6.7.5 $tructures chimiques des composs de Faara zanthoxylodes
( Harborne et Baxter, 1993)

N
O
O
H
3
CO
R
CH
3
N
OCH
3
OH
H
3
CO
R
CH
3
H
3
CO
+

Fagaridine R = OH Fagaronine
Chelerytrine R = OCH
3



O
O
N
H
CH
3
CH
3
O
O
O
N
H
CH
3
CH
3
O


4-5 Dihydropiperlongumine Fagaramide

N
H
3
C
HO CH
3
CH
3
H
HO
H
3
CO
N
H
3
C
R
1
CH
3
CH
3
H
R
2
H
3
CO
+ +


Tembetarine Magnoflorine: R
1
= R
2
= OH
N-methylcorydine : R
1
= OH R
2
= OMe

N
O
OCH
3
OCH
3
N
H
CH
3
CH
3
O


Fagarine = 8 methoxydictamine N-isobutyl - 2E, 4E - octadienamide



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

54
O
O
N
OCH
3
OCH
3
OH
O
H
3
CO
H
3
CO
H
O

Berberine 6,7 - Dimethoxycoumarine

N
O
OCH
3
OCH
3
H
3
CO
CH
3
O

Germacrone -fagarine = Skimmianine

N
O
O
OCH
3
H
3
CO
CH
3
N+
O
O
H
3
CO
CH
3
H
3
CO

Dihydrochelerythrine Nitidine


OH
N
O
O
H
3
CO
CH
3
HC
O
OCH
3
N
CH
3
H
3
C
CH
3
HO

Arnottianamide Candicine


O
O
O
O
O
O
H H
O
O
N
O
CH
3
OCH
3
OCH
3

-fagarine = Allocriptopine (+) Sesamine


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

55


2.1.6.8. Ractions phytochimiques de Faara zanthoxylodes

TALEAU X : RESULTATS DES TESTS PHYTOCHIMIQUES SUR LES ECORCES DE RACINES DE
FAGARA ZANTHOXYLOIDES (BAGAYOKO, 2001)

Fagara zanthoxylodes Lam
Recherches Rsultats Interprtation
Htrosides cyanogntiques (papier
picrosod)
Aucun Test ngatif
Coumarines (fluorescence UV 366 nm) Fluorescence verte +++
Carotnodes (Carr et Price) Bruntre +
Antracnosides combins libres (Borntrager) Aucun Test ngatif
Antracnosides combins C- htrosides Aucun Test ngatif
Antracnosides O-htrosides ( Borntrager) Aucun Test ngatif
Flavonodes : Gnines flavoniques (Shibata) Orange ++
Alcalodes base (Bouchardad Mayer -
Dragendorff
Prcipits abondants +++++
Alcalodes sel (Bouchardad-Mayer-
Dragendorff)
Prcipits abondants +++++
Saponosides : mousse Aucun Test ngatif
Tanins : raction avec le chlorure ferrique Noirtre ++
Tanins : raction avec lacide chlorhydrique Prcipits solubles dans
lalcool isoamylique
++
Tanins catchiques : raction de Stiasny Prcipits solubles dans
lalcool iso amylique
++
Tanins Galliques : raction de Stiasny Verte ++
Composs rducteurs Rouge brique +++
Oses et holosides Rouge +++
Polyuronides ( Mucilages) Flocons blancs +++++
Strols et Triterpnes : Htrosides
triterpeniques (Liebermann)
Anneau rouge bruntre,
surnageant vert
++++
Strols et Triterpnes : Strodes (Liebermann) Anneau rouge bruntre,
surnageant vert
++++
Htrosides cardiotoniques (Raymond
Marthoud )
Violet fugace +++
Htrosides cardiotoniques ( Keede ) Rouge violace +++
Htrosides cardiotoniques ( Baljet ) Orange +++
Anthocyanes Aucun Test ngatif
Leucoanthocyanes Brun rouge ++
Stupfiants ( Ttrahydrocanabinol ) Aucun Test ngatif
Alcalodes des Solanaces mydriatiques Aucun Test ngatif




Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

56


2.1.6.7. DO$AGE$

TALEAU X : TABLEAU RECAPITULATIF DES DOSAGES CHIMIQUES DE FAGARA
ZANTHOXYLOIDES ( BAGAYOKO, 2001)

Recherches Rsultats
Substances extractibles par leau ( 1 gramme ) 29%
Substances extractibles par lther 4,60%
Substances extractibles par lthanol absolu 7%
% d'eau par la mthode gravimtrique 5%
% d'eau par la mthode azotropique 6%
Cendres totales 6,70%
Cendres insolubles dans lacide sulfurique 50% 10,90
Cendres insolubles dans lacide chlorhydrique 10% 2,70%
Alcalodes 0,30%



2.1.6.10. Donnes pharmacoloiques de Faara zanthoxylodes

Les nombreuses tudes effectues sur Fagara zanthoxylodes portent surtout sur lactivit
antimicrobienne in vitro des diffrents extraits des racines (Metou et al, 1988).
Cest en examinant les proprits antibactriennes dun extrait de la plante sur un milieu de
culture qui contenait du sang que le professeur Sofowara du Nigeria constata que le sang
sur lequel il avait dpos lextrait de Fagara zanthoxylodes restait rouge trs longtemps. Il
en a dduit que la plante devait empcher lhmolyse des hmaties (Sofowara,1971).
Depuis, de nombreuses publications ont prcis laction antidrpanocytaire de la plante.
Fagara zanthoxylodes possde la proprit de redonner aux globules rouges leur forme
ronde normale chez les malades drpanocytaires et de permettre un meilleur apport
doxygne. A partir d'un extrait aqueux de racine de Fagara zanthoxylodes qui diminuait
fortement le nombre de cellules falciformes, on a isol l'acide hydroxy-2-mthyl-benzoque,
responsable de cette activit. Au Nigeria, le principe actif de la plante a t formul sous
forme de comprims (Sofowara et al., 1985)


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

57
Au Burkina faso, une tude pharmacologique comparative entre la Dihydroergotoxine
Hydergine

dune part, et lassociation de poudres de Fagara zanthoxylodes et de


Colotropis procera dautre part a t ralise chez les enfants en crise drpanocytaire. La
poudre des deux plantes associes sous forme de glules sest rvle, in vitro, inhibitrice
de la falciformation des globules rouges et in vivo sur la crise drpanocytaire (Guissou,
1990).

Au Mali, une tude clinique a t ralise sur lefficacit dun extrait hydroalcoolique de
Fagara zanthoxylodes compare celle du ktoprofne dans le traitement des crises vaso-
occlusives chez les drpanocytaires.
Lextrait hydroalcoolique de Fagara zanthoxylodes a montr un pouvoir inhibiteur de la
falciformation des hmaties, il est aussi bien tolr avec un taux de sdation des crises
douloureuses de 70% (Diallo, 1998).

Une autre tude a t effectue sur 50 malades, prsentant une moyenne de 25 crises
drpanocytaires douloureuses par mois : traits trois fois par jour par 5 ml d'une solution
correspondant 1 mg/ml d'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes, les crises
disparaissaient compltement et l'hmatocrite restait constant (Isaac-Sodoy et al., 1975).

Les alcalodes de Fagara zanthoxylodes possdent en outre un nombre important
dactivits physiologiques : antileucmique (Guisso, 1990), anticancreuse et antivirale
(Metou et al, 1988).










Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

58


TALEAU X : TABLEAU RECAPITULATIF DES DONNEES PHARMACOLOGIQUES
DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES

Extrait Mthodes de culture Rsultats Rfrence
Extrait aqueux de
racine
Mthode des plaques
stries sur la flore
buccale
F.z prsente des
proprits
antibactriennes
El Sad (1971)
Extrait aqueux de
racine
Mthode des botes de
ptri en cupules sur la
flore buccale
Zone dinhibition en
mm :
-Glose au sang : 23
-Glose nutritive : 23
Fadulu
Extrait aqueux de
racine en fractions
Mthode des botes de
ptri, en cupules sur la
flore buccale
Activit antimicrobienne
attribue 4
alcalodes :
- Canthine-6-one
- Chlrithrine
Odebiyi (1979)
Extrait aqueux de
racine dissous dans TC
199
Action sur les hmaties
en suspension dans le
TC 199 +
Mtabisulfite de Na
Mise en vidence
dhmaties crneles :
5% avec F.z et 70%
sans F.z.
Mise en vidence
dhmaties falciformes
40% avec F.z et 95%
sans F.z.
Sofowara (1971)
Extrait aqueux et
fraction contenant
lacide 2
hydroxybenzoque
Action sur les hmaties
globine A et globine S
en suspension dans le
TC 199
Le taux des hmaties
falciformes diminue de
75% 30% en
prsence de lacide 2
hydroxybenzoque
Sofowara (1971)
Extrait aqueux Sang total des
malades souffrant
danmie + 25 mg
dextrait/ml
Lextrait sest revel
navoir aucune
influence sur la
transformation des
hmaties falciformes.
Honing (1975)
Extrait thr Sur sang total HbS +
2% de mtabisulfite de
Na
Diminution nette du
taux dhmaties
falciformes pour une
concentration de 6,7
mg/ml
Headings (1976)
Fagaronine Souris atteinte de
leucmie + fagaronine


- 25 mg/kg
- 50 mg/kg
-100 mg/kg
Prolongation de la vie
de lanimal par rapport
aux animaux de
contrle de :
- 190%
- 210%
-265%
Messmer (1972)


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

60

2.1.6.11. Donnes Toxicoloiques

Lespce zanthoxylodes est indubitablement non toxique. Cette toxicit a t bien
tudie par Isaacs-Sodeye ; il nen existe pas par la voie orale et elle est faible pour les
autres voies.
Lextrait mthanolique des corces de racines est ichtyotoxique.
200 mg de cet extrait provoque une paralysie en 2 minutes chez les poissons tandis que
lextrait thanolique leur provoque un effet spasmolytique.
1,25 ml/kg d'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes administr aux souris pendant 7
jours n'a provoqu aucun effet pathologique (Isaacs Sodeye et coll., 1975).
Selon Metou et al en 1988, la DL
50
par voie orale de l'extrait aqueux de Fagara
zanthoxylodes est de 20 g/kg chez les rats.
























Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

61


















CHAFTRE 3 :

TRAVAUX FER$ONNEL$
























Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

62
METHODOLOGE

3.1. Matriels

3.1.1. Matriel vtal
Le matriel vgtal est constitu par les corces de racines de Fagara zanthoxylodes,
collectes en septembre 2001, Sanakoroba (Mali) par l'herboriste Madou Diarra.
Le schage a t effectu, sur une claie, l'ombre, et la temprature ambiante du
laboratoire du DMT. Les racines ont t mondes et les corces concasses au
mortier en fins morceaux afin d'tre pulvrises au broyeur hlice type Retsch SM
2000. Nous avons obtenu une poudre jaune, trs fine, partir des corces. Un spcimen
est disponible l'herbier du DMT sous le N14606.
3.1.2. Animaux
Nous avons travaill sur des souris mles et femelles de masse variant entre 20 et 25 g
de l'animalerie du Centre National d'Appui la lutte contre la Maladie (CNAM). Ces
souris issues d'une souche non consanguine qui a t slectionne partir d'une ligne
de souris prsentant des caractristiques de vigueur et de reproductivit appele CF
1

(Carworth Farms Souche 1) et qui a t introduite I'institut Marchoux en 1967 et prit le
nom de OF
1
(Oncins France Souche 1) (Traor, 1983).
3.2. dentification de la matire premire

3.2.1. Caractres morpholoiques
Les racines de Fagara zanthoxylodes sont droites, rugueuses, crevasses et de couleur
jaune claire (figure 2)
3.2.2. Caractres oranoleptiques
La poudre des racines de Fagara zanthoxylodes est de couleur jaune, dodeur faible et
de saveur cre ou piquant (figure 3).


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

63

3.3. Extraction
3.3.1 Dcoction 100C
3.3.1.1. Matriel
- Balance de prcision type Sartorius.
- Rotavapor type 349/2.J Bibby
- Bain-marie Watherbath Bm 480
- Lyophilisateur type Heto.
- Conglateur marque Zanker
- Ballon de 5 litres
- Entonnoir
- Coton
- Spatule
3.3.1.2. Mode opratoire
Nous avons pes 500 g de poudre qui ont t introduits dans un ballon contenant 5 litres
d'eau distille: il s'agit d'une dcoction 10%. Nous l'avons bouillie pendant trois heures
au bain marie. Aprs refroidissement, nous l'avons filtre.
Le filtrat obtenu a t concentr sous vide l'aide d'un rotavapor la temprature de
50C puis lyophilis. Aprs lyophilisation, nous avons obtenu une poudre floconneuse de
couleur marron qu'on a conserve dans les flacons en verre hermtiquement ferms.
Dcoction 100
o
C
Poudre des corces de
racines de Fagara 500 g
Marc Extrait aqueux



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

64
Fiure n +: Schma d'extraction par dcoction de la poudre d'corces de racines de
Fagara zanthoxylodes.
3.3.2 Extraction par les solvants oraniques et l'eau
Les extractions ont t effectues en agitant la drogue pendant 24 heures environ dans
un volume de solvant appropri ; elles ont t rptes trois fois avec chaque solvant.

3.3.2.1. Matriel et solvant
- Ballon de 1000 ml en verre
- Agitateur magntique type Tv Bayern 94361
- Baguette magntique
- Erlenmeyer
- Entonnoir
- Eprouvette gradue de 1000 ml
- Balance analytique type Sartorius
- Papier filtre Whatman cat N1001.917
- Papier filtre en fibre de verre Whatman cat N1820.110
- Rotavapor type Buchi R-114
- Bain-marie B-480
- Pompe type Edward
- Spatule
- Thermomtre
- Solvant : ther de ptrole, dichloromthane, mthanol, eau distille.

3.3.2.2. Mode opratoire
3.3.2.2.1. Extraction par les solvants oraniques
250 g de poudre ont t introduits dans un ballon de 1 litre et macrs dans 500 ml
d'ther de ptrole, sous agitation magntique, pendant 24 heures. Aprs filtration sur
papier Whatman, nous avons concentr le filtrat au rotavapor la temprature de 30C.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

65
Cette opration rpte trois fois successivement a permis de rcuprer un extrait
huileux de couleur jaune que nous avons conserv dans un flacon ouvert pendant 24
heures afin d'liminer toute trace de solvant.
Le marc a t repris avec 1600 ml de dichlomthane conformment la technique
utilise ci-dessus; nous avons obtenu un extrait glatineux de couleur noire que nous
avons conserv dans un flacon ouvert.
Le marc a t repris avec 1100 ml de mthanol conformment aux techniques
prcdentes; mais aprs concentration sec au rotavapor, sous vide, la temprature
de 40C, le rsidu a t rcupr avec un peu d'eau puis lyophilis.
La lyophilisation qui dure 48 heures a permis d'obtenir une poudre floconneuse de
couleur marron que nous avons conserve dans un flacon en verre et hermtiquement
ferm. Le marc a t sch la temprature ambiante du laboratoire puis utilis pour
l'extraction avec l'eau.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

66
Ether de ptrole
Dichloromthane
Mthanol
Poudre des corces de
racines de Fagara 250 g
Marc
Marc
Marc
Extrait ther de ptrole
Extrait dichloromthane
Extrait mthanolique


Fiure n 5: Schma d'extractions par les solvants organiques de la poudre d'corces
des racines de Fagara zanthoxylodes.
3.3.2.2.2. Extraction par l'eau
Le marc d'extraction des solvants organiques, sch, a t introduit dans un bcher
auquel nous avons ajout 1 litre d'eau. Ce mlange a t extrait par digestion 50C
dans un bain-marie pendant 3 heures. Le filtrat obtenu aprs filtration sur un papier filtre
en fibre de verre a t concentr, sous pression rduite, l'aide d'un rotavapor la
temprature de 50C. Le rsidu a t repris avec un peu d'eau puis lyophilis.
Le lyophilisat est une poudre floconneuse de couleur marron qui a t conserve dans
un flacon en verre et hermtiquement ferm.
Le marc d'extraction par l'eau 50C a t utilis pour l'extraction 100C. Nous avons
utilis un procd d'extraction identique celui de l'eau 50C la diffrence que la
temprature du bain marie tait maintenue 100C pendant une dure de 3 heures.
Aprs filtration, l'extrait a t concentr au rotavapor et lyophilis. Nous avons obtenu
une poudre floconneuse de couleur marron.
Le final des diffrentes extractions a t sch et conserv dans un sachet en plastique.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

67
Digestion 50
o
C
Dcoction 100
o
C
Marc sch
Marc
Marc
Extrait aqueux 50
o
C
Extrait aqueux 100
o
C puis


Fiure n 6 : Schma d'extractions par l'eau du rsidu d'extraction par les solvants de
la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.


3.3.3. Extraction par macration l'eau
50 g de poudre introduit dans un ballon d'un litre a t macre dans 500 ml d'eau, sous
agitation magntique, pendant 24 heures. Aprs filtration sur papier Wathman, le filtrat a
t concentr sec au rotavapor sous vide la temprature de 50C. Cette opration a
t rpte trois fois successivement. Aprs concentration, les filtrats ont t lyophiliss.
Nous avons obtenu une poudre floconneuse de couleur marron que nous avons
conserve dans un flacon en verre hermtiquement ferm.
Le marc de la filtration a t sch et conserv dans un sachet en plastique.
Les rendements de chaque extraction sont indiqus au chapitre des rsultats.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

68
Poudre dcorces de racines
de Fagara 50 g
Macration
Extrait Rsidu macr


Fiure n 7 : Schma de la macration par l'eau de la poudre d'corces de racines de
Fagara zanthoxylodes








3.3.+. $paration liquide-liquide
3.3.+.1. Matriel et solvant
- Ampoule dcanter de 1 litre
- Potence
- Erlenmeyer de 500 ml
- Eprouvette gradue de 1 litre
- Balance analytique type Sartorius
- Rotavapor type 349/2.J. Bibby
- Lyophilisateur Driwinner type Heto.
- Solvant : Eau distille, Ether de ptrole, Actate d'thyle , Butanol

3.3.+.2. Mode opratoire

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

69
50 g de poudre lyophilise pralablement dissous dans 500 ml d'eau distille sont
introduites dans une ampoule dcanter. Nous y avons ajout 600 ml d'ther de ptrole
raison de 200 ml toutes les 15 min suivit de dcantations successives; nous avons
obtenu une phase organique et une phase aqueuse. La phase organique constitue
d'ther de ptrole a t rcupre puis concentre au rotavapor la temprature de
30C. A l'issue de cette concentration, nous avons constat qu'aucune substance extraite
par dcoction n'est soluble dans l'ther de ptrole.
A la phase aqueuse, nous avons ajout 600 ml d'actate d'thyle selon le procd ci-
dessus. La phase organique a t rcupre puis concentre sec, au rotavapor la
temprature de 30C.
Le rsidu a t rcupr avec un peu d'eau puis lyophilis.
Le lyophilisat a permis d'obtenir une poudre de couleur marron.
La mme opration a t ralise avec le Butanol et le lyophilisat a donn une poudre
de couleur jaune.
La phase aqueuse puise a t concentre au rotavapor, sous vide, la temprature
de 50C puis lyophilise. Le lyophilisat a permis d'obtenir une poudre floconneuse de
couleur marron fonce.
Tous les lyophilisats ont t conservs dans des flacons en verre et hermtiquement
ferms.
Le marc final des diffrentes extractions a t sch et conserv dans des sachets en
plastique.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

70

Extrait brut de Fagara
50 g
Eau distille
Ether de ptrole
Phase aqueuse
Extrait ther de ptrole
Actate dthyle
Phase aqueuse
Extrait EtOAc
Butanol
Extrait BuOH Phase aqueuse puise
Extrait aqueux




Fiure n 8 : Schma de la sparation liquide-liquide de la poudre d'corces de racines
de Fagara zanthoxylodes.



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

71

3.+. Chromatoraphie sur couche mince (CCM)
3.+.1. Matriels
- Balance analytique de prcision de type Sartorius
- Plaque en aluminium avec comme support le Silicagel 60F
254
(Merck)
- Cuves avec couvercle
- Crayon papier
- Eprouvettes
- Micropipettes de 5l
- Pulvrisateur
- Ractifs de Godin et Dragendorff
- Rgle
- Schoir type Solis
- Ractifs : BuOH, EtOAc, Ligrone, Acide actique, Eau
- Lampe UV type DESAGA

3.+.2. Technique :
Nous avons fait dissoudre 10 mg des extraits aqueux, BuOH, MeOH, macr, aqueux
puis et aqueux 50C et 100C par 1 ml d'un mlange eau - mthanol (1 : 1). Par
contre les extraits ther de ptrole, dichloromthanane, et mthanolique ont t
respectivement dissous dans 1 ml de chloroforme, d'actate d'thyle et de mthanol. A
l'aide d'une micropipette, nous avons dpos 10l de chaque solution sur la plaque. Les
traces du solvant ont t compltement vapores des dpts l'aide du schoir.
Ensuite, nous avons plac la plaque dans les cuves de dveloppement contenant les
systmes de solvants suivants :
- Butanol - Acide actique - Eau (60 : 15 : 25)
- Chloroforme - Mthanol - Eau ( 65 : 35 : 5)
- Ligrone - Actate d'thyle (1 : 1)

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

72
La migration du solvant d'lution entrane les substances contenues dans les extraits de
plante des vitesses varies; il se forment des tches caractrisant les substances
prsentes dans l'extrait. La distance suffisante pour l'lution est d'environ 8 cm partir de
la ligne de dpart.
Les plaques ont t retires des cuves ds que le front de solvant a atteint environ 8 cm.
Elles ont t sches et les substances ont t rvles sous la lampe UV 254 nm,
366 nm; puis gicles avec le ractif de Dragendorff qui est spcifique la rvlation des
alcalodes et le ractif universel de Godin qui permet de caractriser plusieurs groupes
de constituants chimiques (Godin,1954).
Les plaques ont t ensuite chauffes l'aide du schoir jusqu' rvlation des
composes (taches colores sur fond blanc).
Chaque substance a t identifie par sa fluorescence sous UV, par son facteur de
rtention (Rf) dans un systme de solvant prcis et par sa couleur aprs rvlation au
ractif de Godin ou de Dragendorff.


Rf =
distance parcourue par la substance
distance parcourue par le front du solvant













Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

73
3.5. TE$T$ OLOGQUE$
3.5.1. Dtermination de la toxicit
3.5.1.1. Animaux
- Le test a port sur 30 souris mles, jeun de 18 h, de masse variant entre 20 et
25 g, reparties en 3 lots aussi homognes que possible en fonction de leur masse.
3.5.1.2. Matriels
- Balance analytique
- Sonde gastrique
- Seringues gradues et aiguilles
- Gants
- Cage
- Extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes

3.5.1.3. Dtermination de la toxicit (DL50) par voie orale
- Nous avons administr par voie intragastrique un lot de 10 souris, la dose de 5
g/kg de masse corporelle, de l'extrait aqueux de la poudre d'corces de racines de
Fagara zanthoxylodes.
- Nous avons observ les souris pendant 72 h afin de noter les ventuels
manifestations pathologiques et le nombre de morts.
- Un lot contrle compos de 10 souris a reu uniquement de l'eau distille par voie
orale raison de 0,025 ml/100 g de masse corporelle.

3.5.1.+. Dtermination de la toxicit (DL50) par voie intra-pritonale
- Nous avons administr par voie intra-pritonale 2 lots de 10 souris, les doses
de 1 g/kg et 0,5 g/kg de masse corporelle, d'extrait aqueux de la poudre d'corces
de racines de Fagara zanthoxylodes.
- Nous avons observ les souris pendant 120 h afin de noter les ventuels troubles
pathologiques et le nombre de morts.
- Un lot contrle compos de 10 souris a reu uniquement de l'eau distille par voie
intra-pritonale raison de 0,025 ml/100 g de masse corporelle.



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

74



3.5.2. Dtermination de l'activit antalique (Elizabeth et al., 1996)
3.5.2.1. Test de torsion
Animaux utiliss :
- Le test a port sur 30 souris mles, jeun de 18 h, de masse variant entre 20 et
25 g, reparties en 3 lots aussi homognes que possible en fonction de leur masse.
- Le premier lot a t trait par l'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes; Le
deuxime lot a t trait par l'Indomtacine des doses de 25 mg/kg
- Le troisime lot tmoin a reu uniquement de l'eau distille raison de 0,025 ml
pour 100 g de masse corporelle

Ractifs
- Solution d'acide actique 0,6%
- Solution aqueuse d'extrait de Fagara zanthoxylodes des doses de 500 mg,
1000 mg et 1500 mg/kg.
- Solution aqueuse d'indomtacine
- Eau distille

Matriels
- Balance analytique
- Sonde gastrique
- Seringues gradues et aiguilles
- Gants
- Cage

Mthode :
La substance tester , l'indomtacine, et l'eau distille ont t administres
diffremment aux trois groupes de souris, par voie intra-pritonale, 1 heure avant
ladministration de la solution dilue d'acide actique (0,6%) la dose de 10 l/g de
masse corporelle de souris.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

75
Nous avons compt le nombre de torsions effectues pendant les 20 minutes qui suivent
l'injection de l'acide actique.

Evaluation de l'activit antalique :
Nous avons calcul pour chaque groupe de souris la moyenne (M) et la dviation
standard (SD). La signification statistique a t dtermine au moyen du test t student.
Le pourcentage d'inhibition de la douleur pour chaque groupe de souris, traites par les
diffrentes doses d'extraits et le mdicament de rfrence, a t calcul en comparant la
moyenne de groupe de souris traites avec celle du groupe tmoin ayant reu
uniquement de l'eau distille. Ce pourcentage d'inhibition de la douleur a t calcul
selon la formule suivante :

Mnt groupe tmoin - Mnt groupe trait
Mnt groupe tmoin
x 100
= inhibition %


Mnt = Moyenne du nombre de torsion

3.5.2.2. Test la plaque chauffante
Animaux utiliss :
- Le test a port sur 30 souris de masse variant entre 20 et 25 g, reparties en 3 lots
aussi homognes que possible en fonction de leur masse.
- Le premier lot a t trait par l'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes; Le
deuxime lot a t trait par le Tramadol la dose de 25 mg
- Le troisime lot tmoin a reu uniquement de l'eau distille raison de 0,025 ml
pour 100 g de masse corporelle.

Matriels et ractifs
- Plaque chauffante
- Cylindre
- Chronomtre

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

76
- Solution aqueuse d'extrait de Fagara zanthoxylodes des doses de 500 mg,
1000 mg et 1500 mg/kg.
- Solution aqueuse de Tramadol la dose de 50 mg/kg
- Balance analytique
- Sonde gastrique
- Seringues gradues et aiguilles
- Gants
- Cage

Mthode :
Nous avons administr les extraits aqueux de Fagara zanthoxylodes, le Tramadol et
l'eau distille 1 heure avant de dposer la souris sur la plaque chauffante rgle 55C.
Le chronomtre est dclench ds que les pattes de la souris touchent la plaque.
Les seules rponses considrer chez la souris sont le lchage des pattes, les sauts
raliss par la souris sur la plaque et ses ractions vouloir quitter lintrieur du cylindre.
Dautres types de comportements ne sont pas pris en compte.
Le temps de raction est mesur au moment o la souris est maintenue sur la plaque
chauffante pendant une dure de 30 secondes maximum.
Nous avons ensuite compar les temps de raction des animaux traits ceux des
souris ayant reu uniquement de l'eau distille.










Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

77


3.5.3. Dtermination de l'activit hmostatique
3.5.3.1. Mesure du temps de coaulation par la mthode de Lee et White
Matriels :
- Tubes en verre ordinaire de 75 x 10 mm
- Bain-marie
- Chronomtre
- Pipette
- Seringue
- Garrot

Mthode :
100 mg d'extrait aqueux lyophilis ont t dissout dans un 1 ml d'eau distille. Nous
avons reparti cette solution raison de 10l, 25 l, 50 l, et 100 l dans deux tubes
essai pour chaque volume. Deux autres tubes essai ont servi de tmoin.
A l'aide d'une pipette, des volumes identiques ont t dposs sur des lames porte-objet.
Une lame a servi de tmoin et n'a reu aucune dose de l'extrait . Nous avons ensuite
prlev 0,5 ml de sang humain qui a t additionn au contenu de chacun des lames.
Les tubes ont t bouchs avec du coton et incubs au bain-marie 37C.
Les lames ont t recouvertes de botes de ptri et laisses la temprature ambiante
du laboratoire.
Nous avons dclench le chronomtre ds la pntration du sang dans la seringue. Les
observations ont commenc ds la 3

minute et s'taient poursuivit toutes les 30


secondes.
L'valuation de la coagulation a t faite en penchant le tube ou la lame sous un angle
de 45C afin de constater la prsence ou non d'un coagula.
Le test a t positif si le temps de coagulation d'un sang contenant un extrait tait
infrieur celui du sang tmoin.



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

78

3.5.+. Dtermination de l'activit antioxydante
Dpistae de l'activit antioxydante sur CCM l'aide du DFFH
Le test chimique que nous avons employ pour dceler la prsence de composs
antioxydants dans les extraits de plantes est bas sur le principe de la rduction des
radicaux libres fournis par le 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyle (DPPH).
Au cours du screening gnral 10l d'une solution de 10 mg/ml (M/V) de chaque extrait
ont t dposs sur la plaque de Silicagel 60 F
254
(Merck) possdant un support en
aluminium.
Le dveloppement des plaques a t ralis dans le systme de solvant :
Butanol - Acide actique - Eau (65 : 25 : 15).
Aprs migration, les chromatogrammes ont t schs l'aide d'un schoir lectrique
puis rvls l'aide d'une solution de DPPH la concentration de 2 mg/ml (M/V) dans le
mthanol.
En prsence de composs possdant des proprits antioxydantes le DPPH est rduit et
passe de la couleur pourpre au jaune.
Sur la plaque CCM, les zones d'activits antiradicalaires apparaissent jaune-blanc sur
fond violet aprs un temps optimale de 30 minutes (Takao et al., 1994).







Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

79
3.5.5 Dtermination de l'activit anti-inflammatoire
3.5.5.1. Odme la carrahnine (Winter, 1962).
Animaux utiliss :
- Le test a port sur 18 souris mles de masse variant entre 20 et 25 g, reparties en
3 lots aussi homognes que possible en fonction de leur masse.
- Le premier lot a t trait par l'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes
- Le deuxime lot a t trait par l'Aspirine

raison de 200 mg/kg de souris


- Le troisime lot tmoin a reu uniquement de l'eau distille raison de 0,025 ml
pour 100 g de masse corporelle.

Ractifs
- Solution de carraghnine 1% dissoute dans le liquide physiologique
- Solution aqueuse d'extrait de Fagara zanthoxylodes des doses de 250 mg,
500 mg, 1000 mg et 1500 mg/kg.
- Solution aqueuse d'Aspirine



Matriels
- Balance analytique
- Sonde gastrique
- Seringues gradues et aiguilles
- Gants
- Cage
- Ciseaux

Mthode :
- Nous avons mis les souris jeun 18 heures avant le test.
- 1 heure avant de provoquer l'inflammation, nous avons administr par voie orale
l'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes au premier lot de souris.
- Les deuxime et troisime lots ont reu respectivement, par la mme voie, de
leau distille et l'Aspirine

.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

80
- Linflammation est produite en injectant sous laponvrose plantaire de la patte
arrire gauche des souris 50l de la solution de carraghnine 1%: il se produit
un dme de la rgion mtatarsienne.
- Les souris ont t remises en cage.
- Nous avons sacrifi les souris, par rupture de la nuque, 3 heures aprs linjection
de la carraghnine.
- Nous avons ensuite coup rapidement les pattes postrieures la hauteur de
larticulation tarso-crurale et pes sur une balance analytique.

Nous avons calcul pour chaque souris, l'augmentation de la patte enflamme (patte
postrieure gauche : PPG), qui a reue la carraghnine par rapport au poids de la patte
saine (patte postrieure droite: PPD) selon la formule : PPG - PPD.

Evaluation de l'activit anti-inflammatoire :
Nous avons calcul pour chaque groupe la moyenne (M) et la dviation standard (SD).
La signification statistique a t dtermine au moyen du test t student. Le pourcentage
d'inhibition de l'inflammation, pour chaque groupe trait par les diffrentes doses de
l'extrait et le mdicament de rfrence, a t calcul en comparant la moyenne de
l'augmentation de l'inflammation avec celle du groupe tmoin trait avec l'eau distille.
Ce pourcentage est calcul selon la formule de Saenz et al (1998) :

M(PPG - PPD) groupe tmoin - M(PPG-PPD) groupe trait
M(PPG - PPD) groupe tmoin
x 100
= inhibition %











Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

81
3.5.6. Dtermination de l'activit antifonique
3.5.6.1. Mthode bioautoraphique (Diallo, 2000).
3.5.6.1.1. Frparation des plaques CCM
Les solutions correspondent aux concentrations de 10, 30, et 60 mg/ml (M/V) pour les
extraits aqueux et organiques de la plante et 10 mg/ml (M/V) pour le tmoin.
10 l de chaque concentration ont t dposs sur les plaques de support en verre.
Les plaques ont t dveloppes dans des systmes de solvants :
Butanol - Acide actique - Eau (60 : 15 : 25) et Ligrone - Actate d'thyle (1 : 1). Les
plaques ont t ralises en double dont l'une sert de tmoin.
Chaque plaque en verre a t visualise la lumire UV 254 nm puis 366 nm.
Laisser scher les plaques la temprature ambiante du laboratoire, avant le test, afin
dliminer toutes traces de solvant.
Les plaques tmoins ont t rvles avec les ractifs de Godin et de Dragendorff pour
permettre l'identification des substances aprs le test biologique.
3.5.6.1.2. Matriels d'tude
Matriel vtal test
Extraits aqueux lyophiliss et organiques de la poudre d'corces de racines de Fagara
zanthoxylodes.
$olution de rfrence
Nous avons utilis la Nystatine dissout dans du chloroforme la concentration de 100
g/ml et un extrait dichoromthane de Swartzia madagascariensis Desv. comme plante
de rfrence la concentration de 100g/ml.
Champinon test
Nous avons utilis une souche de Candida albicans obtenue partir d'un prlvement
vaginal au laboratoire de bactriologie de l'hpital du point "G" de Bamako.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

82
Milieu de culture
Nous avons utilis les milieux de culture suivants :
- Sabouraud glose + chloramphnicol + Actidione
- Sabouraud glose liquide (SDA; Sabouraud Dextrose Agar).
- Malt agar
Frparation du milieu $abouraud lose liquide :
Dissoudre 15 g de poudre de Sabouraud glose dans un litre deau distille. Attendre 5
min puis bien agiter afin dobtenir une suspension homogne. Chauffer en agitant jusqu
dissolution complte. Le milieu ainsi prpar est strilis lautoclave KSB

la
temprature de 121C pendant 15 min.
Frparation du milieu $abouraud lose + Chloramphnicol + Actidione
Nous a avons utilis la mthode de prparation dcrite en haut en ajoutant le
Chloramphnicol et l'Actidione qui ont permis l'isolement de Candida albicans en
liminant les germes saprophytes. Ce milieu est particulirement recommand pour les
ensemencements souills.
Frparation du milieu Malt aar
Ajouter 48 g un litre de l'eau dminralise par chauffage dans un bain-marie bouillant;
passer avec prcaution l'autoclave pendant 10 min 124C. Ne pas surchauffer.
3.5.6.2. dentification et conservation de souches de Candida albicans
3.5.6.2.1 dentification de Candida albicans
Les travaux ont port uniquement sur les prlvements vaginaux. Lidentification de
Candida albicans a t faite soit par examen microscopique, soit par culture ou par
culture suivi de coloration Gram.
Examens microscopiques
Faire une observation du prlvement entre lame et lamelle. Les caractres
microscopiques que nous avons considrs ont trait laspect des cellules. Candida

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

83
albicans prsente un aspect de cellules levuriformes, rondes, ovalaires parfois
bourgeonnantes.
Culture
Nous avons ralis la culture de Candida albicans sur le milieu Sabouraud +
Chloramphnicol + Actidione coul dans la bote de ptri. La culture seffectue par
passage de lcouvillon de prlvement sur le milieu de culture incorpor dans la bote
de ptri et incuber 37C pendant 24 heures.
Les caractres didentification sont constitus de laspect des colonies crmeuses
blanches de Candida albicans odeur caractristique.
Le milieu didentification Sabouraud + Chloramphnicol + Actidione permet seulement le
dveloppement des spores de Candida albicans .
Coloration de Gram
Prlever dans la bote de ptri ensemence une colonie de levures.
Raliser un frottis sur lame, laisser quelques minutes puis fixer laide de lalcool 90.
Aprs prparation de la lame, nous avons ralis la coloration de Gram proprement dite.
A laide dun microscope lobjectif 100 en immersion nous avons observ des cellules
levuriformes, colores en violet et groupes en chanettes.
Test de filamentation
Cest un test, pralable aux tests biologiques, qui atteste lauthenticit de la souche de
Candida albicans.
Ce test met en vidence la production de filaments caractristiques de Candida albicans
dont 98% des souches en produisent.
Ensemencer la souche dans un tube contenant du srum humain.
Linoculum doit tre suffisant pour donner un trs lger trouble dans le milieu (0,5 ml de
srum pour une colonie).

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

84
Lobservation des filaments se fait au microscope l'objectif 40 aprs 3 heures
dincubation 37C.
3.5.6.3. Conservation des souches.
La conservation se fait sur milieu Sabouraud + Chloramphnicol + Actidione coul en
tube inclin.
Frincipe :
Prendre une jeune colonie de 24 heures et l'ensemencer sur la glose en tube. Incuber
pendant 24 heures 37C puis garder le tube en anarobiose ( les tubes ne doivent pas
tre hermtiquement ferms).
NB : Les souches de Candida albicans doivent tre repiques tous les deux mois .

3.5.6.+. $olution tester et tmoin
3.5.6.+.1. $olutions tester
Les extraits de Fagara zanthoxylodes devant subir les tests biologiques, ont t utiliss
des concentrations progressives allant de 10 mg/ml, 20 mg/ml et 30 mg/ml. Les
extraits aqueux ont t dissous dans de leau distille tandis que les extraits organiques
dans des solvants appropris.

3.5.6.+.2. Tmoins pour le test
Le test antifongique sur Candida albicans recommande lutilisation de la Nystatine
comme tmoin en solution chloroformique 1 mg/10 ml. Nous avons utilis une solution
dichloromthane de Swartzia la concentration de 100g/ml.




Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

85
8.6.1.7. Mode opratoire
]our 1 :
(1). Repiquer une culture de Candida albicans sur le milieu de culture
Sabouraud glos + Chloramphnicol + Actidione en bote de ptri;

(2). Incuber 30C pendant environ 24 heures;

]our 2 :
(3). Prparer 2 erlenmeyers contenant 50 ml de milieu de culture Sabouraud
liquide (SDB; Sabouraud Dextrose Broth) et les striliser l'autoclave
pendant 15 min 121C;

(4). Ajouter froid une pointe de spatule d'une colonie issue de (2) dans l'un
des milieux prpars sous (3);

(5). Laisser reposer une nuit sous agitation
]our 3 :
(6). En dbut de matine, prendre 0,5 ml du milieu prcdent (trouble) et
l'ajouter au second milieu prpar sous (3) (dilution 100 fois);

(7). Laisser reposer pendant environ 7 heures sous agitation. Ce temps est
ncessaire pour atteindre la phase de croissance exponentielle de Candida
albicans;

(8). Pendant ce temps, prparer les milieux de culture base de Malt Agar
qui seront la base de l'inoculum vers sur les plaques CCM, et les rpartir
en erlenmeyers de 50 ml. La quantit du milieu de culture est fonction des
dimensions de la plaque ; pour une plaque de 10 cm x 10 cm, la quantit
du Malt Agar a t de 10 ml.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

86
(9). Maintenir le Malt Agar fondu au bain-marie 48 C car au dessus de
cette temprature, les levures ne survivent pas et en dessous de 43C, le
milieu se solidifie;

(10). Ajouter 0,5 ml de cette solution obtenue sous (6) chaque fraction de 50
ml de Agar fondu, afin d'obtenir un inoculum contenant environ 10
5

cellules/ml ;

(11). Laisser nouveau reposer 48C;

(12). Verser l'inoculum sur les plaques l'aide de pipettes striles raison de
10 ml par portion de 10 cm x 10 cm;

(13). Incuber 30C pendant une nuit en atmosphre humide en utilisant des
botes en plastique contenant un papier buvard dtremp;

(14). Rvler les plaques l'aide d'une solution aqueuse de bleu de
ttrazolium (methylthiozolyl tetrazolium 2,5 mg/ml) : les zones
d'inhibition de croissance apparaissent sous forme de tches incolores
sur fond violet, aprs une nouvelle incubation de 4 heures. Tous les
extraits de Fagara zanthoxylodes ont t soumis la mme technique
et au mme test;

(15). Gicler de l'thanol sur les plaques afin de tuer les microorganismes;

(16). Recouvrir les plaques de feuilles de plastique transparent afin de les
conserver; dans ce cas, scher pralablement l'Agar avec prcaution.





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

87









CHAFTRE + :
RE$ULTAT$











Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

88
RE$ULTAT$
+.1. Extraction
+.1.1. Rsultats de la dcoction 10
L'extraction 10% a donn une poudre floconneuse de couleur marron avec un
rendement de 12%


+.1.2. Rsultats de l'extraction par les solvants oraniques et l'eau

TALEAU X : RESULTATS DES EXTRACTIONS PAR LES SOLVANTS ORGANIQUES ET L'EAU
DE LA POUDRE D'ECORCES DE RACINES DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES.

Type d'extrait Masse obtenue (g) Aspect Couleur Rendement (%)
Ether de ptrole 10 Huileux Jaune 4
Dichloromthane 15 Glatineux Noire 6
MeOH 20 Floconneux Marron 8
Digestion 50C 23 Floconneux Marron 9,2
Digestion 100C 12 Floconneux Marron 4,8

Au cours de cette extraction, l'ther de ptrole a pu extraire 4% des substances tandis
que la digestion 50C nous a donn un rendement de 9,2%.


+.1.3. Rsultats de la macration par l'eau
La macration l'eau a donn une poudre floconneuse de couleur marron avec un
rendement faible de 1,8%



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

89
+.1.+. Rsultats de la sparation liquide-liquide

TALEAU XV : RESULTATS DE LA SEPARATION LIQUIDE-LIQUIDE PAR LES SOLVANTS
ORGANIQUES DE LA POUDRE D'ECORCES DE RACINES DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES

Type d'extrait Masse obtenue (g) Aspect Couleur Rendement (%)
Ether de ptrole 0 - - 0
Actate d'thyle 12 Poudreux Marron 24
Butanol 4 Floconneux Marron fonc 8
Aqueux puis 26 Floconneux Marron fonc 52

Au cours de cette sparation, aucune substance extraite par la dcoction n'a t soluble
dans l'ther de ptrole. Le rendement le plus lev a t obtenu dans l'extrait aqueux
puis.





















Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

90
+.2. Rsultats des chromatoraphies sur couche mince (CCM)

TALEAU XV : RESULTATS DE LA CCM A 254 nm DANS LE SYSTEME BAW

Systme de solvant : Butanol - Acide actique - Eau (60 : 15 : 25)
Rvlation Extrait Rf Couleur
Aqueux total 0,30
0,38
0,46
0,61
0,66
0,71
0,75
0,80
0,90
Violet
Bleu
Jaune
Jaune
Vert
Jaune
Noir
Bleu
Marron
Butanolique 0,27
0,33
0,40
0,46
0,51
0,53
0,58
0,65
0,76
0,81
0,85
0,91
Noir
--
--
Jaune
Noir
--
--
--
--
--
--
--
Mthanolique 0,22
0,27
0,33
0,40
0,47
0,53
0,68
0,75
0,81
Noir
--
--
--
Jaune
Noir
Bleu
Noir
Noir
















254 nm
Aqueux 50C 0,16
0,21
0,25
0,31
0,37
0,41
0,46
0,56
0,68
0,75
Noir
--
--
--
--
--
--
--
--
--


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

91
TALEAU XV : SUITE DES RESULTATS DE LA CCM A 254 nm DANS LE SYSTEME BAW

Systme de solvant : Butanol - Acide actique - Eau (60 : 15 : 25)
Rvlation Extrait Rf Couleur
Aqueux 100C 0,16
0,21
0,33
0,46
0,70
Noir
--
--
--
--
Macr 0,43
0,52
0,68
0,75
0,78
0,81
Noir
--
--
--
--
--





254 nm
Aqueux puis 0,31
0,42
0,50
0,57
0,68
Noir
--
--
--
--
















Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

92

TALEAU XV : RESULTATS DE LA CCM A 366 nm DANS LE SYSTEME B.A.W.

Systme de solvant : Butanol - Acide actique - Eau (60 : 15 : 25)
Rvlation Extrait Rf Couleur
Aqueux total 0,18
0,31
0,38
0,40
0,52
0,70
0,76
0,90
Marron
Bleu
Marron
Jaune
Vert
Bleu
Vert
Jaune
Butanolique 0,12
0,18
0,26
0,38
0,46
0,50
0,56
0,60
0,66
0,78
0,90
Jaune
Violet
Gris
Jaune
Noir
Vert
Jaune
Bleu
Marron
Bleu
Marron
Mthanolique 0,17
0,27
0,41
0,50
0,62
0,68
0,73
0,81
0,90
Jaune
Jaune
Violet
Jaune
Jaune
Bleu
Jaune
Jaune
Jaune
Aqueux 50C 0,26
0,31
0,47
0,72
Jaune
Vert
Jaune
Bleu


















366 nm
Aqueux 100C 0,43
0,50
0,60
0,68
0,70
Jaune
Vert
Jaune
Bleu
Jaune





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

93


TALEAU XV: SUITE DES RESULTATS DE LA CCM A 366 nm DANS LE SYSTEME BAW

Systme de solvant : Butanol - Acide actique - Eau (60 : 15 : 25)
Rvlation Extrait Rf Couleur
Macr 0,28
0,43
0,46
0,55
0,60
0,68
0,75
0,81
0,91
Jaune
--
Vert
Jaune
Vert
Marron
Bleu
Violet
Jaune






366 nm
Aqueux puis 0,23
0,35
0,42
0,46
0,53
0,57
Jaune
Violet
Bleu
Jaune
Vert
Marron
















Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

94
TALEAU XX : RESULTATS DE LA CCM A 254 nm DANS LE SYSTEME LIGROINE - EtOAc

Systme de solvant : Ligrone - Actate d'thyle (1 : 1)
Rvlation Extrait Rf Couleur
Ether de ptrole 0,28
0,37
0,50
0,60
0,66
0,68
0,81
0,87
0,93
Noir
Bleu
Noir
--
--
--
--
Jaune
Noir
Actate d'thyle 0,10
0,22
0,27
0,4
0,53
Noir
--
--
--
--










254 nm
Dichloromthane 0,28
0,37
0,43
0,50
0,60
0,68
0,87
0,93
Noir
Bleu
Noir
--
--
--
Jaune
Noir
Ether de ptrole 0,28
0,37
0,43
0,56
0,66
0,68
0,80
0,87
0,93
Jaune
Orange
Marron
Vert
Marron
Marron
Bleu
Vert
Violet
Actate d'thyle 0,10
0,28
0,37
0,43
0,53
Marron
Vert
Bleu
Vert
Marron









366 nm
Dichloromthane 0,28
0,37
0,43
0,58
0,68
Violet
Vert
Bleu
Marron
Vert





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

95






TALEAU XX : RESULTATS DE LA CCM APRES REVELATION AVEC LE REACTIF DE DRAGENDORFF

Systme de solvant : Butanol - Acide actique - Eau (60 : 15 : 25)
Rvlation Extrait Rf Couleur
Aqueux total 0,31
0,37
0,43
0,55
Tche orange
--
--
--
Butanolique 0,24
0,31
0,37
0,46
0,52
Tche orange
--
--
--
--
Mthanolique 0,25
0,38
0,45
0,5
0,56
0,69
0,75
0,93
Tche orange
--
--
--
--
--
--
--
Aqueux 100C 0,63 Tche orange
Aqueux 50C 0,38
0,56
0,62
Tche orange
--
--
Macr 0,38
0,45
0,51
0,56
0,63
Tche orange
--
--
--
--












Dragendorff
Aqueux puis 0,22
0,41
0,45
0,50
0,55
Tche orange
--
--
--
--





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

96








TALEAU XX : RESULTATS DE LA CCM APRES REVELATION AU GODIN DANS LE
SYSTEME BAW


Systme de solvant : Butanol - Acide actique - Eau (65 : 15 : 25)
Rvlation Extrait Rf couleur
Aqueux total 0,38
0,51
0.53
Grise
Rouge
Jaune
Butanolique 0,27
0,45
0,51
0,57
Grise
Jaune
Jaune
Rouge
Actate d'thyle 0,35
0,53
0,83
Marron
Marron
Rouge
Mthanolique 0,26
0,45
0,76
Grise
Jaune
Rouge
Aqueux 100C 0,48 Rouge
Macr 0,16
0,52
Marron
Rouge












Godin
Aqueux puis 0,36 Rouge









Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

97







TALEAU XX: RESULTATS DE LA CCM APRES REVELATION AU GODIN DANS LE
SYSTEME LIGROINE - ACETATE D'ETHYLE

Systme de solvant : Ligrone - Actate d'thyle (1 : 1)
Rvlation Extrait Rf Couleur
Ether de ptrole 0,19
0,31
0,38
0,41
0,44
0,50
Gris
Vert
Gris
Gris
Violet
Violet
Actate d'thyle 0,94 Violet



Godin

Dichloromthane 0,83 Gris



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

98
TALEAU XX : RESULTATS DE LA CCM APRES REVELATION AU DRAGENDORFF DANS LE
SYSTEME LIGROINE - ACETATE D'ETHYLE

Systme de solvant : Ligrone - Actate d'thyle (1 : 1)
Rvlation Extrait Rf Couleur
Ether de ptrole 0,19
0,31
0,38
0,41
Tche orange
--
--
--









Dragendorff

Dichloromthane 0,13
0,19
0,25
0,29
0,31
0,38
0,50
Tche orange
--
--
--
--
--
--











Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

99

+.+. Rsultats des tests bioloiques

+.+.1. Rsultats de la toxicit aiu de Faara zanthoxylodes :
+.+.1.1 Toxicit aiu (DL50) par voie orale

TALEAU XXV : RESULTATS DE LA DL
50
PAR VOIE ORALE DE L'EXTRAIT AQUEUX DE
FAGARA ZANTHOXYLOIDES

Mortalit Produit Dose en
g/kg
Nombre
de souris 24 h 48 h 72 h
Nombre de
morts
Pourcentage
de morts
Fagara 5 10 0 0 0 0 --
Eau distille 25 ml 10 0 0 0 0 --

Au cours de cette tude, avec une dose aussi leve de 5 g/kg que nous avions
administre, nous n'avons obtenu aucun mort chez les souris pendant les 72 heures
d'observation. La DL
50
est suprieure 5 g/kg

+.+.1.2. Toxicit aiu (DL50) par voie intra-pritonale

TALEAU XXV : RESULTATS DE LA DL
50
PAR VOIE INTRA-PERITONEALE DE L'EXTRAIT
AQUEUX DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES

Mortalit Produit Dose en
g/kg
Nombre
de souris 24 h 72 h 120 h
Nombre de
morts
Pourcentage
de morts
Fagara 1 10 0 0 0 0 --
Fagara 0,5 10 0 0 0 0 --
Eau distille 25 ml 10 0 0 0 0 --

Au cours de cette tude, aucune souris n'tait morte pendant les 5 jours d'observation.
La DL
50
est suprieure 1 g/kg.





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

100


+.+.2. Rsultats des tests de l'activit antioxydante

Le test de l'activit antioxydante que nous avons ralis sur des plaques CCM et
rvles l'aide du DPPH, a donn les rsultats suivants en fonction des Rf .

TALEAU XXV : RESULTATS DU TEST ANTIOXYDANT DES EXTRAITS DE FAGARA
ZANTHOXYLOIDES SUR CCM APRES REVELATION AU DPPH.


Systme de solvant : Butanol - Acide actique - Eau (65 : 15 : 25)
Rvlation Extrait Rf Couleur
Aqueux total 0,39
0,43
Jaune blanc sur fond violet
--
Butanolique 0,22
0,31
0,38
0,43
0,50
Jaune blanc sur fond violet
--
--
--
--



DPPH
Aqueux puis 0,37
0,43
Jaune blanc sur fond violet
--

Les extraits aqueux, butanolique et puis de Fagara zanthoxylodes ont donn de
rsultats positifs au cours du test au DPPH; l'extrait butanolique a montr une bonne
antifongique.





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

101



+.+.3. Rsultats des tests de l'activit antalique

+.+.3.1. Test de Torsion

TALEAU XXV : RESULTATS DE L'ACTIVITE ANTALGIQUE DES EXTRAITS AQUEUX DE FAGARA
ZANTHOXYLOIDES CONTRE LES TORSIONS PROVOQUEES PAR L'ACIDE ACETIQUE.

Produits Doses ml-mg/kg Nombre de torsion
M DS
% inhibition
Eau distille 25 71,17 6,49 --
Fagara zanthoxylodes 500 48,50 9,35* 31,85
Fagara zanthoxylodes 1000 42,00 6,42* 40,98
Fagara zanthoxylodes 1500 33,33 4,08* 53,16
Indomtacine 25 mg 5 33,67 3,50* 52,69
Tramadol 50 mg 5 30,50 6,71* 57,14

M = Moyenne de 6 souris; rsultats exprims en M DS (Dviation standard); *p<0,01;
test t Student.
L'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes a montr un effet dose-dpendant. L'extrait
la dose de 1500 mg/kg a eu les mmes effets d'inhibition de la douleur que
l'indomtacine 5 mg/kg environ 53 % et lgrement infrieure l'effet du Tramadol
qui a t de 57%.







Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

102
+.+.3.2. Test la plaque chauffante
Chez les souris femelles
TALEAU XXV : RESULTATS DE L'ACTIVITE ANTALGIQUE DES EXTRAITS AQUEUX DE FAGARA
ZANTHOXYLOIDES PAR LA METHODE DE LA PLAQUE CHAUFFANTE CHEZ LES SOURIS FEMELLES

Produits Dose ml
mg/kg
Avant
administration
Aprs administration
Temps de raction en secondes
10 min 30 min 60 min 90 min 120 min
Eau distille 25 6,69 1,36 1,54 0,67 3,66 1,90 8,31 4,13 4,22 3,08
Fagara 1000 6,61 1,71 2,79 1,02 2,23 0,79 1,76 0,39 1,60 0,40
Tramadol 5 4,38 0,60 28,12 5,1 23,91 9,08

18,25 4,56 10,59 3,3
M = Moyenne de 10 souris; rsultats exprims en M DS (Dviation standard);
(*p<0,000001 0,001) test t Student.
Au cours de nos tests, les souris femelles ont t plus sensibles la plaque chauffante
que les souris mles avec un temps de raction faible
Chez les souris males
TALEAU XXX : RESULTATS DE L'ACTIVITE ANTALGIQUE DES EXTRAITS AQUEUX DE FAGARA
ZANTHOXYLOIDES PAR LA METHODE DE LA PLAQUE CHAUFFANTE CHEZ LES SOURIS MALES
Produits Dose
mg/kg
Avant
administration
Aprs administration
Temps de raction en secondes
10 min 30 min 60 min 90 min 120 min
Eau distille
25 8,01 1,90 4,95 1,73 6,69 2,23 6,79 2,27 3,34 0,70
Fagara 1000 4,81 0,62 5,31 1,69 4,88 0,55 6,92 0,83 4,32 1,01
Tramadol 5 3,97 1,02 8,48 3,30

25,43 0,32

26,12 7,43

9,17 4,27


M = Moyenne de 10 souris; rsultats exprims en M DS (Dviation standard);
(*P<0,000001 0,001); test t Student.
Le test antalgique a montr que l'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes ne prsente
pas une activit centrale. Les souris ragissaient la plaque chauffante aprs 5 s
maximum contrairement au Tramadol avec lequel elles ragissaient aprs 25 s.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

103
+.+.5. Rsultats des tests de l'activit hmostatique

Temps de coaulation du san

TALEAU XXX: RESULTATS DE L'ACTIVITE DES EXTRAITS DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES
SUR LE TEMPS DE COAGULATION DU SANG.


Temps de coagulation du sang en minute
Tube Lame Tube Lame Tube Lame Tube lame

Extrait
10l 25l 50l 100l
Tmoin 12,37 14,39 12,37 14,39 12,37 14,39 12,37 14,39
Aqueux 9 12,30 17 14 >20 -- >20 --
Butanolique 3,50 6,30 6,30 10 10 18 19 19,30
EtOAc 6 8 7 12 7,50 16,30 10,35 14,39
Mthanol 9 14 8 -- -- -- -- --
Macr 9,30 13 -- -- -- -- -- --
DCM 9 10 12,30 18 12,37 20 -- --
Eau 50C 12 18 -- -- -- -- -- --
Eau 100C 11,30 13 13 15 12,30 -- 14 --

Tous les extraits de Fagara zanthoxylodes ont donn des rsultats positifs aux doses de
10 l. L'extrait butanolique a t le plus actif au cours de ce test en rduisant de moiti le
temps de coagulation du sang par rapport au tmoin sur lame et de 2/3 en tube.





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

104

+.+.5. Rsultats des tests de l'activit anti-inflammatoire

TALEAU XXX : RESULTATS DE L'ACTIVITE ANTI-INFLAMMATOIRE DES EXTRAITS AQUEUX DE
FAGARA ZANTHOXYLOIDES, 3 HEURES APRES L'INDUCTION DE L'OEDEME

Produits Doses ml-mg/kg PPG - PPD
M DS
% inhibition
Eau distille 25 0,122 0,019 --
Fagara zanthoxylodes 250 0,097 ,0,009 20,53
Fagara zanthoxylodes 500 0,097 0,016* 20,98
Fagara zanthoxylodes 1000 0,085 0,007** 30,52
Fagara zanthoxylodes 1500 0,069 0,023* 52,16
Aspirine

100 0,074 0,010** 39,78


Aspirine

200 0,089 0,017* 27,25
Indomtacine 5 0,089 0,013* 26,98

M = Moyenne de 6 souris; rsultats exprims en M DS (Dviation standard); *p<0,05
**p<0,01; test t Student.
L'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes a montr un effet dose-dpendant; l'extrait
la dose de 1500 mg/kg, a montr une activit anti-inflammatoire deux fois plus suprieure
que celle de l'Aspirine

et de l'Indomtacine.








Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

105
TALEAU XXX : RESULTATS DE L'EVOLUTION DE L'EFFET ANTI-INFLAMMATOIRE DE
L'EXTRAIT AQUEUX DE FAGARA ZANTHOXYLOIDES DANS LE TEMPS

Produits Doses ml-
mg/kg
DP 1h DP 3h DP 5h
Eau distille 25 0,093 0,134 0,122 0,019 0,091 0,007
Fagara
zanthoxylodes
1000 0,092 0,021
(0,54%)
0,085 0,007**
(30,25%)
0,078 0,023
(14,60%)
Aspirine

100 - 0,074 0,010**


(39,78%)
-
Indomtacine 5 - 0,089 0,013*
(26,98%)
-

L'activit anti-inflammatoire de l'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes est leve
aprs 3 heures de temps. Elle est quasiment nulle aprs 1 heure de temps et
insignifiante au bout de 5 heures de temps.
















Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

106
+.+.6. Rsultats des tests de l'activit antifonique

TALEAU XXX : RESULTAT DU TEST DE L'ACTIVITE ANTIFONGIQUE


Systme de solvant : Ligrone - Actate d'thyle (1 : 1)
Rvlation Extrait Rf Observations
Ether de ptrole 0,18
0,25
0,31
0,43
0,50
Tches incolores
--
--
--
--
Dichloromthane 0,18
0,25
0,31
0,68
Tches incolores
--
--
--
Mthanolique 0,37
0,57
0,93
Tches incolores
--
--
Swartzia 0,12
0,25
0,37
0,50
Tches incolores
--
--
--








Bleu de
ttrazolium
Nystatine 0,40 Tches incolores

Au cours de ce test ralis sur CCM, les extraits ther de ptrole, dichloromthane et
mthanolique de Fagara zanthoxylodes ont ragi positivement en inhibant la croissance
des souches de Candida albicans par des substances dont les Rf sont prsents dans le
tableau n32 ; l'extrait ther de ptrole a montr la meilleure activit fongicide.






Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

107
TALEAU XXXV : RESULTATS DE LA CCM DE LA PLAQUE TEMOIN DU TEST DE L'ACTIVITE
ANTIFONGIQUE APRES REVELATION AU DRAGENDORFF


Systme de solvant : Ligrone - Actate d'thyle (1 : 1)
Rvlation Extrait Rf observations
Ether de ptrole 0,18
0,25
0,31
0,43
0,50
Tche orange
--
--
--
--
Dichloromthane 0,18
0,25
0,31
0,68
Tche orange
--
--
--




Dragendoff
Swartzia 0,12
0,37
0,50
Tche orange
--
--

Les substances ayant ragi au test antifongique possdent les mmes Rf que celles qui
ont t rvles avec le ractif de Dragendorff. L'activit antifongique peut tre due la
prsence des alcalodes prsents dans la plante.




Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

108











Commentaires et
Discussions



Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

109
COMMENTARE$ ET D$CU$$ON$


Notre travail a port sur la recherche des activits biologiques des extraits aqueux et
organiques de la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.
Nous avons dpist les activits antalgiques, anti-inflammatoires, hmostatiques,
antioxydantes et antifongiques des diffrents extraits. Pour l'interprtation des rsultats,
nous avons pris en compte ceux de certaines tudes antrieures.
Le choix des corces de racines et des activits cites est li au fait que cette partie de
la plante est traditionnellement utilise pour traiter les affections courantes et
particulirement bucco-dentaires.

Pour l'obtention des diffrents extraits de la poudre d'corces de racines de Fagara
zanthoxylodes, nous avons ralis des extractions aqueuses et organiques par la
mthode de polarit croissante.
La dcoction 10% a donn un rendement de 12%. Les rendements d'extractions par
les solvants organiques ont t de 4%, 6%, et 8% respectivement pour l'ther de ptrole,
le dichloromthane et le mthanol. Le pourcentage d'extraction par l'eau du marc puis
par les solvants organiques la temprature de 50C et 100C a t respectivement de
9,2% et 4,8%. Le meilleur rendement obtenu par dcoction valide la forme traditionnelle
d'utilisation (dcoct) de Fagara zanthoxylodes.

Au cours de la sparation liquide-liquide, aucune substance extraite par la dcoction
10% n'est soluble dans l'ther de ptrole, 12% des substances ont t extraites par
l'actate d'thyle alors que 4% des substances taient solubles dans le butanol et 52%
des substances sont restes hydrosolubles. Le pourcentage des substances extractibles
par macration l'eau a t de 1,8%. Ce faible rendement, peut expliquer le fait que
cette mthode est peu utilise par les tradithrapeutes (Isaac-Sodeye et al, 1975).

Les CCM ralises nous ont permis de confirmer les diffrents groupes chimiques
identifis dans les tudes phytochimiques prliminaires. Le ractif de Dragendorff a t
utilis spcifiquement pour la rvlation des alcalodes tandis que celui de Godin, qui est
un ractif universel, a t utilis pour la rvlation des autres constituants chimiques.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

110
La DL
50
a t dtermine en administrant par voie orale et intra-pritonale les extraits
aqueux de Fagara zanthoxylodes aux souris et procder une observation pendant 72
heures. C'est ainsi qu'aucun dcs n'a t constate chez les souris ayant reu par voie
orale l'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes aux doses de 5 g/kg; la DL
50
est donc
suprieure 5 g/kg.
De mme, aucun cas ltal n'a t enregistr chez les souris ayant reu par voie intra-
pritonale les doses de 0,5 et 1 g/kg d'extrait; la DL
50
est donc suprieure 1 g/kg. Ces
rsultats confirment ceux de l'tude toxicologique de l'extrait aqueux de Fagara
zanthoxylodes qui ont montr que la dose de 50 g/kg d'extrait administre par voie orale
n'a provoqu aucun dcs chez les rats (Metou et al, 1988).
Ces rsultats confirment l'innocuit de la forme traditionnelle d'utilisation (dcoct) de
Fagara zanthoxylodes.

Nos tudes ont montr que les extraits aqueux de Fagara zanthoxylodes agissent sur
l'inflammation et la douleur; les extraits aqueux et organiques empchent l'oxydation,
rduisent le temps de coagulation sanguine et inhibent le dveloppement des
champignons.
Concernant le test de l'activit antioxydante que nous avons ralis sur des plaques
CCM, les extraits aqueux, butanolique et puis ont ragi positivement des doses de
100 g. La plus forte activit a t observe avec l'extrait butanolique au niveau des
substances dont les Rf sont gales 0,35 et 0,50. Selon Potterat en 1997, l'activit
antioxydante peut tre due la prsence de composs polyphnoliques prsents dans
les extraits de la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.
L'activit antioxydante retrouve dans les extraits des corces de racines de Fagara
zanthoxylodes confre la plante des vertus thrapeutiques contre certaines
pathologies telles que le cancer, l'athrosclrose, l'asthme et l'arthrite (Chevalley, 2000).

Deux mthodes nous ont permis de dterminer l'activit antalgique : le test de torsion
pour l'valuation d'une activit antalgique priphrique et le test la plaque chauffante
pour l'valuation d'une activit antalgique centrale.
Au cours du test de torsion, aucune inhibition de la douleur n'a t constate chez les
souris ayant reu uniquement l'eau distille. L'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes a


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

111
montr une activit antalgique dose-dpendante. L'extrait aqueux la dose de 500
mg/kg a inhib la douleur de 31,85% chez les souris. La dose de 1000 mg/kg d'extrait de
Fagara zanthoxylodes a montr un pourcentage d'inhibition de la douleur de 40,98%
chez les souris. Le meilleur pourcentage d'inhibition de la douleur a environ 53% a t
observ avec la dose de 1500 mg/kg d'extraits aqueux de Fagara zanthoxylodes qui a
eu les mmes effets que l'Indomtacine 5 mg/kg et lgrement moindre que l'effet du
Tramadol qui tait de 57%.
L'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes a montr une faible activit antalgique
centrale. Les souris ragissaient la plaque chauffante aprs 5 secondes maximum
contrairement au Tramadol avec lequel les souris ont ragi aprs 25 secondes. L'activit
antalgique obtenue confirme l'utilisation des extraits aqueux de Fagara zanthoxylodes
dans le traitement des crises drpanocytaires (Sofowara, 1971).
Des rsultats similaires ont t obtenus au cours d'un screening avec les extraits
mthanoliques des feuilles de Croton cajucara Benth. qui ont inhib la douleur de 53%
chez les souris (Campos et al, 2002).

Pour l'valuation de l'activit anti-inflammatoire, nous avons provoqu un dme par
injection intra-plantaire d'une solution 1% de carraghnine, ractif recommand.
L'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes, aux doses de 1500 mg/kg, a montr une
activit anti-inflammatoire dose-dpendante chez les souris. Aucune inhibition de
l'inflammation n'a t constate chez les souris ayant reu uniquement l'eau distille la
dose de 25 ml/kg.
Afin de suivre l'effet anti-inflammatoire des extraits aqueux sur les diffrents stades de
l'inflammation, les pattes des souris ont t coupes et peses dans des intervalles de
temps de 1 heure, 3 heures et 5 heures aprs l'administration des extraits. Ainsi, 1 heure
aprs administration de l'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes la dose de 1000
mg/kg, l'inflammation a t inhibe de 0,54%.
Quant l'tude de l'action des extraits sur l'volution de l'inflammation dans un intervalle
de temps de 3 heures, nous avons utilis des doses de 250 mg, 500 mg, 1000 mg et
1500 mg/kg d'extrait aqueux de Fagara zanthoxylodes.
La dose de 250 mg/kg d'extrait a inhib l'inflammation de 20,53%;
La dose de 500 mg/kg d'extrait a inhib l'inflammation de 20,98%;

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

112
La dose de 1000 mg/kg d'extrait a inhib l'inflammation de 30,52%; La dose de 1500
mg/kg d'extrait a inhib l'inflammation de 52,16%;
L'aspirine

la dose de 100 mg/kg et l'indomtacine la dose de 5 mg/kg ont


respectivement inhib la douleur de 27,25% et 26,98%.
5 heures de temps aprs administration d'une dose d'extrait de 1000 mg/kg,
l'inflammation a t inhibe de 14,60%. Ces rsultats montrent que les corces de
racines de Fagara zanthoxylodes contiennent un principe actif anti-inflammatoire utile
dans le traitement de l'inflammation aigu. Selon Bani et al en 2000, la prsence de
composs triterpniques parmi les constituants de Fagara zanthoxylodes peut expliquer
cette activit anti-inflammatoire.
L'tude de l'activit hmostatique ralise sur le sang humain en tube et sur lame avec
les extraits aqueux et organiques a donn des rsultats positifs. L'extrait butanolique a
t le plus actif au cours de ce test en rduisant de moiti le temps de coagulation du
sang sur lame et de 2/3 en tube. L' activit hmostatique de Fagara zanthoxylodes peut
tre due la prsence de flavonodes prsents dans les extraits de la poudre d'corces
de racines de la plante (Kosuge et al, 1985). D'autres tests plus approfondis doivent tre
envisags par le DMT pour une confirmation de l'activit hmostatique de Fagara
zanthoxylodes.
Nous avons ralis le test antifongique sur des plaques CCM l'aide de la mthode
biautographique. Les extraits ther de ptrole, dichloromthane et mthanolique de
Fagara zanthoxylodes ont ragi positivement. L'extrait ther de ptrole a
considrablement inhib la croissance des souches de Candida albicans, levure
responsable de mycoses chez l'homme, au niveau de la substance dont le Rf = 0.5.
Quant l'extrait dichloromthane, il l'a inhibe au niveau de la substance correspondant
au Rf = 0,68. Les substances qui ont inhib la croissance de Candida albicans possdent
les mmes Rf que celles qui ont t rvles par le ractif de Dragendorff. Selon
Schaller en 1999, l'activit antifongique peut tre due la prsence des alcalodes
prsents dans la plante.
Les diffrents rsultats obtenus montrent que les principes actifs anti-inflammatoires,
antalgiques, hmostatiques, antioxydants et antifongiques prsents dans la plante sont
hydrosolubles; ce qui valide la forme traditionnelle d'utilisation de Fagara zanthoxylodes
dans le traitement des affections courantes.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

113




















CONCLU$ON


























Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

114
CONCLU$ON
L'utilisation des plantes est une ncessit vitale pour les pays en voie de dveloppement.
Notre travail qui a consist tudier les activits biologiques ainsi que la toxicit aigu
de Fagara zanthoxylodes Lam. s'est droul au cours de l'anne 2001-2002 au
laboratoire du Dpartement de Mdecine Traditionnelle de l'Institut National de
Recherche en Sant Publique du Mali.

Le pourcentage de la dcoction a t de 12%. Les rendements des extraits organiques
de Fagara zanthoxylodes ont t de 12%, 4%, 4%, 6%, et 8% respectivement pour
l'actate d'thyle, le butanol, l'ther de ptrole, le dichloromthane et le mthanol.
L'extraction du rsidu puis par les solvants organiques la temprature de 50C et
100C a t respectivement de 9,2% et 4,8%.
1,8% des substances des racines de Fagara zanthoxylodes sont extractibles par
macration l'eau.

Nos travaux ont montr que les extraits aqueux de Fagara zanthoxylodes n'taient pas
toxiques per os la dose de 5 g/kg de mme par voie ip 1 g/kg.

Au cours des tests biologiques, les extraits aqueux et organiques de Fagara
zanthoxylodes ont donn des rsultats positifs.
Nous avons obtenu une bonne activit antioxydante et hmostatique avec les extraits
butanoliques de la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes.
Les effets antalgiques et anti-inflammatoires des extraits aqueux de Fagara
zanthoxylodes ont t dose-dpendants. Aux doses de 1500 mg/kg d'extraits aqueux,
nous avons obtenu respectivement 53% et 52% de la suppression de la douleur et de
l'inflammation.
La meilleure activit fongicide contre Candida albicans, levure responsable de mycoses
chez l'homme, a t obtenue avec l'extrait ther de ptrole.
Les rsultats obtenues peuvent justifier l'utilisation traditionnelle de Fagara
zanthoxylodes en milieu rural.

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

115
Il serait intressant de tester l'activit des fractions chromatographies et isoler les
molcules qui sous-tendent ces diffrentes activits comme cela a t fait pour les
antifongiques; et aussi dfinir les normes de standardisation des extraits.

Nous esprons par ce travail avoir apport notre modeste contribution la valorisation de
la mdecine traditionnelle et une meilleure connaissance scientifique de l'utilisation de
Fagara zanthoxylodes dans le traitement des affections courantes.

Nous ne pouvons terminer ce travail sans lancer un vibrant appel aux hommes pour la
prservation de la nature car une valorisation de nos rsultats passe par une rcolte
importante de racines de Fagara zanthoxylodes. Il est donc ncessaire d'envisager sa
culture.































Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

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REFERENCE$ LOGRAFHQUE$










Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

117
REFERENCE$ LOGRAFHQUE$


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Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

124











ANNEXE

Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

125
ANNEXE

Annexe 1
FrparationIapplication du ractif de Godin :
Solution A : solution thanolique de vanille 1% + solution d'acide perchlorique 3%.
Solution B : solution thanolique d'acide sulfurique 10%.
Gicler la plaque avec le mlange A suivit de la solution B puis chauffer en observant
(Godin.,1954).
Substances dtectes : ractifs polyvalents

Annexe 2
FrparationIapplication du ractif de Draendorff
Solution A : dissoudre 0,85 g de nitrate basique de bismuth, 10 g d'acide tartrique
dans 40 ml d'eau.
Solution B : dissoudre 16 g d'iodure de potassium dans 40 ml.
Au moment de l'emploi, mlangez 5 ml de solution A + 5 ml de solution B + 20 g d'acide
tartrique (Wagner et al., 1996).
Substances dtectes : tches oranges qui disparaissent avec le temps

Annexe 3
Formule nutritionnelle des souris ayant servi l'tude
pharmacodynamique (Traor et al, 1983)
- Farine de mas 50 kg
- Pte d'arachide 20 kg
- Son de mil 17,5 kg
- Lait en poudre 7 kg
- Poudre de poisson 3 kg
- Feuilles de salade piles 2 kg
- Sel de cuisine 0,5 kg
- Eau q.s.p 100 kg


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

126
FCHE $GNALETQUE

TTRE : Etudes des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes
Lam. (Rutaceae)
Auteur : Igor Passi Lysette BOSSOKPI
Anne : 2002
Fays d'oriine : Rpublique Centrafricaine
Ville de soutenance : Bamako (Mali)
Lieu de dpt : Bibliothque de la Facult de Mdecine de Pharmacie et
d'Odonto-stomatologie (FMPOS) BP: 1805. Bamako


Notre tude base sur le dpistage de l'activit biologique des extraits aqueux et
organiques de la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes a donn des
rsultats significatifs. La dtermination de la toxicit aigu par voie orale, des extraits
aqueux de Fagara zanthoxylodes a permit d'obtenir une DL
50
suprieure 5 g/kg; de
mme, la DL
50
par voie intrapritonale est suprieure 1 g/kg.
L'extrait aqueux d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes a montr un effet dose-
dpendant au cours du test antalgique. L'extrait la dose de 1500 mg/kg a inhib la
douleur de 53% chez les souris de faon comparable l'effet de l'indomtacine.
L'activit anti-inflammatoire des extraits aqueux d'corces de racines de Fagara
zanthoxylodes a t galement dose-dpendante. L'extrait la dose de 1500 mg/kg a
montr un pourcentage d'inhibition de l'inflammation de 52% chez les souris. Ces
rsultats montrent que les corces de racines de Fagara zanthoxylodes contiennent un
principe actif anti-inflammatoire utile dans le traitement de l'inflammation aigu.
Tous les extraits de la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes ont ragi
positivement au test hmostatique aux doses de 10g. L'extrait butanolique a t le plus
actif en rduisant de moiti le temps de coagulation du sang sur lame et de 2/3 en tube.
L'extrait butanolique de la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes, la
dose de 100l, a t trs actif au cours du test de l'activit antioxydante.
L'extrait ther de ptrole de la poudre d'corces de racines de Fagara zanthoxylodes a
montr une bonne activit fongicide aux doses de 100g et 300 g contre Candida
albicans, levure responsable de mycoses chez l'homme.

Mots cls : Fagara zanthoxylodes - Extraction - Criblage - Antioxydant - Antifongique -
Antalgique - Hmostatique - Anti-inflammatoire - Toxicit aigu.


Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

127


A$TRACT

Our study based on the tracking of the biological activity of the aqueous and organic
extracts of the powder of barks of roots of Fagara zanthoxylodes gave significant results.
The determination of acute toxicity by oral way, of the aqueous extracts of Fagara
zanthoxylodes allowed to obtain a DL
50
higher than 5 g/kg; in the same, the DL
50
by way
intra-peritoneal is higher than 1 g/kg.
The aqueous extract of barks of roots of Fagara zanthoxylodes showed a dose-
dependent effect during the antalgic test. The extract with the dose of 1500 mg/kg
inhibited the pain of 53% in the mice of way comparable with the effect of the
indometacin. The anti-inflammatory drug activity of the aqueous extracts of barks of
roots of Fagara zanthoxylodes was also dose-dependent. The extract with the dose of
1500 mg/kg showed a percentage of inhibition of the inflammation of 52% in the mice.
These results show that the barks of roots of Fagara zanthoxylodes contain an active
ingredient useful anti-inflammatory drug in the treatment of the acute inflammation.
All the extracts of barks of roots of Fagara zanthoxylodes reacted positively to the
haemostatic test with the dose of 10g. The extract butanolic was most active by
reducing half time of coagulation of blood on blade and 2/3 out of tube.
The extract butanolic of barks of roots of Fagara zanthoxylodes to the dose of 100g
was very active during the test of the antioxidant activity.
The extract ether petroleum of the powder of barks of roots of Fagara zanthoxylodes
showed a good antifungal activity with the dose of 100g and 300g against Candida
albicans, yeast responsible for mycoses at the man. These various biological activities
obtained can explain the traditional use of Fagara zanthoxylodes in the treatment of the
oral affections.

Key-words : Fagara zanthoxylodes - Extraction - Screening - Antioxidant - Antifungal -
Antalgic - Hemostatic - Anti-inflammatory - Acute toxicity





Etude des activits biologiques de Fagara zanthoxylodes

128






]e jure en prsence des matres de la facult, des conseillers de l'ordre
des pharmaciens et de mes condisciples :
D'honorer ceux qui m'ont instruit dans les prceptes de mon art et de
leur tmoiner ma reconnaissance en restant fidle leur
enseinement;

D'exercer dans l'intrt de la $ant Fublique ma profession, avec
conscience et de respecter non seulement la lislation en viueur mais
aussi les rles de l'honneur, de la probit et du dsintressement;

De ne jamais oublier ma responsabilit et mes devoirs envers le malade
et sa dinit humaine.

En aucun cas, je ne consentirai utiliser mes connaissances et mon
tat pour corrompre les murs et favoriser les actes criminels.

Que les hommes m'accordent leur estime si je suis fidle mes
promesses.

Que je sois couvert d'opprobre et mpris de mes confrres si j'y
manque. ]e le jure.