Captulo 8 - ABSORO E TRANSLOCAO DE HERBICIDAS

Rubem Silvrio de Oliveira Jr. e Marcos Antonio Bacarin

Resumo: Com exceo dos herbicidas que apresentam ao fitotxica de contato, os demais herbicidas devem ser absorvidos e translocados nas plantas para exerceram seu papel. A absoro pode ocorrer por meio de estruturas vegetais antes da emergncia, de folhas e de caules. Os processo de absoro dependem de associaes entra caractersticas fsico-qumicas das clulas vegetais e dos herbicidas, principalmente no que se refere afinidade com membranas celulares. Os mecanismos de transporte pela membrana variam entre os herbicidas, podendo ser passivos ou ativos. A absoro e a translocao de herbicidas aplicados s folhas influenciada por diversas caractersticas anatmicas e fisiolgicas das plantas, alm de caractersticas qumicas das formulaes dos herbicidas, as quais so discutidas nesse captulo.

1. Absoro de herbicidas aplicados ao solo

Absoro pelas partes areas entre a germinao e a emergncia A absoro atravs de estruturas vegetais jovens entre a germinao e a emergncia um stio de entrada importante para muitos herbicidas aplicados ao solo que so ativos em sementes em germinao ou em pequenas plntulas. A parte area, antes da emergncia, tem uma cutcula muito pouco desenvolvida, praticamente desprovida de camadas de cera, tornando-a mais permevel aos herbicidas, sendo uma rota de entrada particularmente importante para a entrada de herbicidas em muitas espcies de gramneas. Alm disso, a faixa de Caspary no est presente nestes tecidos. Alta presso de vapor dos herbicidas tende a favorecer a absoro atravs dessas estruturas (Barrentine & Warren, 1971). Em geral, as gramneas tm mostrado maior absoro de herbicidas por essa via do que as dicotiledneas. Exemplos de famlias de herbicidas com toxicidade para gramneas que so absorvidos pela parte area em emergncia so apresentados na Tabela 1. Em geral, os herbicidas que penetram em plntulas atravs do hipoctilo e da radcula tambm causam injrias nestas regies. Tabela 1. Famlias de herbicidas e exemplos de ingredientes ativos que podem ser absorvidos no solo pelas partes areas emergentes. Famlias qumicas Herbicidas Acetanilidas Acetochlor, alachlor, butachlor, metolachlor Difenilsteres Oxyfluorfen Dinitroanilinas Trifluralin, pendimethalin Tiocarbamatos EPTC, butylate, molinate Fonte: Compilado de Dawson & Appleby (1994) e Rodrigues & Almeida (1998). Movimento radial de herbicidas A entrada pelas razes no to limitada quanto pelas folhas, uma vez que nenhuma camada significativa de cera ou cutcula est presente nos locais onde a maior parte da absoro ocorre. A rota mais importante de entrada a passagem do herbicida junto com a gua atravs dos plos radiculares nas extremidades das razes. Os plos radiculares so responsveis por um aumento significativo da rea disponvel para a absoro de gua e de herbicidas. As razes so rgos responsveis pela sustentao das plantas e pela absoro de gua e sais minerais a partir do solo. Caracterizam-se por apresentarem epiderme desprovida de cutcula, embora em algumas espcies possa ocorrer a cutinizao da parede celular do lado mais externo das clulas da epiderme. Embora no exista nenhuma barreira cuticular na zona dos plos radiculares, existe uma barreira lipdica localizada na endoderme da raiz. Nesses tecidos, todas as paredes radiais contm uma banda fortemente impregnada com suberina (faixa de Caspary), e esta barreira conhecida por ser impermevel gua. Na endoderme, a gua que se move em direo ao

xilema deve penetrar no simplasto. O que acontece aos herbicidas neste ponto no est completamente claro. Sabe-se, no entanto, que a faixa de Caspary no est presente nos pices radiculares de clulas endodrmicas jovens e na regio basal de razes laterais em desenvolvimento (Luxov & Champorov, 1992), o que pode representar uma importante rota de passagem dos herbicidas do apoplasto para o simplasto (Figura 1).

Figura 1. Corte longitudinal da ponta da raiz, indicando o movimento pelo simplasto e apoplasto. Fonte: Malavolta et al. (1989).

Penetrao no simplasto Para que um soluto entre ou saia do protoplasto da clula ou de uma organela interna, ele deve atravessar a membrana celular pelo menos uma vez. Dependendo da natureza do soluto, duas rotas para o movimento atravs da membrana podem ser possveis; uma passiva, relacionada somente diferena de concentrao do soluto entre dois pontos diferentes, ou seja, a favor do gradiente de potencial eletroqumico, e uma outra ativa, com gasto de energia metablica, pois o movimento de partculas ocorre contra o seu gradiente de potencial eletroqumico. Transporte passivo Considera-se que o movimento da maioria dos herbicidas pela membrana seja passivo, por difuso simples atravs da bicamada lipdica, embora alguns ocupem carregadores bastante especficos. A membrana plasmtica uma estrutura lipoprotica, extremamente fina (8 a 10 nm), que separa o protoplasto do meio exterior. Constitui uma barreira livre movimentao de solutos, controlando o fluxo destes para dentro e para fora das clulas. Consiste de uma dupla

camada lipdica com o exterior hidroflico e o interior lipoflico, na qual encontram-se imersos grupamentos proticos. Salisbury & Ross (1990) postularam quatro conceitos bsicos com respeito difuso passiva atravs da membrana plasmtica, os quais podem ser considerados fundamentais para o entendimento do processo: As clulas devem estar em funcionamento normal. Quando em funcionamento anormal, a permeabilidade aumenta para todos os solutos. Molculas de gua e gases dissolvidos (O2, CO2, N2) penetram livremente nas clulas. Molculas hidroflicas penetram atravs das membranas numa taxa inversamente relacionada ao seu tamanho molecular. Molculas lipoflicas penetram as membranas numa taxa diretamente relacionada a sua solubilidade lipoflica, e esta taxa independente de seu tamanho molecular. Movimento de solutos atravs da membrana por difuso Se um soluto suficientemente solvel em lipdeos, o movimento direto atravs da bicamada lipdica da membrana pode ser possvel. Para que este tipo de movimento acontea, um soluto presente na soluo aquosa deve primeiro se dissolver no interior hidrofbico da membrana, mover-se pela bicamada, e ento reentrar a soluo aquosa no outro lado da membrana. Quando isto acontece por difuso, o movimento de soluto atravs da membrana ocorre a partir de uma maior concentrao para uma menor concentrao numa taxa descrita por Briskin (1994) como: = DjKj(C0-Ci)/x Onde: o fluxo de soluto atravs da membrana; Co e Ci so respectivamente as concentraes externa e interna do soluto em relao membrana; Dj o coeficiente de difuso do soluto na membrana; Kj o coeficiente de partio e x representa a espessura da bicamada lipdica. O gradiente de concentrao do herbicida atravs da membrana representa, portanto, o tamanho da fora motriz que move o herbicida atravs da membrana. Alm do gradiente de concentrao, um outro fator muito importante para a difuso o coeficiente de partio de herbicida dentro da membrana, que indica maior ou menor facilidade de passagem do soluto atravs da membrana. Herbicidas lipoflicos so capazes de se difundir mais livremente do que os hidroflicos. As propriedades lipoflicas/hidroflicas dos herbicidas podem ser estimadas por meio da determinao do seu coeficiente de partio octanol-gua (Kow). Critrios experimentais que suportam a hiptese da difuso passiva de herbicidas incluem a saturao da absoro aps o perodo de equilbrio das concentraes, absoro de herbicidas em taxas linearmente relacionadas s concentraes externas, rpido efluxo do herbicida, coeficiente de absoro em funo da temperatura (Q10) menor do que 2 e insensibilidade a inibidores metablicos (Sterling, 1994). Molculas de herbicida em contato com a raiz parecem se mover para dentro por simples difuso. Price & Balke (1982) demonstraram, por exemplo, que a concentrao de atrazine dentro de razes destacadas de Abutilon theophrasti se torna igual concentrao externa em 30 minutos e que no se acumulam internamente concentraes acima da concentrao externa. Alm disso os valores de Q10 para a absoro de atrazine neste tecido foram entre 1,3 e 1,4, sugerindo uma movimento por difuso passiva.

Transporte ativo Para os ons e para as substncias que contm grupamentos polares, o ambiente hidroflico do interior da bicamada lipdica representa uma barreira significativa ao movimento atravs da membrana. O movimento transmembrana desses solutos envolve necessariamente a atividade de protenas que funcionam como sistemas de transporte. Estes sistemas associados s membranas podem ser classificados como bombas, carregadores ou canais. Bombas inicas Pelo termo bomba inica, entende-se uma protena complexa ligada membrana, imersa na sua camada lipdica e capaz de transportar (bombear) ons do ambiente exterior para dentro da clula ou de seus componentes. Uma propriedade dessas bombas a sua capacidade de transportar ons contra um gradiente eletroqumico, com gasto de energia metablica (Kolek & Holobrad, 1992). Embora algumas protenas componentes da membrana tenham funes relacionadas aos processos metablicos que ocorrem dentro das plantas, outras esto envolvidas no transporte de substncias atravs da membrana. A mais importante destas protenas a H+ATPase, envolvida no estabelecimento e na manuteno de um gradiente de ons H+ entre o citossol e o meio externo. As bombas, por serem sistemas de transporte que unem reaes qumicas de liberao de energia (por exemplo a hidrlise de ATP) ao movimento transmembrana de uma substncia so normalmente chamadas sistemas de transporte primrio (Figura 2). Considera-se que as bombas inicas possam transportar qualquer on em uma direo e que so capazes de formar um potencial eltrico negativo na membrana. A extruso de H+ por meio dessas bombas, com gasto de ATP, gera um gradiente de pH ou de cargas eltricas, os quais so considerados atualmente como as foras motrizes para o transporte de ctions, nions e de substncias orgnicas como aminocidos e sacardeos (Kolek & Holobrad, 1992). Com o funcionamento da ATPase, um gradiente de pH de 1,7 unidades (ou mais) estabelecido entre os lados da membrana na maioria das clulas (o lado externo membrana tem um pH entre 5,0-5,5, ao passo que o citoplasma tem pH 7,2-8,0). Segundo Dan Hess (1994a), o gradiente de ons H+ e os gradientes eletroqumicos so importantes para muitos processos nas clulas vegetais, incluindo o movimento de alguns herbicidas atravs das membranas. Carregadores Outras protenas de transporte em membranas so os carregadores e os canais. Estes sistemas de transporte no esto conectados diretamente a reaes qumicas, e gastam indiretamente a energia de gradientes eletroqumicos produzidos pelo transporte ativo primrio, sendo denominados sistemas de transporte secundrios. No caso dos carregadores, o movimento transmembrana ocorre em face de uma srie de mudanas conformacionais na protena, associadas ligao, translocao atravs da membrana e liberao da substncia. Os carregadores podem mover substncias inicas e no inicas atravs da membrana. Se apenas uma substncia move-se atravs da membrana, denominado de carregador uniporte (Figura 2). O movimento de uma substncia pode estar ligado ao movimento de uma outra substncia (usualmente ons H+) na mesma direo (simporte) ou em direo oposta (antiporte) (Figura 2).

At o momento, sabe-se que apenas trs herbicidas movem-se atravs da membrana plasmtica por intermdio de processos mediados por carregadores. So eles o paraquat, o 2,4D e o glyphosate. Segundo Sterling (1994), as duas caractersticas que indicam o envolvimento de carregadores na absoro de herbicidas so o acmulo contra o gradiente de concentrao e a reduo da absoro na presena de inibidores metablicos.

Figura 2. Acoplamento energtico para transporte de solutos (S) atravs da ao dos sistemas de transporte primrio e secundrio. O transporte ativo primrio acopla uma reao qumica como a hidrlise do ATP (substrato) a ADP (produto) ao transporte de prtons atravs da membrana. O potencial eltrico e de pH atravs da membrana podem ser utilizados pelos sistemas de transporte secundrios tais como o uniporte, antiporte e a difuso atravs de canais. Fonte: Briskin (1994). Absoro de 2,4-D Donaldson et al. (1973) foram os primeiros a demonstrar que a absoro de 2,4-D, em razes de cevada, era dependente do suprimento de energia metablica. Posteriormente, Rubery (1977) concluiu que havia um componente saturvel mediado por carregadores na absoro do 2,4-D, alm da difuso passiva do cido no dissociado. Estas evidncias suportam, de forma consistente, a hiptese de que exista um carregador envolvido no mecanismo de movimentao do 2,4-D atravs das membranas. Absoro de paraquat Em soluo aquosa, o paraquat existe na forma de ction divalente, sendo improvvel que ele se difunda passivamente atravs da bicamada lipdica das membranas

celulares. At recentemente, no entanto, poucas evidncias tinham sido mostradas para um mecanismo de transporte do paraquat em membranas de clulas vegetais. Evidncias recentes (Hart et al., 1992) sugerem que o paraquat absorvido por clulas da epiderme e do crtex radicular de razes de milho via um sistema mediado por protenas, que funciona normalmente no transporte de diaminas atravs da membrana. Neste trabalho, os autores propem que a putrescina e o paraquat compartilham um sistema de transporte comum na plasmalema. A especificidade de ligao ao substrato parece estar relacionada distribuio de cargas positivas dos grupamentos amina. As distncias de cargas das poliaminas (putrescina e cadaverina) so similares do paraquat e ambas inibem competitivamente a absoro de paraquat. Experimentos recprocos tambm mostram que o paraquat pode inibir o componente saturvel da absoro da putrescina e da cadaverina. A fora motriz para este carregador parece ser a diferena de potencial eltrico atravs da membrana plasmtica (DiTomaso et al., 1992), que est entre -120 e -200 mV. Estes mesmos estudos mostram que o sistema de transporte de poliaminas no o mesmo sistema carregador usado para ctions divalentes inorgnicos (como o clcio e o magnsio). A absoro de paraquat por um sistema que normalmente funciona no transporte da putrescina (que uma substncia biologicamente abundante em clulas de plantas) poderia explicar a natureza praticamente no seletiva deste herbicida. Absoro do glyphosate O glyphosate inibe a absoro de fosfato em Vicia faba e protege, parcialmente, o transporte de fosfato da inibio pelo cido fosfonofrmico. Variando-se a concentrao, observa-se que a absoro de glyphosate exibe uma fase saturvel em baixas concentraes do herbicida (0,5 a 3 M), e uma outra fase de absoro linear em concentraes mais altas (maiores que 100 M). A absoro de glyphosate inibida por inibidores metablicos, como o cido para-cloromercuribenzeno sulfnico, azida sdica e carbonil-cianeto-m-clorofenilhidrazona, sendo que a inibio muito maior em baixas concentraes do que em altas concentraes do produto. A cintica de absoro indica que o componente saturvel do transporte de glyphosate competitivamente inibido tanto por fosfato quanto pelo cido fosfonofrmico. Conclui-se que o carregador de fosfato capaz de ligar-se ao glyphosate e transport-lo atravs da membrana (Denis & Delrot, 1993).

Canais inicos Os canais so similares aos carregadores uniporte no que diz respeito mediao do transporte de um nico soluto atravs da membrana, mas diferem deste em relao ao mecanismo atravs do qual o movimento transmembrana ocorre. Neste caso, o movimento ocorre atravs de um poro proteinceo cuja abertura e fechamento so intimamente relacionados a sinais qumicos ou ambientais (Hedrich & Schroeder, 1989) e permitem um movimento de difuso de ons favor de seus gradientes eletroqumicos. Esta diferena no transporte entre carregadores e canais inicos explica porque o transporte de solutos pelos canais mais rpido do que o observado por carregadores. Enquanto os carregadores podem estar envolvidos no transporte de ons ou de molculas orgnicas, os canais so tipicamente envolvidos apenas no transporte de ons.

2. Translocao de herbicidas aplicados ao solo Translocao a curta distncia (da epiderme ao estelo) Compostos como os inibidores de crescimento aplicados em pr-emergncia precisam mover-se apenas poucas camadas de clulas para chegar ao seu stio de ao. Este movimento pode acontecer pelo apoplasto ou pelo simplasto. O movimento de herbicidas nas paredes celulares pode ser por difuso com o fluxo de gua. Uma vez dentro da clula, o movimento via simplasma dos herbicidas pode ser alcanado atravs de conexes citoplasmticas (plasmodesmas). Embora o movimento atravs dos plasmodesmas no tenha sido provado especificamente para o caso dos herbicidas, j foi mostrado que vrios outros solutos se movimentam dessa forma (Salisbury & Ross, 1990). possvel tambm que em alguns casos os herbicidas possam ser absorvidos diretamente para o interior do xilema e floema, quando penetram pelas extremidades de razes, atravs de plos radiculares, onde ainda no houve a diferenciao da endoderme. Translocao a longa distncia (xilema) Assumindo que o herbicida no imobilizado na folha ou raiz, ele estar disponvel para movimento a longa distncia na planta utilizando os sistemas de transporte do xilema e do floema. Em ambos os casos, os herbicidas dissolvidos movem-se com o fluxo em massa da gua, sendo importante, portanto, entender como esse processo ocorre. A fora motriz do fluxo longitudinal de gua no xilema a diferena na presso hidrosttica, gerada a partir da suco de gua pelo parnquima foliar na direo do menor potencial de gua no xilema conectado s partes areas, causado pela transpirao. A transpirao influenciada por determinadas condies ambientais, dentre as quais a umidade relativa, que deve ser menor do que a umidade de saturao para que se inicie o processo. Alternativamente, em plantas de pequeno porte, sob alta umidade de solo e umidade relativa prxima saturao, a gua pode se mover como resultado da presso radicular (Dan Hess, 1994b). 3. Absoro foliar Cutcula A cutcula uma camada muito fina (espessura varia de 0,1 a 10 m) que recobre as partes areas no suberizadas dos vegetais. composta de cutina, cera epicuticular, cera embebida e pectina. O corpo da cutcula consiste de cutina, que composta primariamente de cidos graxos polimerizados hidroxilados. Na cutina encontram-se grupos carboxil e hidroxil livres, existindo, portanto, um balano lipo/hidroflico global. O comprimento da cadeia carbnica dos cidos graxos na cutina varia de 16 a 18 tomos de carbono. As ceras embebida e epicutilar so principalmente alcanos de cadeia longa (C12 a C35), com uma pequena porcentagem (10-20%) de lcoois graxos, aldedos graxos e cetonas graxas. Para as ceras, o comprimento da cadeia carbnica varia de 17 a 35 carbonos. A cera pode estar presente na forma cristalina ou amorfa. A cutcula, como um todo, tem carga lquida negativa em pH fisiolgico. O pH isoeltrico (pH onde a carga lquida zero) por volta de 3 (Dan Hess, 1994a). Formulaes de herbicidas com caractersticas lipoflicas

De modo geral, as formulaes de herbicidas solveis em leo ou emulsificadas em gua so capazes de penetrar na barreira cuticular por simples difuso atravs dos componentes lipoflicos predominantes. A velocidade do processo depende de propriedades ligadas ao transporte (solubilidade ou permeabilidade dentro da cutcula) e da fora motriz (gradiente de concentrao). A difuso de herbicidas atravs da camada epicuticular ocorre primariamente atravs daquelas ceras que esto no estado amorfo. Sabe-se, tambm, que a cutcula mais fina em alguns locais da superfcie foliar (por ex. na base dos plos epidrmicos e tambm sobre as clulas-guarda), caracterizando essas reas como stios de penetrao preferenciais para formulaes de herbicidas lipossolveis (Dan Hess, 1994a). Formulaes de herbicidas com caractersticas hidroflicas As formulaes com carter mais hidroflico tambm so capazes de penetrar nas plantas atravs da superfcie cuticular. No entanto, devido a sua baixa permeabilidade dentro da cutcula, sua taxa de movimento significativamente menor do que os herbicidas lipoflicos. Esta penetrao reduzida geralmente resulta em uma menor absoro total. As ceras epicuticulares constituem, com certeza, a barreira mais significativa para a absoro via foliar de formulaes de herbicidas com carter hidroflico. Uma vez que a difuso ocorreu atravs da cera epicuticular, existem componentes polares (hidroflicos) na cutcula para facilitar o processo de absoro. Os componentes cuticulares hidroflicos encontram-se principalmente na cutina com seus grupamentos livres hidroxil/carboxil e nas faixas de pectina. A cutcula de forma global hidratada, e esta gua estrutural tem grande importncia para o componente hidroflico da difuso de herbicidas solveis em gua. Somado penetrao natural por difuso, existem ainda interrupes na camada cuticular causadas por chuvas, insetos, ventos ou outros agentes que podem aumentar a absoro dos herbicidas solveis em gua. Estmatos Com relao penetrao de herbicidas, os estmatos podem potencialmente estar envolvidos de duas formas. Primeiro, a cutcula sobre as clulas-guarda parece mais fina e mais permevel a substncias do que a cutcula sobre as outras clulas epidrmicas. Em segundo lugar, a soluo pulverizada poderia, em tese, mover-se atravs do poro de um estmato aberto para dentro da cmara estomtica, e da para o citoplasma das clulas do parnquima foliar. Embora sejam encontrados trabalhos que, avaliando gentipos diferentes de uma mesma espcie com relao absoro de um herbicida, tenham demonstrado uma correlao direta entre freqncia estomtica e sensibilidade, possvel que a menor espessura da cutcula sobre as clulas-guarda seja o fator de maior importncia neste caso, e no propriamente o aumento da absoro pela penetrao direta pelos estmatos. A penetrao estomtica mais um processo de fluxo em massa do que um processo de difuso. Pontos importantes que devem ser considerados em relao absoro so a tenso de superfcie do lquido, o ngulo de contato produzido pelo lquido na superfcie da planta e a morfologia e composio qumica da parede do poro estomtico. A penetrao pelos poros estomticos pode ocorrer se a tenso superficial da soluo pulverizada tal que o molhamento completo ocorre. Neste caso a tenso de superfcie do lquido menor do que a tenso crtica da superfcie da folha (Schnherr & Buckovac, 1972). Quando isto no ocorre, a

penetrao pelo poro estomtico s pode ocorrer se o ngulo de contato entre a gota pulverizada e a superfcie da cutcula menor do que o ngulo da parede do poro estomtico. Como concluram diversos autores, a penetrao estomtica de gotas pulverizadas a partir de uma soluo baseada em gua, mesmo com a adio de surfactantes, provavelmente um processo de menor importncia em aplicaes de herbicidas a nvel de campo. A infiltrao pelos estmatos, portanto, no possvel a menos que a tenso superficial da soluo pulverizada seja significativamente reduzida pelo uso de surfactantes na formulao ou no tanque. A maioria dos surfactantes atualmente em uso atua aumentando a penetrao cuticular, e no consegue reduzir a tenso superficial adequadamente para permitir a infiltrao estomtica. Recentemente, no entanto, o desenvolvimento de surfactantes a base de organosilicones proporcionou um avano nesse ponto. Eles so capazes de reduzir a tenso superficial ao ponto da infiltrao pelo estmato ocorrer. Dois tipos diferentes de mecanismos de aumento na absoro de ingredientes ativos foram mostrados para os surfactantes a base de organosilicones. Em primeiro lugar, eles podem induzir um fluxo em massa da soluo pulverizada atravs do poro estomatal. Alm disso, podem direta, ou indiretamente, aumentar a penetrao cuticular. Alguns trabalhos tm demonstrado que este tipo de surfactante pode aumentar inclusive a translocao relativa do produto aplicado (Knoche, 1994). Mesmo aps a infiltrao estomtica, o herbicida ainda tem que penetrar uma camada fina de cutcula que existe na superfcie das clulas da cavidade abaixo dos estmatos. Fatores que afetam a absoro foliar Alm da tenso superficial da soluo pulverizada e da lipofilicidade da soluo, j discutidas, alguns pontos importantes que influenciam a absoro foliar de herbicidas so listados a seguir: Interceptao Com relao interceptao do produto pulverizado pelas folhas, a rea foliar exposta e a orientao das folhas com respeito s gotas pulverizadas so fatores determinantes; isto , quanto maior a rea foliar interceptando o produto aplicado, maior a chance dele ser absorvido. Reteno A molhabilidade inerente da superfcie foliar, determinada principalmente pela cerosidade, pela estrutura fsica caracterstica da cutcula, e pela pilosidade (nmero de tricomas) da superfcie foliar afeta a reteno do produto sobre a superfcie foliar. Tambm deve-se considerar o intervalo de tempo entre a aplicao e chuvas aps a aplicao. Concentrao da gota pulverizada Em geral gotas menores e baixos volumes de aplicao (gotas concentradas) tendem a ser melhor absorvidas que as gotas maiores em maior volume de aplicao (gotas diludas). Considera-se que o motivo seria a maior concentrao por unidade de rea foliar coberta pelo herbicida produzindo uma maior fora motriz para difuso atravs da cutcula (Dan Hess, 1994a). Fatores ambientais

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A maioria dos estresses ambientais induz a uma mudana na composio e estrutura da cutcula, e estas mudanas podem influenciar posteriormente a penetrao de herbicidas. Considera-se que podem afetar a absoro foliar dos herbicidas fatores ambientais que ocorrem imediatamente antes ou depois da aplicao. Aumento da intensidade luminosa e baixa umidade do solo tendem a induzir a sntese de cutcula, com um conseqente aumento do carter lipoflico da superfcie foliar. A umidade relativa do ar tem tambm um papel importante na hidratao da cutcula e na redissoluo de sais de herbicidas na superfcie foliar. 4. Translocao a longa distncia - floema A translocao via floema um aspecto importante na atividade de muitos herbicidas. Aqueles aplicados s folhas podem alcanar as razes, rizomas ou tubrculos de plantas perenes apenas se forem translocados pelo floema. Se a cobertura das folhas pela pulverizao tambm for incompleta, a redistribuio a partir das folhas tratadas para outras partes da parte area (como meristemas apicais ou axilares) tambm pode ser importante (Devine & Hall, 1990). A teoria aceita para o transporte pelo floema a proposta por Mnch, chamada de teoria do fluxo de presso osmtica. Consiste basicamente na formao de um gradiente de concentrao, decorrente do aumento da concentrao de solutos na fonte (por sntese ou absoro) e da reduo da concentrao de solutos no dreno (por efluxo seguido por metabolismo ou compartimentalizao). A alta concentrao de solutos (dos quais mais de 90% constitui-se de sacarose) na fonte causa um influxo de gua para dentro do floema, resultando num aumento da presso de turgor. A gua, com os solutos nela contidos, empurrada atravs do floema por este aumento de presso. Portanto, o fluxo dependente da concentrao de solutos no incio da rota (considerado geralmente como sendo no complexo de clulas companheiras/elementos crivados no dreno). Transporte de sacarose pela membrana A sacarose pode cruzar a plasmalema atravs de 3 mecanismos: a) por difuso passiva; b) atravs de um carregador de baixa afinidade, no saturvel e c) atravs de um carregador protico de alta afinidade, saturvel, normalmente identificado como o simporte sacarose/H+. A difuso passiva eqivale a um movimento no saturvel, que depende do gradiente de concentrao de sacarose entre os dois lados da membrana. O transporte pelo mecanismo de baixa afinidade mais rpido do que o previsto por difuso, pH-dependente e sensvel a inibidores metablicos. Pode representar uma protena acoplada membrana com superfcie hidroflica ou do tipo canal, que facilita o transporte de sacarose (Stanzel et al., 1988). O carregador de alta afinidade depende da fora de movimento de prtons gerada pela bomba de H+/ATPase e pode transportar sacarose contra um gradiente de concentrao. O carregador se liga aos substratos (H+ e sacarose), passando por uma mudana conformacional, liberando-os no outro lado da membrana. Nem todos os mecanismos acima descritos foram observados em todas as espcies e tecidos examinados (Reinholdt & Kaplan, 1984). O exame dos mecanismos de transporte do floema revela um controle interno complexo sobre a entrada de sacarose no complexo clulas companheiras-elementos crivados. Anlogos estruturais apenas levemente diferentes da sacarose no so transportados pelo

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carregador de sacarose de alta afinidade. Claramente, este carregador no contribui para o transporte de herbicidas atravs da membrana (Devine & Hall, 1990). Caractersticas qumicas das molculas herbicidas que influenciam a translocao pelo floema Lipofilicidade (Kow) A maioria dos pesticidas translocados so herbicidas contendo uma funo cida. No entanto, outras classes de compostos contm alguns exemplos de pesticidas mveis pelo floema, e entre esses existem algumas substncias polares, no ionizveis, dos quais os exemplos mais bem estudados so o oxamyl e o aminotriazole (Bromilow et al., 1987). Neste trabalho, os autores examinaram os fatores determinantes da translocao e da distribuio dentro das plantas de uma srie de substncias no-ionizveis, com grande variao em termos de lipofilicidade. Concluram que existem boas evidncias de que as substncias qumicas esto continuamente reciclando do floema para o xilema (Figura 3). A pressuposio bsica desta hiptese (chamada de permeabilidade intermediria), de que a sada de substncias a partir do floema ocorre principalmente por difuso atravs da plasmalema e no por meio de conexes plasmodesmticas, suportada pelas taxas diferentes nas quais as substncias deixam o floema. Em trabalhos anteriores, os autores sugeriram que substncias mais lipoflicas poderiam atravessar a membrana lentamente, mas mesmo se seus coeficientes de permeabilidade fossem adequados para o transporte pelo floema, no seria de se esperar que o transporte de longa distncia de tais substncias fosse eficiente, uma vez que elas so fortemente particionadas em constituintes das plantas como a lignina. Conclui-se que reteno no floema aumenta a medida que o Kow diminui. Presena de grupos ionizveis/potencial de ionizao (pKa) Alguns herbicidas podem se mover atravs da membrana plasmtica contra um gradiente de concentrao. A maioria desses herbicidas tem um grupo ionizvel (ex. grupo cido carboxlico COOH) como parte integrante da molcula. O lado externo aquoso das clulas tem um pH mais baixo do que o lado interno. Esta diferena de pH criada pela ao da bomba de ons de H+/ATPase. Dependendo do pKa do grupo ionizvel do H, um equilbrio ser estabelecido entre a forma ionizada (mais solvel em gua) e a forma protonada (mais lipossolvel) em cada lado da membrana. O pKa o pH onde metade das molculas est protonada e metade ionizada. Por causa da diferena de pH entre o lado interno e externo da clula, a forma protonada ser mais abundante no lado interno. A forma protonada prontamente se difunde para o interior da clula, onde a forma ionizada (solvel em gua) tem dificuldade para se difundir para fora da clula. Exemplos de herbicidas que possuem diferentes tipos de grupos ionizveis so bentazon, chlorsulfuron, 2,4-D e sethoxydim. Os herbicidas que possuem uma funo cida so transportados pelo floema, e foi sugerido (Bromilow et al., 1990) que estes compostos deveriam estar penetrando no floema por intermdio de um carregador especfico que reconhece um grupamento cido carboxlico. Aparentemente, outras classes de compostos tambm podem penetrar rapidamente no simplasto (Peterson & Edgington, 1976) mas, apesar disso, poucos deles so efetivamente transportados no floema.

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Tyree et al. (1979) desenvolveram o importante conceito de que muitos compostos so capazes de entrar no simplasto, mas apenas aqueles que possuem taxas de penetrao limitadas poderiam ser retidos durante tempo suficiente para que o transporte a longa distncia via floema pudesse ocorrer. Aqueles compostos que se movem livremente atravs das membranas rapidamente alcanariam um equilbrio entre xilema e floema, e desta forma moveriam-se predominantemente na direo do fluxo transpiratrio, em funo do fluxo de gua muito maior (Figura 3). 5. Padres gerais de translocao de herbicidas O balano entre translocao pelo floema e pelo xilema que determina o padro de distribuio dos herbicidas. Compostos de amnia quaternria podem ser translocados pelo floema, mas os herbicidas dessa classe, tais como o paraquat, causam um dano to rpido s folhas tratadas na presena de luz que o transporte desprezvel. O sumrio de vrias observaes permite que se conclua que: 1) Os herbicidas diferem nas suas caractersticas de translocao (Tabela 2). Estas diferenas podem ser atribudas a diferenas fsico-qumicas entre herbicidas ou aos fatores fisiolgicos diferenciais dos herbicidas nos tecidos. 2) Mesmo os herbicidas considerados como altamente mveis pelo floema exibem algum movimento no apoplasto (Dewey & Appleby, 1983) (Figura 4). 3) A translocao de um herbicida especfico pode variar entre espcies de plantas. Em alguns casos isto pode ser atribudo a diferenas no metabolismo do herbicida, resultando em espcies moleculares com diferentes propriedades fsico-qumicas (Bromilow et al., 1990). possvel que tais diferenas sejam devido a diferenas anatmicas ou fisiolgicas entre espcies, particularmente em relao ao transporte pelo floema.

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Tabela 2. Padro de translocao de alguns herbicidas. Compilado de Dan Hess (1994c).

A) QUANDO APLICADOS NAS FOLHAS Mveis no xilema e floema 2,4 D amitrole glyphosate imazaquim picloram sulfometuron Mveis apenas no xilema atrazine diuron metribuzin norflurazon propanil Pouco mveis ou imveis diclofop-methyl diquat lactofen paraquat

B) QUANDO APLICADOS NO SOLO Mveis rapidamente no xilema atrazine clomazone diuron imazaquin metribuzin picloram simazine terbacil Pouco mveis ou imveis no xilema DCPA orizalin oxyflurofen pendimethalin trifluralin

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Figura 3. Diagrama mostrando porque herbicidas lipoflicos, no ionizveis, no so capazes de se translocarem efetivamente para longe da folha-fonte. Assumir que a bainha vascular est localizada no pecolo foliar e que o herbicida permanece no xilema, floema e parnquima associado por 2 minutos em cada um. Fonte: Dan Hess (1985).

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Figura 4. Diagrama mostrando a possvel transferncia de herbicidas e sacarose do simplasto atravs do apoplasto at o complexo de clulas companheiras/elementos crivados (CC-EC). O herbicida no apoplasto pode reentrar o mesfilo, entrar no complexo CC-EC, ou se mover lateralmente no apoplasto. Mostra-se que a sacarose se difunde a partir do mesfilo para o apoplasto de uma maneira similar ao herbicida, mas a presena de carregadores de sacarose nas membranas do complexo CC-EC favoreceria a rpida entrada de sacarose no floema. Consequentemente, existe pouco movimento apoplstico de sacarose, mas maior translocao apoplstica de herbicidas. Fonte: Adaptado de Devine & Hall (1990).

6. Absoro pelo caule O grau de penetrao atravs do caule varia consideravelmente dependendo das caractersticas de crescimento e do estdio de desenvolvimento da planta. Os herbicidas so prontamente absorvidos pelos tecidos jovens no diferenciados do caule, de modo semelhante ao que ocorre nas folhas. No entanto, comparado s folhas, o caule apresenta uma rea foliar bastante limitada. O movimento atravs da casca de plantas lenhosas muito diferente. A periderme, tecido protetor que toma o lugar da epiderme depois que ela morre, composta de felognio, sber e feloderme. O sber composto por clulas altamente compactadas destitudas de espaos intercelulares e, quando maduras, destitudas de protoplasma. Estas clulas contm tanino e tm paredes paredes altamente suberizadas. Outros constituintes que podem ser encontrados na periderme so cidos graxos, lignina, celulose e terpenos (Buckovac, 1976).

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Em funo de sua estrutura e composio, a periderme exibe uma baixa permeabilidade gua e s substncias qumicas aplicadas s folhas, especialmente aquelas de natureza polar. Qualquer caracterstica que facilite a penetrao atravs da casca pode ser uma rota potencial de absoro. As lenticelas, por exemplo, so canais radiais que podem atravessar parcial ou totalmente a camada de cortia. As lenticelas e as fissuras que se desenvolvem na cascas aps o crescimento secundrio podem servir como portas de entrada na absoro pelo caule em plantas adultas. Considerando-se a casca como uma grande barreira para a absoro de herbicidas em plantas lenhosas, Buckovac (1976) sugere que, para uma performance aceitvel dos herbicidas aplicados dessa forma, eles devem ser preparados numa forma mais solvel em lipdeos (ster por exemplo), ou aplicadas em doses mais altas (5 a 10% v/v) diretamente veiculadas em leo. Em ambos os casos, os herbicidas devem pulverizados em abundncia ou pintados na casca das plantas. Uma outra alternativa introduzir o herbicida por meio de cortes ou pela sua injeo. Nesses casos, a casca mecanicamente penetrada e o herbicida introduzido no sitema de vasos condutores, sendo as formulaes hidroflicas as mais teis.

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