PRACTICA N 01 ESTERILIZACION DE MATERIALES DE LABORATORIO FACULTAD DE ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGIA MARTINEZ OLIVARES, Jos Antonio I.

INTRODUCCIN CIENCIAS BIOLOGICAS

Dentro de las actividades que el personal de enfermera debe realizar se encuentran los procesos de esterilizacin y desinfeccin, que son mtodos esenciales, utilizados de manera sistemtica en las unidades de salud, en el tratamiento y en la prevencin de infecciones. La esterilizacin es el proceso de destruccin o remocin de todas las formas de vida, patgenas o no, de un material o un objeto. Aunque hablamos de todas las formas de vida, para esclarecer este concepto, vamos a describir el concepto de muerte para una bacteria o muerte bacteriana, ya que en la prctica resulta la forma ms frecuente de eliminar. Por definicin para una clula bacteriana, muerte significa la prdida irreversible de la capacidad de reproducirse (crecer y multiplicarse). Pero cuando se trata de microorganismos, la muerte no se mide en una clula individual, sino la muerte de una poblacin, y la prueba de la muerte es la incapacidad de producir una colonia, cuando se cultiva en un medio slido. Pero, la veracidad de esta prueba, depende de la eleccin del medio de cultivo, y de las condiciones en que este se realice, ya que si no hubo destruccin fsica de la clula microbiana, esta solo est muerta en relacin con las condiciones empleadas para probar su viabilidad. Si consideramos la anterior definicin de muerte bacteriana, no existe la posibilidad, desde el punto de vista conceptual, de garantizar la esterilizacin de una preparacin. II. OBJETIVOS

1. Conocer los mtodos de esterilizacin de materiales de laboratorio. 2. esterilizar materiales de laboratorio para su uso en prximas practicas. III. MARCO TERICO

ESTERILIZACION: La esterilizacin es un proceso fsico o qumico que destruye todo microorganismo tanto en su forma vegetativa como sus esporas en el medio u objeto a esterilizar. La esterilizacin es un trmino absoluto, ya que no existe medianamente estril o casi estril Los mtodos utilizados corrientemente en los laboratorios microbiolgicos son: Calor al rojo (flameado). Calor seco (aire caliente). Vapor a presin (esterilizacin al autoclave). Vapor fluente (tyndallizacin). Filtracin. La incineracin es tambin un mtodo de esterilizacin, pero se aplica fuera del laboratorio para la eliminacin final de los desechos producidos en l y se considera por separado.

CALOR AL ROJO(INCINERACION)

Los instrumentos tales como las asas y alambres de siembra y varillas secas se esterilizan calentndolas en la llama de un mechero bunsen hasta que se ponen al rojo. Los microincineradores se recomiendan para esterilizar asas de inoculacin contaminadas con material muy infeccioso (esputos tuberculosos) para evitar el riesgo de chisporrotear partculas contaminadas sobre las zonas de alrededor. La efectividad del calor al rojo como mtodo de esterilizacin depende de: Temperatura Tiempo de exposicin CALOR HUMEDO El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos efectos se deben principalmente a dos razones: El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras biolgicas (DNA, RNA, protenas, etc.) son producidas por reacciones que elimi0nan agua. Por lo tanto, reacciones inversas podran daar a la clula a causa de la produccin de productos txicos. Adems, las estructuras secundarias y terciarias de las protenas se estabilizan mediante uniones puente de hidrgeno intramoleculares que pueden ser reemplazadas y rotos por el agua a altas temperaturas. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho ms elevado que el aire. Por lo que, los materiales hmedos conducen el calor mucho ms rpidamente que los materiales secos debido a la energa liberada durante la condensacin. AUTOCLAVE: es el aparato ms comnmente utilizado en los laboratorios para esterilizar cultivos y soluciones que no formen emulsiones con el agua y que no se desnaturalicen a temperaturas mayores a 100C. Una temperatura de 121 C (una atmsfera de sobrepresin) con un tiempo de exposicin mayor a 15 minutos sirve para destruir organismos formadores de esporas. Ventajas Rpido calentamiento y penetracin Destruccin de bacterias y esporas en corto tiempo No deja residuos txicos Hay un bajo deterioro del material expuesto Econmico

Desventajas No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metlicos

CALOR SECO El calor seco produce desecacin de la clula, efectos txicos por niveles elevados de electrolitos, procesos oxidativos y fusin de membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que estn en contacto con stos. El aire es mal conductor del calor, y el aire caliente penetra ms lentamente que el vapor de agua en materiales porosos. La accin destructiva del calor sobre protenas y lpidos requiere mayor temperatura cuando el material est seco o la actividad de agua del medio es baja. Esto se debe a que las protenas se estabilizan mediante uniones puente de hidrgeno intramoleculares que son ms difciles de romper por el calor seco. ESTUFA DE ESTERILIZACIN: Es el artefacto utilizado en los laboratorios para esterilizar por calor seco. Se requiere mayor temperatura y tiempo de exposicin que el autoclave. La temperatura vara entre 120 y 180C, requirindose distintos tiempos de exposicin. A 140C se necesitan por lo menos 5 horas de exposicin, mientras que a 160C se requieren al menos 2 horas de exposicin. Sirve para esterilizar material de vidrio. El papel y el algodn no pueden ser esterilizados a ms de 160C. Ventajas No es corrosivo para metales e instrumentos. Permite la esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias viscosas no voltiles. Desventajas Requiere mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor hmedo, debido a la baja penetracin del calor.

IV.

MATERIAL Y METODOS

4.1 MATERIAL 4.1.1 MATERIAL DE LABORATORIO Tubos de ensayo Placas peri Matraz Probeta graduada Papel kraft Pabilo Algodn Gasa

4.2.1 EQUIPOS DE LABORATORIO Autoclave Estufa

IV.2METODOS 4.2.1 METODO DE ESTERILIZACION AL ROJO (INCINERACION) Se aplica para esterilizar materiales como asas de siembra, al momento de realizar siembras en medio de cultivo, consiste en exponer la punta del asa de siembra en un mechero hasta que este al rojo vivo. 4.2.2 METODO DE ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO Este mtodo de esterilizacin se realiza empleando el equipo de laboratorio denominado autoclave, antes debe prepararse los materiales de vidrio a esterilizarse de la siguiente manera: Lavar los materiales a esterilizar Preparar los tapones (consiste en algodn envuelto en gasa y amarrado con pabilo), para los materiales que lo requieran como: tubos de ensayo, matraces, probetas. Empaquetar los materiales en papel kraft y asegurarlos con pabilos Llevarlos al autoclave para su esterilizacin

V.

RESULTADOS

VI.

CONCLUSIONES

VII.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

http://www.pdf-search-engine.com/asepsia-pdf.html