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1. INTRODUO
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O controle cientfico do crescimento microbiano comeou somente h cerca de 100 anos; Pasteur levou os cientistas a acreditarem que microrganismos eram a causa possvel de doenas.
Na metade do sculo XIX iniciaram as primeiras prticas de controle microbiano em procedimentos mdicos lavagem das mos e tcnicas cirrgicas asspticas.
ESTERILIZAO destruio de todas as formas de vida microbiana, incluindo endosporos (formas de vida mais resistentes). ESTERILIZAO COMERCIAL uso do calor para matar os microrganismos patognicos sem necessariamente degradar os produtos (alimentos). DESINFECO destruio dos patgenos vegetativos (no formadores de endosporos), o que no igual a esterilidade completa superfcies e substncia inerte. ANTI-SEPSIA tem a mesma definio da desinfeco, porm dirigido ao tecido vivo.
DEGERMINAO remoo mecnica, em vez de morte da maioria dos micrbios, em uma rea limitada;
SANITIZAO prtica destinada a reduzir as contagens microbianas a nveis seguros de sade pblica, e minimizar as chances de transmisso de doena de um usurio para outro.
Os nomes dos tratamentos que causam a morte direta dos micrbios possuem o sufixo cida (significa morte):
GERMICIDA mata todos os microrganismos FUNGICIDA mata os fungos BACTERICIDA mata as bactrias VIRICIDA inativa os vrus E assim por diante...
Outros tratamentos inibem o crescimento e multiplicao dos microrganismos seu nome tem o sufixo sttico ou stase (significa parar).
BACTERIOSTTICO inibe o desenvolvimento bacteriano, porm uma vez que o agente removido, o crescimento pode ser retomado.
Quando as populaes microbianas so aquecidas ou tratadas com substncias qumicas elas normalmente morrem em uma taxa constante... Se uma populao de 1 milho de clulas bacterianas tratada por 1 minuto e 90% da populao morre, temos ento 100.000 clulas...se novo tratamento realizado por mais 1 minuto, 90% dos sobreviventes anteriores morrem, isto sobra apenas 10.000 clulas vivas...e assim por diante. Se a curva de mortalidade plotada logaritmicamente, observa que a taxa de morte constante.
N DE MICRBIOS quanto mais micrbios existem no incio, mais tempo leva para eliminar a maior parte da populao CARACTERSTICAS MICROBIANAS os endsporos so difceis de eliminar, e mesmo os micrbios em forma vegetativa exibem uma variao considervel em sua sensibilidade aos mtodos de controle INFLUNCIAS AMBIENTAIS a presena de matria orgnica (sangue, saliva, fezes) inibe a ao dos antimicrobianos qumicos; meio em suspenso (com gorduras e protenas) tende a proteger as bactrias; pH fator importante, pois o calor mais eficiente em pH cido TEMPO DE EXPOSIO tratamentos de calor e radiao so muito dependentes do tempo; os agentes qumicos necessitam de ao prolongada para que os endsporos sejam afetados
A membrana plasmtica alvo de muitos agentes de controle microbiano; Esta membrana regula ativamente a passagem de nutrientes para dentro da clula e a eliminao de dejetos da mesma; A leso dos lideos ou protenas da membrana por agentes antimicrobianos causa o vazamento do contedo celular e intefere com o crescimento da clula.
As pontes de hidrognio (responsveis pelas ligaes qumicas que mantm a estrutura tridimensionsal das molculas proticas) so suscetveis ao rompimento pela ao do calor ou certos agentes qumicos; Os cidos nuclicos (DNA e RNA) so transportadores da informao gentica a leso a estes pelo calor, radiao ou substncias qumicas frequentemente letal para a clulas esta no pode ser repicar ou realizar funes metablicas normais.
Mesmo na Idade da Pedra provvel que os seres humanos j utilizassem algum mtodo fsico de controle microbiano para preservar alimentos; A secagem e o uso do sal (presso osmtica) provavelmente estiveram entre as tcnicas iniciais; Ao selecionar os mtodos de controle deve-se considerar: calor pode inativar vitaminas e antibiticos ltex e borracha podem ser danificados com o calor consideraes econmicas: descartveis X vidraria reutilizvel
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` CALOR
Causa a morte microbiana atravs da desnaturao das protenas (mido) ou oxidao (seco).
A resistncia ao calor varia entre diferentes micrbios.
DE MORTE TRMICA: PERODO MNIMO EM QUE TODOS OS MICRORGANISMOS SO MORTOS EM UMA CULTURA LQUIDA, EM UMA DADA TEMPERTATURA. DE REDUO DECIMAL: TEMPO EM MINUTOS EM QUE 90% DE UMA POPULAO, EM UMA DADA TEMPERATURA SERO MORTOS.
`TEMPO
CALOR MIDO
FERVURA (100C ao nvel do mar) Mata as formas vegetativas de bactrias, quase todos os vrus, fungos e seus esporos em 10 minutos.
CALOR MIDO
VAPOR DE FLUXO LIVRE Vapor no pressurizado (temperatura semelhante fervura =100C ao nvel do mar) Os endsporos bacterianos e alguns vrus no so mortos, ou necessitam de tempo maior de ao para morte. A FERVURA E O VAPOR DE FLUXO LIVRE NO SO PROCEDIMENTOS CONFIVEIS DE
CALOR MIDO
AUTOCLAVE Mtodo preferencial de esterilizao, usada a menos que o material possa ser danificado pelo calor ou umidade. Aumenta a presso interna, e conseqentemente a temperatura: 1 atm e 121C.
CALOR MIDO
AUTOCLAVE
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A esterilizao em uma autoclave mais efetiva quando os organismos entram em contato com o vapor diretamente ou esto contidos em um pequeno volume de soluo aquosa; Sob estas condies, o vapor em uma presso de cerca de 1 atm (15 psi) e 121C, matar todos os organismos e seus endsporos em cerca de 15 minutos.
CALOR MIDO
PASTEURIZAO
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Pasteurizao lenta: em que se aplicam temperaturas mais baixas durante maior tempo (65C por 30 minutos). Pasteurizao rpida: quando se aplicam temperaturas mais altas (75C) durante alguns segundos - HTST (High Temperature and Short Time) ou "alta temperatura e curto tempo". Pasteurizao muito rpida, quando a temperatura vai de 130C a 150C, durante trs a cinco segundos - UHT (Ultra High Temperature) ou "temperatura ultra-elevada".
CALOR SECO
Usado em laboratrio para esterilizao da ala de inoculao (bico de bunsen); Mtodo efetivo para esterilizar e eliminar papel, copos, sacos, bandagens contaminadas, material hospitalar.
CALOR SECO
AR QUENTE Menos efetivo que o calor mido (vapor); Temperatura utilizada 170C por 2 horas.
` FILTRAO
Passagem de lquido ou gs atravs de um material semelhante a uma tela com poros pequenos o suficiente para reter os microrganismos. Usada para esterilizao de materiais sensveis ao calor: meios de cultura, enzimas, vacinas, antibiticos.
FILTRAO
Uso de filtros de membrana. Composio: steres de celulose ou polmeros plsticos 0,22 e 0,45 m de porosidade
0,2 m
Membrana de nitrocelulose
FILTRAO
Uso de bomba vcuo. o vcuo criado para auxiliar a gravidade a puxar o lquido atravs do filtro
FILTRAO FILTROS DE PARTCULAS DE AR DE ALTA EFICINCIA (HEPA High Efficiency Particulate Air)
Uso em salas cirrgicas e ocupadas por pacientes queimados reduo de infeces. Removem quase todos (99,9%) dos microrganismos maiores que 0,3 m de dimetro.
BAIXAS TEMPERATURAS
O efeito depende do microrganismo e da intensidade da aplicao. Temperaturas de 0 a 7C a taxa metablica da maiora dos microrganismos reduzida efeito bacteriosttico
BAIXAS TEMPERATURAS
Temperaturas baixas (abaixo do ponto de congelamento) obtidas RAPIDAMENTE tendem a tornar os micrbios dormentes no necessariamente os mata. O congelamento LENTO mais nocivo os cristais de gelo que se formam e crescem rompem a estrutura celular e molecular dos microrganismos.
RESSECAMENTO
AUSNCIA DE GUA os microrganismos no podem crescer ou se reproduzir, mas podem permanecer viveis por anos...quando a gua encontra-se presente seu crescimento retomado. Usado para preservar microrganismos em laboratrio: LIOFILIZAO
5. MTODOS FSICOS DE CONTROLE MICROBIANO ` PRESSO OSMTICA Esse princpio utilizado na conservao dos alimentos.
No geral fungos e bolores so muito mais capazes de crescer em materiais com baixa umidade.
Essa propriedade combinada com capacidade de crescer em condies cidas a razo pela qual as frutas e gros so deteriorados por fungos.
RADIAO
Tem vrios efeitos sobre as clulas, dependendo de seu comprimento de onda, intensidade e durao. H dois tipos de radiao: - Ionizante: raios gama, raio X e feixes de eltrons de alta energia - No ionizante: luz ultravioleta (UV)
Comprimento de onda curto (menos de 1 nm) altamente energtico. O principal efeito a ionizao da gua, que forma radicais hidroxila altamente reativos - estes radicais reagem com os componentes orgnicos celulares, especialmente DNA. utilizada na esterilizao de produtos farmacuticos e materiais dentrios e mdicos.
Natureza do material a ser desinfetado (pH e matria orgnica); Contato microrganismo X desinfetante; Temperatura de ao (quanto maior melhor a ao).
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TIPOS DE DESINFETANTES
Usada por Lister (Sculo XIX) cirurgia assptica; Atualmente pouco utilizada irrita a pele e odor desagradvel; Derivados de fenol molcula de fenol quimicamente alterada para reduzir as qualidades irritantes ou aumentar sua atividade antimicrobiana. HEXACLOROFENO
Ao antimicrobiana leso nas membranas plasmticas, inativa enzimas (desnatura protenas); Permanecem ativos na presena de matria orgnica; Grupos: - crsois (desinfetantes de superfcie) - hexaclorofeno (ingrediente de sabo);
Clorexidina (estrutura e aplicao similar ao do hexaclorofenol); Usada no controle microbiano na pele e membranas mucosas; Combinada a um detergente ou lcool, utilizada para a escovao cirrgica das mos e preparo pr-operatrio.
forte agente oxidante, que impede o funcionamento de boa parte do sistema enzimtico celular; forma mais efetiva de cloro, pois tem carga eltrica neutra e se difunde facilmente atravs da parede celular. Forma lquida (gs cloro comprimido) usada para
Hipoclorito de clcio: usado para desinfetar equipamentos de laticnios e utenslios de restaurantes. Hipoclorito de sdio: desinfetante domstico, utilizado em indstrias alimentcias e em sistemas
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compostos estveis que liberam o cloro durante perodos prolongados; so relativamente efetivos em contato com a matria orgnica, mas agem de forma lenta e menos efetiva que outras formas de cloro; a amnia controla o sabor e odor do cloro; por serem menos efetivos deve-se empregar uma concentrao maior.
Os ons do metal se combinam com os grupos Sulfidrila (-SH) das protenas celulares, e ocorre desnaturao.
Curativos impregnados com prata liberam lentamente os ons demonstram serem teis quando h problemas com bactrias resistentes antibiticos.
EFEITO BACTERIOSTTICO. - Seu uso limitado devido sua toxicidade, poder de corroso e ineficcia em contato com a matria orgnica; -Utilizado em tintas para evitar mofo; - mercurocromo usado domesticamente.
Sulfato de cobre usado para inibir algas verdes (algicida) Hidroxiquinolina de cobre utilizados em tintas para prevenir mofo
TRICLOCARBAN e TRICLOSAN - inibem grampositivas Desinfetantes de superfcie CIDO-ANINICO: nions reagem com membrana plasmtica (amplo espectro de ao)
Benzoato de sdio e cido srbico alimentos cidos (queijos e refrigerantes); Propionato de clcio pes Nitrato de sdio embutidos (presunto, salame, salsicha)
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Substncias qumicas que esterilizam em uma cmara fechada com o uso de gs.
XIDO DE ETILENO: desnatura protenas Mata todos os micrbios e endosporos, mas requer tempo de exposio prolongado (4 a 18 horas) Altamente penetrante
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` Agentes
sintticos: Anlogos de fatores de crescimento Ex: SULFAS (Sulfanilamida) Anlogo do cido p-aminobenzico inibe a sntese de cido flico, precursor de cidos nuclicos.
Compostos qumicos produzidos por microrganismos que inibem ou matam outros microrganismos produtos naturais.
Alexander Fleming descobre a Penicilina em 1928
Capacidade adquirida por um organismo de resistir a um agente quimioterpico ao qual este normalmente susceptvel. Envolve GENES DE RESISTNCIA: -Trocas genticas -Mutao.