REV CUBANA PLANT MED 2002;7(2):67-72

Estacin Experimental de Plantas Medicinales "Juan Toms Roig"

EFECTOS ALELOPTICOS DE RESTOS DE DIFERENTES ESPECIES DE PLANTAS MEDICINALES SOBRE LA ALBAHACA (Ocimum basilicum L.) EN CONDICIONES DE LABORATORIO
Lic. Horacio Rodrguez Gonzlez,1 Lic. Dagoberto Mederos Mederos2 y Tc. Isabel Hechevarra Sosa3

Resumen
Con el objetivo de evaluar estos posibles efectos alelopticos en residuos de plantas medicinales sobre semillas de Ocimum basilicum L., que sern cultivadas asociadamente con esta especie en condiciones de campo, se mont en diseo completamente aleatorizado, un experimento, repetido 3 veces, en el laboratorio de cultivo de tejidos de la EEPM "Dr. Juan Toms Roig" del CIDEM, La Habana, Cuba. Se encontr que el proceso de germinacin se ve influenciado por los residuos de las especies evaluadas: Ocimum basilicum L., Aloe vera L. N. Burn., Matricaria recutita L., Calendula officinalis L. y Plecthranthus amboinicus L. En relacin con la formacin de masa seca, Aloe vera L. N. Burn. y Calendula officinalis L. provocaron los efectos ms positivos. DeCS: ALBAHACA/crecimiento & desarrollo; SEMILLAS/ crecimiento & desarrollo; PLANTAS MEDICINALES/ crecimiento & desarrollo; CULTIVOS AGRICOLAS; GERMINACION; MEDICINA HERBARIA; AGRONOMIA.

Summary
In order to evaluate the possible allelopathic effects of medicinal plant residues on seeds of Ocimum basilicum L. that will be grown together with this species under field conditions, a completely randomized experiment was designed. It was repeated 3 times in the tissues culture laboratory of "Dr. Juan Toms Roig" Experimental Station of Medicinal Plants of the Drug Research and Development Center (CIDEM, in Spanish), Havana City, Cuba. It was observed that the germination process was influenced by the residues of the evaluated species: Ocimum basilicum L, Aloe vera L. N. Burn, Matricaria recutita L., Calendula officinalis L., and Plecthranthus amboinicus L. Aloe vera L. N. Burn and Callendula officinalis had more positive effects. Subject headings: BASIL/growth & development; SEEDS/ growth & development; PLANTS MEDICINAL/ growth & development; CROPS; AGRICULTURAL; GERMINATION; MEDICINE; HERBAL; AGRONOMY.

Tanto en los ecosistemas naturales como en los agroecosistemas, las plantas liberan al medio una cantidad apreciable de compuestos biolgicamente activos y algunos de ellos actan como inhibidores o estimuladores de la germinacin de las semillas y afectan o benefician el crecimiento de las plantas. Estas sustancias se denominan alelopticas y su accin se conoce como alelopata o efectos alelopticos.1 La albahaca blanca (Ocimum basilicum L.) es una hierba de las Labiadas originaria del Asia tropical y cultivada en Cuba y otros pases.2 Por sus propiedades aromticas y medicinales, atribuidas popularmente y confirmadas farmacolgicamente,3 es una de las plantas autorizadas por el Ministerio de Salud Pblica de Cuba para su utilizacin en el Sistema Nacional de Salud.
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La especie es de amplia distribucin y abundancia, se le encuentra de forma espontnea en las cercanas de las poblaciones y de las viviendas campesinas. No obstante, en los ltimos tiempos se tiende a sistematizar su cultivo a fin de obtener material de alta calidad para su empleo como materia prima en la produccin de fitofrmacos. Para ello, debe determinarse la forma en que se intensifique la produccin mediante el uso ms eficiente de los factores de crecimiento, del espacio y el tiempo disponibles, y una forma de lograrlo es por medio de la asociacin de especies.4-6 Por estas razones, deben realizarse investigaciones con el propsito de acumular informacin sobre el comportamiento de estos sistemas y determinar posibilidades de aplicacin de esta tcnica tradicional sobre bases cientficas, con miras a incrementar la eficiencia de los sistemas agrco-

Investigador Agregado. Mster. Profesor Asistente. Tcnico Medio en Agronoma.

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las.7 Una de las investigaciones que ms deben potenciarse, son las relaciones alelopticas entre los diferentes componentes del sistema y las asociaciones y rotaciones adecuadas, puesto que los efectos alelopticos no slo se observan en ecosistemas naturales, sino tambin en ecosistemas cultivados.8 Este efecto, tambin se hace extensivo a toda la comunidad biolgica que interacta entre s. De ah, que muchas de las sustancias identificadas como alelopticas, estn simultneamente relacionadas con funciones de proteccin o defensas de las plantas, contra ataques de microorganismos e insectos.9-12 Diversos autores,13 consideran la alelopata como un fenmeno de excrecin, es decir, exudados de sustancias con el efecto inhibitorio, estimulante e incluso autotxico que provienen del follaje o parte subterrnea de otras plantas, ya sean vivas, muertas o en descomposicin. Otros autores,14,15 coinciden al generalizar el concepto: son todas las interferencias entre seres vivos provocadas por sustancias qumicas, por ellos elaboradas, independientemente de ser o no del reino vegetal. La sustancias alelopticas son de naturaleza qumica muy diversa y la mayora son de origen orgnico.16,17 El conocimiento de los efectos alelopticos, contribuye a poder determinar la compatibilidad entre las diferentes especies, para el establecimiento de las asociaciones de cultivo en condiciones de produccin y tecnologa de policultivos ms adecuadas a las necesidades de una agricultura sostenible. Ello permite utilizar ms eficientemente el suelo y otros recursos y reducir los riesgos de prdidas debido a plagas y sequas.18 Por tanto, el objetivo de este trabajo es evaluar los efectos alelopticos de restos de diferentes especies de plantas medicinales sobre la albahaca (Ocimum basilicum L.), como componente de un sistema de cultivos asociados en condiciones de laboratorio.

3. Semillas de albahaca (Ocimum basilicum L.) sobre material vegetal de organo francs (Plecthranthus amboinicus L.). 4. Semillas de albahaca (Ocimum basilicum L.) sobre material vegetal de manzanilla (Matricaria recutita L.). 5. Semillas de albahaca (Ocimum basilicum L.) sobre material vegetal de sbila (Aloe vera L. N. Burn.) y extracto acuoso del gel al 20 % (v/v). 6. Semillas de albahaca (Ocimum basilicum L.) sobre material vegetal de la propia especie. Despus de seco el material vegetal (follaje y races) de cada una de las especies utilizadas, se tritur mediante el empleo de un molino de cuchillas, modelo RETCH de 220 V para obtener un tamao de partcula igual a 3 mm. Se utilizaron frascos de vidrio (pomos de boca ancha), que constituyeron cada uno, una rplica, a los que se les coloc una capa de 5 mm de material vegetal, excepto al testigo, y sobre ella una capa de un centmetro de espesor de algodn humedecido con agua destilada, cubrindose con un papel de filtro estril. Sobre este se colocaron 20 semillas por frasco y se mantuvo la humedad con agua destilada, segn el mtodo de los residuos vegetales.19 Las evaluaciones realizadas fueron las siguientes: - Velocidad de germinacin desde el primer da hasta los 11 d. - Porcentaje de germinacin a los 11 d. - Longitud del epictilo e hipoctilo (cm) a los 11 d. - Masa seca del epictilo e hipoctilo (g) a los 11 d. Los resultados fueron procesados estadsticamente a travs de anlisis de varianza simple, se transformaron los datos de porcentaje por la frmula . La comparacin de las medias se hizo por la dcima de rangos mltiples de Duncan20 para el 5 % de probabilidad.

Mtodos
Se mont un experimento, repetido 3 veces, en el laboratorio de cultivo de tejidos de la Estacin Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Toms Roig" CIDEM, ubicada en el municipio de San Antonio de los Baos, durante el ao 1999. Se utiliz un diseo experimental completamente aleatorio con 6 tratamientos y 5 repeticiones. Los factores empleados fueron: 1. Semillas de albahaca (Ocimum basilicum L.) sin material vegetal (testigo). 2. Semillas de albahaca (Ocimum basilicum L.) sobre material vegetal de calndula (Calendula officinalis L.). 68

Resultados
La germinacin comienza al primer da con todas las especies, excepto en la calndula (Calendula officinalis L.), y durante todo el perodo de evaluacin (11 d), obtuvo valores inferiores, respecto al resto de las variables. Los tratamientos de mayor germinacin el primer da, correspondieron al testigo y sobre la sbila, con el 12 % ambos aproximadamente. A los 10 d, todas las variantes alcanzan el mximo de germinacin. A partir de ah, no se elevan los porcentajes. Se destacan los tratamientos con albahaca y aloe, donde se obtienen los mayores porcentajes de germinacin en el tiempo, incluso superiores al testigo, lo que evidencia un efecto positivo. Ocurriendo lo opuesto con las restantes especies estudiadas (figura).

Masa seca (g) 0,018

0,016

0,014

0,012

0,01

0,008

0,006

0,004

0,002

0 Epic tilo Hipoc tilo

Testigo

A. vera

O. vasilicum

C. officinalis

M. recutita

P. amboinicus

FIG. Masa seca (g) del epictilo e hipoctilo de Ocimum basilium L. frente a residuos de diferentes plantas medicinales. En ambos casos (epictilo e hipoctilo), las barras que indican tratamiento estn dispuestas de izquierda a derecha, en el mismo orden de la leyenda.

En la tabla 1, se aprecia el porcentaje de germinacin de la albahaca frente a diferentes especies de plantas medicinales en 3 repeticiones del experimento en condiciones de laboratorio, donde slo hubo diferencias significativas en la primera. En las

3 repeticiones, el comportamiento de la germinacin fue similar en general. Destacndose el efecto positivo del Aloe vera L. N. Burn., Matricaria recutita L., Plecthranthus amboinicus L., incluso por encima del testigo.

TABLA 1. Germinacin (%) de Ocimum basilicum L., frente a diferentes plantas medicinales en condiciones de laboratorio Tratamiento Testigo Aloe vera L. N. Burn. Ocimum basilicum L. Calendula officinalis 1L. Matricaria recutita L. Plecthranthus amboinicus L. Esx. CV Repeticin 1 % 77,5 a 85,7 a 56,5 b 73,6 ab 76,5 a 80,8 a 0,13 14,10 % Repeticin 2 % 58,4 73,0 69,5 62,3 75,2 66,1 0,15 n.s 17,07 % Repeticin 3 % 44,0 60,5 62,9 31,8 48 66,1 0,14 n.s 20,61 %

Medias con letras iguales, dentro de una misma columna, no difieren segn dcima de rangos mltiples de Duncan para p < 5.

Por su parte, la tabla 2 muestra el comportamiento de la longitud (cm) del epictilo de la albahaca, frente a diferentes plantas medicinales, donde en todas las repeticiones hubo diferencias significativas entre los tratamientos evaluados.

Los mejores resultados los mostr el testigo, seguido del Aloe vera L., que en las repeticiones 1 y 3 no difiri con el mismo. Los valores ms bajos en todos los casos, los obtuvo la Calendula officinalis L. y Plecthranthus amboinicus L. 69

TABLA 2. Longitud (cm) del epictilo de Ocimum basilicum L. frente a diferentes plantas medicinales Tratamiento Testigo Aloe vera L. N. Burn. Ocimum basilicum L. Calendula officinalis L. Matricaria recutita L. Plecthranthus amboinicus L. Esx. CV Repeticin 1 % 1,60 a 1,74 a 1,06 b 0,56 b 0,96 bc 0,88 bc 0,14 27,41 % Repeticin 2 % 1,98 a 1,32 bc 0,96 c 0,38 d 1,46 b 0,34 d 0,16 33,27 % Repeticin 3 % 1,34 a 1,18 a 0,60 b 0,62 b 0,44 b 0,40 b 0,11 31,64 %

Medias con letras iguales, dentro de una misma columna, no difieren segn dcima de rangos mltiples de Duncan para p < 5.

En la tabla 3, se observa la longitud del hipoctilo (cm), donde algo similar a lo anterior ocurre en este caso. Tambin se encontraron diferencias significativas en todas las repe-

ticiones, generalmente, con los mejores resultados en el testigo, seguido del Aloe vera L. N. Burn.

TABLA 3. Longitud (cm) del hipoctilo de Ocimum basilicum L. frente a diferentes plantas medicinales Tratamiento Testigo Aloe vera L. N. Burn. Ocimum basilicum L. Calendula officinalis L. Matricaria recutita L. Plecthranthus amboinicus L. Esx. CV Repeticin 1 % 2,08 a 2,32 a 1,10 bc 0,98 c 1,48 b 0,94 c 0,15 22,38 % Repeticin 2 % 1,44 a 0,86 b 0,56 b 0,84 b 1,32 a 0,66 b 0,14 33,46 % Repeticin 3 % 0,98 a 0,70 b 0,38 c 0,36 c 0,34 c 0,20 c 0,09 40,96 %

Medias con letras iguales, dentro de una misma columna, no difieren segn dcima de rangos mltiples de Duncan para p < 5.

En la figura, por ltimo, se muestra el comportamiento del contenido de masa seca, tanto del epictilo como del hipoctilo, frente a los diferentes residuos. Contrariamente a lo que ocurri en la longitud, la mayor acumulacin de masa seca ocurre con la Calendula officinalis L., seguida del Aloe vera L. N. Burn. y del Ocimum basilicum L. Esto puede indicar que el efecto no resulta totalmente negativo en la Calendula officinalis L. Las 3 variantes restantes mostraron valores inferiores.

Discusin
Se puede observar el comportamiento diferencial en la velocidad de germinacin de la albahaca (Ocimum basilicum L.) frente a las dems especies (figura). Este es uno de los parmetros que puede presentar diferentes respuestas en la germinacin de las semillas de una especie determinada, cuando se encuentra influenciada por diferentes sustancias de otras plantas.8,21 El proceso de germinacin se desencadena a partir 70

de que las semillas se saturan de agua y comienza la mitosis en el embrin, pero si con esta agua penetran algunas sustancias alelopticas que son capaces de inhibir o retardar la multiplicacin o crecimiento de las clulas, se podra tambin retardar el proceso de germinacin. Esto al parecer es lo que debe ocurrir con los restos de la especie Calendula officinalis L., que sobre ellos, en los primeros das no germinaron las semillas y logran estabilizar la germinacin a partir de los 10 d. En relacin con el porcentaje de germinacin de Ocimum basilicum L. (tabla 1), sobre Aloe vera L. N. Burn. y Plecthranthus amboinicus L., est por encima del 80 % y aunque no existen diferencias significativas con el testigo, si fueron en ambas especies superiores a ste, en la primera repeticin. Adems, esto se pudo constatar en las 2 siguientes repeticiones, que aunque no se encontraron diferencias significativas, si se observa un porcentaje superior en la germinacin sobre estos residuos, en comparacin al tratamiento testigo. Esto puede estar relacionado con que dichas especies liberan al medio algunas sustancias que pueden

estimular el proceso de germinacin. Casos similares han sido soportado por otros investigadores,22 al evaluar los efectos de Abutilon theophrasti Med, demostrando que su extracto estimul la germinacin de la soya y de Amaranthus sp. Tambin se reporta,23 que las plantas parsitas de los gneros Striga y Orobanche, producen strigol, que estimula la germinacin de las plantas hospedantes y otras especies consideradas malezas. Al analizar la elongacin (tablas 2 y 3), tanto del epictilo como del hipoctilo, es destacable el fuerte poder inhibitorio logrado por Calendula officinalis L., sin diferencias significativas con Plecthranthus amboinicus L., indicando la posibilidad de que se desarrollen efectos alelopticos negativos entre estas especies y las semillas de Ocimum basilicum L., provocados por determinadas sustancias qumicas (aleloqumicos). Esto ha sido evidente entre numerosas especies vegetales en condiciones de campo y laboratorio, as, por ejemplo, los residuos de Ambrosia artemiscifolia L., Abutilon theophrasti Med. y Echinochloa crus-gali L. Bear., inhibieron el crecimiento del maz y la soya.24 Dentro de este mismo contexto, se report25 que la pangola (Digitaria decumbens L., Imperata cylinfrica L. y Panicum repens L.), desarrollada bajo varias condiciones culturales, generalmente mostraron una inhibicin del crecimiento del sistema radical de plntulas de lechuga (Latuca sativa L.) y arroz (Oryza sativa L.). Tambin se reporta 24 que extractos hechos con residuos de Chenopodium album L., Amaranthus retroflexus L., Panicum dichofomiflorum L., Setaria viridis L., inhibieron la elongacin del hipoctilo de la soya. Otros investigadores,26 sealan que los extractos de Don Carlos (Sorghum halepense L.), inhiben la elongacin radicular de los cultivos de tomate, frijol, pepino, col y meln de agua, por su parte, los extractos de Cynodon dactylon., mostraron efectos similares con respecto al pepino y tomate, no afectando al frijol. El comportamiento del contenido de masa seca, en particular con relacin a los residuos de Calendula officinalis L. donde ocurri la mayor acumulacin, puede tambin estar influido por el fuerte poder inhibitorio de estos restos vegetales, pues existen indicadores de que las sustancias alelopticas alteran el balance hdrico, influyendo en el crecimiento y por ende en el contenido de masa seca, as se ve que el extracto lquido de las hojas de girasol (Helanthus annus L.) altera el balance hdrico e inhibe el crecimiento de Sorghum bicolor Moench.27 Tambin se reporta,28 que los exudados producidos por el sistema radicular del girasol producen la autotoxicidad de la especie, provocando autoinhibicin en su emergencia, reduccin de la altura, masa fresca y masa seca y el peso seco se afect tambin en las especies, Echinochloa colonum L. y rbano (Raphanus sativus L.) con dichos exudados.

Conclusiones
De forma general se puede concluir: El proceso de germinacin de la albahaca ( Ocimum basilicum L.,) se ve influenciado por las especies evaluadas. La veloci dad y el porcentaje de germinacin, as como la longitud del epictilo y el hipoctilo fueron favorecidos en el Ocimum basilicum L. por los residuos de Aloe vera L. N. Burn. y los de la propia especie. Matricaria recutita L. mostr valores intermedios y Calendula officinalis L. y Plecthranthus amboinicus L, los menores. En relacin a la formacin de masa seca, la Calendula officinalis L. y el Aloe vera L. N. Burn. provocaron los efectos ms positivos.

Recomendaciones
Tener en cuenta estos resultados para experimentos de campo y poder llegar a conclusiones sobre las mejores asociaciones de cultivos a establecer con las especies estudiadas, as como para una efectiva rotacin de cultivos en condiciones de produccin.

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