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INTRODUCCIN Todos los mamferos estudiados hasta el momento poseen un grupo de genes, el Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH) o MHC del ingls Major Histocompatibility Complex), cuyos productos se asocian con el reconocimiento intercelular y con la discriminacin de lo propio o no propio. El CMH juega un papel fundamental en el desarrollo de la respuesta inmune. La capacidad de un animal para montar una respuesta inmune (valorada mediante la produccin de anticuerpos) depende de su haplotipo CMH y, ms concretamente, de la presentacin antignica controlada por los genes de clase II. Hay dos posibles explicaciones para la diferencia de respuesta entre distinto haplotipos. De acuerdo con el modelo de seleccin de determinantes las distintas molculas de clase II difieren en su capacidad para fijar antgenos procesados. El modelo alternativo de agujeros en el repertorio defiende que aquellas clulas T con receptores que reconocen antgeno extraos muy parecidos a autoantgenos se eliminan durante la seleccin tmica. Como en la respuesta T a un antgeno intervienen TCR, pptido antignico y molculas Clase II, ambos modelos pueden ser correctos.

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OBJETIVOS: Conocer la naturaleza del Linfocito TCD4 y del Complejo Mayor de Histocompatibilidad Comprender la presentacin de antgeno Conocer la restriccin de los linfocitos TCD4 segn las molculas del CMHII

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LINFOCITOS TCD4 Los linfocitos T colaboradores o linfocitos T cooperadores (del ingls "T helper cells"), tambin conocidos como linfocitos T efectores o simplemente linfocitos Th, son un subgrupo de linfocitos (a su vez un tipo de leucocito) que tienen un papel muy importante en establecer y maximizar las capacidades de defensa del sistema inmunitario. La actividad de estas clulas es inusual, en tanto no son capaces de producir efectos citotxicos o fagocitarios, es decir, no pueden aniquilar la clula husped (tambin conocidas como clulas somticas) o patgenos. Sin la ayuda de otras clulas inmunitarias se consideran intiles contra una infeccin. Los linfocitos Th estn involucrados en la activacin y direccin de otras clulas inmunitarias, y son particularmente importantes en la respuesta inmune adaptativa. Son esenciales en el proceso de conmutacin para la posterior formacin de anticuerpos por parte de los linfocitos B, en la activacin y crecimiento de los linfocitos T citotxicos, y en el aumento de la actividad bactericida de fagocitos como los macrfagos. Es esta diversidad en su funcin y su papel en la influencia de otras clulas lo que les da a los linfocitos T "colaboradores" su nombre. Se cree que los linfocitos Th maduros siempre expresan su protena de superficie CD4. Los linfocitos T que expresan activamente su CD4 son entonces llamados linfocitos T CD4+. Se considera que estas clulas CD4+ tienen generalmente un papel predefinido como linfocitos T colaboradores en el sistema inmunitario, aunque existen raras excepciones. Por ejemplo, hay subgrupos de clulas supresoras, linfocitos asesinos naturales (NK), y linfocitos citotxicos en los que es conocida su expresin de CD4 (en el caso de los citotxicos CD4, se han observado en nmeros extremadamente bajos durante estadios especficos de enfermedad, y se consideran como inexistentes). Todos estos otros grupos celulares de linfocitos T CD4 + no se consideran como colaboradores, y por ende no se tratarn en este artculo. La importancia de los linfocitos T colaboradores puede observarse durante una infeccin por VIH, virus que infecta las clulas que son tipo CD4 + (incluidos los linfocitos T colaboradores). Hacia el final de la infeccin por VIH, el nmero de clulas T CD4+ funcionales cae, lo que lleva al estado sintomtico de la infeccin conocido como sndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). Tambin hay desrdenes raros, de etiologa casi siempre gentica, que producen la ausencia o disfuncin de Facultad de Medicina Humana - UDCH 3

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linfocitos T CD4+. Este tipo de desrdenes produce sntomas similares a los del sida, y muchos de ellos son fatales, como en el caso de las Linfocitopenias. Activacin de linfocitos T colaboradores Luego de ocurrido el desarrollo linfocitario, las clulas T vrgenes (aquellas que nunca han sido expuestas a un antgeno al cual responden) abandonan el timo y comienzan a dispersarse a travs del cuerpo, incluyendo los ndulos linfticos. Como todo el linaje de clulas T, expresan el complejo Receptor de linfocitos T/CD3. Este receptor de clulas T (TcR) contiene regiones fijas y variables, siendo estas ltimas las que determinan ante qu antgeno puede responder. Los linfocitos T CD4 + tienen TcRs con afinidad al MHC de clase II, y se cree que el CD4 est involucrado en la determinacin de la afinidad al MHC durante el proceso de maduracin en el timo. Las protenas MHC de clase II slo se encuentran en la superficie de las llamadas clulas presentadoras de antgeno (CPAs) profesionales. Las llamadas as profesionales son principalmente las clulas dendrticas, macrfagos y linfocitos B, aunque las clulas dendrticas son el nico grupo de clulas que expresan el MHC de clase II constitutivamente (todo el tiempo). Algunas CPAs tambin se acoplan a antgenos nativos (o sin procesar) en su superficie, como las clulas dendrticas foliculares, pero los antgenos sin procesar no interaccionan con los linfocitos T y por ende no estn involucrados en su activacin. Los antgenos del que se acoplan a las MHC siempre son de 8-10 aminocidos mientras que las que MHC de clase II son hasta 25 protenas de

pptidos cortos, longitud, de se acoplan al mayores, aminocidos.

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Reconocimiento Durante una respuesta inmunolgica, las clulas presentadoras de antgeno (CPAs) profesionales endocitan (absorben) el material forneo (tpicamente bacterias o virus), el cual sufre de un procesamiento para despus viajar desde el sitio de la infeccin hasta un ndulo linftico. Una vez all, la CPA comienza a presentar los pptidos del antgeno que estn vinculados al MHC de clase II, permitiendo la activacin a los linfocitos T CD4+ T que expresan TcRs especficos a ese complejo pptido/MHC. Cuando un linfocito Th encuentra y reconoce el antgeno en una CPA, el complejo TcR/CD3 del linfocito se enlaza fuertemente al complejo pptido/MHC presente en la CPA profesional. El CD4, un co-receptor del complejo TCR, tambin se une a una seccin diferente de la molcula del MHC. Estas interacciones acercan a esas protenas, permitiendo a las quinasas en las porciones intracelulares de las protenas TcR, CD3 y CD4, activarse unas a otras mediante fosforilacin. Con la asistencia de una fosfatasa presente en la seccin intracelular de la CD45 (antgeno comn leucocitario), estas molculas activan las vas bioqumicas principales en el citosol del linfocito Th. Estas vas ahora activas son conocidas como Sealizacin 1 de la activacin de linfocitos T, ya que es la primera y principal seal pro-activacin en la clula Th. Cuando ocurre un reencuentro con el mismo antgeno dado, los linfocitos T de memoria son reactivados usando las mismas vas TCR. La unin del antgeno-MHC al complejo TcR y el CD4 pueden participar en la adhesin de la CPA y el linfocito Th durante el proceso de activacin celular, pero son en realidad la protena integrina LFA-1 en la superficie del linfocito T y la ICAM en la CPA las ms importantes en este tipo de interaccin. Facultad de Medicina Humana - UDCH 5

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Es desconocido el papel de la regin extracelular relativamente grande del CD45 durante las interacciones celular, pero la CD45 tiene distintas isoformas que cambian en tamao dependiendo del estado de activacin y maduracin de los linfocitos T h. Por ejemplo, el CD45 se reduce en longitud luego de la activacin de Th(CD45RA+ a CD45RO+), pero es desconocido el hecho de que este cambio influencia o no la activacin. Se ha propuesto que un CD45RA+ ms largo pueda disminuir la accesibilidad del receptor de clulas T a la molcula antgeno-MHC, por ende necesitando un aumento en la afinidad (y especificidad) del linfocito T para activarse. Una vez ocurrida la activacin, el CD45 se acorta, permitiendo interacciones ms fciles y una posterior activacin como linfocito T efector Verificacin Una vez recibida la primera seal TcR/CD3, el linfocito T virgen debe activar una segunda va bioqumica independiente, conocida como va de Sealizacin 2. Este paso de "verificacin" es una medida de proteccin que asegura que un linfocito T responde correctamente a un antgeno extrao. Si esta segunda seal no est presente durante la exposicin inicial al antgeno, la clula T presume que es autoreactivo. Esto conlleva a que la clula se vuelva anrgica (la anergia se genera por los cambios bioqumicos no protegidos de la Sealizacin 1). Las clulas anrgicas no respondern a ningn antgeno en el futuro, incluso si ambas seales se llevan a cabo. Se cree que estas clulas circulan por el cuerpo sin ninguna funcin ni valor, hasta que mueren al final de su ciclo vital. La segunda seal involucra la interaccin entre el CD28 en la superficie de los linfocitos T CD4+ y las protenas CD80 (B7.1) o CD86 (B7.2) en las CPAs profesionales. Ambas molculas, CD80 y CD86 activan el receptor CD28. Estas protenas son tambin llamadas molculas co-estimulatorias. Aunque el estadio de verificacin es necesario para la activacin de los linfocitos T vrgenes, la importancia de este es demostrada durante los mecanismos de activacin similares en linfocitos T citotxicos CD8+. Debido a que los linfocitos T CD8 + vrgenes no tienen preferencias ante material proveniente de fuentes externas, stas clulas T deben recaer en la activacin de la CD28 para confirmar que estn reconociendo un antgeno extrao (ya que la CD80/CD86 slo se expresa por CPAs acttivas). Es por eso que la CD28 juega un papel importante en la disminucin del riesgo de contraer una autoinmunidad por linfocitos T ante antgenos del organismo husped (propio). Facultad de Medicina Humana - UDCH 6

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Una vez ambas vas de sealizacin han sido activadas, los cambios bioqumicos inducidos por la Seal 1 son alterados, permitindole a la clula activarse en lugar de quedar en estado de anergia. Entonces la segunda seal se vuelve obsoleta; slo se requerir de la primera seal para una futura activacin. Esto tambin es cierto en linfocitos T de memoria, los cuales son ejemplo de inmunidad adquirida. Las respuestas ms rpidas ocurren durante una reinfeccin, debido a que los linfocitos T de memoria ya han pasado por el proceso de confirmacin y pueden crear clulas efectoras mucho ms tempranamente.

Proliferacin Una vez ambas seales estimulatorias son activadas dentro del linfocito T colaborador, la clula se permite iniciar el proceso de proliferar. Logra esto al liberar un potente factor de crecimiento celular llamado interleucina-2 (IL-2). Los linfocitos T activados tambin producen la sub-unidad alfa del receptor IL-2 (CD25 o IL-2R), otorgndoles de un receptor plenamente funcional que puede unirse a la IL-2, el cual a su vez activa las vas de proliferacin. En este caso, la IL-2 liberada se acopla a los receptores IL-2 en la misma clula, lo cual potencia el proceso de proliferacin. Este fenmeno en el que clulas liberan citoquinas para alterar su propio comportamiento es conocido como auto-regulacin (o estimulacin autocrina). Es de destacar que esta no es la nica funcin de la IL-2 liberada (p. ej., los linfocitos NK tambin proliferan cuando entran en contacto con esta IL-2), y que la IL-2 tambin puede unirse a otras clulas T en el rea (estimulacin paracrina). Maduracin Luego de muchas generaciones celulares, los linfocitos Th progenitores se diferencian en linfocitos Th efectores, linfocitos Th de memoria, y linfocitos Th supresores.

Linfocitos Th efectores: secretan citoquinas, protenas o pptidos que estimulan o interaccionan con otros leucocitos, incluyendo linfocitos Th.

Linfocitos Th de memoria: retienen la afinidad por el antgeno de la clula T activada original, y son usados para actuar ms tarde como clulas efectoras

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durante una segunda respuesta inmunitario (p. ej., si hay una reinfeccin del husped ms adelante).

Linfocito T supresor: no promueve la funcin inmunitaria sino que la disminuye. A pesar de ser pocos en cantidad durante un proceso de infeccin, se cree que estas clulas juegan un papel importante en la auto-limitacin del sistema inmunitario; han demostrado prevenir el desarrollo de varias enfermedades autoinmunes.

La produccin de IL-2 por parte de los linfocitos T colaboradores es tambin necesaria para aumentar la proliferacin de linfocitos T CD8+. Sin las interacciones de los linfocitos T colaboradores, las clulas T CD8+ no podran multiplicarse y eventualmente se volveran anrgicas. Esta asistencia-cruzada de los linfocitos T colaboradores es otra de las formas en las que el sistema inmunitario intenta prevenir una enfermedad autoinmune mediada por clulas T. Determinacin de la respuesta efectora de linfocitos T Los linfocitos T colaboradores son capaces de influenciar a otras clulas inmunitarias, y la respuesta generada (incluyendo las seales extracelulares como las citoquinas) podra ser esencial para la resolucin de una infeccin. Para poder ser efectivos, los linfocitos T colaboradores deben determinar qu citoquinas le permiten al sistema inmunitario ser las ms tiles o beneficiosas para el husped. El entendimiento de cmo exactamente los linfocitos T responden a los desafos al sistema inmunitario, es en la actualidad en tpico de gran inters en la inmunologa, ya que tal conocimiento podra ser til en el tratamiento de la enfermedad adems de aumentar la efectividad del proceso de vacunacin. Modelo de linfocitos Th1/Th2 El linaje de linfocitos T que se desarrolla a clulas efectoras se diferencia en dos grandes tipos de clulas conocidas como Th1 y Th2 (la "h" viene del trmino ingls helper que significa colaborador) o tambin conocidas como linfocitos T de tipo 1 y tipo 2, respectivamente.

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Limitaciones del modelo Th1/Th2 Las interacciones entre las citoquinas del modelo Th1/Th2 pueden ser ms complicadas en algunos animales. Por ejemplo, la citoquina Th2 IL-10 inhibe la produccin de los tipos de citoquinas T h en seres humanos. La IL-10 humana (hIL-10) detiene la proliferacin y produccin de citoquinas en todas las clulas T adems de la actividad de los macrfagos, pero continua estimulando a las clulas plasmticas, asegurando que se contine la produccin de anticuerpos. Como tal, no se cree que la hIL-10 verdaderamente promueva la respuesta Th2 en humanos, pero acta para prevenir la sobre-estimulacin de linfocitos T colaboradores, mientras al mismo tiempo maximiza la produccin de anticuerpos. Tambin hay otros tipos de clulas T que pueden influenciar la expresin y activacin de los linfocitos T colaboradores, tales como los linfocitos T reguladores, junto con algunos perfiles de citoquinas poco comunes como los linfocitos T del grupo Th3. Los trminos "regulador" y "supresin" se han vuelto ambiguos luego del descubrimiento de que los linfocitos T CD4 tambin son capaces de regular (y suprimir) su propia respuesta sin necesidad de clulas de supresin dedicadas. Otra diferencia importante con los linfocitos T "supresores" (o "reguladores naturales") es que stos siempre suprimirn las acciones del sistema inmunitario, mientras que los grupos de clulas T efectoras comienzan con citoquinas de funcin promotora-inmune y luego cambiarn ms adelante su repertorio a citoquinas inhibitorias. Esto ltimo es

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lo que ocurre en clulas Th3, las cuales inician acciones propias de un grupo supresor luego de su produccin de citoquinas y activacin inicial. Ambos grupos de clulas, los linfocitos T reguladores y los Th3 producen la citoquina denominada factor de crecimiento transformante (TGF-) e IL-10. Ambas citoquinas son inhibitorias de la actividad de linfocitos T colaboradores; el TGF- suprime la actividad de la mayora del sistema inmunitario. Existe evidencia sugierendo que el TGF- puede no suprimir los linfocitos T h2 tan efectivamente como lo hace con linfocitos T vrgenes, pero no se considera tpicamente como citoquina Th2. La caracterizacin de un nuevo subtipo de T colaborador, el linfocito Th17[2] ha trado ms dudas ante el modelo bsico Th1/Th2. Estas clulas productoras de IL-17 fueron descritas inicialmente como una poblacin implicada en la autoinmunidad, pero ahora se cree que tienen sus propias funciones efectoras y reguladoras. Muchas de las citoquinas citadas en este artculo tambin son expresadas por otras clulas del sistema inmunitario (ver detalles en los artculos individuales para cada citoquina), y se hace claro que aunque el modelo bsico T h1/Th2 brinda luces y permite comprender las funciones de los linfocitos T colaboradores, es demasiado simple para definir su rol o acciones totales. Algunos inmunlogos cuestionan el modelo en su totalidad, ya que algunos estudios in vivo sugieren que las clulas T colaboradoras, no desarrollan individualmente los perfiles de citoquinas especficos del modelo T h, y que muchas expresan citoquinas de ambos perfiles. Dicho eso, es de destacar la importancia del modelo Th en el desarrollo de nuestro entendimiento acerca de las labores y comportamiento de los linfocitos T colaboradores, junto con las citoquinas que ellos producen durante una respuesta inmunitario. Linfocitos T colaboradores y reacciones de hipersensibilidad El sistema inmunitario debe lograr un balance de sensibilidad para poder responder a antgenos externos y evitar la respuesta con antgenos del propio organismo. Cuando el sistema inmunitario responde ante niveles muy bajos de antgenos con los que usualmente no debera responder, ocurre una respuesta de hipersensibilidad. Se conoce que la hipersensibilidad es la causa de alergias y algunas enfermedades autoinmunes. Las reacciones de hipersensibilidad pueden ser divididas en cuatro tipos: Facultad de Medicina Humana - UDCH 10

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La hipersensibilidad de tipo 1 incluye desrdenes comunes como el asma, rinitis alrgica (fiebre del heno), eccema, urticaria y anafilaxis. Todas estas reacciones incluyen anticuerpos IgE, los cuales necesitan de una respuesta Th2 durante el desarrollo de las clulas T colaboradoras. Los tratamientos preventivos, como aquellos que usan frmacos corticosteroides y montelukast, se enfocan en suprimir los mastocitos u otras clulas promotoras de la alergia; los linfocitos T no hacen ninguna funcin primaria en la respuesta inflamatoria como tal. Es importante notar que la categorizacin numrica de los "tipos" de hipersensibilidad, no se correlaciona (y no tiene nada que ver) con la "respuesta" en el modelo Th.

Las reacciones de hipersensibilidad de Tipos 2 y 3 involucran complicaciones debidas a anticuerpos de baja afinidad o autoinmunes. En ambos tipos de reaccin, los linfocitos T juegan un papel 'cmplice' en la generacin de estos anticuerpos auto-especficos, aunque algunas de estas reacciones de hipersensibilidad del Tipo 2 pueden ser consideradas como normales en un sistema inmunitario saludable (por ejemplo, reacciones de factor Rhesus contra los antgenos del beb por la diferencia de grupos sanguneos madre-hijo durante el parto). Nuestra comprensin del papel de los linfocitos T colaboradores en estas respuestas es limitado, pero se cree que las citoquinas producidas por Th2 podran promover tales desrdenes. Por ejemplo, algunos estudios han sugerido que el lupus (LES) y otras enfermedades autoinmunes de naturaleza similar pueden ser vinculadas a la produccin de citoquinas Th2.

La hipersensibilidad de Tipo 4, tambin conocida como hipersensibilidad tarda, son causadas mediante la sobreestimulacin de las clulas inmunitarias, comnmente linfocitos y macrfagos, lo que resulta en una inflamacin crnica y liberacin de citoquinas. Los anticuerpos no realizan una actividad importante en este tipo de alergia. Los linfocitos T son importantes en este tipo de hipersensibilidad, ya que son activados por el propio estmulo y promueven la activacin de otras clulas, particularmente macrfagos va citoquinas Th1.

Otros tipos de hipersensibilidad celular incluyen la enfermedad autoinmune mediada por linfocitos T citotxicos, adems de un fenmeno similar; rechazo de transplantes. Los linfocitos T colaboradores son necesarios para el desarrollo de estas enfermedades. Para lograr crear suficientes clulas T asesinas auto-reactivas, debe producirse interleucina-2, y esta es suministrada por los linfocitos T CD4 +. Los Facultad de Medicina Humana - UDCH 11

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linfocitos T CD4+ pueden estimular a su vez a clulas tales como linfocitos asesinos naturales y macrfagos mediante citoquinas como el interfern gamma, provocando a estas clulas citotxicas a destruir clulas del organismo hospedador en ciertas circunstancias. El mecanismo que usan las clulas T asesinas durante la autoinmunidad es casi idntico a su respuesta contra virus, y algunos virus han sido acusados de causar enfermedades autoinmunes como la Diabetes mellitus tipo 1.Este tipo de enfermedades ocurre debido a que los sistemas de reconocimiento del antgeno en el organismo hospedador fallan, y el sistema inmunitario cree, por error, que un antgeno propio es exgeno o desconocido. Como resultado, los linfocitos T CD8 + tratan a la clula como si estuviese infectada, y entonces provocan la destruccin total(o en el caso de transplantes, el rechazo del rgano) de las clulas que expresan ese antgeno. Es importante indicar que los mecanismos aqu explicados son una simplificacin, y que muchas enfermedades autoinmunes son mucho ms complejas; un ejemplo bien conocido es la artritis reumatoide, en el que el conjunto de clulas y anticuerpos est involucrado en su patologa. De manera general, la inmunologa de muchas enfermedades autoinmunes no es an comprendida en su totalidad. Infeccin por VIH Quiz el mejor ejemplo de la importancia de los linfocitos TCD4+ es demostrada con la infeccin por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH). El VIH hace blanco en las clulas que expresan CD4, y por ende pueden infectar macrfagos, clulas dendrticas (ambos grupos expresan CD4 en bajos niveles) y por supuesto, los linfocitos T CD4+. Se ha propuesto que durante la fase asintomtica de la infeccin por VIH, el virus tiene una afinidad relativamente baja hacia las clulas T (y tiene una ms alta afinidad por los macrfagos), resultando en una baja tasa de eliminacin de linfocitos T CD4+ por el sistema inmunitario. Esto se compensa inicialmente mediante la produccin de nuevos linfocitos T colaboradores desde el timo (originalmente de la mdula sea). Sin embargo, una vez el virus se vuelve 'linfotrpico' (o T-trpico), comienza a infectar linfocitos T CD4+ de una manera tan eficiente (probablemente debido a cambios en los co-receptores a los que se enlaza durante la infeccin), que el sistema inmunitario es abrumado y vencido. Facultad de Medicina Humana - UDCH 12

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En ese momento, los niveles de linfocitos T CD4 + funcionales comienzan a disminuir, hasta el punto en el que la poblacin de clulas T CD4 + es muy pequea como para reconocer el rango total de antgenos que pueden ser potencialmente detectados. La falta de cubrimiento antignico total comienza a producir los sntomas principales del sndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). La eliminacin de los linfocitos T CD4 durante el sida, permite que varios patgenos escapen al reconocimiento, permitiendo entonces una infeccin oportunista. Muchas de las infecciones aumentan en severidad y/o duracin debido a que la disminucin de linfocitos provoca una contribucin ms dbil en el sistema inmunitario para responder ante ellas. Particularmente, dos componentes del sistema inmunitario son afectados debido a su dependencia en los linfocitos T CD4+: 1. Los linfocitos T CD8+ no son estimulados tan efectivamente durante la fase sintomtica de la infeccin por VIH, haciendo a los pacientes con sida muy susceptibles a muchos virus, incluyendo el propio VIH. Este decremento en la eliminacin de los linfocitos T CD4+ afectados, provoca que el virus se produzca ms (los linfocitos T CD4 + no mueren lo suficientemente rpido), aumentando la proliferacin del virus, y acelerando el desarrollo de la enfermedad. 2. La conmutacin de clase de inmunoglobulina disminuye significativamente una vez que fallan las funciones de los linfocitos T colaboradores. El sistema inmunitario pierde su habilidad para mejorar la afinidad de sus anticuerpos, y se vuelve incapaz de generar linfocitos B que produzcan grupos de anticuerpos como IgG e IgA. Estos efectos se producen principalmente debido a la prdida del nmero de linfocitos T colaboradores que pueden interaccionar correctamente con los linfocitos B. Otro sntoma del sida es la reduccin en los niveles de anticuerpos debido a la disminucin de las citoquinas Th2 (y menores interacciones por los linfocitos T colaboradores). Todas esas complicaciones acaban en una susceptibilidad aumentada ante infecciones bacterianas, especialmente en reas del cuerpo no accesibles por anticuerpos IgM. Si el paciente no responde al (o no recibe) tratamiento contra el VIH, eventualmente sucumbir a cncer o infecciones; finalmente, el sistema inmunitario llega a un nivel en el que ya no est coordinado o estimulado lo suficiente como para afrontar la enfermedad. Facultad de Medicina Humana - UDCH 13

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EL

COMPLEJO

PRINCIPAL

DE

HISTOCOMPATIBILIDAD

HUMANO:

HLA.

Estructura, funcin y organizacin gentica

La

clula

central

de

la

respuesta

inmune

es

el

LINFOCITO

COLABORADOR/HELPER (Th) CD4+. El Th reconoce a los antgenos gracias al RECEPTOR DE LINFOCITOS T (TCR). El reconocimiento de antgenos por parte de los distintos linfocitos B y T se realiza de una manera muy distinta: Las INMUNOGLOBULINAS de los linfocitos B son capaces de reconocer antgenos solubles, muy grandes y complejos, sobre los que se pueden fijar y no necesitan ser degradados. Los RECEPTORES DE LINFOCITOS T (TCR) solo son capaces de reconocer antgenos que hayan sido procesados/degradados dentro de una CLULA PRESENTADORA DE ANTGENOS (CPA), que es una clula pequea (de pocos pptidos) que se incorpora dentro de las molculas del COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD (MHC), es decir, los antgenos son incorporados a las molculas del MHC por las CPA y se presentan as al TCR, el cual presenta los antgenos al linfocito T.

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En conclusin, para que un TCR pueda reconocer a un antgeno (para poder presentrselo al linfocito T) es necesario que se d esta interaccin:

El complejo mayor de histocompatibilidad tiene en su seno un antgeno que le ha trado una clula presentadora de antgenos y que es presentado a un linfocito T, el cual lo reconoce gracias a su receptor de linfocitos T. HLA = MHC de humanos Las molculas cuya funcin especfica es la presentacin de antgenos a los linfocitos T (a travs del receptor de linfocitos T) estn presentes en todas las especies y reciben el nombre genrico de Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC). Las molculas del MHC son un conjunto de protenas que se encargan de la presentacin antignica y segn la especie el MHC recibe un nombre distinto, que en humanos es ANTGENO LEUCOCITARIO HUMANO (HLA). Normalmente tambin se utilizan como sinnimos ANTGENOS HLA GENES HLA, haciendo referencia a su gran variabilidad interindividual. Las molculas de HLA estn especializadas en la presentacin de antgenos a los linfocitos T a travs del TCR y se expresan en TODAS las clulas del organismo. Como ya hemos explicado anteriormente, mientras que las inmunoglobulinas de membrana de los linfocitos B no van a necesitar ninguna molcula que procese a los antgenos para poder reconocerlos (ya que reconocen al antgeno de forma aislada y nativa, sin procesar), los linfocitos T solo van a poder recocer al antgeno si ste es presentado en la membrana de nuestras propias clulas y asociado a las molculas de HLA. La interaccin CPA-HLA-TCR-linfocitoT consiste en la unin firme de la clula presentadora de antgenos con el linfocito T, mediada por molculas de adhesin, durante el tiempo necesario para que se establezca el intercambio de informacin que permita al linfocito T reconocer al antgeno como algo extrao para as poder atacarlo.

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Las protenas y genes que forman el MHC conforman el sistema de protenas ms polimrfico del organismo, ya que tienen muchas formas distintas de expresarse que varan segn el individuo, lo cual tiene grandes aplicaciones en:

Medicina legal: se emplean en el reconocimiento de cadveres, en estudios de paternidad como marcadores polimrficos que nos dan un 70-80% de la informacin global del individuo. Trasplantes: su existencia es un impedimento para que los trasplantes entre distintos individuos sean aceptados, ya que como ya hemos dicho, las protenas del HLA se expresan en TODAS las clulas del organismo.

Las protenas del MHC se clasifican en 2 clases: HLA-I HLA-II

ESTRUCTURA DE LAS MOLCULAS HLA-I Y HLA-II: HETERODMEROS

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MOLCULAS HLA CLASE II Formadas por dos cadenas variables y (hay muchas formas de ambas). Las dos cadenas variables a1 y 1 se doblan en el espacio formando esa estructura en concha y dejando en el interior una parte ms hundida, la HENDIDURA PARA EL ANTGENO (formada por los dominios a1 y 1), que presenta 3 zonas: o o Zona ms hundida (el suelo): la protena adopta una estructura de lmina u hoja plegada . Laterales de la hendidura y protruyendo hacia el exterior (sobre elevadas una en un lado y la otra en el otro): la protena adopta una forma de a-hlice. o o Centro de la hendidura: donde se acomoda el pptido antignico (sea procedente de un virus, de una bacteria). El linfocito T se colocara sobre el suelo.

Genes ms importantes de clase II: HLA-DR, HLA-DQ y HLA-DP. CARACTERSTICAS DE LOS HLA II Presentan antgenos a los Linfocitos T COOPERADORES/helper (Th) o CD4+ (llevan en su membrana la molcula CD4+ de forma especfica). Distribucin de las molculas de HLA-II: solo se expresan EN CLULAS PRESENTADORAS DE ANTGENOS (APCs) ESPECIALIZADAS EN ESA FUNCIN FAGOCTICA de molculas ms complejas Macrfagos tisulares y clulas dendrticas ( monocitos) Linfocitos B Linfocitos T activados (no en reposo) Presentan pptidos antignicos que provienen del EXTERIOR de la CPA, que la clula ha fagocitado del exterior, es decir, no pasan por el ncleo celular: Bacterias Facultad de Medicina Humana - UDCH 17

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Hongos Cuando presentan un pptido extrao activan al Th, lo que conlleva una serie de funciones efectoras finales como la proliferacin de las clulas B Obviamente estas clulas fagocticas tambin podrn sufrir mutacin cancergena o ser infectadas por virus (como el virus del VIH que afecta a los Linfocitos Th).

RESTRICCIN HISTOCOMPATIBLE: RECONOCIMIENTO RESTRINGIDO POR HLA El receptor antignico de la clula T (TCR) reconoce de forma conjunta al antgeno y al HLA en la hendidura de unin al antgeno. Esto implica que un clon de linfocitos Tc que reconoce a un antgeno en el contexto de, por ejemplo la molcula A2, no va a reconocer al mismo antgeno en el contexto de A24. El reconocimiento de un antgeno por el receptor de linfocitos T (TCR) est restringido por la molcula HLA que lo presenta , es decir, TCR reconoce al conjunto de un determinado antgeno o de una determinada molcula de MHC: si cambia la molcula de MHC el reconocimiento ya no existir de la misma forma, y si se mantiene la misma molcula de MHC pero se carga con otro antgeno el reconocimiento tampoco es el mismo. EL RECONOCIMIENTO DEL ANTGENO POR TCR EST MODULADO O DEPENDE DE LA MOLCULA HLA QUE LO PRESENTE.

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Procesamiento De Antgenos Extracelulares Y Asociacin A Molculas De Clase II El origen de los pptidos unidos a las molculas de clase II incluye, la degradacin de las protenas internalizadas en vesculas y la unin de los pptidos a las molculas de clase II dentro de estas (fig 7). Este mecanismo difiere en varios aspectos en referencia al procesamiento de los pptidos unidos a las molculas de clase I, no solo por su mecanismo vesicular o vacuolar, sino adems en la manera en que el pptido logra unirse a las molculas de clase II. Captura de protenas extracelulares en compartimientos vesiculares por las APC. Las clulas dendrticas y los macrfagos poseen una variedad de receptores que, permiten reconocer estructuras compartidas por muchos tipos de microorganismos, e inducen la fagocitosis. Los macrfagos expresan receptores de manosa, quienes reconocen los residuos de manosa y fucosa de las glucoproteinas y glucolipidos bacterianos. Asimismo los receptores de las porcin Fc de los anticuerpos, a travs de los cuales pueden reconocer y fagocitar a los microorganismos o protenas recubiertas de anticuerpos. Como tambin los receptores para opsoninas, por ejemplo, los receptores para el fragmento C3b del complemento. Los Linfocitos B pueden reconocer y fagocitar antgenos proteicos a travs del receptor de las clulas B (IgM junto con las cadenas Ig e Ig). Una vez que el antgeno fue reconocido, es internalizado en vesculas denominadas endosomas. Estos compartimientos intracelulares contienen un pH cido y es rico en enzimas proteolticas. La va endosomal continua con la posterior unin del endosoma a un lisosoma, quien posee un contenido enzimtico an mayor. Procesamiento de las protenas en las vesculas endosmicas y lisosomicas. Las protenas son degradadas enzimaticamente generando pptidos, muchos de los cuales poseen las caractersticas estructurales para poder interactuar con las molculas de clase II. Esta lisis proteica es llevada a cabo por proteasas que Facultad de Medicina Humana - UDCH 19

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actan a pH cido. La catepsina, es una proteasa de amplia especificidad de sustrato, y es la enzima endosomal y lisosomal ms abundante. Biosntesis y transporte de las molculas del MHC II al endosoma.

Las cadenas y las cadenas , son sintetizadas por separadas y se asocian unas con otras en el ER, este proceso es facilitado por protenas chaperonas residentes de esta orgenela, tales como la calnexina (al igual que en la va del MHC I). La molcula de clase II ensamblada, aun continua siendo inestable, por lo que se une al sitio de unin al pptido, una protena denominada cadena invariable (Ii). La Ii es una protena no polimrfica compuesta por tres subunidades. Esta protena se une a un heterodimero formado por las cadenas y , en su sitio de unin al pptido. De esta manera interfiere en la carga del pptido.

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Gracias a la Ii las molculas de clase II se estabilizan por completo en el ER y mantiene ocupado el sitio de unin al pptido dentro de esta organela impidiendo que los pptidos propios del ER se unan a las molculas nacientes. Las Ii tambin favorecen el correcto plegamiento y su posterior transporte a las vesculas endosmicas. Los segmentos de membrana del ER que contienen a las molculas de MHC II, se separan del ER formando vesculas que son transportadas a la membrana celular. Pero durante este camino, las vesculas exociticas se unen con los endosomas que contiene a los pptidos recin internalizados. El significado la esta va vacuolar, consiste en que las molculas de clase II se encuentren con los pptidos generados por proteolisis de las protenas previamente fagocitadas. Se han identificado endosomas ricos en molculas de clase II, a los que se los llamo compartimiento de clase II del MHC o MIIC (MHC class II compartment). Se debe destacar que estas vesculas contienen todos los componentes para la asociacin pptido-molculas de clase II, incluyendo las enzimas que degradan las protenas, la Ii y una molcula denominada HLA-DM. Asociacin del pptido a las molculas del MHC II en el MIIC Debido que la Ii se encuentra bloqueando el sitio de unin al pptido, debe ser removido para que el pptido se una a las molculas de clase II. Este evento se realiza en dos pasos. Primero, las mismas catepsinas que degradaron las protenas, clivan al Ii, dejando como resultado una molcula de 24 aminocidos en el sitio de unin al pptido llamada CLIP (pptido de cadena invariable asociado a clase II). El segundo paso consiste en quitar al CLIP de la hendidura, esto es llevado a cabo por la molcula HLA-DM. Quien adems facilita la entrada del pptido antignico en su lugar. El gen que codifica la protena HLA-DM se encuentra ubicado en la regin II del MHC (fig 8).

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Expresin del complejo pptido-MHC II en la superficie celular. Una vez que el pptido se ha unido a la molcula de clase II esta se estabiliza y puede ser presentada en la membrana celular. Finalmente en la membrana los complejos peptido-MHC II pueden interactuar con los Linfocitos T CD4+.

Presentacin Del Antgeno Cd4 A Los Linfocitos T Restringidas Por Complejo Mayor De Histocompatibilidad Tipo II
El primer paso es la captacin del antgeno y su internalizacin a la clula. Durante este proceso se reconoce a la protena extraa a travs de diversos receptores, en el caso de microorganismos extracelulares se realizar a travs del reconocimiento de PAMs, la unin de estas molculas a su receptor activan el proceso intracelular que da modificaciones en el citoesqueleto y promueven la formacin de una vescula a partir de la membrana citoplasmtica llamada fagosomas, hay algunos estudios que afirman que la misma sealizacin distingue a la vescula recin formada para un trfico vesicular predeterminado, a la activacin de bombas de protones que acidifican el contenido de la vescula y que lleva posteriormente a la fusin con el lisosoma. Los cimgenos al encontrarse en medio cido se convierten en enzimas activas, de las ms importantes que podemos mencionar en este proceso se encuentran las catepsinas, que son enzimas proteolticas (tiol-aspatil proteasas). Al mismo tiempo la clula produce las cadenas proteicas y polimrficas necesarias para formar el MHC II, adems de unas molculas nodrizas, las calnexinas, que asisten a las enzimas y la cadena invariable (I) que es una protena compuesta por 3 unidades, la cual funciona

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como un protector para el sitio de unin al antgeno mientras es transportado por el retculo endoplsmico, el aparato de Golgi y la formacin de una vescula.

El fagosoma se une a la vescula que contiene al MHC II, la catepsina afecta tambin a la cadena invariable, degradndola, y dejando slo un residuo de 24 aminocidos en el sitio de unin del antgeno llamado pptido invariable ligado a CPH (CLIP); este pptido ser desplazado gracias a la ayuda del HLADM o por HLA-DO en el caso de linfocitos B, permitiendo finalmente la unin del pptido al sitio de unin, una vez unido el complejo antgeno y MHC, se desplaza la vescula hacia la superficie de la membrana, con la cual se fusiona, dando as lugar a la presentacin del antgeno, el cual podr ser reconocido por linfocitos CD4.

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CONCLUSIONES: Los linfocitos T colaboradores o linfocitos T cooperadores, son un subgrupo de linfocitos que tienen un papel muy importante en establecer y maximizar las Facultad de Medicina Humana - UDCH 24

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capacidades de defensa del sistema inmunitario. Son esenciales en el proceso de conmutacin para la posterior formacin de anticuerpos por parte de los linfocitos B, en la activacin y crecimiento de los linfocitos T citotxicos, y en el aumento de la actividad bactericida de fagocitos como los macrfagos. Y las molculas MHC de clase II se expresan slo en la superficie d clulas presentadoras de antgeno (macrfagos, clulas dendrticas y linfocitos B), y sirven para presentar pptidos procesados procedentes de antgenos exgenos a los linfocitos T CD4. El antgeno penetra en la clula mediante endocitosis y fagocitosis. Las clulas presentadoras de antgeno procesan este antgeno exgeno en pptidos este pptido ser desplazado gracias a la ayuda del HLADM, permitiendo finalmente la unin del pptido al sitio de unin, una vez unido el complejo antgeno y MHC, se desplaza la vescula hacia la superficie de la membrana, con la cual se fusiona, dando as lugar a la presentacin del antgeno, el cual podr ser reconocido por linfocitos CD4. Los linfocitos T CD4+ reconocen el antgeno asociado al CMH II, y por ello se refiere a ellos como restringidos a CMH de clase II.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.

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ENRIQUE CHIPANA; del 2013.

Procesamiento y Presentacin De Antgenos PDF;

Universidad Nacional Jorge Badre Grohmann; Per, Tacna; rev. 27 de febrero IBEROVET.CL; linfocitos T; Rev. 28 de febrero del 2013; disponible en: http://www.iberovet.cl/inmunologia/index.php? option=com_content&view=article&id=19&Itemid=21. PARHAM; Inmunologa; 2da Edicin; Argentina; 2006; editorial medica Panamericana; Pg. 172-175

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