APLICAO DE LAMA DE CAL EM SOLO DE FLORESTA DE Pinus taeda E SEUS EFEITOS SOBRE A MICROBIOTA DO SOLO E BIODEGRADABILIDADE DA SERRAPILHEIRA

Eduardo Barcelos Platte

Porto Alegre 2002 UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

FACULDADE DE AGRONOMIA PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM MICROBIOLOGIA AGRCOLA E DO AMBIENTE

APLICAO DE LAMA DE CAL EM SOLO DE FLORESTA DE Pinus taeda E SEUS EFEITOS SOBRE A MICROBIOTA DO SOLO E BIODEGRADABILIDADE DA SERRAPILHEIRA

EDUARDO BARCELOS PLATTE (Bilogo, UFRGS)

Dissertao apresentada como um dos requisitos obteno do grau de mestre em Microbiologia Agrcola e do Ambiente

Porto Alegre, Julho de 2002

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AGRADECIMENTOS

Aos meus orientadores, Prof. Pedro A. Selbach e Prof. Flavio A. O. Camargo que se revezaram na tarefa, deram todo o apoio tcnico e logstico e se mantiveram, constantemente, contribuindo para o trabalho. Janine Viezzer, bolsista, pelo seu empenho, dedicao, e comprometimento que, competentemente, conduziu o experimento nas minhas ausncias. Devo ao seu esforo, a concluso deste trabalho. empresa Rigesa, Celulose, Papel e Embalagens Ltda. que acreditou na idia do trabalho e forneceu o resduo. Ao Laboratrio de Solos da Faculdade de Agronomia, pela utilizao dos seus equipamentos e aos seus funcionrios no auxlio da utilizao dos mesmos. Ao Centro de Pesquisas da Petrobras (CENPES), e equipe do Laboratrio de Ecotoxicologia pelo auxlio na utilizao do Microtox. Ao laboratrio Bioensaios Anlises e Consultoria Ambiental, pela utilizao dos equipamentos. Aos colegas Joo Teixeira, Davi Chemello, Jairo, Luiz, Cludio e Pajara pela amizade, sugestes e ajuda. minha famlia pelo estmulo que sempre deram minha vida acadmica, incluindo os meus sogros, pela ajuda incondicional, e minha irm, Tatiana, que me ensinou, do alto das suas vitrias, entre outras coisas, a no ter preguia de pensar.

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 minha esposa Cristiane que me apoiou desde o surgimento da idia de entrar para o mestrado, participou ativamente da parte experimental e da redao, dividiu dvidas e incertezas e agentou o mau humor advindo das piores horas. A ela, dedico este trabalho.

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APLICAO DE LAMA DE CAL EM SOLO DE FLORESTA DE Pinus taeda E SEUS EFEITOS SOBRE A MICROBIOTA DO SOLO E BIODEGRADABILIDADE DA SERRAPILHEIRA1/

Autor: Eduardo Barcelos Platte Orientador: Prof. Pedro Alberto Selbach Co-orientador: Prof. Flvio Anastcio de Oliveira Camargo

RESUMO
A serrapilheira da floresta de Pinus possui baixa biodegradabilidade, o que acarreta em acmulo de nutrientes nesta camada superficial, diminuindo a sua disponibilidade no solo. Alm disto observada acidificao do solo destas florestas. Estes fatores diminuem a atividade dos microrganismos no solo e selecionam, por limitao fisiolgica, o estabelecimento de alguns grupos microbianos. A indstria de papel e celulose produz um resduo conhecido como lama de cal, que apresenta potencial para utilizao como corretivo da acidez do solo. A proposta deste trabalho avaliar a aplicao da lama de cal em solo de floresta de Pinus taeda e avaliar os seus efeitos sobre a degradao da serrapilheira e na microbiota do solo. Com este objetivo, foi montado um experimento de bancada, mantido em laboratrio, onde foram testadas as aplicaes de duas doses de lama de cal, 19t/ha e 26t/ha, associadas aplicaes de nitrognio, nas doses de 40 e 80 kgN/ha, com a incorporao ou no da serrapilheira no solo. Foram realizadas anlises qumicas e microbiolgicas do solo e ecotoxicolgicas da lama de cal e do solo utilizando a bactria luminescente Vibrio fischeri (Sistema Microtox). Os resultados indicaram que aps a aplicao da lama de cal houve elevao do pH do solo. Os testes de toxicidade do solo aps aplicao da lama de cal no indicaram efeitos txicos para a bactria Vibrio fischeri. Os tratamentos que receberam lama de cal apresentaram taxas de respirao maiores (atividade microbiana), o que promoveu no s um aumento da mineralizao da matria orgnica do solo como tambm da biodegradao da serrapilheira. A incorporao das acculas e da lama de cal ao solo tambm promoveu o aumento das taxas de respirao. A aplicao de lama de cal promoveu um incremento no nmero de bactrias e actinomicetos do solo, especialmente nos tratamentos que receberam a dose de 26t/ha deste resduo. A adio de nitrognio aos tratamentos no acarretou incrementos atividade microbiana no solo ou na biodegradao da serrapilheira.

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Dissertao de Mestrado em Microbiologia Agrcola e do Ambiente, Faculdade de Agronomia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, (87p.) Julho, 2002.

LIME SLUDGE EFFECTS ON SOIL MICROORGANISMS AND ON LITTER BIODEGRADABILITY OF Pinus taeda FORESTS.1/ Author: Eduardo Barcelos Platte Advisers: Prof. Pedro Alberto Selbach Prof. Flvio Anastcio de Oliveira Camargo

ABSTRACT
The Pinus litter shows low biodegradability rates, decreasing the soil nutrient content and increasing the soil acidification. Soils under Pinus forests show limitations to microbial activity and exclusion of some microbial groups by soil acidity and litter quality. The pulp and paper industry produces a solid waste with high concentration of CaCO3 (lime sludge) that can be used for soil acidity correction. In order to evaluate the effects of the lime sludge application on soil microorganisms and litter biodegradability of Pinus taeda forest, a laboratory study was conducted. Two doses of lime sludge (19t/ha and 26t/ha) were tested associated to two nitrogen doses (40 and 80kgN/ha), with and without litter incorporation to the soil. The evaluations included soil chemical and microbiological analyses and ecotoxicity tests with Vibrio fischeri (Microtox Sistem). The results show that application of lime sludge on soil increased the soil pH, microbial activity and number of bacteria and actinomycetes, contributing to acceleration of organic matter mineralization and litter degradation. The incorporation of lime and litter to the soil increased the microbial activity. No toxic effects were observed to Vibrio fischeri on soil with application of lime sludge. The nitrogen application showed no significant effects on soil microorganisms activity and litter degradation.

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Master of Science Dissertation in Agricultural and Environmental Microbiology. Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, (87p.) July, 2002.

SUMRIO
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1. INTRODUO..................................................................................................................1 1.2. Hiptese .....................................................................................................................4 1.3. Objetivos ....................................................................................................................4 1.3.1. Objetivo geral .......................................................................................................4 1.3.2. Objetivos especficos ...........................................................................................4 1.4. Justificativa.................................................................................................................5 2. REVISO BIBLIOGRFICA .............................................................................................7 2.1. Degradao da serrapilheira da floresta de Pinus sp. ...............................................7 2.2. Microbiota do solo e atuao na biodegradao da serrapilheira ............................10 2.3. Efeitos do pH do solo sobre a biodegradabilidade da serrapilheira .........................12 2.4. Testes ecotoxicolgicos com microrganismos .........................................................15 2.5 Aplicao de resduos slidos no solo ......................................................................18 2.6 Lama de cal e o seu potencial como corretivo de pH do solo ...................................19 3. MATERIAL E MTODOS ...............................................................................................21 3.1 Descrio do local e caracterizao do solo .............................................................22 LOCALIZAO ...............................................................................................................24 DESCRIO ...................................................................................................................24 3.2. Caracterizao da lama de cal .................................................................................25 3.3. Amostragens de solo e acculas ..............................................................................25 3.4 Etapa piloto ...............................................................................................................26 3.5. Etapa confirmatria ..................................................................................................29 3.6 Acompanhamento dos parmetros ...........................................................................32 3.6.1 Anlises qumicas ...............................................................................................32 3.6.2 Anlises de respirometria....................................................................................33 3.6.3 Anlises da biomassa microbiana.......................................................................34 3.6.4. Anlises da populao microbiana ....................................................................35 3.6.5. Avaliaes de toxicidade com Vibrio fischeri. ....................................................36 3.6.6. Avaliaes estatsticas.......................................................................................38 4. RESULTADOS ...............................................................................................................40 4.1 Resultados das avaliaes na etapa piloto ...............................................................40 4.1.1 Valores de pH do solo.........................................................................................40 4.1.2 Anlises de respirometria....................................................................................41

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4.2. Resultados da etapa confirmatria...........................................................................43 4.2.1. Anlises de parmetros qumicos do solo .........................................................43 4.2.2 Resultados das anlises de respirometria ..........................................................47 4.2.3 Resultados das avaliaes da biomassa microbiana .........................................50 4.2.4. Resultados das avaliaes da populao microbiana do solo...........................53 4.2.5. Resultados das avaliaes ecotoxicolgicas com Vibrio fischeri .......................56 5 . DISCUSSO..................................................................................................................58 5.1. Aplicao da lama de cal no solo.............................................................................58 5.2. Aplicao da lama de cal na dosagem de 26t/ha no solo ........................................67 5.3. Aplicao de nitrognio no solo ...............................................................................68 5.4. Aplicao da lama de cal no solo de floresta de Pinus taeda ..................................69 6. CONCLUSES...............................................................................................................71 7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ...............................................................................73 APNDICES .......................................................................................................................79

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RELAO DE TABELAS Tabela 1: Valores de pH em cada tratamento nos solos dos dois talhes de Pinus taeda, aps 56 dias de incubao. ..............................................................................40 Tabela 2: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie mdia das trs replicaes. ...........................................................43 Tabela 3: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos com lama de cal e accula incorporados ao solo mdia das trs replicaes. .........................................44 Tabela 4: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos sem accula e com lama de cal na superfcie mdia das trs replicaes. ......................................................44 Tabela 5: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos sem accula e com lama de cal incorporada ao solo mdia das trs replicaes. ...........................................45 Tabela 6: Coeficientes de correlao entre os parmetros qumicos ao final do experimento . ....................................................................................................47 Tabela 7: Avaliao da biomassa microbiana nos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie, no incio (dia 0) e no final do experimento (dia 90). ...................50 Tabela 8: Avaliao da biomassa microbiana nos tratamentos com lama de cal e accula incorporados, no incio (dia 0) e no final do experimento (dia 90). ...................52 Tabela 9: Avaliao da biomassa microbiana nos tratamentos com lama de cal na superfcie e sem accula, no incio (dia 0) e no final do experimento (dia 90). .52 Tabela 10: Avaliao da biomassa microbiana nos tratamentos com lama de cal incorporados e sem accula, no incio (dia 0) e no final do experimento (dia 90). ..........................................................................................................................53 Tabela 11: Avaliaes da populao microbiana nos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie, no final do experimento, mdia de trs replicaes.......54 Tabela 12: Avaliaes da populao microbiana nos tratamentos com lama de cal e accula incorporados, no final do experimento..................................................54 Tabela 13: Avaliaes da populao microbiana nos tratamentos com lama de cal na superfcie e sem accula, no final do experimento. ...........................................55 Tabela 14: Avaliaes da populao microbiana nos tratamentos com lama de cal incorporada e sem accula, no final do experimento.........................................55 Tabela 15: Avaliaes da toxicidade dos extratos aquosos da lama de cal, do solo e dos tratamentos para Vibrio fischeri, em CE50. ......................................................56

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Tabela 16: Resultado do teste de sensibilidade (referncia) com Vibrio fischeri para Sulfato de Cobre. ..............................................................................................57

RELAO DE FIGURAS

Figura 1: Solo do talho de Pinus taeda de 16 anos, prximo rea de coleta de material para o experimento. Trs Barras (SC). 2000. ...................................................23 Figura 2: Reflorestamento de Pinus taeda de 16 anos mostrando uma densa camada de serrapilheira cobrindo o solo Trs Barras (SC), 2000. ...................................24 Figura 3: Detalhe do solo e da camada de serrapilheira da floresta de Pinus taeda, no local de amostragem do talho de 16 anos. Trs Barras (SC), 2000. ..............26 Figura 4: Valores acumulados de C-CO2, em mg kg-1 de solo seco do talho de Pinus taeda de 16 anos de idade, em cada um dos tratamentos, aps 56 dias de incubao..........................................................................................................41 Figura 5: Valores acumulados de C-CO2, em mg kg-1 de solo seco do talho de Pinus taeda de 20 anos de idade, em cada um dos tratamentos, aps 56 dias de incubao..........................................................................................................42 Figura 6: Valores de pH do solo nos tratamentos com lama de cal nas dosagens de 19 e 26 t ha-1 e sem lama de cal. ..............................................................................46 Figura 7: Valores acumulados de C-CO2 ao final do experimento nos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie do solo. .....................................................48 Figura 8: Resultados acumulados de C-CO2 ao final do experimento nos tratamentos com lama de cal e accula incorporados ao solo. .....................................................49 Figura 9: Resultados acumulados de C-CO2 ao final do experimento nos tratamentos sem accula e lama de cal na superfcie do solo. .....................................................49 Figura 10: Resultados acumulados de C-CO2 ao final do experimento nos tratamentos sem accula e lama de cal incorporados ao solo. .............................................49 Figura 11: Valores de C-CO2 acumulados ao final do experimento em funo do pH do solo. Os valores circundados pelas elipses amarela, verde, vermelha e azul, correspondem, respectivamente aos tratamentos com accula e sem lama de cal, sem accula e sem lama de cal, com lama de cal e com accula e sem lama de cal e com accula.................................................................................64

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1. INTRODUO

Os programas de reflorestamento, na sua grande maioria, utilizam essncias florestais exticas como espcies dos gneros Eucalyptus e Pinus, em substituio s matas tropicais e subtropicais. No Brasil, no ano de 1982, j haviam mais de 5 milhes de hectares plantados com espcies destes dois gneros, com florestas de Pinus compondo 34% deste total, sendo que uma das destinaes principais da madeira gerada o fornecimento de matria prima para a indstria de celulose e papel (Malavolta, 1987). A rea cultivada com estas essncias florestais de rpido crescimento tem uma perspectiva de expanso, especialmente nos pases tropicais, dado o aumento da demanda por esta matria prima (Lima, 1996). Nos solos de florestas, a decomposio da serrapilheira representa um papel importante na ciclagem de nutrientes e aporte de compostos mineralizados para o solo. A espessura da camada de serrapilheira determinada pela quantidade de material que cai da vegetao e pela taxa de decomposio, ou seja, quanto maior o aporte e mais lenta a taxa de degradao, maior esta camada (Correia & Andrade, 1999). Entretanto, os resduos que compem a serrapilheira diferem em funo das espcies florestais e, portanto, existem diferenas entre a liteira de florestas nativas tropicais e a de origem de espcies exticas usadas em reflorestamento. De maneira geral, a degradao de serrapilheira composta por acculas de conferas um processo lento. Berg e Sderstrm (1979) citam dados de que foram necessrios cerca de sete anos para a degradao total

das acculas na Inglaterra. Na liteira de espcies de Pinus spp, a disponibilidade de nutrientes menor, o que implica em decomposio mais lenta, quando comparada de espcies arbreas nativas. Este fato, associado a uma grande produo de acculas, resulta em maior acmulo de serrapilheira na superfcie do solo sob cultivos de Pinus spp., em relao a outras espcies (Lugo, et al., 1990). Alm da disponibilidade de nutrientes, os teores de lignina, celulose e a relao destes compostos com os teores de nitrognio contidos nas acculas e na serrapilheira so fatores destacados como responsveis pela lenta decomposio da serrapilheira observada em alguns estudos. Alm de nitrognio, teores de outros nutrientes como fsforo e enxofre, e componentes como polifenis, so citados como interferentes na velocidade de degradao da serrapilheira (Correia & Andrade, 1999). O solo sob florestas monoespecficas de Pinus sp. apresenta algumas alteraes em relao queles mantidos sob cobertura florestal original. Uma dessas alteraes a diminuio do pH (Fleig et al., 1996). A acidez do solo limitante para diversas culturas agrcolas e florestais, sendo determinante para a atividade dos microrganismos do solo e para a disponibilizao de nutrientes. Alm disso, em pH cido ocorre a solubilizao de alumnio e mangans, que podem ser txicos para as plantas (Foy, 1984). A acidificao do solo reduz a taxa de decomposio da liteira, o tamanho das populaes e a atividade dos microrganismos, especialmente em funo da limitao fisiolgica imposta a muitos grupos microbianos intolerantes acidez. Outra caracterstica dos solos sob florestas de Pinus a alterao na dinmica de nutrientes resultante tanto da decomposio lenta da serrapilheira como tambm pelas altas taxas de absoro destes elementos pelas razes das rvores de Pinus. Ambos os fatores levam a um acmulo de nutrientes na liteira e a uma diminuio das

concentraes de nitrognio, fsforo, clcio e magnsio no solo (Lugo et al., 1990 e Fleig et al., 1996). Em funo disso, mesmo que as espcies de Pinus sejam reconhecidas como tolerantes a solos com baixa fertilidade, com pH cido e com altos teores de alumnio solvel, pode ocorrer a necessidade de adio de clcio e magnsio ao solo para utilizao nesta cultura, visando a reposio destes elementos e correo do pH, como recomenda Gonalves (1995), e ainda a adio de adubao nitrogenada, fosfatada e potssica, segundo Malavolta (1987) e Osaki (1991). Dentre os resultados positivos da correo da acidez do solo sob a floresta de Pinus sp. so destacados o aumento da populao microbiana, proporcionado especialmente pelo aumento no nmero de bactrias e actinomicetos, e a acelerao nos processos de degradao da serrapilheira e mineralizao da matria orgnica do solo (Lohm, et al., 1984; Bth et al., 1992 e Persson et al., 1990/1991). Entretanto, Bth et al. (1980), no encontraram diferenas na taxa de degradao do folhedo aps a calagem e, estudos realizados por Persson et al. (1990/1991) e Neale et al. (1997) apontaram at para a possibilidade de diminuio do desenvolvimento da floresta aps a correo do pH. Estas observaes foram feitas em estudos de curta durao e foram atribudas imobilizao de nitrognio causada pelo aumento da atividade dos microrganismos na degradao do folhedo. Por outro lado, a indstria de celulose e papel pode produzir um resduo slido que contm altos teores de carbonato de clcio. Este resduo, chamado lama de cal, resultante da recuperao do licor de cozimento, utilizado no processo de fabricao de celulose. Estudos realizados por Loureno (1997) e Bognola et al. (1997) com a aplicao deste resduo no solo mostraram que ele proporciona a elevao do pH, indicando o seu potencial para a utilizao como corretivo de pH do solo.

A proposta deste trabalho foi avaliar a utilizao desta lama de cal proveniente de indstria de celulose como corretivo do pH do solo de floresta de Pinus taeda em um experimento de laboratrio. As avaliaes do estudo foram direcionadas para os efeitos sobre a microbiota do solo e suas implicaes sobre a degradao da serrapilheira da floresta de Pinus taeda, sob diferentes teores de lama de cal e de nitrognio e com as acculas e lama de cal incorporadas ou no ao solo.

1.2. Hiptese A aplicao da lama de cal no solo de floresta de Pinus taeda promove o aumento da atividade microbiana, favorecendo os processos de mineralizao da matria orgnica e degradao da serrapilheira.

1.3. Objetivos

1.3.1. Objetivo geral Avaliar os efeitos da aplicao da lama de cal proveniente de indstria de papel e celulose como corretivo de pH do solo em reflorestamento de Pinus taeda e a otimizao da sua utilizao associada adio nitrognio mineral sobre a populao e atividade da comunidade microbiana do solo e a degradao da serrapilheira de Pinus taeda.

1.3.2. Objetivos especficos Avaliar o potencial da lama de cal como corretivo da acidez do solo. Avaliar possveis efeitos txicos da lama de cal e do solo aps aplicao para a bactria Vibrio fischeri, atravs de testes de toxicidade padronizados.

Avaliar a biodegradabilidade da serrapilheira da floresta de Pinus taeda sob diferentes dosagens de lama de cal associada a diferentes adies de nitrognio e com as acculas e lama de cal incorporadas ou na ao solo. Avaliar a populao e a atividade da comunidade microbiana nos diferentes tratamentos do solo.

1.4. Justificativa Investigaes dos parmetros microbiolgicos do solo tm sido consideradas nas avaliaes de degradao de resduos florestais tendo em vista as suas implicaes em processos importantes neste ambiente, como formao de hmus, ciclagem de nutrientes e estruturao fsica do solo. A correo do pH do solo, aumenta o nmero e atividade de bactrias e actinomicetos no solo. Desta forma, atravs da correo do pH e da conseqente adio de clcio ao sistema pode-se melhorar as condies abiticas do ecossistema da floresta de Pinus sp., diminuindo os fatores limitantes e dando condies para o estabelecimento e atividade de uma comunidade microbiolgica mais diversificada, que possa atuar com maior eficincia na degradao da serrapilheira, melhorando a ciclagem de nutrientes no solo da floresta e diminuindo os impactos negativos desta atividade sobre a microbiota e caractersticas qumicas do solo. Entretanto, foi evidenciado tambm que a aplicao de calcrio para a correo do pH pode trazer imobilizao de nitrognio, com prejuzos para o processo de degradao e at para o desenvolvimento da floresta. Alm disto, os teores de nitrognio so apontados como um dos fatores limitantes atuao dos microrganismos na degradao da serrapilheira. Assim, a adio de nitrognio em conjunto aos tratamentos com lama de cal importante por avaliar a contribuio deste elemento ao sistema para

no processo de degradao da serrapilheira e por permitir discriminar possveis inibies ao processo de degradao referentes limitao por nitrognio, permitindo adequar as taxas de aplicao deste nutriente na floresta em proporo lama de cal. A utilizao de um resduo proveniente de indstria de papel e celulose como corretivo de pH representa a possibilidade de retorno desse material ao processo, uma vez que a floresta de Pinus geradora de matria prima para a fabricao da celulose. Alm disso, reduo dos custos com adubao e calagem, diminuio de passivos ambientais resultantes da atividade, como extrao de recursos naturais, acmulo de resduos em depsitos e melhoramento das condies de sustentabilidade dos solos e ciclagem de nutrientes so justificativas para este trabalho.

2. REVISO BIBLIOGRFICA

2.1. Degradao da serrapilheira da floresta de Pinus sp. A velocidade de degradao da camada de serrapilheira determinada por fatores climticos, edficos e biolgicos e a sua composio apresenta uma grande diversidade, variando no somente entre ecossistemas como dentro do ecossistema (Correia e Andrade, 1999). Os principais fatores determinantes da degradao da serrapilheira de espcies vegetais arbreas so os fatores ambientais a composio qumica do folhedo, incluindo os teores de nutrientes. Um estudo com dez espcies arbreas, nativas e exticas ao ambiente de estudo, entre elas Pinus caribea var. hondurensis e Pinus elliottii var. densa, foi feito por Lugo et al. (1990) e mostrou que sob a floresta de Pinus h formao de uma camada de serrapilheira mais espessa e com maior massa, indicando uma maior acumulao, quando comparada com outras espcies florestais. Os fatores determinantes deste acmulo so a alta taxa da formao da serrapilheira e a sua lenta degradao. A baixa degradabilidade foi relacionada, por estes autores, aos baixos teores de nutrientes contidos no folhedo, uma vez que os menores teores de nitrognio foram encontrados no folhedo das espcies de Pinus em relao s demais espcies. Como decorrncia disso, foram observadas mudanas na concentrao e disponibilidade de nutrientes do solo e acmulo dos mesmos na liteira. Assim, os maiores valores totais de nutrientes

acumulados na serrapilheira como nitrognio, fsforo e potssio foram observados nas espcies de Pinus. Como resultado deste acmulo e imobilizao de nutrientes na camada de serrapilheira, os solos das plantaes com espcies deste gnero apresentaram as menores concentraes de nitrognio do que os demais. Os teores de nutrientes contidos nas acculas de Pinus elliottii so citados por Brum (1980) em um estudo feito em plantaes no norte do estado de Santa Catarina e por Lugo et al. (1990). Os teores de nitrognio na serrapilheira foram de 0,76% no primeiro estudo e de 0,65% no segundo. Fioretto et al. (1998) destacam tambm que a baixa concentrao de mangans presente nas liteiras de Pinus pode acarretar em um efeito de imobilizao deste elemento, tornando-o limitante e levando a uma inibio do processo de degradao. Alm da composio qumica, a velocidade do processo de degradao dependente tambm da estrutura dos tecidos vegetais, destacando assim o papel dos teores de lignina contidos neles (Entry e Backman, 1995). Os altos teores de lignina associados baixa proporo de nitrognio so destacados como fatores responsveis pela lenta degradao do folhedo das espcies de Pinus por Witkamp (1966) e Sanger et al., (1996). Alm disso, a relao entre os teores de carbono e de nitrognio (relao C:N) tambm influencia a velocidade de degradao da serrapilheira (Taylor et al. 1989), entretanto, para resduos vegetais com elevado contedo de lignina, como so as acculas de espcies de Pinus, a relao lignina:nitrognio tem sido usada como estimativa mais precisa do potencial de degradao destes resduos (Taylor et al., 1989); (Mellilo et al., 1982). Isto porque, apenas a relao cabono:nitrognio no expressa a forma molecular que se encontra o carbono, podendo estar como molculas estveis e recalcitrantes, como a lignina (Cortez et al., 1996). Entry e Backman (1995) sugerem

ainda, a utilizao da relao lignina:celulose:nitrognio presente no folhedo como ndice de estimativa mais acurado da decomposio da matria orgnica da serrapilheira. As caractersticas do solo tambm podem determinar a composio das acculas, como o teor de lignina e fenilpropanides nelas contido. Sanger et al. (1996) atribuiu maiores teores de lignina em serrapilheiras de florestas em solos com maior saturao por bases. Alm disto, caractersticas do solo, como o teor de nitrognio e a relao C:N, tambm influenciam as taxas de degradao da serrapilheira, segundo Prescott (1996). Segundo este autor, a composio da microbiota do solo, tambm difere com as caractersticas do solo e, por sua vez, tambm influencia a taxa de degradao da serrapilheira. Alm da composio qumica das acculas, outros fatores, como a gua disponvel, tambm so relevantes para a regulao da degradao da serrapilheira, como foi destacado por Virzo de Santo et al. (1993) e Fioretto et al. (1998). Os primeiros autores destacaram que o efeito da umidade pode ser mais importante na degradao da serrapilheira do que a sua composio. Entretanto, ocorrem alteraes na composio da liteira ao longo do processo de degradao e na composio dos microrganismos atuantes, alm de um aumento da capacidade de reteno de umidade. Como decorrncia da perda inicial de compostos de carbono lbeis e de fcil degradao, os teores de lignina tendem a aumentar durante o processo de degradao (Sanger et al., 1996). Por outro lado, o aumento da capacidade de reteno de gua pela serrapilheira medida que a degradao avana, facilita a atuao dos microrganismos, por fornecer condies favorveis de umidade e possibilita perdas de massas maiores. Isto mostra tambm, que limitaes provocadas por baixa umidade podem ser mais severas nos estgios iniciais da degradao (Virzo de Santo et al. 1993). Tambm ocorrem aumentos na concentrao de nutrientes na serrapilheira com

o processo de degradao, o que indica que a mineralizao possa ser mais rpida nas camadas mais profundas e prximas do solo (Lugo et al., 1990). Mas, ao mesmo tempo, que h um incremento na concentrao de nitrognio aps os estgios iniciais da degradao, tornando a serrapilheira mais rica em nitrognio, pode haver o aumento na concentrao de substncias mais recalcitrantes, limitando a ao dos microrganismos pela qualidade do carbono (McClaugherty et al., 1985). Este incremento na concentrao de nitrognio foi atribudo ao maior desenvolvimento de fungos na liteira, especialmente aps a diminuio das concentraes de substncias solveis em gua mais facilmente degradveis (Berg e Sderstrm, 1979). Aps o resduo vegetal passar a conter compostos recalcitrantes, a tarefa de degradao da serrapilheira , segundo estes autores, realizada predominantemente por fungos, em funo da sua maior afinidade por estes substratos.

2.2. Microbiota do solo e atuao na biodegradao da serrapilheira Gourbire (1986) caracterizou a composio da microbiota da liteira de conferas (Abies alba) e a dinmica das espcies ao longo da degradao. Este autor definiu quatro grupos sucessionais de fungos ao longo do processo: (a) epfitos da superfcie das acculas vivas; (b) saprfitos primrios, colonizadores internos das acculas senescentes; (c) saprfitos internos ausentes na primeira fase da senescncia; (d) saprfitos externos, que se desenvolvem superficialmente responsveis pelo escurecimento do material. So citadas as espcies Lophodermium pinastri, Verticicladium trifidum, Marasmius

androsaceus, Troposporella acicola, Kriegeriella mirabilis, envolvidas na degradao da serrapilheira de Pinus. Um estudo desenvolvido por Prescott (1996) avaliou a degradao de uma mesma serrapilheira em vrios tipos de solo e observou que as diferenas na composio

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da microbiota de cada um deles determinaram taxas de degradao diferentes. Alm disto, os valores de degradao mais elevados foram verificados nos solos que originalmente estavam associados a uma serrapilheira de estrutura semelhante que foi testada. Isto indica que a microbiota de um solo de uma floresta especfica em funo da serrapilheira formada, evidenciando que a composio e atividade dos microrganismos do solo dependente tanto das caractersticas do solo como da serrapilheira. Witkamp (1966) j havia atribudo diferentes taxas de liberao de CO2 da serrapilheira de vrias espcies arbreas s diferenas na composio microbiana do solo. Entretanto, cita tambm que as caractersticas das acculas que compem a serrapilheira so ainda mais importantes na determinao da taxa de degradao do que a composio da microbiota atuante. Por outro lado, alm do seu papel como agente na degradao da serrapilheira deve ser destacada a importncia da microbiota como reservatrio e fonte de nutrientes para o solo durante os processos de degradao da serrapilheira. Este processo dinmico destacado por Gama-Rodrigues (1999), que cita dados que mostram que a biomassa microbiana contm de 2 a 5% do carbono orgnico do solo e 1 a 5% do nitrognio total do solo, evidenciando que este compartimento exerce uma relevante influncia na disponibilizao de nutrientes oriundos da serrapilheira para o solo. Desta forma, o acompanhamento da biomassa microbiana no solo tambm tm sido utilizado como ferramenta para avaliao dos parmetros microbiolgicos do solo, em complemento s anlises de composio e atividade. A composio da microbiota do solo tem sido avaliada, tanto em trabalhos de degradao da serrapilheira como tambm em estudos da composio microbiana dos solos sob acidificao ou que receberam correo da acidez. Tcnicas de microbiologia tradicionais para avaliao da composio microbiana do solo tm sido empregadas com

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resultados satisfatrios, ainda que procedimentos mais recentes tenham apresentado vantagens em discriminar as diferenas na composio microbiana, como ser apresentado no item subseqente. Ferreira (1998) utilizou tcnicas de contagem em meio slido para discriminar a composio da microbiota do solo aps aplicao de resduo de curtume e observou diferenas temporais aps a aplicao do resduo, especialmente na populao de actinomicetos. So conhecidas, entretanto, as limitaes destas tcnicas tradicionais em identificar todos os grupos microbianos presentes num ambiente to complexo quanto o solo. Atlas e Bartha (1997) salientam que os mtodos de contagem em meio slido so amplamente utilizados e apresentam bons resultados para contagens de organismos viveis e culturveis, entretanto, no podem ser utilizados como tcnicas para a obteno da quantificao de microrganismos totais do solo.

2.3. Efeitos do pH do solo sobre a biodegradabilidade da serrapilheira Alm da caracterstica de lenta decomposio da serrapilheira e conseqente baixa disponibilizao de nutrientes, as florestas de Pinus provocam alteraes nas caractersticas qumicas dos solos. Dentre estas alteraes, Fleig et al. (1996) destacam como uma das principais, a acidificao da camada de solo at 10cm de profundidade, que acarreta maior solubilizao do alumnio, quando comparada com as condies existentes na floresta mista de araucria, que a vegetao original do local de estudo. A diminuio do pH, alm de alterar as caractersticas qumicas do solo, tem efeitos sobre a microbiota do solo, destacando-se o predomnio relativo da concentrao de fungos, em funo da sua maior tolerncia acidez, em detrimento das populaes de bactrias e actinomicetos. Alexander (1977) cita que em pH abaixo de 5,5 no solo j h um predomnio de fungos filamentosos executando a tarefa de degradar a celulose. Este

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mesmo autor salienta tambm que as taxas de decomposio em solos neutros so tipicamente maiores do que em solos cidos. Em um estudo que avaliou a resposta da comunidade microbiana acidificao induzida do solo atravs da incorporao de agentes cidos, Bth et al. (1980) observaram que ocorreu uma diminuio da biomassa microbiana total, mesmo com um aumento do nmero de fungos, acompanhada de uma significativa reduo da degradao da serrapilheira. Essa diminuio da taxa de decomposio tambm foi observada por Lohm et al. (1984), evidenciada pela diminuio da respirao no solo que recebeu tratamento que acidificou o pH. Em um estudo sobre a degradao da liteira de conferas e angiospermas desenvolvido por Dursun et al. (1993), foi avaliado o efeito do pH e adio de sulfito, utilizando o fungo Cladosporium cladosporoides, que citado como uma espcie importante como degradadora de folhas da serrapilheira, em um experimento sem solo. Neste estudo, foram obtidas relaes na diminuio da liberao de CO2 da liteira com o aumento da concentrao de sulfito e com a reduo do pH. Entretanto, no foram observados efeitos do pH isoladamente na atividade do fungo, o que indica que a atividade dos fungos pode no ser afetada pela acidificao do solo. Por outro lado, os efeitos da neutralizao da acidez do solo sobre a atividade e composio da microbiota foram avaliados por vrios autores e as alteraes mais evidentes esto relacionadas com o aumento da populao bacteriana e da atividade geral dos microrganismos, aps a calagem (Lohm et al., 1984; Bth et al., 1992; Bth e Arnebrant, 1994; Bth et al., 1995). Estes resultados foram concordantes tambm com os de Neale (1997), que acrescentou ainda, o aumento na biomassa geral, que foi atribudo ao aumento na populao de bactrias autctones intolerantes acidez. Foram observados, tambm, aumentos na populao de actinomicetos (Bth et al., 1992 e Frostegrd, 1993). Alm disso, aps a calagem, Lohm et al. (1984) relataram aumentos

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na taxa de mineralizao de carbono, resultado que foi obtido tambm por Persson et al. (1990/1991), mas apenas para componentes da serrapilheira que apresentavam baixa relao C:N (entre 24 a 28). Este ltimo autor encontrou, por outro lado, que a taxa de mineralizao lquida do nitrognio foi reduzida aps a calagem. No trabalho j citado de Bth et al. (1980), os resultados de biodegradao da serrapilheira aps a calagem haviam sido pouco conclusivos, indicando at uma pequena diminuio na taxa de decomposio e uma maior reteno de nitrognio nesta camada. Concordando com estes trabalhos, Lohm et al. (1984) tambm indicaram que ocorreu imobilizao do nitrognio aps a correo do pH. No estudo de Neale et al. (1997), tambm foi observado um efeito de reduo da taxa de mineralizao de nitrognio em solos com alta relao carbono:nitrognio, e que foi atribudo incorporao de nitrognio em formas orgnicas estveis e diminuio da toxicidade de compostos fenlicos (que so pobres em nitrognio) causada pela ligao do clcio a estas molculas, tornando-as mais facilmente degradveis, aumentando a demanda por nitrognio disponvel. Os estudos que melhor retratam as alteraes que ocorrem na estrutura da comunidade microbiana aps a neutralizao do pH do solo foram feitos utilizando as anlises do padro de cidos graxos dos fosfolipdeos, pois refletem melhor a diversidade dos microrganismos do solo (Zelles et al., 1995) e (Bth et al., 1992). Estes ltimos autores utilizaram estas anlises e identificaram aumentos do nmero de bactrias em relao ao nmero de fungos, como j foi citado. Por outro lado, a relao de biomassa entre estes dois grupos manteve-se constante quando a mudana ficou abaixo de dois pontos de pH (Bth et al., 1995). Estes dois trabalhos indicaram que h uma resposta similar da estrutura da comunidade microbiana s alteraes de pH do solo, quando analisadas por estas tcnicas. Outro resultado importante obtido por Bth et al. (1992) foi

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que, atravs da anlise da relao de ismeros trans:cis dos cidos graxos dos fosfolipdeos, foi observada a diminuio do estresse nutricional das bactrias, indicada pelo aumento desta relao aps a elevao do pH do solo pela alcalinizao.

2.4. Testes ecotoxicolgicos com microrganismos Testes de toxicidade ou ecotoxicolgicos so ferramentas utilizadas para a avaliao de possveis efeitos danosos de substncias ou amostras sobre organismos. Esses testes consistem na exposio de organismos vivos diferentes concentraes da amostra, sob condies controladas e especficas para cada espcie, e refletem os efeitos da amostra como um todo sobre os organismos, sendo ela complexa ou no, incluindo aes sinergticas, antagnicas e aditivas de todos os componentes fsicos, qumicos e biolgicos que a compem. Os efeitos observados no teste diferem para cada sistema-teste e podem estar baseados na mortalidade ou efeitos adversos sobre o comportamento ou metabolismo. A sensibilidade na deteco da toxicidade de uma amostra depende do organismo-teste e do sistema teste empregado. Os testes de toxicidade aguda expressam o efeito de uma amostra sobre uma fase curta no ciclo de vida do organismo-teste, enquanto os testes de toxicidade crnica expressam o efeito de uma amostra sobre o organismo durante o seu ciclo de vida ou uma parte importante dele (Kruijf, 1988 e Rand et al., 1995). Os resultados de testes de toxicidade aguda so, usualmente, expressos como CL50 ou CE50 que a concentrao que causou efeito letal, ou efeito adverso, respectivamente, para 50% dos organismos expostos amostra. Desta forma, a toxicidade aguda de uma amostra inversamente proporcional ao valor de CE50, ou seja, quanto menor o valor da CE50, mais txica a amostra (Kruijf, 1988).

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Avaliaes da toxicidade para microrganismos de resduos a serem aplicados no solo, bem como no solo aps a aplicao, tm sido efetuadas por diversos pesquisadores e so importantes na indicao prvia de possveis efeitos inibitrios e/ou deletrios sobre a microbiota do solo. Um procedimento para avaliao de efeitos de substncias sobre

microrganismos do solo foi padronizado pela SETAC (1995), que traa diretrizes para avaliao de substncias a serem aplicadas no solo. Estes testes se baseiam na avaliao da atividade de bactrias heterotrficas na degradao de compostos orgnicos, atravs da taxa de formao de CO2 e na avaliao da atividade das bactrias envolvidas nos processos de nitrificao, atravs da anlise da transformao de amnio em nitrato, portanto, sem especificar um organismo como indicador nico. Um teste de toxicidade com microorganismo, a bactria luminescente Vibrio fischeri, foi padronizado atravs do sistema Microtox (Azur Environmental, 1995). Este teste est baseado na medio de um parmetro fisiolgico do organismo, que a emisso de luminescncia (Mayfield, 1993). O Gnero Vibrio integrante da Famlia Vibrionaceae e era anteriormente denominado de Gnero Photobacterium. So bastonetes Gram-negativos marinhos que podem viver simbioticamente com peixes de guas profundas (Frobischer, 1974). O mecanismo de deteco de algum efeito txico sobre a fisiologia de Vibrio fischeri est baseado na interrupo ou inibio da reao bioqumica, responsvel pela emisso da luminescncia descrita abaixo, aps a exposio do organismo amostra:

Luciferase FMNH2 + O2 + R-CHO Luz FMN + R-COOH

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A reao est baseada na oxidao de uma Flavina Mononucleotdeo em estado reduzido que libera energia. Nas bactrias luminescentes, a energia disponvel desta reao no utilizada para regenerao de ATP, mas dissipada na forma de luz. O teste se baseia na medio da luminescncia emitida pela bactria em diferentes concentraes da amostra, em 15 minutos de exposio. A concentrao do poluente que promove uma reduo da emisso de luz em 50% caracteriza a CE50, analogamente DL50 (dose letal a 50% dos organismos teste) usada na toxicologia. A metodologia do teste com Vibrio fischeri foi posteriormente padronizado pela CETESB (2001a), a qual foi concebida para avaliao de amostras lquidas, mas que apresenta tambm as diretrizes para avaliaes de extratos aquosos de amostras slidas, permitindo que este teste seja utilizado para testes com amostras de solo, amparado por um procedimento padronizado. Este teste foi recomendado em uma reviso de metodologias realizado pela SETAC (1999) como um bioensaio para avaliao de possveis efeitos de metais sobre os microrganismos do solo, destacando este procedimento pela sua capacidade de repetibilidade, sensibilidade e facilidade de execuo. Gestel et al. (2001) utilizaram avaliaes de toxicidade em solo contaminado com vrios organismos teste e observaram que o teste com Vibrio fischeri mostrou uma resposta correspondente com os resultados de toxicidade obtidos para os demais organismos. Harkey e Young (2000) avaliaram dois tipos de testes com Vibrio fischeri para amostras de solo e observaram que tanto o teste realizado com a extrao em soluo salina como no teste realizado na fase slida, apresentaram-se correlacionados com os teores dos contaminantes avaliados. Atlas e Bartha (1998) citam um trabalho de avaliao da biorremediao de um solo contaminado com leo combustvel e utilizaram a toxicidade para Vibrio fischeri

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(quando o gnero ainda era denominado Photobacterium) como um dos parmetros para avaliao da contaminao do solo. A CE50 inicial era de 44 g/L de solo e passou para nveis no detectveis aps o perodo de tratamento.

2.5 Aplicao de resduos slidos no solo O uso do solo como receptor para resduos orgnicos comeou a ganhar nfase e preocupao pela comunidade cientfica brasileira a partir de discusses na dcada de 80, quando aumentou a necessidade de tratamento de resduos urbanos e industriais e quando os dejetos animais deixaram de ser vistos apenas como fertilizantes e comearam a ser considerados como fontes potenciais de poluio, principalmente dos aqferos. Com a elevao dos custos de adubao mineral, os resduos orgnicos produzidos pela indstria, pelas cidades ou pelas atividades agrcolas passaram a ter maior importncia como materiais reciclveis e passveis de aproveitamento para melhorar as condies do solo (Tedesco, et al., 1999). Entretanto, a possibilidade de um resduo ser descartado atravs da sua aplicao no solo como corretivo ou fertilizante ir depender das suas caractersticas, do seu valor corretivo de acidez ou fertilizante e dos seus efeitos sobre o ambiente (Ferreira, 1998). Efroymson, et al. (1997) procuraram definir padres como critrios de comparao (benchmarks) de contaminantes com efeitos potenciais adversos sobre invertebrados do solo e da liteira, bem como nos processos heterotrficos. Estes critrios incluem efeitos txicos sobre invertebrados (obtidos atravs de testes de toxicidade) e processos microbianos heterotficos. Agncias governamentais de meio ambiente tm se preocupado, diante da crescente utilizao do solo como receptor de resduos, em

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estabelecer critrios para o descarte neste compartimento (EPA, 1993 e 1995 e CETESB, 2001b). O monitoramento de metais em um solo que recebeu aplicaes de resduo relevante tendo em vista os possveis aportes destes elementos a mananciais hdricos, como gua subterrnea, ou cultivos agrcolas. A CETESB (2001b) compilou critrios estabelecidos por outros pases para padronizar a avaliao de poluentes no solo, procurando criar critrios variveis para situaes diferentes tendo em vista as principais vias de exposio destes compostos, com foco na proteo da sade humana e preservao dos ecossistemas. Recomendaes de quantidades mximas cumulativas (carga) de metais a serem aplicados no solo, segundo EPA (1993), para lodo de estaes de tratamento de esgoto so, entre outros: Cd=39kg/ha; Cr=3000kg/ha; Cu=1500kg/ha; Ni=420kg/ha e Zn=2800kg/ha. Por outro lado, a utilizao do solo como receptor para resduos industriais no se baseia apenas no aproveitamento dos processos microbianos para melhoria da condio nutricional do solo pela mineralizao dos compostos presentes no rejeito, mas tambm para degradao e detoxificao destes resduos no solo atravs da transformao enzimtica ou da imobilizao de compostos indesejveis (Tedesco, et al. 1999 e Atlas e Bartha, 1998).

2.6 Lama de cal e o seu potencial como corretivo de pH do solo Durante o processo de fabricao do papel, um dos resduos produzidos a chamada lama de cal. Este resduo gerado na etapa de caustificao, onde recuperado o licor de cozimento. O licor de cozimento constitudo principalmente por hidrxido de sdio em soluo, utilizado na digesto da madeira. Aps a passagem por

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esta etapa, o hidrxido de sdio do licor est transformado em carbonato de sdio. A recuperao feita com a adio de cal hidratada, regenerando o hidrxido de sdio, que retorna ao processo de digesto da celulose, e produzindo o rejeito, chamado de lama de cal, constitudo principalmente por carbonato de clcio. A utilizao deste resduo como corretivo do pH do solo foi testada por Loureno (1997) e Bongnola et al. (1997) e foi considerada como eficiente por ambos os autores. A composio mdia do material caracterizado por Loureno (1997) foi de CaO (53,1%), MgO (0,16%) e NaOH (0,09%). Este autor cita tambm a presena de sdio neste resduo, o qual mereceu destaque em funo dos possveis efeitos decorrentes da sua aplicao no solo, conhecidamente danosos dada sua ao dispersante sobre as argilas, interferindo negativamente na estruturao fsica do solo. Entretanto, nestes estudos no foram observados indcios de efeitos adversos potenciais no solo atribudos ao sdio, em funo das concentraes resultantes no solo, aps a aplicao do resduo, terem sido baixas. Foram encontrados, neste resduo caracterizado por Bognola et al. (1997), metais pesados como zinco, chumbo, cdmio e mercrio, que devem ser monitorados em funo do risco ambiental que representam. Segundo a Environmental Protection Agency - USA (EPA, 1995) a maioria dos estudos no mostra efeitos adversos decorrentes dos metais pesados associados a bioslidos sobre a atividade dos microrganismos, incluindo os processos de nitrificao ou mineralizao do nitrognio. Entretanto, segundo o trabalho acima citado, efeitos negativos foram observados sobre a habilidade de fixar nitrognio de linhagens de Rhizobium em locais onde houve aplicao de resduos slidos com altas concentraes de metais (resduos contendo 100 mg/Kg de cdmio e 3000 mg/Kg de zinco).

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3. MATERIAL E MTODOS

Para conduo do experimento, os trabalhos foram divididos em uma etapa piloto e em uma etapa confirmatria. A etapa piloto contemplou os trabalhos de caracterizao qumica do resduo (lama de cal), avaliao do seu poder corretivo de pH e avaliao prvia dos efeitos sobre a atividade dos microrganismos do solo de dois talhes de Pinus taeda aps a aplicao deste resduo. Na etapa piloto, os trabalhos tiveram como objetivo o direcionamento da etapa confirmatria, que enfocaram os efeitos dos tratamentos realizados sobre a biodegradabilidade da serrapilheira e sobre a microbiota do solo. Ambos os experimentos foram realizados em laboratrio, onde foram estudados diferentes tratamentos aplicando a lama de cal (LC) para correo do pH do solo sob reflorestamento de Pinus taeda nas dosagens de 19t ha-1 e 26t ha-1, em combinao com duas dosagens de nitrognio (40 e 80 kg ha-1), e com acculas e lama de cal incorporadas e no incorporadas ao solo, mais os tratamentos controle que consistiram no solo sem tratamento para cada um dos fatores envolvidos. As variveis, na etapa confirmatria, foram acompanhadas atravs de anlises qumicas do solo (pH, nutrientes e metais), biolgicas (composio, atividade e biomassa da microbiota do solo) e ecotoxicolgicas (solo e resduo).

3.1 Descrio do local e caracterizao do solo Uma rea vegetada com Pinus taeda foi selecionada para coleta de solo e serrapilheira para o experimento. Esta uma rea de reflorestamento da empresa Rigesa, Celulose, Papel e Embalagens Ltda., que est localizada no planalto norte do estado de Santa Catarina, no municpio de Trs Barras. Esta empresa utiliza reflorestamentos de Pinus e Eucalyptus para fornecimento de matria prima para celulose e se dedica fabricao de papel Kraftliner de fibra virgem. O clima desta regio do tipo cfb, segundo a classificao de Keppen e a vegetao original composta pela mata mista de Araucaria angustifolia. Dois talhes monoespecficos povoados com rvores de Pinus taeda de 20 anos e 16 anos de idade, foram utilizados para amostragens de solo e acculas para os ensaios. O solo que ocorre do tipo Latossolo Vermelho, que segundo EMBRAPA (1999), est dentro do grupo de solos caracterizados pela presena de horizonte B latosslico, solos profundos e bem drenados, podendo atingir 200 cm ou mais. A rea em estudo no recebeu aplicao de adubos ou pesticidas aps o plantio. A localizao dos pontos de coleta de solo dos talhes selecionados, obtida por GPS, esto apresentados na Quadro 1. As principais caractersticas dos solos coletados no talho de 16 anos (Ponto 1), o qual foi utilizado na etapa definitiva, foram pH em gua: 3,7; matria orgnica: 56 g kg-1 fsforo: 4,0 mg L-1, potssio: 25 mg L-1; clcio trocvel 0,2 cmolcL-1; magnsio trocvel: 0,2 cmolcL-1. A caracterizao qumica e mineralgica de cada um dos solos coletados, analisadas pelo Laboratrio de Anlises do Departamento de Solos da Faculdade de Agronomia da UFRGS, esto apresentadas no Apndice 1. Na Figura 1 pode ser visualizado o perfil do solo da rea reflorestada com Pinus taeda onde foram feitas as coletas de material.

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Figura 1: Solo do talho de Pinus taeda de 16 anos, prximo rea de coleta de material para o experimento. Trs Barras (SC). 2000.

A camada de serrapilheira em cada um dos talhes foi quantificada em campo para subsidiar os experimentos em laboratrio e est apresentada no Apndice 2. Na Figura 2 pode-se observar a densa camada de serrapilheira, promovendo a cobertura completa do solo, existente na rea de reflorestamento de Pinus taeda.

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Figura 2: Reflorestamento de Pinus taeda de 16 anos mostrando uma densa camada de serrapilheira cobrindo o solo Trs Barras (SC), 2000.

Quadro 1: Localizao e descrio dos pontos de coleta de solo e acculas para os trabalhos de laboratrio.
PONTO PONTO 1 PONTO 2

LOCALIZAO
26 07'71''S 050 19'01''W 26 07'48''S 050 19'04''W

DESCRIO
Pinus taeda plantado em1984 (16 anos) Pinus taeda plantado em1980 (20 anos)

Antes da montagem dos experimentos, os solos foram secos ao ar e peneirados em malha 2 mm, retirando-se fragmentos de razes e partculas de tamanho maiores que este.

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3.2. Caracterizao da lama de cal A caracterizao qumica da lama de cal foi executada pelo Laboratrio de Anlises do Departamento de Solos da Faculdade de Agronomia da UFRGS, cujas principais caractersticas qumicas do resduo seco a 75C, so: pH (1:5): 10,7; carbono orgnico: 22 g kg-1; clcio:18 g kg-1; Magnsio: 0,86 g kg-1 e umidade 29,7%. A

caracterizao qumica completa da lama de cal est apresentada no Apndice 3. Alm da caracterizao qumica, a lama de cal foi analisada quanto o seu poder de neutralizao, atravs da determinao do ndice PRNT (Poder Relativo de Neutralizao Total), a sua Eficincia Relativa (ER%) e a faixa de PRNT para calcrio agrcola, determinados atravs das metodologias descritas em Tedesco et al. (1995), cujos resultados esto apresentados nos Apndices 4 e 5. O valor de PRNT obtido para este material foi de 79,04%, valor que foi utilizado para clculo das doses a serem aplicadas ao solo, visando a elevao do pH. Para uniformizar a aplicao a lama de cal foi seca e peneirada em malha de 1mm previamente adio aos tratamentos.

3.3. Amostragens de solo e acculas As amostragens de solo para anlises e para montagem dos experimentos de laboratrio foram realizadas na camada de 0-20 cm, coletando seis pontos de cada talho, compondo uma amostra nica. A coleta das acculas foi feita recolhendo-se o material compreendido na camada superficial da serrapilheira, ou camada L, e que se caracteriza por ser composta por folhas recm cadas e ainda no decompostas (Correia & Andrade, 1999). Na Figura 3 pode ser observada a camada de serrapilheira e o solo sob floresta de Pinus taeda nos locais de coleta de material, do talho de 16 anos de idade.

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Figura 3: Detalhe do solo e da camada de serrapilheira da floresta de Pinus taeda, no local de amostragem do talho de 16 anos. Trs Barras (SC), 2000.

3.4 Etapa piloto Para a etapa piloto, para cada um dos solos testados, foram empregados os tratamentos descritos na matriz apresentada no Quadro 2, que consistiram na utilizao de duas doses de lama de cal visando elevar o pH do solo para 5,5 e 6,0; combinadas a

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duas dosagens de nitrognio e duas formas de manejo (resduos incorporados ou na superfcie do solo).

Quadro 2: Tratamentos realizados na etapa preliminar no solo do talho de 16 anos e no solo do talho de 20 anos.

Adio de lama de cal

Adio de Nitrognio
Sem N 40 kg ha-1 N 80 kg ha-1 N

Forma de aplicao
Superficie* Incorporado

Sem correo

Superficie Incorporado Superficie Incorporado

Sem N Correo para pH 5,5 -1 Lama de cal=19t ha 40 kg ha-1 N 80 kg ha-1 N

Superficie Incorporado Superficie Incorporado Superficie Incorporado

Sem N Correo para pH 6,0 -1 Lama de cal=26t ha 40 kg ha-1 N 80 kg ha-1 N * Tratamentos no realizados

Superficie Incorporado Superficie* Incorporado Superficie Incorporado

A correo de pH do solo foi realizada atravs da adio de lama de cal valendose da tabela padro para correo de solo contida em Tedesco et al. (1995) onde so recomendadas as dosagens de calagem a serem aplicadas em funo do pH do solo medido na forma do ndice SMP, e em funo do valor de PRNT do corretivo a ser empregado. O ndice SMP, tambm chamado de acidez potencial, representa os teores de hidrognio e alumnio presentes no solo, e reflete a necessidade da carga de corretivo para aumento do pH do solo (Silva, 1999). O valor de SMP e est apresentado no

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Apndice 1 para cada tipo de solo. O valor do poder corretivo (PRNT), utilizado para calcular a dosagem a ser aplicada da lama de cal, est apresentado no Apndice 5. Com bases nestes valores, as doses de lama de cal aplicadas para elevao do pH do solo para pH 5,5 e 6,0 obtidas para ambos os solos foram: Solo 1 (Talho de 16 anos): 6,8 g de lama de cal por kg de solo (base seca), que corresponde a 19,0 toneladas de lama de cal por hectare, para correo do pH do solo para 5,5 e 9,3 g de lama de cal por kg de solo (base seca), que corresponde a 26,0 toneladas de lama de cal por hectare para correo do pH do solo para 6,0. Solo 2 (talho de 20 anos): 6,25 g de lama de cal por kg de solo (base seca), que corresponde a 19,0 toneladas de lama de cal por hectare, para correo do pH do solo para 5,5 e 8,55 g de lama de cal por kg de solo (base seca), que corresponde a 26,0 toneladas de lama de cal por hectare para correo do pH do solo para 6,0. Deve-se destacar que, mesmo com as diferenas de pH SMP verificadas entre os solos (4,1 e 4,3 para os solos dos talhes de 16 e 20 anos, respectivamente), as quantidades de calcrio a serem adicionadas foram iguais, por ficarem, estes valores, dentro da mesma faixa da tabela citada. As doses de aplicao de nitrognio foram obtidas atravs da recomendao de Silva (1999), para a cultura de Pinus sp., tomando como base o teor de matria orgnica dos solos. Assim, com base nestes valores, apresentados no Apndice 1, a dose recomendada de nitrognio para os solos de ambos os talhes foi de 40kg de nitrognio por hectare. Entretanto, foi testado tambm o dobro desta dose (80kg ha-1). O nitrognio foi aplicado ao solo na forma de uria em soluo. Da mesma forma como ocorreu para a dosagem de calcrio, os valores resultantes para aplicao de nitrognio foram os mesmos, por estarem dentro da mesma faixa.

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A quantidade de acculas a ser aplicada em cada solo foi calculada com base nos valores levantados no campo para cada um dos talhes, que esto apresentados no Apndice 2. Desta forma, foram adicionados 15,5 g de acculas por kg de solo (base seca) nos tratamentos do talho 1 e 13,7 g de acculas por kg de solo (base seca) nos tratamentos do talho 2. Para facilitar o manuseio, preciso das medies de massa e padronizao do tamanho dos fragmentos, as acculas foram trituradas at partculas de 1mm. Nos tratamentos em que a forma de aplicao dos resduos foi feita atravs da incorporao ao solo, a lama de cal e as acculas foram misturadas ao volume total de solo contido dentro do frasco de incubao. O experimento de bancada foi montado em frascos de vidro de 2000 mL com tampa de fechamento hermtico. Em cada um foi colocado 200 g de solo (como solo seco), mas com a umidade corrigida para 50% da capacidade de campo do solo. A durao do experimento foi de 56 dias (8 semanas). Os parmetros acompanhados nesta fase do experimento foram o pH final do solo e a atividade da microbiota do solo, atravs da captura do CO2 liberado com NaOH, e quantificado por titulometria de neutralizao, seguindo a tcnica descrita por Stotzky (1965). As anlises de CO2 foram realizadas em 1, 2, 4, 7, 14, 28, 35, 42, 49 e 56 dias aps o incio do experimento.

3.5. Etapa confirmatria Para a etapa confirmatria, estabelecida aps os resultados da etapa piloto, foram montados os tratamentos contidos na matriz apresentada no Quadro 3.

Quadro 3: Tratamentos realizados na etapa definitiva no solo do talho de 16 anos.

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Adio de lama de cal

Adio de Nitrognio

Forma de aplicao
Superfcie

Acculas
Sem accula Com accula

Sem N Incorporado

Sem accula* Com accula

Superficie Sem correo 40 kg ha N Incorporado

-1

Sem accula Com accula Sem accula* Com accula

Superfcie 80 kg ha N Incorporado
-1

Sem accula Com accula Sem accula* Com accula

Superfcie Sem N Incorporado Correo para pH 5,5 Lama de Cal -1 LC=19t ha

Sem accula Com accula Sem accula Com accula

Superficie 40 kg ha N Incorporado
-1

Sem accula Com accula Sem accula Com accula

Superfcie 80 kg ha N Incorporado
-1

Sem accula Com accula Sem accula Com accula

Superfcie Sem N Incorporado Correo para pH 6,0 Lama de cal -1 LC=26t ha

Sem accula Com accula Sem accula Com accula

Superficie 40 kg ha N Incorporado
-1

Sem accula Com accula Sem accula Com accula

Superfcie 80 kg ha N Incorporado
-1

Sem accula Com accula Sem accula Com accula

* Tratamentos no includos no experimento.

30

Nesta etapa do trabalho, foi utilizado apenas o solo coletado no talho 1, povoado com Pinus taeda de 16 anos. A exemplo do que foi realizado no experimento piloto, as dosagens aplicadas de lama de cal para correo do pH do solo e adubao nitrogenada seguiram as tabelas padro contidas em Tedesco et al. (1995) e Silva (1999), respectivamente, levando-se em considerao as caractersticas do solo e da lama de cal, apresentadas nos Apndices 1 e 5, respectivamente. Desta forma, as dosagens aplicadas foram: Aplicao de lama de cal para correo do pH do solo: 6,8 g de lama de cal por kg de solo (base seca), que corresponde a 19,0 toneladas de lama de cal por hectare, para correo do pH do solo para 5,5 e 9,3 g de lama de cal por kg de solo (base seca), que corresponde a 26,0 toneladas de lama de cal por hectare para correo do pH do solo para 6,0. Aplicao de adubao nitrogenada: foram usadas duas dosagens, 40 kg e 80 kg de nitrognio por hectare, aplicado ao solo na forma de uria em soluo. A quantidade de accula triturada adicionada ao solo seguiu os valores apresentados no Apndice 2, levando em considerao os dados levantados em campo, a exemplo do experimento preliminar. Somados aplicao de lama de cal e nitrognio ao solo foram testados tambm tratamentos incorporando-se estes tratamentos ao solo e com e sem accula. O experimento de bancada foi montado em frascos de vidro de 2000 mL com tampa de fechamento hermtico. Em cada um foi colocado 80 g de solo (como solo seco). Na montagem do experimento a umidade do solo foi corrigida para 50% da sua capacidade de campo, a fim de garantir a atividade biolgica e os processos metablicos, mas sem afetar a difuso do oxignio entre os poros do solo. Para cada tratamento foram

31

realizadas rplicas extingveis para cada dia de anlise, e trs replicatas para cada uma. A durao do experimento foi de 90 dias. Os parmetros acompanhados nesta fase do experimento esto descritos nos itens a seguir.

3.6 Acompanhamento dos parmetros 3.6.1 Anlises qumicas Durante o experimento, foram acompanhadas as seguintes caractersticas qumicas do solo em cada um dos tratamentos: a) pH do solo em gua destilada (1:1) ou acidez ativa, determinada por potenciometria de eletrodo combinado; b) ndice SMP ou acidez potencial, determinada por potenciometria de eletrodo combinado com o solo, adicionando-se mistura solo:gua utilizada na anlise de pH em gua, 5 ml da soluo SMP e determinando-se o pH novamente; c) Carbono orgnico total, pela tcnica de Walkley-Black, que consiste da oxidao dos compostos orgnicos do solo com K2Cr2O7 e da determinao pela titulao do excesso de K2Cr2O7 com FeSO4. d) Fsforo extravel; determinado por espectrometria de absoro aps extrao em soluo cida de HCl 0,05M + H2SO4 0,0125M e leitura no comprimento de onda de 660nm. e) Potssio e sdio trocveis, determinados por emisso atmica no fotmetro de chama a partir da amostra extrada como descrito no item acima. f) Nitrognio mineral, na forma de nitrato, determinado por potenciometria de on seletivo na amostra extrada em soluo de CaCl2 0,02M, seguida de centrifugao.

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g) Metais: Clcio, Magnsio, Cobre e Zinco trocveis, avaliados por espectrofotometria de absoro atmica, aps extrao em KCl 1M. Todos os procedimentos para a realizao das anlises qumicas seguiram as metodologias descritas em Tedesco et al. (1995), exceto a determinao de nitrato, que foi realizada em potencimetro Denver Modelo 225 acoplado a eletrodo de on seletivo. As anlises foram realizadas em cada uma das replicatas, no incio e no final do experimento (90 dias), exceto as anlises de pH que foram realizadas em 0, 30, 60 e 90 dias de experimento e as anlises de nitrato, que foram realizadas somente no final do experimento (90 dias). As solues que exigiam padronizao para anlises quantitativas foram elaboradas segundo as tcnicas descritas em Morita e Assumpo (1972). Os metais clcio e magnsio foram selecionados pela sua importncia em processos de aplicao de corretivos de acidez no solo. J os metais cobre e zinco foram includos entre as variveis selecionadas por terem sido estes os metais que apresentaram concentraes mais altas entre os analisados na lama de cal. As subamostragens de solo de cada tratamento para retirada de alquotas de para as anlises foram feitas aps a homogeneizao do solo, inclusive aqueles tratamentos onde as acculas e a lama de cal haviam sido aplicadas na superfcie do solo.

3.6.2 Anlises de respirometria A atividade microbiolgica do solo foi avaliada por respirometria, a qual foi realizada seguindo a tcnica descrita por Stotzky (1965) que consiste na captura do CO2 liberado da mineralizao do material orgnico em uma soluo de NaOH 1mol L-1,

mantida em um pequeno recipiente dentro do frasco hermtico, contendo 10 ml desta soluo. A captura do CO2 se d pela reao qumica apresentada abaixo:

33

CO2 + NaOH

NaHCO3

Aps o perodo incubao, a soluo de NaOH foi adicionada de 5 mL de BaCl2 1 mol L-1. O NaHCO3 formado calculado atravs da determinao do NaOH excedente na soluo, por titulometria de neutralizao com HCl 1 mol L-1. O C-CO2 liberado calculado atravs da seguinte frmula, descrita em Stotzky (1965): mg C-CO2 = (B V) x M x E Onde: B = Volume de HCl necessrio para titular o excedente de NaOH da prova em branco; V = Volume necesssrio para titular o excedente de NaOH da amostra; E = peso equivalente do carbono (6). M = Molaridade do cido

As anlises de CO2 foram realizadas em 2, 7, 15, 30, 45, 60, 75 e 90 dias aps o incio do experimento.

3.6.3 Anlises da biomassa microbiana As anlises da biomassa microbiana foram realizadas atravs da tcnica irradiao-extrao, descrita em Ferreira, et al. (1999), e que consiste na determinao da diferena entre o teor de nitrognio total na amostra e o teor de nitrognio aps a irradiao da mesma amostra em microondas. O tempo de irradiao das amostras foi calculado de forma a fornecer energia equivalente a 1,62x105 J. Os compostos

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nitrogenados so recuperados com uma soluo extratora de K2SO4 0,5 mol L-1. O clculo do nitrognio presente na biomassa foi efetuado pela seguinte equao:

Nmic (g g-1 solo) = (Nti Nto)/Kn Onde: Nmic = nitrognio da biomassa microbiana do solo; Nti = Nitrognio total da amostra irradiada; Nto = Nitrognio total da amostra no irradiada; Kn = 0,54 (fator de correo proposto por Brookes et al., 1985)

3.6.4. Anlises da populao microbiana A populao microbiana do solo de cada tratamento foi analisada atravs de contagem em meio slido utilizando a tcnica de diluies sucessivas. De cada frasco, foram retiradas amostras de 10g de solo que foram dispersas em 95 ml de gua estril. A partir desta suspenso foram realizadas as demais diluies e delas retiradas alquotas para semeadura nos meios de cultura para cada grupo microbiano. Para contagem de fungos foi utilizado o meio de Martin (Menzies, 1965) e para quantificao de actinomicetos foi utilizado o meio Jansen (Clark, 1965). Para contagem de bactrias foi utilizado o meio Thornton, descrito por Parkinson et al. (1971). Foram utilizadas trs placas por diluio e trs diluies para cada grupo de organismos. Aps a inoculao, as placas foram incubadas a 28 C. As contagens de bactrias foram efetuadas aps 5 dias de incubao e para fungos e actinomicetos as placas foram incubadas por 7 dias antes das leituras.

35

3.6.5. Avaliaes de toxicidade com Vibrio fischeri. As avaliaes de toxicidade foram realizadas com a lama de cal e com o solo que recebeu adio deste resduo para a bactria Vibrio fischeri, mas no para todos os conjuntos envolvidos na etapa definitiva. Foram testadas amostras de solo que receberam lama de cal nas doses de 19 t ha-1 e 26 t ha-1. Alm destas, foram simuladas dosagens no avaliadas nos experimentos de bancada que corresponderam a 5 e 10 vezes a dose de 26 t ha-1, ou seja, 130 t ha-1 e 260 t ha-1, visando uma avaliao dos possveis efeitos txicos decorrentes de uma eventual superaplicao. Os testes de toxicidade com Vibrio fischeri utilizaram o sistema Microtox e seguiram os procedimentos descritos no manual do aparelho (Azur environmental,1995), complementados por solubilizao da amostra de solo em gua destilada (1:4), seguida de centrifugao (6000 rpm) e ajuste osmtico. Os testes foram conduzidos com quatro diluies sucessivas a partir desta soluo (CETESB, 2001a). A metodologia do teste consiste em expor uma suspenso de uma cultura de bactrias da espcie Vibrio fischeri a diferentes concentraes da amostra. A toxicidade medida em termos de reduo da luminescncia emitida naturalmente pela bactria. A concentrao efetiva da amostra que causa 50% do efeito medido (CE50) obtida em leituras aps 5 e 15 minutos de exposio (Azur Environmental, 1995). A luminescncia medida no sistema Microtox, que consiste de um fotmetro com controle de tempo e temperatura integrado a um computador para compilao dos dados e clculo dos resultados. As condies do teste de toxicidade com Vibrio ficheri esto resumidas no Quadro 4. O controle do teste feito mantendo-se um grupo de organismos sob as mesmas condies daqueles expostos amostra, mas apenas com o meio apropriado, isento de

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qualquer contaminante. Alm disso, cada teste ou lote de testes deve ser acompanhado de um teste de sensibilidade com uma substncia de referncia padro, que tem sua toxicidade conhecida, para verificar se os organismos esto respondendo dentro da faixa de sensibilidade previamente estabelecida para as condies de laboratrio. Para o teste com Vibrio ficheri, a substncia padro utilizada foi o sulfato de cobre. O teste considerado vlido quando a resposta (CE50) exposio a esta substncia estiver dentro da faixa de sensibilidade prevista. So consideradas txicas amostras que, diludas ou no, causam efeitos em 50% dos organismos-teste em qualquer concentrao. So consideradas no txicas amostras que, sem qualquer diluio, ou seja, na concentrao 100% no apresentam efeitos adversos superior ao limite de aceitao para o controle.

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Quadro 4: Condies do teste de toxicidade com Vibrio fischeri

PARMETRO TIPO DE TESTE GUA DE DILUIO FRASCO TESTE VOLUME DE SOLUO No DE ORGANISMOS/FRASCO No DE RPLICAS LUMINOSIDADE FOTOPERIODISMO TEMPERATURA AGITAO TEMPO DE EXPOSIO PARMETRO FINAL DE AVALIAO LEITURA EXPRESSO DOS RESULTADOS CLCULO ESTATSTICO SUBSTNCIA DE REFERNCIA Condio estabelecida Agudo, esttico, sem renovao. NaCl 2% Cubeta de borossilicato 1 mL Suspenso de clulas (1 milho de bactrias) 1 Sem luz No tem 15 C No tem 5 e/ou 15 minutos Inibio da emisso de luminescncia Fotmetro de absoro de luz (MICROTOX 500) CE50 5minutos e/ou CE50 15minutos Programa computacional do prprio equipamento Sulfato de cobre
o

3.6.6. Avaliaes estatsticas Para a comparao dos resultados obtidos entre os tratamentos foi utilizado o procedimento de anlise de varincia (ANOVA), seguido do teste de Tukey que permite comparaes entre todos os tratamentos. Quando o conjunto de dados no permitiu a utilizao deste teste, como nas comparaes das populaes de microrganismos, por no ser paramtrico, foi utilizado o teste de Kruskal-Wallis, como alternativa. Ambos os procedimentos foram testados com probabilidade de 5%.

38

Alm disso, foram realizadas anlises de correlao entre os fatores acompanhados no experimento. Para o conjunto de dados do experimento preliminar, no foram executadas anlises estatsticas por no terem sido feitas rplicas dos tratamentos executados.

39

4. RESULTADOS

4.1 Resultados das avaliaes na etapa piloto 4.1.1 Valores de pH do solo Na Tabela 1 podem ser visualizados os valores de pH obtidos nos solos de cada um dos tratamentos conduzidos na etapa piloto, ao final do perodo de incubao (56 dias).

Tabela 1: Valores de pH em cada tratamento nos solos dos dois talhes de Pinus taeda, aps 56 dias de incubao.
Tratamento Lama de cal 0t LC ha-1 incorporado 0t LC ha superficial 19t LC ha incorporado 19t LC ha superficial 26t LC ha-1 incorporado 26 tLC ha superficial Solo NR: No realizado
-1 -1 -1 -1

Talho de 16 anos 0kg ha N 4,0 3,8 5,2 5,1 5,4 5,6 3,7
-1

Talho de 20 anos
-1

40kg ha N 3,8 3,8 5,4 5,3 5,8 4,7

-1

80 kg ha N 3,8 3,8 5,4 5,6 5,9 4,9

0kg ha N 4,8 NR 5,4 4,8 5,6 NR 4,2

-1

40kg ha N 4,5 4,3 5,3 5,3 5,9 5,0

-1

80 kg ha N 4,3 4,2 5,6 5,1 6,0 5,2

-1

Os resultados obtidos indicaram que os valores de pH do solo nos tratamentos com adio de lama de cal foram superiores aqueles sem este componente. No solo do talho de 16 anos, os tratamentos que receberam lama de cal na dose de 19 t ha -1,

apresentaram uma mdia de pH 5,3 unidades, e nos tratamentos que receberam a dose de 26 t ha-1 o pH final ficou numa mdia de 5,2 contra a mdia de pH dos solos dos tratamentos sem adio de lama de cal, que foi de 3,8 unidades, em mdia. J para o solo do talho de 20 anos, o pH dos solos nos tratamentos com correo foi de 5,2 e 5,5 unidades, em mdia, para os tratamentos com 19t e 26t de lama de cal por hectare, respectivamente, contra um pH dos solos deste talho sem tratamento de 4,4 unidades, em mdia.

4.1.2 Anlises de respirometria Os resultados das anlises de atividade microbiana realizadas na etapa piloto esto apresentados nas Figuras 4 e 5, onde podem ser visualizados os valores de C-CO2 acumulados ao final do perodo de incubao (56 dias), para cada um dos solos estudados. Estes valores tambm esto apresentados, na forma de tabela, no Apndice 6.
mg C - C O 2 / kg

Talho de 16 anos - Ponto 1

1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0

0t LC/ ha inc 0t LC/ ha sup. 19t LC/ ha inc. 19t LC/ha sup. 26tLC/ ha inc. 26t LC/ha sup.

0kg N/ha

40kg N/ha

80 kg N/ha

Figura 4: Valores acumulados de C-CO2, em mg kg-1 de solo seco do talho de Pinus taeda de 16 anos de idade, em cada um dos tratamentos, aps 56 dias de incubao.

41

mg C - C O 2 / kg

Talho 20 anos - Ponto 2

1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0

0t LC/ ha inc 0tLC/ ha sup. 19tLC/ ha inc. 19t LC/ha sup. 26t LC/ ha inc. 26tLC/ ha sup.

0kg N/ha

40kg N/ha

80 kg N/ha

Figura 5: Valores acumulados de C-CO2, em mg kg-1 de solo seco do talho de Pinus taeda de 20 anos de idade, em cada um dos tratamentos, aps 56 dias de incubao.

A quantidade de C-CO2 apurada no final do experimento foi, em mdia, de 1044,8 mg kg-1 de solo para o talho 1 e de 807,13 mg kg-1 de solo para o talho 2. Os valores acumulados de C-CO2 liberado nos tratamentos com lama de cal para correo do pH foram maiores do que aqueles sem correo. O C-CO2 liberado foi, em mdia, 80,7% e 71,9% superior nos tratamentos que tiveram aplicao da lama de cal, em relao queles que no receberam o resduo, ao final do experimento, nos solos do talho de 16 anos e 20 anos, respectivamente. Assim, observou-se que existe uma tendncia de aumento da taxa de respirao em resposta adio da lama de cal e que esta resposta foi maior no talho de 16 anos do que no talho de 20 anos. Nos tratamentos que receberam doses de nitrognio, no foram observadas tendncias de incrementos na taxa de respirao. O sistema de manejo que incorporou a lama de cal, as acculas e o nitrognio ao solo apresentou uma tendncia de atividade maior do que aqueles em que estes foram mantidos na superfcie.

42

4.2. Resultados da etapa confirmatria Os resultados da etapa confirmatria esto apresentados agrupados por sistemas de manejo a que foram submetidos os tratamentos, com lama de cal e accula na superfcie, com lama de cal e accula incorporados ao solo, sem accula e lama de cal na superfcie e sem accula e lama de cal incorporada ao solo.

4.2.1. Anlises de parmetros qumicos do solo Os resultados das anlises qumicas dos solos, submetidos aos diferentes tratamentos, avaliados no incio e no final do perodo de incubao, esto apresentados nas Tabelas de 2 a 5 onde esto contidos os parmetros: pH em gua, carbono orgnico, nitrato, fsforo e clcio. Nos Apndices 7 a 10 esto apresentados os resultados dos parmetros pH SMP, potssio, magnsio, cobre e zinco.

Tabela 2: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie mdia das trs replicaes.
pH gua Tratamentos 0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1

C. org. -1 (g kg ) Dia 0 3,41 3,12 3,28 3,97 2,81 3,53 3,16 3,62 3,59 Dia 90 3,86 b 3,86 b 3,75 ab 3,12 b 3,11 b 3,28 ab 3,40 ab 3,62 ab 3,55 ab

NO3 (mgkg-1) Dia 90 67,8 ab 80,2 b 74,7 b 58,3 a 77,7 b 89,7 bc 71,5 ab 72,3 ab 83,7 b

Na (mg kg-1) Dia 0 65 55 51 180 70 203 118 139 120 Dia 90 124 ab 116 ab 113 ab 167 ab 72 a 192 b 109 ab 143 ab 128 ab

P (mg kg-1) Dia 0 1,9 2,1 2,3 7,4 2,1 6,2 6,6 4,0 3,1 Dia 90 1,8 a 2,7 a 1,9 a 4,0 ab 2,5 a 5,6 a 7,2 c 6,5 bc 7,0 bc

Ca (mg kg-1) Dia 0 0,9 1,0 0,8 4,3 5,9 5,5 6,6 6,3 6,9 Dia 90 0,9 a 1,0 a 0,9 a 4,5 b 3,9 b 5,5 b 6,5 b 6,6 b 6,7 b

Dia 0 3,8 3,8 3,9 5,7 5,3 5,0 5,1

-1

Dia 90 3,7 a 3,8 a 3,8 a 5,2 b 5,2 b 5,0 b 5,2 b 5,2 b 5,1 b

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha 19t LC ha e 0kg N ha

-1 -1 -1

-1

-1

-1

19t LC ha e 40kg N ha 19t LC ha e 80kg N ha 26t LC ha e 0kg N ha

-1 -1 -1 -1

-1

-1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha

-1

5,1 5,0

-1

LC=lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra, na mesma coluna, no diferem entre si probabilidade de 5%.

43

Tabela 3: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos com lama de cal e accula incorporados ao solo mdia das trs replicaes.
pH gua Tratamentos 0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1

C. org. -1 (g kg ) Dia 0 33,8 34,6 33,5 29,8 31,4 31,7 24,5 36,7 36,2 Dia 90 42,7 d 38,9 cd 37,3 bc 31,5 a 32,5 a 29,7 a 34,6 b 34,9 b 33,9 b

NO3 (mgkg-1) Dia 90 51,2 a 51,6 a 60,4 ab 70,2 b 83,8 b 81,7 b 61,1 ab 66,8 ab 80,7 b

Na (mg kg-1) Dia 0 51 48 69 190 197 188 159 161 155 Dia 90 129 ab 117 a 111 a 210 c 226 c 207 bc 152 abc 155 abc 151 abc

P (mg kg-1) Dia 0 1,9 1,9 2,3 9,5 5,2 4,1 7,6 3,8 4,5 Dia 90 2,0 a 2,2 a 2,0 a 7,8 c 3,7 ab 4,2 ab 7,6 c 6,4 bc 5,8 bc

Ca (mg kg-1) Dia 0 0,9 3,1 0,9 6,1 6,4 6,3 6,9 7,4 8,0 Dia 90 0,8 a 0,8 a 0,9 a 7,0 b 6,5 b 6,3 b 7,1 b 6,2 b 6,5 b

Dia 0 3,9 3,9 3,9 5,3 5,6 5,4 5,1

-1

Dia 90 3,9 a 3,9 a 3,8 a 5,4 b 5,4 b 5,3 b 5,5 b 5,4 b 5,5 b

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha 19t LC ha e 0kg N ha

-1 -1 -1

-1

-1

-1

19t LC ha e 40kg N ha

-1

19t LC ha-1 e 80kg N ha-1 26t LC ha e 0kg N ha

-1 -1 -1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha

-1

5,3 5,4

-1

LC=lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra, na mesma coluna, no diferem entre si probabilidade de 5%.

Tabela 4: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos sem accula e com lama de cal na superfcie mdia das trs replicaes.
pH gua Tratamentos 0t LC ha-1 e 0kg N ha-1 0t LC ha e 40kg N ha
-1 -1

C. org. -1 (g kg ) Dia 0 30,3 28,0 31,3 25,7 28,0 29,8 33,0 36,2 33,2 Dia 90 34,4 b 31,9 b 32,9 b 28,2 a 30,2 b 24,9 a 30,5 b 29,6 ab 29,7 ab

NO3-1 (mgkg ) Dia 90 66,0 a 78,4 a 95,1 87,4 ab 97,9 b 96,8 b 87,4 ab 96,9 b 102,0 b

Na -1 (mg kg ) Dia 0 54 46 44 68 208 301 137 182 141 Dia 90 120 a 118 a 120 a 91 a 124 a 210 a 159 a 165 a 135

P -1 (mg kg ) Dia 0 2,1 1,8 1,9 2,6 4,9 6,1 17,7 7,0 4,4 Dia 90 2,2 a 2,1 a 2,1 a 2,6 a 6,8 a 5,3 a 8,3 a 6,6 a 5,3 a

Ca -1 (mg kg ) Dia 0 3,0 0,8 0,8 2,6 5,5 3,6 4,7 6,4 5,5 Dia 90 0,9 a 0,9 a 1,0 a 3,3 b 6,5 c 6,8 c 6,1 c 7,5 c 6,5 c

Dia 0 3,9 3,8 3,8 5,1 4,5 5,7 4,9

-1

Dia 90 3,7 a 3,8 a 3,8 a 5,2 b 4,9 b 5,1 b 5,4 b 5,4 b 5,1 b

-1 -1 0t LC ha e 80kg N ha

19t LC ha e 0kg N ha

-1

-1

-1 -1 19t LC ha e 40kg N ha

19t LC ha e 80kg N ha
-1 -1 26t LC ha e 0kg N ha

-1

-1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha

-1

-1

4,8 5,2

-1

LC=lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra, na mesma coluna, no diferem entre si probabilidade de 5%.

44

Tabela 5: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos sem accula e com lama de cal incorporada ao solo mdia das trs replicaes.
pH gua Tratamentos 19t LC ha-1 e 0kg N ha-1 19t LC ha e 40kg N ha
-1 -1

C. org. -1 (g kg ) Dia 0 30,8 31,3 31,0 31,4 33,4 30,8 Dia 90 30,4 a 31,2 a 30,2 a 31,1 a 29,9 a 29,0 a

NO3-1 (mgkg ) Dia 90 74, a 96,5 b 97,2 b 90,9 ab 105,0 b 105,0 b

Na -1 (mg kg ) Dia 0 115 130 121 118 128 136 Dia 90 125 a 130 ab 136 b 132 ab 134 ab 136 b

P -1 (mg kg ) Dia 0 6,7 6,8 7,3 6,1 4,5 5,1 Dia 90 6,5 a 6,8 a 7,2 a 7,0 a 6,2 a 6,1 a

Ca -1 (mg kg ) Dia 0 6,2 7,3 6,2 6,2 6,7 7,3 Dia 90 6,3 a 5,6 a 6,7 a 6,5 a 6,7 a 6,4 a

Dia 0 4,8 4,8 4,8 5,0

-1

Dia 90 5,2 a 5,2 a 5,2 a 5,6 b 5,6 b 5,7 b

-1 -1 19t LC ha e 80kg N ha

26t LC ha e 0kg N ha
-1

-1

-1

26t LC ha e 40Kg N ha

5,4 5,3

-1 -1 26t LC ha e 80kg N ha

LC=lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra, na mesma coluna, no diferem entre si probabilidade de 5%.

Os valores mdios de pH em gua, registrados ao final do experimento, para o conjunto de dados com aplicao de lama de cal na dose de 19t ha -1 ficaram em 5,2 unidades, enquanto que para aqueles tratamentos com aplicao de lama de cal na dose de 26t ha-1 o pH ficou em 5,4 unidades. J para os tratamentos sem adio nenhuma de lama de cal o pH ficou em 3,8 unidades, em mdia. Os valores mdios, mximos e mnimos do pH do solo (em gua), ao longo do experimento, dos tratamentos com lama de cal, nas dosagens de 19 e 26 t ha-1 e sem lama de cal esto apresentados na Figura 6. Os valores de carbono orgnico, ao final do experimento, apresentaram uma mdia geral de 33 g kg-1, com valores mximo e mnimos de 42,7 g kg-1 e 24,9 g kg-1, respectivamente. A mdia de valores de carbono orgnico para os tratamentos com aplicao de lama de cal foi de 30 e 32 g kg-1, respectivamente, para os tratamentos com aplicao de 19 t ha-1 e 26 t/ha-1 de lama de cal, respectivamente. A mdia para os tratamentos sem aplicao de lama de cal foi em 37 g kg-1. Os teores mdios de nutrientes presentes no solo ao final do experimento foram de 36,0 mg kg-1 de potssio, 6,0 mg kg-1 de fsforo e 84,3 mg kg-1 de nitrato, para os

45

tratamentos que receberam aplicao de lama de cal. Para os tratamentos sem aplicao de lama de cal as mdias para estes parmetros foram de 36,8 mg kg-1 de potssio, 2,1 mg kg-1 de fsforo e 69,5 mg kg-1 de nitrato.

6,5

6,0 mdia 19t/ha. 5,5 mdia 26t/ha. mdia 0t/ha. 5,0

pH

mximo 19t/ha. mnimo 19t/ha. mximo 26t/ha.

4,5

mnimo 26t/ha. mnimo 0t/ha. mximo 0t/ha.

4,0

3,5

3,0 0 30 dias 60 90

Figura 6: Valores de pH do solo nos tratamentos com lama de cal nas dosagens de 19 e 26 t ha-1 e sem lama de cal.

Os teores mdios de metais no solo ao final do experimento, foram de 149,5 mg kg-1 de sdio, 6,2 mg kg-1 de clcio, 0,4 mg kg-1 de magnsio, 1,4 mg kg-1 de cobre e 2,3 mg kg-1 de zinco, para os tratamentos que tiveram aplicao de lama de cal. Para os tratamentos que no tiveram aplicao de lama de cal, os valores mdios de metais foram de 118,7 mg kg-1 de sdio; 0,9 mg kg-1 de clcio, 0,2 mg kg-1 de magnsio; 1,8 mg kg-1 de cobre e 3,4 mg kg-1 de zinco. Na tabela 6 esto apresentados os resultados de correlaes entre os parmetros qumicos do solo acompanhados durante o experimento.

46

Tabela 6: Coeficientes de correlao entre os parmetros qumicos ao final do experimento .

pH pH NO3 C org. K Na P Ca Mg Cu Zn 1 0,43 -0,57 0,01 0,36 0,70 0,85 0,38 -0,49 -0,33 1 -0,66 0,00 0,19 0,39 0,43 -0,22 -0,43 -0,28 1 0,22 -0,26 -0,39 -0,50 -0,11 0,55 0,25 1 0,16 0,31 0,11 0,14 0,15 0,06 1 0,44 0,35 0,26 -0,33 0,07 1 0,65 0,29 -0,33 -0,33 1 0,38 -0,57 -0,36 1 -0,20 -0,31 1 0,13 1 NO3 C. org. K Na P Ca Mg Cu Zn

As anlises de correlao entre os parmetros qumicos monitorados no solo indicaram que o pH do solo apresentou correlao positiva com clcio (0,85); fsforo (0,70); nitrato (0,43), magnsio (0,38) e sdio (0,36), sendo que apenas o primeiro apresentou significncia. Os coeficientes de correlao foram utilizados apenas para indicar a tendncia de comportamento entre os parmetros analisados.

4.2.2 Resultados das anlises de respirometria Os resultados das anlises de respirometria, que refletem a atividade microbiana e a taxa de mineralizao do material orgnico, esto apresentados nas Figuras 7 a 10, que resumem os valores acumulados obtidos ao final do acompanhamento do experimento definitivo. Os mesmos valores esto apresentados nos Apndices 11 a 14, porm na forma de tabelas, onde constam tambm os valores obtidos ao longo do

47

perodo de acompanhamento do experimento, e os resultados da anlise estatstica para estes conjuntos de dados.

Tratamentos com lama de cal e accula na superfcie

2500

2000
mg C-CO 2/kg

1500

0kgN/ha 40kgN/ha

1000

80KgN/ha

500

0 0tLC/ha 19tLC/ha 26tLC/ha

Figura 7: Valores acumulados de C-CO2 ao final do experimento nos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie do solo.

Tratamentos com lama de cal e accula incorporados

2500

2000
mg C-CO 2/kg

1500 0kgN/ha 1000 40kgN/ha 80KgN/ha

500

0 0tLC/ha 19tLC/ha 26tLC/ha

48

Figura 8: Resultados acumulados de C-CO 2 ao final do experimento nos tratamentos com lama de cal e accula incorporados ao solo.

Tratamentos com lama de cal na superfcie

2500

2000
mg C-CO 2/kg

1500
0kgN/ha 40kgN/ha

1000

80KgN/ha

500

0 0tLC/ha 19tLC/ha 26tLC/ha

Figura 9: Resultados acumulados de C-CO 2 ao final do experimento nos tratamentos sem accula e lama de cal na superfcie do solo.

Tratam entos com lam a de cal incorporada 2500

2000
mg C-CO 2/kg

1500
0kgN/ha 40kgN/ha

1000

80KgN/ha

500

0 0tLC/ha 19tLC/ha 26tLC/ha

Figura 10: Resultados acumulados de C-CO 2 ao final do experimento nos tratamentos sem accula e lama de cal incorporados ao solo.

49

Os maiores valores de C-CO2 acumulado ao final do experimento foram verificados nos tratamentos com aplicao de lama de cal e accula incorporados ao solo (Figura 8), cujo valor mdio ao final do experimento foi de 2057,2 mg C-CO 2 kg-1 solo, com extremos de 2021,3 a 2139,3 mg C-CO2 Kg-1 de solo. O conjunto que apresentou a menor liberao de CO2 foi dos tratamentos sem accula e sem lama de cal, sem incorporao, cuja mdia, ao final do experimento foi de 438,5 mg C-CO2 kg-1 de solo. A mdia geral dos tratamentos com aplicao de lama de cal foi de 1443,1 mg CCO2 kg-1 de solo, enquanto a dos tratamentos sem aplicao de lama de cal foi de 818,4 mg C-CO2 kg-1 de solo. Os tratamentos com accula tiveram uma liberao de 1586,2 mg C-CO2 kg-1 de solo ao final do experimento, a qual foi maior do que a mdia de para os tratamentos em que no foi adicionada a accula, cuja mdia foi de 896,7 mg C-CO 2 kg-1 de solo.

4.2.3 Resultados das avaliaes da biomassa microbiana Os resultados das avaliaes da biomassa microbiana, na forma de nitrognio contido na biomassa esto apresentados nas tabelas 7 a 10, que contm, cada uma os resultados das anlises no incio e no final do experimento, para cada grupo de tratamento.

Tabela 7: Avaliao da biomassa microbiana nos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie, no incio (dia 0) e no final do experimento (dia 90).
Biomassa (gN g-1 de solo) Tratamentos
0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1

Dia 0
24,94

Dia 90
30,93

50

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha 19t LC ha e 0kg N ha

-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

-1

-1 -1 -1 -1 -1

22,82 23,10 20,36 25,93 23,02 20,89

-1

29,91 25,41 23,89 27,82 28,51 24,41 26,87 29,48

19t LC ha e 40kg N ha 19t LC ha e 80kg N ha 26t LC ha e 0kg N ha

-1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha LC=Lama de cal

22,18 20,76

-1

51

Tabela 8: Avaliao da biomassa microbiana nos tratamentos com lama de cal e accula incorporados, no incio (dia 0) e no final do experimento (dia 90).
Biomassa (gN g-1 de solo) Tratamentos
0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

Dia 0
22,85 18,07 24,45 27,96 18,69 25,54 29,85

Dia 90
28,70 22,81 29,05 25,33 31,33 23,24 28,08 22,32 30,60

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha 19t LC ha e 0kg N ha

-1 -1 -1 -1 -1 -1

19t LC ha e 40kg N ha 19t LC ha e 80kg N ha 26t LC ha e 0kg N ha

-1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha LC=Lama de cal

-1

20,67 26,86

-1

Tabela 9: Avaliao da biomassa microbiana nos tratamentos com lama de cal na superfcie e sem accula, no incio (dia 0) e no final do experimento (dia 90).
Biomassa (gN g-1 de solo) Tratamentos
0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

Dia 0
21,97 24,76 22,62 18,06 20,48 25,05 22,27

Dia 90
28,12 25,18 24,11 25,29 26,28 26,00 23,26 23,89 25,53

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha 19t LC ha e 0kg N ha

-1 -1 -1 -1 -1 -1

19t LC ha e 40kg N ha 19t LC ha e 80kg N ha 26t LC ha e 0kg N ha

-1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha LC=Lama de cal

-1

23,09 23,56

-1

52

Tabela 10: Avaliao da biomassa microbiana nos tratamentos com lama de cal incorporados e sem accula, no incio (dia 0) e no final do experimento (dia 90).
Biomassa (gN g-1 de solo) Tratamentos
19t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

Dia 0
24,38 21,07 19,68 26,27

Dia 90
27,09 24,87 28,10 24,87 26,98 24,09

19t LC ha e 40kg N ha 19t LC ha e 80kg N ha 26t LC ha e 0kg N ha

-1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha LC=Lama de cal

-1

20,74 23,86

-1

Os valores de nitrognio presente na biomassa, avaliados nos diferentes tratamentos no apresentaram diferenas significativas estatisticamente entre si, ao final do experimento. O valor mdio para a biomassa microbiana, contemplando todos os tratamentos, no incio do experimento foi de 22,92gN g-1 de solo, com um valor mnimo de 13,37gN g-1 de solo e um mximo de 35,75gN g-1 de solo. J para o conjunto de dados do final do experimento (90dias) o valor mdio foi de 26,44gN g-1 de solo, com um valor mnimo de 17,11gN g-1 de solo e um mximo de 38,0gN g-1 de solo.

4.2.4. Resultados das avaliaes da populao microbiana do solo Os resultados das avaliaes da populao microbiana no solo sob os diferentes tratamentos, realizadas no final do experimento (dia 90), esto apresentados nas tabelas 11 a 14, agrupados em grandes grupos de microrganismos (bactrias, fungos e actinomicetos).

53

Tabela 11: Avaliaes da populao microbiana nos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie, no final do experimento, mdia de trs replicaes.
UFC x 105 por g de solo Tratamentos
0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1

Bactrias
15,87 a 7,21 a 11,54 a 118,3 ab 101,0 ab 90,91 a 330,4 c

fungos
18,61 cb 24,10 cd 29,44 d 10,82 ab 6,64 a 8,95 a 17,89 bc 14,43 ab 6,64 a

actinomicetos
4,04 a 2,60 a 3,17 a 27,42 ab 43,29 b 16,45 ab 53,39 b 28,86 b 43,29 b

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha

19t LC ha-1 e 0kg N ha-1 19t LC ha-1 e 40kg N ha-1 19t LC ha e 80kg N ha 26t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha

251,1 bc 375,2 c

-1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey probabilidade de 5%.

Tabela 12: Avaliaes da populao microbiana nos tratamentos com lama de cal e accula incorporados, no final do experimento.
UFC x105 por g de solo Tratamentos
0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

Bactrias
59,16 ab 90,91 ab 54,83 ab 37,52 a 17,32 a 27,42 a 80,81 ab

fungos
41,70 a 39,54 a 35,79 a 16,16 b 1,88 c 12,41 b 19,05 b 8,80 bc 16,31 b

actinomicetos
5,77 a 8,51 ab 6,49 a 38,96 bcd 7,65 ab 28,86 abc 31,17 abc 40,40 cd 69,26 d

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha 19t LC ha e 0kg N ha

-1 -1 -1

19t LC ha e 40kg N ha 19t LC ha e 80kg N ha 26t LC ha-1 e 0kg N ha-1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha

-1

-1

-1

56,28 ab 145,7 b

-1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey probabilidade de 5%.

54

Tabela 13: Avaliaes da populao microbiana nos tratamentos com lama de cal na superfcie e sem accula, no final do experimento.
UFC x105 por g de solo Tratamentos
0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1

Bactrias
76,48 ab 249,6 bc 36,08 a 15,87 a 8,66 a 27,42 a 428,6 c

fungos
4,47 a 4,47 a 2,31 a 5,05 a 4,76 a 3,17 a 3,61 a 4,62 a 2,74 a

actinomicetos
6,78 a 5,20 a 8,22 a 6,35 a 8,80 a 4,62 a 15,30 a 47,62 b 15,87 a

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha

19t LC ha-1 e 0kg N ha-1 19t LC ha-1 e 40kg N ha-1 19t LC ha e 80kg N ha 26t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha

144,3 ab 161,6 ab

-1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey probabilidade de 5%.

Tabela 14: Avaliaes da populao microbiana nos tratamentos com lama de cal incorporada e sem accula, no final do experimento.
UFC x 105 por g de solo Tratamentos
19t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

Bactrias
72,15 a 17,32 b 17,32 b 38,96 ab

fungos
5,34 a 1,59 b 3,17 ab 3,17 ab 2,02ab 1,01 b

actinomicetos
6,35 a 3,03 a 6,06 a 20,20 b 12,27 ab 11,54 ab

19t LC ha e 40kg N ha 19t LC ha e 80kg N ha 26t LC ha e 0kg N ha

-1

26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha

-1

14,43 b 41,85 ab

-1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey probabilidade de 5%.

A mdia da populao bacteriana no solo aps 90 dias, considerando-se todos os tratamentos, foi de 111,3x105 UFC g-1 solo, que foi o grupo mais numeroso nas amostras avaliadas, enquanto que a populao mdia de fungos foi de 11,5x105 UFC g-1

55

solo e a de actinomicetos foi de 19,3x105 UFC g-1 solo, para este mesmo conjunto de dados.

4.2.5. Resultados das avaliaes ecotoxicolgicas com Vibrio fischeri Os resultados das avaliaes de toxicidade para Vibrio fischeri dos extratos aquosos da lama de cal, do solo e do solo com adio da lama de cal esto apresentados na Tabela 15. Os resultados obtidos no teste de sensibilidade esto apresentados na tabela 16.

Tabela 15: Avaliaes da toxicidade dos extratos aquosos da lama de cal, do solo e dos tratamentos para Vibrio fischeri, em CE50.
AVALIAO DA TOXICIDADE PARA A BACTRIA Vibrio fischeri TRATAMENTOS Solo Lama de cal Solo e 19t LC ha Solo e 26t LC ha
-1

pH extrato 3,52 9,94 6,48 6,28 6,82 7,07 7,62

max. Conc . 90 10 90 90 90 90 81

CE50 5min 34,41 1,845 NT NT NT NT NT

% efeito 83,2 98,5 0 0 0 0,2 0

CE50 15min 44,14 1,619 NT NT NT NT NT

% efeito 88,4 0 0 0 0 0 0 0

-1

Solo e 130t LC ha Solo e 260t LC ha

-1

-1

Solo com pH do extrato ajustado

Lama de cal com pH do extrato 7,27 81 NT 0 NT ajustado CE50: Concentrao Efetiva (que causou efeito) a 50% da populao exposta. NT: no txico para Vibrio fischeri. LC=lama de cal 1-Mxima concentrao testada do extrato aquoso, a partir da qual foram feitas as diluies sucessivas para as demais concentraes testadas.

56

Tabela 16: Resultado do teste de sensibilidade (referncia) com Vibrio fischeri para Sulfato de Cobre.
Valor de Referncia Faixa aceitvel para Vibrio fischeri Resultado obtido neste estudo Mdia histrica CE5015min 0,18 0,56 mg L-1 0,3 mg L
-1

0,37 mg L-1

CE50: Concentrao de sulfato de cobre que causou efeito a 50% da populao exposta.

O resultado do teste de sensibilidade para o sulfato de cobre foi de CE5015min=0,3 mg L-1, o que ficou dentro da faixa estabelecida para o teste (0,18 a 0,56 mg L-1), indicando que a resposta do organismo estava adequada, validando os resultados obtidos nos testes realizados com o solo e com os resduos. As amostras de solo tratadas com lama de cal no apresentaram efeito txico para a bactria Vibrio fischeri. Foi observada toxicidade no extrato de solo sem tratamento com lama de cal e no extrato da lama de cal. Estes dois testes foram repetidos com o pH dos respectivos extratos ajustados para a faixa adequada este organismo. Nesta condio ambas as amostras no apresentaram toxicidade.

57

5 . DISCUSSO

5.1. Aplicao da lama de cal no solo A aplicao da lama de cal ao solo promoveu o aumento do pH, diminuindo a sua acidez. Os solos dos tratamentos que receberam lama de cal apresentaram valores de pH significativamente superiores queles que no tiveram aplicao deste resduo, como pode ser observado nas Tabelas 2 a 5. Estes resultados confirmam os obtidos no experimento piloto, onde a resposta do pH nos tratamentos com lama de cal foi similar obtida no experimento confirmatrio.Estes dados so concordantes com os obtidos por Bognola et al. (1997), que observaram uma resposta da lama de cal semelhante ou at superior do carbonato de clcio na correo do pH de um Cambissolo Distrfico e por Loureno (1997), para um Cambissolo lico. Aumentos nas concentraes de clcio no solo tambm foram observados, conforme Tabelas 2 a 5, onde os tratamentos que receberam aplicao da lama de cal apresentaram concentraes deste elemento significativamente maiores do que os que no receberam aplicao deste resduo. Alm disso, as concentraes de clcio apresentaram correlao positiva com o pH do solo (Tabela 6). Esta observao era esperada, uma vez que as concentraes de clcio na lama de cal se mostraram altas, sendo o elemento mais abundante entre os analisados, como pode ser observado no Apndice 3. As observaes do aumento do pH do solo e das concentraes de clcio no

solo em decorrncia da aplicao da lama de cal melhoram as condies edficas do solo, aspectos que tambm foram observados no estudo de Fleig et al. (1996). Alm disto, como destaca Gonalves (1995), a adio de clcio ao solo de reflorestamento de Pinus recomendada para reposio deste elemento. Os teores de fsforo apresentaram valores mais altos nos tratamentos que receberam aplicao de lama de cal, ainda que em alguns grupos de tratamentos a anlise estatstica no tenha indicado estas diferenas como sendo significativas. Os valores de nitrato tambm apresentaram uma tendncia dos valores de nitrato mais elevados nos tratamentos que receberam aplicao de lama de cal e adio de nitrognio na dosagem de 80kgN ha-1. Estes dois elementos que apresentaram correlaes positivas com o pH do solo, indicando que aumentos na concentrao destes elementos podem estar ligados aplicao de lama de cal ao solo. Efeito semelhante foi observado com os teores de sdio, que tambm apresentaram correlaes positivas com pH, mas com diferenas significativas correlacionadas s aplicaes de lama de cal apenas nos tratamentos onde o resduo e as acculas foram incorporados ao solo, enquanto nos demais tratamentos as diferenas foram mais discretas. No estudo realizado por Loureno (1997), que acompanhou o efeito do sdio resultante da aplicao da lama de cal no solo, o valor deste elemento, aps a aplicao de 24 t ha-1 deste resduo, foi de cerca de 70 mg kg-1, que corresponde a cerca de 3,5 vezes mais do que o solo onde no foi aplicado lama de cal. Mesmo assim, este autor no atribuiu a estes teores de sdio nenhum efeito adverso sobre o solo. No presente trabalho, apenas o tratamento que recebeu lama de cal na dose de 19t ha-1 incorporada com as acculas, que apresentou valores de 226 mg kg-1 de sdio, atingiu valores prximos 5% da CTC do solo. Em mdia, os tratamentos que receberam

59

aplicao de lama de cal apresentaram teores de sdio que no ultrapassaram 3% da CTC do solo. A alta variabilidade observada nos valores de sdio, que no permitiu a visualizao de uma tendncia clara de relao com a aplicao da lama de cal, pode estar relacionada a granulometria do resduo, dificultando a realizao de

subamostragens homogneas e representativas do conjunto. Os teores de cobre e zinco no mostraram diferenas significativas que pudessem ser relacionados aplicao da lama de cal, indicando que adio do resduo no proporcionou elevao significativa na concentrao destes metais no solo, nas dosagens que foram utilizadas no experimento. As concentraes mdias destes dois elementos, nos tratamentos que receberam aplicao de lama de cal, foram de 1,4 mg kg1

de cobre e 2,3 mg kg-1 de zinco ao final do experimento. Segundo critrios sugeridos por

CETESB (2001b) os teores de zinco ficaram muito abaixo do Soil Screeen Levels mesmo para a condio mais restritiva de exposio e sem nenhuma atenuao consideradas neste documento. Alm disso, a carga total de zinco e cobre no solo, para os tratamentos que receberam 26 t ha-1 de lama de cal foi de 5,3 kg ha-1 e 1,4 kg ha-1, respectivamente, o que bastante inferior aos limites sugeridos pela EPA (1993) para carga mxima destes metais que de 2800 kg ha-1 e 1500 kg ha-1, respectivamente. Segundo critrios para disposio de resduos slidos de curtume apresentados pela FEPAM (1993), as quantidades mximas cumulativas para estes dois metais so de 560 kg ha-1 de zinco e de 280 kg ha-1 de cobre, reforando que os valores observados no presente estudo no oferecem risco ao meio ambiente. Colaborando com estas observaes, a aplicao da lama de cal no causou toxicidade para Vibrio fischeri nas dosagens utilizadas, nem tampouco em dosagens 5 e 10 vezes superiores a maior dosagem testada.

60

Foram observados efeitos de toxicidade, como pode ser verificado na tabela 20, nos extratos da lama de cal e do solo sem nenhuma adio da lama de cal. A lama de cal apresentou uma a CE5015min para Vibrio fischeri que ficou em 1,62 % do extrato, o que equivale a uma concentrao nominal de 0,324% (p/v) de lama de cal. Este valor corresponde a uma toxicidade elevada, entretanto este efeito foi observado no extrato obtido da lama de cal sem correo do pH. Nesta mesma tabela pode-se observar que o valor de pH para o extrato sem correo ficou em 9,94 unidades, o que est fora da faixa tolervel para o organismo em questo (CETESB, 2001b). Quando o teste foi efetuado com o extrato da lama de cal corrigindo o seu pH, que reduziu o pH do extrato para 7,27, no foi mais observada a toxicidade. Da mesma forma, foi observado efeito txico do extrato do solo sem correo de pH para Vibrio fischeri, onde a CE5015min ficou em 44,14% do extrato, o que corresponde a uma concentrao nominal de 8,83% (p/v) de solo. Porm, pode-se observar que o pH do extrato de solo testado ficou em 3,52 unidades, o que um valor abaixo da faixa tolervel para este organismo (CETESB, 2001b). Desta forma, semelhana do que foi observado para o extrato da lama de cal, o extrato do solo com pH ajustado para a neutralidade no apresentou toxicidade para a bactria Vibrio fischeri. Estas duas avaliaes indicam que a toxicidade tanto da lama como do solo pode estar associada aos valores de pH extremos que foram observados nos extratos destas amostras, j que em nenhum dos solos com adio de lama de cal foi observado efeito txico. Entretanto, deve ser destacado tambm o efeito descrito por Neale et al (1997) que atriburam o aumento na taxa de degradao da serrapilheira aps a correo do pH reduo da toxicidade de fenilpropanides. Esta reduo da toxicidade decorrente da ligao do clcio a estas molculas presentes nas acculas. Desta forma, a reduo da toxicidade do solo aps a correo do pH pode estar relacionada tambm

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neutralizao do efeito txico destes compostos com o aumento da disponibilidade de clcio. Por outro lado, o teste de toxicidade, no pode, por si s ser um indicador de total segurana ambiental da aplicao do produto, uma vez que uma avaliao padronizada e envolve apenas uma espcie. Entretanto, resultados positivos indicam o potencial inerente da substncia em produzir efeitos txicos sobre o organismo que est em teste e isto pode ser extensivo a outras espcies (Rand, et al. 1995). Os valores de carbono orgnico no solo tambm apresentaram correlaes negativas com o pH do solo. Entretanto, observando as tabelas de 2 a 5, os valores de carbono orgnico observados no corroboram para a confirmao deste fato, uma vez que o conjunto de dados se manteve em torno de 3%. E pode-se observar que as avaliaes estatsticas no apresentaram uma tendncia de distino entre os tratamentos com e sem aplicao de lama de cal, de forma que faltam evidncias para justificar a correlao observada e este dado deve ser interpretado com cautela. Alm disto, a verificao de quedas acentuadas nos teores de carbono orgnico do solo pode exigir perodos de estudo superiores a este e a dificuldade de segregao das acculas para amostragens nos tratamentos onde estas foram mantidas na superfcie do solo prejudicaram a distino dos teores de carbono orgnico entre os tratamentos. Os valores de C-CO2 acumulados ao final do experimento apresentaram diferenas significativas em todos os tratamentos que tiveram adio de lama de cal em relao queles que no receberam aplicao deste resduo. Os maiores valores foram observados nos tratamentos que tiveram adio de lama de cal e accula incorporadas ao solo. A liberao de CO2 mostrou correlao positiva com o pH do solo (0,5406), quando foi analisado o conjunto total de dados. Analisando a correlao entre pH e C-CO2

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segregando os tratamentos que receberam accula daqueles em que esta no estava presente, os valores de correlao foram maiores, sendo 0,8934 e 0,8409,

respectivamente (Tabela 11). Na Figuras 11 esto apresentadas as disperses de valores de pH e C-CO2, para os conjuntos de dados dos tratamentos realizados. Nelas pode-se observar que, as distribuies dos valores de C-CO2 em funo do pH do solo formaram grupos distintos. Estas observaes indicam que o comportamento da atividade em relao ao pH do solo foi diferente entre os conjuntos de tratamentos, pois a resposta adio de lama de cal foi maior nos tratamentos com accula presente, em funo da maior disponibilidade de substrato para os microrganismos. Assim, pode-se destacar que a adio da lama de cal ao solo proporcionou o incremento da atividade dos microrganismos, aumentando a taxa de mineralizao da matria orgnica do solo e acelerando a degradao das acculas.

2500,0

2000,0

m g C-CO2/kg

1500,0

1000,0

500,0

0,0 3,5 4,0 4,5 pH 5,0 5,5 6,0

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Figura 11: Valores de C-CO2 acumulados ao final do experimento em funo do pH do solo. Os valores circundados pelas elipses amarela, verde, vermelha e azul, correspondem, respectivamente aos tratamentos com accula e sem lama de cal, sem accula e sem lama de cal, com lama de cal e com accula e sem lama de cal e com accula. Os resultados de aumento da atividade microbiana encontrados aps a elevao do pH do solo so concordantes com os obtidos por Bth e Arnebrant (1994), que verificaram um aumento de 43% na taxa de respirao do solo de conferas aps a elevao do seu pH de 4,1 para 5,5 com calagem. Lohm et al. (1984) tambm encontraram taxas de respirao 40% maiores em solos de conferas que tiveram o pH aumentado atravs de calagem. Entretanto, foram obtidos, neste trabalho, aumentos na taxa de respirao ainda superiores aos citados, como resultado da aplicao da lama de cal, nos tratamentos em que a accula e a lama de cal foram incorporadas ao solo. Tal observao pode ser atribuda s condies fornecidas ao experimento no laboratrio, e pelo fato das acculas terem sido adicionadas aos tratamentos na forma triturada, o que aumenta a superfcie de contato do substrato, facilitando a ao dos microorganismos. Paralelamente ao aumento geral da atividade microbiana, pode-se observar tambm um aumento da populao de bactrias e actinomicetos no solo com a aplicao da lama de cal. Desta forma, pode-se contatar que o aumento da atividade microbiana no solo pode estar relacionado a um aumento no nmero microrganismos no solo. Por outro lado, pode-se observar uma tendncia do nmero de fungos se manter constante nos tratamentos que receberam adio de lama de cal. Este comportamento se deve especialmente maior eficincia das bactrias, em relao aos fungos, no aproveitamento do substrato quando o pH do meio est mais prximo neutralidade. Com pH cido, h uma limitao de vrios grupos bacterianos, diminuindo a competio, permitindo que os fungos se desenvolvam mais amplamente (Alexander, 1977).

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Entretanto, as anlises estatsticas empregadas no proporcionaram uma discriminao clara desta tendncia em todos os grupos de tratamentos, o que deve ser atribudo variabilidade inerente metodologia observada entre as rplicas, diminuindo a sensibilidade da anlise. Entretanto, observou-se que o nmero de bactrias e actinomicetos foi significativamente maior nos tratamentos com a aplicao de lama de cal, quando a accula e a lama de cal foram mantidos na superfcie do solo. Alm disso, foi observado que o nmero de bactrias, fungos e actinomicetos foi maior nos tratamentos que tiveram lama de cal e accula incorporados ao solo, em relao aos mesmos tratamentos, mas com lama de cal e accula na superfcie, indicando que a incorporao destes resduos vegetais ao solo favoreceu os grupos microbianos por facilitar o contato com as acculas de Pinus taeda, o que coerente com os valores de C-CO2, cujos maiores resultados tambm foram observados no primeiro grupo de tratamentos. Deve-se destacar tambm, a diferena para maior nas contagens microbianas entre os tratamentos com e sem accula, mas que receberam aplicao de lama de cal, indicando que a adio da lama de cal e o conseqente aumento de pH do solo proporcionou incrementos tambm na populao microbiana envolvida na degradao da serrapilheira de Pinus. Estas observaes so coerentes com os resultados obtidos por vrios autores que relataram aumentos da populao microbiana aps a calagem do solo (Lohm et al., 1984; Bth et al., 1992; Bth e Arnebrant, 1994; Bth et al. 1995). Entretanto, nos tratamentos com accula e lama de cal incorporados ao solo, e nos tratamentos que no receberam accula e a lama de cal foi mantida na superfcie, no foi observada uma linearidade de resposta das contagens microbianas em relao adio de lama de cal ao solo. Por outro lado, os resultados de C-CO2 indicam que houve um aumento na atividade microbiana nestes tratamentos. Deve-se destacar, entretanto,

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que a tcnica de contagem empregada apresenta limitaes para identificao de microrganismos no culturveis e no expressa a totalidade da diversidade microbiana presente no solo. Um estudo realizado por Bth et al. (1980), no identificou efeitos da calagem do solo sobre o nmero microrganismos no solo e no trabalho de Bth e Arnebrant, (1994) tambm no foram identificadas alteraes na populao microbiana quando esta foi avaliada pela tcnica de contagem direta com acridina laranja, mesmo que tenham sido verificados aumentos na biomassa e na atividade microbiana. Os valores encontrados para a biomassa microbiana foram semelhantes aos observados por Ferreira (1998) para rea de cultivos anuais, como tambm ficaram dentro do intervalo citado por Gama-Rodrigues (1999) para solos sob cultivos de Pinus. Estudos citados por este autor indicaram que e a biomassa microbiana do solo (0-10 cm) de floresta de Pinus variou entre 22 a 56 g de N por grama de solo. Pode-se observar que os valores de biomassa no final do experimento foram ligeiramente maiores do que aqueles encontrados no incio, o que pode indicar que as condies proporcionadas no trabalho permitiram um desenvolvimento da biomassa ao longo do perodo. Por outro lado, no foram observadas alteraes da biomassa microbiana que pudessem ser associados aos tratamentos empregados. Bth et al. (1980) tambm citam que no detectaram aumentos na biomassa microbiana aps a calagem do solo e Persson et al. (1990) e Neale et al. (1997) encontraram resultados contraditrios quanto biomassa microbiana em resposta a elevao do pH do solo. Alm disso, foi observada a tendncia de aumento do nmero de bactrias e actinomicetos, em contraponto a uma diminuio do nmero de fungos, em alguns tratamentos que receberam lama de cal. Este fato pode indicar que a biomassa microbiana poderia estar sendo transferida entre os grupos microbianos, sem que os valores totais apresentassem alteraes significativas. Em um estudo realizado por Bth

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et al. (1995) foi evidenciado que a correo de pH do solo trouxe um incremento no nmero de bactrias em relao ao nmero de fungos, mas a relao de biomassa entre os dois grupos no apresentou alteraes quando a mudana de pH do solo ficou abaixo de duas unidades, como o caso do presente estudo.

5.2. Aplicao da lama de cal na dosagem de 26t ha-1 no solo A aplicao de lama de cal na dosagem de 26t ha-1 ao solo proporcionou um aumento do pH do solo, que ficou em 5,4, em mdia, a qual foi ligeiramente maior do que a mdia dos tratamentos que tiveram aplicao de lama de cal na dosagem de 19t ha-1, que ficou em 5,2 unidades. Entretanto, esta diferena entre as dosagens no foi significativa em todos os grupos de tratamentos, exceto para os tratamentos sem accula e com lama de cal incorporada, mas esta discriminao pode ser atribuda ao fato de no ter sido considerado neste grupo, nenhum tratamento sem aplicao de lama de cal, o que tornou o procedimento estatstico mais sensvel, pois as diferenas de tratamento, nestes conjuntos, foram menores que os demais. A adio de 26t ha-1 de lama de cal ao solo no promoveu aumentos significativos na taxa de respirao em relao aos tratamentos que receberam 19t ha -1. Apenas nos grupo que tiveram lama de cal incorporada ao solo, mas sem accula, apresentaram diferenas nos os tratamentos com aplicao de lama de cal na dosagem de 26t/ha em relao queles com aplicao de lama de cal nas dosagens de 19t ha -1. Entretanto, no foram observados valores de pH no significativamente superiores entre as duas dosagens de lama de cal, o que pode ter se refletido em uma condio semelhante entre os tratamentos o que se refletiu em uma atividade biolgica semelhante entre os tratamentos.

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Os valores das contagens de microrganismos nos tratamentos realizados indicaram que houve um incremento no nmero de bactrias e actinomicetos nos tratamentos que receberam lama de cal na dosagem de 26t ha-1 em relao aos que tiveram aplicao de 19t ha-1, em oposio populao de fungos, que apresentou um tendncia de diminuio especialmente naqueles tratamentos onde esta dosagem de 26t ha-1 de lama de cal foi associada a aplicao de 80kg ha-1.

5.3. Aplicao de nitrognio no solo A adio de nitrognio aos tratamentos no mostrou tendncia de incremento da atividade microbiana, tanto na comparao da dosagem recomendada para esta cultura (40kg ha-1) como com duas vezes esta dosagem (80kg ha-1) e sem a adio de nitrognio. Da mesma forma, no foram observados efeitos marcantes da aplicao de nitrognio ao solo sobre a composio da microbiota, exceto quando a dose de 80kg ha-1 esteve associada aplicao de 26t ha-1 de lama de cal. Muitos autores retratam casos de limitao da atividade microbiana por carncia de nitrognio aps a adio de corretivo de pH ao solo (Lohm et al. 1984), especialmente em solos com alta relao C:N, (Neale et al. 1997) e (Persson 1990/1991). Entretanto, os resultados obtidos neste trabalho indicam que o nitrognio no se comportou como um elemento limitante, nem nos tratamentos onde no foi adicionada adubao nitrogenada, como pode ser observado pelas anlises de nitrato, que apresentaram valores elevados. Alm disso, em solos cidos, h limitao da atividade microbiana e por conseqncia, baixa disponibilidade de nitrognio solvel. Com a elevao do pH aps a calagem pode haver um aumento nos teores de nitrognio disponvel, como decorrncia da mineralizao da matria orgnica.

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As anlises de nitrato no solo demonstram que houve uma pequena elevao deste elemento nos tratamentos onde foi adicionada a lama de cal somada aplicao de nitrognio, o que indica que a lama de cal pode proporcionar condies mais favorveis fisiologia dos grupos microbianos envolvidos no processo de nitrificao. Alm disso, a verificao de que este processo est sendo regularmente realizado um bom indicador de que a aplicao de lama de cal no confere caractersticas desfavorveis aos grupos microbianos, uma vez que a tarefa de nitrificao realizada por grupos microbianos especficos, que no so substitudos ou selecionados como pode ocorrer nos processos heterotrficos (SETAC, 1995). Desta forma, observou-se que a aplicao de nitrognio no promoveu o incremento na biodegradabilidade da serrapilheira, o que est de acordo com o estudo realizado por Cortez et al. (1996) que cita que a forma em que se encontra o carbono da matria orgnica mais importante do que a relao C:N do material, o que explica a baixa biodegradabilidade de compostos com alto teor de lignina, mesmo que a relao C:N no seja desfavorvel, como as acculas de Pinus sp.

5.4. Aplicao da lama de cal no solo de floresta de Pinus taeda A avaliao integrada dos resultados obtidos no experimento aponta para a principal caracterstica da lama de cal, que o seu contedo de carbonato de clcio, que confere a sua capacidade de correo da acidez do solo. A aplicao da lama de cal no solo sob a floresta de Pinus taeda aumentou a atividade microbiolgica do solo e a biodegradabilidade da serrapilheira, por permitir o estabelecimento de uma populao maior de bactrias e actinomicetos. Alm disto, os teores de clcio, magnsio e fsforo no solo apresentaram aumento aps a aplicao deste resduo, sem que os teores de elementos indesejveis tenham sido aumentados. Poucas diferenas foram atribudas

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dosagem de 26t ha-1 em relao a dosagem de 19t ha-1. Com base nestas observaes, a aplicao da lama de cal recomendada na dosagem de 19t ha-1, com perspectivas de otimizao dos processos microbiolgicos como a biodegradabilidade da serrapilheira e a conseqente mineralizao e disponibilizao de nutrientes para o solo. A aplicao de nitrognio, indicada por muitos autores como relevante para evitar processos de imobilizao deste elemento resultante da aplicao de corretivos de acidez no solo e no aporte de nutrientes para melhorar a relao C:N, no teve resposta positiva na atividade microbiolgica ou na composio da microbiota, indicando que este nutriente no limitante, e a sua aplicao em associao lama de cal dispensvel. Entretanto, aspectos legais da aplicao de resduos ao solo, no foram contemplados nem fizeram parte do escopo do projeto, mas devem ser atendidos para este tipo de destinao. Da mesma forma, aspectos destacados neste trabalho, como a incorporao da lama de cal e da camada de serrapilheira ao solo, que trouxeram incrementos na taxa de decomposio da serrapilheira, devem ser encarados com cautela tendo em vista a necessidade de conservao da estrutura fsica do solo e controle dos processos erosivos. Alm disso, os tratamentos com os resduos mantidos na superfcie apresentaram valores semelhantes aos que tiveram estes incorporados, no justificando a aplicao desta prtica no campo.

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6. CONCLUSES

Com base nos resultados obtidos e considerando-se as condies de execuo do experimento, pode-se concluir que: O experimento confirmou o poder corretivo da acidez do solo da lama de cal com valores de pH obtidos aps o experimento prximos aos valores esperados; No foi observado efeito txico para Vibrio fischeri, avaliado pelo sistema Microtox, nos solos onde foi adicionada a lama de cal, nem com uma dosagem dez vezes superior (260t ha-1) s utilizadas para correo do pH; A atividade microbiana foi estimulada pela adio da lama de cal ao solo em ambas as dosagens, 19t ha-1 e 26t ha-1, indicando um aumento da taxa de mineralizao do solo; A diminuio da acidez do solo, atravs da adio da lama de cal, do solo foi o principal fator, entre o conjunto de variveis avaliadas, para estimulao da biodegradao da serrapilheira de Pinus taeda; No foram obtidos ganhos expressivos nos processos avaliados pela da adio de nitrognio ao solo, indicando que este fator no foi limitante atividade microbiolgica do solo, nas condies do experimento;

A composio da microbiota do solo apresentou aumento do nmero de bactrias e actinomicetos nos tratamentos onde foi adicionada a lama de cal como corretivo de pH do solo, especialmente na dosagem de 26t ha -1; Os tratamentos onde as acculas foram incorporados ao solo e este teve o pH corrigido apresentaram as maiores taxas de liberao de CO2, indicando que estes tratamentos apresentaram os melhores resultados na degradao da serrapilheira.

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7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

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78

APNDICES

Apndice 1:

Composio e caractersticas qumicas dos solos coletados em cada ponto de amostragem.

PARMETRO Teor de argila (%) pH (em gua) ndice SMP Fsforo (P) mgL-1 Potssio (K) mgL-1 Matria Orgnica (g kg-1) Alumnio trocvel. cmolcL-1 Clcio trocvel. cmolcL-1 Magnsio trocvel. cmolcL-1 Al+H cmolcL-1 CTC cmolcL-1 % sat. CTC BASES % sat CTC Alumnio Relao Ca/Mg Relao Ca/K Relao Mg/K Sdio (Na) mg L
-1

PONTO 1 13 3,7 4,1 4,0 25,0 56 7,1 0,2 0,2 19,8 20,3 2 35,0 1,0 3,1 3,1 <0,1

PONTO 2 13 4,4 4,3 4,5 18,0 52 5,8 0,5 0,3 16,5 17,4 5 33,4 1,7 11 6 17

80

Apndice 2:

Quantidade de material depositado na camada de serrapilheira nos dois talhes de Pinus taeda.
MATERIAL DEPOSITADO mido (g/m2) MATERIAL DEPOSITADO Peso seco (g/m2) 4349,65 g/m2 4156,34 g/m
2

PONTO

Ponto 1 (talho de 16 anos) Ponto 2 (talho de 20 anos)

4924,0 g/m2 4724,4 g/m

2

Apndice 3:

Caractersticas qumicas da lama de cal (mdia de duas determinaes).

UNIDADE % unidades % % % % % % % mg/kg mg/kg % % % mg/kg RESULTADO 29,7 10,7 2,2 0,02 0,52 0,29 18 0,86 0,59 53,0 204,0 0,21 0,30 2,1 7,5

PARMETRO Umidade pH (1:5) Carbono orgnico Nitrognio (TKN) Fsforo total Potssio total Clcio total Magnsio total Enxofre total Cobre total Zinco total Ferro total Mangans total Sdio total Boro total

81

Apndice 4:

Caracterizao granulomtrica da lama da cal, a partir de 100g (peso seco) de material.

GRANULOMETRIA > 2,0 mm 2,0 - 0,84 mm 0,84 - 0,3 mm <0,3 Total

MASSA (G) 14,78 16,22 6,27 62,58 99,85

MASSA CORRIGIDA (G) 14,80217 16,24433 6,279405 62,67387 99,999775

Apndice 5:

Caracterizao da lama de cal quanto capacidade de correo do pH do solo.

PARMETRO
RESULTADO

Eficincia relativa (ER) Valor de Neutrlizao (VN) Valor PRNT Faixa de granulometria (equivalente calcreo)

69,7% 113,4% 79,04% Faixa C

Apndice 6:

Valores de C-CO2 acumulados em cada tratamento do experimento piloto nos solos dos dois talhes de Pinus taeda, aps 56 dias de incubao.
Talho de 16 anos mg de C-CO2 kg-1 de solo seco 0kg N ha-1 748,12 605,03 1482,85 959,99 1559,08 979,83 40kg N ha-1 743,07 635,14 1387,27 962,60 1496,32 985,94 80 kg N ha-1 690,48 652,74 1382,35 969,37 1577,94 991,69 Talho de 20 anos mg de C-CO2 kg-1 de solo seco 0kg N ha-1 516,48 NR 1001,84 690,58 1155,44 NR 40kg N ha-1 551,97 531,97 978,56 750,21 1138,31 819,91 80 kg N ha-1 599,38 561,68 994,88 718,65 1230,42 823,63

Tratamento Lama de cal

0t LC ha-1 incorporado 0t LC ha superficial 19t LC ha incorporado 19t LC ha superficial 26t LC ha-1 incorporado 26t LC ha superficial NR: No realizado
-1 -1 -1 -1

82

Apendice 7: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie mdia das trs replicaes.
pH SMP Tratamentos 0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1

K -1 (mg kg ) Dia 0 27 25 29 31 16 23 37 40 37 Dia 90 44 ab 39 ab 36 ab 33 ab 20 a 27 ab 38 ab 37 ab 46 b

Mg -1 (mg kg ) Dia 0 0,13 0,14 0,12 0,27 0,22 0,25 0,40 0,39 0,38 Dia 90 0,24 a 0,15 a 0,11 a 0,32 a 0,31 a 0,30 a 0,38 a 0,40 a 0,40 a

Cu -1 (mg kg ) Dia 0 1,9 1,8 1,8 1,4 1,6 1,4 1,3 1,5 0,9 Dia 90 1,9 a 1,8 a 1,9 a 1,5 a 1,6 a 1,2 a 1,6 a 1,6 a 1,3 a

Zn -1 (mg kg ) Dia 0 1,9 1,7 1,6 2,2 1,6 1,9 1,8 1,3 2,2 Dia 90 3,1 a 4,2 a 3,1 a 3,2 a 2,3 a 2,8 a 2,0 a 2,1 a 2,4 a

Dia 0 4,7 4,5 4,5 5,8 5,5 5,3 5,4 5,4 5,4

Dia 90 4,5 4,5 4,5 5,6 5,5 5,5 5,1 5,2 5,3

0t LC ha-1 e 40kg N ha-1 0t LC ha e 80kg N ha

-1 -1

-1 -1 19t LC ha e 0kg N ha

19t LC ha e 40kg N ha

-1

-1

-1 -1 19t LC ha e 80kg N ha

26t LC ha e 0kg N ha-1 26t LC ha e 40Kg N ha

-1 -1

-1

-1 -1 26t LC ha e 80kg N ha

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si probabilidade de 5%.

Apndice 8: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos com lama de cal e accula incorporados ao solo mdia das trs replicaes.
pH SMP Tratamentos 0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1

K -1 (mg kg ) Dia 0 23 21 24 30 26 93 41 40 45 Dia 90 38 a 42 a 32 a 34 a 32 a 32 a 40 a 42 a 44 a

Mg (mg kg-1) Dia 0 1,01 0,15 0,55 0,29 0,35 0,33 0,47 0,50 0,47 Dia 90 0,50 a 0,14 a 0,42 a 0,34 a 0,40 a 0,33 a 0,39 a 0,36 a 0,38 a

Cu (mg kg-1) Dia 0 1,8 1,9 1,8 1,4 1,4 1,3 1,3 1,1 1,2 Dia 90 2,0 a 1,8 a 1,8 a 1,6 a 1,4 a 1,5 a 1,6 a 1,4 a 1,4 a

Zn (mg kg-1) Dia 0 1,5 1,7 1,7 2,0 1,9 2,2 1,9 1,9 1,9 Dia 90 3,8 a 4,3 a 2,4 a 3,1 a 3,1 a 2,7 a 2,4 a 2,2 a 2,1 a

Dia 0 4,5 4,5 4,6 5,6 5,9 5,7 5,5 5,6 5,6

Dia 90 4,5 4,5 4,5 5,7 5,8 5,7 5,4 5,5 5,6

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha 19t LC ha e 0kg N ha

-1 -1 -1

-1

-1

-1

19t LC ha e 40kg N ha 19t LC ha e 80kg N ha

-1 -1

-1

-1

26t LC ha e 0kg N ha-1 26t LC ha e 40Kg N ha 26t LC ha e 80kg N ha

-1 -1 -1

-1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si probabilidade de 5%.

83

Apndice 9: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos sem accula e com lama de cal na superfcie mdia das trs replicaes.
pH SMP Tratamentos 0t LC ha e 0kg N ha
-1 -1 -1

K -1 (mg kg ) Dia 0 18 14 17 16 19 28 46 40 40 Dia 90 34 ab 35 ab 31 ab 21 a 38 b 32 ab 41 b 40 b 45 b

Mg -1 (mg kg ) Dia 0 0,11 0,10 0,15 0,20 0,22 0,17 0,29 0,36 0,40 Dia 90 0,16 a 0,14 a 0,14 a 0,27 ab 0,27 ab 0,41 b 0,37 b 0,36 b 0,41 b

Cu -1 (mg kg ) Dia 0 1,9 1,8 1,9 0,9 0,9 1,2 1,4 1,5 1,4 Dia 90 1,8 a 1,8 a 1,8 a 1,4 a 1,2 a 0,2 a 1,7 a 1,6 a 1,6 a

Zn -1 (mg kg ) Dia 0 1,6 1,5 1,5 1,9 2,5 1,7 1,5 1,5 1,6 Dia 90 3,1 a 4,1 a 2,1 a 2,7 a 1,9 a 3,3 a 2,2 a 2,3 a 2,4 a

Dia 0 4,5 4,5 4,5 5,4 5,0 5,8 5,3 5,2 5,5

Dia 90 4,4 4,5 4,5 5,5 5,4 5,4 5,4 5,4 5,4

0t LC ha e 40kg N ha 0t LC ha e 80kg N ha
-1

-1

-1

-1 -1 19t LC ha e 0kg N ha

19t LC ha e 40kg N ha

-1

-1

-1 -1 19t LC ha e 80kg N ha

26t LC ha e 0kg N ha-1

-1 -1 26t LC ha e 40Kg N ha

-1

26t LC ha e 80kg N ha

-1

-1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si probabilidade de 5%.

Apndice 10: Parmetros qumicos do solo nos tratamentos sem accula e com lama de cal incorporada ao solo mdia das trs replicaes.
pH SMP Tratamentos 19t LC ha-1 e 0kg N ha-1 19t LC ha e 40kg N ha 19t LC ha e 80kg N ha
-1 -1 -1

K -1 (mg kg ) Dia 0 32 31 29 34 38 35 Dia 90 37 a 35 a 36 a 37 a 37 a 39 a

Mg -1 (mg kg ) Dia 0 0,25 0,29 0,26 0,37 0,36 0,36 Dia 90 0,28 a 0,29 a 0,28 a 0,37 ab 0,42 b 0,45 b

Cu -1 (mg kg ) Dia 0 1,3 1,3 1,4 1,2 1,2 1,3 Dia 90 1,4 ab 1,4 ab 1,3 ab 1,2 a 1,5 ab 1,6 b

Zn -1 (mg kg ) Dia 0 1,8 1,9 1,8 1,8 1,8 1,8 Dia 90 1,9 ab 1,7 a 1,8 a 1,9 ab 1,8 ab 2,0 b

Dia 0 5,4 5,3 5,2 5,4 5,6 5,5

Dia 90 5,7 5,7 5,7 6,0 6,0 6,0

-1

-1 26t LC ha e 0kg N ha-1

26t LC ha e 40Kg N ha

-1

-1

-1 -1 26t LC ha e 80kg N ha

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si probabilidade de 5%.

Apndice 11: Acompanhamento da liberao de CO2 (respirometria) ao longo do experimento nos solos dos tratamentos com lama de cal e accula na superfcie mdia das trs replicaes.

84

mg C-CO2 Kg-1 de solo Dias Tratamento

0t LC ha e 0kgN ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

2
8,4 33,9 31,3 153,5 173,9 179,0 84,6
-1

7
98,3 123,7 108,5 363,1 370,7 383,5 288,6 308,5 338,3

15
221,2 236,5 216,2 626,1 638,9 679,6 512,4 549,8 597,0

30
433,4 420,6 410,4 935,0 973,2 1031,8 803,5 870,6 905,5

45
642,9 620,0 650,6 1169,7 1205,3 1271,5 1027,4 1099,5 1126,9

60
837,2 791,4 837,2 1363,6 1399,2 1468,0 1228,9 1298,5 1320,9

75
993,3 934,7 985,6 1575,3 1605,9 1677,2 1368,2 1435,3 1462,7

90
1126,1 ab 1057,3 a 1123,5 ab 1756,5 c 1810,0 c 1888,9 c 1507,5 bc 1582,0 bc 1611,9 bc

0t LC ha e 40kgN ha 0t LC ha e 80kgN ha 19t LC ha e 0kgN ha

-1

19t LC ha-1 e 40kgN ha-1 19t LC ha e 80kgN ha 26t LC ha e 0kgN ha

-1 -1 -1 -1 -1

26t LC ha e 40KgN ha

94,5 114,4

26t LC ha-1 e 80kgN ha-1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey probabilidade de 5%.

Apndice 12: Acompanhamento da liberao de CO2 (respirometria) ao longo do experimento nos solos dos tratamentos com lama de cal e accula incorporados mdia das trs replicaes.
mg C-CO2 Kg-1 de solo Dias Tratamento
0t LC ha e 0kgN ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1

2
26,2 44,0 26,2 306,3 336,9 382,7 368,2 388,1 412,9

7
80,4 111,0 88,1 538,8 541,4 612,7 646,8 659,2 684,1

15
162,7 193,2 172,9 852,8 832,4 893,5 950,2 967,7 975,1

30
313,7 367,1 326,4 1199,8 1176,9 1225,3 1313,4 1338,3 1313,4

45
462,1 548,7 451,9 1452,3 1414,1 1449,8 1574,6 1611,9 1562,2

60
623,3 704,8 630,9 1643,7 1613,1 1628,4 1793,5 1833,3 1756,2

75
761,6 858,3 779,4 1847,8 1814,7 1817,2 1942,8 2000,0 1895,5

90
871,4 a 970,7 a 902,0 a 2041,7 b 2026,4 b 2021,3 b 2089,5 b 2139,3 b 2024,9 b

0t LC ha e 40kgN ha 0t LC ha e 80kgN ha

19t LC ha-1 e 0kgN ha-1 19t LC ha e 40kgN ha 19t LC ha e 80kgN ha 26t LC ha e 0kgN ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1

26t LC ha-1 e 40KgN ha-1 26t LC ha e 80kgN ha

-1 -1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey probabilidade de 5%.

85

Apndice 13: Acompanhamento da liberao de CO2 (respirometria) ao longo do experimento nos solos dos tratamentos com lama de cal superficial e sem accula mdia das trs replicaes.
mg C-CO2 Kg-1 de solo Dias Tratamento
0t LC ha e 0kgN ha
-1 -1

2
16,0 0,7 8,4 156,1 363,2 214,7 92,0
-1

7
34,6 24,4 32,1 263,8 439,4 317,3 191,5 221,4 246,3

15
68,5 86,3 60,8 384,2 514,1 437,7 293,5 318,4 363,2

30
148,1 148,1 120,1 545,4 591,2 616,7 420,4 450,2 512,4

45
212,6 207,5 166,7 662,9 650,9 749,5 524,9 554,7 631,8

60
292,3 289,7 246,4 783,0 700,6 872,1 626,9 669,2 728,9

75
377,0 371,9 333,7 918,3 817,5 997,3 711,4 758,7 808,4

90
446,2 a 448,7 a 420,7 a 1063,8 cd 904,6 bc 1130,0 d 801,0 b 845,8 b 893,0 b

0t LC ha-1 e 40kgN ha-1 0t LC ha e 80kgN ha 19t LC ha e 0kgN ha

-1 -1 -1 -1 -1 -1

19t LC ha e 40kgN ha

19t LC ha-1 e 80kgN ha-1 26t LC ha e 0kgN ha

-1 -1 -1 -1

26t LC ha e 40KgN ha 26t LC ha e 80kgN ha

121,9 131,8

-1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey probabilidade de 5%.

Apndice 14: Acompanhamento da liberao de CO2 (respirometria) ao longo do experimento nos solos dos tratamentos com lama de cal incorporada e sem accula mdia das trs replicaes.
mg C-CO2 Kg-1 de solo Dias Tratamento
19t LC ha e 0kgN ha
-1 -1 -1 -1 -1 -1 -1

2
340,8 360,7 385,6 400,5 442,8 485,1

7
456,8 464,3 489,2 531,5 581,2 640,9

15
538,9 543,9 573,8 635,9 693,2 772,8

30
638,4 645,9 685,7 765,3 827,5 939,4

45
705,6 713,1 757,8 844,9 934,5 1066,3

60
757,8 762,8 815,0 904,6 1006,6 1163,3

75
852,4 857,3 907,1 1011,6 1123,5 1305,1

90
922,0 a 924,5 a 974,3 ab 1078,7 bc 1198,1 c 1399,6 d

19t LC ha e 40kgN ha 19t LC ha e 80kgN ha 26t LC ha e 0kgN ha

-1

26t LC ha-1 e 40KgN ha-1 26t LC ha e 80kgN ha

-1 -1

LC=Lama de cal Tratamentos seguidos da mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey probabilidade de 5%.

86