Bacilos gram negativos no fermentadores emergentes: Identificaci Identificacin, sensibilidad antibi antibitica e impacto cl clnico

Dra Marisa N. Almuzara Departamento de Bioquimica Clinica. Facultad de Farmacia y Bioquimica. UBA

BACILOS GRAM-NEGATIVOS NO FERMENTADORES (BNF)

Patgenos oportunistas Ms de 120 especies

Pseudomonas aeruginosa Acinetobacter baumannii Stenotrophomonas maltophilia

Sin embargo em los ltimos aos: Emergencia de BNF (no P. aeruginosa no

Acinetobacter spp) productores de carbapenemasas

Emergencia de aislamiento de BNF de origen ambiental en la infeccin humana

BNF. Emergencia de nuevos patgenos

Incremento de pacientes hospitalizados con enfermedades de base graves Inmunosupresin natural o adquirida Uso inadecuado de antibiticos Aumento de maniobras invasivas Mejora en los mtodos de deteccin en el laboratorio

BNF. Emergencia de nuevos patgenos

Pseudomonas putida/Pseudomonas putida like multirresistente/Pseudomonas grupo stutzeri Achromobacter xylosoxidans Bordetella spp. y gneros relacionados Elizabethkingia meningoseptica Wohlfahrtiimonas chitiniclastica

Principales caractersticas del grupo fluorescente

KinG B + ADH + Oxidasa + Motilidad + Mac Conkey + Glucosa +

Caractersticas bioqumicas de las especies de Pseudomonas del grupo fluorescente

Pig. Fenaznicos Pig. Fluorescentes NO3/NO2 ADH 42 Gelatina +/+

P. aeruginosa P. putida P. fluorescens

+* -

+ + +

+ -/+

+ + +

+ -

* Algunas cepas son apiocinicas

Pseudomonas putida
Bajo nivel patgeno Coloniza ambiente hospitalario (soluciones, medicinas, catteres) Colonizante de vas areas en pacientes con tumores (no neumona) Pseudobacteriemia Bacteriemia Infecciones de PPB
Hemodializado Asociada a cat catter en pac. con c cncer

Pseudomonas putida
Emergencia de infecciones en ni nios Brote de bacteriemia en UCI neonatal (Grimont et al, J Hosp Infect 2004) Sepsis en neonatos asociadas a soluciones de heparina (cat (catteres umbilicales) contaminadas (Perz et al, J Clin Microbiol 2005) Brote en unidad oncohematol oncohematolgica pedi peditrica ( hemoc y cat teres) por desag es de agua contaminada (Aumeran cat desag et al, J Hosp Infect 2007)

Pseudomonas putida/ Pseudomonas fluorescens

Perfil de Sensiblidad ~ P aeruginosa ATMs activos: Idem P aeruginosa

Actividad in vitro de 21 antimicrobianos sobre P

putida
Antimicrobino CIM range (g/ml) Ampicilina Piperacilina PiperacilinaPiperacilina-Taz Cefoperazona Cefoperazona/Sul Ceftazidima Cefepima Sulbactama Imipenem Meropenem Aztreonama 3232-> 128 0,50,5-256 1-64 8->128 8-32 0,50,5-128 1-128 >128 0,1250,125-8 1-16 1616->128 CIMs 50 (g/ml) >128 16 8 16 16 4 2 >128 1 2 16 CIMs 90 (g/ml) >128 32 16 32 16 32 16 >128 4 8 32

Vay et al, RAM, 2004

Actividad in vitro de 21 antimicrobianos sobre P

putida
Antimicrobino CIM range (g/ml) colistina gentamicina amicacina TMS Cloranfenicol Eritromicina Rifampicina Minociclina Norfloxacina Ciprofloxacina 0,1250,125-64 0,0630,063-128 0,1250,125->128 0,250,25->128 1616-128 1616->128 2-32 1-8 <0,008<0,008-64 <0,008<0,008-8 CIMs 50 (g/ml) 0,5 0,25 0,5 8 128 32 4 2 0,25 0,125 CIMs 90 (g/ml) 32 128 32 32 >128 >128 8 2 16 4

Vay et al, RAM, 2004

Pseudomonas putida resistentes a carbapenemes.

Estudios de sensibilidad antibitica (g/ml)
Concentraci Concentracin Inhibitoria Minima (g/ml)
N PIP PTZ CXT CAZ CRO FEP AZT MER IMP ERT CIP COL LEV GAT GEN AKN

33 103 127 162 174 217 236

64 64 >256 64 32 8 16

32 32 >256 32 32 8 16

>128 >128 >128 >128 >128 >128 >128

128 128 256 256 8 2 8

128 128 >256 >256 32 8 32

32 32 >256 16 8 32 16

64 64 64 64 64 16 64

64 64 64 64 32 16 16

32 64 >32 >32 0,5 0,5 2

128 128 128 128 128 16 128

>64 >64 >32 >32 16 32 0,25

4 4 4 4 2 1 2

>128 >128 8 >32 64 64 2

>128 >128 8 64 32 32 1

16 16 64 16 2 4 8

4 4 64 8 >128 32 >128

de los mecanismos de resistencia a carbapenemes

Aislados IMP R MERO R
Ensayos de sinergia de doble disco: sinergia IMP EDTA MERO Estudio del perfil de hidr hidrlisis de sustratos de las lactamasas por el m mtodo iodom iodomtrico: Actividad hidrol hidroltica sobre AMP, CTN, CRO, CAZ, IMP y MER

Pseudomonas putida. Caracterizacin fenotpica

Pseudomonas putida. Caracterizacin genotpica

de la resistencia a carbapenemes
Aislados IMP R MERO R

Deteccin de genes codificantes de lactamasas (PCR) PCR positiva para genes blaVIM (VIM-2) e integrones de clase 1

Carbapenemasas en Pseudomonas putida

1- IMP-1 Koh TH et al. Antimicrob. Agents Chemother. 2004; 48: 2334-2336.

Yomoda S et al. J. Clin. Microbiol. 2003; 41: 4246- 4251. 2- IMP-12 Docquier JD et al. Antimicrob. Agents Chemother. 2003; 47: 1522-1528. 3- VIM-1

Lombardi G, et al. J. Clin. Microbiol. 2002; 40: 4051-4055.

Carbapenemasas en Pseudomonas putida

4- VIM-2 Senda K, et al.. J. Clin. Microbiol. 1996; 34: 2909-2913. Lee K, et al. Antimicrob. Agents Chemother. 2002; 46: 1053-1058. Almuzara M et al. First VIM-2 producing P. putida isolated in Buenos Aires. Emerg Infect Dis. 2007; 4: 668-669 Trevio M. et al. J Med Microbiol. 2010; 59:853-5. 5. VIM-4 (+ PER) Bogaerts P. et al. JAC; 2008; 61: 749-751

Carbapenemasas en Pseudomonas putida

5. VIM 5 6- VIM-6 Poirel L el al. Int J Antimicrob Agents. 2009; 33: 287. Koh et al Antimicrob. Agents Chemother. 2004; 48: 2334-2336.

7- IMP -16 Carvalho-Assef. JMM, 2010. 8- KPC -2 Bennet J et al. Antimicrob Agents Chemother 2009, 53:292- 294.

Pseudomonas putida imipenem S meropenem R

3 aislamientos Liquido libre en cavidad abdominal, paciente 78 a aos, sexo masculino Hemocultivos 2:2, paciente 64 a aos, sexo masculino, con estenosis a artica Liquido biliar purulento, paciente 67 a aos, sexo masculino, pancreatitis aguda 2ria a maniobra de derivaci derivacin interna de la via biliar como tto de la obstrucci obstruccin 2ria a la met metstasis de un carcinoma de colon

Pseudomonas putida resistente a meropenem Caracterizaci Caracterizacin fenot fenotpica de mecanismos de resistencia mediada por bombas de eflujo
Tabla 2: CIM en presencia y ausencia de PhePhe-ArgArg--naphthylamida (PAN) 50 g/ml
Meropenem (g/ml) PAN 16 16 8 1 2 + PAN 0,5 0,5 0,5 1 1 Norfloxacina (g/ml) PAN 64 64 32 + PAN 1 16 1 Carbenicilina (g/ml) PAN 1024 512 2048 + PAN 1 32 64 Eritromicina (g/ml) PAN 256 1024 256 + PAN 1 1 1 Gentamicina (g/ml) PAN 2 4 8 + PAN 0,5 0,125 0,125

Aislado

174 217 236 182 184

CIMs en presencia de reserpina = CIMs en ausencia de reserpina CIMs en presencia de 100 g/ml de naftilnaftil- metil piperazina (NMP) =CIMs en ausencia de NMP

Pseudomonas putida. Caracterizacin genotpica

de la resistencia a carbapenemes
Aislados IMP S MERO R

Deteccin de la presencia de genes codificantes de la bomba de eflujo ArpABC (PCR): 9 Presencia de un amplicn de 1931 pb (gen arpB)

Pseudomonas putida. Caracterizacin genotpica

de la resistencia a carbapenemes
CIM MER + PAN CIM IMP Presencia de gen codificante de MBL Aislado CIM MER Nmero de cambios en el nivel de ARN

arpB

174 217 236 182

16 16 32 4

0.5 0.5 0.5 2

0.5 0.5 2 2

3.66 29.64 446.8 1

Pseudomonas putida
9 La resistencia a carbapenemes en P. putida representa alrededor del 50% del total de los aislados de P. putida en el per perodo se sealado emergencia de P. putida resistente a carbapenemes en nuestro medio La resistencia a ambos carbapenemes en P. putida fue debida a la presencia de una carbapenemasa de tipo metalometalo--lactamasa (VIM(VIM-2) y constituyo el 1er reporte de P. putida productora de VIMVIM-2 en Argentina y en Latinoamerica (Almuzara y col., EID 2007)

La sobreexpresi sobreexpresin de la bomba de eflujo arpABC fue responsable de la resistencia a meropenem en los aislados con resistencia disociada disociada a carbapenemes

Pseudomonas putida like

Pseudomonas putida like

Aislado de varias muestras de LCR y del sistema de drenaje ventricular de un paciente peditrico con meningitis asociada a shunt de evolucin fatal

Pseudomonas putida like:

Identificacin fenotpica por pruebas convencionales
Nuestro aislado Oxidasa Movilidad Pigmento amarillo + insoluble Pigmento en KB ADH NO3 Urea ONPG + + + + v v v + + v v + + + + + + + + P. fulva +d + P. putida + + P. luteola + P. oryzihabitans + A. delafieldii + +

Pseudomonas putida like:

Identificacin fenotpica por pruebas convencionales
Nuestro aislado Esculina Glucosa Xilosa Manitol Maltosa Lactosa + + P. fulva ND ND ND ND ND P. putida + + v v v P. luteola + + + + + v + v P. oryzihabitans + + + (+) v A. delafieldii + +

9API 20 NE: P. putida 96,6 % (bioc (biocdigo 0143451)

Pseudomonas putida like:

Identificacin genotpica
9 Secuenciacin del ADNr 16S: 99.57 % de identidad con P. putida; 99.64 % de identidad con Pseudomonas fulva. 9 Hibridizacin DNA- DNA: 100 % de identidad con P. fulva NRIC 0180T (P. parafulva AJ 2129T = 63%, P. cremoricolorata NRIC 0181T = 60%; P. putida IFO 14164T = 41%)
Almuzara, Vazquez, Tanaka, Ramirez, Lopez, Turco, Rapaport, Pasteran, Procopio, Vay JCM, 2010.

Pseudomonas putida like

CIM IMP: 32 g/ml CIM MERO: 32 g/ml

Pseudomonas fulva. Sensibilidad a los

antimicrobianos (g/ml)
Piperacilina/ tazobactam Cefepime + Clavulnico Clavul Ceftazidima Ceftazidima + Clavulnico Clavul Cefepime Aztreonam Imipenem Meropenem 32 Ciprofloxacina Imipenem + EDTA Meropenem + EDTA Gentamicina Amikacina Colistina

32 0.5

32

32

128

16

128

16

0.125

* EDTA 0.4 mM (concentraci (concentracin final) ** Clavulanic acid 10 g/ml (concentraci (concentracin final)

Pseudomonas fulva. Caracterizacin fenotpica de

la resistencia a carbapenemes

9 Ensayos de sinergia de doble disco: sinergia IMP EDTA MERO (probable MBL) 9 Ensayos de deteccin de actividad hidroltica sobre imipenem : Positivos

Pseudomonas fulva. Caracterizacin genotpica de

la resistencia a carbapenemes

PCR positiva para genes blaVIM (VIM-2) PCR positiva para integrones de clase 1

Pseudomonas fulva
9 El hallazgo de P. fulva representa el primer caso de infeccin humana por este microorganismo y muestra que una bacteria que forma parte de la microbiota ambiental puede causar infecciones severas y adquirir genes de resistencia bajo presin selectiva en el medio hospitalario 9 La hibridizacin ADN-ADN fue el mtodo que permiti la identificacin definitiva a nivel de especie
First case of human infection due to Pseudomonas fulva. Almuzara y col., J. Clin. Microbiol., 2010

Pseudomonas grupo stutzeri

Complejo Pseudomonas stutzeri ( > 10

genomoespecies)
Pseudomonas mendocina (CDC Vb2) Pseudomonas grupo Vb 3

Grupo Stutzeri
Oxidasa + Motilidad + Mac Conkey + Glucosa + Gas NO3 + ClNa +

Pseudomonas stutzeri
Colonias secas, adherentes, arrugadas Dimorfismo cultural frecuente Pigmento pardo amarillento, a veces difusible Desarrollo dificultoso en EMB de Levine

Pseudomonas stutzeri
Denitrificacin Oxidasa +, mvil Muy activa frente a hidratos de carbono Amilasa + Muy sensible a los ATM

Pseudomonas stutzeri
Aspectos clnicos
Heridas post - q uirrgica y post - traumatismos Bacteriemia asociada a catter Meningitis post - q uirrgicas o a shunt. Absceso cerebral Otitis media Conjuntivitis Endocarditis

Pseudomonas stutzeri Emergencia en Infecciones osteoarticulares

Edad (aos)
35 54 12 78 37 55 32 6

Factor predisponente
Ninguno Prtesis cadera Herida de pie Inoculacin de esteroides en rodilla DBT alcohlica Osteomielitis crnica Fractura de pierna Herida con cuchillo

Infeccin
Osteomielitis vertebral Absceso de cadera Osteomielitis del calcneo Artritis de rodilla Artritis cadera Osteomielitis crnica Infeccin de sitio Qx Artritis de rodilla

Pseudomonas stutzeri
Ampliamente sensible
Resistente
Cefalotina Cefoxitina

Sensible
Ampicilina Piperacilina Cefalosporinas 3 y 4 generacin Carbapenemes Polimixina Aminoglucsidos Cotrimoxazol Quinolonas

Pseudomonas stutzeri
Rango de CIM 1-8 0.5-2 0.5-1 0.125-0.5 <0.125-0.25 0.125-0.5 <0.063-0.25 CIM 50 1 1 1 0.25 <0.125 0.25 0.125
Vay C. et al. RAM 2004

ampicilina piperacilina taz ceftazidima cefepima imipenem meropenem

Pseudomonas stutzeri
Rango de CIM Aztreonam colistina gentamicina amikacina TMS ciprofloxacina minociclina <0.25<0.25-1 0.0160.016-2 0.0320.032-0.5 0.1250.125-2 0.250.25-16 0.0160.016-0.032 1-2 CIM 50 0.5 0.25 0.125 1 2 0.032 2
Vay C. et al. RAM 2004

Resistencia a Carbapenemes en

Pseudomonas stutzeri

DIM-1 . Holanda, Poirel et al., AAC, 2010 IMP-16. Brasil, Carvalho-Assef et al. JMM, 2010 IMP (4 casos de bacteriemia). Lee et al. JMII, 2004

Pseudomonas mendocina
Primera descripcin: 1970; Palleroni et al Primer caso de endocarditis de vlvula protsica: Argentina, Aragone MR et al, JCM, 1992) Endocarditis de valvula nativa ( Mert A et al. 2007; Johansen HK et al. 2001) Espondilodiscitis (Chi CY et al, Taiwan, 2005)

Resistencia a Carbapenemes en

Pseudomonas mendocina

IMP-8 Portugal, Santos C. et al. Res Microbiol. 2010

Achromobacter spp.: Emergencia de un nuevo patgeno

Familia Alcaligenaceae
Gnero Alcaligenes

- A. faecalis
Gnero Achromobacter

- A. xylosoxidans - A. denitrificans - A. piechaudii - A. insolitus, A. ruhlandii, A. spanius - Achromobacter grupos B, E, F

Gnero Bordetella

Pannonibacter

Familia Alcaligenaceae
Gnero Kerstersia

- K. gyiorum (Coenye et.al. 2003)

Gnero Advenella

- A. incenata (Coenye et.al. 2005)

Gnero Oligella

- O. ureolytica - O. urethralis

Alcaligenes spp y Achromobacter spp

Colonias no pigmentadas de tamao similar a las de Acinetobacter spp Especies asacarolticas

- A. faecalis - A. piechaudii - A. denitrificans - A. insolitus - A. spanius

Coenye, 2003

Especies sacarolticas

- A. xylosoxidans - A. ruhlandii

Achromobacter xylosoxidans
Caractersticas culturales y bioqumicas:

Colonias no hemolticas No pigmentado Desarrollo en EMB de Levine Oxidasa + Movil Acetamida + No produce enzimas extracelulares ADH Oxida xilosa y glucosa Reduce NO3-

Achromobacter xylosoxidans

Infecciones La mayor mayora de adquisici adquisicin nosocomial

Bacteriemia en pacientes con enfermedad de base e

instrumentados
Principales factores de riesgo: neonatos, quemados,

inmunosupresin natural o adquirida

Brotes de pseudobacteriemia debido a soluciones contaminadas

Shie SS y col. J Microbiol Immunol Infect. 2005 MolinaMolina-Cabrillana J y col. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2007

Achromobacter xylosoxidans
Infecciones de la comunidad Infecciones ticas ticas Infecci n de BQC, Neumon Infeccin Infeccin respiratoria: Exacerbaci Exacerbaci Exacerbacin Neumona Neumona y Enfermedad FQ. Infecciones oculares Infecci Infeccin Infeccin urinaria Osteomielitis (fractura expuesta)

Achromobacter xylosoxidans: Emergencia de un nuevo pat patgeno

Patgeno emergente en secreciones respiratorias de

pacientes con fibrosis quistica

(Raso T y col. APMIS 2008; Spicuzza L y col. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2009; Lipuma JJ. Clin Microbiol Ver. 2010)

Patgeno emergente en bacteriemias asociadas a cateter en

pacientes hemodializados
(Ahmed MS y col. Clin Nephrol. 2009)

Achromobacter xylosoxidans: Emergencia en Fibrosis Qu Qustica

9 Colonizante durante o despus del tratamiento de infeccin por P. aeruginosa 9 Aislamiento concomitante con PAE o con PAE + S. aureus 9 Colonizacin asociada con la exacerbacin de los sntomas pulmonares 9 Colonizacin transiente o crnica
Kanellopoulou y col.Eur J. Clin Microb Infect Infect Dis. 2004. Wainwright CE y col. Thorax. 2009

Achromobacter xylosoxidans: Emergencia en Fibrosis Qu Qustica

9 Colonizante del pulmn daado ms que un agente infeccioso destructivo 9 Incidencia incrementada por uso de colistina y tobramicina inhalatorias 9 Transmisin persona- persona va area?
Kanellopoulou y col.Eur J. Clin Microb Infect Dis. 2004. Wainwright CE y col. Thorax. 2009

Achromobacter spp. Aislamientos de pacientes fibroquisticos Hospital de Ni Nios Ricardo Gutierrez

Per Perodo febrero 20022002-diciembre 2007 9 9 9 9 9 9 9 19 pacientes Edad: 1 a 24 a aos 31 aislados 11 tipos clonales (1 paciente colonizado con 4 clones diferentes) diferentes) Clon A prevalente (8 pacientes) 74 % coinfecci coinfeccin con P. aeruginosa Prevalencia en 1987 y 1995: 0 %; 2004: 5.3 % (Galanternik L., SADEBAC 2006)

Achromobacter spp.
Resistencia natural:
9 Aminopencilinas, cefalosporinas de 1ra y 2da generacin, cefotaxima, cefepima y aztreonam 4 Aminoglucsidos 4 Fluorquinolonas

Achromobacter xylosoxidans
Multirresistente
Resistente Aminoglucsidos Fluorquinolonas Aztreonam Variable Polipeptdicos Cotrimoxazol Cefepima Sensible Piperacilina Ceftazidima Imipenem Meropenem Minociclina

Achromobacter xylosoxidans. Resistencia a antibiticos -lactmicos

OXAOXA-114 lactamasa cromos cromosmica clase D (pI (pI 8.6) benzilpenicilinas, benzilpenicilinas, CEF, PIP, TIC y d dbil actividad hidrol hidroltica sobre IMP No hidroliza OXA No hidroliza CAZ, FOX, CTX, FEP ni AZT No inhibible por SUL, TAZ, CLAV No inducible por FOX ni IMP

Doi y col. AAC. 2009

Achromobacter spp. Estudios de sensibilidad antibitica

n= 92 (59 no FQ; 33 FQ) A. xylosoxidans: 77 A. denitrificans: 8 A. piechaudii: 7 Perodo: 1995-2007

Achromobacter spp.
(n = 92 )
10% 51% 14% Sangre (23) Mat. Resp. (47) Hueso y TCS (9) Otros (13) 25%

Actividad antibitica de 18 antimicrobianos sobre Achromobacter spp (g/ml) n = 92

Antibitico Ceftazidima Cefepime Piperacilina Piperacilina/tazobacta m Imipenem Meropenem Ertapenem Ciprofloxacina Gatifloxacina Levofloxacina Moxifloxacina Amikacina Gentamicina TMS Tetraciclina Doxiciclina Minociclina Colistina CIM 50 8 32 0.5 0.5 1 0.125 0.125 4 4 4 4 128 64 0.25 64 16 2 8 CIM 90 16 128 4 4 4 4 16 16 32 16 64 256 256 32 256 32 16 64 Rango 1 - 256 4 - 256 0.06 256 0.06 - 32 0.5 - 256 0.016 - 64 0.03 - 32 0.5 - >64 0.5 - >64 0.5 - >64 0.5 - 64 4 - >256 4 - >256 0.03-128 2 - 256 < 0.125 64 0.03-128 < 0.125-256

Correlacin Difusin versus Dilucin en Agar

Antibitico Ceftazidima Cefepime Piperacilina Piperacilina/ tazobactam Imipenem Meropenem Ertapenem Ciprofloxacina Gatifloxacina Levofloxacina Moxifloxacina Gentamicina Amikacina TMS Tetraciclina Doxiciclina Minociclina

Nmero (%) de errores

VM M 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 2(2.17) 0 (0) 1(1.08) 1(1.08) 1(1.08) MI

r -0.65 -0.74 -0.63 -0.56 -0.80 -0.77 -0.85 -0.81 -0.81 -0.80 -0.79 -0.78 -0.67 -0.82 -0.87 -0.87 -0.71

r2 0.42 0.55 0.40 0.31 0.63 0.59 0.72 0.65 0.66 0.64 0.63 0.61 0.45 0.68 0.76 0.76 0.50

Puntos de corte R I S

0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 1(1.08) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 1(1.08) 0 (0) 1(1.08) 1(1.08) 0 (0) 0 (0) 0 (0)

16(17.4) 29 (31.5) 0 (0) 1 (1.08) 3 (3.3) 5 (5.4) 4 (4.3) 17 (18.5) 28 (30) 24 (26) 18 (19.6) 1 (1.08) 16 (17.4) 0 (0) 10(10.9) 10(10.9) 35 (38.0)

11 13

17

12-21 14-23 18-23

22 24 24

15 27 20 20

16-20

21 28

21-28 21-23

29 24

Correlacin E-Test versus Dilucin en Agar

Antibitico Ceftazidima Piperacilina Imipenem TMS Minociclina Colistina

Nmero (%) de errores VM 0 (0) 0 (0) 0 (0) 1 (2.0) 0 (0) 1 (2.0) M 0 (0) 0 (0) 0 (0) 1 (2.0) 0 (0) 3 (6.0) MI 10 (20) 0 (0) 2 (4.0) 0 (0) 3 (6.0) 13 (26.0)

r 0.75 0.95 0.62 0.70 0.82 0.65

r2 0.56 0.90 0.39 0.49 0.68 0.42

Achromobacter spp. Difusin vs Dilucin

1. DIFUSION IMIPENEM MEROPENEM ERTAPENEM GENTAMICINA TMS DOXICICLINA TETRACICLINA 2. EE-test PIPERACILINA MINOCICLINA 11 13 17 15 27 20 20 22 24 24 21 28 24 29

Achromobacter xylosoxidans Resistencia adquirida a cefalosporinas de 3ra generaci generacin

9 VEB - 1 : Neuwirth C. et al. EID 2006 9 GES - 1: Yoya N. et al. CAM. 2010

Achromobacter xylosoxidans. Resistencia adquirida a Carbapenemes

1: MBL 1a. VIM - 1 :Riccio M et al; AAC; 2001 1b. IMP - 1 0 : Iyobe S. et al; AAC; 2002 1c. IMP - 1 :Shibata N et al; JCM; 2003 1d. VIM - 2 :Shin K et al; Diag. Microbiol Infect Dis; 2005 2: Aislamientos IMI (R) MERO (R) NO por MBL M. Kanellopoulou .Eur I. Clin Microb Infect Dis 2004 3: Disociaci Disociacin IMI (S) M E RO (R) Mecanismo ?

Gnero Bordetella
Especies exigentes - B. pertussis - B. parapertussis - B. holmesii Especies no exigentes (forman colonias similar a Alcaligenes) - B. bronchiseptica - B. avium - B. hinzii - B. trematum - B. ansorpii - B. petrii

Gnero Bordetella
9 Cocobacilos gram-negativos 9 Aerobios estrictos 9 Asacarolticos 9 Patgenos humanos estrictos: B. pertussis 9 Patgenos en animales y oportunistas en el hombre: B. bronchiseptica, B. avium

Bordetella spp
Especie
B. pertussis B. parapertussis B. bronchiseptica B. holmessi B. avium B. hinzii B. trematum B. ansorpii B. petrii

Oxidasa
+ + + + - +

Movilidad
+ + + + + -

Urea
+ 24 hs + 4 hs -

Bordetella spp y gneros relacionados

Emergencia de aislamientos de Bordetella spp (no B. pertussis) de especimenes no respiratorios

9 Bordetella hinzii 9 Bordetella holmessii 9 Bordetella trematum 9 Kerstersia gyorium

Bordetella holmesii
9 Ex CDC no oxidador grupo 2 (NO2) 9 Descripta inicialmente por Weyant RS en 1995 9 Sindrome pertussis like 9 Bacteriemia en pacientes con enfermedades de base severas (asplenia, linfoma de Hodking, anemia de las celulas falciformes, EPOC)

Bordetella trematum
Bordetella avium like (Dorittke et. al, 1995) Descripta por Vandamme P. en 1996 Aislada de odo y de heridas Significado clnico incierto

Kerstersia gyiorum
Descripta por Coenye T y col., IJSEM, 2003 Aislada de heridas en pierna y tobillo Fenotpicamente similar a Alcaligenes faecalis Identificacin polifsica

trematum (Ox -) y de otras especies de Bordetella

Asimilacin de Caprato (+) y Adipato (-) la diferencian de B. Caractersticas principales: cocobacilo gram-negativo, oxidasa negativa, movilidad variable

Bordetella hinzii
Descripta por Vandamme P . y col. 1995 Comensal del tracto respiratorio de aves de corral Aislado de TR de pacientes con fibrosis quistica, asma o tabaquismo, SIDA Aislado de bilis de paciente transplantado heptico con colangitis Bacteriemia en pacientes con enfermedades de base severas: mielodisplasia, SIDA

Flavobacteriaceae
Chryseobacterium Bergeyella Elizabethkingia Weeksella Empedobacter Capnocytophaga ( son fermentadores)

Myroidaceae
Myroides spp

Elizabethkingia meningoseptica
CAMBIOS TAXONMICOS
CDC IIa Flavobacterium meningosepticum (King E;1959) Chryseobacteruim meningosepticum (Vandamme et al.,1996) Elizabethkingia meningoseptica (Kim K. K y col. Int J S E Microbiol.2005)

Elizabethkingia meningoseptica
Colonia grande de borde entero similar a Enterobacteriaceae Produce hemlisis Colonias puede no ser pigmentadas

Similitudes y Diferencias entre E. meningoseptica y S maltophilia

Prueba Pig. Amar. DNasa Esculina Manitol ONPG Movilidad Oxidasa LDC PYR

E. meningoseptica
Plido o + + + + + +

S. maltophilia
Plido o + + V + -* + -

Elizabethkingia meningoseptica
Primera descripcin 1944: Meningitis en infante prematuro.
Shulman et al. J Lab Clin Med.

Elizabethkingia meningoseptica
Peditricos Meningitis Bacteriemia Neumon Neumonas (rara aprox. 3%) Adultos Neumon Neumona Bacteriemia primaria Meningitis Celulitis, infecciones oculares

Elizabethkingia meningoseptica.
Emergencia de aislamiento
Bacteriemia en adultos Adquisicin IH Internacin en UCI Enfermedad de base: neoplasia y DBT Bacteriemia 1ria (> ria) Polimicrobiana Mortalidad asociada a CVC, ATB, biofilm
Hsu M. et al. EICMID. 2011 Lin PJ et al. IJAA. 2010

Elizabethkingia meningoseptica.
Emergencia de aislamiento
Esputo de pacientes fibroquisticos 35 aislamientos en 22 pacientes Distintos patrones en PFGE Coinfeccin con P. aeruginosa No asociado con deterioro pulmonar
Lambiase A. y col. J. Infect. 2007

Flavobacteriaceae
Resistencia Natural
Aminoglucsidos Polipeptdicos (excepto Weeksella Penicilina (excepto

virosa)

W. virosa, B. zoohelcum

y grupo CDC II)

Elizabethkingia meningoseptica
Multirresistente
Resistente Aminopenicilinas Piperacilina Cefalosporinas Monobactamas Aminoglucsidos Polipeptdicos Variable Carbapenemes Cefamicinas (cefoxitina) Cefepima Vancomicina Ciprofloxacina Levofloxacina Trimetoprimasulfametoxazol Sensible Minociclina Rifampicina

Elizabethkingia meningoseptica
Carbapenemasas 2

Mecanismo de resistencia a los -lactmicos

BlaB-1 GOB-1 Bajo Nivel de R a carbapenemes

Cromosmicas clase B

Resistente a inhibidores. Afecta a cefepima. Impermeabilidad + carbapenemasa: Alto nivel de resistencia a carbapenemes Cefalosporinasa clase A (CME-2): cromosmica, espectro extendido. No afecta a cefamicinas, piperacilina, carbapenemes y cefepima. Es inhibida por inhibidores, cefamicinas e imipenem

Sensibilidad antibi antibitica de Elizabethkingia meningoseptica

ANTIMICROBIANO
PIPERACILINAPIPERACILINA-TAZOBACTAM PIPERACILINA MEROPENEM IMIPENEM ERTAPENEM CEFTAZIDIMA CEFEPIMA CIPROFLOXACINA LEVOFLOXACINA MOXIFLOXACINA GATIFLOXACINA AZITROMICINA CLARITROMICINA ERITROMICINA RIFAMPICINA TRIMETROPRIMA / SULFAMETOXASOL MINOCICLINA TETRACICLINA DOXICICLINA LINEZOLID VANCOMICINA TEICOPLANINA

CIM50 g/ml
16 32 32 64 16 256 32 2 0.5 0.25 0.5 32 2 4 0.125 2 0.5 32 2 32 16 16

CIM90 g/ml
32 64 64 64 32 256 64 4 1 1 0.5 64 4 16 0.125 8 0.25 64 4 64 64 32 4 8

RANGO g/ml
32 64 64 64 64 256 128 256 64 32 32 16 8 64 0.5 8 0.5 128 4 4 256 32

16 16 16 32 8 0.5 0.25 0.25 0.25 1 0.5 0.5 0.125 0.75 0.25 8 1 16 8 16

Perfil de sensibilidad a los ATMs: Similitudes y Diferencias entre E. meningoseptica y S. maltophilia

ATM IMI/MERO CAZ FEP AGLU Colistina FOX TMS LEVO E. meningoseptica R/S R R/S R R R/S V S/R S. maltophilia

R
R R R S/R R S/R S/R

Meningitis por Elizabethkingia meningoseptica

Rifampicina +

Vancomicina ?

TMS

Minociclina

Fluorquinolona

Elizabethkingia meningoseptica
Estudios de sinergia antibitica
Rifampicina + vancomicina ANTAGONISMO INDIFERENCIA SINERGIA 3/12 8/12 1/12 Rifampicina + minociclina 1/12 9/12 2/12 Rifampicina + TMS 4/12 5/12 3/12

Elizabethkingia meningoseptica
9 Los antibiticos ms activos : rifampicina, minociclina, doxiciclina, trimetoprimasulfametoxazol y las nuevas fluorquinolonas. 9 Debido a su comportamiento impredecible, las asociaciones de antimicrobianos para E. meningoseptica deberan ensayarse para cada aislamiento en particular.

Aislamiento de BNF de habitat larvario en infeccin humana

Paciente de 70 aos, sexo masculino, deambulante en la va pblica, con antecedentes de enolismo, tabaquismo severo y arteriopata perifrica Hipotenso, frecuencias cardiaca y respiratoria Lesiones en ambas regiones inguinales Diagnstico: shock sptico

Aislamiento de BNF de habitat larvario en infeccin humana

Tratamiento emprico: ciprofloxacina + ampicilina sulbactam BNF en hemocultivos (2:2) Se rot el tratamiento a ceftazidima ms amicacina. Fallece

BGN, Ox +, inmvil, asacaroltico, fenilalanina ++ Por pruebas bioqumicas convencionales: Gilardi Rod grupo 1 Por API 20NE: Brevundimonas diminuta/Oligella urethralis (88.5 % de exactitud). Por secuenciacin del ARN ribosomal 16S: Wohlfahrtiimonas chitiniclastica strain 5401129 (GenBank accession no.EU484335).

Primer caso de Sepsis fulminante por Wohlfahrtiimonas chitiniclastica

First Case of Fulminant Sepsis Due to Wohlfahrtiimonas chitiniclastica Marisa N. Almuzara, et al J. Clin. Microbiol. June 2011 49: 2333-2335

Wohlfahrtiimonas chitiniclastica
Clase de las gamma- Proteobacteria Aislada del 3er estado de la larva de una mosca parasitaria:

Wohlfahrtia magnifica

Filogenticamente relacionada con Ignatzschineria larvae Miasis severas de heridas en el ganado y en el hombre, que constituyen la puerta de entrada para la bacteriemia. Infecciones en homeless

Conclusiones
Emergencia de aislamiento de especies del gnero Pseudomonas (distintas de P. aeruginosa) productoras de carbapenemasas Emergencia de aislamientos de BNF de origen ambiental en la infeccin humana Emergencia de aislamientos de BNF distintos de P. aeruginosa, B. cepacia y S. maltophilia de las secreciones respiratorias de pacientes FQ