IDENTIFICACIN DE COMPUESTOS AROMTICOS DEL VINO MEDIANTE NARIZ ELECTRNICA

J. Lozano, J.P. Santos, M. Aleixandre, M.J. Fernndez, J. Gutirrez, T. Arroyo*, J. M. Girn**, M.C. Horrillo Laboratorio de sensores, Instituto de Fsica Aplicada, Consejo Superior de Investigaciones Cientficas. C/ Serrano 144. 28006 Madrid. Telf. 91 651 8806. Fax : 91 563 1794 * Instituto Madrileo de Investigacin Agraria y Alimentaria. Dept. Agroalimentacin. Finca El Encn. Ctra. N-II Km. 28,2. 28800 Alcal de Henares ** Dept. Arquitectura de Computadores y Automtica. Fac. Fsicas. Universidad Complutense de Madrid. Av/ Complutense s/n. 28040 Madrid E-mail: jesloz@ifa.cetef.csic.es

Resumen
Se presenta en esta comunicacin una aplicacin de un sistema de nariz electrnica para discriminar varios compuestos aromticos disueltos en agua, etanol y vino. Los compuestos analizados se encuentran generalmente en el vino y son: cido actico, acetato de etilo, acetaldehdo, tricloroanisol (TCA) y SO2. Las concentraciones de estos compuestos estn en el rango de mg/l excepto en el caso del TCA que est en el rango de ng/l. Se ha realizado un procesado de los datos del tipo Anlisis de Componentes principales (PCA) y redes neuronales del tipo Radial Basis. Los resultados muestran que a pesar de la fuerte influencia del etanol, el sistema puede distinguir correctamente la mayora de los compuestos medidos. Palabras Clave: compuestos aromticos, nariz electrnica, reconocimiento de patrones.

sera bueno trabajar con sensores con baja sensibilidad a etanol a las concentraciones usuales en el vino (alrededor del 12 % v/v). El principal objetivo de este trabajo es estudiar la capacidad de discriminacin de la nariz electrnica presentada para varias disoluciones de compuestos aromticos del vino con un array de sensores de xido de estao complementado con un sistema de reconocimiento de patrones.

2
2.1

EXPERIMENTAL
CONFIGURACIN DE LAS MEDIDAS

En la figura 1 se muestra un esquema del sistema de medidas. El gas portador utilizado es Nitrgeno con un 99.998% de pureza que va a realizar el arrastre de los compuestos voltiles de la muestra.

INTRODUCCION

Durante los ltimos aos la calidad del vino ha adquirido una gran importancia como alto valor aadido del producto. La investigacin en el vino y en sus constituyentes tiene mucho inters, especialmente para los enlogos. Se han identificado ms de 600 compuestos voltiles en los vinos. Generalmente el estudio de estos compuestos se lleva a cabo utilizando tcnicas complejas como pueden ser cromatografa de gases y espectrometra de masas. En los ltimos aos, los sistemas olfativos artificiales se han utilizado en aplicaciones con vino [1]. Uno de los inconvenientes en este tipo de investigaciones es la fuerte influencia del agua y el etanol. Para evitar estos problemas se suelen utilizar otros mtodos de extraccin como microextraccin en fase slida (SPME) [2], extraccin lquido-lquido [3], etc. Pero a menudo estos mtodos aaden complejidad al sistema de medida y no son adecuados para un proceso automtico. Por tanto,

Figura 1. Esquema del sistema de medida. El mtodo de muestreo empleado ha sido el espacio de cabeza esttico seguido de una inyeccin dinmica. Se utilizan 10 ml de la disolucin que se mantienen en un burbujeador durante 30 minutos a 30C para generar voltiles en la parte superior. Despus se conmutan las electrovlvulas y el nitrgeno fluye durante 20 minutos arrastrando los compuestos voltiles hacia la cmara de los sensores. A continuacin se vuelven a conmutar de nuevo las

electrovlvulas, para que circule de nuevo el nitrgeno por los sensores para comenzar la desorcin de los mismos. Este proceso se repite varias veces para cada compuesto. Se hace cada cierto tiempo una medida de calibracin de los sensores con una disolucin de etanol al 12% en agua desionizada. Todas las medidas se llevaron a cabo con un flujo total de nitrgeno de 200 ml/min. La resistencia de los sensores se mide con un multiplexor Keithley 7001 y un multmetro digital Keithley 2001 con 7 dgitos y 1/2 conectados al PC y controlados mediante una interfaz GPIB. El sistema de medida est completamente automatizado y controlado por un programa desarrollado en Testpoint . 2.2 SENSORES

resistencia de los sensores cuando los sensores estn expuestos al aroma a medir. A continuacin se calculan las respuestas individuales de los sensores, que se definen como el cociente de la mnima resistencia medida en el sensor con el compuesto y la resistencia obtenida al medir una disolucin de etanol al 12%:

r=

Rc Ret

(1)

Se han utilizado en este sistema un array de 16 sensores de xido de estao fabricados en nuestro laboratorio utilizando la tcnica de sputtering RF sobre un sustrato de almina y dopado con cromo e indio. El espesor de las pelculas sensibles vara entre 200 y 800 nm. 2.3 COMPUESTOS AROMTICOS

Con esto se pretende que el sistema responda frente a cambios en los otros compuestos del vino y no al etanol. Adems, al realizar peridicamente medidas con etanol, se puede realizar una calibracin de los sensores y corregir la posible deriva que vaya apareciendo. Por ltimo, se realiza un normalizado de los datos para que todos los datos se encuentren entre 0 y 1. A continuacin se realiza un procesado de las respuestas obtenidas para poder identificar los diferentes compuestos obtenidos, para ello se van a utilizar dos tcnicas de reconocimiento de patrones: el anlisis de componentes principales y las redes neuronales artificiales. El anlisis de componentes principales es una potente tcnica de reconocimiento de patrones, supervisada y lineal basada en la expansin de Karhunen-Loeve [7]. El objetivo de la tcnica de anlisis de componentes principales es expresar la informacin de la matriz respuesta mediante un nmero menor de variables, variables ms descriptivas llamadas componentes principales [8]. El tipo de red utilizada va a ser del tipo Radial Basis. La arquitectura de esta red consta de dos capas: una capa escondida radial basis de S1 neuronas y una capa lineal de salida de S2 neuronas. Estas redes pueden requerir ms neuronas que las redes backpropagation estndar, pero a menudo pueden ser diseadas en un tiempo menor que las redes backpropagation. Tanto el anlisis de componentes principales como la programacin de la red se han realizado utilizando Matlab 6.0. 3.1 MEDIDAS DE COMPUESTOS EN AGUA

Los compuestos aromticos medidos han sido: cido actico, acetato de etilo, acetaldehdo, 2,4,6tricloroanisol (TCA) y dixido de azufre (SO2). Estos compuestos se han medido a los niveles mnimos y mximos encontrados usualmente en el vino. Las concentraciones en la disolucin del 12% de etanol se muestran en la tabla 1. Estos compuestos se han medido tambin disueltos en vino y algunos de ellos (cido actico y etanol) se han medido tambin disueltos en agua desionizada. Los compuestos citados a sus concentraciones mximas son considerados defectos en vino [5]. El TCA siempre se considera un defecto y es el responsable del olor a corcho del vino. Algunos autores han estimado que entre el 2 y el 6% de las botellas de vino estn afectadas por defectos derivados del corcho. [6] Nombre
A. Actico Acetato Etilo Acetaldehdo TCA SO2

Concentracin
200 - 800 50 - 300 50 400 1 10 20-200

Unidades
mg/l mg/l mg/l ng/l mg/l

Tabla 1: Concentraciones de los compuestos aromticos.

RESULTADOS Y DISCUSIN

El preprocesado que se ha realizado a los datos medidos por el sistema consta de una primera fase de extraccin en la que se obtiene el mnimo valor de

En este apartado se van a mostrar las medidas de los compuestos disueltos en agua desionizada. En la figura 2 se muestra el diagrama de componentes principales obtenido para las medidas de agua, 12% de etanol, SO2 y cido actico, la aportacin de cada componente principal aparece entre parntesis. Como se puede comprobar, hay una completa separacin de los datos correspondientes a las medidas de compuestos en agua.

Figura 2: Diagrama de componentes principales de las medidas de compuestos en agua.

Figura 3: Diagrama de componentes principales de las medidas de compuestos en etanol al 12%.

Compuesto estimado Comp. Real Agua Etanol SO2 Actico Agua 5 0 0 0 Etanol 0 10 0 0 SO2 0 0 10 0 Actico 0 0 0 10

En la tabla 2 se muestra la matriz de confusin de la red neuronal entrenada con los datos de disoluciones en agua. Hay un 100% de xito en la clasificacin de estos compuestos. 3.2 MEDIDA DE COMPUESTOS SOLUCIN HIDROALCOHLICA EN

Tabla 2: matriz de confusin para los compuestos en agua

Se han medido los compuestos en las concentraciones mostradas en la tabla 1 y despus del

procesado comentado anteriormente, el diagrama de componentes principales obtenido se muestra en la figura 3, en el que se puede observar que al igual que en las medidas de compuestos en agua, se puede realizar una separacin completa de las clases. La matriz de confusin de la red neuronal se muestra en la tabla 3, al igual que en el anterior, hay un 100% de xito en la clasificacin. Para comprobar los efectos de las pequeas variaciones de la concentracin de etanol, se ha medido tambin disoluciones alcohlicas de concentraciones entre el 11 y el 14%. En este rango se encuentra la regin de saturacin de la curva de respuesta de nuestros sensores a etanol. Esto implica que pequeas variaciones en la concentracin de etanol produce una variacin despreciable en la respuesta comparada con aquella obtenida para los compuestos aromticos.
Compuesto estimado
Comp. Real A. Actico Acetato de Etilo Acetaldehdo TCA SO2 A. Actico 10 0 0 0 0 Acetato de Etilo 0 10 0 0 0 Acetaldehdo 0 0 10 0 0 TCA 0 0 0 8 0 SO2 0 0 0 0 10

compuestos aromticos pero esta vez disueltos en vino. En la figura 4 se muestra el diagrama de componentes principales de las medidas realizadas, se puede observar que la separacin de clases no es completa como en las otras medidas, las elipses que delimitan las clases del TCA y el Acetaldehdo, se solapan, debido a que las respuestas de los sensores para estos dos compuestos son muy similares. Se ha realizado el entrenamiento de la red de la forma habitual. En la tabla 4 se muestra la clasificacin que la red realiza de las medidas realizadas, en esta ocasin se obtiene un 80% de xito en la clasificacin. Se puede observar que al igual que el anlisis de componentes principales no clasifica correctamente el TCA y el Acetaldehdo. El resto de defectos los ha clasificado correctamente en la clase correspondiente. Tambin es importante resaltar que aunque el sistema no es capaz de distinguir entre TCA y Acetaldehdo, s que reconoce que es un defecto ya que lo separa del vino base.
Vino base 3 0 0 0 0 0 Actico 0 3 0 0 0 0 SO2 Acetato 0 0 3 0 0 0 0 0 0 3 1 1 TCA 0 0 0 0 0 0 Acetaldehdo 0 0 0 0 2 2

Vino base Actico SO2 Acetato TCA Acetaldehdo

Tabla 3: Matriz de confusin para compuestos en solucin hidroalcohlica. 3.3 MEDIDA DE COMPUESTOS AROMTICOS EN VINO

Tabla 4: Matriz de confusin para las medidas en vino. El hecho de que la clasificacin de los compuestos en el vino no la realice correctamente es debido a que en el vino existen muchos ms compuestos que tambin provocan una respuesta en los sensores, incluso para

Por ltimo se han realizado medidas de los mismos

Figura 4: Diagrama de componentes principales de las medidas de compuestos en vino.

concentraciones mayores que las encontradas de TCA (1 a 10 ng/l).

CONCLUSIONES

Se ha realizado un sistema y unas tcnicas de medida y procesado de los datos que permite la identificacin de varios compuestos aromticos caractersticos del vino incluso con la fuerte interferencia que introduce la presencia del etanol en las muestras. En el caso de compuestos en agua y en soluciones hidroalcohlicas el xito de la identificacin es de un 100% mientras que en el vino, obtenemos un 80% que podra ser incrementado utilizando otras tcnicas de extraccin de voltiles y/o modificando las caractersticas de los sensores. Referencias [1] I. Sayago, M. C. Horrillo, J. Getino, J. Gutirrez, L. Ars, J. I. Robla, M. J. Fernndez and J. Rodrigo, Discrimination of grape juice and fermented wine using a tin oxide multisensor Sensors and Actuators B (1999) 249-254. [2] J. A Guadarrama et al., Discrimination of wine aroma using an array of conducting polymer sensors in conjunction with solid-phase micro-extraction (SPME) technique, Sensors and Actuators B 77 (2001) 401-408. [3] M. Ortega-Heras, M. L. Gonzlez-SanJos, and S. Beltrn, Aroma composition of wine studied by different extraction methods, Analytica Chimica Acta 458 (2002) 85-93. [4] M.C. Horrillo et al., Design and development of an electronic nose system to control the processing of dry cured Iberian hams monitored via Internet. Electronic noses and olfaction 2000, pp.75-80. Bristol and Philadelphia: Institute of Physics publishing. [5] R. S. Jackson, Wine Science, San Diego, California: Academic Press, (1994). [6] R. Carey, Natural cork: The new closure for wine bottles, Vineyard Winery Management 14 (1988) 38. [7] J. Kittler y P.C. Young, Pattern Recognition, 5 (1973) 335-352. [8] E. Llobet, J. Brezmes, X. Vilanova, J.E. Sueiras y X. Correig, Sensors and Actuators B, 41 (1997) 1321.