Dra.

NievesM

Gonzlez

Resumen Cuando un paciente debe ser evaluado por un posible problema inmunolgico, muchos factores deben tomarse en consideracin. Las pruebas menos costosas deberan ordenarse primero en buscade una guadiagnstica y adicionalmente se ordenarn las pruebas ms sofisticadas si el diagnstico y el tratamiento lo ameritan. Este tipo de investigaciones inmunolgicas deben ser ticamente justificadas sobre todo si van a tener un impacto positivo en el tratamiento futuro de estos pacientes y sobre todo que no sean tcnicamente engorrosas (en nios, tomar grandes cantidades de sangre es imposible), ni que vayan a comprometer econmicamente al paciente.

slo se realizan en laboratorios especializados en el diagnstico biolgico de enfermedades inmunolgicas {autoinmunes, infecciosas, virales o micticas). La exquisita sensibilidad y especificidad de la reaccin Antgeno -Anticuerpo, ha sido utilizada como la base de muchos procedimientos diagnsticos. Dependiendo del test, se puede detectar o cuantificar un antgeno especfico o un anticuerpo especfico. La deteccin de un antgeno especfico se aplica en el diagnstico de enfermedades infecciosas, neoplasias, cuantificacin de hormonas, drogas etc. La cuantificacin de anticuerpos especficos se utiliza en el diagnstico de infecciones, alergias, enfermedades autoinmunes e inmunodeficiencias, etc. Nos limitaremos a pruebas inmunolgicas que permitan apreciar el nivel de inmunidad humoral y celular, distinguiendo los factores especficos y no especficos que controlan el nivel general de la respuesta inmunitaria.
Sistenuz del Complemento

Diagnstico en la Prctica Los progresos damental

Inmunolgico Mdica de la inmunologa funen estos

nos han conducido

aos, a desarrollar tcnicas sofisticadas aplicadas a la Inmunologa Clnica. Algunas tcnicas ya son rutina, pues se conocen desde hace tiempo. Otras
107

El complemento (C) es un sistema biolgico complejo, mediador humoral primario de la reaccin Antgeno -Anti-

Diagnstico

Inmunolgico

en 10 Prctica Mdica

cuerpo.. Constituido por al menos 20 globulinas sricas qumica e inmunolgicamente distintas, en la cual la activacin sec uencial se hace por dos vas : la va clsica y la v.a alterna, y que se renen en un tronco terminal comn produciendo lisis celular. As, su activacin puede tener un punto de partida inmunolgico (antgeno-anticuerpo) o no inmunolgico (contacto con endotoxinas, etc.). La aparicin de esta serie de actividades biolgicas sugiere que el complemento es un mediador de un gran nmero de fenmenos fisiopatolgicos y de esta manera el complemento acta como un sistema inespecfico efector de defensa y de ampliacin de la respuesta inflamatoria.

(polisacridos como la insulina, endotoxinas de bacterias Gram negativas, paredes de levadura, zymozan, veneno de cobra, etc.}. Entre las inmunoglobulinas humanas, la IgA ltimarf1ente est considerada como la nica capaz de activarla. Ms recientemente, se han reportado tambin las IgG 1, IgG2, IgG3, IgM e IgE. Seis componentes al menos intervienen en el funcionamiento de la vfa alterna, de los cuales 5 son propios (Factor 8 y D; Properdina, 8eta1 H y C3b1Na} y un componente de la vfa clsica, el C3. Esta actividad de la vfa altema es importante durante las primeras fases de la infeccin, cuando las concentraciones de anticuerpos son bajas. Despus que se forman los anticuerpos en cantidades necesarias, las dos vfas actan sinrgicamente y la vfa altema funciona como una "antena amplificadora" de la vfa clsica, generando mayor actividad del componente C3. En la Tabla I mostramos las funciones biolgicas de los componentes del complemento. En la prctica clnica la medicin de la actividad del Complemento es de gran utilidad porq ue permite detectar defectos congnitos de algunos de sus componentes, los cuales predisponen al desarrollodeenfermedades autoinmunes. Los dficits hereditarios de C1 r, Cs, C11 NH, C2, C4 y C8 estn descritos en los enfermos de lupus eritematoso sistmico (LES). El dficit de C2 es el ms frecuente y es asociado a los antfgenos HLAA10, 818 y DW2 (Tabla II). Su anlisis y medicin en sangre es la representacin de la funcin directa
108

Vas de activacin

del

complemento 1) Va O.\,ica La activacin del complemento por la va clsica se basa en el estudio de la reaccin de inmunohemlisis, en la cual los eritrocitos (E) sensibilizados por un anticuerpo anti-hemates (A) son hemolisados por el complemento (C). En la va clsica intervienen sucesivamente 9 componentes (C1, C4, C2, C3, C5, C6, C7, CB y C9) que se reagrupan en unidades funcionales: .C1 .C4, o unidad de reconocimiento. C2, C3 o unidad de activacin-

.C5, C6, C7, CB y C9 o unidad de ataque a la membrana. 2) Va Alterna La va alterna puede ser activada por sustancias inmunolgicas (agregados deinmunoglobulinas, compleios inmunes) o no inmunolgicos

Diagnstico

Inmunolgico

en la Prctica Mdica

Tabla I Actividades Actividad biolgica Complejos lmunes Agregacin Solubilizacin Vasosy fIbras musculares lisas Aumento penneabilidad vascu lar y contraccin fibras musculares lisas Cfulas Ouimiotaxis polinucleares y macrfagos Aumento movilidad polinucleares Inhibicin migracin macrfagos Movilizacin leucocitos medulares Agregacin polinucleares circulantes y neutropenia "in vivo" Agregacin polinucleares "in vitro" Liberacin enzimas lisosomiales polinucleares Secrecin proteasas macrfagos Inmunoadherencia Opsonizacin Estimulacin linfocitos B Liberacin histamina de p)aquetas Citolisis Modulacin respuesta inmune !nmunoconglutinina VIrUS Neutralizacin virus herpes Lisis clulas infectadas virus oncgenos entre sntesis y catabolismo de dichos componentes y del tipo y curso de la enfermedad o infeccin, dependiendo de las defensas inmunolgicas del husped. Niveles elevados del complemento en una enfermedad significa un rpido catabolismo y una mayor sntesis; niveles bajos significan que es mayor el consumo que la sntesis. Los ensayos clnicos ms utilizados del Complemento consisten primordial109

biolgicas

del complemento Componentes Clq C3b

C2 Kinina C3a C5a C3a,C5aC5bC6-7 Ba Bb C3e C5a C5a C5a C3b C3a, C5a, C5b C6-7 C3b C3b C3, C 1-6, C1-9 C8, cg C3b, C4b, C3d C3b C1+C4 Clq, cg

mente en la determinacin del complemento hemoltico total, CH'50 y de los ensayos inmunoqumicos o funcionales especficos de los diversos componentes (C3, C4, Clq, etc). El CH'50, prueba de hemlisis de los eritrocitos mediada poranticuerpos especficos en presencia de la secuencia intacta del complemento, es una prueba fiel para medir su actividad en el suero humano. La unidad CH'50 es una unidad arbitraria que se define como

Diagnstico Tabla II

lnmunolgico

en la Prctica Mdica

son bien tiles para un diagnstico biolgico adecuado. La hipercomplementemia es frecuente y acompaa a la mayor parte de las enfermedades inflamatorias, infecciosas y malignas. La elevacin del Complemento total (CH'50) va seguido de una elevacin de la mayora de los componentes, particularmente C4, C3 y C9. La significacin fisiopatolgica se conoce mal, no obstante se puede interpretar como la estimulacin de las clulas del sistema retculo endotelial (SRE) productoras de la mayor parte de los componentes del complemento, en particular los macrfagos, por los productos liberados de los focos inflamatorios hacia el plasma. Se observa una relacin significativa entre la elevacin de la tasa del complemento y ciertos estigmas biolgicos no especficos de la inflamacin: elevacin de las alfa2globulinas, aumento de la protena C reactiva, haptoglobina, aumento de la velocidad de sedimentacin y baja de albmina y transferrina. Las hipocomplementemias se producen por consumo, prdida (liberacin) o defecto de produccin de uno o varios componentes del complemento. Las hipocomplementemias de consumo son las ms frecuentes; el consumo puede deberse a una activacin de la va clsica, de la va alterna o de las dos vas a la vez. Adems de la accin ltica de ciertas enzimas sobre uno u otro de los componentes. La hipocomplementemia observada en el Lupus Eritematoso Sistmico (LES), constituye el tipo de hipocomplementemia de consumo por activacin de la va clsica, tiene una importancia variable en funcin de la gravedad de la enfermedad, las complicaciones visceralln

Enfernledades asociadas a deficiencias congnitas del complemento

Componente

f.njermedad

asocIada

Clq Clr

Glomerulonefritis Sndrome tipo LES Glomerulonefritis. Lupus por drogas LES. Lupus inducido por drogas LES. Lupus discoide crnico LES. Sndrome Sjogren LES. Lupus Discoide. Polimiositis Prpura de HenochSchoenlein Vasculitis. Glomeru'lonefritis VasculLtis. LES. Susceptibilidad a infecciones LES. Infecciones por Neisseria. Infeccin por Neisseria LES. AR. Vasculitis. por Sind. Raynaud LES. Infeccin Neisseria.

CI2 CIINH
C4

C2

C3

C5

C6 C7
C8

la cantidad de complemento necesaria para la lisis de 50% de los eritrocitos de camero sensibilizados con un anticuerpo (EA). Se reporta en UCH'50/ml. La medicin de las fracciones especficas C3 y C4 se hace por inmunodifusin radial, cuantificando su valor en mgrs/dl. Los otros componentes se determinan por tcnicas muy sofisticadas y costosas, pero en la mayora de los casos clnicos las pruebas descritas

Dial.'nstico

In~~~~en-la

Prctica

Mdica

les y su evolucin. As el CH'50 est bajo por lo menos alg una vez en la mayora de lo pacientes con LES, mientras permanece normal en los pacientes con Lupus Eritematoso Discoideo Crnico (LEDC). La baja del complemento total se acompaa de una depresin de la tasa de Clq, Cis, C4, C2y C3, en cambio el C5 y el cg permanecen normales. La dosificacin repetida en lascrisis lpicas muestra que la tasa de C4 es la primera que baja, seguida de C3, CH'50 y Clq y en el caso especfico de nefritis es el cg. Despus de las crisis el regreso a la normalidad se hace a partir del Clq, C3, CH'50 y C4, dato de interpretacin bien interesante para el manejo clnico de las crisis de esta enfermedad. Paralelamente a la hipocomplementemia, se observa en el plan metablico un hipercatabolismo del C3 por aumento de la sntesis que se ve con frecuencia en loS estados inflamatorios, as como la presencia de compleios inmunes circulantes que fijan el complemento. La glomerulonefritis, vasculitis cutnea, artritis y las manifestaciones neurolgicas en el LES, son consecuencia de la deposicin de inmuno complejos en los tejidos. La inmunofluorescencia en la nefritis lpica contiene depsitos de inmunoglobulinas y complemento. Los estudios han detrlostrado la presencia de DNA y anticuerpos anti-DNA, confirmando as la presencia de complejos Antgeno -Anticuerpo. El DNA tiene gran afinidad por la membrana basal glomerular. Estos complejos inmunes son considerados nefrotxicos, activando el complemento y causando inflamacin en los pacientes con LES. Tambin se depositan en piel en la unin dermo epidrmica, en piel inflamada y piel sana, apareciendo una "banda" fluorescente cuando se estudian las biopsias de piel por inmuno111

fluorescencia con antisueros de anti-inmunoglobulinas y complemento (banda lpica). As como se forman y se depositan estos inmunocomplejos en el LES, tambin existe una disminucin para eliminarlos de la circulacin, existiendo un defecto en la interaccin del G3b con su receptor celular. Las subpoblaciones de clulas inmunocompetentes tienen receptores para algunas fracciones del complemento, a travs de los cuales el complemento tendra un papel importante como inmunorregulador de la respuesta inmune. En la nefritis lpica la activacin se da principalmente por la va clsica. En la glomerulonefritis membrano proliferativa hipocomplementmica, la activacin ocurre por la va alterna, predominando el consumo precoz de G3. Las tasas sricas de G1 , C4 y G2 estn normales. Las prdidas importantes de protenas pueden acompaarse de una disminucin no selectiva de los componentes del complemento, ejemplo: en los grandes quemados. En cuanto al defecto de sntesis, sabemosqueeIGH'50, e1G4, G2yG3 estn bajos en las grandes insuficiencias hepticas (cirrosis alcohlicas, hepatitis crnica activa, hepatitis viral severa, etc.) y va en conjunto con la baja en el plasma de testigos de la funcin heptica (colesterol, albmina, factores de coagulacin). En la desnutricin importante (Kwashiorkor) de los pases tropicales y subdesarrollados, hay descenso de la mayor parte de los componentes (Glq, Gis, G5, G6, G8, G9 y G3 PA) a excepcin del G4. Esto revela una patogenia compleja en lacual intervienen la insuficiencia de protenas en el aporte alimentario y las infecciones. Se corri-

Diagnstico

Inmunolgico

en la Prctica Mdica

ge rpidamente con slo restaurar el equilibrio nutricional. La determinacin de los valores del complemento es muy til en la evaluacin biolgica y seguimiento clnico de los pacientes lpicos. En ocasiones hay descenso prolongado del CH'SO que no se correlaciona con la actividad clnica, por tanto se debe hacer una evaluacin clnica integral para tomar las decisiones teraputicas adecuadas. Se ha demostrado que el complemento es capaz de mediar la destruccin ltica de muchas clulas: eritrocitos, plaquetas, bacterias, virus con cubierta de lipoprotenas y linfocitos. Cualquiera de las dos vas del complemento pueden producir dao celularcitoltico. As, pues, el complemento puede considerarse un conjunto de protenas constituyendo un sistema reguladorque interviene bsicamente en la iniciacin y coordinacin de la respuesta humoral y celular de un husped a sustancias extraas invasoras.

cientes con LES a 372 C durante 30-60 minutos; sugiriendo la presencia de anticuerpos contra los componentes nucleares celulares, en el suero de estos pacientes. Este anticuerpo responsable de la formacin de la clula LE, fue designado Factor LE. La investigacin de la reactividad de este factor LE en los diferentes pacientes condujo a la definicin de un grupo muy heterogneo de anticuerpos antinucleares (AAN). Son detectados por la tcnica de inmunofluorescencia indirecta, no es especfica, pero s muy sensible para detectar muchos tipos de estos anticuerpos. Se utilizan substratos de cortes de rganos criopreservados. La tcnica se puede resumir as: el substrato es expuesto al suero problema, el AAN reacciona con alguna estructura subcelular y es detectado con un segundo anticuerpo antiIgG humano marcado con una sustancia fluorescente. De esta manera se puede determinar si la muestra es positiva, el grado de intensidad de la fluorescencia (que est en relacin directa con la cantidad de AAN presente) y el patrn de distribucin de la misma: a) homogneo, en anticuerpos antihistonas; b) perifrico, es la expresin morfolgica de los anticuerpos anti-D NA nativo y anticuerpos antinucleoprotenas solubles; c) moteado refleja la presencia de anticuerpos dirigidos contra constituyentes n ucleares diferentes del DNA como son los antgenos Sm y RNP; (1} nucleolar causado por la tincin homognea de los nucleolos, de los anticuerpos anticentrmero.
112

A nticuerposa ntinuclear es La produccin de anticuerpos antinucleares (AAN) es la caracterstica fundamental de las enfermedades del tejido conectivo. En inmunologa tienen un valor preponderante por su frecuencia y su valor diagnstico. Los primeros descritos fueron los anticuerpos antinucleoprotenas, detectados por la observacin del fenmeno LE en el ao 1948 por Hargraves. Esta clula tan particular es un polimorfonuclear que ha ingerido material nuclear de otros leucocitos destruidos. Este fenmeno se reproduce in vitro, en los laboratorios, incubando la sangre perifrica, sin anticoagulante, de los pa-

Dia~stico

lnmunoll..'.co

en fa Pr,1ica Mdica

De estos patrones morfolgicos desGritos,slo los patrones perifrico, homogneo y moteado son vistos en el LES. Tabla III. Los AAN se clasifican en 4 grandes grupos: 1) anti DNA de doble cadena,

2) anti DNA de cadena nica, 3) anti-histonas (protenas bsicas presentes en el ncleo) y 4) protenas anti-no histonas (protenas acdicas unidas a los cidos nuclicos).

Tabla III lnmunoespecificidad AAN

ss-DNA (una sola cadena) ss-DNA y DNA ds-DNA(nativo) Histonas H1, H2A, H2B, H3, H4

de anticuerpos yenfermedades

antinucleares

(AAN)

l!.'Nf't.'RMl!.'})AJJ LES: casos raros LES: 60-70% LES y otras enfermedades reumticas LES: 60-70% LE drogas: 95% (procainamida) LE drogas otras: 30-90% AR: 30% bajo ttulo LES: 25-40%, anticuerpo marcador EMTC:95-100% LES: 30% S. Sjogren: 60-70% LES: 30-40% Lupus neonatal: 100% S. Sjogren: 50-60% LES: 10-20% Escleroderma: 15-20%, anticuerpo marcador CREST: 70-90%", anticuerpo marcador Escleroderma: 20% AR: 90-95% Polimiositis/Escleroderma: 60-80% Oermatomiositis: 17% Oermatomiositis: 11 % Polimiositis: 31% Polimiositis/Escleroderma: 55%
Esclerodenna Esclerodenna
111

Antgenos no Histonas Sm U1-RNP

SS-A/Ro

SS-B/La Scl- 70 Centrmero RANA (Ac EBV) PM-1

Mi-1 Jo-1 Ku Nucleolar RNAyRNP ONAnucleolar

D;a~stico

lnmunolgico

en la Prctica Mdica

.Los anticuerpos anti-DNA son los ms importantes en el LES. Dos tercios de los pacientes con LES tienen anti D NA circulante. El anti-DNA de doble cadena est presente exclusivamente en el LES (60-70% de los pacientes). Es detectado por inmunofluorescencia indirecta usando un substrato de Crithidia lucillae, la cual tiene un kinetoplasto rico en DNA. Los niveles de anti-DNA en el suero pueden fluctuar con la actividad de la enfermedad. Los pacientes con LES activo tienen altos niveles de anti-DNA circulante y es obvio pensar que poseen complejos inmunes circulantes depositados en el tejido colgeno yen estructuras ricas en colgenos como la membrana basa! glomerular, los cuales tienen gran afinidad por el DNA. Los altos niveles de anti-DNA y los niveles bajos de C3 (consumo por complejos Ag-Ac) predicen la aparicin de la nefritis lpica. Anticuerpos anti histonas, presentes en el 65% de los pacientes con LES. La tcnica de ELISA ha permitido la identificacin de estos anticuerpos; H1, H2A, H2B, H3 y H4. Tambin estn presentes en pacientes con lupus inducido por drogas (hidralazina, procainamida).

frecuencia menor de nefritis y mayorincidencia de enfermedad neurolgica. b) U1-RNP. Este antgeno es una protena conjugada del U 1-RNA. Anticuerpos contra este antgeno estn presentes en el 35% de los casos de LES y en el 95% en la enfermedad mixta del tejido conectivo. c) SS-A/Ro. Anticuerpo presente en 30% de los pacientes con LES y 70% delos pacientes con sndrome de Sjogrens. En LES ha sido asociado a la presencia de nefritis, linfoadenopatas y leucopenias. Tambin a otros procesos autoinmunes: lupus eritematoso subagudo, sndrome de lupus eritematoso neonatal, deficiencia homocigota de C2 y C4 en lupus-Iike, sndrome primario de Sjogrenscon vasculitis, LES MN negativo y LES con neumonitis intersticial. d) SS-B/La. Anticuerpo presente en un tercio de los pacientes con LES y aproximadamente en un 50% de los pacientes con sndrome. de Sjogrens.

Anticuerpos no histonas a) Antgeno Sm. El anticuerpo contra este antgeno est presente en el 30% de los pacientes con LES. El determinante antignico es una protena que se conjuga con uno de los seis diferentes ncleos. RNAs (snRNA). El anticuerpo anti Sm es patognomnico del LES y ha sido incluido como uno de los criterios de diagnstico del LES por la ARA. Se asocia con una
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Cuantificacin

de

innmnoglobulinas Las inmunoglobulinas: IgA, IgG, IgM e IgD se dosifican por Inmunodifusin radial (Mancini). Es el test ms usado para explorar la inmunidad humoral. Las IgE, en general se evalan por dosificacin radioinmunolgica. Tambin es posible pero raramente utilizadas en clnica, dosificar las diferentes sub clases de IgG. La Inmunoelectroforesis permite una apreciacin simultnea semicuantitativa

Diagnstico

Inmunolgico

en la Prctica Mdica

de las 3 principales clases de Inmunoglobulinas {lgG, IgA e IgM). Es una tcnica muy utilizada en todos los laboratorios de inmunodiagnstico para el diagnstico de disproteinemias, caracterizacin de las prote[nas monoclonales y diagnstico de inmunodeficiencias {hipogammaglobulinemia, agammaglobulinemia y disgammaglobulinemia). Hipogammaglobulinemia, si la depresin de las tres inmunoglobulinas es muy severa, asociada a inmunodeficiencias secundarias: discrasias sangu[neas, s[ndromenefrtico, mala absorcin intestinal. La agammaglobulinemia se ve en inmunodeficiencias primarias. Disgammaglobulinemia cuando una o dos clases de inmunoglobulinas estn deprimidas, la ms frecuente es la deficiencia de IgA. Otra forma es una combinacin de una deficiencia de IgG e IgA con IgM elevada {s[ndrome hiperlgM), asociada a una hiperactividad de las clulas supresoras. Deficiencias combinadas de IgG2 e IgA son frecuentes en individuos que sufren infecciones bacterianas a repeticin. Los anticuerpos de la inmunoglobulina A secretora es el mejor mecanismo de defensa de las mucosas de superficie, su deficiencia predispone a infecciones a repeticin de la mucosa.

La purificacin y el anlisis inmunoqumico llev a Brouet a proponer una clasificacin de las crioglobulinas en 3 grupos distintos y cada uno se ha asociado a determinadas enfermedades. .Crioglobulinemia tipo lo monoclonal: Precipitado constituido de una sola inmunoglobulina monoclonal. Lo ms frecuente es que sea IgM, pero puede ser IgG, IgA o protenas Bence-Jones. Suelen encontrarse niveles elevados de ms de 5 gr/dl. .Crioglobulinemiatipo Ilomixtacon componente monoclonal: Precipitado formado por 2 tipos de inmunoglobulinas: unamonoclonalyotra policlonal. La inmunoglobulina monoclonallgM tiene actividad de anticuerpo contra las inmunoglobulinas policlonales. La crioprecipitacin se produce por la formacin de un complejo inmune. Los niveles sricos son altos, pero el componente monoclonal es bajo. .Crioglobulinemia tipo III o mixta policlonal: Presenta ambos componentes del tipo de Inmunoglobulinas policlonales. Las IgM policlonales tienen especificidad AntiIgG y precipitan formando complejos inmunes IgM-IgG. Sus niveles sricos son ms bien bajos, menos de 1 gr/dl. El mecanismo patognico en la tipo I no est esclarecido, la accin del fro desencadena la precipitacin y la consiguiente oclusin vascular en los tejidos expuestos al fro. Para explicar la afectacin de zonas no expuestas y en particularde las vsceras se piensa que intervienen factores como la modificacin de la .microcirculacin de la ultrafiltracin renal,
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Crioglobulinas
Las crioglobulinas son un grupo de protena del suero que a temperaturas inferiores a 37QC precipitan y tienden a redisolverse despus del calentamiento. Fueron detectadas por primera vez por Wintrobe en un paciente con mieloma mltiple, trombosis retiniana y fenmeno de Raynaud. Desde entonces, se han descrito en sinnmero de enfermedades, aunque tambin se pueden detectar en personas sanas.

Diagnstico

Inmunolgico

en la Prctica Mdica

la elevacin de la concentracin protica y el aumento de la viscosidad sangunea. En las crioglobulinemias mixtas (Tipo I y II) se produce una vasculitis por inmunocomplejos, clnicamente demostrables por los niveles disminuidos del complemento srico y por la presencia en las paredes vasculares de complejos inmunes y complemento, demostrada por inmunofluorescencia en material de biopsia. Las personas sanas por lo general no presentan crioglobulinas en suero y su hallazgo evidencia una situacin patolgica, debido bien a un incremento en su produccin por estimulacin benigna o maligna conducida por linfocitos B, o bien a una disminucin en su eliminacin por una gran variedad de lesiones hepticas.

fibringeno, lo mismo en la vasculitis leucocitoclstica.

Anticuerpos antifosfolpidos
Analizaremos brevemente este tema ya que debera ser objeto de un captulo aparte, por su innovacin como mtodo de diagnstico y por su gran utilidad en inmunologa aplicada. Los anticuerpos antifosfolpidos (aPLs), son inmunoglobulinas que fueron inicialmente descritas en el LES, pero tambin se han asociado con trombosis arterial y venosa, trombocitopenia y abortos espontneos. Tres pruebas son usadas en la determinacin de los aPLs: VDRL, anticoagulante lpico (LA) y anticuerpos anticardiolipina (ACA). Una baja sensibilidad del VDRL en pacientes con trombosis relacionada a los aPLs o prdida fetal, reduce su uso como prueba diagnstica. La sensibilidad del LA como productor de trombosis es de 6% y la especificidad de 87%; la sensibilidad de los ACA por el mtodo de ELISA es de 77% con una especificidad de51%. Loveycols en sus estudios sobre ms de 1.000 pacientes, encontraron una frecuencia de 34 % para el anticoagulante lpico y un 44% para el anticuerpo anticardiolipina. Los anticuerpos anticardiolipina se han encontrado asociados con pruebas de antiglobulina humana directa positiva, anemia hemoltica autoinmune, rreutropenia, trombocitopenia y en especial con fenmenos tromboemblicos y enfermedades neurolgicas. Del estudio de los efectos fisiopatolgicos de los aPLs se revelan algunos mecanismos potencialmente trombticos: disfuncin endotelial aumentando lacoagulacin, anormalidades de Prostaciclina (PGI2), Antitrombina III, protena
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Test de fa banda lpica Est caracterizada por depsitos de inmunoglobulinas (lgG e IgM) y fracciones del complemento (C3) en la unin dermoepidrmica, en piel lesionada y en piel sana de pacientes con LES sobre todo cuando hay actividad de la enfermedad. Se ha estudiado el valor predictivo de diagnstico de estos depsitos, encontrndose C4 positivo en 100% de los casos, Properdina 91,3%, IgA 86,2% e IgM 59%. Pacientes con pnfigo tienen depsitos de anti IgG y C3 en las reas interceIulares de la epidermis, pnfigo vulgaris, pnfigo bulloso, pnfigo vegetans y pnfigo foliceo. En el pnfigo eritematoso se encuentran depsitos de IgG y complemento en la unin dermoepidrmica. En la dermatitis herpetiforme IgA y C3. En el eritema multiforme depsitos en la superficie de los vasos de IgG, IgM, C3,

Diagnstico

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anticoagulante placentaria, protena S y activacin del complemento. En algunos pacientes la trombosispuedeocurrirpor la combinacin de estas anormalidades, o por la presencia de otras perturbaciones no inmunes del sistema de coagulacin. La asociacin de estos anticuerpos y la trombosis fue primeramente descrita en el LES, ms tarde, en lesiones parecidas al Lupus (Lupus like), lupus inducido por drogas, otras colagenosis como el sndrome de Sjogrens, prdidas fetales recurrentes, trombosis arterial y venosa y posteriormente con enfermedades no lpicas: cardiopatas valvulares, enfermedades infecciosas agudas. Enfermedades dermatolgicas como: Livedo reticularis, sndrome de Sneddon, vasculitis inflamatoria primaria, lceras de piel recurrentes. Ms recientemente en Lupus discoideo y Lupus cutneo subagudo (Ro positivo). Estos anticuerpos aPLs se determinan en el laboratorio a travs de dos pruebas. Una, detecta la inmunoglobulinas (lgG e IgM) que reaccionan contra fosfolpidos aninicos, Cardiolipina, por medio del ensayo de ELISA de fase slida. La otra, determina la presencia del anticoagulante lpico porla capacidad de ste de prolongar las pruebas de coagulacin dependientes de fosfolpidos.

Antena amplificadora o circuito de amplificacin: Va alterna de activacin del complemento, que acta como circuito de retroalimentacin positiva cuando se desdobla C3 en presencia de una superficie activadora. CI-C9: Componentes de las vas clsica y ltica del complemento responsables de medir las reacciones inflamatorias, la opsonizacin de las partculas y la lisis de las membranas celulares. Complejo Inmune: Complejo antgeno-anticuerpo, que puede contener tambin componentes del sistema del complemento. Complemento: Grupo de protenas s ricas que intervienen en el control de la inflamacin, en la activacin de los fagocitos y en el ataque ltico sobre las membranas celulares. El sistema puede activarse por interaccin con el sistema inmunitario. dsDNA: DNA bicatenario.

Humoral: Relativo o perteneciente a los lquidos extracelulares incluyendo el suero y la linfa. InnmnoJluorescencia: Tcnica usada para identificar microscpicamente antgenos en tejidos o clulas mediante la reaccin con anticuerpos conjugados con fluorocromos. Monoclonal: Derivado de un solo

Glosario Anticuerpo: Molcula producida por los animales en respuesta al antgeno; tiene la propiedad de combinarse especficamente con el antgeno que indujo su formacin. la

clon: por ejemplo, los anticuerpos monoclonales que son producidos por un solo clon y tienen carcter homogneo.

Antgeno: Molculaqueinduce formacin de anticuerpos.

Opsonizacin: Proceso porelque se facilita la fagocitosis mediante de117 .

Diagnstico

lnmunolgico

en 10 Prctica Mdica

psito de opsoninas (ejemplo: anticuerpos y C3b) sobre el antgeno. Policlonal: Trmino que califica los productos de diferentes tipos de clulas. Sistema Reticuloendotelial (SRE): Sistema disperso de clulas fagocitarias, derivadas de las clulas primordiales de la mdula sea asociadas a la trama de tejido conjuntivo en el hgado, bazo, ganglios linfticos y otras cavidades serosas. LES (lupus eritematoso sistmico): Enfermedad autoinmune del ser humano, en la que habitualmente intervienen anticuerpos antinucleares. Va alterna: Va de activacin del sistema del complemento en las que intervienen C3 y los factores B, O, P, H e I, que interactan en la vecindad de una superficie activadora para constituir una va alterna C3 convertasa. Va clti\'ica: Va por la cual los

complejos antgeno-anticuerpo pueden activar el sistema del complemento; comprenden los componentes C1, C2 y C4, y genera una convertasa C3 de la va clsica.

1 IR

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Inmunolgico

en la Prctica Mdica

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