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Les mthodes de biologie cellulaire et molculaire

Les mthodes dobservation

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1. Concernant les constituants du microscope photonique : A. La lentille la plus proche de l'objet est lobjectif. B. Le condenseur permet de concentrer la lumire sur l'objet. C. Lobjectif permet un grossissement supplmentaire de limage projete par loculaire. D. Lobjectif peut tre remplac par une camra vido dans le cas de la vidomicroscopie. E. Le microscope photonique possde le plus souvent un objectif unique. 2. Concernant le pouvoir de rsolution dun microscope : A. Il augmente linairement avec le grossissement. B. Cest un paramtre fixe indpendant du type de microscope. C. Le pouvoir de rsolution du microscope optique est diffrent de celui du microscope lectronique. D. Le pouvoir de rsolution du microscope lectronique balayage est diffrent de celui du microscope lectronique transmission. E. Le pouvoir de rsolution du microscope lectronique balayage est meilleur que celui du microscope lectronique transmission. 3. La limite de rsolution dun microscope optique : A. Est la distance laquelle deux objets spars peuvent tre clairement distingus. B. Dpend de la longueur donde de la lumire visible. C. Dpend de louverture numrique du systme de lentille utilis. D. Dpend de langle du faisceau dlectrons par rapport lobjet. E. Est gale au produit des grossissements des lentilles objectif et oculaire. 4. Le microscope optique permet gnralement de discerner clairement la forme des : A. Cellules animales et vgtales. B. Mitochondries et chloroplastes. C. Bactries et noyaux des eucaryotes. D. Virus et ribosomes. E. Atomes et molcules.

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5. Le microscope contraste de phase : A. Est un microscope optique. B. Est un microscope lectronique. C. Permet lobservation de cellules vivantes. D. Permet de rgler les problmes de dcalage de phase de la lumire, lis la structure des cellules vivantes observes. E. Permet dapprcier les mouvements cytoplasmiques lors de la migration cellulaire. 6. Quel est le chemin optique dans le microscope photonique ? Rpondre en indiquant lordre exact : a. b. c. d. e. Lentille oculaire. Lentille du condenseur. Lentille objectif. Echantillon. Source lumineuse.

Rpondre par : A. d e b c a. B. e d b c a. C. e b d c a. D. e b d a c. E. d e c b a. 7. Lors de la prparation dchantillons pour la microscopie photonique, ltape de fixation : A. Utilise souvent des aldhydes comme le formaldhyde et le glutaraldhyde. B. Rend les cellules permables aux colorants. C. Runit transversalement les protines par lutilisation du formaldhyde. D. Peut se faire par conglation. E. Est ralise aprs ltalement des coupes sur lames porte-objet. 8. Lors de la prparation dchantillons pour la microscopie photonique, le bain de paraffine : A. Permet la fixation de lchantillon. B. Permet linclusion de lchantillon. C. Est prcd dune tape dhydratation de lchantillon. D. Est prcd dune tape de dshydratation de lchantillon. E. Est ralis aprs ltape de coloration afin de permettre limprgnation du colorant. 9. Lors de la prparation dchantillons pour la microscopie photonique, ltape dinclusion de lchantillon : A. Utilise de la paraffine chaude qui polymrise froid pour former un bloc.

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B. Facilite la microtomisation. C. Implique une hydratation pralable de lchantillon. D. Implique la dshydratation pralable de lchantillon. E. Ncessite un passage de lchantillon dans un bain de tolune. 10. Lors de la prparation des coupes pour la microscopie photonique, la microtomisation permet dobtenir des rubans de coupes incluses dans la paraffine. Les rubans de coupes sont alors tals sur une lame de verre. Quelle est ltape suivante ? A. Bain deau distille. B. Bain dalcool degrs croissant. C. Bain dalcool degrs dcroissant. D. Coloration. E. Bain de tolune. 11. Lors de la prparation des coupes pour la microscopie photonique, la microtomisation permet dobtenir des rubans de coupes incluses dans la paraffine. Les rubans de coupes sont alors tals sur une lame de verre. Donner lordre exact des tapes qui suivent ltalement des rubans de coupes sur la lame de verre. a. Bain deau distille. b. Montage lamelle sur lame. c. Bain dalcool degrs dcroissant. d. Coloration. e. Bain de tolune. Rpondre par : A. e d b c a. B. c e a d b. C. e c a d b. D. c a e d b. E. e a c d b. 12. Le microscope fluorescence est bas sur : A. La dviation dun flux de particules charges, les lectrons. B. La dviation dun flux de particules non charges, les photons. C. La dtection des lectrons mis par lchantillon observ. D. Lutilisation de molcules qui absorbent la lumire une certaine longueur donde et mettent de la lumire une longueur donde plus faible. E. Lutilisation de molcules qui absorbent la lumire une certaine longueur donde et mettent de la lumire une longueur donde plus leve. 13. Contrairement au microscope photonique classique, le microscope fluorescence possde : A. Une lampe blanche classique et une lampe fluorescence. B. Un systme qui filtre la lumire avant quelle natteigne lchantillon.

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C. Un systme qui filtre la lumire qui provient de lchantillon. D. Un miroir dichroque qui rflchit la lumire issue de la source lumineuse vers lchantillon. E. Des lentilles lectromagntiques. 14. En microscopie fluorescence, lutilisation : A. De la fluorescine permet de dtecter une fluorescence verte spcifique des protines mitochondriales de la chane respiratoire. B. Du colorant fluorescent G.F.P permet dobserver une fluorescence verte. C. Du colorant fluorescent D.A.P.I permet de colorer spcifiquement lADN. D. Dun mme jeu de filtres permet de visualiser simultanment la fluorescence de plusieurs fluorochromes et donc dapprcier la distribution de diffrentes molcules dans la cellule. E. Danticorps coupls la rhodamine permet de dtecter spcifiquement des molcules dans la cellule. 15. Lors de lobservation au microscope fluorescence avec utilisation de la fluorescine : A. Le filtre dexcitation laisse passer uniquement la lumire de longueur donde comprise entre 450 nm et 490 nm. B. Le filtre dexcitation laisse passer uniquement la lumire de longueur donde comprise entre 500 nm et 540 nm. C. Le filtre dmission laisse passer la lumire de longueur donde comprise entre 650 nm et 690 nm. D. Le filtre dmission laisse passer la lumire de longueur donde comprise entre 520 nm et 560 nm. E. Le miroir rflchit la lumire de longueur donde comprise entre 520 nm et 560 nm. 16. Vous utilisez la technique dimmunocytochimie indirecte afin de dtecter au microscope fluorescence des complexes antigne-anticorps. Le marqueur utilis est : A. Une enzyme, la proxydase de raifort. B. Lor collodal. C. Un fluorochrome. D. Coupl un anticorps primaire qui est dirig contre lantigne. E. Coupl un anticorps secondaire qui est dirig contre lanticorps primaire. 17. Concernant le microscope confocal fluorescence : A. Cest un microscope lectronique particulier qui permet lobservation dun focal unique de lchantillon. B. Limage est forme partir des lectrons mis par lchantillon. C. Il permet la production de coupes optiques en liminant la lumire hors focale. D. La source lumineuse est fournie par une lampe de tungstne.

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E. La source lumineuse est fournie par un laser. 18. Le microscope lectronique balayage : A. Permet dexplorer la surface dun chantillon. B. Utilise un faisceau dlectrons fin qui balaie point par point la surface de lchantillon. C. Utilise les lectrons qui sont mis partir de la surface de lchantillon. D. A une limite de rsolution de 2 ;m. E. A une limite de rsolution de 2 nm. 19. Par rapport au microscope lectronique transmission, le microscope lectronique balayage : A. Fournit une profondeur de champ infrieure. B. Fournit une profondeur de champ suprieure. C. A une limite de rsolution meilleure. D. A un grossissement maximal infrieur. E. A un grossissement maximal suprieur. 20. Le microscope lectronique transmission : A. La tension maximale dacclration des lectrons est de 20 keV. B. La limite de rsolution est de 20 nm. C. Le grossissement maximal est de 10 000. D. La source dlectrons est situe au sommet dune colonne cylindrique haute. E. Lair situ dans la colonne augmente lacclration des lectrons. 21. Le microscope lectronique transmission (T.E.M) : A. La source dlectrons est une cathode de tungstne chauffe lectriquement. B. La tension dacclration entre cathode et anode est de 50 100 volts. C. La colonne du microscope doit tre sous vide. D. Des lentilles de verre focalisent les lectrons sur lchantillon. E. Lchantillon nest jamais travers par les lectrons. 22. Prparation des chantillons pour la microscopie lectronique transmission : A. Ltape de fixation utilise le glutaraldhyde. B. Ltape de fixation utilise le ttroxyde dosmium. C. Lchantillon correctement dshydrat est inclus dans une rsine. D. Le bloc de rsine contenant lchantillon doit tre coup laide dune lame fine en sections de 5 10 ;m. E. Les coupes fines obtenues sont rcupres sur une grille de cuivre circulaire. 23. Vous incubez des coupes de tissu avec un anticorps primaire spcifique puis avec un anticorps secondaire fix une particule dor collodal. Lobservation des complexes anticorps-antigne : A. Repose sur la technique dimmunocytochimie directe.

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B. Repose sur la technique dimmunocytochimie indirecte. C. Ncessite lutilisation dun microscope fluorescence. D. Ncessite lutilisation dun microscope lectronique balayage. E. Ncessite lutilisation dun microscope lectronique transmission. 24. Lombrage mtallique : A. Le mtal lourd est vaporis perpendiculairement la surface de lchantillon. B. Le mtal lourd est vaporis obliquement la surface de lchantillon. C. Un film de carbone doit tre vapor avant le mtal lourd. D. Permet dapprcier les caractristiques de surface dun chantillon. E. Est suivit de la formation dune rplique carbone-mtal pour les chantillons pais. 25. Pour prparer une rplique par ombrage mtallique dune surface dchantillon, plusieurs tapes sont ncessaires. Classer les tapes suivantes : a. b. c. d. Rplique place sur une grille de cuivre. Film de carbone vapor la surface de lchantillon. Utilisation dun solvant puissant (soude par exemple). Mtal lourd vaporis la surface de lchantillon.

Rpondre par : A. d c b a. B. b d c a. C. d b c a. D. c b d a. E. a d b c. 26. A propos de la microscopie lectronique aprs cryofracture : A. Elle permet dobserver lintrieur des membranes cellulaires. B. La prparation de lchantillon utilise la technique de lombrage mtallique. C. Un cryodcapage doit prcder la cryofracture. D. Elle permet dapprcier la distribution des protines membranaires. E. Elle donne un meilleur relief des surfaces dchantillon que la microscopie lectronique balayage. 27. Classer les tapes suivantes qui concernent la prparation dun chantillon pour la microscopie lectronique par cryodcapage : a. Conglation de lchantillon. b. Sublimation de la glace. c. Mtal lourd vapor obliquement. d. Echantillon soumis une lame de couteau.

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Rpondre par : A. a c d b. B. a d c b. C. a b d c. D. a b c d. E. a d b c. 28. La coloration ngative : A. Est particulirement utilise pour observer les virus, les ribosomes, les protines filamenteuses. B. Les structures observes apparaissent sombres sur fond clair. C. Les structures observes apparaissent claires sur fond sombre. D. Les structures observes arrtent les lectrons qui sont rflchis vers un cran fluorescent. E. Les structures observes sont traverses par les lectrons. 29. Des macromolcules sont prpares pour une coloration ngative. Classer les tapes suivantes de la technique de coloration utilise : a. Pulvrisation de la suspension de macromolcules sur une grille recouverte dun film fin de carbone. b. Pulvrisation dactate duranyl sur les macromolcules. c. Schage permettant dentraner le mtal lourd entre les macromolcules. d. Schage de la suspension de macromolcules en vaporant leau. Rpondre par : A. b a c d. B. b c a d. C. a b d c. D. a b c d. E. a d b c. 30. Un chantillon est fix dans un mlange glutaraldhyde-ttroxyde dosmium (Tx-Os) puis prpar par coloration positive : A. Le Tx-Os ragit avec les fonctions NH2 des protines membranaires. B. Le Tx-Os ragit avec les fonctions insatures des lipides membranaires. C. En plus de la fixation, le Tx-Os agit galement comme un agent colorant. D. Les membranes apparaissent claires lobservation. E. Les membranes apparaissent sombres lobservation. 31. Pour la coloration positive : A. Lchantillon est pulvris sur une grille recouverte dun film fin de carbone. B. Lchantillon dpos sur une grille flotte dans une solution de mtal lourd. C. La pulvrisation dactate duranyl se poursuit par un schage permettant dentraner le mtal entre les molcules de lchantillon.

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D. Les structures observes apparaissent sombres sur fond clair. E. Les structures observes apparaissent claires sur fond sombre. 32. Laequorine est : A. Comme la rhodamine et la fluorescine, un fluorochrome non spcifique utilis en microscopie fluorescence. B. Comme la GFP, utilise pour tudier lexpression gnique. C. Comme la GFP, extraite dune mduse. D. Une protine luminescente. E. Une protine fluorescente. 33. Laequorine est une protine : A. Luminescente qui dtecte la variation de concentration de chlore dans une cellule. B. Luminescente qui dtecte la variation de concentration des cations (Ca++, Na+, K+, H+) intracellulaires. C. Fluorescente dont la fluorescence est fonction de la concentration calcique. D. Luminescente qui permet de dterminer la concentration calcique intracellulaire. E. Luminescente qui met une lumire lorsque la concentration calcique intracellulaire augmente. 34. Les indicateurs fluorescents utiliss pour dtecter les variations de concentration ionique intracellulaire : A. Permettent dapprcier la variation de concentration ionique. B. Permettent de mesurer la concentration intracellulaire dun ion. C. Ne sont pas spcifiques. D. Sont spcifiques. E. Sont reprsents par laequorine, le quin 2, le fura 2 par exemple. 35. Dans la technique de pulse-chase (pousse-chasse), le pulse : A. Consiste incuber une prparation en prsence dune molcule radioactive. B. Consiste incuber une prparation en prsence dune molcule non radioactive. C. Est continue durant toute lexprience. D. Est ralis pendant une priode trs courte. E. Est suivi dune autoradiographie pour localiser les molcules radioactives. 36. La technique de pulse-chase (pousse-chasse) : A. Peut tre utilise pour suivre la destine dune protine dans la cellule. B. Peut tre utilise pour suivre lARN aprs sa synthse chez les eucaryotes. C. Dbute par une autoradiographie. D. Utilise des isotopes radioactifs de diffrents lments. E. Doit tre associe lautoradiographie pour localiser les molcules.