biofilm

BIOFILM ::Un enemigo poco evidente::

OBJETIVO GENERAL Conocer el Biofilm, su composicin, accin y formas de eliminacin en el mbito quirrgico OBJETIVOS ESPECFICOS
>>Informar acerca de la estructura del Biofilm y la existencia del mismo en el material quirrgico. >>Conocer la biodiversidad de microorganismos presentes en el Biofilm y sus formas de Comunicacin. >>Comparar la accin de los distintos agentes germicidas y su capacidad de eliminacin del Biofilm.

DEFINICIN DE BIOFILM >>Comunidad estructurada de microorganismos Inmovilizados >>Adheridos a una superficie inerte o viva >>Encapsulados en una matriz polimrica orgnica de origen bacteriano >>Forma de crecimiento protegida de los mico-organismos en un medio hostil.

ESTRUCTURA :::1/3 microcolonias de bacterias adheridas a una superficie :::2/3 lminas de microorganismos muertos entre los cuales transcurren canales

>

>

nutrientes

desechos

Microscopio ptico

Microscopio Electrnico

Muestra bacterias habitando por un largo perodo de tiempo

Colonias de bacterias vivas cohabitando con otras muertas

Microscopio lser de escner o confocal

ruc
Presenta una imagen en lminas donde se denota su composicin.

est

tura

biofilm

FUNCIONAMIENTO DEL BIOFILM

>>Determinado por el sistema sensible a Qurum >>El sistema sensible a qurum es una forma de comunicacin de clulas bacterianas >>Puede no solamente estimular la respuesta inmune del husped, sino tambin evadirlo >>Basado en la liberacin constante de autoinductores (AI) AUTO INDUCTORES

::Seales qumicas generadas por las bacterias ::Permiten coordinar actividades simbiticas o patognicas con el husped ::Determinan la densidad poblacional, formacin de Biofilm bacterianos, etc ::Proteccin a las bacterias contra agentes ambientales adversos ::Los niveles de AI estarn determinados por la densidad poblacional bacteriana ::Si existen pocas bacterias los niveles de AI permanecen indetectables ::Si crece el nmero bacteriano la cantidad de AI aumenta ::La protena R consta de dos dominios: ::Uno N terminal que interacta con el AI ::Otro C terminal involucrado en la interaccin con el ADN bacteriano

AI

ADN

auto inductor

protena R

ncleo bacteriano

ETAPAS DE FORMACIN DEL BIOFILM Condiciones del medio >>Independiente Del medio de suspensin (lquido o gaseoso) De la naturaleza del soporte (superficies inanimadas y vivas como tejidos animales o vegetales) >>Generalmente superficies hmedas inertes >>Le debe aportar cierto nmero de ventajas, especialmente nutricionales Adhesin bacteriana

>>Efectiva si los microorganismos proceden de lugares cercanos a la superficie receptora >>Transporte microbiano ::Sedimentacin ::Movimiento browniano ::Movimiento autnomo ::Turbulencia del fluido ambiental >>Una vez adheridos a la superficie la colonizan en tres etapas>>> Co-agregacin celular Multiplicacin microbiana

I. Electrostticas I. Electro dinmicas I. Fsico-qumicas no especficas

Etapa irreversible

FIJACIN
Elaboracin glucocalix
Red fibrosa polimerizada de exopolisacridos Resinas de intercambio inicoregulan la fagocitosis, nutricin y resistencia antimicrobiana

COLONIZACIN
Acumulacin a largo tiempo
De compuestos orgnicos

ADSORCIN
Corta Reversible Fenmeno de atraccin-repulsin

De exopolisacridos

biofilm

Lecho mucoso que sirve de reservorio alimenticio

ormacio

biofilm

biofil

biofilm

:::BIOFILM MADURO::: >>Otras bacterias se pueden adherir

>>Protegiendo a los microorganismos de las capas profundas de las agresiones del medio exterior

>>Estos microorganismos se encuentran en economa de privacin

>>Lo que les confiere una mayor resistencia al calor, los desinfectantes y los antibiticos

bo

Agua dura sustancias orgnicas minerales Superficies acondicionadas absorcin molecular Alcohol residuos protenas, etc.

biofilm
biofilm
Contaminacin Bacterias Oxidacin

<<<ACCIN PATOGNICA DEL BIOFILM>>> :::Las infecciones bacterianas involucradas con el Biofilm rara vez son resueltas por los mecanismos de defensa del husped :::Las bacterias organizadas bajo la estructura del Biofilm son, 500 veces ms resistentes a los antibiticos :::Muchas infecciones bacterianas persistentes o crnicas pueden ser explicadas por la presencia del Biofilm (peritonitis, neumonas, infecciones msculo-esquelticas, otitis media, osteomielitis) :::Gran variedad de enfermedades nosocomiales pueden ser generadas por suturas, catteres, prtesis colonizadas con Biofilm

<<<TEORA DE LA BAJA SUSCEPTIBILIDAD DEL BIOFILM A LOS ANTIBITICOS>>> >Pobre difusin de los antibiticos >Heterogeneidad bacteriana >Mecanismos reducidos de susceptibilidad conferidos por fenotipos adoptados

<<<TIPOS DE BIOFILM>>>
EN EL MEDIO HODPITALARIO SE DISTINGUEN DOS TIPOS DE BIOFILM

>Superficies del mobiliario, paredes, piso, etc. >Materiales de uso mdico parcial o totalmente implantable

<<<VAS DE COLONIZACIN>>> >Inoculacin directa del microorganismo >Contigidad desde una infeccin vecina >Siembra hematgena
La composicin del material juega un rol importante sobre la reaccin del tejido circundante

El proceso de integracin tisular y la adherencia bacteriana son fisiolgicamente paralelos, competitivos y mutuamente excluyentes

<<<PROPIEDADES DEL MATERIAL IDEAL MBITO MDICO-QUIRRGICO>>>

resistente imputrescible

impermeable liso

uniforme fcilmente lavable

elevada resistencia a las agresiones mecnicas y qumicas

<<<BIOFILM VERSUS DETERGENTES Y/O DESINFECTANTES>>>

::Antigedad del Biofilm ::Presencia de residuos orgnicos ::Interactan con los principios activos disminuyendo su eficacia ::Limpieza y mantenimiento defectuoso ::Procedimiento de encerado o metalizacin

La utilizacin regular de detergentes y/o desinfectantes permite asociar la limpieza y la desinfeccin, sin embargo, la eficacia de dichos productos aun no est normatizada.

Para eliminar un Biofilm maduro es necesario romper su matriz orgnica protectora con la utilizacin de Complejos Limpiadores eficaces sobre los polisacridos.

:::SELECCIN Y USO DE DESINFECTANTES::: En la desinfeccin se eliminan la mayora de los microorganismos presentes en los objetos inanimados, a excepcin de las formas esporuladas bacterianas, mediante el uso de sustancias qumicas.

desi nfec cion

La desinfeccin se puede realizar en tres niveles Desinfeccin de bajo nivel Desinfeccin de mediano nivel Desinfeccin de alto nivel :::FACTORES QUE AFECTAN SU ACCIN::: >>Limpieza previa del objeto >>Presencia de sustancia orgnica >>Tipo y nivel de contaminacin microbiana >>Concentracin del agente >>Tiempo de exposicin con el agente >>Naturaleza del objeto >>Temperatura y ph del proceso de desinfeccin

biofilm

:::CARACTERSTICAS DE UN DESINFECTANTE IDEAL::: >>Amplio espectro anti-microbiano >>Rapidez de accin >>Estable ante variabilidad de factores ambientales >>Activo en presencia de materia orgnica >>Soluble en agua >>Estabilidad de la dilucin inicial y en uso >>Compatible con jabones y detergentes >>Compatible con superficies tratadas >>Inoloro, no txico ni irritante para el usuario >>Fcil de usar >>Econmico

:::TABLA COMPARATIVA DE LOS DISTINTOS DESINFECTANTES DE ALTO NIVEL :::

Caractersticas

H.P. ( 7.5%)

P.A. (0.2%) Glut. (>2.0 ) No Aplicable 30 min. a 50C No Uso nico 6 meses ninguna regular no Dao ocular y cutneo grave Automtico Si 20-90 min. a 20 - 25C 10 hs. a 2025C Si 14 a 30 das 2 aos local excelente Si (1.5% >) Dao Respiratorio Manual o Automtico Si

P.A./H.P.(0.08%/1%)

OPA (0.55%) 10 min. A 20C 10 Hs. a 25C No 14 Das 2 aos Local excelente Si (0.3% OPA) Irritante Ocular, manchas cutneas Manual o Automtico Si

HDL Declaracin 30 min. a 20C Esterilizacin Activacin Vida de Reuso Estabilidad Restriccin de Eliminacin Compatibilidad con Materiales Monitoreo MEC 6 hs. a 20C No 21 Das 2 aos ninguna buena Si 6 % Dao ocular serio Manual o Automtico S

25 min a 20C 8hs. A 20C No 14 Das 2 aos ninguna Regular Si 500 ppm PA

Seguridad

Dao Ocular Manual o Automtico Si

Procesamiento Resistencia a Materia Orgnica

Ref: W. A Rutala. Cap 77 C. Glen Mayhall

>>>CUALIDADES PERXIDO DE HIDRGENO<<<

MECANISMO DE ACCIN

Produccin de radicales libres OH

Lpidos de membrana

El ADN

Componentes celulares

ventajas
>>No tiene olor >>No necesita activacin >>No produce irritacin >>Inactiva el Cryptodporidium >>No tiene requisitos de eliminacin >>Numerosas publicaciones de su uso >>Compatible con metales, plsticos y elastmeros >>No coagula la sangre ni fija tejidos a superficies >>Problemas de compatibilidad con lata, zinc, cobre y platino de niquel - plata >>Dao ocular serio si existe contacto directo

desventajas

::::COMO DESTRUMOS EL BIOFILM:::: Mtodos de esterilizacin actualmente utilizados Calor seco / Esterilizantes lquidos o gaseosos / xido de etileno Calor hmedo / Radiaciones ionizantes / Plasma lquido

NO SON CAPACES DE REMOVER LA CAPA DE EXOPOLISACARIDOS DEL BIOFILM

Ref: Dc. C. Guy Rioufol Universidad Claude Bernard - Lyon1-1997

>>Requiere un producto que acte durante el proceso de limpieza removiendo dicha placa y que a su vez sea capaz de eliminar los micro-organismos all existentes

El problema actual

REMOVER EL FILM

Productos detergentes, enzimticos

Nuevo producto PS32/32

Desinfectante de alto nivel agente esterilizante

<<<FORMULACIN DEL PS 32/32>>>

>Perxido de hidrgeno al 10% estabilizado con tensoactivos >Triclosan al 0.5% >Secuestrantes (SR) >Desengrasantes >Aromatizantes y colorantes
Calcreos Materia orgnica

ESTUDIO DE ACTIVIDAD BACTERICIDA

:::Clnica y Laboratorio Sauce :::Estudio de actividad In Vitro :::Tcnica AOAC :::Dilucin de PS 32/32 al 2% :::Microorganismos nosocomiales en presencia y ausencia de materia orgnica

Los microorganismos estudiados fueron

Gram Negativos Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Serratia marsescens Enerobacter sp Pseudomona aeruginasa Morganella morganii

Gram Positivos Staphylococcus aureus (sensible a meticilina, SAMAS) Staphylococcus aureus (meticilino resistente, SAMAR) Staphylococcus coagulasa negativo

ausencia
Resultados en ausencia de materia orgnica

Microorganismos SAMAS SAMAR Staphylococcus coagulasa Neg. Escherichia Coli Klebsiella pneumoniae Enterobacter sp Morganella Morganii Serratia marsenscens Pseudomona aeruginosa

5 min 10 min. 20 min. 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 14 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC

40 min. 60 min. 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC

presencia
Resultados en presencia de materia orgnica

Microorganismos SAMAS SAMAR Staphylococcus coagulasa Neg. Escherichia Coli Klebsiella pneumoniae Enterobacter sp Morganella Morganii Serratia marsenscens Pseudomona aeruginosa

5 min 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC

10 min. 20 min. 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC

40 min. 60 min. 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC

104 UFC 104 UFC 5 UFC 0 UFC 0 UFC 104 UFC 103 UFC 102 UFC 0 UFC 0 UFC 105 UFC 102 UFC 0 UFC 0 UFC 0 UFC 104 UFC 103 UFC 102 UFC 0 UFC 0 UFC 102 UFC 20 UFC 10 UFC 0 UFC 0 UFC

::::RESULTADOS DEL ESTUDIO DE ACTIVIDAD BACTERICIDA PS 32/32::::

>Tiene una muy buena actividad frente a grmenes Gram positivos aun en presencia de materia orgnica.

>En grmenes Gram negativos mostr buena actividad logrando una erradicacin temprana en ausencia de materia orgnica y una disminucin progresiva del inculo frente a materia orgnica logrando la erradicacin entre los 20 y 40 minutos
-C.L. Sauce-

GRANDES CONCEPTOS

>>>El Biofilm est presente en muchas de las infecciones bacterianas nosocomiales >>>La formacin de Biofilm aumenta los riesgos de corrosin de materiales metlicos >>>Es imposible Esterilizar en presencia de Biofilm >>>Los procesos de Limpieza y Desinfeccin son la clave para Remover el Biofilm

con cep tos

grandes

conclusiones
CONCLUSIONES >>>Conocimos una nueva forma de resistencia bacteriana la cual provoca daos en el instrumental quirrgico, coloniza distintos materiales presentes el ambiente quirrgico, que de no eliminarse adecuadamente puede actuar en demrito de la salud del paciente. >>>Como personal de block quirrgicos debemos conocer la compleja estructura y accin de Biofilm al igual que sus formas de resistencia, con el propsito de optar por un adecuado y efectivo proceso de eliminacin, teniendo en cuenta la relacin costo/beneficio. >>>Las distintas formas de procesamiento del instrumental quirrgico, aprendidas durante nuestras experiencias formativas y desempeo profesional, sumado esto a una amplia revisin bibliogrfica, nos da las herramientas para optar por el producto que rene las condiciones para un mejor tratamiento de limpieza y desinfeccin. >>>Actualmente el PS32/32 es el producto que cumple con todas o la mayora de las caractersticas de un desinfectante ideal, eliminando en dichos procesos el Biofilm para una posterior esterilizacin.

BIOFILM / UN ENEMIGO POCO EVIDENTE Rocha - Uruguay