DE LA MEIOSIS AL BLASTOCISTO

Araceli Lantigua Cruz

La meiosis es un tipo especial de divisin celular propia de las clulas germinales. Con esta divisin celular se generan los gametos que son clulas altamente especializadas a partir de cuya unin comienza el desarrollo de una nueva vida. Es incalculable el nmero de procesos moleculares que ocurren en este fenmeno tan especial de la vida. Durante el mismo pueden ocurrir muchos errores, algunos de los cuales se expresan por fallas en la fecundacin, abortos espontneos, defectos congnitos incompatibles con la vida y que pueden identificarse como fenmenos de seleccin natural y que escapan de los mecanismos genticos de reparacin de los mltiples errores que en este delicado proceso deben ocurrir. Pero tambin la meiosis es un proceso biolgico a partir del cual se garantiza una gran variabilidad de cualidades en los mltiples caracteres que son generados por el genoma de las especies de reproduccin sexual y que junto a las mutaciones, nos permiten identificar y diferenciar a los individuos inter especies en los que por supuesto est incluido el Humano. Este Captulo est dirigido a enfatizar en los mecanismos biolgicos comunes que tienen lugar en la meiosis en el proceso de obtencin de gametos y en las particularidades que presenta la gametognesis del hombre y de la mujer y cuyas caractersticas explican un grupo de defectos de origen gentico. Tambin se tratarn los procesos biolgicos que median entre la fecundacin y la formacin del blastocisto, necesarios para la comprensin de fenmenos involucrados en la etiologa de enfermedades o defectos congnitos que sern abordados en el presente texto.

LA MEIOSIS
En esta divisin celular, las clulas diploides de la lnea germinal dan lugar a clulas denominadas gametos, que se caracterizan por tener un nmero haploide de cromosomas. Cmo se originan esas clulas de la lnea germinal? 42

Durante la formacin del embrin en la segunda semana de desarrollo y procedentes del ectodermo primario, las clulas germinales migran hacia la pared del saco vitelino recibiendo el nombre en esta etapa de clulas germinales primordiales. Esta lnea celular (lnea germinal) permanece protegida en este sitio hasta la cuarta o sexta semana en que migran hacia la pared posterior del embrin, donde continan multiplicndose por mitosis sucesivas y forman las crestas genitales que representan las gnadas primitivas. Estas gnadas primitivas se desarrollan en ovarios o testculos en dependencia de la presencia de los cromosomas X (XX) o de un cromosoma X y un Y (XY) ( ver Captulo 9). Cada clula germinal humana que dar inicio a la meiosis presenta un nmero diploide de 46 cromosomas equivalentes a 23 pares. En este proceso de divisin celular deben ocurrir una serie de eventos que permitan concluir la misma con un contenido haploide de 23 cromosomas en cada clula o gameto. La meiosis consta entonces de dos divisiones consecutivas denominadas MEIOSIS I y MEIOSIS II cada una de ellas transcurre como un proceso continuo que para su mejor comprensin se ha dividido, como en la mitosis en PROFASE, METAFASE, ANAFASE Y TELOFASE (Figuras 4.1 y 4.2). La meiosis I . Comienza despus que la clula germinal ha llegado a la fase G2 de su ciclo luego de la sntesis del ADN. Esto significa que cada molcula cromosmica de ADN est doble y unida por el centrmero. En este momento del inicio de la meiosis la informacin gentica en el ncleo celular es igual a 4n. La figura 4.1 permite comprender mejor la explicacin. La profase de la meiosis I es uno de los eventos ms importantes de la meiosis como aparece en el Captulo 3 el acpite sobre reordenamiento de la informacin gentica. Durante esta fase los cromosomas sufren un proceso de condensacin progresiva y se describen cinco subfases denominadas leptoteno, cigoteno, paquiteno, diploteno y diacinesis. Como en cada una de ellas ocurren fenmenos de importancia gentica es necesaria la descripcin de los elementos ms significativos. Leptoteno. Es el inicio de la profase I, lo ms significativo en ella es el comienzo de la condensacin de los cromosomas que permiten la observacin de zonas ms gruesas del ADN denominadas crommeros que poseen un patrn caracterstico para cada par cromosmico. Cigoteno: Los cromosomas homlogos comienzan a acomodarse por parejas a lo largo de toda su extensin, a este fenmeno se le denomina sinapsis y es muy preciso de modo tal que las secuencias de ADN contactan punto a punto a lo largo de la extensin de las parejas de cromosomas homlogos. Al microscopio electrnico se observa que gran parte de esta unin est favorecida por lo que se ha denominado complejo sinaptonmico una estructura formada por protenas involucradas en el entrecruzamien-

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to del ADN y que son esenciales para los eventos de recombinacin que sern estudiados en le Captulo 13. Paquiteno: En esta subfase la sinapsis es completa, los cromosomas estn mucho ms condensados y es posible visualizar a sus cromtidas por lo que en este estado se les denomina tetrada y ya ha ocurrido el entrecruzamiento y la recombinacin de zonas del ADN como consecuencia del mismo. Diploteno: El complejo sinaptonmico ha desaparecido sin embargo los cromosomas homlogos se mantienen unidos por unas estructuras denominadas quiasmas que permiten que la pareja de cromosomas homlogos se mantenga unida. Estos quiasmas parecen ser la evidencia citolgica del intercambio entre las molculas de ADN de las cromtideas de la pareja de cromosomas homlogos. La observacin de los quiasmas en la espermatognesis sugiere que hay varios quiasmas por parejas de cromosomas homlogos y este fenmeno tiene un importante papel en la separacin precisa de ambos homlogos (disyuncin). La falla en la formacin de quiasmas predispone a la no disyuncin. Los cromosomas X y Y hacen sinapsis a nivel del extremo de sus brazos cortos y en esa extensin se produce entrecruzamiento y se visualizan quiasmas (ver Captulo 9). Diacinesis en esta etapa la pareja de cromosomas homlogos unidas por los quiasmas alcanzan su mxima condensacin y de esta forma se sitan en el plano ecuatorial en la metafase I. La metafase I comienza con la desaparicin de la envoltura nuclear y la formacin del huso acromtico en tanto que las parejas de cromosomas homlogos se sitan alineados en el plano ecuatorial y los microtbulos del huso alcanzan a las estructuras protenicas (cinetocoro) situadas a nivel de los centrmeros de cada cromosoma homlogo para de esta forma comenzar la separacin de las parejas de cromosomas homlogos. La anafase I se extiende desde la separacin de cada cromosoma homlogo hasta el comienzo de la telofase. Lo ms significativo de esta fase de la meiosis es que se reduce el nmero de cromosomas a la mitad al separarse los cromosomas homlogos. Sin embargo, an la informacin gentica se encuentra doble ya que cada cromosoma homlogo mantiene sus cromtidas hermanas. La telofase I como en la mitosis los cromosomas comienzan a descondensarse se reorganiza la membrana nuclear y el citoplasma se separa para dar lugar a dos clulas hijas. Una vez terminada la meiosis I an las clulas resultantes no son gametos maduros ya que la informacin gentica como ya explicamos se encuentra doble. Es a partir de este final de la meiosis I y sin nueva sntesis de ADN que comienza la meiosis II. La meiosis II transcurre como una mitosis comn, su diferencia est en el nmero de cromosomas ya que en la meiosis II hay en lugar de 46 cromosomas 23 (Figura 4.2). Al finalizar la Meiosis II se obtienen cuatro gametos. Cada uno de ellos tiene 23 cromosomas con solo una cromtida. Una caracterstica importante de la meiosis II es la 44

distribucin azarosa de cada uno de los 23 cromosomas una vez ubicados en el plano ecuatorial de la metafase II.
INIC IO D E LA M EIO SIS
cr o m m ero

G2

LE PT O T EN O

SN TESIS D E ADN
s in aps is

C IG O TE N O

ttra d a
C ELULA G ERM IN AL

P AQ U ITE N O

q u ia sm a s

PROFASE I

D IP LO T EN O

D IAC IN ES IS

Figura 4.1. Esquema de los eventos que tienen lugar en la Meiosis representados solo en dos pares de cromosomas.

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TELOFASE I

Figura 4.2. De la diacinesis de la Meiosis I hasta la formacin de los gametos.

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El proceso de gametognesis en la mujer recibe el nombre de ovognesis y en el hombre de espermatognesis.

ESPERMATOGNESIS
La espermatognesis comienza en la pubertad cuando los testculos segregan grandes cantidades de testosterona (hormona esteroidea). Bajo el efecto de la testosterona, las clulas de Sertoli de los testculos desarrollan los tbulos seminferos en cuya formacin estn comprometidas las clulas germinales primordiales que a travs de sucesivas mitosis originan las espermatogonias que ocupan un sitio bajo la membrana basal de los tbulos seminferos y que darn lugar al espermatocito primario, clula a partir de la cual comienza la meiosis en el hombre y que contina sin interrupcin hasta la formacin de los espermatozoides (Figura 4.3). Las clulas obtenidas al concluir la meiosis I, reciben el nombre de espermatocitos secundarios y estos al concluir la meiosis II dan lugar a cuatro clulas denominadas espermatdes. Las espermtides sufren cambios dramticos en su forma y organizacin interna para finalmente quedar formado el espermatozoide, proceso este que recibe el nombre de espermiognesis. El espermatozoide queda configurado por una cabeza, una porcin intermedia y una cola (Figura 4.4). La cabeza queda desposeda de citoplasma y est ocupada por el ncleo haploide extremadamente condensado y por una vescula denominada acrosoma situada por delante de la envoltura nuclear y que est llena de enzimas hidrolticas. La pieza o porcin intermedia contiene grandes mitocondrias que son fuente de energa requerida para la velocidad de traslacin de los espermatozoides (Figura 4.4). La cola contiene microtbulos cuya disposicin permitir su rpido desplazamiento desde la red de tubos del testculo hasta las trompas uterinas, sitio en el cual debe alcanzar y fecundar al vulo. El espermatozoide tiene una longitud total de 10 micrmetros (m). En la vagina de la mujer son depositados unos 200 millones, que pueden sobrevivir con capacidad de fertilizacin hasta tres das.

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Figura 4. 3. Esquema de tbulo seminfero y espermatognesis

Figura 4. 4. Esquema de un espermatozoide

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LA OVOGNESIS
Una vez que la gnada primitiva se desarrolla como ovario, las clulas germinales se multiplican por mitosis sucesivas y en la semana doce del desarrollo del embrionario femenino, comienzan la profase de la meiosis I varios millones de ovogonias que se convierten en ovocitos primarios y casi inmediatamente se mantienen latentes en este estadio de la meiosis I rodeados de clulas foliculares constituyendo folculos primordiales (Figura 4.5). La mayora de estos folculos (al inicio unos 7 millones), degeneran y al nacimiento de la nia se mantienen entre 2 millones y 700 000. Al arribar a la pubertad solamente quedan unos 400 000 y unos 5 a 12 de ellos se desarrollan por cada mes y de estos solo uno madura el resto degeneran. Ya a este nivel de desarrollo el ovocito primario completa la primera divisin meitica quedando una clula mayor en tamao (el ovocito secundario) y un cuerpo polar. El folculo ha crecido, el ovocito est rodeado por la zona pelcida y las clulas foliculares; se convierte en un folculo vesicular.

Figura 4. 5. Desarrollo de la meiosis en la mujer, obsrvese que la meiosis I est presente en el cuarto mes de desarrollo embrionario y termina todos los meses desde la pubertad hasta la menopausia.

La segunda divisin meitica comienza unas tres horas antes de la ovulacin que ocurre al entrar la divisin en la metafase II. El folculo roto forma una estructura endocrina que recibe el nombre de cuerpo lteo. Todo este proceso a partir de la pubertad ocurre cclicamente como parte del ciclo menstrual, aspecto este que se sale de los objetivos de este captulo. La meiosis II en la ovognesis culmina cuando el ovocito secundario es alcanzado por un espermatozoide. Es en ese momento que se completa la meiosis II en el ovocito secundario y en el Primer cuerpo Polar. Al finalizar la ovognesis quedan cuatro clulas 49

rodeadas por la zona pelcida y la corona radiante: el vulo y los tres cuerpos polares que eventualmente degeneran. De no ocurrir la fecundacin la meiosis II de la ovognesis nunca llega a terminar desapareciendo esta estructura celular en el proceso de la menstruacin.

El vulo
Al finalizar la anafase II el citoplasma del ovocito secundario se agranda y se divide en la telofafase II asimtricamente. Las dos clulas hijas del primer cuerpo polar y el vulo al finalizar la meiosis dan lugar a cuatro clulas una de ellas es el vulo propiamente dicho y las otras tres corresponden a los cuerpos polares. Todas estas clulas tienen un nmero haploide de cromosomas. El tamao del vulo es de 1 mm o 1000 m. Durante toda esta etapa de formacin y al final de la misma el vulo requiere un gran nmero de ribosomas y recibe apoyo nutricional de las clulas foliculares de la corona radiante incluyendo macromolculas que pasan directamente al citoplasma a travs de puentes entre estas clulas foliculares y la membrana plasmtica del vulo. El vulo en su estructura queda rodeado por la zona pelcida compuesta de glicoprotenas y de la corona radiante formada por las clulas foliculares e inmediatamente por debajo de la membrana plasmtica se encuentran los grnulos corticales cuyo contenido se libera al contacto con el primer espermatozoide que llega a la zona pelcida impidiendo con los cambios qumicos que produce en ella, que penetren ms de un espermatozoide. El vulo contiene los componentes membranosos y no membranosos comunes a toda clula incluyendo las mitocondrias. El vulo queda constituido al concluir la meiosis II pero esto ocurre solamente cuando es alcanzado por el espermatozoide por lo cual tiene un tiempo muy breve como tal (Figura 4.6).
C O R O N A R A D IA N T E

Z O N A P E L U C ID A

GRANULOS C O R T IC A L E S

Figura 4.6 Esquema de la estructura del vulo.

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LA FECUNDACIN
En condiciones normales de funcionamiento de los mecanismos que tienen lugar en la fecundacin y que ya se han ido decribiendo, solamente un espermatozoide logra hacer contacto con la membrana plasmtica del vulo donde la liberacin del contenido de las enzimas hidrolticas de la vescula acrosmica del espermatotozoide por un lado y las de los grnulos corticales por el lado interno del citoplasma del vulo abren una brecha por la cual penetran solamente el ncleo haploide y los microtbulos del espermatozoide. Esto significa que los componentes citoplasmticos de esta unin corresponden solamente al vulo. La presencia de los dos ncleos haploides, del vulo y del espermatozoide da inicio a una nueva estructura celular, el cigoto (Figura 4.7).

SE G M E N T A C IO N

B L A S T O C IST O Q U IN T O D IA

Figura 4. 7. Esquema desde la ovulacin hasta la implantacin del blastocisto.

La primera divisin mittica del cigoto El cigoto entra en un ciclo celular. Ambos ncleos haploides no se fusionan en un primer momento sino que se replican de forma independiente en la fase de sntesis de su 51

ADN. Los cromosomas maternos y paternos cuando desaparece la envoltura nuclear entran en contacto por primera vez despus de las primeras 24 horas comenzando la primera divisin mittica del cigoto. Esta divisin produce dos clulas simtricas que dividen el cigoto en dos clulas o primeras blastmeras sin que ocurra cambio alguno en su tamao que se encuentra limitado por la zona pelcida y la corona radiante. La segunda divisin mittica se completa 48 despus de la fecundacin y da lugar a cuatro blast meras. En este estado inicial de preembriog nesis las blast meras son indiferenciadas, la asuencia de una de ellas no deja huellas en el futuro del embrin. Por este motivo es en esta etapa en la cual pueden hacerse diagnsticos prenatales de preimplantacin sin riesgos para el feto. Tres das despus de la formacin del cigoto, existen entre seis a 12 blastmeras y a los cuatro das ya hay entre 16 a 32 clulas cada vez ms pequeas en su contenido citoplasmtico. En este momento de pre embriognesis esta estructura recibe el nombre de mrula es a partir de este estadio cuando comienza a ocurrir el proceso de inactivacin de uno de los dos cromosomas X cuando se trata de un cigoto femenino (ver ms detalles de la inactivacin del X en captulos 6 y 9). A partir de este momento del desarrollo las blastmeras entran en contacto ms estrecho y se desarrollan mecanismos de adhesin diferencial entre ellas comenzando a presentarse diferencias entre las blastmeras que se encuentran en contacto con la zona ms externa y las que se encuentran en el interior y que reciben el nombre de masa externa y masa interna respectivamente. En la etapa de 30 clulas la mrula comienza a absorber fluidos que forman una cavidad delimitando perfectamente la masa de clulas externas de la interna y formndose el blastocisto que consiste de una cavidad blastocistica, una masa compacta interna denominada embrioblstico y una capa de clulas de la masa externa que rodea a toda la estructura y que recibe el nombre de trofoblasto. Cuando el blastocisto se libera de la cubierta de la zona pelcida 124 horas (al quinto dia) despus de la fecundacin comienza el proceso de la implantacin que concluye en la segunda semana despus de la fecundacin.

RESUMEN
La formacin de los gametos requiere de una divisin celular especial denominada meiosis y que presenta regularidades comunes tanto para los gametos femeninos como para los masculinos. Se describen en este proceso de la divisin meiticas dos divisiones celulares consecutivas (meiosis I y meiosis II) sin que medie entre ambas nueva sntesis de ADN. La primera divisin o reduccional separa los cromosomas homlogos en las dos clulas resultantes. Estas clulas una vez concluida la meiosis II cada una da lugar a otras dos clulas de modo tal que al concluir la meiosis de una clula germinal inicial se 52

obtienen cuatro clulas hijas que contienen un nmero haploide de cromosomas. La profase I de la primera divisin meitica garantiza con el contacto estrecho entre las parejas de cromosomas homlogos y el intercambio de ADN entre las cromtidas hermanas que se originen cromosomas con nuevas combinaciones de genes que al final de la meiosis quedan distribuidos en los cuatro gametos resultantes de forma aleatoria. El intercambio entre las cromtidas y las combinaciones aleatorias de los cromosomas en los gametos junto con las nuevas mutaciones que constantemente ocurren, explican la gran variabilidad entre las especies. Si bien hay mecanismos meiticos comunes en la formacin de los gametos tambin hay diferencias sustanciales en el cronograma de la formacin del vulo y del espermatozoide. En ambos las clulas germinales desde la etapa embrionaria tienen el mismo destino, sin embargo mientras en el sexo masculino la activacin de la meiosis comienza en la pubertad con el estmulo de la testosterona y una vez comenzado el proceso no se detiene en la vida adulta, en el sexo femenino la meiosis comienza en la semana 12 del desarrollo embrionario mantenindose en profase I hasta que la nia alcanza la pubertad en que la meiosis I finaliza y comienza la meiosis II pero con la particularidad de que se limita a la liberacin del ovario a solo un ovocito secundario por mes. De las cuatro clulas solo una se desarrolla como vulo y tres quedan como cuerpos polares que despus desaparecen. La produccin de vulos es limitada ya que de un nmero inicial de 7 millones de folculos conteniendo ovocitos primarios en divisin, al nacimiento de la nia quedan menos de dos millones y se reducen a 400 000 en la etapa de la pubertad. La unin del vulo y del espermatozoide es un fenmeno especial en el que intervienen un gran nmero de procesos moleculares y movimientos celulares complejos que requieren del buen funcionamiento fisiolgico y anatmico de las estructuras comprometidas en el mismo. Desde la fecundacin hasta la formacin del blastocisto ocurren mltiples mitosis en un proceso de segmentacin que se caracteriza porque las clulas resultantes se adaptan con un citoplasma cada vez menor al mismo contenido limitado por la zona pelcida. Las primeras blastmeras pueden ser utilizadas con fines de diagnstico prenatal de preimplantacin ya que son altamente indiferenciadas en esta etapa de la vida. A partir del estadio de 30 clulas el contacto entre ellas y genes involucrados en el desarrollo originan la formacin del blastocisto inicindose as el periodo de implantacin que culmina dos semanas despus de la fecundacin dando paso a la etapa de desarrollo del embrin. Algunos de los defectos gen ticos o ambientales que ocurren desde la fecundaci n hasta esta etapa de preembriognesis sern tambin abordados en varios de los captulos de este texto.

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