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Universidad Jurez del Estado de Durango

Facultad de Ciencias Biolgicas Biologa de Virus y Bacterias

Practica #5. Caracterizacin bioqumica y funcional de una bacteria.

M.C. Ma. Edubiges Cisneros Valdez.

Amanda Dennise De Len Duees.

INTRODUCCIN Para identificar bacterias es imprescindible poner de manifiesto rasgos especiales de su metabolismo y fisiologa ya que, la simple observacin de su forma y tamao, ofrece una informacin muy limitada que apenas nos permite encuadrarlas en grandes grupos. Incluso las tinciones diferenciales son una herramienta muy til pero insuficiente para llegar al nivel necesario de informacin, con frecuencia, la identidad de una especie requiere que se conozca de manera detallada su actividad bioqumica, por que otras caractersticas no son suficientemente distintivas o diferenciales. Es por esto que las pruebas bioqumicas se emplean para identificar de forma clara y precisa, estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo es capaz de fermentar azcares, la presencia de enzimas, la degradacin de compuestos, determinada va metablica, crecimiento a una determinada temperatura, crecimiento en presencia de inhibidores, la produccin de compuestos coloreados, etc. Algunas de estas pruebas son: LIA, MIO, SIM, Criterio de Simmons, TSI entre otras. Una limitacin de este tipo de mtodo de identificacin es la aparicin de cepas mutantes y la adquisicin de plasmidios que pueden dar origen a cepas con caractersticas diferentes. Este tipo de mtodo de identificacin tambin ha sido desarrollado para la identificacin de levaduras y de otros hongos.

OBJETIVOS Conocer y realizar los mtodos bioqumicos utilizados para la identificacin microbiana as como la realizacin de estos, la interpretacin de sus resultados, la importancia que tienen y comprender los principios bioqumicos de dichas pruebas y resultados.

METODOLOGIA
Prueba de catalasa Con la ayuda de un asa bacteriolgica colocamos un poco del cultivo puro en un portaobjetos, despus de esto colocamos una gota de agua oxigenada y observamos la reaccin. Prueba de oxidasa Con la ayuda de un asa bacteriolgica colocamos un poco del cultivo puro en un portaobjetos, despus de esto colocamos un disco diclorhidrato de tetrametil-pfenilendiamina y observamos la reaccin. Prueba SIM Con la ayuda de un asa bacteriolgica se tom un poco del cultivo puro y se realiz una siembra por puncin en el medio para verificar la movilidad, produccin de indol y de sulfuro de hidrgeno en un mismo tubo. Prueba en caldo nutritivo Con la ayuda de un asa bacteriolgica se tom un poco del cultivo puro y se realiz la siembra en el tubo con caldo nutritivo para verificar requerimientos de oxgeno. Prueba Criterio de Simmos Con la ayuda de un asa bacteriolgica se tom un poco del cultivo puro y se realiz una siembra por puncin en el medio para verificar si hay capacidad de usar citrato como fuente de carbono y energa. Prueba MIO Con la ayuda de un asa bacteriolgica se tom un poco del cultivo puro y se realiz una siembra por puncin en el medio para verificar si hay descarboxilacin de la ornitina. Prueba LIA Con la ayuda de un asa bacteriolgica se tom un poco del cultivo puro y se realiz una siembra por puncin en el medio para verificar si hay descarboxilacin o desaminacin de la lisina. Prueba TSI Con la ayuda de un asa bacteriolgica se tom un poco del cultivo puro y se realiz una siembra por puncin en el medio para verificar si hay fermentacin de molculas de glucosa, lactosa y sacarosa y capacidad de producir gas.

RESULTADOS Prueba de catalasa

Despus de colocar el agua oxigenada hubo un leve burbujeo, lo que nos indica que nuestra bacteria es productora de catalasa dbil.

Prueba de oxidasa

Despus de colocar el disco diclorhidrato de tetrametil-p-fenilendiamina este no presento ningn cambio, lo que nos indica que nuestra bacteria no produce oxidasa.

Prueba SIM

Despus de realizar la prueba se encontr que nuestra bacteria es mvil y que la produccin de indol y de sulfuro de hidrgeno fue negativa.

Prueba en caldo nutritivo

Se encontraron partculas por todo el caldo de cultivo lo nos indica que nuestra bacteria es facultativa.

Prueba Criterio de Simmos

Hubo crecimiento en el medio lo cual indica que nuestra bacteria tiene la capacidad de utilizar citrato como fuente de carbono y energa.

Prueba MIO

El agar se torn de un color morado intenso lo que nos indica que un hubo descarboxilacin de la ornitina, y esta se convirti en putracina (amina).

Prueba LIA

El agar mantuvo su color lo que nos indica que hubo descarboxilacin de lisina y esta se convirti en caraberina (amina).

Prueba TSI

El agar se torn color amarillo lo cual nos indica que hubo fermentacin de molculas de glucosa, lactosa y sacarosa y que no hubo produccin de sulfuro de hierro, no presentaba burbujas lo cual indica que no hubo produccin de gas.

CONCLUSIONES De la realizacin de esta prctica podemos concluir que; es importante conocer y realizar los mtodos bioqumicos de identificacin bacteriana, para as tener una complementacin a los mtodos morfolgicos y que nuestra identificacin se lo mas certera posible, podemos concluir adems que la bacteria cultivada pose propiedades como produccin de catalasa, movilidad, capacidad de utilizar citrato como fuente de carbono, puede descarboxilar la ornitina y la lisina, fermentacin de de glucosa, lactosa y sacarosa y que pose flagelos ya que tambin presento movilidad.