UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO FACULTAD DE MEDICINA

ASIGNATURA: Bioqumica y Biologa Molecular Prctica 1: Soluciones

EQUIPO: AYN MARTNEZ AARN BUENO AREVALO JULIO CESAR CARLO BAUTISTA SAMUEL FALCON MOLINA JESUS EDUARDO

PRCTICA 1 SOLUCIONES
Objetivos Que el alumno: 1. Identifique la existencia de soluciones en los sistemas biolgicos. 2. Explique los clculos y procedimientos para preparar soluciones porcentuales, molares y normales, as como las diferentes diluciones de stas. 3. Presente ejemplos de soluciones utilizadas en medicina (solucin isotnica, Ringer, Darrow y Hartman). Responda a las siguientes preguntas: 1. Qu es una solucin? Una solucin es una mezcla homognea de por lo menos dos componentes: una fase dispersa, que es el soluto (sustancia que se disuelve), y una dispersora que constituye el solvente o disolvente (la sustancia que disuelve al soluto) y que, generalmente, se encuentra en mayor proporcin. 2. Cuntas clases de soluciones existen? Soluciones diluidas, concentradas, saturadas, sobresaturadas, soluciones porcentuales, soluciones molares, soluciones normales, soluciones osmolares, soluciones isotnicas. 3. Qu significan los siguientes trminos: mol, solucin molar y solucin normal? Mol: un mol es igual al peso atmico o molecular expresado en gramos (tomo gramo o molcula gramo). Un mol contiene el nmero de Avogadro (6.023x10 23) de partculas, tomos o molculas. Solucin molar: Una solucin molar se define como el nmero de moles de soluto en un litro de solucin: M= No. de moles litro de solucin Solucin normal: Son las que contienen el peso equivalente de una sustancia en gramos por litro de solucin: N = peso equivalente litro de solucin

donde el peso equivalente de una sustancia es el nmero de unidades de esta sustancia que puede combinarse con una unidad de hidrgeno: Peso equivalente = peso molecular n n = nmero de hidrgenos sustituibles 4. Qu significan: v/v, p/v, p/p y ppm? v/v: Se utiliza cuando el soluto y el solvente son lquidos. El v/v indica el nmero de volmenes de soluto por 100 volmenes de solucin. p/v: Esto expresa el nmero de gramos de soluto en 100 ml de la solucin final p/p: El peso/peso porcentual expresa el nmero de gramos del soluto en 100 gramos de la solucin final ppm: Partes por milln (ppm) es la unidad de medida con la que se evala la concentracin. Se refiere a la cantidad de unidades de la sustancia (agente, etc) que hay por cada milln de unidades del conjunto. 5. Cules son los tipos de soluciones que existen in vivo? Mencionar ejemplos. Soluciones isotnicas y soluciones osmolares. 6. Qu es una solucin isotnica? Son aquellas que contienen la misma concentracin de partculas osmticamente activas. Cuando se habla de soluciones isotnicas en el laboratorio, suele tratarse de las que tienen la misma presin osmtica que el plasma sanguneo, que es aproximadamente de 0.3 osmolar (300 miliosmoles). 7. Qu es una solucin osmolar? Concentracin de soluto expresada en nmero de osmoles por litro de solucin. 8. Cmo se calcula la osmolaridad de una solucin? 9. Qu les pasa a los eritrocitos cuando se ponen en contacto con soluciones salinas de diferente osmolaridad? o Si una clula se coloca en una solucin y gana agua se trata de una solucin hipotnica.

o Si una clula se coloca en una solucin y pierde agua se trata de una solucin hipertnica. o Si una clula se coloca en una clula y no gana ni pierde agua se trata de una solucin isotnica.

Estos enunciados ejemplificacin lo que le ocurrira a un eritrocito colocado en diferentes soluciones salinas de osmolaridad variable. 10. Qu se entiende por dilucin y dilucin seriada de las soluciones? - Dilucin Disoluciones, en qumica, mezclas homogneas de dos o ms sustancias. Las disoluciones verdaderas se diferencian de las disoluciones coloidales y de las suspensiones en que las partculas del soluto son de tamao molecular, y se encuentran dispersas entre las molculas del disolvente - Dilucin seriada Tcnica de laboratorio en la cual se disminuye la concentracin de una sustancia, como el suero sanguneo, en una serie de cantidades proporcionales. En general se parte de una solucin concentrada y se preparan series de diluciones al dcimo (1:10) o al medio (1:2). De esta manera se obtiene una serie de soluciones relacionadas por ejemplo por un factor de dilucin 10 es decir 1/10; 1/100; 1/1000 y as sucesivamente. O la otra serie es 1/2; 1/4; 1/8; 1/16;1/32.

INTRODUCCION Las soluciones son mezclas homogneas de dos o ms sustancias. La sustancia que se disuelve se llama soluto (la cual se encuentra en menor cantidad) y el medio en que se disuelve es el solvente o disolvente (de mayor cantidad). En el ser humano los solutos se conforman de electrolitos (Na +, K +, Cl-, Ca2+) y de otras molculas de mayor peso molecular (glucosa, urea, protenas). El solvente ms importante es el agua siendo el 60% del peso corporal total. Estos componentes se distribuyen en dos compartimientos principales, el intracelular (40%) y el extracelular (20%). El cuerpo se mantiene en un equilibrio hdrico, esto significa que cada uno de los compartimientos tiene las cantidades necesarias de agua y solutos. Sin embargo cabe recordar que el intercambio de agua y solutos es continuo entre los compartimientos, a travs de la filtracin, la osmosis y otros procesos fsicos; el volumen del lquido en cada compartimiento permanece casi constante sin que se pierda el equilibrio hidroelectroltico. La smosis constituye el medio primario para el desplazamiento del agua entre el lquido intracelular y el intersticial, y la concentracin de solutos en ellos determina la direccin en la cual el agua se va a desplazar. La osmolaridad de las soluciones refleja la concentracin de los diferentes solutos disueltos en su disolvente; definiendo osmolaridad como el nmero de miliosmoles de soluto por kilogramo de agua. La osmolaridad del plasma sanguneo es de 290310 mOsm/Ly se puede medir con un osmmetro o calcularse emplendose la siguiente frmula:

El nmero 2 de la ecuacin es para tener en cuenta la ionizacin del sodio y los aniones negativos que lo acompaan. El nmero 18 es la conversin de la glucosa de mg/dl a miliosmoles ya que 100mg /dl de glucosa equivale a 1 miliosmol y un miliosmol de urea a 28mg/dl. No obstante el nitrgeno ureico atraviesa la membrana celular y se podra calcular la osmolaridad efectiva:

Para mantener o restablecer el equilibrio hdrico y electroltico de un individuo, se necesitan determinadas soluciones las cuales se han de calcular y preparar con precisin, estn van desde el simple suministro de agua y sal (deshidratacin o quemadura mayor a 2 grado), hasta la correccin de posibles deficiencias de otros iones, por ejemplo, potasio o bien aporte de aminocidos o caloras en forma de solucin glucosada (paciente en terapia intensiva o falla orgnica mltiple).

Algunas de estas soluciones suponen un soporte de lcali para tratar estados de acidosis o alcalosis. Para poder realizar un clculo adecuado de las soluciones que necesita se debe considerar los siguientes aspectos: 1.- Existe compartimientos celulares (intracelular y extracelular) y que en los que se lleva a cabo el intercambio entre ellos para mantener un Equilibrio (homeostasis) integral. 2.-El agua corporal total (TBW) depende del porcentaje de masa muscular y del tejido graso como se muestra en la siguiente tabla. AGUA CORPORAL TOTAL (%) COMPLEXIN LACTANTE Delgado 80 Promedio 70 Obeso 65 HOMBRE 65 60 55 MUJER 55 50 45

As es que en un masculino de complexin promedio de 70 kg de peso: TBW = (peso Kg) (% agua corporal total) TBW= (70Kg) (0.60)=42 litros Si 42 litros se tiene de agua corporal total y el volumen de lquido extracelular corresponde al 40%: 42 litros-------100% del agua corporal total x----------- 40% del LEC x=16.8 litros de LEC 3.- En cada compartimiento los electrolitos se distribuyen de manera diferente esto se debe a su permeabilidad a travs de las membranas celulares, la presencia de transportadores y canales que su movimiento. El nmero de solutos determina la distribucin del agua y la osmolaridad de la solucin. Por ejemplo en el lquido extracelular (LEC) el sodio representa 90% de las partculas osmoticamente activas por lo cual si hay cambios en la concentracin del sodio cambiara la osmolaridad por el movimiento del solvente. 4.- Necesidades de mantenimiento: para que se metabolice una calora se necesita 1 ml de agua, por lo que las necesidades calricas y por lo tanto de agua, son proporcionales al peso corporal. 0 a 10 Kg 100 cal/Kg 11 a 20 Kg: 50 cal / Kg adicionadas por cada Kg despus de los 10 Kg Ms de 20 kg: 20 cal/Kg adicionales por cada Kg despus de los 20 Kg Entonces las necesidades diarias de agua se calcularan as: 1 a 10 Kg: 100ml/Kg/da (4 ml /Kg/h) 11 a 20 Kg: 1000 ml + 50 ml/Kg/da (2 ml /Kg/hora) >20 Kg: 1500 ml + 20 ml /Kg /da (1ml /Kg/h adicional)

5.- Existen factores que modifican las necesidades basales de agua como: a) Fiebre: por cada grado centgrado que aumente de la temperatura basal se incrementa 12% las necesidades de agua. b) En estados hipometablicos como en el estado de coma las necesidades de agua disminuyen en 20%. 6. La osmolaridad de los compartimientos depende de los electrolitos ms abundantes disueltos. La osmolaridad extracelular depende de la [Na+] y la osmolaridad intracelular de la [K+]; por lo que es necesario mantener requerimientos basales siendo los siguientes: POTASIO =2mEq/Kg/da y SODIO= 3mEq/Kg/da Con estos conceptos podramos concluir: Un individuo en ayuno el cual pesa 6 Kg se requiere Necesidades diarias de lquido: 6 Kg x 100ml/Kg/da= 600 ml por da Necesidades de sodio 3 mEq /Kg/ da x 6 Kg de peso = 18 mEq/ L Necesidades de potasio: 2 mEq/Kg/ da x 6 Kg de peso= 12 mEq /L Por lo que con estos datos es ms fcil poder decidir qu solucin se ocupar. MATERIAL Por equipo: 3 vasos de precipitado de 10 ml 3 pipetas de 1.0 ml 3 pipetas de 5.0 ml 3 pipetas de 10.0 ml Gradilla con 6 tubos de ensayo Eritrocitos humanos lavados en solucin. Salina isotnica Solucin de azul de metileno al 1.0% Cloruro de sodio en cristales (NaCl) Balanza granataria Por grupo: 1 Microscopio marca Leica.

PROCEDIMIENTO 1. Hacer los clculos correspondientes para comprobar que la solucin a 0.9% de NaCl es isotnica con respecto al plasma (ver pag. 92). Considerar que: a) El cloruro de sodio se disocia en solucin acuosa en los iones sodio y cloruro, por lo que la concentracin inica se duplica (1 mmol/l = 2 mosm/l). b) La presin osmtica normal del plasma es de 290-310 mosm/l. 2. Preparar 20 ml de una solucin de NaCl a 4.5% (etiquetar como solucin 1). 3. A partir de la solucin anterior, preparar 25 ml a 0.9% (solucin 2) y 50 ml a 0.045% (solucin 3). 4. Colocar en tres tubos de ensayo las diferentes soluciones de cloruro de sodio preparadas en los puntos 1 y 2. Con la ayuda de un gotero (dejando caer lentamente por las paredes del tubo) 2 gotas de eritrocitos lavados. Mezclar con cuidado y dejar reposar a temperatura ambiente unos minutos. Valorar el grado de hemlisis que sufren los eritrocitos cuando se ponen en contacto con las diferentes soluciones. 5. De las soluciones preparadas tomar una gota de cada una y por separado colarlas en un porta objetos, colocar un cubreobjetos y observarlas al microscopio, para valorar el efecto de los eritrocitos. 6. Hacer la dilucin y redilucin (dilucin seriada) de la solucin de azul de metileno como se muestra en el siguiente cuadro: DILUCIN SERIADA DE AZUL DE METILENO Tub H2O Sol de Volumen de o (ml) azul de transferencia metileno 1 2 0.5 ml* 2 2 0.5 ml 3 2 0.5 ml 4 2 0.5 ml 5 2 0.5 ml 6 2 0.5 ml *Nota: para mezclar al hacer las diluciones se debe succionar y soplar con cuidado la pipeta en cada tubo varias veces antes de transferir la dilucin al siguiente tubo. Resultados 1. Expresar en forma ordenada los clculos efectuados para cada uno de los ejercicios.

2. Deducir el movimiento o no del solvente cuando se ponen en contacto eritrocitos con soluciones hipo, hiper e isoosmticas. 3. Calcular la dilucin y la concentracin de azul de metileno en cada uno de los seis tubos de la dilucin seriada (ver pg. 93). Asegrese que la coloracin obtenida disminuya gradualmente conforme avanza la dilucin. REFERENCIAS 1. Villazn SA, Crdenas CO, Villazn DO, Sierra UA. Fluidos y electrlitos. Mxico: JGH Editores; 2000. 2. Pea-Daz A, Arroyo BA, Gmez PA, Tapia IR, Gmez EC. Bioqumica. Undcima reimpresin de la 2a. ed. Mxico: Editorial Limusa; 2004. 3. Laguna J, Pia E. Bioqumica de Laguna. 5a.ed. Mxico: Editorial El Manual Moderno; 2002: p. 41-56. 4. Holum JR. Fundamentos de qumica general, orgnica y bioqumica para ciencias de la salud. Mxico: Editorial Limusa Wiley; 2001. 5. Farias GM. Qumica clnica. Dcima edicin Mxico: Editorial El Manual Moderno; 1999. 6. Bloomfield MM.Qumica de los organismos vivos. Mxico: EditoriaLimusa; 1997.